JPH07508258A - モノシアロガングリオシドｇｍ↓１またはその誘導体を含有する，パーキンソン病の治療に適する医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 モノシアロガングリオシドＧ　Ｍ　＋またはその誘導体を含有する、パーキンソ ン病の治療に適する医薬組成物技術分野 本発明は、モノンアロガングリオシドＧＭ、またはその誘導体を含有する、パー キンソン病の治療に適する医薬組成物に関する。

先行技術 パーキンソン病は神経変性性の疾患で、高い発症率を有しく米国では１００．０ ００人につき２０人）、一般的には４５才以上の人間に発症する。

パーキンソン病はドーパミン作動性欠乏によって特徴づけられ、これは一連のニ ューロン異変をもたらし、その結果、運動不能症、筋肉の硬直、および振せんが 起こる。

総体的症状は、黒質および緻密層部におけるＤＡ（ドーパミン）産生ニューロン の変性により、線条体のドーパミン作動性神経支配の最低８５％が失われると発 現すると考えられている（Ｋｉｓｈ　Ｓ、Ｊ、ら、Ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａ ｎｄ　Ｊ、ｏｆ　Ｍｅｄ、、３１８．　８７６、　１９８８）。

パーキンソン病の薬理学的治療が２５年以上も研究されてきたが、この疾患が特 にドーパミン作動系の緩慢で進行性の変性ゆえにいまだに重大な問題であること は強調されるべきである（ＭｃＧｅｅｒ　Ｐ、Ｌ、ら、Ａｎｎ、Ｎｅｕｒｏｌ、 、２４．　５７４．　１９８８）。

公知のように、Ｌ−ドーパと末梢デカルボキシラーゼ阻害剤（カルビドパまたは ペンセラシト）やモノアミンオキシダーゼ阻害剤（５ｈｏｕｌｓｏｎ　Ｉ、ら、 “ＥｆｆｅＣｔ　ｏｆ　Ｄｅｐｒｅｎｙ［ｏｎ　ｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ 　ｏｆ　ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ　ｉｎ　ｅａｒｌｙ　Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ　 ｄｉｓｅａｓｅ″。

Ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊ、　ｏｆ　Ｍｅｄ、、　１６．１３６４− １３７１．１９８９）の併用に基づく治療、並びに長期作用性直接ドーパミン作 動性アゴニスト（ペルゴリド、カベルゴリン）に基づく治療は、初期症例の大多 数において臨床状態を相当改善し、またい（つかの症例においては症状の完全な 制御をもたらしている。

しかし、治療後数年たつと（すなわち最低２〜３年から一般には最大１０年また はそれ以上）、臨床的には主として種々の振せんおよび運動障害により特徴づけ られる諸症状がほとんどの患者（８０〜９０％）にまた現われる。

この動的振せん［特にオンオフ（ｏｎ−ｏｆｆ）現象コおよび過剰な筋活動は、 治療によって病気がおさまり数年間安寧に過ごした後に悪化状態に逆戻りする患 者をひどく狼狽させ、彼／彼女が十分な家族生活、社会生活および職業生活を享 受するのを妨げる。

パーキンソン病の治療が直面する主な問題、すなわち病勢悪化期、を解決するた めに、現在臨床的実践ではレボドーパとペンセラシトまたはカルビドーパの併用 に基づく徐放性組成物、長期作用性直接ドーパミン作動性アゴニスト（ペルゴリ ド、カベルゴリン）および注射法（リスリドおよびアポモルフインの皮下注射） を採用している。しかし、現在にいたるまでいかなる治療も、この病気の進行期 に起こるすべての合併症の根本にある異変の進行を遅くする、または止めるのに 有効であるとは実証されていない。

公知のように、Ｌ−ドーパとそのヒドロキシル化された代謝物（Ｔ　ＯＰ　Ａ） は神経毒性作用を生じ、患者の能力を損なう神経変性性病状の進行を悪化させる 可能性がある（Ｏｎｌｙ　Ｊ、Ｗ、ら、“Ｅｘｃｉｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ 　Ｌ−ｄｏｐａ　ａｎｄ　６−０Ｈ−ｄｏｐａ：　ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　 ｆｏｒＰａｒｋｉｎｓｏｎ’　ｓ　ａｎｄ　Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’　ｓ　ｄｉ ｓｅａｓｅｓ″、　Ｅｚｐ、　Ｎｅｕｒｏｌ、、　１０８゜２６８−２７２．　 １９９０；　Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ　Ｐ、Ａ、ら、　２．４．５−Ｔｒｉｈｙｄｒ ｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ　ｉｎ　５ｏｌｕｔｉｏｎ　ｆｏｒｍｓ　ａ 　ｎｏｎ−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅｇｌｕｔａｍａｔｅｒｇ ｉｃ　ａｇｏｎｉｓｔ　ａｎｄ　ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｎ”、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａ ｔｌ、　Ａｃａｄ。

Ｓｃｉ、ＵＳＡ、８８．　４８６５−４８６９．　１９９１；　Ｎｅｗｃｏｍｅ ｒ　Ｔ、Ａ、ら、　“Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＯＰＡ　（６−ＯＨ−ＤＯ ＰＡ）　ａｎｄ　ＴＯＰＡ　ｑｕｉｎｏｎｅ　ｂｙ　ＨＰＬＣｒｅｖｅａｌｓ　 ａ　５ｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ＤＯＰＡ　ｔｏ　ＴＯＰＡ　ｃｏｎｖｅｒｓｉｏ ｎ　ｉｎ　ａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎｓ”、ｌ！ｘｃｉｔａｔｏｒｙ　Ａ ｍ１ｎｏ　Ａｃ１ｄｓ：　Ｅｘｅｉｔｏ−ｔｏｘｉｃｉｔｙ　Ｉｐ、　８３）。

パーキンソン病の進行を遅くするまたは抑制することによりこの病気の進展を緩 和することが可能な新しい薬理学的治療法を開発するために、動物を用いた実験 的研究がいくつかなされた。それらは特にパーキンソン病において細胞の死、と りわけ点質細胞の死、を引き起こす神経生物学的メカニズムの同定を目的とする ものであった。

パーキンソン病の症状と酷似した神経病理学的および神経薬理学的症状を作り出 すことができる毒性物質であるメチルフェニルテトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ ）を用いて得た情報は非常に重要なものである（Ｌａｎｇｓｔｏｎ　Ｊ、Ｗ、、 　”ＭＰＴＰ　ａｎｄ　Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’５ｄｉｓｅａｓｅ″、　Ｔｒｅｎ ｄｓ　ｉｎ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、　８．２．７９−８３．１９８５） 。

ＭＰＴＰＯ神経毒性は、モノアミンオキシダーゼＢの触媒作用により、酸化して ＭＰＰ＋イオンになることに起因するとされていた。ＭＰＰ＋はドーパミン作動 性細胞末端によって積極的に取り込まれ、ＮＡＤＨ依存性基質のミトコンドリア での酸化に対して抑制作用を及ぼす。これは、点質および緻密層部のドーパミン 作動性ニューロンの喪失、および線条体を神経支配するドーパミン作動性線維の 喪失に帰着し、その結果生化学的および行動的欠陥をもたらす。

ガングリオシド類、すなわちニューロン膜に存在する複合シアログリコスフィン ゴ脂質（Ａｎｄｏ　Ｓ、、　”Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅｎｅｒ ｖｏｕｓ　ｓｙｓｔｅｍ″、　Ｎｅｕｒｏｃｈ、Ｉｎ５ｔ、、　５．５０７−５ ３７．１９８３）が、いくつかの急性疾患障害実験モデルの中枢神経系において 神経病的経過を改善することも知られている。この結果に基づき、ＧＭ、は臨床 に適用され、大脳虚血発作の治療（Ｕ、　Ｓ、　４．９４０．６９４　ｄａｔｅ ｄｌｏｔｈ　Ｊｕｌｙ、１９９０；　Ａｒｇｅｎｔｉｎｏ　Ｃ，ら、”ＧＭＩ　 ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎ　ａｃｕｔｅ　ｉｓｃｈｅｍｉｃ 　５ｔｒｏｋｅ″、　５ｔｒｏｋｅ、　２０．１１４３−１１４９゜１９８９） および外傷性を髄損傷の治療（１９９１年１２月２３日付特許出願ＰＤ　９１０ ００２３４　：　Ｇｅ１ｓｌｅｒ　Ｆ、Ｈ，、Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｍｏｒ ｔａｒｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　５ｐｉｎａｌ−ｃｏｒｄ　１ｎｊｕｒｙ 　−ａ　ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ　ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　ｔｒ ｉａｌ　ｗｉｔｈ　ＧＭＩ　ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ″、　Ｔｈｅ　Ｎｅｗ　Ｅ ｎｇｌａｎｄ　Ｊ。

ｏｒ　Ｍｅｄ、、　３２４．　１８２９−１８３８．　１９９１）がなされた。

ＧＭ、の内部エステル誘導体（ＡＧＦ２）と、低用量で迅速に作用するその治療 効果、特に急性虚血モデルに対する治療効果もまた公知である（　Ｃａｈｎ　Ｒ ，ら、”Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆｍｏｎｏｓｉａｌｏｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ 　１ｎｎｅｒ　ｅｓｔｅｒ　ｏｎ　ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ　ｒｅｃｏｖｅｒｙａ ｆｔｅｒ　ｇｌｏｂａｌ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｉｎ　ｍｏｎ ｋｅｙｓ”、　５ｔｒｏｋｅ　２０゜６５２−６５６．１９８９）。

さらに、ＧＭ、エステル誘導体がその前駆体であるＧＭ、より薬物速度論的に有 利であることはすでに記述されている（Ｂｅｌｌａｔｏ　Ｐ、ら、　Ｄｉｓｐｏ ｓｔｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ｔｒｉｔｉｕｍ　ｌａｂｅｌｌｅｄ ＧＭＩ　１ａｃｔｏｎｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔ″、　Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、、 　ｐｐ、１−６．１９９１；　ＥＰｐａｔｅｎｔ　８５４０１２９１．１）。

要旨 驚くべきことに、モノシアロガングリオシド（ＧＭ、　）、その内部エステル誘 導体（ＡＧＦ２）、およびそのメチルエステル（ＡＧＦ４）よりなる群より選ば れた化合物は、慢性パーキンソン病の治療に効果的に使用し得ることが判明した 。

さらに、上記の化合物は、ＴＯＰＡ等のＬ−ドーパ代謝物の神経毒性に対し中和 作用を及ぼすので、Ｌ−ドーパおよび／またはＢＤＮＦ　（悩由来神経栄養因子 ）との併用治療において有効に活用し得る。

よって、本発明はパーキンソン病の治療に有効な医薬組成物の製造における上記 化合物の使用、および当該治療方法に関するもモノシアロガングリオンドＧＭ、 　、その内部エステル誘導体へ〇Ｆ２、およびそのメチルエステルＡＧＦ４を用 いたパーキンソン病の治療の特徴および有利な点を、以下にサルを使ったテスト および試験管テストに言及しながらより詳細に説明する。

上記の実験的テストは、本発明の化合物をパーキンソン病の治療に有効に使用し 得ることを示した。

また、上記化合物およびＮ−ジクロロアセチルリソＧＭ、（ＬＩＧＡ２０）は、 パーキンソン病の治療に使用される他の医薬品、たとえばＬ−ドーパやＢＤＮＦ 　（脳由来神経栄養因子）などと有利に併用し得ることが判明した。

これから報告する実験は、特に以下のことを示したニー　ＭＰＴＰ　（１−メチ ル−４−フェニル−１２，３，６−チトラヒドロピリジン）投与により誘発され た深刻な／＜−キンラン病の全症状を示すサルを、ＧＭＩ　、その誘導体ＡＧＦ ２およびＡＧＦ４で治療すると、パーキンソン病に特徴的な運動障害諸症状から 有意に回復しく運動不能症および筋肉硬直のほぼ完全な治癒）、また同時に認識 欠陥からも回復した。

−ＧＭ、、その誘導体ＡＧＦ２、ＡＧＦ４およびＬＩＧＡ２０は、ドーパミン作 動性中脳ニューロンおよび小脳ニューロンの培養物において、ＴＯＰＡ　（Ｌ− ドーパ酸化物）によって誘発される神経毒性を防止した。

ＧＭ、を用いた生体実験を、リスザル１５匹（雄または雌）およびマカクザル４ 匹を使って実施した。

サルの筋肉内に塩酸ケタミン５ｍｇ／ｋｇを注射して麻酔した後、ＭＰＴＰ生理 食塩水溶液を以下のように投与したニー　０．３５ｍｇ／ｋｇ／用量、静脈注射 （マカクザル）−ｚｍｇ／ｋｇ／用量、筋肉注射（リスザル）パーキンソン病運 動障害の全症状、すなわち運動不能症、刺激への反応欠如、および登ること・自 律的に食べること・毛づくろいができない、が完全に出現するまでＭＰＴＰを３ 日ごとに投与した。最後のＭＰＴＰ投与から４８〜６０時間のうちに最低３０ポ イント（図１の説明中に定義されている）が獲得されなければならなかった。次 に、２種類のサルを無作為に２つの治療グループ、すなわちＧＭ、による治療グ ループと生理食塩水による治療グループに分けた。

ＭＰＴＰの投与回数と最初の全症状評価は、両グループについて同一であった。

ＧＭ、を長期にわたって以下の投与量で筋肉内に投与したニー　マカクザルには １５ｍｇ／ｋｇ／日−リスザルには３０ｍｇ／ｋｇ／日。

対照グループには生理食塩水水を投与した。

実験第１週には、サルは集中的食物療法も受けた。

サルの神経学的および行動的機能の記録は調査開始の１〜２週間前からスタート し、調査の全期間を通して継続した。

特に以下の機能を記録した：全般的活動、登る能力、移行７歩きぶり、上下肢の 動き、細かい運動能力、運動緩徐／運動不能症、運動異状症（ジスキネジー）／ 失調症（シストニー）、姿勢、振せん、バランス、毛づくろい能力、運動中の突 然のすくみ、及び食べる能力。

マカクザルの試験では、顔の表情変化および防御反応も調べた。

リスザルの試験は単純な運動機能（例えば深い容器の中にいれた食物をつかむ） に関するもので、反応時間の測定と手足の機能的使用の評価を目的としたもので あった。具体的には、サルは直径９．５ｍｍの窪みをもつプレキシガラス製プラ ットフォームからレーズンをつかみ取る訓練を受けた。つかみ取り開始までに要 した時間と６分の制限時間内につかんだレーズンの数を記録した。

上記の試験はすべて１日の最初の食事の前に実施した。

マカクザルの行動的および神経学的機能の試験も行なった。マカクザルにもまた 物体をつかむ訓練をしたが、これはＭＰＴＰを投与されたサルの運動および認識 機能の指標となることが実証されたものである（Ｔａｙｌｏｒ　Ｊ、Ｒ，ら、　 Ｂｒａｉｎ、　１１３．６１７．１９９０）。

つかみ取り試験はＤｉａｍｏｎｄ　Ａ、、　”Ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ 　ａｎｄ　ｎｅｕｒａｌｂａｓｅｓ　ｏｆ　ｈｉｇｈｅｒ　ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ 　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ″、　Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＮｅｗＹｏｒｋ　Ａ ｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　５ｃｉｅｎｃｅｓ、　ｖｏｌ、６０８．　Ａ、Ｄｉａｍｏ ｎｄ　Ｅｄ、　（Ｔｈｅ　ＮｅｗＹｏｒｋ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　５ｃｉｅｎ ｃｅｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ、　６３７−６７６、１９９０）にしたがって実施 した。

要約すると、サルは檻の外に腕を伸ばして、左右に動きまた回転するプラットフ ォームに固定された、片側が開いているプレキシガラス製の箱（１５ｃｍｘ　１ ５　ｃｍｘ　５　ａｍ）から食物（レーズンまたはリンゴ）をつかみ取るよう訓 練された。

箱の開いた側はサルの正面にくることも左側か右側にくることもあった。各実験 は３０回のテストからなった。次の事柄が記録された：成功した腕伸ばしく最初 の試みで食物をつかんだ）、正しい腕伸ばしくいろいろ試みてから食物をつかん だ）、および「障害」への腕伸ばしくすなわち、開いている側に届くまで箱の回 りに腕を伸すのではなく、閉まっている側に伸ばす）。５分以内に全く食物がつ かめない場合は、そのテストは「反応なし」と判定された。

ドーパミン（Ｄ　Ａ）とその代謝物、例えばホモバニリン酸（ＨＶＡ）や３，４ −ジヒドロフェニル酢酸（ＤＯＰＡＣ）などを測定するため、死後、線条体組織 の神経化学的検査を行なった。ＤＡとその代謝物の線条体におけるレベルは、電 気化学的検出器を用いた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により定量し た（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ　Ｊ、Ｓ、、　Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、、　２４．５３４ ．１９９０）。

さらに、ＭＰＴＰを投与したリスザル（６匹）に、ＡＧＦ２とＡＧＦ４を２０ｍ ｇ／Ｉｇ／日の用量で６週間筋肉的投与した後の運動行動を評価する目的で、予 備テストを実施した（実験条件および運動指数評価は上述のものと同じ）。

行動および神経学的テストの結果、ならびに神経免疫組織化学的検査の結果を以 下に報告する。

行動的・神経学的テストは次のことを示したニー　ＭＰＴＰ投与は深刻なパーキ ンソン病の全症状を引き起こす：運動行動の変化（図１参照）および顕著な認識 欠陥（図２参照）。

−６〜８週間の調査の終了時には、ＧＭ、の長期間投与はパーキンソン病の全症 状を、はとんど完全に（８６〜８９％）回復した運動行動にまで戻すことができ る。ＧＭ、の効果は３〜４週間治療した時点ですでに明らかである（図１参照） 。同様の結果が、リスザルを用いた予備テストでも、ＡＦＧ２とＡＦＧ４の投与 の後に得られた［第６週における運動行動平均ポイント：生理食塩水＝４０（２ 匹）；ＡＧＦ２＝７　（２匹）；ＡＧＦ４＝９　（２匹）］。

Ｇ　Ｍ　＋は、運動認識欠陥の回復にも効果がある（「物体つかみ取り」テスト により決定される一図２参照）。

ここで図１および図２を詳細に検討する。図ＩはＭＰＴＰおよびＧＭ、が運動行 動に及ぼした影響を示す。リスザルの行動／運動ポイント（Ａ）およびマカクザ ルのそれ（Ｂ）は縦軸に示しである。棒は平均ポイント［士標準偏差（Ｓ、　Ｄ 、　）　］を表わす；正常ポイントは０で、ＭＰＴＰポイントは最後のＭＰＴＰ 注射の後であってＧＭ、と生理食塩水の投与が始まる前に記録されたポイントで ある。治療開始後３〜４週間以内にＧＭ、で治療したサルは、生理食塩水で治療 したサルに比較すると、改善された運動機能を示すようになった。調査終了時に は、ＧＭ、で治療したサルはほぼ正常な行動を示したが、生理食塩水で治療した サルは深刻なパーキンソン病全症状を示した［＊ｐ＜０．０１　（Ａ）；＊ｐｒ ０．０５　（Ｂ）、７ンーウイツト二−（Ｍａｎｎ　−Ｗｈ　ｉ　ｔｎｅｙ）　 テストコ　。

図１／Ｃは、リスザルの食物つかみ取りテストにおける反応開始時間を示す。正 常なサルは食物容器を見るとすぐ反応を開始した。ＭＰＴＰ投与後の初期状態で は、すべてのサルが反応開始に遅れを示した。しかし、治療後３週間以内に、Ｇ Ｍ、で治療したサルは、生理食塩水で治療したサルよりも先に反応を開始するよ うになった（＊ｐ＜０．０　Ｏ５）。調査終了時には、前者はほどんどすぐに反 応を開始したが、後者はまだ運動不能症的で運動緩徐的てあった（＊ｐ＜０．０ ０２）。

図１／Ｄは、テスト中につかみ取られた食物の百分率を示す。

正常なリスザルは、１００％の食物をつかみ取ることに成功した。

ＭＰＴＰ投与の直後には、すべてのサルが危機にさらされ、約１５％の食物しか つかみ取れなかった。治療開始３週間目にＧＭ。

で治療したサルは、生理食塩水で治療したサルに比較すると、より大量の食物を つかみ取るようになった。調査終了時には、前者は１００％の食物をつかみ取っ たが、後者は２５％の食物をつかみ取るだけであった（＊ｐ＜０．０５）。

図２は、ＭＰＴＰおよびＧＭ、が「物体つかみ取り」テストにおいてマカクザル に及ぼした影響を示す。

図２／Ａは、正しい反応（物体が結果的にサルによってつかみ取られる）の百分 率を、図２／Ｂは成功した試み（最初の試みで食物がつかみ取られる）の百分率 を示す。若干の訓練の後、正常なサルはこの課題をほぼ完全にこなせるようにな った。何ら深刻な運動障害を引き起こさない低用量ＭＰＴＰの実験的な長期間投 与においては、サルがこの課題をこなすのは非常に困難であった。

対照的に、ＧＭ、で治療したパーキンソン病のサルは調査終了時に上記の課題を ほぼ完全にこなすことができた。他方、生理食塩水で治療したパーキンソン病の サルは、主として深刻な運動障害が原因で、これをこなすことが非常に困難であ った。

図２／Ｃは、反応阻害の徴候である「障害」への試み（箱のしまっている側に腕 を伸ばす）を示す。治療の初期段階では、ＧＭｌで治療したサルも（彼らが実際 に反応を示したテストの中で）この種の試みを数回行なった。

神経免疫組織化学的検査は以下のことを示したニー　ＭＰＴＰ投与は、検査した 種々の線条体サブ領域におけるドーパミンおよびその代謝物のレベルを著しく低 下させる（表１参照）。

−ＧＭ、を使用した長期治療は、ドーパミンおよびその代謝物（ＨＶＡおよびＤ ＯＰＡＣ）のレベルを有意に上昇させ（表１参照）、この上昇は神経脱落のより 少ない領域、例えば腹側正中領域においてより高い。

以下に記述するように、ニューロン培養物に及ぼすＴＯＰＡの神経毒性作用に対 するＧＭＩ　、ＡＧＦ２、ＡＧＦ４およびＬＩＧＡ２０の保護作用に関する研究 を行なった。

公知のように、ドーパミンの天然に存在する前駆体であるＬ−ドーパに基づく治 療は、パーキンソン病の全症状に幾分効果的な作用をもたらしはするが、長期的 には副作用を生じる。実際、Ｌ−ドーパおよびその代謝物、例えば６−ヒトロキ シードーパ（ＴＯＰＡ）もまたニューロンに対して毒性となりうるちので、その ため患者の能力を損なう神経変性性の病状進行を悪化させる。

本出願人が実施したテストは、ガングリオシド類が、Ｌ−ドーパのヒドロキシル 化した代謝物によって引き起こされる神経毒性の予防および／または抑制に効果 的であることを明らかにした。

それゆえ、この結果は該化合物をパーキンソン病の治療に適用することによって もたらされる非常に有利な点を示すものである。

したがって患者は、パーキンソン病、特にＬ−ドーパ等のドーパミン作動性医薬 品で治療された患者に見られる神経の変性を予防および／または抑制するという 利点を提供する、ガングリオシドとＬ−ドーパの組み合わせによる治療を受ける ことができる。

テストは、２種類のニューロン培養物、すなわち中脳ドーパミン作動性ニューロ ンと小脳ニューロンについて実施した。

中脳ニューロン培養物はＤａｌ　Ｔｏｓｏらにしたがって（Ｄａｌ　Ｔｏｓｏら 。

Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　５ｕｒｖｉｖａｌ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｎｓ　 ｉｎ　ｄｉｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｆｅｔａｌｍｅｓｓｅｎｃｅｐｈａｌｉｃ　ｓ ｅｒｕｍ−ｆｒｅｅ　ｃｅｌｌ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ：　１．　Ｅｆｆｅｃｔｓ　 ｏｆｃｅｌｌ　ｄｅｎｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｏｆ　ａｎ　ａｄｕｌｔ　ｍａｍｍａ ｌｉａｎ　５ｔｒｉａｔａｌ−ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｎｏｔｒｏｐｈｉｃ　 ｆａｃｔｏｒ　（ＳＤＮＦ）”、　Ｊ、　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、、　８　（３）　 ７３３−７４５゜１９８８）、日齢１４．５〜１５日のラットの胎児の中脳被蓋 より調製した。

ニューロン（０，７５ｘｌＯ’）をポリーＬ−オルニチン基質上に１２穴（それ ぞれ直径２５ｍｍ）の群としてプレートした。

培養物は、培地を変えずに、第４日から６日のあいだに使用した。

顆粒細胞培養物は５ｋａｐｅｒら（Ｓｋａｐｅｒ　Ｓ、Ｄ、ら、“Ｃｕ１ｔｕｒ ｅ　ａｎｄｕｓｅ　ｏｆ　ｐｒｉｍａｒｙ　ａｎｄ　ｃｌｏｎａｌ　ｎｅｕｒａ ｌ　ｃｅｌｌｓ”、Ｍｅｔｈｏｄｓ　１ｎＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｂｄ、 ｂｙ　Ｐ、Ｍ、Ｃｏｎｎ、Ｖａｌ、２．　ｐｐ、１７−３３゜Ａｃａｄｅｎ＋ｊ ｃ　Ｐｒｅｓｓ、　０ｒｌａｎｄｏ、　１９９０）にしたがって、日齢４日のラ ットの小脳から得て、ポリーＬ−リシン基質を塗布したプレート上で培養（３ｘ ｌＯ’細胞）した。

２４時間後に、非ニューロンの増殖を抑制するため、シトシンアラビノシド（１ ０μＭ）を添加した。小脳顆粒細胞は、培地を変えずに１０〜１２日後に使用し た。

細胞は、ＴＯＰＡとともに４０分間（１００μＭ急性暴露）または２４時間（１ ０μＭ長期暴露）インキュベートした。

ＧＭ、　、ＡＧＦ２、ＡＦＧ４（１００μＭ）およびＬＩＧＡ２０（１〜３０μ Ｍ）による処理は、以下のように行なったニー　ＴＯＰＡとの急性インキュベー ションの前に、２時間の前処理 −ＴＯＰＡとの急性インキュベーションの前に、ＬＩＧＡ２０のみによる共処理 −ＴＯＰＡとの（１００μＭ２時間）インキュベーションの前および／またはＴ ＯＰＡとの（１００μＭ２４時間）長期インキュベーションの間における共処理 あり／なしの前処理ＴＯＰＡの細胞毒性は細胞生残率の評価により決定した。よ り詳細には、以下の方法で決定したニ ー　中脳ドーパミン作動性ニューロンについては、Ｂａｒｇｅｒらが記述するＴ Ｈ蛍光抗体法（チロシンヒドロキシラーゼ特異性）（Ｂｅｒｇｅｒ　Ｂ、ら、　 Ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍｅｓｅｎｃｅｐｈａｌ ｉｃｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ　ｎｅｔｌｒｏｎｓ　ｏｆ　ｍｏｕｓｅ　ｅｍｂ ｒｙｏｓ　ｉｎ　ｄｉｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ″ ：　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａ ｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ’、　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、、　７．１９３−２０５． １９８２）−Ｍｏｓｍａｎｎが記述する小脳ニューロンのＭＴＴ比色分析（Ｍｏ ｓｍａｎｎ　Ｔ、、”Ｒａｐｉｄ　ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ　ａｓｓａｙ　ｆ ｏｒ　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｇｒｏｗｔｈａｎｄ　５ｕｒｖｉｖａｌ：　ａｐｐｌ ｉｃａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄｃｙｔｏｔｏｘｉ ｃｉｔｙ　ａｓｓａｙｓ”、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｍｅｔｈ、、　６５． ５５−６３．１９８３）。

細胞毒性は細胞生残率（％）で表わしている。

２つの試験（３回の繰り返し実験による）は、ダンカン試験（Ｄｕｎｃａｎ’ｓ 　ｔｅｓｔ）にしたがって統計的に分析した。その要約を以下に報告するニ ー　ＧＭｌ　（１００μＭｘ２４時間）は、毒性レベルのＴＯＰＡに暴露された （１０ＭＭｘ２４時間、共インキュベーション）中脳ドーパミン作動性ニューロ ンに対し、神経保護効果を奏する。

−ＴＨ免疫陽性ニューロンは、ＴＯＰＡとＧＭ、の共インキュベーションにかけ ても無傷のままである（表２参照）。

−　また、ＧＭ、誘導体（ＡＧＦ２およびＡＧＦ４）は、ＴＯＰＡによって引き 起される神経毒性に対し保護的効果を奏する（表２参照）。

表４＝中脳細胞培養物におけるＴＯＰＡによって誘発されるドー−ＧＭ、は、Ｔ ＯＰＡへの急性または長期暴露（１００μＭｘ４０分またはｌＯμＭｘ２４時間 ）後の小脳ニューロンに対して保護的作用を及ぼす。

特に、細胞が組み合わせ処理、すなわち前処理および共処理（ＴＯＰＡの不在下 で１００μＭ　Ｇ　Ｍ　ｔ　ｘ　２時間＋１０μＭＴＯＰＡの存在化で１００μ ＭＧＭ＋　ｘ２４時間）を受けていると、長期インキュベーションの後、ＧＭ、 は更に効果を発揮する（表３参照）。

−さらにＬＩＧＡ２０は、共処理において、小脳顆粒細胞をＴＯＰＡの急性毒性 （ＥＤ５０・９μＭ）から保護するのに用量依存的に効果的である。共処理のこ のような条件下では、２００μＭまでのＧＭ、は効果がない（図３参照）。

図３には、ＴＯＰＡによって誘発される培養小脳顆粒細胞の死に対するＬＩＧＡ ２０の用量依存的保護効果が示されている。細胞は、１００μＭのＴＯＰＡおよ び１〜３０ＭＭのＬＩＧＡ２０または２００μＭのＧＭＩに同時にロック液中で ４５分間暴露しく２４℃）、洗浄して、もとの培地へ戻した。２４時間後に、Ｍ ＴＴ法により生残率を評価した。平均値±Ｓ、Ｅ、　Ｍ、（ｎ＝９゜３実験）。

ＴＯＰＡ　（ロ）、ＬＩＧＡ２０　（・）、ＧＭ、（○）。

−ＬＩＧＡ２０　（３０ＭＭ）による共処理は、急性毒性レベルのＴＯＰＡに暴 露された（１００μＭｘ４５分）中脳ドーパミン作動性ニューロンに対し、神経 保護的効果を奏するが、他方、ＧＭ、（２００μＭ）は共処理に用いるだけでは 効果がない（表４参照）。

表２：ＴＯＰＡによって誘発される中脳ドーパミン作動性ニューパミン作動性ニ ューロンの喪失に対する、ＬＩＧＡ２０およびＧＭｌの保護的効果 ５ＤＩＶの培養物を、３０ＭＭのＬＩＧＡ２０または２００μＭのＧＭ、ととも に、１００μＭＩ７）ＴＯＰＡを含有するロック液中で４５分間インキュベート しく２２℃）、十分洗浄し、もとの培地に戻した。ある場合には、細胞をロック 液中で２００μＭのＧＭ、によって２時間処理しく３７°Ｃ）、洗浄し、その後 上記のようにＴＯＰＡに暴露した。すべての培養物は、ＴＯＰＡへの暴露終了の ２４時間後に、ＴＨ免疫細胞学用に処理され、ＴＨ＋細胞数を計測した。平均値 ±Ｓ、Ｅ、　Ｍ、（ｎ＝８．４実験）。対照（１００％）＝偽薬品で洗浄したＴ ＯＰＡに暴露していない姉妹培養物。

ＬＩＧＡ２０　８３．９±４．２ ＧＭ、　５．６±０．７ ＧＭ、（前処理）　７９．１±４．０ ”ｐ＜０．ＯＯＩ　Ｖｓ、　ＴＯＰＡ ロンへの神経毒性に対するＧＭ、およびその誘導体（ＡＧＦ２ならびにＡＧＦ４ ）の効果 処理　ＴＨ＋細胞数 対照　２４４±２０ ＴＯＰＡ　（１０μＭ）　６２±　８（ａ）ＴＯＰＡ　（１０μＭ） ＋ＧＭ、　（１００μＭ）　１８７±ｔｏ（ｂ）＋ＡＧＦ２　（ｌ　Ｏ０８Ｍ） 　２２５±１５（ｃ）＋ＡＧＦ２　（ｌ　Ｏ０８Ｍ）　２１９±１１（ｃ）（ａ ）＝ｐ＜０．０２ｖｓ対照 （ｂ）＝ｐ＜０．０５ｖｓＴＯＰＡ （Ｃ）＝ｐ（Ｑ、０５ＶＳＧＭｌ 血清を含まない中脳細胞を５日間培養し、次にこれをＧＭＩ　、ＡＧＦ２、ＡＧ Ｆ４（１００μＭ）、およびＴＯＰＡ　（１０μＭ）とともに２４時間インキュ ベートした。固定化およびチロシンヒドロキンラーゼ抗体による免疫染色の後、 ＴＨ−ニューロンの数を計測した。数値は３回の測定による平均値（±Ｓ、Ｄ、 ’）である。

表３：ＴＯＰＡによって誘発される小脳顆粒細胞への神経毒性に対するＧＭ、の 効果 培養物の処理　ニューロン生残率（％）４０分暴露： ＴＯＰＡ　（１００μＭ）　２２　上２゜０ＴＯＰＡ　（１００μＭ）＋ＧＭ、 　７２．４±５．８　（ａ）２４時間暴露・ ＴＯＰＡ　（１０μＭ）　１７．１±１．４ＴＯＰＡ＋ＧＭ、（前処理）　５７ ．０±６．５　（ａ）ＴＯＰＡ＋ＧＭ、（前および共処理）　７５．４±５．５ 　（ｂ）１１日口の試験管内顆粒細胞を上記のようにインキュベートした。Ｔｏ ＰＡへの４０分暴露においては、ＧＭｌ　（１００μＭ）を２時間の前処理にの み使用した。ＴＯＰＡへの２４時間暴露においては、ＧＭＴ（１００μＭ）を２ 時間の前処理にのみ、または２時間の前処理およびＴＯＰＡとの共処理に使用し た。数値は、対応の対照培養物を１００％ととして表わしてあり、それぞれ３回 繰り返し測定して得た２個の定量の平均値（±Ｓ、Ｄ、）である。

（ａ）　−ｐ＜Ｏ，Ｏｌｖｓアゴニスト単独（ｂ）　−ｐ＜０，０５ｖｓＧＭ１ 前処理群Ｌ−ドーパの存在下または不在下で、ＧＭ、　、ＡＧＦ２、およびＡＧ Ｆ４をＢＤＮＦ　（脳由来神経栄養因子）と併用して、中脳ドーパミン作動性ニ ューロンの研究を行なった。ＧＭＩ　、ＡＧＦ２、およびＡＧＦ４のＢＤＮＦと の併用は、中脳ドーパミン作動性ニューロンをＴＯＰＡによる神経毒性から保護 する上で相乗効果を有することが判明した。この相乗効果は、ＧＭ、、ＡＧＦ２ 、およびＡＧＦ４　（１〜１０μＭ）ならびにＢＤＮＦ　（１ｎ　ｇ／ｍＩ）が 極めて低い濃度、つまり個々の濃度においては全く神経保護作用がないような濃 度においても、かなり認められる。特にある実験で中脳ドーパミン作動性ニュー ロンをｌｎｇ／ｍｌのＢＤＮＦおよび１０μＭのＧＭＩと一緒にしたところ、Ｔ ＯＰＡによって誘発された毒性障害から生き残ったニューロン数は、飽和濃度（ ５０ｎｇ／ｍｌ）のＢＤＮＦを単独で使用して得たニューロン生残数と有意差が なかった。これらの結果から、Ｇ　Ｍ　＋　とその誘導体ＡＧＦ２、ＡＧＦ４お よびＬＩＧＡ２０は、Ｔ　ＯＰ　Ａ　＋：よって引き起こされる毒性から神経細 胞を保護するという結論に達した。この効果は、中脳ニューロン（ドーパミン作 動性のものも、そうでないものも）についてばかりでなく他の神経集団、例えば 小脳ニューロンについても明らかである。これらの結果は、常用のドーパミン作 動性医薬品（Ｌ−ドーパ等）で治療されているパーキンソン病患者に、ＧＭｌ及 びその誘導体を適用する新しい治療方法を予言する。特にＧ　Ｍ　＋誘導体であ るＬＩＧＡ２０は、ＧＭｌ自体またはその誘導体ＡＧＦ２およびＡＧＦ４より強 力でかつより即効性であり、共処理のみに使用しても効果的で、経口使用の可能 性を示唆している。

ガングリオシド＋Ｌ−ドーパおよび／またはＢＤＮＦを併用する新しい治療は、 Ｌ−ドーパによる長期治療がもたらす神経変性を予防しおよび／または停止させ るという大きな利点を提供する。

したがって、モノガングリオシドＧＭ、　、その内部エステル誘導体ＡＧＦ２、 およびそのメチルエステル誘導体ＡＧＦ４は、薬学上許容される賦形剤および希 釈剤と混合された、薬学上有効な量の上記化合物を含有する、パーキンソン病の 治療に適した医薬組成物の製造に使用することできる。

さらに、上記の化合物およびＮ−ジクロロアセチルリソＧＭ。

（ＬＩＧＡ２０）は、パーキンソン病の全症状を緩和しドーパミン作動性機能を 回復するための医薬品またはその組み合わせとの併用治療にも活用し得る。特に 便利なのは、上記化合物とＬ−ドーパと併用し、かつＢＤＮＦまたは他のデカル ボキシラーゼまたはモノアミンオキシダーゼ阻害剤も共に使用することである。

本発明による医薬組成物は、１回の投与量あたり１０から２００　ｍ　ｇの有効 成分を、１種類またはそれ以上の薬学上許容される賦形剤または希釈剤と共に含 有することができ、上述のように経口的または非経口的に（すなわち筋肉内、静 脈内または皮下への注射により）ヒトに投与することができる。

投与されるべき有効成分の量は、所望の効果および投与方法によって左右される であろう。非経口的注入の場合は、有効成分の投与量は０．１〜３０ｍｇ／ｋｇ ／日の範囲となろう。経口投与の場合は、０．　５〜Ｊｓｏｍｇ／ｋｇ／日の範 囲となろう。

本発明にしたがって調製された医薬組成物を以下に例として示すが、本発明はこ れらに限定されるものではない。

ケース１ ２ｍ１バイアル１個が下記のものを含有するニー　モノシアロガングリオシド（ ＧＭ、）ナトリウム塩２０、ＯＯｍｇ −二環基リン酸ナトリウム１２　ＨｚＯ６，００ｍｇ−−塩基リン酸ナトリウム ２Ｈ２００，５０ｍｇ−塩化ナトリウム　１６．ｏＯｍｇ −注射用水　適量 ケース２ ２ｍ１バイアル１個が下記のものを含有するニー　モノシアロガングリオシド（ ＧＭ、　）ナトリウム塩４０．００ｍｇ −二環基リン酸ナトリウム１２　Ｈ２Ｏ６，ＯＯｍｇ−−塩基リン酸ナトリウム ２　ＨｇＯＯ，５０ｍｇ−塩化ナトリウム　１６．００ｍｇ −注射用水　適量 ケース３ ５ｍ１バイアル１個が下記のものを含有するニー　モノシアロガングリオシド（ ＧＭ、）ナトリウム塩１００．００ｍｇ −二環基リン酸ナトリウム１２Ｈ２０１５，ＯＯｍｇ−−塩基リン酸ナトリウム ２Ｈ２０１，２５ｍｇ−塩化ナトリウム　４０．ＯＯｍｇ −注射用水　適量 ケース４ ２ｍｌアンプル１個が下記のものを含有する・−ＧＭ、メチルエステル　５．ｏ ｏｍｇ−塩化ナトリウム　１６．ＯＯｍｇ −非発熱性蒸留水中のｐＨ６のクエン酸緩衝液　適量ケース５ ２ｍ１アンプル１個が下記のものを含有する：Ｇ　Ｍ　＋メチルエステル　５ｏ 、ｏｏｍｇ−塩化ナトリウム　１６．ｏＯｍｇ −非発熱性蒸留水中のｐＨ６のクエン酸緩衝液　適量ケース６ ４ｍ１バイアル１個が下記のものを含有する：Ｇ　Ｍ　＋　メチルエステ／ｌ／ 　１００．００ｍｇ−塩化ナトリウム　３２．００ｍｇ −非発熱性蒸留水中のｐＨ６のクエン酸緩衝液　適量ケース７ ２ｍ１バイアル１個が下記のものを含有する。

−Ｎ−ジクｏｏアセチルリソＧＭ１　５．００ｍｇ−塩化ナトリウム　１６．ｏ ｏｍｇ ＝　非発熱性蒸留水中のｐＨ６のクエン酸緩衝液２．００ｍ１まで ケース８ ２個のバイアルに調製する医薬組成物 このケースに記載する組成物は、２個のバイアルに調製される。

片方のバイアルは薬学上許容される賦形剤であるグリシンまたはマンニトールと 混合した凍結乾燥粉末形態の有効成分（重量で１０％〜９０％）を含有する。他 方のバイアルは溶剤として塩化ナトリウム溶液およびクエン酸緩衝液を含有する 。システム６のバイアルが有効成分のみを含有する時は、その粉末は注射用水ま たは他の溶剤（例：第三級ブタノール）を用いて凍結乾燥するか、または滅菌粉 末を無菌条件下で直接分割して得られる。

システムＮｏ、１ ａ、２ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

−モノシアロガングリオシド（ＧＭ、）内部エステル５．００ｍｇ −グリシン　３０．ＯＯｍｇ ｂ、２ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 １６．００ｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮｏ、２ ａ、３ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

−モノシアロガングリオシド（ＧＭＩ）内部エステル５、ＯＯｍｇ −マンニトール　４０．ＯＯｍｇ ｂ、２ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 １６．００ｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮｏ、３ ａ、３ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

−モノシアロガングリオシド（ＧＭＩ）内部エステル５０、ＯＯｍｇ −マンニトール　２０．ＯＯｍｇ ｂ、３ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 ２４．ＯＯｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮｏ、４ ａ、５ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

−モノシアロガングリオシド（ＧＭ、）内部エステル１００、ＯＯｍｇ −グリシン　５０．ＯＯｍｇ ｂ、４ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 ３２．ＯＯｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮｏ、５ ａ、５ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

−モノシアロガングリオシド（ＧＭ、）内部エステル１００、ＯＯｍｇ −マンニトール　４０．ＯＯｍｇ ｂ、４ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 ３２．ＯＯｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮｏ、６ ａ、５ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含何する。

−モノンアロガングリオンド（ＣＡＭ、）内部エステル１００．００ｍｇ ｂ、４ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　−塩基リン酸ナト リウム２Ｈ２０１，ＯＯｍｇ−二塩基リン酸ナトリウム１．２　Ｈ２Ｏ１２，Ｏ Ｏｍｇ−マンニトール　１６０．００ｍｇ −注射用水　適量 システムＮｏ、７ ａ、２ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

−ＧＭ、メチルエステル　５．００ｍｇ−グリシン　３０．ＯＯｍｇ ｂ、２ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 １６．００ｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮ０１８ ａ、５ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

Ｇ　Ｍ　＋　メチルエステル　１５０．００ｍｇ−グリシン　５０．ＯＯｍｇ ｂ、４ｍｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム　 ３２．ＯＯｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量システムＮ０９９ ａ、３ｍｌの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有する。

Ｇ　Ｍ　＋メチルエステル　５０．００ｍｇ−　グリシン　２５．ＯＯｍｇ ｂ、３ｒｎｌの溶剤アンプル１個が下記のものを含有するニー　塩化ナトリウム 　２４．００ｍｇ −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液　適量ケース９ 腸溶性錠剤１個が下記のものを含有する：　ｍｇ　ｍｇ−モノシアロガングリオ シド（ＧＭ、）内部エステル　１００　２００ 賦形剤ニ ー　ラクトース　５０　１００ −　微小結晶セルロース　２５　５〇 −ナトリウムカルボキシメチルセルロース　１０　２〇−ポリビニルピロリドン 　６　１２ −　メタクリル酸コポリマー　１０　２０＝　ポリエチレングリコール　２４ −　ステアリン酸マグネシウム　２４ −　タルク　１０　２０ ケースｌＯ 腸溶性錠剤１個が下記のものを含有する：　ｍｇｍｇ−モノシアロガングリオン ド（ＧＭ、　）内部エステル　１００　２００ 賦形剤ニ ー　ヒドロキシプロピルメチルセルロース　３０　６０−　ラクトース　１０３ 　２０６ −　微小結晶セルロース　３０　６０ −　メタクリル酸コポリマー　１６　３２−　ポリエチレングリコール　３６ −　ステアリン酸マグネシウム　３６ −　タルク　１５　３〇 −モノシアロガングリオシド（Ｇ！ＶＬ）ケース１１ 即成性錠剤１個が下記のものを含有する：　ｍｇ　ｍｇ−モノシアロガングリオ シド（ＧＭ、）内部エステル　１００　２００ 賦形剤ニ ー　ラクトース　５０　１００ −　微小結晶セル口・−ス　２５　５〇−ナトリウムカルボキシメチルセルロー ス　１０　２〇−ポリビニルピロリドン　６　１２ −　ステアリン酸マグネシウム　２４ 放出制御錠剤１個が下記のものを含有する：　ｍｇ　ｍｇ−モノシアロガングリ オシド（ＧＭ、）内部エステル　１００　２００ 賦形剤ニ ー　ヒドロキシプロピルメチルセルロース　３０　６〇−ラクトース　１２０　 ２４０ −　微小結晶セルロース　３０　６０ −　ステアリン酸マグネシウム　３６ 腸溶性顆粒剤を封入した固形ゼラチンカプセル１個が下記のものを含有する： ｍｇ　ｍｇ 内部エステル　１００　２００ 条件 補正書の写しく翻訳文）提出書 （特許法　第１８４条の８） 平成６年９月１３日

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. １．パーキンソン病の治療に適する医薬組成物の製造に、モノジアロガングリオ シドＧＭ１またはその誘導体を有効成分として使用する方法。
2. ２．該モノジアロガングリオシドＧＭ１誘導体が、内部エステルＡＧＦ２および メチルエステルＡＧＦ４よりなる群から選ばれる、請求項１に記載の使用方法。
3. ３．該医薬組成物が、薬学的に許容される賦形剤および希釈剤と混合された、治 療上有効な量の該有効成分を含有する、請求項１に記載の使用方法。
4. ４．薬学的に許容される賦形剤および希釈剤と混合された、薬学的に有効な量の モノジアロガングリオシドＧＭｌまたはその誘導体を含有する、パーキンソン病 の治療に適する医薬組成物。
5. ５．該モノジアロガングリオシドＧＭ１誘導体が、内部エステルＡＧＦ２、メチ ルエステルＡＧＦ４およびＮ−ジクロロアセチルリソＧＭｌよりなる群から選ば れる請求項４に記載の医薬組成物。
6. ６．経口薬品として調製される請求項４に記載の医薬組成物。
7. ７．非経口薬品として調製される請求項４に記載の医薬組成物。
8. ８．モノジアロガングリオシドの内部エステルＡＧＦ２、そのメチルエステルＡ ＧＦ４およびＮ−ジクロロアセチルリソＧＭ１よりなる群から選ばれるモノジア ロガングリオシドまたはその誘導体の薬学的に有効な量を、単独でまたは他の薬 品と併用して投与することからなるパーキンソン病の治療方法。
9. ９．該投与が経口的に行なわれる請求項８に記載の治療方法。
10. １０．該投与が非経口的に行なわれる請求項８に記載の治療方法。
11. １１．該投与が、パーキンソン病の全症状の緩和とドーパミン作動性機能の回復 のために用いられる医薬品または医薬品の組み合わせを併用する、請求項８に記 載の治療方法。
12. １２．該投与が、Ｌ−ドーパ、ＢＤＮＦ，およびそれらとデカルボキシラーゼま たはモノアミンオキシダーゼ阻害剤の組み合わせからなる群より選ばれる医薬品 を併用する、請求項８に記載の治療方法。