JP2903465B2 - 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 - Google Patents
新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤Info
- Publication number
- JP2903465B2 JP2903465B2 JP9225478A JP22547897A JP2903465B2 JP 2903465 B2 JP2903465 B2 JP 2903465B2 JP 9225478 A JP9225478 A JP 9225478A JP 22547897 A JP22547897 A JP 22547897A JP 2903465 B2 JP2903465 B2 JP 2903465B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- activated oxygen
- peptide
- gln
- gly
- nonapeptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、医薬品として有用性を
有する下記のアミノ酸配列で表されるペプチドならびに
それらペプチドを有効成分とする活性化酸素阻害剤に関
する。 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ （式中、アミノ酸残基を表わす各記号は、アミノ酸化学
において慣用の表示法によるものである。）
有する下記のアミノ酸配列で表されるペプチドならびに
それらペプチドを有効成分とする活性化酸素阻害剤に関
する。 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ （式中、アミノ酸残基を表わす各記号は、アミノ酸化学
において慣用の表示法によるものである。）
【０００２】
【従来の技術】活性化酸素が関与する疾病は、火傷、関
節炎などの炎症、再環流障害、抗癌剤の副作用、放射線
障害、消化性潰瘍、細菌性ショック、悪液質、自己免疫
疾患など幅広く存在する。好中球やマクロファージなど
の活性化によって、発生する大量の活性化酸素が引き起
こす疾患は、すべて対象となる。一般に、酸素には動物
に必須の酸素（三重項酸素分子：３Ｏ２）と、特定の条
件あるいは体の不調時に生じるラジカル（活性化酸素）
とが存在する。ラジカルは直接又は間接的（過酸化反応
という形で）に細胞膜、細胞内顆粒膜、あるいはＤＮＡ
をはじめ種々の細胞成分を変質、損傷させたりする。こ
のラジカルは体内で生産され、その種類はスーパーオキ
シドアニオン（−Ｏ２・）、一重項酸素（１Ｏ２・）、
水酸化ラジカル（・ＯＨ）等が存在する。このうちスー
パーオキシドアニオン（−Ｏ２・）は細胞膜の不飽和脂
肪酸等に作用して過酸化反応を引き起こし、脂質に対す
る酸化力は動物に必須な酸素の数千倍も高いといわれて
いる。活性化酸素阻害剤としてのスーパーオキシドジム
スターゼ（ＳＯＤ、酵素番号ＥＣ１．１５．１．１）
は、１９６９年マクコルドら［ＭｃＣｏｒｄ，Ｊ．Ｍ．
＆Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ，Ｉ． ：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．，２４４，６０４９（１９６９）］によってその作
用が発見された酵素であり、酸素分子が一電子還元され
て生じるスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）を不均
化する ２−Ｏ２・＋２Ｈ＋→ Ｈ２Ｏ２＋Ｏ２ を触媒する。人体が正常なときにはＳＯＤが働いてスー
パーオキシドアニオンの発生を抑えている。このＳＯＤ
活性は加齢と共に低下し、すなわち壮年期から老年期に
なると活性が低下し、ＳＯＤ活性の増減は生体の老化、
癌化のバロメーターともいわれている。このようなＳＯ
Ｄ活性が低下するとラジカルの発生は抑えにくくなりＳ
ＯＤを摂取補強するか、又はラジカルを捕捉除去する活
性化酸素阻害剤の摂取が必要となってくる。一方、水溶
性の抗酸化剤としてのアミノ酸から蛋白質にいたるポリ
ペプチドの活性化酸素阻害作用は、油脂をペプチド類が
包み込むことにより酸素分子と不飽和脂肪酸の接触を阻
害し、脂質ペルオキシラジカル（ＬＯＯ・）の発生を抑
制すると考えられており、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシル
アニソール）及びＢＨＴ（ジブチルヒドロキシトルエ
ン）の抗酸化作用のように、油脂（Ｌ）の酸化の際に生
じるラジカル（ＬＯＯ・）に作用して、酸化の連鎖反応
を停止させるラジカル捕捉作用とは区別している。 ＬＯＯ・＋ＡＨ２ →ＬＯＯＨ＋ＡＨ・２ＡＨ・→２Ａ
Ｈ２＋Ａ 又は ＬＯＯ・＋ＡＨ・→ＬＯＯＨ＋Ａ（Ａ
Ｈ２；抗酸化剤） このような背景のもとに、抗癌、老化防止に対する特効
薬がない今日、環境中からＤＮＡ損傷因子、突然変異因
子、発癌因子、老化因子等を取り除いたり不活性化し、
活性化酸素フリーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を
示す活性化酸素阻害剤に関する研究や検討が進められて
いる。
節炎などの炎症、再環流障害、抗癌剤の副作用、放射線
障害、消化性潰瘍、細菌性ショック、悪液質、自己免疫
疾患など幅広く存在する。好中球やマクロファージなど
の活性化によって、発生する大量の活性化酸素が引き起
こす疾患は、すべて対象となる。一般に、酸素には動物
に必須の酸素（三重項酸素分子：３Ｏ２）と、特定の条
件あるいは体の不調時に生じるラジカル（活性化酸素）
とが存在する。ラジカルは直接又は間接的（過酸化反応
という形で）に細胞膜、細胞内顆粒膜、あるいはＤＮＡ
をはじめ種々の細胞成分を変質、損傷させたりする。こ
のラジカルは体内で生産され、その種類はスーパーオキ
シドアニオン（−Ｏ２・）、一重項酸素（１Ｏ２・）、
水酸化ラジカル（・ＯＨ）等が存在する。このうちスー
パーオキシドアニオン（−Ｏ２・）は細胞膜の不飽和脂
肪酸等に作用して過酸化反応を引き起こし、脂質に対す
る酸化力は動物に必須な酸素の数千倍も高いといわれて
いる。活性化酸素阻害剤としてのスーパーオキシドジム
スターゼ（ＳＯＤ、酵素番号ＥＣ１．１５．１．１）
は、１９６９年マクコルドら［ＭｃＣｏｒｄ，Ｊ．Ｍ．
＆Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ，Ｉ． ：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．，２４４，６０４９（１９６９）］によってその作
用が発見された酵素であり、酸素分子が一電子還元され
て生じるスーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）を不均
化する ２−Ｏ２・＋２Ｈ＋→ Ｈ２Ｏ２＋Ｏ２ を触媒する。人体が正常なときにはＳＯＤが働いてスー
パーオキシドアニオンの発生を抑えている。このＳＯＤ
活性は加齢と共に低下し、すなわち壮年期から老年期に
なると活性が低下し、ＳＯＤ活性の増減は生体の老化、
癌化のバロメーターともいわれている。このようなＳＯ
Ｄ活性が低下するとラジカルの発生は抑えにくくなりＳ
ＯＤを摂取補強するか、又はラジカルを捕捉除去する活
性化酸素阻害剤の摂取が必要となってくる。一方、水溶
性の抗酸化剤としてのアミノ酸から蛋白質にいたるポリ
ペプチドの活性化酸素阻害作用は、油脂をペプチド類が
包み込むことにより酸素分子と不飽和脂肪酸の接触を阻
害し、脂質ペルオキシラジカル（ＬＯＯ・）の発生を抑
制すると考えられており、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシル
アニソール）及びＢＨＴ（ジブチルヒドロキシトルエ
ン）の抗酸化作用のように、油脂（Ｌ）の酸化の際に生
じるラジカル（ＬＯＯ・）に作用して、酸化の連鎖反応
を停止させるラジカル捕捉作用とは区別している。 ＬＯＯ・＋ＡＨ２ →ＬＯＯＨ＋ＡＨ・２ＡＨ・→２Ａ
Ｈ２＋Ａ 又は ＬＯＯ・＋ＡＨ・→ＬＯＯＨ＋Ａ（Ａ
Ｈ２；抗酸化剤） このような背景のもとに、抗癌、老化防止に対する特効
薬がない今日、環境中からＤＮＡ損傷因子、突然変異因
子、発癌因子、老化因子等を取り除いたり不活性化し、
活性化酸素フリーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を
示す活性化酸素阻害剤に関する研究や検討が進められて
いる。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】前記従来技術で、活性
化酸素阻害剤としてのＳＯＤはその製造が困難であり又
原料の入手に制限があり、ビタミンＥ、ビタミンＣ、カ
テキン類等は、生体を用いた実験では活性化酸素阻害作
用が十分でない等の難点があり、更に強力な作用を有す
る活性化酸素阻害剤が要望されている。又活性化酸素フ
リーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を示す活性化酸
素阻害剤の多くは、その殆どが化学合成で製造されたも
のであり、又たとえ植物や動物からの材料を用いた天然
物由来のものであっても、その製造過程で人体に害を及
ぼす化学物質を用いたり、生成物の一部を化学物質と反
応させて作られたものが多い。水溶性の抗酸化剤とし
て、アミノ酸から蛋白質に至るポリペプチドのアミノ酸
配列と抗酸化力に関する知見は極めて少なく、山口ら
［ニューフードインダストリー、３１巻、１８−２２頁
（１９８９年）］は、ジペプチドがアミノ酸や蛋白質よ
りも抗酸化力が強いことを示しており、又最近、拓殖ら
［日本農芸化学会誌、６５巻、１６３５−１６４１頁
（１９９１年）］が、ヒスチジンを含む３種の抗酸化ペ
プチドを報告しているのみである。これら活性化酸素フ
リーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を有する活性化
酸素剤が、未だ医薬品として開発が進んでいるとの報告
はない。
化酸素阻害剤としてのＳＯＤはその製造が困難であり又
原料の入手に制限があり、ビタミンＥ、ビタミンＣ、カ
テキン類等は、生体を用いた実験では活性化酸素阻害作
用が十分でない等の難点があり、更に強力な作用を有す
る活性化酸素阻害剤が要望されている。又活性化酸素フ
リーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を示す活性化酸
素阻害剤の多くは、その殆どが化学合成で製造されたも
のであり、又たとえ植物や動物からの材料を用いた天然
物由来のものであっても、その製造過程で人体に害を及
ぼす化学物質を用いたり、生成物の一部を化学物質と反
応させて作られたものが多い。水溶性の抗酸化剤とし
て、アミノ酸から蛋白質に至るポリペプチドのアミノ酸
配列と抗酸化力に関する知見は極めて少なく、山口ら
［ニューフードインダストリー、３１巻、１８−２２頁
（１９８９年）］は、ジペプチドがアミノ酸や蛋白質よ
りも抗酸化力が強いことを示しており、又最近、拓殖ら
［日本農芸化学会誌、６５巻、１６３５−１６４１頁
（１９９１年）］が、ヒスチジンを含む３種の抗酸化ペ
プチドを報告しているのみである。これら活性化酸素フ
リーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を有する活性化
酸素剤が、未だ医薬品として開発が進んでいるとの報告
はない。
【０００４】
【問題を解決するための手段】本発明者は、小麦グルテ
ンの蛋白質分解酵素の分解液から薬理作用を有する物質
を検索し、新規なノナペプチドが強い活性化酸素阻害作
用を有することを見出した。そして、このペプチドを医
薬として実用化するための研究を鋭意行った。その結
果、このペプチドが活性化酸素フリーラジカル消去作用
並びに抗酸化作用を有し、天然物由来の活性化酸素阻害
剤としての有用性を見出した。本発明は係る知見に基づ
くものである。以下に、本発明を詳細に説明する。本発
明に係る新規なペプチドは、次式 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸配列で表わされる新規なノナ
ペプチドであり、常温における性状は白色の粉末であ
る。
ンの蛋白質分解酵素の分解液から薬理作用を有する物質
を検索し、新規なノナペプチドが強い活性化酸素阻害作
用を有することを見出した。そして、このペプチドを医
薬として実用化するための研究を鋭意行った。その結
果、このペプチドが活性化酸素フリーラジカル消去作用
並びに抗酸化作用を有し、天然物由来の活性化酸素阻害
剤としての有用性を見出した。本発明は係る知見に基づ
くものである。以下に、本発明を詳細に説明する。本発
明に係る新規なペプチドは、次式 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸配列で表わされる新規なノナ
ペプチドであり、常温における性状は白色の粉末であ
る。
【０００５】前記のノナペプチドは、化学的に合成する
方法又は小麦グルテンの蛋白質分解酵素の分解液から分
離精製する方法を挙げることができる。本発明に係る新
規なペプチドを化学的に合成する場合には、液相法また
は固相法等の通常のペプチド合成法によってポリマー性
の固相支持体へペプチドのＣ末端（カルボキシル末端
側）からそのアミノ酸残基に対応したＬ体のアミノ酸を
順次ペプチド結合によって結合していくのがよい。そし
て、そのようにして得られた合成ペプチドは、トリフル
オロメタンスルホン酸、フッ化水素等を用いてポリマー
性の固相支持体から切断した後、アミノ酸側鎖の保護基
を除去し、逆相系のカラムを用いた通常の方法で精製す
ることができる。
方法又は小麦グルテンの蛋白質分解酵素の分解液から分
離精製する方法を挙げることができる。本発明に係る新
規なペプチドを化学的に合成する場合には、液相法また
は固相法等の通常のペプチド合成法によってポリマー性
の固相支持体へペプチドのＣ末端（カルボキシル末端
側）からそのアミノ酸残基に対応したＬ体のアミノ酸を
順次ペプチド結合によって結合していくのがよい。そし
て、そのようにして得られた合成ペプチドは、トリフル
オロメタンスルホン酸、フッ化水素等を用いてポリマー
性の固相支持体から切断した後、アミノ酸側鎖の保護基
を除去し、逆相系のカラムを用いた通常の方法で精製す
ることができる。
【０００６】上記のように、本発明に係る新規なノナペ
プチドは、小麦グルテンの蛋白質分解酵素の分解液から
分離精製することができるが、その場合には、例えば、
以下のようにして行うことができる。上記の新規なペプ
チドを含有している小麦グルテン部分を取り出し傘初分
解する。加水分解は常法に従って行う。例えば、ペプシ
ン等の蛋白質分解酵素で加水分解する場合は、小麦グル
テンを必要とあれば更に加水分解した後、酵素の至適値
に調整し、酵素を加えてインキュベートする。次いで必
要に応じ中和した後、酵素を失活させて加水分解液を得
る。その加水分解液を濾紙及び／又はセライト等を用い
て濾過することによって不溶性成分を除去し、得られた
濾液をセロファン等の半透膜を用いて適当な溶媒（例え
ば、トリス−塩酸緩衝液、リン酸緩衝液の中性の緩衝液
等）中で充分に透析し、その濾液中の成分で半透膜を通
過した成分を含む溶液を強酸性陽イオン交換樹脂（例え
ば、ダウケミカル社製のＤｏｗｅｘ ５０Ｗ等）にか
け、その吸着画分から活性化酸素阻害活性を有する成分
を含有する画分を得、得られた活性化酸素阻害活性画分
を陽イオン交換ゲル濾過（例えば、ファルマシア社製の
ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５等）によって分画
し、得られた活性化酸素阻害活性画分を更に逆相ＨＰＬ
Ｃによって分画する。
プチドは、小麦グルテンの蛋白質分解酵素の分解液から
分離精製することができるが、その場合には、例えば、
以下のようにして行うことができる。上記の新規なペプ
チドを含有している小麦グルテン部分を取り出し傘初分
解する。加水分解は常法に従って行う。例えば、ペプシ
ン等の蛋白質分解酵素で加水分解する場合は、小麦グル
テンを必要とあれば更に加水分解した後、酵素の至適値
に調整し、酵素を加えてインキュベートする。次いで必
要に応じ中和した後、酵素を失活させて加水分解液を得
る。その加水分解液を濾紙及び／又はセライト等を用い
て濾過することによって不溶性成分を除去し、得られた
濾液をセロファン等の半透膜を用いて適当な溶媒（例え
ば、トリス−塩酸緩衝液、リン酸緩衝液の中性の緩衝液
等）中で充分に透析し、その濾液中の成分で半透膜を通
過した成分を含む溶液を強酸性陽イオン交換樹脂（例え
ば、ダウケミカル社製のＤｏｗｅｘ ５０Ｗ等）にか
け、その吸着画分から活性化酸素阻害活性を有する成分
を含有する画分を得、得られた活性化酸素阻害活性画分
を陽イオン交換ゲル濾過（例えば、ファルマシア社製の
ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５等）によって分画
し、得られた活性化酸素阻害活性画分を更に逆相ＨＰＬ
Ｃによって分画する。
【０００７】この新規なノナペプチドは、静脈内への繰
り返し投与を行った場合、抗体産生を惹起せず、アナフ
ィラキシーショックを起こさない。又このペプチドはＬ
−アミノ酸のみの配列構造からなり、投与後、生体内の
プロテアーゼにより徐々に分解される為、毒性は極めて
低く安全性は極めて高い（ＬＤ５０＞５０００ｍｇ／ｋ
ｇ：ラット経口投与）。本発明に係るノナペプチドは、
通常用いられる賦形剤等の添加物を用いて注射剤、錠
剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等に調製することができ
る。投与法としては、通常は、ＳＯＤが欠乏している噛
乳類（例えば、ヒト、イヌ、ラット等）に注射するこ
と、あるいは経口投与することがあげられる。投与量
は、例えば、動物体重１ｋｇ当たりノナペプチド０．０
１−１０ｍｇの量である。投与回数は、通常、１日１回
から４回程度であるが、投与経路によって、適宜、調製
することができる。上記の各種製剤において用いられる
賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等の種類は、特に限定
されず、通常の注射剤、散剤、顆粒剤、錠剤あるいはカ
プセル剤に用いられるものを使用することができる。
り返し投与を行った場合、抗体産生を惹起せず、アナフ
ィラキシーショックを起こさない。又このペプチドはＬ
−アミノ酸のみの配列構造からなり、投与後、生体内の
プロテアーゼにより徐々に分解される為、毒性は極めて
低く安全性は極めて高い（ＬＤ５０＞５０００ｍｇ／ｋ
ｇ：ラット経口投与）。本発明に係るノナペプチドは、
通常用いられる賦形剤等の添加物を用いて注射剤、錠
剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等に調製することができ
る。投与法としては、通常は、ＳＯＤが欠乏している噛
乳類（例えば、ヒト、イヌ、ラット等）に注射するこ
と、あるいは経口投与することがあげられる。投与量
は、例えば、動物体重１ｋｇ当たりノナペプチド０．０
１−１０ｍｇの量である。投与回数は、通常、１日１回
から４回程度であるが、投与経路によって、適宜、調製
することができる。上記の各種製剤において用いられる
賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等の種類は、特に限定
されず、通常の注射剤、散剤、顆粒剤、錠剤あるいはカ
プセル剤に用いられるものを使用することができる。
【０００８】錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤に用いる
添加剤としては、下記のものをあげることができる。賦
形剤としては、結晶セルロース等の糖類、マンニトール
等の糖アルコール類、でんぷん類、無水リン酸カルシウ
ム等；結合剤としては、でんぷん類、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロース等；崩壊剤としては、カルボキシメ
チルセルロース及びそのカリウム塩類；滑沢剤として
は、ステアリン酸及びその塩類、タルク、ワックス類を
あげることができる。又製剤の調製にあたっては、必要
に応じメントール、クエン酸及びその塩類、香料等の矯
臭剤を用いることができる。注射用の無菌組成物は、常
法により、本発明に係る新規なノナペプチドを、注射用
水、生理食塩液及びキシリトールやマンニトールなどの
糖アルコール注射液、プロピレングリコールやポリエチ
レングリコール等のグリコールに溶解又は懸濁させて注
射剤とすることができる。この際、緩衝液、防腐剤、酸
化防止剤等を必要に応じて添加することができる。本発
明の新規なノナペプチドを含有する製剤は凍結乾燥品又
は乾燥粉末の形とし、用時、通常の溶解剤、例えば水又
は生理食塩液にて溶解して用いることもできる。
添加剤としては、下記のものをあげることができる。賦
形剤としては、結晶セルロース等の糖類、マンニトール
等の糖アルコール類、でんぷん類、無水リン酸カルシウ
ム等；結合剤としては、でんぷん類、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロース等；崩壊剤としては、カルボキシメ
チルセルロース及びそのカリウム塩類；滑沢剤として
は、ステアリン酸及びその塩類、タルク、ワックス類を
あげることができる。又製剤の調製にあたっては、必要
に応じメントール、クエン酸及びその塩類、香料等の矯
臭剤を用いることができる。注射用の無菌組成物は、常
法により、本発明に係る新規なノナペプチドを、注射用
水、生理食塩液及びキシリトールやマンニトールなどの
糖アルコール注射液、プロピレングリコールやポリエチ
レングリコール等のグリコールに溶解又は懸濁させて注
射剤とすることができる。この際、緩衝液、防腐剤、酸
化防止剤等を必要に応じて添加することができる。本発
明の新規なノナペプチドを含有する製剤は凍結乾燥品又
は乾燥粉末の形とし、用時、通常の溶解剤、例えば水又
は生理食塩液にて溶解して用いることもできる。
【０００９】活性化酸素はマクロファージ等の食細胞内
に生じ、食細胞が捕食した異物を分解する役割を有して
いるが、活性化酸素が過剰に生産されると細胞の外に分
泌され、他の組織に障害を起こす。本発明に係る新規な
ノナペプチドは、優れた活性化酸素阻害作用を有し、活
性化酸素フリーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を示
すことから、組織障害を引き起こす過剰な活性酸素を分
解して組織を守る作用を持つことから、例えば抗炎症剤
として、関節炎やリュウマチなどに有効であるほか、ベ
ーチュット病、心筋梗塞等に対しても有用である。
に生じ、食細胞が捕食した異物を分解する役割を有して
いるが、活性化酸素が過剰に生産されると細胞の外に分
泌され、他の組織に障害を起こす。本発明に係る新規な
ノナペプチドは、優れた活性化酸素阻害作用を有し、活
性化酸素フリーラジカル消去作用並びに抗酸化作用を示
すことから、組織障害を引き起こす過剰な活性酸素を分
解して組織を守る作用を持つことから、例えば抗炎症剤
として、関節炎やリュウマチなどに有効であるほか、ベ
ーチュット病、心筋梗塞等に対しても有用である。
【００１０】
【実施例】以下に実施例として、製造例及び試験例を記
載し、本発明を更に詳細に説明する。 製造例１ 小麦グルテン３３０ｇに脱イオン水１．６５ιを加えて
ホモジナイズした。得られた小麦グルテン−ホモジネイ
トにペプシン９．９ｇを加え、ｐＨ２．０に調整して３
７℃で２０時間インキュベートした。このようにして調
製した小麦グルテン−ホモジネイトのペプシン分解液を
Ｄｉａｆｌｏｗ膜（アミコン社製、ＹＭ−１０型膜、分
画分子量１万）を用いて限外濾過した。得られた濾過液
をＤｏｗｅｘ ５０Ｗ×４（Ｈ＋）を充填したカラムを
用いてクロマトグラフィー処理した。脱イオン水で水洗
し、溶出は２Ｎ−ＮＨ４ＯＨで行い溶出液を濃縮した。
この濃縮液をＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２５カラムにより
クロマトグラフィー処理して低分子ペプチド画分（分画
番号２７−４１）を分離した。そのカラムクロマトグラ
フを図１に示した。この低分子ペプチド画分を濃縮して
小麦グルテンペプチド液を得た。更にこのペプチド液を
ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５（Ｈ＋）カラムによ
りクロマトグラフィー処理して各ペプチド画分としてＳ
Ｐ−１画分（分画番号１７−３７）、ＳＰ−２画分（分
画番号３８−５９）及びＳＰ−３画分（分画番号６０−
８０）を分離した。そのカラムクロマトグラフを図２に
示した。これら各ペプチド画分を凍結乾燥してペプチド
パウダー（以下、小麦グルテンペプチドと称す。）とし
て、ＳＰ−１画分１８．６ｇ、ＳＰ−２画分１９．９ｇ
及びＳＰ−３画分２３．３ｇを得た。このようにして分
画した小麦グルテンペプチドの中で、活性化酸素阻害活
性の高いＳＰ−３画分のペプチドパウダーを脱イオン水
に溶解（５ｍｇ／２５μι）した後ＨＰＬＣを行った。
条件はカラムとして野村化学社製ＤｅｖｅｌｏｓｉｌＯ
ＤＳ−５（ψ４．６ｍｍ ＩＤ×２５ｃｍＬ）を使用
し、移動相として０．０５％トリフルオロ酢酸（以下、
ＴＦＡと略記する。）から２５％アセトニトリル／０．
０５％ＴＦＡでの濃度勾配法により、流速１．０ｍｌ／
ｍｉｎ、検出波長２２０ｎｍでクロマトグラフィー処理
し、溶出時間５６．１分に強い活性化酸素阻害作用を有
するペプチドフラグメントを得た。その結果は図３に示
すとおりである。このようにして得られた活性化酸素阻
害作用を有するこれらペプチドのアミノ酸配列は、アプ
ライドバイオシステム（ＡＢＩ）社製のプロテインシー
クエンサー４７７Ａ型を用いて決定された。その結果、
次式 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸配列で表わされるノナペプチ
ドであることが確認された。本発明に係る小麦グルテン
ペプチドを活性化酸素阻害剤として、例えば錠剤に製剤
する場合には、常法に従って、例えば次のように処理す
ればよい：（１）ペプチド１３ｇ、（２）乳糖８７ｇ、
（３）コーンスターチ２９ｇ、（４）ステアリン酸マグ
ネシウム１ｇを原料とし、先ず（１）、（２）及び１７
ｇのコーンスターチを混和し、７ｇのコーンスターチか
ら作ったペーストとともに顆粒化し、この顆粒に５ｇの
コーンスターチと（４）とを加え、得られた混合物を圧
縮錠剤機で打錠し、錠剤１０００個を製造する。
載し、本発明を更に詳細に説明する。 製造例１ 小麦グルテン３３０ｇに脱イオン水１．６５ιを加えて
ホモジナイズした。得られた小麦グルテン−ホモジネイ
トにペプシン９．９ｇを加え、ｐＨ２．０に調整して３
７℃で２０時間インキュベートした。このようにして調
製した小麦グルテン−ホモジネイトのペプシン分解液を
Ｄｉａｆｌｏｗ膜（アミコン社製、ＹＭ−１０型膜、分
画分子量１万）を用いて限外濾過した。得られた濾過液
をＤｏｗｅｘ ５０Ｗ×４（Ｈ＋）を充填したカラムを
用いてクロマトグラフィー処理した。脱イオン水で水洗
し、溶出は２Ｎ−ＮＨ４ＯＨで行い溶出液を濃縮した。
この濃縮液をＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２５カラムにより
クロマトグラフィー処理して低分子ペプチド画分（分画
番号２７−４１）を分離した。そのカラムクロマトグラ
フを図１に示した。この低分子ペプチド画分を濃縮して
小麦グルテンペプチド液を得た。更にこのペプチド液を
ＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５（Ｈ＋）カラムによ
りクロマトグラフィー処理して各ペプチド画分としてＳ
Ｐ−１画分（分画番号１７−３７）、ＳＰ−２画分（分
画番号３８−５９）及びＳＰ−３画分（分画番号６０−
８０）を分離した。そのカラムクロマトグラフを図２に
示した。これら各ペプチド画分を凍結乾燥してペプチド
パウダー（以下、小麦グルテンペプチドと称す。）とし
て、ＳＰ−１画分１８．６ｇ、ＳＰ−２画分１９．９ｇ
及びＳＰ−３画分２３．３ｇを得た。このようにして分
画した小麦グルテンペプチドの中で、活性化酸素阻害活
性の高いＳＰ−３画分のペプチドパウダーを脱イオン水
に溶解（５ｍｇ／２５μι）した後ＨＰＬＣを行った。
条件はカラムとして野村化学社製ＤｅｖｅｌｏｓｉｌＯ
ＤＳ−５（ψ４．６ｍｍ ＩＤ×２５ｃｍＬ）を使用
し、移動相として０．０５％トリフルオロ酢酸（以下、
ＴＦＡと略記する。）から２５％アセトニトリル／０．
０５％ＴＦＡでの濃度勾配法により、流速１．０ｍｌ／
ｍｉｎ、検出波長２２０ｎｍでクロマトグラフィー処理
し、溶出時間５６．１分に強い活性化酸素阻害作用を有
するペプチドフラグメントを得た。その結果は図３に示
すとおりである。このようにして得られた活性化酸素阻
害作用を有するこれらペプチドのアミノ酸配列は、アプ
ライドバイオシステム（ＡＢＩ）社製のプロテインシー
クエンサー４７７Ａ型を用いて決定された。その結果、
次式 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸配列で表わされるノナペプチ
ドであることが確認された。本発明に係る小麦グルテン
ペプチドを活性化酸素阻害剤として、例えば錠剤に製剤
する場合には、常法に従って、例えば次のように処理す
ればよい：（１）ペプチド１３ｇ、（２）乳糖８７ｇ、
（３）コーンスターチ２９ｇ、（４）ステアリン酸マグ
ネシウム１ｇを原料とし、先ず（１）、（２）及び１７
ｇのコーンスターチを混和し、７ｇのコーンスターチか
ら作ったペーストとともに顆粒化し、この顆粒に５ｇの
コーンスターチと（４）とを加え、得られた混合物を圧
縮錠剤機で打錠し、錠剤１０００個を製造する。
【００１１】製造例２ 本例は、Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇ
ｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙの合成法による製造例で
ある。アプライドバイオシステム（ＡＢＩ）社製のペプ
チド合成装置４３０Ａ型を用いた固相法によって当該ノ
ナペプチドを合成した。固相担体としては、スチレン−
ジビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン樹脂）をクロ
ロメチル化した樹脂を使用した。先ず、当該ノナペプチ
ドのアミノ酸配列に従って、常法どおり、そのＣ末端側
のＧｌｙからクロロメチル樹脂に反応させ、ペプチド結
合樹脂を得た。このときのアミノ酸は、ｔ−ブトキシカ
ルボニル（以下、ｔ−Ｂｏｃと略記する。）基で保護さ
れたｔ−Ｂｏｃアミノ酸を使用した。次にこのペプチド
結合樹脂をエタンジオールとチオアニソールからなる混
合液に懸濁し、室温で１０分間撹拌後、氷冷下でトリフ
ルオロ酢酸を加え、更に１０分間撹拌した。この混合液
にトリフルオロメタンスルホン酸を滴下し、室温で３０
分間撹拌した後、無水エーテルを加えてその生成物を沈
澱させて分離し、その沈澱物を無水エーテルで数回洗浄
した後、減圧下で乾燥した。このようにして得られた未
精製の合成ペプチドは蒸留水に溶解した後、逆相系のカ
ラムＣ１８（５μ）を用いたＨＰＬＣにより精製した。
移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸留水、（Ｂ）
０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を使用し、
（Ａ）液が２０分間で９０％−６５％の濃度勾配法によ
り流速１．６ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィー処理し
た。紫外部波長２１６ｎｍで検出し、最大の吸収を示し
た溶出画分を分取し、これを凍結乾燥することによって
目的とする合成ノナペプチオドを得た。
ｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙの合成法による製造例で
ある。アプライドバイオシステム（ＡＢＩ）社製のペプ
チド合成装置４３０Ａ型を用いた固相法によって当該ノ
ナペプチドを合成した。固相担体としては、スチレン−
ジビニルベンゼン共重合体（ポリスチレン樹脂）をクロ
ロメチル化した樹脂を使用した。先ず、当該ノナペプチ
ドのアミノ酸配列に従って、常法どおり、そのＣ末端側
のＧｌｙからクロロメチル樹脂に反応させ、ペプチド結
合樹脂を得た。このときのアミノ酸は、ｔ−ブトキシカ
ルボニル（以下、ｔ−Ｂｏｃと略記する。）基で保護さ
れたｔ−Ｂｏｃアミノ酸を使用した。次にこのペプチド
結合樹脂をエタンジオールとチオアニソールからなる混
合液に懸濁し、室温で１０分間撹拌後、氷冷下でトリフ
ルオロ酢酸を加え、更に１０分間撹拌した。この混合液
にトリフルオロメタンスルホン酸を滴下し、室温で３０
分間撹拌した後、無水エーテルを加えてその生成物を沈
澱させて分離し、その沈澱物を無水エーテルで数回洗浄
した後、減圧下で乾燥した。このようにして得られた未
精製の合成ペプチドは蒸留水に溶解した後、逆相系のカ
ラムＣ１８（５μ）を用いたＨＰＬＣにより精製した。
移動相として（Ａ）０．１％ＴＦＡ含有蒸留水、（Ｂ）
０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル溶液を使用し、
（Ａ）液が２０分間で９０％−６５％の濃度勾配法によ
り流速１．６ｍｌ／ｍｉｎでクロマトグラフィー処理し
た。紫外部波長２１６ｎｍで検出し、最大の吸収を示し
た溶出画分を分取し、これを凍結乾燥することによって
目的とする合成ノナペプチオドを得た。
【００１２】この合成ノナペプチドをマススペクトルに
より分析した結果、次式 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｈｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ なるアミノ酸配列で表わされるペプチドであることが確
認された。このマススペクトルの結果は図４に示すとお
りである。合成によって得られた本発明に係る新規なノ
ナペプチドは、以下に示すｉｎｖｉｔｒｏ（試験管内）
試験によって、活性化酸素フリーラジカル消去作用並び
に抗酸化作用を確認することにより、その活性化酸素阻
害効果が確認された。
より分析した結果、次式 Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｈｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ なるアミノ酸配列で表わされるペプチドであることが確
認された。このマススペクトルの結果は図４に示すとお
りである。合成によって得られた本発明に係る新規なノ
ナペプチドは、以下に示すｉｎｖｉｔｒｏ（試験管内）
試験によって、活性化酸素フリーラジカル消去作用並び
に抗酸化作用を確認することにより、その活性化酸素阻
害効果が確認された。
【００１３】試験例１ （活性化酸素フリーラジカル消去作用の測定）ウミホタ
ル−ルシフェリン誘導体（ＣＬＡ）は一重項酸素（１Ｏ
２・）、スーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）を特異
的に検出する有効な化学発光試薬であり、発明者ら［Ａ
ｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，５５，１５７−１６
０（１９９１）］の方法によりスーパーオキシドジムス
ターゼ（ＳＯＤ）を消光剤に用いた消光実験によりＣＬ
Ａと−Ｏ２・との反応速度が求められる。ＣＬＡ（Ｃ
１３Ｈ１１ＯＮ３、東京化成社製、最終濃度１．３９×
１０−７〜４．６４×１０−８）溶液１０μｌ、アルブ
ミン（５０ｍｇ／ｍｌ、シグマ化学社製）５００μｌ、
キサンチンオキシダーゼ（１．４５ｕｎｉｔ／ｍｌ、シ
グマ化学社製）５０μｌを順に円筒方石英セル（内径１
４ｍｍ、高さ６０ｍｍ）に入れ、ルミノメーター（Ａｌ
ｏｋａ ＢＬＲ−１０２Ｂ型、浜松ホトニクス社製）の
試料室内に移し、３ｍＭヒポキサンチン溶液２００μｌ
を注入して、セル底面から化学発光を単一光量子計数に
より測定した。消光剤が存在する場合並びに存在しない
場合の−Ｏ２・の発光強度の比率（Ｉ０／Ｉ）はＩ０／
Ｉ＝１＋［ｋ３／（ｋ１＋ｋ２〔ＣＬＡ〕）］×［Ｑ］
で表される。ここで［Ｑ］は活性化酸素阻害剤を、ｋ１
は−Ｏ２・の消光速度定数、ｋ２は−Ｏ２・と［ＣＬ
Ａ］との反応速度定数、ｋ３は−Ｏ２・と［Ｑ］との反
応速度定数を示す。本発明に係る小麦グルテン由来のペ
プチド画分の、活性化酸素フリーラジカル消去作用を示
す活性化酸素阻害活性（消光速度）を表１に示す。
ル−ルシフェリン誘導体（ＣＬＡ）は一重項酸素（１Ｏ
２・）、スーパーオキシドアニオン（−Ｏ２・）を特異
的に検出する有効な化学発光試薬であり、発明者ら［Ａ
ｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，５５，１５７−１６
０（１９９１）］の方法によりスーパーオキシドジムス
ターゼ（ＳＯＤ）を消光剤に用いた消光実験によりＣＬ
Ａと−Ｏ２・との反応速度が求められる。ＣＬＡ（Ｃ
１３Ｈ１１ＯＮ３、東京化成社製、最終濃度１．３９×
１０−７〜４．６４×１０−８）溶液１０μｌ、アルブ
ミン（５０ｍｇ／ｍｌ、シグマ化学社製）５００μｌ、
キサンチンオキシダーゼ（１．４５ｕｎｉｔ／ｍｌ、シ
グマ化学社製）５０μｌを順に円筒方石英セル（内径１
４ｍｍ、高さ６０ｍｍ）に入れ、ルミノメーター（Ａｌ
ｏｋａ ＢＬＲ−１０２Ｂ型、浜松ホトニクス社製）の
試料室内に移し、３ｍＭヒポキサンチン溶液２００μｌ
を注入して、セル底面から化学発光を単一光量子計数に
より測定した。消光剤が存在する場合並びに存在しない
場合の−Ｏ２・の発光強度の比率（Ｉ０／Ｉ）はＩ０／
Ｉ＝１＋［ｋ３／（ｋ１＋ｋ２〔ＣＬＡ〕）］×［Ｑ］
で表される。ここで［Ｑ］は活性化酸素阻害剤を、ｋ１
は−Ｏ２・の消光速度定数、ｋ２は−Ｏ２・と［ＣＬ
Ａ］との反応速度定数、ｋ３は−Ｏ２・と［Ｑ］との反
応速度定数を示す。本発明に係る小麦グルテン由来のペ
プチド画分の、活性化酸素フリーラジカル消去作用を示
す活性化酸素阻害活性（消光速度）を表１に示す。
【表１】 本発明に係る新規なノナペプチドの活性化酸素フリーラ
ジカル消去作用を示す活性化酸素阻害活性値（反応速度
定数ｋ３）は１．２×１０−６Ｍ−１ｓｅｃ−１であ
る。尚、標品ＳＯＤの活性化酸素フリーラジカル消去作
用を示す活性化酸素阻害活性値（反応速度定数ｋ３）は
３．４７×１０−８Ｍ−１ｓｅｃ−１である。
ジカル消去作用を示す活性化酸素阻害活性値（反応速度
定数ｋ３）は１．２×１０−６Ｍ−１ｓｅｃ−１であ
る。尚、標品ＳＯＤの活性化酸素フリーラジカル消去作
用を示す活性化酸素阻害活性値（反応速度定数ｋ３）は
３．４７×１０−８Ｍ−１ｓｅｃ−１である。
【００１４】試験例２ （抗酸化作用の測定）抗酸化作用の測定として、反応液
はリノール酸５１．１ｍｇ、エタノール４．０５２ｍ
ｌ、０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）４．０ｍｌ
脱イオン水１．９４８ｍｌの混合液に、抗酸化作用を有
するペプチド１−３ｍｇ添加し、全量が１０ｍｌとなる
ように調製した。この溶液をネジ付き試験管で密封し５
０℃の恒温器中に放置し、２４時間毎にリノール酸の過
酸化物価をロダン鉄法で測定した。即ち反応液０．１ｍ
ｌ、７５％エタノール液９．７ｍｌ、３０％ロダンアン
モニウム液０．１ｍｌ、０．０２Ｍ塩化第二鉄を含む
３．５％塩酸溶液０．１ｍｌを添加し、３分間反応させ
た後、吸光度５００ｎｍを測定した。その際、５００ｎ
ｍの吸光値が０．３５に達するまでの日数を誘導日数
（日）とした。本発明に係る小麦グルテン由来のペプチ
ド画分の、抗酸化作用を示す活性化酸素阻害活性値（誘
導日数）を図５に示す。本発明に係る新規なノナペプチ
ドの抗酸化作用を示す活性化酸素阻害活性値（誘導日
数）は、トコフェロール２ｍｇの６．５日に対して、ノ
ナペプチド１ｍｇの１６日である。以上の試験の結果、
本発明に係る新規なノナペプチドは活性化酸素フリーラ
ジカル消去作用並びに抗酸化作用を有することから、ｉ
ｎ ｖｉｔｒｏ（試験管内）試験において有意な活性化
酸素阻害作用を示すことが確認された。従って、本発明
に係るノナペプチドは活性化酸素阻害剤の対象となる虚
血性心疾患者、慢性関節リュウマチ及び重症火傷患者の
治療又は予防薬として有用である。尚、本発明に係るノ
ナペプチドは、構造的にそのアミノ酸配列で表わされる
ペプチドにおいて、構造中に採用することもできる。
はリノール酸５１．１ｍｇ、エタノール４．０５２ｍ
ｌ、０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）４．０ｍｌ
脱イオン水１．９４８ｍｌの混合液に、抗酸化作用を有
するペプチド１−３ｍｇ添加し、全量が１０ｍｌとなる
ように調製した。この溶液をネジ付き試験管で密封し５
０℃の恒温器中に放置し、２４時間毎にリノール酸の過
酸化物価をロダン鉄法で測定した。即ち反応液０．１ｍ
ｌ、７５％エタノール液９．７ｍｌ、３０％ロダンアン
モニウム液０．１ｍｌ、０．０２Ｍ塩化第二鉄を含む
３．５％塩酸溶液０．１ｍｌを添加し、３分間反応させ
た後、吸光度５００ｎｍを測定した。その際、５００ｎ
ｍの吸光値が０．３５に達するまでの日数を誘導日数
（日）とした。本発明に係る小麦グルテン由来のペプチ
ド画分の、抗酸化作用を示す活性化酸素阻害活性値（誘
導日数）を図５に示す。本発明に係る新規なノナペプチ
ドの抗酸化作用を示す活性化酸素阻害活性値（誘導日
数）は、トコフェロール２ｍｇの６．５日に対して、ノ
ナペプチド１ｍｇの１６日である。以上の試験の結果、
本発明に係る新規なノナペプチドは活性化酸素フリーラ
ジカル消去作用並びに抗酸化作用を有することから、ｉ
ｎ ｖｉｔｒｏ（試験管内）試験において有意な活性化
酸素阻害作用を示すことが確認された。従って、本発明
に係るノナペプチドは活性化酸素阻害剤の対象となる虚
血性心疾患者、慢性関節リュウマチ及び重症火傷患者の
治療又は予防薬として有用である。尚、本発明に係るノ
ナペプチドは、構造的にそのアミノ酸配列で表わされる
ペプチドにおいて、構造中に採用することもできる。
【００１５】
【図１】本発明に係る小麦グルテンのペプシン分解液
の、製造例１におけるＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２５カラ
ムクロマトグラフィーによる活性化酸素阻害ペプチドの
分離精製の結果を示す図である。尚、図中マーカーとし
て分子量６千のインシュリン、分子量３，５００のイン
シュリンＢ鎖、分子量２，５５０のインシュリンＡ鎖、
分子量１，４５０のバシトラシン及び分子量７５のグリ
シンを用いた。
の、製造例１におけるＳｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−２５カラ
ムクロマトグラフィーによる活性化酸素阻害ペプチドの
分離精製の結果を示す図である。尚、図中マーカーとし
て分子量６千のインシュリン、分子量３，５００のイン
シュリンＢ鎖、分子量２，５５０のインシュリンＡ鎖、
分子量１，４５０のバシトラシン及び分子量７５のグリ
シンを用いた。
【図２】本発明に係る小麦グルテンペプチドの、製造例
１におけるＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５（Ｈ＋）
カラムクロマトグラフィーによる活性化酸素阻害ペプチ
ドの分離精製の結果を示す図である。
１におけるＳＰ−Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ−２５（Ｈ＋）
カラムクロマトグラフィーによる活性化酸素阻害ペプチ
ドの分離精製の結果を示す図である。
【図３】本発明に係る小麦グルテンペプチドの製造例１
における逆相ＨＰＬＣによる活性化酸素阻害ノナペプチ
ドのフラグメントの分離精製の結果を示す図である。
における逆相ＨＰＬＣによる活性化酸素阻害ノナペプチ
ドのフラグメントの分離精製の結果を示す図である。
【図４】本発明に係るノナペプチドの、製造例２で得ら
れた合成ノナペプチドのマススペクトルを示す図であ
る。
れた合成ノナペプチドのマススペクトルを示す図であ
る。
【図５】本発明に係る小麦グルテンペプチドの、製造例
１におけるＳＰ画分（１，２，３ｍｇ）の誘導日数
（日）を示し、抗酸化作用を表わすと同時に活性化酸素
阻害作用を示す図である。
１におけるＳＰ画分（１，２，３ｍｇ）の誘導日数
（日）を示し、抗酸化作用を表わすと同時に活性化酸素
阻害作用を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＥＤ Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＢＸ ＡＧＡ ＡＥＤ Ｃ０７Ｋ 14/415 ＡＧＡ
Claims (2)
- 【請求項１】 次式；Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸配列で表わされる新規なノナ
ペプチド。 - 【請求項２】 次式：Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ で示されるＬ体のアミノ酸配列で表わされる新規なノナ
ペプチドを有効成分として含有することを特徴とする活
性化酸素阻害剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9225478A JP2903465B2 (ja) | 1997-07-16 | 1997-07-16 | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9225478A JP2903465B2 (ja) | 1997-07-16 | 1997-07-16 | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1135599A JPH1135599A (ja) | 1999-02-09 |
| JP2903465B2 true JP2903465B2 (ja) | 1999-06-07 |
Family
ID=16829958
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9225478A Expired - Lifetime JP2903465B2 (ja) | 1997-07-16 | 1997-07-16 | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2903465B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1488796B1 (en) * | 2002-03-26 | 2011-01-05 | Tsutomu Kagiya | Chromanol glucosides for ameliorating cancer chemotherapy |
-
1997
- 1997-07-16 JP JP9225478A patent/JP2903465B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH1135599A (ja) | 1999-02-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2860637B2 (ja) | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2835504B2 (ja) | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2920827B1 (ja) | 新規なペンタペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2903465B2 (ja) | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP3101875B2 (ja) | 新規なトリペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2678181B2 (ja) | 新規なヘクサペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2007161696A (ja) | 新規なヘプタペプチド及びプロリルエンドペプチダーゼ阻害剤 | |
| JP2903464B2 (ja) | 新規なペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2006199671A (ja) | 新規なヘクサペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP2863898B2 (ja) | 新規なペプチドおよび免疫賦活剤 | |
| JP2005080655A (ja) | 新規なイソフラボン含有組成物及び活性化酸素阻害剤 | |
| JP3893579B2 (ja) | 新規なテトラペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2003267994A (ja) | 新規なペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2873434B2 (ja) | 新規なペプチドおよび免疫賦活剤 | |
| JP3811922B2 (ja) | 新規なヘクサペプチド、ヘプタペプチドおよび免疫賦活剤 | |
| JP3972104B2 (ja) | 新規なヘクサペプチド及びアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2990354B1 (ja) | 新規なペンタペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP3885214B2 (ja) | 新規なヘクサペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2678180B2 (ja) | 新規なテトラペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素 阻害剤 | |
| JP3108920B1 (ja) | 新規なテトラペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2001106699A (ja) | 新規なヘクサペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JPH08225593A (ja) | 新規なテトラペプチド、ペンタペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2003306498A (ja) | 新規なヘプタペプチド、オクタペプチドおよび活性化酸素阻害剤 | |
| JP3709425B2 (ja) | 新規なトリペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 | |
| JP2003267995A (ja) | 新規なヘプタペプチドおよびアンジオテンシン変換酵素阻害剤 |