JPH08225594A - 新規なペプチドおよび免疫賦活剤 - Google Patents
新規なペプチドおよび免疫賦活剤Info
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- JPH08225594A JPH08225594A JP7072224A JP7222495A JPH08225594A JP H08225594 A JPH08225594 A JP H08225594A JP 7072224 A JP7072224 A JP 7072224A JP 7222495 A JP7222495 A JP 7222495A JP H08225594 A JPH08225594 A JP H08225594A
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- gly
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 大豆のタンパク質分解酵素の分解液から新
規な免疫賦活作用を有する新規なペプチドを提供する。 【構成】 大豆をタンパク質分解酵素等で処理し、新規
な免疫賦活作用を有する６種のペプチドは（１）Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ，（２）Ｌｅｕ−Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ，（３）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ，（４）Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐ
ｈｅ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ，（５）Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ
−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ，（６）Ｖ
ａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｙｒ，（７）Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ，（８）Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈ
ｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏであり、免疫賦活作用を有し、毒性
も極めて低い。
規な免疫賦活作用を有する新規なペプチドを提供する。 【構成】 大豆をタンパク質分解酵素等で処理し、新規
な免疫賦活作用を有する６種のペプチドは（１）Ｐｈｅ
−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ，（２）Ｌｅｕ−Ｌ
ｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ，（３）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ，（４）Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐ
ｈｅ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ，（５）Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ
−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ，（６）Ｖ
ａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｙｒ，（７）Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ，（８）Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈ
ｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏであり、免疫賦活作用を有し、毒性
も極めて低い。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、医薬として有用性を有
する下記のアミノ酸の配列のペプチド構造を有するペプ
チドならびにそのペプチドを有効成分とする免疫賦活剤
に関する。 （１）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （２）Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ （３）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （４）Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓ
ｎ−Ｌｅｕ （５）Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒ
ｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ （６）Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ （７）Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌ
ｙ−Ｉｌｅ （８）Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ （式中、アミノ酸残基を表わす各記号は、アミノ酸化学
において慣用の表示法によるものである。）
する下記のアミノ酸の配列のペプチド構造を有するペプ
チドならびにそのペプチドを有効成分とする免疫賦活剤
に関する。 （１）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （２）Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ （３）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （４）Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓ
ｎ−Ｌｅｕ （５）Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒ
ｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ （６）Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ （７）Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌ
ｙ−Ｉｌｅ （８）Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ （式中、アミノ酸残基を表わす各記号は、アミノ酸化学
において慣用の表示法によるものである。）
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】摂取さ
れた食品は消化管の中で分解、吸収される過程で宿主免
疫系へ種々の影響を与えることが知られている（Ｊ．
Ｌ．Ｄｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．：Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒ
ｎ．Ｍｅｄ．，１ｏ１，８１０−８２４（１９８
４））。宿主の免疫反応は免疫担当細胞であるリンパ球
及びマクロファージから分泌される生理活性物質によっ
て調節、制御されていることが知られているが、一方、
食品成分中にも宿主免疫系を調節する物質の存在が知ら
れている。その中には、食品蛋白質を酵素的に分解した
ペプチドとして、ヒトカゼイン由来Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐ
ｈｅ，ウシカゼイン由来Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ，ヒト
βカゼイン由来Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｙｒのものが知られておりいずれもマクロファー
ジの活性を上昇させることが見いだされている。（Ｆ．
Ｐａｒｋｅｒ ｅｔａｌ．：Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．１４５，６７７−６８２（１９８４），Ｊ．Ｂｅｒ
ｔｈｏｕ ｅｔ ａｌ．：ＦＡＢＳ Ｌｅｔｔ．，２１
８，５５−５８（１９８７））。生体内に摂取された食
品蛋白質は、そのままの形かあるいは分解されてペプチ
ドの形で免疫応答系細胞と接する。このような食品成分
と免疫応答系細胞との相互作用は、これまで知られてい
るところでは、たとえば免疫系の異常状態である食品ア
レルギーを引き起こす場合があり、さらに、免疫系の賦
活あるいは抑制という形となって観察されている。免疫
応答系を調節する本来の生体内物質としてインターロイ
キンをはじめとするサイトカイニンと呼ばれる一群のポ
リペプチドであり、その機能及び構造について多くの情
報が集積しつつある。これに対し、食品たん白質由来の
ペプチドで免疫調節機能をもつものは多くはなく、未だ
医薬品としての開発が進んでいるとの報告はない。
れた食品は消化管の中で分解、吸収される過程で宿主免
疫系へ種々の影響を与えることが知られている（Ｊ．
Ｌ．Ｄｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．：Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒ
ｎ．Ｍｅｄ．，１ｏ１，８１０−８２４（１９８
４））。宿主の免疫反応は免疫担当細胞であるリンパ球
及びマクロファージから分泌される生理活性物質によっ
て調節、制御されていることが知られているが、一方、
食品成分中にも宿主免疫系を調節する物質の存在が知ら
れている。その中には、食品蛋白質を酵素的に分解した
ペプチドとして、ヒトカゼイン由来Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐ
ｈｅ，ウシカゼイン由来Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ，ヒト
βカゼイン由来Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
ｏ−Ｔｙｒのものが知られておりいずれもマクロファー
ジの活性を上昇させることが見いだされている。（Ｆ．
Ｐａｒｋｅｒ ｅｔａｌ．：Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．１４５，６７７−６８２（１９８４），Ｊ．Ｂｅｒ
ｔｈｏｕ ｅｔ ａｌ．：ＦＡＢＳ Ｌｅｔｔ．，２１
８，５５−５８（１９８７））。生体内に摂取された食
品蛋白質は、そのままの形かあるいは分解されてペプチ
ドの形で免疫応答系細胞と接する。このような食品成分
と免疫応答系細胞との相互作用は、これまで知られてい
るところでは、たとえば免疫系の異常状態である食品ア
レルギーを引き起こす場合があり、さらに、免疫系の賦
活あるいは抑制という形となって観察されている。免疫
応答系を調節する本来の生体内物質としてインターロイ
キンをはじめとするサイトカイニンと呼ばれる一群のポ
リペプチドであり、その機能及び構造について多くの情
報が集積しつつある。これに対し、食品たん白質由来の
ペプチドで免疫調節機能をもつものは多くはなく、未だ
医薬品としての開発が進んでいるとの報告はない。
【０００３】
【課題を解決するための手段】本発明者は、大豆のタン
パク質分解酵素の分解液から薬理作用を有する物質を検
索し、新規な８種のペプチドが強い免疫賦活作用を有す
ることを見出した。そして、これら８種のペプチドを医
薬として実用化するための研究を鋭意行った。その結
果、この８種のペプチドが免疫賦活作用を有し、天然物
由来の免疫賦活剤としての有用性を見い出した。本発明
は係る知見に基づくものである。以下に、本発明を詳細
に説明する。本発明に係る新規なペプチドは、次式
（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、
（７）及び（８） （１） Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （２） Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ （３） Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （４） Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａ
ｓｎ−Ｌｅｕ （５） Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐ
ｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ （６） Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖ
ａｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ （７） Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇ
ｌｙ−Ｉｌｅ （８） Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ （式中の各記号はペプチド化学におけるアミノ酸配列の
各アミノ酸単位を示す。）の式で示されるＬ体のアミノ
酸の配列を有する新規なペプチドであり、常温における
性状は白色の粉末である。
パク質分解酵素の分解液から薬理作用を有する物質を検
索し、新規な８種のペプチドが強い免疫賦活作用を有す
ることを見出した。そして、これら８種のペプチドを医
薬として実用化するための研究を鋭意行った。その結
果、この８種のペプチドが免疫賦活作用を有し、天然物
由来の免疫賦活剤としての有用性を見い出した。本発明
は係る知見に基づくものである。以下に、本発明を詳細
に説明する。本発明に係る新規なペプチドは、次式
（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、
（７）及び（８） （１） Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （２） Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ （３） Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （４） Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａ
ｓｎ−Ｌｅｕ （５） Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐ
ｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ （６） Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖ
ａｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ （７） Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇ
ｌｙ−Ｉｌｅ （８） Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ （式中の各記号はペプチド化学におけるアミノ酸配列の
各アミノ酸単位を示す。）の式で示されるＬ体のアミノ
酸の配列を有する新規なペプチドであり、常温における
性状は白色の粉末である。
【０００４】前記の８種のペプチドは、化学的に合成す
る方法または大豆のタンパク質分解酵素の分解液から分
離精製する方法を挙げることができる。本発明に係る新
規なペプチドを化学的に合成する場合には、液相法また
は固相法等の通常のペプチド合成方法によって行うこと
ができるが、好ましくは、固相法によってポリマー性の
固相支持体へ前記ペプチドのＣ末端（カルボキシル末端
側）からそのアミノ酸残基に対応したＬ体のアミノ酸を
順次ペプチド結合によって結合して行くのがよい。そし
て、そのようにして得られた合成ペプチドは、トリフル
オロメタンスルホン酸、フッ化水素等を用いてポリマー
性の固相支持体から切断した後、アミノ酸側鎖の保護基
を除去し、逆相系のカラムを用いた高速液体クロマトグ
ラフィー（以下、ＨＰＬＣと略記する。）等を用いた通
常の方法で精製することができる。
る方法または大豆のタンパク質分解酵素の分解液から分
離精製する方法を挙げることができる。本発明に係る新
規なペプチドを化学的に合成する場合には、液相法また
は固相法等の通常のペプチド合成方法によって行うこと
ができるが、好ましくは、固相法によってポリマー性の
固相支持体へ前記ペプチドのＣ末端（カルボキシル末端
側）からそのアミノ酸残基に対応したＬ体のアミノ酸を
順次ペプチド結合によって結合して行くのがよい。そし
て、そのようにして得られた合成ペプチドは、トリフル
オロメタンスルホン酸、フッ化水素等を用いてポリマー
性の固相支持体から切断した後、アミノ酸側鎖の保護基
を除去し、逆相系のカラムを用いた高速液体クロマトグ
ラフィー（以下、ＨＰＬＣと略記する。）等を用いた通
常の方法で精製することができる。
【０００５】上記したように、本発明に係る新規なペプ
チドは大豆のタンパク質分解酵素の分解液から分離精製
することができるが、その場合には、発明者等の文献
［Ｊ．Ｎｕｔｒ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９３，Ｖｏ
ｌ．４，Ａｕｇｕｓｔ］の方法に準拠し、例えば、以下
のようにして行うことができる。上記の新規なペプチド
を含有している生大豆を用いて、適当な溶媒（例えば、
水−トリス塩酸緩衝液、リン酸緩衝液の中性の緩衝液
等）中で十分にホモジネイトした後、加水分解する。加
水分解は常法に従って行う。例えば、ペプシン等のタン
パク質分解酵素で加水分解する場合は、生大豆ホモジネ
イトを必要とあれば更に加水分解した後、酵素の至適温
度まで加温しｐＨを至適値に調整し、酵素を加えてイン
キュベートする。次いで必要に応じ中和した後、酵素を
失活させて加水分解液を得る。その加水分解液を濾紙お
よび／またはセライト等を用いて濾過することによって
不溶性成分を除去し、得られた濾液をセロファン等の半
透膜を用いて適当な溶媒（例えば、トリス−塩酸緩衝
液、リン酸緩衝液の中性の緩衝液等）中で十分に透析
し、その濾液中の成分で半透膜を通過した成分を含む溶
液を強酸性陽イオン交換樹脂（例えば、ダウケミカル社
製のＤｏｗｅｘ ５０Ｗ等）にかけ、その吸着溶出分画
から免疫賦活作用を有する成分を含有する分画を得、得
られた免疫賦活作用を有する分画をゲル濾過（例えば，
ファルマシア社製の Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２５等）
によって分画し、得られた免疫賦活作用を有する分画を
陽イオン交換ゲル濾過（例えば、ファルマシア社製のＳ
Ｐ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５等）によって分画し、
得られた免疫賦活作用を有する分画を更に逆相ＨＰＬＣ
によって分画する。
チドは大豆のタンパク質分解酵素の分解液から分離精製
することができるが、その場合には、発明者等の文献
［Ｊ．Ｎｕｔｒ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９３，Ｖｏ
ｌ．４，Ａｕｇｕｓｔ］の方法に準拠し、例えば、以下
のようにして行うことができる。上記の新規なペプチド
を含有している生大豆を用いて、適当な溶媒（例えば、
水−トリス塩酸緩衝液、リン酸緩衝液の中性の緩衝液
等）中で十分にホモジネイトした後、加水分解する。加
水分解は常法に従って行う。例えば、ペプシン等のタン
パク質分解酵素で加水分解する場合は、生大豆ホモジネ
イトを必要とあれば更に加水分解した後、酵素の至適温
度まで加温しｐＨを至適値に調整し、酵素を加えてイン
キュベートする。次いで必要に応じ中和した後、酵素を
失活させて加水分解液を得る。その加水分解液を濾紙お
よび／またはセライト等を用いて濾過することによって
不溶性成分を除去し、得られた濾液をセロファン等の半
透膜を用いて適当な溶媒（例えば、トリス−塩酸緩衝
液、リン酸緩衝液の中性の緩衝液等）中で十分に透析
し、その濾液中の成分で半透膜を通過した成分を含む溶
液を強酸性陽イオン交換樹脂（例えば、ダウケミカル社
製のＤｏｗｅｘ ５０Ｗ等）にかけ、その吸着溶出分画
から免疫賦活作用を有する成分を含有する分画を得、得
られた免疫賦活作用を有する分画をゲル濾過（例えば，
ファルマシア社製の Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２５等）
によって分画し、得られた免疫賦活作用を有する分画を
陽イオン交換ゲル濾過（例えば、ファルマシア社製のＳ
Ｐ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５等）によって分画し、
得られた免疫賦活作用を有する分画を更に逆相ＨＰＬＣ
によって分画する。
【０００６】この新規な８種のペプチドは、静脈内への
繰返し投与を行った場合、抗体産生を惹起せず、アナフ
イラキシーショックを起こさない。また、このペプチド
はＬ−アミノ酸のみの配列構造からなり、投与後、生体
内のプロテアーゼにより徐々に分解される為，毒性は極
めて低く安全性は極めて高い（ＬＤ５０＞５０００ｍｇ
／Ｋｇ：ラット経口投与）。本発明に係る新規なペプチ
ドは、通常用いられる賦形剤等の添加物を用いて注射
剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等に調整すること
ができる。投与法としては、通常は免疫不全症を有して
いる哺乳類（例えば、ヒト、イヌ、ラット等）に注射す
ること、あるいは経口投与することがあげられる。投与
量は、例えば、動物体重１ｋｇ当りこのペプチドを０．
０１〜１０ｍｇの量である。投与回数は、通常、１日１
〜４回程度であるが、投与経路によって、適宜、調整す
ることができる。上記の各種製剤において用いられる賦
形剤、結合剤、滑沢剤の種類は、特に限定されず、通常
の注射剤、散剤、顆粒剤、錠剤あるいはカプセル剤に用
いられるものを使用することができる。
繰返し投与を行った場合、抗体産生を惹起せず、アナフ
イラキシーショックを起こさない。また、このペプチド
はＬ−アミノ酸のみの配列構造からなり、投与後、生体
内のプロテアーゼにより徐々に分解される為，毒性は極
めて低く安全性は極めて高い（ＬＤ５０＞５０００ｍｇ
／Ｋｇ：ラット経口投与）。本発明に係る新規なペプチ
ドは、通常用いられる賦形剤等の添加物を用いて注射
剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等に調整すること
ができる。投与法としては、通常は免疫不全症を有して
いる哺乳類（例えば、ヒト、イヌ、ラット等）に注射す
ること、あるいは経口投与することがあげられる。投与
量は、例えば、動物体重１ｋｇ当りこのペプチドを０．
０１〜１０ｍｇの量である。投与回数は、通常、１日１
〜４回程度であるが、投与経路によって、適宜、調整す
ることができる。上記の各種製剤において用いられる賦
形剤、結合剤、滑沢剤の種類は、特に限定されず、通常
の注射剤、散剤、顆粒剤、錠剤あるいはカプセル剤に用
いられるものを使用することができる。
【０００７】錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤に用いる
添加剤としては、下記のものをあげることができる。賦
形剤としては、結晶セルロース等の糖類、マンニトール
等の糖アルコール類、でんぷん類、無水リン酸カルシウ
ム等；結合剤としてはでんぷん類、ヒドロキシプロピル
メチルセルロース等；崩壊剤としてはカルボキシメチル
セルロースおよびそのカルウム塩類；滑沢剤としてはス
テアリン酸およびその塩類、タルク、ワツクス類を挙げ
ることができる。また、製剤の調整にあたっては、必要
に応じメントール、クエン酸およびその塩類、香料等の
矯臭剤を用いることができる。注射用の無菌組成物は、
常法により、本発明に係る新規なペプチドを、注射用
水、生理食塩液およびキシリトールやマンニトールなど
の糖アルコール注射液、プロピレングリコールやポリエ
チレングリコール等のグリコールに溶解または懸濁させ
て注射剤とすることができる。この際、緩衝液、防腐
剤、酸化防止剤等を必要に応じて添加することができ
る。本発明の新規なペプチドを含有する製剤は凍結乾燥
品または乾燥粉末の形とし、用時、通常の溶解剤、例え
ば水または生理食塩液にて溶解して用いることもでき
る。
添加剤としては、下記のものをあげることができる。賦
形剤としては、結晶セルロース等の糖類、マンニトール
等の糖アルコール類、でんぷん類、無水リン酸カルシウ
ム等；結合剤としてはでんぷん類、ヒドロキシプロピル
メチルセルロース等；崩壊剤としてはカルボキシメチル
セルロースおよびそのカルウム塩類；滑沢剤としてはス
テアリン酸およびその塩類、タルク、ワツクス類を挙げ
ることができる。また、製剤の調整にあたっては、必要
に応じメントール、クエン酸およびその塩類、香料等の
矯臭剤を用いることができる。注射用の無菌組成物は、
常法により、本発明に係る新規なペプチドを、注射用
水、生理食塩液およびキシリトールやマンニトールなど
の糖アルコール注射液、プロピレングリコールやポリエ
チレングリコール等のグリコールに溶解または懸濁させ
て注射剤とすることができる。この際、緩衝液、防腐
剤、酸化防止剤等を必要に応じて添加することができ
る。本発明の新規なペプチドを含有する製剤は凍結乾燥
品または乾燥粉末の形とし、用時、通常の溶解剤、例え
ば水または生理食塩液にて溶解して用いることもでき
る。
【０００８】本発明に係る新規なペプチドは、優れた免
疫賦活作用を有し、新規なペプチドをウサギに経口投与
すると、末梢血リンパ球のコンカナバリンＡ（以下Ｃｏ
ｎＡと略記する。）刺激に対する幼若化反応が有意に上
昇し、又、新規なペプチドをＣ５７ＢＬ／６マウスに経
口投与すると抗体産生能が上昇した。更に、新規なペプ
チドは、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいてＣ３Ｈ／ＨｅＮマウ
スより得た脾細胞に対してマイトージェン活性を示す。
疫賦活作用を有し、新規なペプチドをウサギに経口投与
すると、末梢血リンパ球のコンカナバリンＡ（以下Ｃｏ
ｎＡと略記する。）刺激に対する幼若化反応が有意に上
昇し、又、新規なペプチドをＣ５７ＢＬ／６マウスに経
口投与すると抗体産生能が上昇した。更に、新規なペプ
チドは、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいてＣ３Ｈ／ＨｅＮマウ
スより得た脾細胞に対してマイトージェン活性を示す。
【０００９】
【実施例】以下に実施例として、製造例及び試験例を記
載し、本発明を更に詳細に説明する。 製造例１ 生大豆２００ｇに脱イオン水１ｌを加えホモジナイズし
た後、１Ｎ塩酸にてｐＨを２．０に調整し、ペプシン
（メルク社製、酵素番号 ＥＣ ３．４．２３．１）１
０ｇを添加し、３７℃で２時間撹拌しながら加水分解を
行った。分解反応液を直ちに限外濾過膜（アミコン社
製、ＹＭ１０型、φ７６ｍｍ）に通過させ、通過液を強
酸性陽イオン交換樹脂Ｄｏｗｅｘ ５０Ｗ Ｘ４
［Ｈ＋］（φ４．５ｘ１５ｃｍ）カラムに加えた。カラ
ムを脱イオン水で十分に洗浄した後、２Ｎ水酸化アンモ
ニウム液２ｌを用いて溶出した。減圧濃縮によりアンモ
ニアを除去し、濃縮液４０ｍｌを得た。濃縮液４ｍｌを
予め脱イオン水で緩衝化したＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２
５ カラム（φ２．５ｘ１５０ｃｍ）に負荷し、流速３
０ｍｌ／ｈｒ、各分画量８．３ｍｌでゲル濾過した。そ
の結果は図１に示すとおりである。上記のゲル瀘過を繰
り返して大量分取した免疫賦活活性の高い分画（分画番
号１７〜３７）を集め、凍結乾燥してペプチド粉末（大
豆由来のペプチド粉末）とした。このペプチド粉末を脱
イオン水に溶解した後、予め、脱イオン水で緩衝化した
ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５［Ｈ＋］（φ１．５
ｘ４７．２ｃｍ）カラムに負荷し、脱イオン水１ｌから
３％塩化ナトリウム液１ｌの濃度勾配法により、流速６
０ｍｌ／ｈｒ、各分画量７．８ｍｌでクロマトグラフィ
ーを行った。その結果は図２に示すとおりである。
載し、本発明を更に詳細に説明する。 製造例１ 生大豆２００ｇに脱イオン水１ｌを加えホモジナイズし
た後、１Ｎ塩酸にてｐＨを２．０に調整し、ペプシン
（メルク社製、酵素番号 ＥＣ ３．４．２３．１）１
０ｇを添加し、３７℃で２時間撹拌しながら加水分解を
行った。分解反応液を直ちに限外濾過膜（アミコン社
製、ＹＭ１０型、φ７６ｍｍ）に通過させ、通過液を強
酸性陽イオン交換樹脂Ｄｏｗｅｘ ５０Ｗ Ｘ４
［Ｈ＋］（φ４．５ｘ１５ｃｍ）カラムに加えた。カラ
ムを脱イオン水で十分に洗浄した後、２Ｎ水酸化アンモ
ニウム液２ｌを用いて溶出した。減圧濃縮によりアンモ
ニアを除去し、濃縮液４０ｍｌを得た。濃縮液４ｍｌを
予め脱イオン水で緩衝化したＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２
５ カラム（φ２．５ｘ１５０ｃｍ）に負荷し、流速３
０ｍｌ／ｈｒ、各分画量８．３ｍｌでゲル濾過した。そ
の結果は図１に示すとおりである。上記のゲル瀘過を繰
り返して大量分取した免疫賦活活性の高い分画（分画番
号１７〜３７）を集め、凍結乾燥してペプチド粉末（大
豆由来のペプチド粉末）とした。このペプチド粉末を脱
イオン水に溶解した後、予め、脱イオン水で緩衝化した
ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５［Ｈ＋］（φ１．５
ｘ４７．２ｃｍ）カラムに負荷し、脱イオン水１ｌから
３％塩化ナトリウム液１ｌの濃度勾配法により、流速６
０ｍｌ／ｈｒ、各分画量７．８ｍｌでクロマトグラフィ
ーを行った。その結果は図２に示すとおりである。
【００１０】上記クロマトグラフ中、分画番号３０〜３
８の免疫賦活活性の高い分画を集めて凍結乾燥して精製
ペプチド粉末（ＳＰ−Ｉ分画部分）、分画番号３９〜４
７の免疫賦活活性の高い分画を集めて凍結乾燥して精製
ペプチド粉末（ＳＰ−ＩＩ分画部分）を得た。これら精
製ペプチド粉末（ＳＰ−Ｉ、ＳＰ−ＩＩ分画部分）を脱
イオン水に溶解した後ＨＰＬＣを行った。条件はカラム
として野村化学（株）製Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ ＯＤＳ−
５０（φ４．６ｍｍ ＩＤｘ２５ｃｍＬ）を使用し、移
動相として０．０５％トリフルオロ酢酸（以下、ＴＦＡ
と略記する。）から２５％アセトニトリル／０．０５％
ＴＦＡの濃度勾配法により、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ、
検出波長 ２２０ｎｍでクロマトグラフィーを行い、免
疫賦活活性を有するペプチドを得た。その結果は図３に
示すとおりである。 ｛溶出時間；（１）のペプチド３２分、（２）のペプチ
ド３８分、（３）のペプチド８３分、（４）のペプチド
１２２分、（５）のペプチド１２７分、（６）のペプチ
ド１４２分、（７）のペプチド４１分、（８）のペプチ
ド１０９分｝ このようにして得られた免疫賦活作用を有するペプチド
のアミノ酸配列は、アプライドバイオシステム社製のプ
ロテインシーケンサー４７７Ａ型を用いて決定された。
その結果、８種のペプチドは、それぞれ、 次式、（１）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （２）Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ （３）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （４）Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓ
ｎ−Ｌｅｕ （５）Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒ
ｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ （６）Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ （７）Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌ
ｙ−Ｉｌｅ （８）Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ で示されるＬ体のアミノ酸残基からなる配列を有するペ
プチドであることが確認された。
８の免疫賦活活性の高い分画を集めて凍結乾燥して精製
ペプチド粉末（ＳＰ−Ｉ分画部分）、分画番号３９〜４
７の免疫賦活活性の高い分画を集めて凍結乾燥して精製
ペプチド粉末（ＳＰ−ＩＩ分画部分）を得た。これら精
製ペプチド粉末（ＳＰ−Ｉ、ＳＰ−ＩＩ分画部分）を脱
イオン水に溶解した後ＨＰＬＣを行った。条件はカラム
として野村化学（株）製Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ ＯＤＳ−
５０（φ４．６ｍｍ ＩＤｘ２５ｃｍＬ）を使用し、移
動相として０．０５％トリフルオロ酢酸（以下、ＴＦＡ
と略記する。）から２５％アセトニトリル／０．０５％
ＴＦＡの濃度勾配法により、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ、
検出波長 ２２０ｎｍでクロマトグラフィーを行い、免
疫賦活活性を有するペプチドを得た。その結果は図３に
示すとおりである。 ｛溶出時間；（１）のペプチド３２分、（２）のペプチ
ド３８分、（３）のペプチド８３分、（４）のペプチド
１２２分、（５）のペプチド１２７分、（６）のペプチ
ド１４２分、（７）のペプチド４１分、（８）のペプチ
ド１０９分｝ このようにして得られた免疫賦活作用を有するペプチド
のアミノ酸配列は、アプライドバイオシステム社製のプ
ロテインシーケンサー４７７Ａ型を用いて決定された。
その結果、８種のペプチドは、それぞれ、 次式、（１）Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （２）Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ （３）Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ （４）Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓ
ｎ−Ｌｅｕ （５）Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒ
ｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ （６）Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａ
ｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ （７）Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌ
ｙ−Ｉｌｅ （８）Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏ で示されるＬ体のアミノ酸残基からなる配列を有するペ
プチドであることが確認された。
【００１１】製造例２ 本例は、合成法による製造例である。 Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの合成法。 アプライドバイオシステム社製のペプチド自動合成装置
４３０Ａ型を用いた固相法によって当該ペプチドを合成
した。固相担体としては、スチレン−ジビニルベンゼン
共重合体（ポリスチレン樹脂）をクロロメチル化した樹
脂を使用した。まず、当該ペプチドのアミノ酸配列に従
って、常法どおり、そのＣ末端側のグリシンからクロロ
メチル樹脂に反応させペプチド結合樹脂を得た。このと
きのアミノ酸は、ｔ−ブトキシカルボニル（以下ｔ−Ｂ
ｏｃと略記す。）基で保護されたｔ−Ｂｏｃアミノ酸を
使用した。次にこのペプチド結合樹脂をエタンジチオー
ルとチオアニソールからなる混合液に懸濁し、室温で１
０分間撹拌後、氷冷下でトリフルオロ酢酸を加え、更に
１０分間撹拌した。この混合液にトリフルオロメタンス
ルホン酸を滴下し、室温で３０分間撹拌した後、無水エ
ーテルを加えてその生成物を沈澱させて分離し、その沈
澱物を無水エーテルで数回洗浄した後、減圧下で乾燥し
た。このようにして得られた末精製の合成ペプチドは蒸
留水に溶解した後、逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を
用いたＨＰＬＣにより精製した。移動相として（Ａ）
０．１％ＴＦＡ含有蒸留水、（Ｂ）０．１％ＴＰＡ含有
アセトニトリル溶液を使用し、（Ａ）液が２０分間で９
８％→７８％の濃度勾配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉ
ｎでクロマトグラフィーを行った。紫外部波長２１５ｎ
ｍで検出し、最大の吸収を示した溶出分画を分取し、こ
れを凍結乾燥することによって目的とする合成ペプチド
を得た。
４３０Ａ型を用いた固相法によって当該ペプチドを合成
した。固相担体としては、スチレン−ジビニルベンゼン
共重合体（ポリスチレン樹脂）をクロロメチル化した樹
脂を使用した。まず、当該ペプチドのアミノ酸配列に従
って、常法どおり、そのＣ末端側のグリシンからクロロ
メチル樹脂に反応させペプチド結合樹脂を得た。このと
きのアミノ酸は、ｔ−ブトキシカルボニル（以下ｔ−Ｂ
ｏｃと略記す。）基で保護されたｔ−Ｂｏｃアミノ酸を
使用した。次にこのペプチド結合樹脂をエタンジチオー
ルとチオアニソールからなる混合液に懸濁し、室温で１
０分間撹拌後、氷冷下でトリフルオロ酢酸を加え、更に
１０分間撹拌した。この混合液にトリフルオロメタンス
ルホン酸を滴下し、室温で３０分間撹拌した後、無水エ
ーテルを加えてその生成物を沈澱させて分離し、その沈
澱物を無水エーテルで数回洗浄した後、減圧下で乾燥し
た。このようにして得られた末精製の合成ペプチドは蒸
留水に溶解した後、逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を
用いたＨＰＬＣにより精製した。移動相として（Ａ）
０．１％ＴＦＡ含有蒸留水、（Ｂ）０．１％ＴＰＡ含有
アセトニトリル溶液を使用し、（Ａ）液が２０分間で９
８％→７８％の濃度勾配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉ
ｎでクロマトグラフィーを行った。紫外部波長２１５ｎ
ｍで検出し、最大の吸収を示した溶出分画を分取し、こ
れを凍結乾燥することによって目的とする合成ペプチド
を得た。
【００１２】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列構造を有するペプチドであ
ることが確認された。このマススペクトルの結果は図４
に示すとおりである。他の７つのペプチドについても上
記合成方法に準じ固相法によりそれぞれＣ末端側から反
応させ合成した。末精製の合成ペプチドは以下に示すと
おり精製した。 Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９０％→６０％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列構造を有するペプチドであ
ることが確認された。このマススペクトルの結果は図４
に示すとおりである。他の７つのペプチドについても上
記合成方法に準じ固相法によりそれぞれＣ末端側から反
応させ合成した。末精製の合成ペプチドは以下に示すと
おり精製した。 Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９０％→６０％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１３】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図５に示
すとおりである。 Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図５に示
すとおりである。 Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１４】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図６に示
すとおりである。 Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｌ
ｅｕの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図６に示
すとおりである。 Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｌ
ｅｕの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１５】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図７に示
すとおりである。 Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａ
ｓｐ−Ｔｙｒの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図７に示
すとおりである。 Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａ
ｓｐ−Ｔｙｒの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１６】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図８に示
すとおりである。 Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図８に示
すとおりである。 Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐ
ｒｏ−Ｔｙｒの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１７】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図９に示
すとおりである。 Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉ
ｌｅの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図９に示
すとおりである。 Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉ
ｌｅの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１８】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図１０に
示すとおりである。 Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図１０に
示すとおりである。 Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｐｒｏの精製法 逆相系のカラムＣ１８（５μｍ）を用いたＨＰＬＣによ
り精製した。移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸
留水、（Ｂ）０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を
使用し、（Ａ）液が２０分間で９８％→７８％の濃度勾
配法により流速１．５ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィ
ーを行った。紫外部波長２１５ｎｍで検出し、最大の吸
収を示した溶出分画を分取し、これを凍結乾燥すること
によって目的とする合成ペプチドを得た。
【００１９】この合成ペプチドをマススペクトルにより
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図１１に
示すとおりである。合成によって得られた本発明の８種
のペプチドは、以下に示す試験によって薬理効果が確認
された。
分析した結果、アミノ酸配列およびアミノ酸組成が前記
式で示したアミノ酸配列構造を有するペプチドであるこ
とが確認された。このマススペクトルの結果は図１１に
示すとおりである。合成によって得られた本発明の８種
のペプチドは、以下に示す試験によって薬理効果が確認
された。
【００２０】試験例１ （ウサギ末梢血リンパ球のコンカナバリンＡ刺激に対す
る幼若化反応の測定）ウサギは成熟雄性日本白色種（Ｋ
ＢＬ：ＪＷ、ＳＰＦ、体重２．０ｋｇ）を（株）北山ラ
ベスより購入し、１週間予備飼育を行った後、健常な動
物を試験に供した。飼育は温度２３±２℃、湿度５５±
１０％に保った飼育室内の金属製個別ゲージで行った。
飼料はオリエンタル酵母（株）製ＲＣ４を１日１２０ｇ
給餌し、水は自家揚水（水道法、水質基準適合）を自由
に摂取させた。１群３例のウサギを用い、製造例１にお
ける大豆由来のペプチド粉末２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ
を体重１ｋｇ当り５ｍｌの割合で３０日間連続投与し
た。対照群には同容量の溶媒を投与した。体重測定は３
日毎に行った。投与開始日並びに最終投与の翌日、各ウ
サギの耳静脈からヘパリン処理した注射器で１０ｍｌの
血液を採取し、３時間以内に、リンパ球分離並びに３Ｈ
−サイミジン取り込み能測定法による幼若化反応を実施
した。各リンパ球の取り込んだ放射能から次式により刺
激指数（ＳＩ）を算出した。 ＳＩ＝（ＣｏｎＡを加えた培養系）／（ＣｏｎＡを加え
ない培養系） 大豆由来のペプチド粉末（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）
を３０日間経口投与したウサギの体重変化は表１に示し
た。体重変化は大豆ペプチド投与群と対照群との間に有
意差は認められなっかた。又、ウサギ末梢血リンパ球の
ＣｏｎＡ刺激による幼若化反応（ＳＩ値）を表２に示し
た。この結果、大豆ペプチドの投与前５．３±０．６か
ら投与後４４．８±７．０に上昇し、有意差（ｐ＜０．
０１、ｔ検定）が認められた。
る幼若化反応の測定）ウサギは成熟雄性日本白色種（Ｋ
ＢＬ：ＪＷ、ＳＰＦ、体重２．０ｋｇ）を（株）北山ラ
ベスより購入し、１週間予備飼育を行った後、健常な動
物を試験に供した。飼育は温度２３±２℃、湿度５５±
１０％に保った飼育室内の金属製個別ゲージで行った。
飼料はオリエンタル酵母（株）製ＲＣ４を１日１２０ｇ
給餌し、水は自家揚水（水道法、水質基準適合）を自由
に摂取させた。１群３例のウサギを用い、製造例１にお
ける大豆由来のペプチド粉末２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ
を体重１ｋｇ当り５ｍｌの割合で３０日間連続投与し
た。対照群には同容量の溶媒を投与した。体重測定は３
日毎に行った。投与開始日並びに最終投与の翌日、各ウ
サギの耳静脈からヘパリン処理した注射器で１０ｍｌの
血液を採取し、３時間以内に、リンパ球分離並びに３Ｈ
−サイミジン取り込み能測定法による幼若化反応を実施
した。各リンパ球の取り込んだ放射能から次式により刺
激指数（ＳＩ）を算出した。 ＳＩ＝（ＣｏｎＡを加えた培養系）／（ＣｏｎＡを加え
ない培養系） 大豆由来のペプチド粉末（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）
を３０日間経口投与したウサギの体重変化は表１に示し
た。体重変化は大豆ペプチド投与群と対照群との間に有
意差は認められなっかた。又、ウサギ末梢血リンパ球の
ＣｏｎＡ刺激による幼若化反応（ＳＩ値）を表２に示し
た。この結果、大豆ペプチドの投与前５．３±０．６か
ら投与後４４．８±７．０に上昇し、有意差（ｐ＜０．
０１、ｔ検定）が認められた。
【００２１】試験例２ （マウス脾細胞の抗体産生能測定）マウスは雄性、５週
齢（Ｓｌｃ：Ｃ５７ＢＬ／６、ＳＰＦ）を日本エスエル
シー（株）より購入し、１週間予備飼育を行った後、健
常な動物を試験に供した。マウスの飼育は温度２３±２
℃、湿度５５±１０％に保った飼育室内のエアコンケー
ジで行った。餌料はオリエンタル酵母（株）製ＭＦ、水
は自家揚水（水道法、水質基準適合）を自由に摂取させ
た。１群３例のマウスを用い、製造例１における大豆由
来のペプチド粉末２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを体重１０
ｇ当り０．１ｍｌの割合で１０日間連続経口投与した。
体重は、毎日計測した。大豆ペプチドの投与開始から５
日後、それぞれのマウスの尾静脈にヒツジ赤血球（ＳＲ
ＢＣ、デンカ生研（株））５Ｘ１０８ｃｅｌｌｓ／ｍｌ
を０．２ｍｌ投与して免疫した。免疫の５日後、各群の
マウスから脾臓を採取し、Ｅａｇｌｅ′ｓ ｍｉｎｉｍ
ａｌ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ（ＥＭＥＭ、
日水製薬（株））を入れたシャーレ内で脾細胞を遊離さ
せた。リン酸緩衝液（ＰＢＳ）で３回洗浄した後、ＥＭ
ＥＭで２．５Ｘ１０６ ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整した脾
細胞と５０％ＳＲＢＣ浮遊液及びモルモット乾燥補体
（デンカ生研（株））を８：１：１の割合で混合した。
Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ，Ａ．Ｊ．らの方法（Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ，１４，５９９，（１９６８））に準じて３
７℃で９０分反応後、溶血斑（ｐｌａｑｕｅ ｆｏｒｍ
ｉｎｇ ｃｅｌｌ，ＰＦＣ）を計測した。大豆由来のペ
プチド粉末（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を１０日間経
口投与したマウスの体重変化並びに脾細胞調製時に測定
した脾臓重量を表３に示した。体重変化において大豆ペ
プチド投与群と対照群との間に有意差は認められなかっ
た。又、大豆ペプチド投与群の脾臓重量は１０４．７±
６．１、対照群のそれは７３．１±１０．９で両者間に
有意差は認められなかった。マウス脾細胞での抗体産生
能を表４に示した。大豆ペプチド投与群の抗体産生細胞
数は１１１２±３０６．６であり、対照群の抗体産生細
胞数４９３．３±１７０．２と比較して有意（ｐ＜０．
０１、ｔ検定）に上昇していた。
齢（Ｓｌｃ：Ｃ５７ＢＬ／６、ＳＰＦ）を日本エスエル
シー（株）より購入し、１週間予備飼育を行った後、健
常な動物を試験に供した。マウスの飼育は温度２３±２
℃、湿度５５±１０％に保った飼育室内のエアコンケー
ジで行った。餌料はオリエンタル酵母（株）製ＭＦ、水
は自家揚水（水道法、水質基準適合）を自由に摂取させ
た。１群３例のマウスを用い、製造例１における大豆由
来のペプチド粉末２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙを体重１０
ｇ当り０．１ｍｌの割合で１０日間連続経口投与した。
体重は、毎日計測した。大豆ペプチドの投与開始から５
日後、それぞれのマウスの尾静脈にヒツジ赤血球（ＳＲ
ＢＣ、デンカ生研（株））５Ｘ１０８ｃｅｌｌｓ／ｍｌ
を０．２ｍｌ投与して免疫した。免疫の５日後、各群の
マウスから脾臓を採取し、Ｅａｇｌｅ′ｓ ｍｉｎｉｍ
ａｌ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ（ＥＭＥＭ、
日水製薬（株））を入れたシャーレ内で脾細胞を遊離さ
せた。リン酸緩衝液（ＰＢＳ）で３回洗浄した後、ＥＭ
ＥＭで２．５Ｘ１０６ ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整した脾
細胞と５０％ＳＲＢＣ浮遊液及びモルモット乾燥補体
（デンカ生研（株））を８：１：１の割合で混合した。
Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ，Ａ．Ｊ．らの方法（Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ，１４，５９９，（１９６８））に準じて３
７℃で９０分反応後、溶血斑（ｐｌａｑｕｅ ｆｏｒｍ
ｉｎｇ ｃｅｌｌ，ＰＦＣ）を計測した。大豆由来のペ
プチド粉末（２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）を１０日間経
口投与したマウスの体重変化並びに脾細胞調製時に測定
した脾臓重量を表３に示した。体重変化において大豆ペ
プチド投与群と対照群との間に有意差は認められなかっ
た。又、大豆ペプチド投与群の脾臓重量は１０４．７±
６．１、対照群のそれは７３．１±１０．９で両者間に
有意差は認められなかった。マウス脾細胞での抗体産生
能を表４に示した。大豆ペプチド投与群の抗体産生細胞
数は１１１２±３０６．６であり、対照群の抗体産生細
胞数４９３．３±１７０．２と比較して有意（ｐ＜０．
０１、ｔ検定）に上昇していた。
【００２２】試験例３ （合成ペプチドのマイトージェン活性の測定）藤原らの
方法（栄食誌，Ｖｏｌ４３，Ｎｏ．３，２０３−２０
８，（１９９０））に準じてマイトージェン活性を測定
した。製造例２で合成した新規な８種類のペプチドは、
２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地に対して
溶解（最大濃度１ｍｇ／ｍｌ）し、０．２μのフィルタ
ー濾過滅菌後、同培地により２倍ごと段階希釈を行った
ものを供試サンプルとした。Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウス（６
週齢、雄性）の脾臓を無菌的に摘出し、ワイヤーメッシ
ュ上で２５ｍＭＨＥＰＥＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地を滴
下しながら穏やかに磨砕し、通過液を更にもう一組のワ
イヤーメッシュを通すことにより単一細胞浮遊液を調製
した。脾細胞は同培地にて３回洗浄後、牛胎児血清１０
％を含む２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地
に浮遊させ、９６ウェルマイクロプレートに５Ｘ１０５
個／１００μｌ／ウェルとなるように分注した。その
後、前記の供試サンプル１０μｌを加え、５％ＣＯ２雰
囲気下、３７℃で培養した。尚、陰性対照には、２５ｍ
Ｍ ＭＨＥＰＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地１０μｌを、陽
性対照にはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、終濃度１μｇ
／ｍｌ）並びにリポポリサッカライド（ＬＰＳ、終濃度
１００μｇ／ｍｌ）を供試サンプルの代わりに加えてい
る。その後、０．５％の３−（４，５−ジメチル−２−
チアゾリル）−２，５ジフェニル−２Ｈテトラゾリウム
ブロマイド（ＭＴＴ）溶液を１０μｌ加え、更に３時間
培養を行い、しかる後、生じたＭＴＴ−フォルマザンを
酸−イソプロパノール溶液（０．０４Ｎ濃度に塩酸を添
加）１００μｌを加えて溶解し、ＥＩＡリーダーにて５
９５ｎｍの吸光度を測定した。データは陰性対照の値を
１００とした相対値にて表示している。マイトジェン活
性の結果は表５に示すとおりである。以上の試験の結
果、本発明に係わる新規な８種のペプチドより成る大豆
由来のペプチド粉末は、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて有意に
免疫機能に影響を及ぼすことが確認された。更に、本発
明に係わる新規な８種の合成ペプチドは、ｉｎ ｖｉｔ
ｒｏにおいて有意にマイトージェン活性を示すことが確
認され、免疫賦活剤として有用である。尚、本発明に係
わる新規な８種のペプチドは、構造的にそのアミノ酸配
列を部分構造とするペプチドにおいて、構造中に採用す
ることもできる。
方法（栄食誌，Ｖｏｌ４３，Ｎｏ．３，２０３−２０
８，（１９９０））に準じてマイトージェン活性を測定
した。製造例２で合成した新規な８種類のペプチドは、
２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地に対して
溶解（最大濃度１ｍｇ／ｍｌ）し、０．２μのフィルタ
ー濾過滅菌後、同培地により２倍ごと段階希釈を行った
ものを供試サンプルとした。Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウス（６
週齢、雄性）の脾臓を無菌的に摘出し、ワイヤーメッシ
ュ上で２５ｍＭＨＥＰＥＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地を滴
下しながら穏やかに磨砕し、通過液を更にもう一組のワ
イヤーメッシュを通すことにより単一細胞浮遊液を調製
した。脾細胞は同培地にて３回洗浄後、牛胎児血清１０
％を含む２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地
に浮遊させ、９６ウェルマイクロプレートに５Ｘ１０５
個／１００μｌ／ウェルとなるように分注した。その
後、前記の供試サンプル１０μｌを加え、５％ＣＯ２雰
囲気下、３７℃で培養した。尚、陰性対照には、２５ｍ
Ｍ ＭＨＥＰＳ−ＲＰＭＩ１６４０培地１０μｌを、陽
性対照にはコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ、終濃度１μｇ
／ｍｌ）並びにリポポリサッカライド（ＬＰＳ、終濃度
１００μｇ／ｍｌ）を供試サンプルの代わりに加えてい
る。その後、０．５％の３−（４，５−ジメチル−２−
チアゾリル）−２，５ジフェニル−２Ｈテトラゾリウム
ブロマイド（ＭＴＴ）溶液を１０μｌ加え、更に３時間
培養を行い、しかる後、生じたＭＴＴ−フォルマザンを
酸−イソプロパノール溶液（０．０４Ｎ濃度に塩酸を添
加）１００μｌを加えて溶解し、ＥＩＡリーダーにて５
９５ｎｍの吸光度を測定した。データは陰性対照の値を
１００とした相対値にて表示している。マイトジェン活
性の結果は表５に示すとおりである。以上の試験の結
果、本発明に係わる新規な８種のペプチドより成る大豆
由来のペプチド粉末は、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて有意に
免疫機能に影響を及ぼすことが確認された。更に、本発
明に係わる新規な８種の合成ペプチドは、ｉｎ ｖｉｔ
ｒｏにおいて有意にマイトージェン活性を示すことが確
認され、免疫賦活剤として有用である。尚、本発明に係
わる新規な８種のペプチドは、構造的にそのアミノ酸配
列を部分構造とするペプチドにおいて、構造中に採用す
ることもできる。
【００２３】
【表１】 本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例１におけ
る大豆由来のペプチド粉末投与時のウサギ体重変化。
る大豆由来のペプチド粉末投与時のウサギ体重変化。
【００２４】
【表２】 本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例１におけ
る大豆由来のペプチド粉末投与時の、ウサギ末梢血リン
パ球のコンカナバリンＡ刺激による幼若化反応。
る大豆由来のペプチド粉末投与時の、ウサギ末梢血リン
パ球のコンカナバリンＡ刺激による幼若化反応。
【００２５】
【表３】 本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例１におけ
る大豆由来のペプチド粉末投与時の、マウス体重変化と
脾臓重量。
る大豆由来のペプチド粉末投与時の、マウス体重変化と
脾臓重量。
【００２６】
【表４】 本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例１におけ
る大豆由来のペプチド粉末投与時の、マウス脾細胞での
抗体産生能。
る大豆由来のペプチド粉末投与時の、マウス脾細胞での
抗体産生能。
【００２７】
【表５】 本発明に係る新規な８種の合成ペプチドの、ｉｎ ｖｉ
ｔｒｏにおけるマイトージェン活性。
ｔｒｏにおけるマイトージェン活性。
【図１】本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例
１におけるＳｅｐｈｄｅｘ Ｇ−２５カラムロマトグラ
フィーによる免疫賦活ペプチドの分離精製の結果を示す
図である。
１におけるＳｅｐｈｄｅｘ Ｇ−２５カラムロマトグラ
フィーによる免疫賦活ペプチドの分離精製の結果を示す
図である。
【図２】本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例
１におけるＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５
［Ｈ＋］カラムクロマトグラフィーによる免疫賦活ペプ
チドの分離精製の結果を示す図である。
１におけるＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５
［Ｈ＋］カラムクロマトグラフィーによる免疫賦活ペプ
チドの分離精製の結果を示す図である。
【図３】本発明に係る新規な８種のペプチドの、製造例
１における逆相高速液体クロマトグラフィーによる免疫
賦活ペプチドの分離精製の結果を示す図である。上図の
ＨＰＬＣパターンは、製造例１における精製ペプチド粉
末（ＳＰ−Ｉ分画部分）を供試料とし、下図のＨＰＬＣ
パターンは、精製ペプチド粉末（ＳＰ−ＩＩ分画部分）
を供試料としたものである。
１における逆相高速液体クロマトグラフィーによる免疫
賦活ペプチドの分離精製の結果を示す図である。上図の
ＨＰＬＣパターンは、製造例１における精製ペプチド粉
末（ＳＰ−Ｉ分画部分）を供試料とし、下図のＨＰＬＣ
パターンは、精製ペプチド粉末（ＳＰ−ＩＩ分画部分）
を供試料としたものである。
【図４、図５、図６、図７、図８、図９、図１０、図１
１】同、製造例２で得られた８種の合成ペプチドのマス
スペクトルを示す図である。
１】同、製造例２で得られた８種の合成ペプチドのマス
スペクトルを示す図である。
Claims (16)
- 【請求項１】 次式； Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−ＬｙＳ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項２】 次式； Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項３】 次式； Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−
Ａｓｎ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項４】 次式； Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−
Ａｓｎ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項５】 次式； Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−
Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項６】 次式； Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−
Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項７】 次式； Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−
Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項８】 次式； Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−
Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−Ｌｅｕ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項９】 次式； Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−
Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項１０】 次式； Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−
Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項１１】 次式； Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項１２】 次式； Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項１３】 次式； Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−
Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項１４】 次式； Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−
Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｉｌｅ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。 - 【請求項１５】 次式； Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−
Ａｌａ−Ｐｒｏ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチド。 - 【請求項１６】 次式； Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−
Ａｌａ−Ｐｒｏ で示されるＬ体のアミノ酸の配列によるペプチド構造を
有する新規なペプチドを有効成分として含有することを
特徴とする免疫賦活剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7072224A JP2863898B2 (ja) | 1995-02-21 | 1995-02-21 | 新規なペプチドおよび免疫賦活剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7072224A JP2863898B2 (ja) | 1995-02-21 | 1995-02-21 | 新規なペプチドおよび免疫賦活剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08225594A true JPH08225594A (ja) | 1996-09-03 |
| JP2863898B2 JP2863898B2 (ja) | 1999-03-03 |
Family
ID=13483084
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7072224A Expired - Lifetime JP2863898B2 (ja) | 1995-02-21 | 1995-02-21 | 新規なペプチドおよび免疫賦活剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2863898B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999045941A1 (en) * | 1998-03-13 | 1999-09-16 | Mrs, Llc | Peptide compositions and formulations and use of same |
| US6794362B1 (en) | 2000-05-30 | 2004-09-21 | Connective Tissue Imagineering Llc | Asparagine containing elastin peptide analogs |
| US6809075B1 (en) | 2000-05-30 | 2004-10-26 | Connective Tissue Imagineering Llc | Elastin peptide analogs and uses of same incombination with skin enhancing agents |
| US6962904B1 (en) | 1998-03-13 | 2005-11-08 | Connective Tissue Imagineering | Elastin peptide analogs and uses thereof |
| KR100787949B1 (ko) * | 2007-08-29 | 2007-12-24 | 한양대학교 산학협력단 | 대두 발효 조성물의 제조방법 및 이 조성물로부터 유래된펩타이드 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04297493A (ja) * | 1991-02-13 | 1992-10-21 | Ajinomoto Co Inc | 新規ペプチドおよびこれを含有する降圧剤 |
| JPH07107078A (ja) * | 1993-10-05 | 1995-04-21 | Nec Corp | 時刻設定方式 |
-
1995
- 1995-02-21 JP JP7072224A patent/JP2863898B2/ja not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH04297493A (ja) * | 1991-02-13 | 1992-10-21 | Ajinomoto Co Inc | 新規ペプチドおよびこれを含有する降圧剤 |
| JPH07107078A (ja) * | 1993-10-05 | 1995-04-21 | Nec Corp | 時刻設定方式 |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999045941A1 (en) * | 1998-03-13 | 1999-09-16 | Mrs, Llc | Peptide compositions and formulations and use of same |
| US6069129A (en) * | 1998-03-13 | 2000-05-30 | Mrs, Llc | Elastin derived composition and method of using same |
| US6962904B1 (en) | 1998-03-13 | 2005-11-08 | Connective Tissue Imagineering | Elastin peptide analogs and uses thereof |
| US7666842B2 (en) | 1998-03-13 | 2010-02-23 | Connective Tissue Imagineering, LLC | Elastin peptide analogs and uses thereof |
| US6794362B1 (en) | 2000-05-30 | 2004-09-21 | Connective Tissue Imagineering Llc | Asparagine containing elastin peptide analogs |
| US6809075B1 (en) | 2000-05-30 | 2004-10-26 | Connective Tissue Imagineering Llc | Elastin peptide analogs and uses of same incombination with skin enhancing agents |
| KR100787949B1 (ko) * | 2007-08-29 | 2007-12-24 | 한양대학교 산학협력단 | 대두 발효 조성물의 제조방법 및 이 조성물로부터 유래된펩타이드 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2863898B2 (ja) | 1999-03-03 |
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