JPH08176002A

JPH08176002A - 細胞接着抑制剤

Info

Publication number: JPH08176002A
Application number: JP6325334A
Authority: JP
Inventors: Takatoshi Murase; 孝利村瀬; Tadashi Hase; 正長谷; Yusuke Shibuya; 祐輔渋谷; Yoshinori Nishizawa; 義則西澤; Ichirou Tokimitsu; 一郎時光
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1994-12-27
Filing date: 1994-12-27
Publication date: 1996-07-09

Abstract

(57)【要約】【構成】ハコベ草、仙鶴草、甘茶、茵チン蒿、甘遂、
カッコウ、連銭草、カミツレ、千金子、浮き草、薄荷及
び延命草から選ばれる１種もしくは２種以上の植物又は
その抽出物を有効成分とする細胞接着抑制剤、癌転移抑
制剤、抗アレルギー剤又は免疫抑制剤を提供するもので
ある。【効果】細胞毒性が低く、細胞接着抑制作用、抗アレ
ルギー作用、癌転移抑制作用、免疫抑制作用に優れる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、植物又はその抽出物を
有効成分とする細胞接着抑制剤、癌転移抑制剤、抗アレ
ルギー剤及び免疫抑制剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来、抗炎症剤としては、ステロイド
剤、アラキドン酸代謝物や、ヒスタミン等に代表される
化学伝達物質の産生・放出抑制剤、レセプター拮抗剤な
どが広く用いられている。また、免疫抑制剤としてはア
ザチオプリン、ミゾリビン等の代謝拮抗剤、プレドニゾ
ロン等のステロイド剤、各種抗体、サイクロスポリン、
ＦＫ５０６等が用いられている。そして、癌転移抑制剤
として有効な物質は未だ見出されていない。

【０００３】一方、近年各種の炎症、免疫反応、癌転移
についての分子レベルでの研究が進展し、これらの疾患
には共通して白血球と血管内皮細胞、癌細胞と血管内皮
細胞などの細胞間接着が大きく関与していることが明ら
かとなり、接着に携わる細胞接着分子そのものの発現抑
制や接着分子のマスキングなどによる細胞間の接着抑制
が、上記疾患の治療に有効であることが明らかになりつ
つある〔「接着分子の発現調節と臨床応用」（メジカル
ビュー社、１９９１年）、Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．３６
４，１４９−１５５（１９９３）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖ
ｏｌ．２４７，４５６−４５９（１９９０）、Ａｎｎｕ
ａｌＲｅｖｉｅｗ免疫１９８９，１７５−１８５、Ｔ
ｒｅｎｄｓｉｎＧｌｙｃｏｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ
Ｇｌｙｃｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４，Ｎ
ｏ．１９，４０５−４１４（１９９２）、実験医学Ｖ
ｏｌ．１０，Ｎｏ．１１，１４０２−１４１３（１９９
２）、実験医学Ｖｏｌ．１１，Ｎｏ．１６，２１６８
−２１７５（１９９３）、Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２
５５，１１２５−１１２７（１９９２）等〕。そして、
細胞間の接着にはＩＣＡＭ−１，ＥＬＡＭ−１，ＶＣＡ
Ｍ−１等の細胞表面接着分子が関与していることが明ら
かになっている〔ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗ免疫１９
８９，１７５−１８５、感染・炎症・免疫Ｖｏｌ．１９
（２），１２９−１５３（１９８９）、感染・炎症・免
疫Ｖｏｌ．２４（３），１５８−１６５（１９９
４）〕。

【０００４】これらの細胞接着を抑制する物質としては
細胞表面接着分子に対する抗体やリガンド、Ｎ−（フル
オレニル−９−メトキシカルボニル）アミノ酢酸、３−
デアザアデノシン等が知られているが〔Ｐｒｏｃ．Ｎａ
ｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，Ｖｏｌ．８８，３５
５−３５９（１９９１）、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃ
ｏｌｏｇｙ，２３，１３９−１４９（１９９２）、Ｊ．
ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２
６７（１３），９３７６−９３８２（１９９２）、Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１４４（２），６５３
−６６１（１９９０）〕、その効力は未だ満足できるも
のではなかった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、この細胞接着を有効に抑制する薬物、更に抗アレル
ギー剤、免疫抑制剤及び癌転移抑制剤を提供することに
ある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】斯かる実情に鑑み本発明
者は、種々の植物抽出物等について細胞接着抑制作用を
検討し、癌モデルを用いた試験を数多く行った結果、下
記に示す植物が、意外にも優れた細胞接着抑制作用を有
し、抗アレルギー剤、免疫抑制剤、癌転移抑制剤として
有用であることを見出し本発明を完成した。

【０００７】すなわち本発明は、ハコベ草、仙鶴草、甘
茶、茵チン蒿、甘遂、カッコウ、連銭草、カミツレ、千
金子、浮き草、薄荷及び延命草から選ばれる１種もしく
は２種以上の植物又はその抽出物を有効成分とする細胞
接着抑制剤、癌転移抑制剤、抗アレルギー剤及び免疫抑
制剤を提供するものである。

【０００８】本発明で用いる植物は、ハコベ草（ラテン
名Stellaria neglecta）、仙鶴草（Aqrimonia pilso
a）、甘茶（Hydrangea macrophylla ）、茵チン蒿（Art
emigiacapillaris）、甘遂（Euphorbia kansui）、カッ
コウ（Agastache rugosa）、連銭草（Glechoma hederac
ea）、カミツレ（Matricaria chamomilla ）、千金子
（Euphorbia lathyris）、浮き草（Spirodela ployrhiz
a ）、薄荷（Mentha haplocalyx ）及び延命草（Isodom
japonicus）から選ばれるものである。本発明において
は斯かる植物の全草又は葉、葉柄、枝根等が利用でき、
これはそのまま又は乾燥して用いてもよいし、粉砕し、
更に抽出物を用いてもよい。

【０００９】抽出方法は、植物の一部又は全体の粉砕物
を通常３〜７０℃で水又は有機溶媒により抽出する方法
が挙げられる。ここで抽出に用いられる有機溶媒は、特
に限定されないが例えば、石油エーテル、シクロヘキサ
ン、トルエン、ベンゼン等の炭化水素類；四塩化炭素、
ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水
素；エーテル類；酢酸エチル等のエステル類；アセトン
等のケトン類；ブタノール、プロパノール、エタノー
ル、メタノール、ポリエチレングリコール、プロピレン
グリコール、ブチレングリコール等のアルコール類；ピ
リジン等が挙げられる。抽出溶媒は単独で用いても２種
以上を混合して用いてもよい。

【００１０】得られた抽出物は、そのまま用いてもよい
が、更に必要により濃縮、濾過、凍結乾燥等の処理をし
たものを用いてもよい。また抽出物や植物体は単独でも
２種以上を組み合せて用いてもよい。

【００１１】かくして得られる上記植物又はその抽出物
は、優れた白血球−血管内皮細胞間に代表される細胞接
着を抑制する作用を有する。更に優れた抗アレルギー作
用、免疫抑制作用及び癌転移抑制作用を有する。更にま
た、細胞毒性、皮膚刺激性等が弱く、安全性も高い。従
って、上記植物又はその抽出物を有効成分として含有す
る医薬は、細胞接着抑制に基づき、歯周病、リウマチ、
気管支喘息、花粉症、乾癬、虚血再灌流障害抑制、急性
呼吸窮迫症候群、移植臓器拒絶反応抑制、自己免疫疾患
等の治療及び癌転移予防に有用である。

【００１２】上記植物又はその抽出物の医薬への配合量
は、特に限定されないが、一般的に乾燥固形分に換算し
て０．０００１〜４０重量％、特に０．０１〜２０重量
％とすることが好ましい。また１日の投与量は２０mg／
kg〜５００mg／kg／日とすることが好ましい。投与は、
経口、経腸、外用等いずれの経路によってもよい。なお
これらの植物及びその抽出物の安全性は高いことが知ら
れている。

【００１３】本発明の医薬は上記必須成分の他、既存の
抗炎症剤や抗アレルギー剤、抗ヒスタミン剤等の薬物と
任意に組み合せて配合、投与することができる。

【００１４】剤形としては任意の形態をとることがで
き、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、ト
ローチ剤などの固形製剤、シロップ、乳液、軟ゼラチン
カプセル、クリーム、ゲル、ペースト、スプレー、注射
などの液状製剤が挙げられる。

【００１５】これら剤形にするための賦形剤、その他の
添加剤としては特に限定されず、例えば、固形状の物と
しては乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コー
ンスターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、
ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウム
などが挙げられ、液状のものとしてはグリセリン、落花
生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノー
ル、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、水な
どが挙げられる。

【００１６】本発明の医薬は常法により製造することが
できる。

【００１７】

【発明の効果】本発明の医薬は、植物由来のため細胞毒
性が低く、優れた細胞接着抑制作用、抗アレルギー作
用、癌転移抑制作用、免疫抑制作用を有する。従って本
発明の医薬は癌、喘息、アレルギー性鼻炎、痛風、乾
癬、じんましん、リウマチ、花粉症、歯周病、虚血再灌
流障害、急性呼吸窮迫症候群、自己免疫疾患、急性肺胞
障害等の予防、治療に広く用いることができる。

【００１８】

【実施例】次に、実施例を挙げ本発明を更に詳細に説明
するが、本発明はこれらに限定されるものではない。な
お、以下の実施例で用いた植物抽出物は、次の方法によ
り得た。乾燥ハコベ草１kgを、７０％エタノール５リッ
トルで、１週間室温で抽出し、７０％エタノール可溶成
分を得た。抽出液を分離した残渣について同様の操作を
繰り返し、合計１０リットルの抽出液を得た。この抽出
液の溶媒を留去し減圧乾固し抽出物８５ｇを得た。他の
植物についても同様の操作により抽出物を得た。

【００１９】実施例１下記表１〜３に示す如き植物抽出物を上記方法により得
た。これら植物抽出物を下記の試験に供した。（１）白血球−血管内皮細胞接着抑制試験：９６穴培養
プレート上にコンフルエントとなったヒト血管内皮細胞
に対し、最終濃度〔乾燥固形分換算の重量％〕（以下同
じ）０．００１％となるように被験物質を添加する。１
８時間後にヒトＩＬ−１αを最終濃度２．５ng／mlとな
るように添加し、６時間培養する。培養液除去後、新し
い培養液で２回洗浄した後、予め⁵¹Ｃｒ標識したヒト末
梢白血球１０cells／mlを２００μl 添加し、培養す
る。３０分後、未接着細胞を除去し、接着細胞を溶解後
その放射活性を測定する。その結果を表１に示す。これ
からハコベ草、仙鶴草、甘茶、茵チン蒿、甘遂、カッコ
ウ、連銭草、カミツレ、千金子、浮き草、薄荷、延命草
は優れた細胞接着抑制活性を有することが判明した。

【００２０】

【表１】

【００２１】（２）癌細胞−血管内皮細胞接着抑制試
験：９６穴培養プレート上にコンフルエントとなったヒ
ト血管内皮細胞に対し、最終濃度０．００１、０．００
０１％となるように被験物質を添加する。１８時間後に
ヒトＩＬ−１αを最終濃度２．５ng／mlとなるように添
加し、６時間培養する。培養液除去後、新しい培養液で
２回洗浄した後、予め⁵¹Ｃｒ標識したヒト骨髄腫瘍細胞
（ＨＬ−６０）１０cells／mlを２００μl 添加し、培
養する。３０分後、未接着細胞を除去し、接着細胞を溶
解後その放射活性を測定する。その結果を表２に示す。
これよりハコベ草、仙鶴草、甘茶、茵チン蒿、甘遂、カ
ッコウ、連銭草、カミツレ、千金子、浮き草、薄荷、延
命草は癌細胞の転移に重要な、癌細胞と血管内皮細胞の
接着を強く抑制することが判明した。

【００２２】

【表２】

【００２３】（３）血管内皮細胞に対する毒性試験（細
胞形態，ＤＮＡ合成）：形態的変化に対しては倒立顕微
鏡による目視判定とし、ＤＮＡ合成は常法に従い³Ｈ−
チミジンの取り込みを指標に、被験物質添加後２４時間
培養の最終８時間における取り込み量を液体シンチレー
ションカウンターを用いて評価した。なお、被験物質濃
度は０．００１％とした。結果を表３に示す。その結
果、表３に示すように、本植物エキスはいずれも血管内
皮細胞に対し、低毒性であった。

【００２４】

【表３】

【００２５】実施例１連銭草抽出物（固形分）５００ｇ、ヒドロキシプロピル
セルロース８００ｇ、軽質無水ケイ酸２００ｇ、乳糖５
００ｇ、結晶セルロース５００ｇ及びタルク５００ｇを
常法により直径９mm、重量２００mgの錠剤とした。

【００２６】実施例２ハコベ草抽出物（固形分）１０００ｇ、結晶セルロース
１０００ｇ、乳糖１５００ｇ及び軽質無水ケイ酸２００
ｇを常法によりカプセル剤とした。

【００２７】実施例３カミツレ抽出物（固形分）２００ｇ、乳糖２００ｇ、ヒ
ドロキシプロピルセルロース３００ｇ及びタルク１５ｇ
を常法により顆粒剤とした。

【００２８】実施例４ハコベ草抽出物（固形分）１ｇ、コレステロール０．５
ｇ、コレステリルイソステアレート１ｇ、ポリエーテル
変性シリコーン１．５ｇ、環状シリコーン２０ｇ、メチ
ルフェニルポリシロキサン２ｇ、メチルポリシロキサン
２ｇ、硫酸マグネシウム０．５ｇ、５５％エタノール５
ｇ、カルボキシメチルキチン０．５ｇ及び精製水（残
量）を混合し、クリームとした。

【００２９】実施例５連銭草抽出物（固形分）３ｇ、コレステリルイソステア
レート３ｇ、流動パラフィン１０ｇ、グリセリルエーテ
ル１ｇ、グリセリン１０ｇ及び白色ワセリン（残量）を
混合し、軟膏とした。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者時光一郎栃木県宇都宮市竹林町89−28

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ハコベ草、仙鶴草、甘茶、茵チン蒿、甘
遂、カッコウ、連銭草、カミツレ、千金子、浮き草、薄
荷及び延命草から選ばれる１種もしくは２種以上の植物
又はその抽出物を有効成分とする細胞接着抑制剤。
【請求項２】請求項１記載の植物又はその抽出物を有
効成分とする癌転移抑制剤。
【請求項３】請求項１記載の植物又はその抽出物を有
効成分とする抗アレルギー剤。
【請求項４】請求項１記載の植物又はその抽出物を有
効成分とする免疫抑制剤。