JPH07508196A - アズラクトン官能基材，義角膜，並びにその製造及び利用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 アズラクトン官能基材、義角膜、並びにその製造及び利用発明の分野 本発明はアズラクトン官能表面を有する基材、特に水和ゲル、かかるアズラクト ン官能水和ゲルを含んで成る哺乳動物身体移植片（例えば義角膜）、並びにその 製造及び使用方法に関する。

発明の背景 哺乳動物身体移植片、例えば義角膜（人工角膜としても知られる）は、変質した 又は傷付いた哺乳動物組織を代替するときに、その哺乳動物身体の残り部分がか かる移植片の存在を許容するとき、及びその生体適合性移植片がその置き換えら れた組織の機能を許容される状況で発揮するとき、非常に有用である。

義角膜は哺乳動物、特に人類の継続的な生活機能にとって特に不可欠なものであ り、その理由は変質又は傷付いた角膜は視覚を妨げるからである。

合成義角膜を供する試みがなされてきたが、現状どれも、死体から獲得される天 然の角膜移植片の代わりとなる許容される代替品を供することができないことか ら、政府の規制により許容されていないようである。これらの器具は隣接する組 織の侵食及び壊死、慢性炎症、並びに前眼房の上皮形成を理由により不合格とさ れている。

最適には、人工角膜の前方面は角膜上皮細胞の接着及び増殖を助けて、周囲の宿 主（ｈｏｓｔ）上皮と連続する完全な上皮層をもたらすべきである。上皮の連続 層は正常な前角膜涙膜の維持を可能とし、良好な視角面を保証し、そして微生物 の侵入に対するバリヤーを供する。

光学要素としてのポリ（ビニルアルコール）水和ゲル及びその要素の外周に固定 された多孔質外部スカートを用いる義角膜を供する先行研究がなされている。米 国特許第５．１０８．４２８号に対するヨーロッパ対応物、欧州特許公開公報第 ０．３３３，３４４号（Ｃａｐｅｃｃｈｉら）がこの義角膜を開示しており、そ して上皮細胞の増殖を促進するために前方面を基底膜成分でコート又はラミネー トする望ましさを示している。コーティングは、その前方面上に角膜上皮細胞の 植え付ける前に、重合中に基底膜成分を収着もしくは化学付着させる又は組込ん で行うのが好ましい。許容される基底膜成分にはラミニン、フィブロネクチン、 Ｉ型コラーゲン、■型コラーゲン、又は角膜上皮細胞の細胞外マトリックスより 調製した無細胞抽出物が含まれる。

発明の概要 細胞と哺乳動物身体移植片との相互作用を最適化する要望がある。

本発明は、最適な哺乳動物細胞増殖、特に上皮細胞増殖にとっての表層を供する ことのできる生体適合性哺乳動物身体移植片、特に義角膜を供する問題を解決す る。

本発明の一観点は核化合物との反応にとって機能する新規のアズラクトン官能基 材にある。

本発明の別の観点は哺乳動物移植片における成分として有用な新規のアズラクト ン官能水和ゲルにある。

本発明の別の観点はアズラクトン官能基材、特にアズラクトン官能水和ゲルの製 造にとって有用な多価アズラクトン組成物にある。

本発明の別の観点は、哺乳動物身体移植片、特に義角膜にあり、これはアズラク トン官能水和ゲルと、この水和ゲルの外周においてその後方面上に固定されてい る不縁ポリオレフィンウェブの多孔質外部スカートとを用いて３Ｊｉ、］製され る。

本発明の別の観点はアズラクトン官能基材、特にアズラクトン官能水和ゲルを調 製する方法にある。　。

本発明の別の観点はアズラクトン官能水和ゲルと不織ポリメ゛レフィンウェゾの 多孔質外部スカートとを用いる哺乳動物身体移植片を製造する方法にある。

本発明の別の観点は”Ｉズラクトン官能水和ゲルと共に採用する紫外光吸収性千 ツマ−とし“Ｃ有用な組成物にある。

「基材」とは請求核面を有し、且つアズラクトン官能組成物と反応できる組成物 を意味する。

「水和ゲル」とは、水の中で膨潤できるが熔解することのなし１、その水和の状 態に無関係に親水性である組成物のＰＬＥＡを意味する。

「多価アズラフ（・ン組成物」とは核反応にとって有用な少なくとも二のアズラ クトン成分を有する組成物を意味する。

「アズラクトン」とは次式のオキサヅリノン成分を意味する：製 Ｒ１及びＲ２は独立して、１〜１４個の炭素原子を有するアルキル基、３〜１４ 個の炭素原子を有するンクロアルキル基、５〜１２個の環原子を有するアリール 基、６〜２６個の炭素原子並びＧこ０〜３個のＳ。

Ｎ及び罪過酸化○ヘテロ原子を有するアレニル基である力・、又番よＲ１及びＲ ２はそれらが結合している炭素と共に４〜１２個の環原子を含む炭素環を形成し ていてよく、そして ｎはＯ又は１の整数である）。

「アズラクトン官能」とは、多価アズラクトン組成物と基材との反応が、基材の 核面とこの多価′？ズラクトン組成物の少なくともーのアズラクトン成分との間 でノ（イｒ結合をもたらしめ、少なくとも−のアズラクトン成分が生物学的に活 性な物質との更なる核反応乙ことって有効であり続けていることを意味する。

「生物学的に活性な物質」とは、アズラクトンと反応性の核官能基を有し、且つ 特に哺乳動物細胞の生物学的過程を左右せしめる状況で反応することのできる化 学的組成物を意味する。生物学的に活性な物質の限定でない例には、生物学的、 免疫化学的、生理学的又は薬理学的に活性である物質である。生物学的に活性な 物質の例には、タンパク質、ポリペプチド、抗体、抗原性物質、酵素、補体、イ ンヒビクー、レクチン、ホルモン、レセプター、凝集因子、アミノ酸、ヒストン 、ビタミン、薬剤、細胞表層マーカー、及びそれらと相互作用する物質が含まれ る。

Ｆ活性化基材Ｊとは、次式Ｈのアズラクトン官能基材を意味する：（式中、Ｒ’ 　、Ｒ２及びｎは先に定義した通りであり、ｙは少なくとも１であり、そしてア ズラクトン成分の数より少なくとも１少ない数であり、 Ｒ３４よ複数のアズラクトン成分を共有結合することのできる架橋基であり、そ して Ｂはこの基材であり、そしてＡはこの基材上のアズラクトン反応性求核基の残基 、例えば○、Ｓ又はＮＲ’であり、Ｒ４は水素であるか又は１〜４個の炭素原子 を含むアルキル基である）。

「架橋基」とは、（ａ）１４個までの炭素原子を有するアルキレン５；（ｂＮＯ 個までの炭素原子を有するアリーレンＭ；　（ｃ）６個までの炭素原子を有する シクロアルキレン基；　（ｄ）ミカエル（門１ｃｈａｅｌ）ドナー求核化合物と 複数の２−アルケニルアズラクトンミカエルアクセプターとのミカエル反応に由 来する基（ここでこの請求核化合物は少なくとも二のアズラクトン反応性成分を 有する）；又は（ｅ）上記の架橋基の組合せ；を含んで成る基を意味する。アル キレン、アリーレン及びシクロアルキレン基の限定でない例が、ｒＰｏｌｙａｚ ｌａｃｔｏｎｅｓＪ、　Ｊ、に、　Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ＋　Ｓ、Ｍ。

１１ｅｉ１ｍａｎｎ、　Ｌ、Ｒ，Ｋｒｅｐｓｋｉの、Ｅｎｃ　ｃｌｏ　ｅｄｉｎ 　ｏｒ　Ｐｏｌ　ｍｅｒ　５ｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄＥｎ　１ｎｅｅｒｉｎ　、第 １１巻、第２版、　１９８８．　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、　Ｉｎ ｃ、＋頁５５Ｂ−５７１に開示されている。かかる請求核化合物の限定でない例 には、米国特許第４，４８５，２３６号（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎら）に開示の如き のチオール及び第二アミン、もしくはそれらの組合せ：又は炭素酸、エナミン、 イミド及び窒素複素環（米国特許第５．１４９，８０６号（Ｍｏｒｅｎら）に開 示の如く）もしくはそれらの組合せが含まれる。

本発明の特徴は、アズラクトン官能基材が請求核性生物学的活性物質、例えば細 胞外マトリックスタンパク質、例えばラミニン、フィブロネクチン、■型コラー ゲン、■型コラーゲン、又は角膜上皮細胞の細胞外マトリックスより調製された 無細胞抽出物と、移植のための哺乳動物身体移植片の製造及び有効な細胞増殖の ために反応することができることにある。

本発明の別の特徴は、このアズラクトン官能基材が生物学的に活性な物質と、生 存細胞との更なる生化学的相互作用を可能にする状況で複合することにある。

本発明の別の特徴は、生物学的に活性な物質の水和ゲルに対する複合か、この水 和ゲルの表層を、生体適合性哺乳動物身体移植を可能にする状況で改質せしめる ことにある。この水和ゲルは哺乳動物移植にとっての任意の所望される形態であ ってよい。その表層改質は移植に基づく細胞増殖を高め、従って本発明の物品を 哺乳動物身体移植片として有用なものにする。

本発明の利点は、角膜移植片の要素としてのアズラクトン官能水和ゲルの利用が 、細胞増殖を高める従来の方法より優れていることにある。

従って、本発明は、アズラクトン反応性求核面を有する水和ゲル、このアズラク トン反応性求核面に共有結合した多価アズラクトン組成物、及びこの多価アズラ クトン組成物に複合した生物学的に活性な物質を提供する。

本発明はまた、アズラクトン反応性求核面を有する基材と、更なる核反応にとっ て有効な少なくとも−のアズラクトン成分が残っている状況でそれに共有結合し ている多価アズラクトン組成物とを含んで成るアズラクトン官能基材をも供する 。

本発明はまた、上記の活性化基材と生物学的に活性な物質との反応生成物を含ん で成る生物学的に活性な基材をも供する。

本発明はまた、トリス（（２−（Ｎ−２−（４，４−ジメチル−２−オキサプリ ン−５−オン−２−イル）エチル、Ｎ−イソプロピル〕−２−アミノ〕エチル〕 アミン及びＮ、Ｎ’　、Ｎ″−トリス−２−（４，４−ジメチル−２−オキサゾ リン−５−オン−２−イル）エチル−ビス−（Ｎ、Ｎ’−イソプロピル−２−ア ミノエチル）アミンより成る群から選ばれる多価アズラクトン組成物も供する。

本発明はまた、２−アリルオキシ−４，４′−ジメトキシ−２−ヒドロキシベン ヅフェノン及び３−アリル−２，２′−ジヒドロキジー４．４′−ジメトキシヘ ンシフエノンより成る群から選ばれるヘンシフエノン紫外光吸収剤も供する。

本発明はまた、アズラクトン官能水和ゲルを製造する方法であって、（ａ）水和 ゲルを、アズラクトン反応性求核面を有する組成物を含んで成る脱水状態で形成 せしめ、そして多価アズラクトン組成物をこの脱水状態の水和ゲルのアズラクト ン反応性求核面と、少なくとも−のアズラクトン成分が更なる核反応にとって有 効であり続ける状況で反応させる工程を含んで成る方法も供する。

本発明はまた、哺乳動物身体移植片を形成する方法であって、上記の方法に従っ てアズラクトン官能水和ゲルを形成し、そして少なくとも−のアズラクトン成分 を有する生物学的に活性な物質と反応させる工程を含んで成る方法も供する。

本発明の更なる詳細は図面の簡単な説明に続く。

図面の簡単な説明 図１は本発明に係る義角膜の一部破断した模式透視図である。

図２は本発明に係る義角膜を含む人の眼の一部の模式断面図である。

図３は図１の人工器官の前方面を示す図２の部分の拡大図であり、その上に上皮 層が増殖している。

発明の態様 閃一杯 本発明にとって有用な基材は任意の天然又は合成組成物であってよく、これはア ズラクトン反応性、求核成分、例えばヒドロキシル、アミン又はチオール成分の 存在に基づきアズラクトン反応性求核面を有する。基材の限定でない例には、天 然組成物、例えばセルロース（及び改良セルロース誘導体）、アガロース、デキ ストラン、キチン及びキトサン；合成組成物、例えばヒドロキシエチルメタクリ レート、ヒドロキシプロピルアクリレート、Ｎ−メチロールアクリルアミド、ア リルアルコール、アリルアミン及びＮ−（３−（Ｎ’−イソプロピル）アミノプ ロピル］メタクリルアミドの如きのモノマーに由来するポリマー；並びにポリマ ーの改良により誘導されたポリマー、例えばγ−トリエトキシシリルプロビルア ミン、γ−トリエトキシシリルプロパンー１−チオール又はＴ−グリシドキシプ ロピルトリメトキシシランと反応させたシリカゲル及びガラス粒子（それにエポ キシドの加水分解が続＜）、並びに本明細書に規定する水和ゲルが含まれる。

水粗ｒ止 哺乳動物身体移植片のタイプに応じて、有効な水和ゲルの選択は所望の物理的及 び化学的特徴に従って変えてよい。水和ゲルはアズラクトン成分との共有結合の ためのアズラクトン反応性求核反応部位を必要とする。好ましくは、アズラクト ン反応性求核反応部位はヒドロキシル基である。

哺乳動物組織に生体適合性である数多くの適当な水和ゲル組成物が当業界におい て述べられている。哺乳動物組織と、又はその中に用いることについて政府規制 機関により認められている水和ゲルが好ましい。多価アズラクトン組成物と化学 的に相互作用するためのアズラクトン反応性求核反応部位を有する生体適合性水 和ゲルの限定でない例には、ポリ（ビニルアルコール）コポリマー系、及びポリ （ビニルピロリドン）ブレンドであってそのブレンドの他方のポリマーがアズラ クトン反応性求核面を含むものが含まれる。　０ｆｓｔｅａｄの欧州公開特許出 願第０．１３７，６８６Ａ（’０ｆｓｔｅａｄ　’６８６八」）は所望のコポリ マー系及びブレンドを開示している。かかる可能な生体適合性水和ゲルのうち、 ポリ（ビニルアルコール）ホモポリマー及びコポリマーが、バルク材料又はその 外面上のコーティングのいづれかとして好ましい。好適なポリ（ビニルアルコー ル）コポリマーは米国特許第４．６１８，６４９号（ｒｏｆｓｔｅａｄ　’６４ ９Ｊ　）及び米国特許第４．５２８，３２５　（’０ｆｓｔｅａｄ　’３２５Ｊ 　）に記載されている。

義角膜の光学要素として利用するのに現状最も好ましい材料は、ビニルトリフル オロアセテート（ＶＴＦＡ　）とビニルアセテート（ＶＡｃ）とのコポリマーよ り調製され、且つ０ｆｓｔｅｄ　’６４９（Ｅｘａｍｐｌｅ　８　）に記載の方 法に従って作られたポリ（ビニルアルコールーコービニルアセテート）である。

ＶＴＦ八、対、ＶＡｃの重量比は約９５＝５〜約９９．９：０．１、そして好ま しくは約９７：３〜約９９：ｌに範囲しうる。現状好ましい重量比は９８．５　 ：　１．５であり、これは９７．６　：　２．４のＶＴＦＡ　：　ＶＡｃのモル 比に相当する。ビニルアルコールに至るＶＴＦＡの加溶媒分解を経て、このポリ （ビニルアルコールーコービニルアセテー日材料は半結晶水和ゲルとなり、これ はヒドロキシル成分のアズラクトン反応性求核面を有し、正常食塩水中で７３％ の平衡水分含量を有し、１１０ｋｇ／ｃｍ”の引張り強さ、１０〜１５ｋｇ／ｃ ａ＋”の初期弾性率及び４３６％の伸び率を有する。引張強さ、伸び率及び弾性 率は全て０ｆｓｔｅａｄ゛６４９の第６欄、行５７〜第７欄、行４に記載の通り に測定した。

その他の生体適合性水和ゲル材料が、その水分含量が５０％より大であり（好ま しくは６５％〜８０％）、そしてその引張強さが２０ｋｇ／ｃ＋＋”より大（好 ましくは４０ｋＢ／ｃｍｚより大）である限り、義角膜の光学要素として利用で きうる。更に、好適な強度に関係する基準は３〜１１５　ｋｇ／ｃＩ１１２（好 ましくは５〜１５ｋｇ／ｃｎ＋”　）の弾性率、及び１００〜１０００％（好ま しくは１５０％より大）の伸び率である。

光学要素として使用するための他の生体適合性水和ゲル材料にはその他のポリ（ ビニルアルコール）コポリマー、例えばコモノマーとして無水マレイン酸（０〜 ３％）（モル％）を含むもの、０ｆｓｔｅａｄ゛６４９に記載のその他の水和ゲ ル材料（特に、第３４１１１！、行１９〜５０の説明を参照のこと）　、０ｆｓ ｔｅａｄ　’３２５に記載のその他の水和ゲル材料、Ｏｆｓ　Ｌｅａｄ“６８６ Ａに記載のその他の水和ゲル材料（ポリ（ビニルピロリドン）を有するその他の ブレンドは、もしこのブレンドの他方のポリマーがアズラクトン反応性求核成分 を含むなら、挙げることができる）及びＨａｍｍａｒら米国特許第４，６７３， ５３９号に記載のその他の水和ゲル材料が含まれる。この水和ゲル材料において 、その水分含量及び強度特性は、ポリマー系中のコモノマーのタイプ及び含量、 又はブレンドの中の材料の比によって変えることができ、一般的には哺乳動物移 植片、そして特に義角膜にとって必要とされる物理的及び化学的特性に合うよう に仕立てることが可能となる。

上記の義角膜における使用にとって現状最も好適なポリ（ビニルアルコールーコ ービニルアセテート）は、０ｆｓｔｅａｄ　’６４９に記載の通り前駆ポリマー の溶媒キャストディスクの成形加工により作られるが、熱成形ボタン又はバルク ＵＶ連合ボタンの旋盤加工も利用できうる。例えば、米国特許第４．６７３，５ ３９号（Ｈａｍａ＋ａｒら）のＥｘａｍｐｌｅ　１４に開示の技術が熱成形ボタ ンのために採用されうる。次にＶＦＴＡ／ＶＡｃの前駆ポリマーを加溶媒分解反 応によりポリ（ビニルアルコールーコービニルアセテート）水和ゲルへと変換さ せる。

好ましくは、義角膜における光学要素として使用するためには、水和ゲルは光学 的に透明であり、約５０％〜約９０％の水分含量を有し、約２０ｋｇ／ｃｍ”よ り大の引張強さを有し、そして上皮細胞の層を支えることのできる前方面を有す る。

任意的に、その他の材料を水和ゲルに加えて性能特性を変えることができる。例 えば１９９０年３月９日公開の日本国公開公報０２００７０７１１号に開示され ている紫外光吸収剤、例えば２−アリルオキシ−４゜４′−ジメトキシ−２′− ヒドロキシベンゾフェノン（２−アリルオキシ−ＢＰ）　、３−アリルオキシ− ２Ｘ　２′−ジヒドロキシ−４゜４′−ジメトキシベンゾフェノン（３−アリル −ＢＰ）　、２．　２’　−ジヒドロキシ−４−メトキシ−４’　−（２−メタ クリロイルオキシエトキシ）ベンゾフェノン（ＭＥＢＰ）　、又は４−　（２’ 　−アクロイルオキシエトキシ）−２−ヒドロキシヘンシフエノン（Ａｍｅｒｉ ｃａｎＣｙａｎａｍｉｄよりｒＣｙａｓｏｒｂ　ＵＶ−２０９８Ｊとして重版） を、約０．１〜約１重量部に範囲する重量比率においてビニルトリフルオロアセ テートと共重合せしめてコポリマーを形成せしめ、それを好適な前駆ポリマーと 約５０　：　５０　（前駆体：Ｕｖ吸収性ポリマー）〜９０　：　１０の重量比 で配合せしめてＵＶ吸収性ＰＶＡ配合化水和ゲルを形成せしめてよい。他方、Ｕ ｖ吸収性モノマーはビニルトリフルオロアセテート（νＴＦ八）及び無水マレイ ン酸（ＭＡ）と、９８．５　：　１．５　：　０．２５　（ＶＴＦＡ　：　ＭＡ 　：　ｔｌＶ吸収性モノマー）の重量比において、熱開始剤、例えばＬｕｐｅｒ ｓｏｌ　２２５（Ｐｅｎｎｗａｌｔ　Ｃｏｒｐ、）を利用し、４０°Ｃで１２時 間、その後の６０°Ｃで３時間の連続加熱により共重合せしめることができる。

Ｕｖ吸収性モノマーのうちで、２−アリルオキシ−ＢＰ又は３−アリル−ＢＰが 現状好ましく、なぜならそれらは永久的な非浸出性紫外光防御及び３８０ｎｍで 鋭くカットオフする光吸収を有するからである。

多ゴアズラクトン 本発明において任意の多価アズラクトン組成物が、アズラクトン官能基材、例え ば上記の式Ｈに規定する活性化基材、そして好ましくはアズラクトン官能水和ゲ ルを生成するための基材との反応のために上記の式ｌに規定する複数のアズラク トンを供するのに有用でありうる。この基材は、アズラクトン成分との共有反応 にとって有効なアズラクトン反応性求核反応部位、好ましくはヒドロキシル基を 有するため、この多価アズラクトン組成物をこの水和ゲルに共有結合するための 結合の形成は少なくとも−のアズラクトン成分を利用し、そして生物学的に活性 な物質との核反応にとって有効な少なくとも−の他のアズラクトン成分を残す。

多価アズラクトン組成物の限定でない例には上記の式Ｉに規定した少なくともこ のアズラクトンを有するホモポリマー、コポリマー及びオリゴマーが含まれる。

多価アズラクトン組成物は上記の通りの架橋基に共有結合した少なくともこのア ズラクトンを含んで成る。

適当な多価アズラクトン組成物の限定でない例及びミカエル付加によるその製造 方法は米国特許第４，４８５，２３６号（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎら）及び米国特許 第５，１０９．８０６号（Ｍｏｒｅｎら）に開示されている。

好ましくは、多価アズラクトン組成物は、２−アルケニルアズラクトンモノマー と式（ＩＩＸ）、　Ｒ５を有する核基置換化化合物とのミカエル付加により調製 されたホモポリマー、コポリマー及びオリゴマーであり、ここでＲ５はｎの価数 を有する有機基であり、且っ核基置換化化合物（ＩＩＸ）、、Ｒ’の残基であり 、ここでＸは上記した通りであり、そしてｎは下記に定義する通りであり、その 残基は２０，０００までの分子量を有し、好ましくは一価及び多価の炭化水素（ 即ち、２〜２０個の炭素原子及び任意的に１〜４個の酸素、窒素又は硫黄のカテ ナリーへテロ原子を有する脂肪族及びアリール化合物、例えばピペラジン、フラ ン及びチオフェン）、ポリオキシアルキレン、ポリエステル、ポリオレフィン、 ポリアクリレート及びポリシロキサン残基であって、任意的に全て少なくとも１ 個の非求核基、例えばシアノ、ハロ、エステル、エーテル、ケト、ニトロ、シリ ル、スルフィド（１０個までの炭素原子を有する炭素含有基）及び核基、例えば 第二アミノ基、ヒドロキシル基又はメルカプト基により更に置換されていること のある残基より好適に選ばれ；そしてｎは２〜６の値を有する整数である。

重合されて多価アズラクトン組成物を形成することのできる２−アルケニルアズ ラクトンモノマーの限定でない例及びその合成は米国特許第４，３０４．７０５ 　；　５，０８１，１９７　、及び５，０９１，４８９号（全てＨｅｉｌｍａｎ ｎら）に開示されている。適切な２−アルケニルアズラクト二／には： ２−エチニル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−エチニル−４−メチル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−インプロペニル−１，３−オキサプリン−５−オン。

２−イソプロペニル−４−メチル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−エチニル−４，４−ジメチル−１，３−オキサプリン−５−オン。

２−イソプロペニル−４，４−ジメチル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−エチニル−４−メチル−４−エチル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−イソプロペニル−４−メチル−４−ブチル−１，３−オキサプリン−５−オ ン。

２−エチニル−４，４−ジブチル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−イソプロペニル−４−メチル−４−ドデシル−１，３−オキサプリン−５〜 オン。

２−イソプロペニル−４，４−ジフェニル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−イソプロペニル−４，４−ペンタメチレン−１，３−オキサプリン−５−オ ン。

２−イソプロペニル−４，４−テトラメチレン−１，３−オキサプリン−５−オ ン。

２−エチニル−４，４−ジエチル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−エチニル−４−メチル−４−ノニル−１，３−オキサゾリン−５−オン。

２−イソプロペニル−４−メチル−４−フェニル−１，３−オキサゾリン−５− オン。

２−イソプロペニル−４−メチル−４−ヘンシル−１，３−オキサゾリン−５− オン及び ２−エチニル−４，４−ペンタメチレン−１，３−オキサゾリン−５−オン、が 含まれる。

２−アルケニル　アズラクトン　には２−エチニル−４，４−ジメチル−１，３ −オキサゾリン−５−オン（本明細書ではＶＤＭと呼ぶ）及び２−イソプロペニ ル−４，４−ジメチル−１，３−オキサプリン−５−オン（本明細書ではＩＤＭ と呼ぶ）が含まれる。

好ましくは、多価アズラクトン組成物はＶＤＭを用いて調製する。

ＶＤＭヘーベーリマー及びオリゴマーの限定でない例には、ビニルジメチルアズ ラクトンホモポリマー及びコポリマー（「ポリ−ＶＤＭ　Ｊ　）、米国特許第５ ．０８１．１９７号に従ってＶＤＭの酸触媒化重合により調製したビニルジメチ ルアズラクトンオリゴマー（「オリゴ−Ｖ［１Ｍ　Ｊ　）、次式■を有し、且つ 本願においてはトリス（Ｃ２−ＣＮ−２−（４゜４−ジメチル−２−オキサゾリ ン−５−オン−２−イル）エチル。

Ｎ−イソプロピル〕−２−アミノ〕エチル］アミン（［トリス−νＤＭ−Ｔ　Ｊ 　）と命名しているＶＤＭとトリス−（Ｎ’　−イソプロピルアミノエチル）ア ミンとのトリス−ミカエル付加物：及び次式■を有し、且つ本願においてＮ、Ｎ ’　、Ｎ“−トリス−２−（４，４−ジメチル−２−オキサゾリン−５−オン− ２−イル）エチル−ビス−（Ｎ、Ｎ“−イソプロピル−２−アミノエチル）アミ ン（「トリス−ＶＤＭ−１１」）と命名しティるＶｌ）Ｍとビス−（Ｎ’　−イ ソプ１ノビルアミノエチル）アミンとのトリス−ミカエル付加物：ＶＤＭを用い で調製したこれらの好適な多価アズラフＩ・ン組成物のうら−ご（リス−Ｖ　Ｄ 　Ｍ　−Ｔが々了ましい。

多価アズラクｌ−ン組成物と水和ゲルとの反応は、好ましくは実質的に脱水状聾 における水和ゲルで行い、そして約２５゛Ｃ〜約３００″Ｃに１・ｎ囲する温度 におい°ζζ約１一〜約２４間に範囲する時間にわたり、大気圧、加圧、又は減 圧において、周囲又は不活性な雰囲気条件下で行う。奸ましくは、その温度は約 ５０゛Ｃ〜約２００°Ｃに範囲する。好ましく：よ、その反応時間は約３０分〜 約３時間に範囲する。好ましく：よ、その反応槽の圧力；よ大気圧とする。好ま しくは、その反応雰囲気は無水条件でＮ、又はその他のガスを用いることにより 、アズラクトン官能基にとって不活性なものとする。

肴万量一 本発明の義角膜は、アズラクトン官能性である少なくとも−の前方面を有する光 学要素と、その要素の外周にその後方面上で固定された多孔質外部スカートとを 含む。

図１に関し、光学要素１２及び多孔質外部スタート１４を含む義角膜を示す。光 学要素１２は全幅（ｆｕｌｌ　ｄｅｐｔｈ）透光性中央領域１６と、人工器官１ ０の外周伝いに広がるスカート１４の上に重なったそれより薄い外部領域１８と を含む。光学要素１２の前方面１７はアズラクトン官能性である。

光学要素１２は透光性中央領域１６と、上皮細胞の層を支えることのできる前方 面１７とを有する。その外部スカート１４は、光学要素１２を患者の周囲組織に 固定するのに用い、そして細胞の内部増殖及び組織付着を可能にするのに十分な ほど孔質である。

好適な態様において、光学要素１２は、上記の多価アズラクトン組成物が共有結 合している前方面１７を有する上記のポリ（ビニルアルコール）コポリマー水和 ゲルより成る。

別の観点において、人工器官１０は、光学要素１２の前方面１７を覆う上皮細胞 の層も含む。好ましくは、基底膜成分の如きの生物学的に活性な物質を光学要素 １２のアズラクトン官能前方面１７に複合させた後に、その生物学的に活性な物 質に対するかかる細胞の複合を介して、かかる細胞を前方面１７に付着させる。

基底膜成分（はとんどの場合タンパク質）の利用はその上での上皮細胞の増殖を 促進する。

光学要素１２は、５０％〜９０％の水分含量、２０ｋｇ／ｃｍ”より大の引張強 さ及び上皮細胞の層を支えることのできる前方面を有する上記の透光性水和ゲル 材料より成る。米国特許第５，１０８．４２８号（Ｃａｐｅｃｃｈｉら）は、光 学要素の所望される性質及びその上に上皮細胞の層を供する利点を述べている。

細胞増殖を高めるために生物学的に活性な物質を複合させるための本発明のアズ ラクトン官能前方面の利用は、その上に上皮細胞の層を支えるその前方面１７の 能力を驚くべきほどに高める。

光学要素１２の材質は好ましくは上記の水和ゲル材料より作った水和ゲルである 。

灸孔１ム左二上 多孔質スカート１４は好ましくは米国特許第５，１０８，４２８号（Ｃａｐｅｃ ｃｈｉら）（’Ｃａｐｅｃｃｈｉ　’４２８　ｊ　）に実質的に記載の通りの孔 の連続ネットワークを有する溶融吹込ファイバーの凝集塊より成る。多孔質スカ ート１４にとって現状最も好ましい材料はポリブチレン（例えば商標名５ｈｅｌ ｌ　８０１０のもとて入手可能）又はポリブチレン／ポリプロピレンブレンド（ ８０％／２０％）である。好ましくは、溶融吹込ファイバーを形成するために用 いるポリマー材料は酸化防止剤、例えば商品名１ｒｇａｎｏｘ　１０１０の酸化 防止剤（Ｃｉｂａ　Ｇｅｉｇｙ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、　Ｈａｒｔｈｏｒｎ 。

Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋより市販）も含む。この酸化防止剤は約１重量％において樹脂 の混合物に、その樹脂混合物を押出器の中に供給する前に乾燥配合する。

スカート１４は好ましくはＣａｐｅｃｃｈｉ　’４２８に含まれている詳細に従 い、そのｐｉｇ、　４Ａ及びＥｘａｍｐｌｅ　１１を参考に作られる。また、米 国特許第４，１１８，５３１号（Ｈａｕｓｅｒ）＋　ｖａｎ　Ｗｅｎｔｅ、　’ ５ｕｐｅｒｆｉｎｅ　ＴｈｅｒｍｏｐｌａｓｔｉｃＦｉｂｅｒｓＪＩｎｄｕｓｔ ｒｉａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４８巻１頁１３４ ２−（１９５６）及びＮａｖａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅ ｓの報告Ｎｏ、４３６４．１９５４年５月２５日出版１題名’Ｍａｎｕｆａｃｔ ｕｒｅ　ｏｆ　５ｕｐｅｒｆｉｎｅ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｆｉｂｅｒｓ　」ｖａｎ 　Ｗｅｎｔｅら、及び下記の実施例５は、溶融吹込マイクロファイバーウェブの 作成方法を述べている。

義理股ｑ製造 Ｃａｐｅｃｃｈｉ　’４２８は義角膜の製造を述べているが、ただし本発明に従 うと、光学要素１２の前方面１７はアズラクトン官能性であり、そして上皮細胞 増殖を高めるのに適切な生物学的に活性な物質と反応させている。好ましくは、 光学要素１２　（Ｏｆｓｔｅａｄ　’６４９に記載の加溶媒段階の前；その段階 は水膨潤を及ばしめる）は吹込ファイバーウェブスカート１４の環の存在下で成 形する。スピンキャスティングドラムを用いる力吋容媒分解及び水和の際の膨潤 に適応するのに所望される特定の中央領域１６の厚みより薄い厚みで前駆ポリマ ーのフィルムを調製した後、吹込ファイバーウェブをそのフィルムの隣りのドラ ムに合うように切ってその中に入れてる。ドラムを回転させている間、光学要素 １２のポリマーにとっての溶媒であり、且つスカート１４にとっての溶媒でない 少量の溶媒（例えばアセトン）を、その吹込ファイバーウェブを濡らすため及び フィルムの表面を溶かして吹込ファイバーがそのフィルムの中に包埋されるよう にするために注入する。この溶媒は吹込ファイバーウェブの完全飽和を防ぐため 、及びスカート１４の孔をふさいでしまうであろうフィルムの完全な溶解を防く ために２速に蒸発させねばならない。次にスピンを、そのスピンキャスティング ドラムをカバーせずに約３０〜約６０分続ける。ポリ（ビニルアルコールーコー ビニルアセテート）を形成スるための前駆体の力吋容媒分解及び水和ゲルを形成 するための水和の後、適当なサイズのディスクを義角膜１０を形成するために切 り取る。

他方、光学要素１２の前駆体（Ｏｆｓｔｅａｄ　’６４９に記載の加溶媒分解の 段階にかける前；この段階は水膨潤を及ぼす）を成形しく予備成形ボタンの成形 加工又は旋盤加工のいづれかにより）、そして多孔質外部スカート１４に、スカ ート１４を溶媒（例えばアセトン）に浸し、次いでこれら二つを互いに押し付け ることによって溶媒融着させる。

二つの成分１２と１４との間で良好な接触が得られるようちょうどよい圧力をか ける。要素１２の前駆体を次に加溶媒段階に付してスカート１４に取り付け、光 学要素１２はその形態及び光学的透明度を維持している。

スカート１４は加溶媒段階の際の光学要素１２の形態の変化に適応するよう十分 に弾性である。溶媒融着の利点は、水和ゲルの中でのファイバーの機械的固着を 獲得せしめることにあり、接着界面での剥離の問題を回避せしめる。これは力旧 容媒分解及び膨潤に基づいてサイズの変化を受ける材料にとって特に重要である 。また、二成分を接着させ合う接着剤の使用を回避することにより、人の眼に適 する様々な材料が数において制約される。この付着法は、水和ゲルを、その特性 を潜在的に変えてしまいうるプロセスに委ねることをも回避せしめる。

他方、光学要素１２と多孔質スカート１４とは、義角膜１０を形成するために生 体適合性接着剤（例えばシアノアクリレート）を使用することによって組合せる ことができる。接着剤の使用は哺乳動物の眼に適する追加の材料を導入するが、 しかし前方面１７上のアズラクトン官能基を破壊しうるプロセス技術を回避する 。

工）官のコーティング 植え付けの前に、光学要素１２及び多孔質スカート１４の両者に、基底膜成分を 、その基底膜成分と、この光学要素１２の前方面に共有結合している多価アズラ クトン組成物との化学付着反応を介してコートせしめる。付着及び移植したとき の治癒を助長するため、１又は数種の下記の基底膜成分を使用してよい：ラミニ ン、フィブロネクチン、Ｉ型コラーゲン、■型コラーゲン又は義角膜上皮細胞の 細胞外マトリックスより調製した無細胞抽出物。

−への　“・番 患者の眼の中への人工器官１０の移植の前に、Ｃａｐｅｃｃｈｉ　’４２ＢのＦ ｉｇ、　５及び米国特許第５，０３２．１３１号（Ａｙｓ　ｔａら）の保持器具 を、光学要素１２の前方面１７の上の基底膜成分に上皮細胞を、そして多孔質ス カート１４に間質角膜実質細胞をＣａｐｅｃｃｈｉ　’４２８に記載の通りに植 え付けるのに使用できる。

２（工１ｊ×１克疵 人工器官１０は移植の前に、当業者に従う技術によって紫外又はガンマ−線で滅 菌すべきである。次に、人工器官１０を公知の角膜切除手順を採用及びＣａｐｅ ｃｃｈｉ　’４２８に一般的に記載のフィブリン接着剤を利用することで眼の中 に外科移植する。

図２に関し、スカート１４を含む人工器官１０の外周領域を角膜５０に縫合して いる。人工器官ＩＯの後方面５２は前眼房５４を封入し、そしてその上に重って いる領域１８の縁は角膜５０の上皮層と整合し、そしてスカート１４は眼の支質 と整合している。支質ｍ織は多孔質スカート１４の連続孔へと成長し、患者の眼 の中での人工器官１０の定着を担う。

上皮細胞は角膜５０の周辺組織の上皮層から光学要素１２の前方面へと移動し、 そしてとりわけ要素１２の前方面５８上に連続上皮層５６（図３参照）を形成す る。層５６は所望するには少なくとも３枚の細胞層を含み、そして約５０〜１０ ０μｍの厚みである。前方面への上皮細胞の事前植え付は及びスカートへの支質 角膜実質細胞の事前植え付けは、再上皮細胞形成及び組織の内増殖を助長する。

前方面の完全被覆は正常な角膜前部涙膜及び微生物侵入に対するバリヤーを供す る。

Ｃａｐｅｃｃｈｉ“４２８は有効な細胞増殖を決定するのに再利用する実験室実 験に関する手順も述べている。

その他の態様 本発明のその他の態様は以降の請求の範囲に属する。

他の哺乳動物身体移植片の限定でない例には、部分的に厚みのある角膜移植片、 層板内移植片、皮下移植片、血管移植片が含まれる。

多孔質外部スカートを光学要素に結合させるのにその他の方法を利用することが できる。例えば、光学要素は多孔質外部スカートに結合させる前に加溶媒分解に 付してよい。

光学要素は水和ゲル状態にあるときにその所望の形態へと形成してよい。例えば 、光学要素１２についての湾曲したオプチックの形態は、所望の厚みの前駆ポリ マーフィルムのディスクを、約１６５°Ｃの温度を有するオーブンの中に予め熱 しておいたホント金属モルトの中に約２介入れておき、続いてモルトセットを取 り除き、そしてそのモルトセットの天然固冷却の際に約５０〜ｌ００ｐｓｉの圧 力を付することで授けることができる。この湾曲したオプチンクを次に加溶媒分 解及び加水分解してよい。このようにして形成したその光学要素１２は水和の後 に湾曲を維持している。

溶融吹込材料はその他の移植器具においても用途を有し、そしてその溶融吹込材 料とは異なる材料より成る部材を定着させるのに用いることができる。

上皮細胞の下方成長を抑制するフィブリン接着剤の利用は、上皮細胞下方成長が 潜在的な合併症となるその他の皮下型移植片、例えば腹膜アクセス器具、血管ア クセス器具、及び上皮細胞が歯−歯肉面に向って移植することを防ぐことが必要 な歯周外科において有用である。

本発明の特徴及び利点を下記の実施例により更に説明するが、しかしこれらの実 施例の中に記載の特定の材料及びその量、並びにその他の条件及び詳細は本発明 を限定するものと考えるべきではない。

Ｃａｐｅｃｃｈｉ　’４２ＢのＥｘａｍｐｌｅ　１−１１は本発明にとって有用 な情報を述べている。特に、それらの実施例は、上皮細胞培養物の調製、並びに インビトロ及びインビボでのその植え付け、支質角膜実質細胞の調製及びインビ トロ及びインビボでのその内部増殖、溶融吹込ファイバーと水和ゲルとのインビ トロでの組合せ、フィブリン接着剤の利用、ポリビニルトリフルオロアセテート ーコー無水マレイン酸の調製及びイオン官能基を含む水和ゲルへのその変換、並 びに溶融吹込ファイバーウェブの調製を述べている。

実歴ｌ目三」（臣乙上−ヤスティング法・　ｒ　八”；　；　び慕鷹影賀収賢シ レ’ＶＡｃ）フィルムのれＩＩ調製は全て化学ヒユームフードの中で行った。ブ チルゴム又はネオプレン保護グローブを、溶媒（アセトン、メタノール及びエタ ノール）の操作中及び水酸化アンモニウム／メタノール溶液を使用する加溶媒分 解工程中に使用した、 ５、Ｉ　Ｘ　１．３ｃｍのゴムカップリングを使用する、１．２７ｃｎ＋のシャ フト上に装置され、且つ、下記の寸法を有する電気モーターにより３４５０ｒｐ ｍにて駆動するスピンキャスティングドラムを採用した：アルマイト旋盤ドラム （外寸：直径９．５ｃｍｘ長さ１４ｃｍ、内寸：直径７ｃａ及び長さ１２．７ｃ ｍ）　、並びにポリテトラフルオロエチレンガスケットシール及びドラムへの窒 素の供給のためのチューブの入口としてその中央に１ｃｍの穴が開けられている 蓋。

このドラムを５０％のメタノール／アセトン溶液で飽和となったペーパーティッ シュでドラムの中に残っている残留ポリマーを溶かして清浄した後、そのドラム を追加のペーパーティッシュでぬぐって乾した。次に清浄なポリエステル剥離ラ イナー（アセトンで洗った下塗りなしのポリエステルフィルム、２７／８’　Ｘ 　８１／２”　）ヲこのドラムの中に挿入した。このフィルムを、１〜２ｍｌの アセトンをスピニングドラムの中に噴出することを介してドラム面に装着させた 。

チューブを流れる窒素でドラムから空気を追い出し、次いでそのフローを最小検 出量にまで調節した。

次に、２０ｍ１のプラスチックシリンジを使用して、０ｆｓｔｅａｄ　’６４９ のＥｘａｍｐｌｅ　８に従って調製したアセトン溶液中の固形分３０％のｐ（Ｖ ＴＦＡ／νＡｃ）１０ｍｌをスピニングドラムの中に注入した。次いで、最少量 ではあるが検出可能な流量の窒素を伴うチューブをドラムのほぼ半分にまで挿入 して低温度、低酸素量の雰囲気を保った。このドラムを２〜４時間連続回転し続 けた。

次に剥離フィルムを小さな金属スパチラを用いてこのドラムから慎重に剥し、そ してそのフィルム及び剥離ライナーをｐＶＴＦＡ　／　ＶＡｃフィルムに亀裂が 入らないように慎重にドラムから引張った。この剥離ライナーをフィルムから取 外した。ｐＶＴＦＡ／ＶＡｃフィルムをはさみを使用してシームにおいて切った 。

スピンキャストしたフィルムは、それをグローブバッグの内側で、又はロノキン グブラスチノクハノグの中にシールして、窒素雰囲気の中に保った。より長い保 管期間を必要とする状況においては、ｐＶＴＦＡ　／　ＶＡｃフィルムを一２０ °Ｃ未満の温度で保管した。

ｐ　（ＶＴＦＡ　／　ＶＡｃ）　７　イルムをＰｖＡフイルムニ変換するため、 ｐ（ＶＴＦＡ／ＶＡｃ）を７−ルフイルムカハーでカバーしたビーカーの中の１ ０％の水酸化アンモニウム／メタノール？８液の中で２時間、そのビーカーを化 学ヒユームフートの中に入れて加溶媒分解した。次に水酸化アンモニウム／メタ ノールン容ン夜をメタノールに置き換え、そしてそのフィルムを化学ヒユームフ ードの中で更に２時間浸漬させた。メタノール？ｉ　ｉｆｆの後、このフィルム を脱イオン水の中で各すすぎの間での最低６０分にわたる脱イオン水中でのフィ ルム浸漬により少なくとも４回浸漬することですすいだ。

脱イオン水中での少なくとも８時間にわたるフィルムの保管を経て、そのＰＶＡ フィルムは完全に水和した０次に、その水和Ｐν八へィルムをグイ又ははさみに より所望のサンプル形態に切った。

より長い保管を必要とするＰｖ＾フィルム又はディスクサンプルに関して、これ らのフィルム及びディスクサンプルを７０％のエタノール／水の溶液の中に１〜 ２時間入れておいた。次に、７０％のエタノール／水の溶液を、それらのサンプ ルをカバーするのに十分な無水エタノールに置き換えた。これらのサンプルを無 水エタノールの中に１〜２時間浸漬した。ある状況においては、これらのサンプ ルを最低１時間づつにわたり、アセトン中での６回の浸漬を利用して完全に乾か した。アセトンは吸水性であるため、これらのサンプルはその浸漬の際、窒素パ ージグローブバッグの中で浸漬した。その水和ゲルサンプルはこれによりキセロ ゲルとしても知られる脱水状態として、多価アズラクトン組成物との反応にとっ て有効となった。

２：　アズラクトン　のＵ 多価アズラクトン組成物を下記の通りに調製した：（ａ）ポリ−ビニルジメチル アズラクトン（ポリ−ＶＤ？Ｉ）を’Ｐｏ１ｙａｚｌａｃｔｏｎｅｓ」、　Ｊ、 に、Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ、　Ｓ、Ｍ、Ｈｅ１ｌ＋＋ａｎｎ、　Ｌ、Ｒ，Ｋｒｅｐ ｓｋｉの」ヱ１り旦凹則互」Ｌヱ１１咀Ｌジ注胛μＬ鮭止１■力咀肛頂４　、第 １１　巻。

第２版、　１９８９．　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ＋　Ｉｎｃ、、頁 ５５Ｂ−５７１に記載の通りに二周製した。

（ｂ）、ｔｌＪゴ７−ＶＤＭ　（ｔリゴーＶＤＭ）は米国特許第５，０８１，１ ９７号のＥｘａｍｐｌｅ　１に記載の通りに調製した。

（Ｃ）トリスＣ（（１−（Ｎ−１−（４，４−ジメチル−２−オキサゾリン−５ −オン−２−イル）エチル−Ｎ−イソプロピルクー２−アミノ］エチル〕アミン （トリス−ＶＤＭ−Ｔ）は２工程で調製した。

（１）トリス（Ｎ−イソプロピル−２−アミノエチル）アミンを、トリス（２− アミノエチル）アミン（Ｗ、Ｒ，Ｇｒａｃｅ　ａｎｄ　Ｃｏ、。

Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ、　ＭＡ）　（５０ｇ　）　、アセトン（１００ｍｌ）　、 エタノール（２５＋ｗｌ）及び酸化プラチナ（＾Ｉｄｒｉｃｈ、　Ｍｉｌｗａｕ ｋｅｅ、　Ｍｌ）　（０，５ｇ　）の混合物より、Ｐａｒｒ加圧反応装置（Ｐａ ｒｒ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　Ｃｏ、、　Ｉｎｃ、＋　Ｍｏ１ｉｎｅ＋　ＩＬ） で水素添加した５００１の加圧ボトルの中で５０ＰＳＩＧで２４時間で調製した 。

次にその触媒を濾過により除去し、溶媒を減圧で除去し、そして残留物を蒸留さ せて（ｂ、ｐ　１１３−１１５　’Ｃ；　１〜２ＩＩｌｌｌ）所望の生成物を得 た。その生成物の構造をＮＭＲ及びＩＲスペクトル分析により確認した。

（２）（）リス−ＶＤＭ−７）を、トリス（Ｎ−イソプロピル−２−アミノエチ ル）アミン及び３モル当量のＶＤＭ　（ＳＮＰＥ、　Ｐｒ１ｎｃｅｔｏｎ、　Ｎ Ｊ）より、所望の生成物を供するために６５°Ｃで１８時間熱することによって 調製した。その生成物の構造をスペクトル分析により確認した。

（ｄ）Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’−１−リス　２−（４，４−ジメチル−２−オキサプリ ン−５−オン−２−イル）エチル−ビス−（Ｎ、Ｎ’　−イソプロピル−２−ア ミノエチル）アミン（トリス−ＶＤＭ−８）を２工程で調製した。

（１）ビス−（Ｎ’　、Ｎ’−イソプロピル−２−アミノエチル）アミンを、ビ ス（２−アミノエチル）アミン及びアセトンより、上記の（ｃ）（１）に記載の 通りに調製した。

（２）トリス−ＶＤＭ−８を、ビス（Ｎ、Ｎ’−イソプロピル−２−アミノエチ ル）アミンと３モル当量のＶＤＭ　（ＳＮＰＥ、　Ｐｒ１ｎｃｅｔｏｎ、　ＮＪ ）との、上記の（ｃ）（２）に記載の通りの反応により調製した。

−３：　ＰＶＡ　ゲルディスク上でのアズークトン＝　のノ多価アズラクトン組 成物をアセトン溶液の中に約５％の固形分にまで希釈した。実施例１２に従って 調製、且つ完全に乾かしたＰＶＡディスクのサンプルをガラスペトリ皿の中に均 一に広げた。このディスクを多価アズラクトン溶液の中に１５分間、ＰＶＡディ スクの均質なコーティングを確実なものにするためにペトリ皿の中でその溶液を ゆっくり攪拌しながら浸漬した０次に、過剰の溶液をデカントし、そしてそのデ ィスクを単層で均一に広げた。そのペトリ皿を少量の乾燥剤（［１ｒｉｅｒｉｔ ｅ　（商標））を含むロッキングプラスチックバッグの中に入れた。次に、アズ ラクトンコート化ＰＶＡディスクを１００°Ｃで１時間硬化させた。次いで、そ のアズラクトン改質化ＰＶＡディスクを約１時間づつの３回連続でのアセトン浸 漬で洗った。そのアズラクトン改質ＰＶＡディスクを真空チャンバー又は窒素パ ージグローブハノグの中で室温（２５°Ｃ）で風乾した。乾燥アズラクトン改質 ＰＶＡディスクを小さなガラスサンプルバイアルの中で、乾燥剤（Ｄｒｉｅｒｔ ｔｅ（商標））を含むホイル−ラミネートヒートシールバッグの内側で保管した 。

−４：ＰＶＡディスクのアズークトン＝　への　ンパク　のカップリング 上記の実施例３に従って調製した未水和アズラクトン改質ＰＶＡディスクを牛血 清アルブミン（’ＢＳＡ　Ｊ　）（Ｓｉｇｍａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　；　Ｓｔ、 Ｌｏｕｉｓ＋Ｍｉｓｓｏｕｒｉより市販の画分■）の濃縮溶液に室温で加えた。

４５分後、そのディスクをタンパク質溶液から取り出し、そしてリン酸緩衝食塩 水の中でよく洗った。そのタンパク質改質ＰＶＡディスクをリン酸緩衝食塩水中 で４°Ｃで一夜水和させた。上記の実施例３に従って調製した未水和アズラクト ン改質ＰＶＡディスクの別のセットを同じ技術及び条件に従ってプロティンＡ（ これもＳｉｇｒａａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ由来）と反応させた６ ５：１１′人マイクロファイバーウエフ゛のＵポリブチレン（Ｓｈｅｌｌ　８５ １０＋　５ｈｅｌｌ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｈｏｕｓｔｏｎ。

Ｔｅｘａｓ）及びポリプロピレン（Ｅｘｘｏｎ　３５０５＋　Ｅｘｘｏｎ　Ｃｈ ｅｒｌｉｃａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ。

１１ｏｕｓＬｏｎ、　Ｔｅｘａｓ）を８０　：　２０の比で１重量％のＩｒｇａ ｎｏｘ　１０１０酸化防止剤（Ｃｉｂａ　Ｇｅｉｇｙ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ＋　Ｉｌａｗｔｈｏｒｎ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋより市販）と乾燥配合し、そして 樹脂を溶融させてその溶融樹脂を輸送することのできる、Ｖａｎ　Ｗｅｎｔｅ　 ら’Ｍａｎｎｆａｃｔｕｒｅ　ｏｆ　５ｕｐｅｒｆｉｎｅ　ＯｒｇａｎｉｃＦｉ ｂｅｒｓ」、　Ｎａｖａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｒｅｐ ｏｒｔ　Ｉｔ４３６４＋　１９５４年５月２５日及びＶａｎ　Ｗｅｎｔｅ　’５ ｕｐｅｒｆｉｎｅ　Ｔｈｅｒｍｏｐｌａｓｔｉｃ　Ｆｉｂｅｒｓ」むｈ護μ工り 隙［匣ｙ〕１浬庶畦■■、　４８．１３４２−１３４６　（１９５６）に記載の 通りの押出機に９０〜１８０　ｇｒ／ｃｍダイ幅／ｈｒで供給した。そのダイは ０．０３３ｃｍ（０，０１３インチ）の口径、４０：１のＬ／Ｄ比を有し、そし てダイの線上ｃｍ当り２２．４４のオリフィス（ダイの線上インチ当り５７のオ リフィス）がある。ン容融ポリマーは、１１３７Ｔｏｒｒ（２２Ｌｂｓ／　ｉｎ ”）及び２４０°Ｃに保たれた０、０２５ｃｍ（０，０１０インチ）のエアーギ ヤノブを有する二枚のエアーナイフにより作った高速エアー流の中に押出した。

細分化したファイバーを押出機から３３ｃｍ　（１３インチ）離れた回転ドラム の上で集めた。

得られるウェブは４５ｇ／ｍ２の基礎重量、０．３８＋ｍの厚み、及び５〜８μ ｍの平均ファイバー直径を有する。得られるうニブを９５％のエタノーノ噛容液 の中で洗った。

ファイバーの直径、基礎重量及び孔率は、ポリマー供給速度、エアー流量及びコ レクター上のドラムスピードを調整することにより調整できる。ポリマーブレン ド組成物又は使用するベースポリマーの変更は同様に行って処理できる。

吹込マイクロファイバーウェブを調製した後、そのウェブを９５％のエタノール を含むガラスベトソ皿の中に入れ、そしてそのウェブを濡らすためにゴムローラ ーでエアーを追い出すことによりそのウェブをエタノールで飽和させた後にその ウェブの縁を切り取った。

このウェブを脱イオン水を含むガラスペトリ皿に移した。再びそのウェブをゴム ローラーで加圧してその表面の濡れを確実なものにした。長い金属製ピンセント でそのウェブを扱って、そのウェブを液体窒素の中に凍るまで浸した。その凍結 ウェブを取出し、そして直ちに所望の形態にダイパンチで切った。複数の切断が 必要なら切断の間でそのウェブを再凍結させた。

１ｈ　６：？″″媒　法による　方散ｐＩ］。

実施例１の組成を有するｐ（ＶＴＦＡ／ＶＡｃ）のフィルムを実施例１のスピン キャスティング法を利用して調製した。このシートは、そのフィルムを加溶媒分 解及び水和すべきときに１．５〜１．６Ｘのｐ　（ＶＴＦ＾／ＶＡｃ）の膨潤係 数を可能にするのに最終的に所望される中央光学要素の厚みより０．０５〜０． １０ｍｍ小さい厚みを有していた。このフィルムをスピンキャスティングドラム から外し、そしてｐ　（ＶＴＦＡ　／　ＶＡｃ）フィルムをガラスの上に載せた ポリエステル剥層うイナー上で平らにした。

ナイフコーターを用い、メチルエチルケトンの中に溶かしたｐ（ＶＴＦＡ／ＶＡ ｃ）　（固形分５％〜１５％）溶液をスパンキャストｐ（νＴＦＡ／ＶＡｃ）フ ィルム上に広げた。実施例５に従って調製した吹込マイクロファイバーウェブを ７．３ｃｎ＋Ｘ２１．６ｃｍ　（２７／８インチｘ８１／２インチ）のノートに 切り、次いで直径４ｍｍの内径孔又は直径４ｍａ＋を有する外径８１を有する環 を形成するように再び切った。次にその切断した吹込マイクロファイバーウェブ をｐ（ＶＴＦＡ／νＡｃ）フィルムの上に設置した。そのウェブは、フィルムと ウェブとの複合物を、ｐ（ＶＴＦＡ／ＶＡｃ）のコーティングを乾する間に２枚 のガラスプレートの間でサンドインチすることによりその位置に保った。接着コ ーティングが完全に乾くのに十分な時間が経過した後、そのガラスプレートを取 外した。次に、その複合フィルムを実施例１の条件を利用して加溶媒分解させ、 そして水和させた。所望のサイズのディスクを次に水和の後にそのフィルムから 切り取った。

ｎ］ユニｌ工ｙ」２スー　ン　−の１′実施例１の組成のｐ　（ＶＴＦＡ　／　 ＶＡｃ）のフィルムを実施例１のスピンキャスタードラムを用いて調製した。こ のシートは、そのフィルムを加溶媒分解及び水和ずべきときに１．５〜１．６ｘ のｐ　（ＶＴＦＡ　／　ＶＡｃ）の膨潤係数を可能にするのに最終的に所望され る中央光学要素の厚みより０．０５〜０−１０ｍｍ小さい厚みを有していた。フ ィルムはスピンキャスティングドラムの中に残っていた。実施例５に従って調製 した吹込マイクロファイバーウェブをスピンキャスティングドラム（７，３Ｘ２ 、１６ｃｍ＋　）の中に納めるために切り、そして直径４−の内径孔をバンチし た。このウェブ゛をｐ（ＶＴＦＡ／　ＶＡｃ）フィルムの隣りのスピンキャステ ィングドラムの内側に設置した。ドラムを回転させている間、少量（２〜３１） のアセトンを、そのウェブを濡らすため及びそのウェブをドラムに対して平らに するのに役立たせるために注入した。

実施例１２に記載のチューブからの窒素流量はアセトンの蒸発を早めるために高 めた。この少量のアセトンはｐ　（ＶＴＦ＾／ＶＡｃ）フィルムの表面を溶かし 、ウェブファイバーがフィルムの中に包埋されるようにする。このアセトンは、 ウェブの完全飽和及びフィルムの完全溶解（このことはふさがれた孔を有するウ ェブをもたらしうる）を防ぐために迅速に蒸発させなくてはならない。次に、ス ピンキャスティングドラムを３４５０ｒｐｍで３０〜６０分スピンさせた。この ドラムにはスピンの最中、カバーをしなかった。次にこの複合フィルムを実施例 １の手順に従って加溶媒分解及び水和させた。水和後、義角膜ディスクをこの複 合フィルム／ウェブより所望のサイズで切り取った。

８：アズラクトン　ゲル　８　、へのウェブスカートのシアノアクリレート 実施例４に従って調製したＢＳＡ改質ＰＶＡディスク並びに実施例５に従って調 製し、そして実施例６及び７に従って環へとパンチ甘しめた吹込マイクロファイ バーウェブを義角膜へと集成するために束ねた。　ＢＳ＾改質永和水和Ａディス クをポリエステル剥離ライナーの上に載せ、そしてシアノアクリレート（Ｍｉｎ ｎｅｓｏｔａ　Ｍｉｎｉｎｇ　ａｎｄＭａｎｎｆａｃｔｕｒｉｎｇ　Ｃｏｍｐａ ｎｙｔ　Ｓｔ、　Ｐａｕｌ、　Ｍｉｎｎｅｓｏｔａより市販のＣＡ−４）をその ウェブ環の片面に塗った。シアノアクリレート接着剤を有するウェブ環の面をＢ ＳＡ改譬ＰＶＡディスクの上に載せ、そして第二ポリエステル剥離ライナーを１ 〜２秒の手による加圧でその義角膜集成体の上に載せた０次にその集成体を剥離 ライナーからゆっくりと剥し、そしてその義角膜集成体のカーリングを防ぐため に蒸留水の中に入れた。このシアノアクリレート接着剤を硬化させた。

９：　・に・′　な　をカップル　せるためのアズラクトン〜　−ルの１ オリゴ−ＶＤＭ　（メチルエチルケトン（ＭＥに）中で固形分５０％）を実施例 １２ニ従ってｍ製したｐ　（ＶＡ　／　ＶＡｃ）　７　イア１／ム（９７，６： 　２．４モル％）上にコートし、そして５０”ｃ、ｉｏｏ″Ｃ又は１５０°Ｃの いづれかで１時間熱した。更に、コントロールサンプルを室温で同じ時間保った 。アセトンでよく洗った後、そのサンプルをＨｅｗｌｅｔｔ　Ｐａｃｋａｒｄ　 ５９５０Ｂ　ＥＳＣＡ装置で、単色Ｘ線源、ＡＩ　Ｋ−α放射線及び８００ワツ トのビームを利用してＸＰＳ　（ＥＳＣＡ）により分析した。表１に示す結果は 、アズラクトンの組込み（％Ｎとして測定）は硬化温度の上昇に伴って上昇する ことを示唆する。また表１は、ＸＰＳ　（ＥＳＣＡ）により測定した炭素物質の 分布を示す。

表　１ オリゴ−ビニルジメチルアズラクトンでコートされ、そして様々な時間にわたっ て熱処理された水和ゲルディスクのＥＳＣＡ分析原子％組成 丈１１及皇鼓廠　Ｘ旦　３ｉｊｉ　鳳　里鉦コントロール、加熱なし　６７　＊ 　２８　５．６１ｈｒ、、５０°Ｃで加熱　７１　１．３　２６　１．０２ｈｒ 、、　１００″Ｃで加熱　７１　１．７　２３　４．４２ｈｒ、、　１５０°Ｃ で加熱　７１　３．８　２１　４．１炭素物質の分布 コントロール、加熱なし　５３　３８　６．１　２．４１ｈｒ、、５０°Ｃで加 熱　５２　３Ｂ　６．８　３．５　．０１８２ｈｒ、、　１００°Ｃで加熱　６ １　３０　５．７　４．０　．０１４２　ｈｒ、、　１５０°Ｃで加熱　６５　 ２１　８．５　５．１　．０４４次に、ｐ（ＶＡ／ＶＡｃ）　（９７，６：　２ ．４　モル％）フィルム（実施例１２に従って調製）にポリ−ＶＤＰ又はオリゴ −ＶＤ？Ｉ　（ＭＥＫ中で３０〜５０％）のいづれかをコートし、１００°Ｃで １時間硬化し、そしてアセトンで洗って未結合樹脂を除去した。これらのサンプ ルを米国特許第５．２００．４７１号に記載の手順に従ってプロティンへ〇カッ プリングについて試験した。その結果を表２に示し、ここでＲＡは放射活性を意 味する。

表２ これらの結果かられかる通り、ポリ−ＶＤＭ及びオリゴ−ＶＤ？ｌコート化ｐ（ ＶＡ　／　ＶＡｃ）フィルムはコントロールよりも有意に多くのプロティンＡと カップルする。また、エタノールアミンによるプレクエンチはポリーＶＤＭコー ト膜の場合、カップリングを低める；なぜエタノ−アミンクエンチしたオリゴ− ＶＤＭフィルムが高レベルのプロティンＡとカップルするかは不明である。

これらのポリ−ＶＤＭ、オリゴ−ＶＤＭ、トリス−ＶＤＭ−Ｔ及び）　ＩＪ　７ ！、−ＶＤＭ−１３とＰｖ＾面との反応を研究するため、基材としてＰＶＡホモ ポリマーコート化多孔質ＰＥ膜（国際出願ＵＳ９１１０７６８６における手順に 従って調製）を使用するモデル系を利珀した。このことは、トランスミシランモ ードにおけるサンプルのＦＴｒＲ分析による反応のモニターを可能にした。誘導 したＰＶＡコート膜をアズラクトンの溶液（ＭＥＫ又はアセトン中で約５％）に 浸し、次いで無水条件で１００°Ｃで熱した。様々な時間において、それらのサ ンプルを１時間〜２３時間に範囲するＦＴＩＲ分析のために取り出した。

ポリ−ＶＤＭとの反応は、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅ１ｍｅｒモデル１７５０赤外線フー リエ変換スペクトロメーターを用いて測定して、ＩＲスペクトルにおいて非常に わずかな変化をもたらした。　１５２０ｃｍ−’及び１７４０ｃｍ−’において 吸収の上昇が認められ、これは環の開いたアズラクトン中の第ニアミド及びエス テル結合のそれぞれのアミド■振動に基づいている。１゜２及び３回のアセトン 洗浄を経ての３つのスペクトルは、ポリ−ＶＤＭが溶離されていないことを示す 。更に、かなりの量の残留アズラクトン官能基がある（１Ｂ２０ｃｍ−’での吸 収）。

オリゴ−ＶＤＭとＰｖ八へ−ト化ＰＥ膜との１００°Ｃでの反応は、アズラクト ン吸収（１８２０ｃｍ−’　）において非常に大きな減少と、１６４０ｃｍ−’ 及び１５２０ｃｍ−’　（アミドＩ及びアミド■バンド）並びに１７４０ｃｍ− ’　（エステルカルボニル）における上昇とを示した。しかしながら、アセトン による洗浄に基づき、はとんど全てのオリゴ−ＶＤＭが除去され、そして残留ア ズラクトンの証拠は認められなかった。洗浄後に非常にわずかな材料が残ってい る事実はおそらくポリマー及びオリゴマー−ＶＤＨ間の分子量の相違に基づ（、 ポリ−ＶＤＭのアズラクトン基と表層ヒドロキシルとの反応は表層に固定化され た大量の物質をもたらしたが、オリゴ−ＶＤＭでは、より多くの表層反応が同程 度の固定化物質を達しめるために必要とされるであろう。

ＰＶＡ／ＰＥ膜とトリス−ＶＤＭ−Ｔ及びトリス−ＶＤＭ−Ｂとの反応は両ケー スにおいて、アズラクトンピークが急速に消失することを示し、そして１５４０ ｃｍ−’、　１６００ｃｍ−’、　１６４０〜１６６０ｃｍ−’及び１７３０ｃ ｍ−’での新たな吸収は、アズラクトンと表層ヒドロキシル基との反応によるエ ステル及びアミド基の形成の指標である。しかしながら、アズラクトン吸収は３ 時間の反応時間を経て消えた。これらの分子中のアミン基はヒドロキシル基とア ズラクトンとの反応を触媒する。

１０：　めるための　・に２　な　ルの■ ｐ（ＶＡ／ＶＡｃ）　７４　／ｌ／ム（９７，６：　２．４　モ）Ｌｉ％）ディ スク（実施例１に従って調製）のサンプルをポリ−ＶＤＭ及びオリゴ−ＶＤＭ　 （適当なＶＤＭ試薬でコートし、風乾し、そして１５０　’Ｃで１時間硬化）と 反応させ、そしてＴｒｉｎｋａｕｓ−Ｒａｄａｌｌ　ら’Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎ ｔ　ｏｆ　ａ　Ｂｉｏｐｏｌｙｓ＋ｅｒｉｃＫｅｒａｔｏｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃ 　Ｍａｔｅｒｉａｌ　Ｊ　Ｉｎｖ、　Ｏｈｔｈ、　ａｎｄ　Ｖｉｓ　Ｓｃｉ、　 、　１９８Ｂ。

第２９巻１頁３９３−４００に特定の手順に従ってタンパク質カップリング並び に角膜上皮細胞付着及び増殖を調べるためにボストン薬科大学に供給した。これ らのディスクをフィブロネクチン、ラミニン又は■型コラーゲンと水性溶液の中 で反応させ、そして洗浄後、ウサギ角膜上皮細胞を植え付け、それを付着及び増 殖についてモニターした。その結果は、ＶＤＭ処理面上での細胞増殖がコントロ ール面に対して向上していたことを示した。特にフィブロネクチンに関しては、 オリゴ−ＶＤＭ及びポリ−ＶＤＨの両者による細胞増殖は１０日間で一貫してデ ィスク当り３．０００を超えた。ラミニンに関しては、オリゴ−ＶＤＭ及びポリ −ＶＤＨの両者に関して、細胞増殖は２日後でのディスク当り約２．０００の細 胞からＩＯ０日目ディスク当り約４．５００の細胞まで上昇した。■型コラーゲ ンに関しては、ポリ−ＶＤＭに関して９、最初の１０日にわたって細胞増殖はデ ィスク当り２，０００細胞を超え、そしてオリゴ−ＶＤＨに関しては、２日目で のディスク当り約３．０００の細胞からＩＯ０日目ディスク当り約６，０００の 細胞にまで上昇した。比較により、これらの３種の細胞タイプそれぞれのコント ロールについての細胞増殖は２日後にディスク当り１　、０００の細胞未満に減 った。

更に、細胞層上で長期生存が、安定な形態学が認められる主観的決定により示さ れた。

ポリ（ビニルトリフルオロアセテートーコー無水マレイン酸（ｐ（ＶＴＦＡ／Ｍ Ａ））　９９．９　：０．１％（ｗ　／　ｗ　）を下記の通りに調製した：メチ ルトリ７／Ｌ／オロアセテート（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、、 　１８１．５ｇ）、ビニルトリフルオロアセテート（６０ｇ）及び無水マレイン 酸（Ａｌｄｒｉｃｈ　Ｃｈｅ＋ａｉｃａｌ　Ｃｏ、、　０．０６ｇ　）を５００ 　＋ｗｌの丸底三つロフラスコの中で合わせた。この溶液に窒素を３分間吸込み 、そして３滴のＤａｒｏｃｕｒｅ　１１７３開始剤（Ｅ３Ｍ、　Ｍｅｒｃｋ）を 加えた。その反応をマグネチンクスターハーを用いて撹拌し、そして氷冷槽の中 で冷却した。

重合を、その反応体に、その反応フラスコから約５〜１０ｃｍ離したサンランプ （２７５ワツト）を用いて照射を付することにより開始させた。５時間後、その 反応を停止させ、そしてその生成物を、その溶媒及び残留モノマーを減圧で除去 することにより単離した。その生成物をアセトン中での溶解及びヘプタンの中で の沈殿により′＃青製して、１．３２の極限粘度数を有するｐ（ＶＴＦＡ／ＭＡ ）　（３４，６ｇ　）を得た。

（０，０５％、０．３％、０．５％及び１％の無水マレイン酸を含む・ボＩＪマ ーを同様にして調製した）。水和ゲルを調製するため、各ｐ（ＶＴＦＡ／ＭＡ） フィルムをアセトンの中に溶かして固形分１０％の溶液にし、そしてドライＮ２ 流のもとてフィルム形質にキャストした。このフィルムを１０％のＮＬＯＨ／Ｍ ｅ０１１の中での２時間の浸漬、続いてＭｅＯＨＯ中での２時間の浸漬により加 溶媒分解し、そしてＨ２Ｏの中で水和させた。

得られる水和ゲルの特性を下記の表３に示す。

表３ 傘これらはポリ（ビニルトリフルオロアセテートーコー無水マレイン酸コポリマ ー）中の重量％である。対応のモル％は０．０７％。

０．１４．０．４３．０．７０及び１．４である。

これらのサンプル上での細胞増殖は、３通りのＭＡモル％：　０．０７　ｉｏ、 １４．及び０．４３を有するポリマー組成物に関して、３日後での約３．０００ の細胞から５日後に６，０００〜１２，０００の範囲まで上昇した。しかし５日 後の細胞は７日後に３，０００細胞末梢へと、そして１０日後に約２．０００細 胞末梢へと死んでいった。

更に、主観的な評価は、ｐ（ＶＡ／ＭＡ）表層上の細胞が「丸くする」傾向にあ ることを決定せしめ、そして細胞増殖を高めるために生物学的に活性な物質をカ ップルさせるアズラクトン官能基を採用する表層はど、ポリマー表層に対して付 着力がなかった。

Ｉ２：セルロース　の　ズー　ン　の１四角いセルロース濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ 　Ｌｔｄ、　Ｍａｉｄｓｔｏｎｅ、　Ｅｎｇｌａｎｄより市販の−ｈａｔｍａｎ 　１４）を１００°Ｃで叶ｆｅｒｉｔｃ　（商標）乾燥剤の上で乾かし、そして 下記の溶液の一つの中で５分間浸漬することにより処理した（１セント当り４つ のサンプル）。

Ａ）メチルエチルケトン（肝に）中の５％のポリＶＤＭＢ）ＭＥＫ中の５％のオ リゴ−ＶＤＭ Ｃ）　ＭＥＫ中のトリス−ＶＤＭ−Ｔ Ｄ）ＭＥＫ中のトリス−νＤＭ−Ｂ これらのサンプルを１０分間風乾しくドライＮ、下で）、そして−サンプルを各 セットから取り出し、そしてＭＥにでよく洗った（そしてサンプルＡ１−口１と ラベルした）。

残りのサンプルを乾燥条件で１００°Ｃで熱し、そしてそのサンプルを３０分後 （サンプルＡ２〜Ｄ２とラベル）、６０分後（サンプルＡ３〜Ｄ３とラベル）及 び９０分後（サンプル＾４〜Ｄ４とラベル）に取り出した。全てのサンプルを？ ＩＥＫでよく洗い、そしてドライＮｔで乾かした。

ＸＰＳ　（ＥＳＣＡ）分析を表４に報告する。

表４ これらのサンプルを拡散反射赤外線フーリエ変換（ＤＲＩＦＴ）スペクトロスコ ピー（Ｐｅｒｋｉｎ　Ｅｌｓｅｒモデル１７５０光度計）により、バックグラン ドスペクトルとして未改質−ｈａｔｍａｎ　１１４紙のサンプルを用いて分析し た（即ち、このことは、試験サンプルと未改質紙との間で異なるスペクトルをも たらす）。ポリｖ叶処理サンプルは全ての加熱サンプルに関して弱い１８２０ｃ ｍ−’のピークを示した。（１８２０ｃ■−１のピークはアズラクトン成分の特 徴である。）オリゴ−ＶＤＭ処理（サンプルＢｌ〜Ｂ４）及びトリス−ＶＤＭ− Ｔ　（サンプルｃ１〜ｃ４）サンプルは１８２０ｃｍ−’の微量な吸収を示した 。サンプル０１〜Ｄ４においてはアズラクトン吸収はこの方法によっては検出さ れなかった。

固定化アズラクトンに対する共有結合を実証するため、Ｗｈａｔｓ＋ａｎＩ４紙 にポリ−ＶＤＭを、３３％の固形分の溶液の中に１５分浸漬し、過剰な？８液を 排液し、ｉｏｏ　’ｃで１時間熱し、ＭＥＫでよく洗い、そしてドライＮ２で風 乾することによりコートした０次にサンプルを０．１ＸのＣＩ　（ＣＨｚ）　Ｊ Ｈｚ−ＨＣＩ又はＣＨｉＣＨｚＳＣＩＩｚＣＨＪＨｚ　・１（ＣＩのいづれかを 含む１．５Ｍのに２ＳＯ４、ｐｌ＋９．０の水性溶液の中で反応させた（室温で ２時間反応）。コントロールとして、サンプルを０．１Ｍのエタノールアミン、 ｐＨ９−０、１，５Ｍのに２Ｓ０４の中で室温で２時間反応させることによりプ レクエンチし、１１□０で洗い、そして上記のクロロプロピルアミン？８′ｍ、 及びエチルチオエチルアミン溶液と室温で４時間反応させた。全てのサンプルを 次にＸＰＳ（ＥＳＣＡ）により分析し、そしてその結果を下記の表５に示す。

表５ ２−アリルオキシ−４，４′−ジメトキシ−２−ヒドロキシベンゾフェノン（２ −アリルオキシ−ＢＰ）及び３−アリル−２，２’−ジヒドロキシ−４，４′− ジメトキシベンゾフェノン（３−アリル−ＢＰ）を下記のプロセスに従って調製 した。８９ｇの２．２′−ジヒドロキシ−４，４′−ジメトキシヘンシフエノン を３９ｇのアリルプロミド、１６５　ｇの炭酸カリウム及び４００１のアセトン に加えた。その混合物を３時間還流し、室温にまで冷やし、そして得られる塩を 溶液から濾過した。その濾液を残留油にまで濃縮し、水及び塩化メチレンを加え 、そして有機層を抽出した。その抽出物を水で更に数回洗った。塩化メチレンを 硫酸マグネシウムで乾がし、そして溶媒を真空のもとでエバポレートして２−ア リルオキシ−ＢＰを含んで成る茶色の油約９４ｇを生成した。

３−アリル−ＢＰを、その１０ｇの茶色油を丸底フラスコの中に入れることによ り合成した。このフラスコを２４０″Ｃの油浴に入れた。撹拌しながら３０分の 加熱の後、その材料を室温にまで冷やし、そして２０１のメタノールを加えた。

溶液が冷えたら、黄色い固形物が沈殿した。メタノールからの２回の再結晶化は 約７０〜７１°Ｃの融点を有する２、５ｇの３−アリル−ＢＰをもたらした。

１４：記入による、　ルの斎　１ 下記の化合物を一緒にし、そして反応槽の中に入れた：　ＰＣＴ公開ＷＯ９２１ ０７８９９（Ｇａｇｎｏｎら）のＥｘａｍｐｌｅ　１に従って調製した１０ｇの ＶＴＦＡ。

上記の実施例１３に従って調製した０、０２５　ｇの３−アリル−ＢＰ。

Ｐｅｎｎｗａ　Ｉ　ｔよりＬｕｐｅｒｓｏｌ　２２５として市販されている０、 ０２ｇのジ（第ニブチル）パーオキシジカルボネート開始剤及び１０ｇのＦｒｅ ｏｎ　ＴＦ、その反応槽を４０°Ｃで１２時間、次いで６０°Ｃで３時間熱して ポリ（ＶＴＦＡ／３−アリル−ＢＰ）を得た。収率は８４％であった。その他の 実験は、配合物中の３−アリル−ＢＰの量を１．０重量％にまで高めると、６％ まで収率が下がることを示した。次にポリ（ＶＴＦＡ／　３−アリル−ＢＰ）を アセトンの中に溶かしく３０重量％）、次いで０ｆｓｔｅａｄ　’６４９のＥｘ ａｍｐｌｅ　８に従って調製したアセトン溶液中の固形分３０重量％のｐ　（Ｖ ＦＴＡ　／　ＶＡｃ）と、５０　：　５０〜９０　：　１０　（ｐ（ＶＴＦ＾／ ＶＡｃ）　：　Ｐ（ＶＴＦＡ／　３−７リルーＢＰ）　）に範囲する配合比で配 合した。その溶液をよく混合し、そしてガラスプレート上にキャストした。厚さ 約０．４−の薄くて非常に強いフィルムが得られる。加溶媒分解及び水和の後、 ％での水取り込み量は５０　：　５０の配合物については５９．２％、そして９ ０　：　１０の配合物については６３．１％に範囲した。比較により、未配合ｐ （ＶＡ　／ＶＡｃ）フィルムは６８．２％の水取り込み量を有した。

１５：此　４による　ル　”　の“　１下記の化合物を一緒にし、そして反応槽 の中に入れた：　ＰＣＴ公開ＷＯ９２１０７８９９のＥｘａｍｐｌｅ　１に従っ て調製した９、８５ｇのＶＴＦ＾、上記の実施例１３に従って調製した０、０２ ５　ｇの３−アリル−ＢＰ、　ＰｅｎｎｗａｌｔよりＬｕｐｅｒｓｏｌ　２２５ として市販されている０、０２　ｇのジ（第ニブチル）バーオキシジカルボネー ト開始剤及び０．０１５　ｇの無水マレイン酸、その反応槽を４０℃で１２時間 、次いで６０’Ｃで３時間熱してポリ（ＶＴＦＡ／３−アリルーＢＰ／ＭＡ）を 得た。収率は９８．３％であった。第二の実験において、その反応槽に２倍量の ３−アリル−ＢＰを入れ、収率は４８．４％に下がった。得られるコポリマーを アセトンに溶かしく固形分３０重量％）、そして実施例１４の配合組成物につい て説明したのと同じようにしてフィルムにした。加溶媒分解及び水和の後、水取 り込み量は０．２５重量％の３−アリル−ＢＰより調製したコポリマーについて は５７．２％、そして０．５０重量％の３−アリル−ＢＰより調製したコポリマ ーについては７８．５％であった。

本発明の範囲の理解のため、下記の請求の範囲が続く。

補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成６年１２月１Ｌ日

Claims (24)

【特許請求の範囲】
1. １．哺乳動物身体移植片であって：アズラクトン反応性求核面を有する水和ゲル 、このアズラクトン反応性求核面に対して少なくとも一のアズラクトン成分を利 用して共有結合している多価アズラクトン組成物、及びこの多価アズラクトン組 成物に対して少なくとも一のアズラクトン成分を利用して複合している生物学的 に活性な物質を含んで成る移植片。
2. ２．前記移植片が義角膜を構成する、請求項１記載の哺乳動物身体移植片。
3. ３．前記生物学的に活性な物質がラミニン、フィブロネクチン、Ｉ型コラーゲン 、ＩＶ型コラーゲン、角膜上皮細胞の細胞外マトリックスから調製した無細胞抽 出物、又はそれらの組合せを含んで成る、請求項１又は２記載の哺乳動物身体移 植片。
4. ４．前記多価アズラクトン組成物が、アズラクトン反応性求核面に共有結合され る前に、少なくとも二のアズラクトンに共有結合している架橋基を含んで成り、 ここでこの架橋基は、１４個までの炭素原子を有するアルキレン基；１０個まで の炭素原子を有するアリーレン基；６個までの炭素原子を有するシクロアルキレ ン基；ミカエルドナー求核化合物と複数の２−アルケニルアズラクトンミカエル アクセプターとのミカエル反応に由来する基、ここでこのミカエルドナー求核化 合物は少なくとも二のアズラクトン反応性成分を有する；又はそれらの組合せを 含んで成り；そして ここでアズラクトンは ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、 Ｒ１及びＲ２は独立して、１〜１４個の炭素原子を有するアルキル基、３〜１４ 個の炭素原子を有するシクロアルキル基、５〜１２個の環原子を有するアリール 基、６〜２６個の炭素原子並びに０〜３個のＳ，Ｎ及び非過酸化Ｏヘテロ原子を 有するアレニル基であるか、又はＲ１及びＲ２はそれらが結合している炭素と共 に４〜１２個の環原子を含む炭素環を形成していてよく、そして ｎは０又は１の整数である）を含んで成る、請求項１又は２記載の哺乳動物身体 移植片。
5. ５．前記水和ゲルがポリ（ビニルアルコール）コポリマーを含んで成る、請求項 １又は２記載の哺乳動物身体移植片。
6. ６．前記求核面にその生物学的に活性な物質において付着している上皮細胞の層 を更に含んで成る、請求項１又は２記載の哺乳動物身体移植片。
7. ７．前記義角膜が、ポリ（ビニルアルコールーコービニルアセテート）及びポリ （ビニルアルコール）のコポリマー、並びに２−アリルオキシ−４，４′−ジメ トキシ−２−ヒドロキシベンゾフェノン、３−アリル−２，２′−ジヒドロキシ −４，４′−ジメトキシベンゾフェノン、２，２′−ジヒドロキシ−４−メトキ シ−４′−（２−メタクリロイルオキシエトキシ）ベンゾフェノン及び４−（２ ′−アクリロイルオキシエトキシ）−２−ヒドロキシベンゾフェノンより成る群 から選ばれるベンゾフェノン紫外光吸収剤のブレンドを含んで成る、請求項２記 載の哺乳動物身体移植片。
8. ８．前記義角膜が、ポリ（ビニルアルコール）のコポリマー；２−アリルオキシ −４，４′−ジメトキシ−２′−ヒドロキシベンゾフェノン及び３−アリル−２ ，２′−ジヒドロキシ−４，４′−ジメトキシベンゾフェノンより成る群から選 ばれるベンゾフェノン紫外光吸収剤、並びに無水マレイン酸を含んで成るコモノ マー、を含んで成る光学要素を含んで成る、請求項２記載の哺乳動物身体移植片 。
9. ９．前記義角膜が、透光性中央領域及び多価アズラクトン組成物と生物学的に活 性な物質との反応生成物を有する前方面を有する光学要素、並びにこの光学要素 の外周に固定されている多孔質外部スカートを含んで成り、ここでこの前方面は 上皮細胞の層を支えることができ、このスカートは細胞の内部増殖及び組織付着 を可能にするのに十分なほど孔質である、請求項２記載の哺乳動物身体移植片。
10. １０．前記多孔質外部スカートが、孔の連続ネットワークを有する無秩序に配向 した溶融延伸ファイバーの凝集塊を含んで成り、そして前記光学要素がポリ（ビ ニルアルコール−コービニルアセテート）コポリマーであり、そして前記多孔質 外部スカートがポリオレフィン材料であり、そして 前記多価アズラクトン組成物が、アズラクトン反応性求核面に共有結合している 前に、２−アルケニルアズラクトンホモポリマー、コポリマーもしくはオリゴマ ー、トリス〔〔２−〔Ｎ−２−（４，４−ジメチル−２−オキサゾリン−５−オ ン−２−イル）エチル，Ｎ−イソプロピル〕−２−アミノ〕エチル〕アミン、又 はＮ，Ｎ′，Ｎ′′−トリス−２−（４，４−ジメチル−２−オキサゾリン−５ −オン−２−イル）エチル−ビス−（Ｎ，Ｎ′′−イソプロピル−２−アミノエ チル）アミンを含んで成る、 請求項９記載の哺乳動物移植片。
11. １１．前記光学要素が上皮細胞でコートされた前方面を有する、請求項１０記載 の哺乳動物身体移植片。
12. １２．トリス〔〔２−〔Ｎ−２−（４，４−ジメチル−２−オキサゾリン−５− オン−２−イル）エチル，Ｎ−イソプロピル〕−２−アミノ〕エチル〕アミン及 びＮ，Ｎ′，Ｎ′′−トリス−２−（４，４−ジメチル−２−オキサゾリン−５ −オン−２−イル）エチル−ビス−（Ｎ，Ｎ′′−イソプロピル−２−アミノエ チル）アミンより成る群から選ばれる多価アズラクトン組成物。
13. １３．２−アリルオキシ−４，４′−ジメトキシ−２−ヒドロキシベンゾフェノ ン及び３−アリル−２，２′−ジヒドロキシ−４，４′−ジメトキシベンゾフェ ノンより成る群から選ばれるベンゾフェノン紫外光吸収剤。
14. １４．アズラクトン官能基材であって、アズラクトン反応性求核面を有し、セル ロース；改質セルロース誘導体；アガロース；デキストラン；キチン；キトサン ；ヒドロキシエチルメタクリレート、ヒドロキシプロピルアクリレート、Ｎ−メ チロールアクリルアミド、アリルアルコール、アリルアミンもしくはＮ−〔３− （Ｎ′−イソプロピル）アミノプロピル〕メタクリルアミドモノマーに由来する ポリマー；ポリ（ビニルアルコール）コポリマーより成る群から選ばれる基材、 及び更なる求核反応にとって有効な少なくとも一のアズラクトン成分を残したま まで少なくとも一のアズラクトン成分を利用してこの基材に共有結合している多 価アズラクトン官能組成物、を含んで成るアズラクトン官能基材。
15. １５．前記多価アズラクトン組成物が、アズラクトン反応性求核面に共有結合さ れる前に、少なくとも二のアズラクトンに共有結合している架橋基を含んで成り 、 ここでこの架橋基は、１４個までの炭素原子を有するアルキレン基；１０個まで の炭素原子を有するアリーレン基；６個までの炭素原子を有するシクロアルキレ ン基；ミカエルドナー求核化合物と複数の２−アルケニルアズラクトンミカエル アクセプターとのミカエル反応に由来する基、ここでこのミカエルドナー求核化 合物は少なくとも二のアズラクトン反応性成分を有する；又はそれらの組合せを 含んで成り；そして ここでアズラクトンは ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、 Ｒ１及びＲ２は独立して、１〜１４個の炭素原子を有するアルキル基、３〜１４ 個の炭素原子を有するシクロアルキル基、５〜１２個の環原子を有するアリール 基、６〜２６個の炭素原子並びに０〜３個のＳ，Ｎ及び非過酸化Ｏヘテロ原子を 有するアレニル基であるか、又はＲ１及びＲ２はそれらが結合している炭素と共 に４〜１２個の環原子を含む炭素環を形成していてよく、そして ｎは０又は１の整数である）を含んで成る、請求項１４記載のアズラクトン官能 基材。
16. １６．前記多価アズラクトン組成物が、２−アルケニルアズラクトンホモポリマ ー、コポリマーもしくはオリゴマー、トリス〔〔２−〔Ｎ−２−（４，４−ジメ チル−２−オキサゾリン−５−オン−２−イル）エチル，Ｎ−イソプロピル〕− ２−アミノ〕エチル〕アミン又はＮ，Ｎ′，Ｎ′′−トリス−２−（４，４−ジ メチル−２−オキサゾリン−５−オン−２−イル）エチル−ビス−（Ｎ，Ｎ′′ −イソプロピル−２−アミノエチル）アミンを含んで成り、そして前記基材が天 然又は合成組成物を含んで成り、ヒドロキシル、アミン又はチオール成分を含ん で成るアズラクトン反応性求核成分の存在によりアズラクトン反応性求核面を有 している、請求項１４記載のアズラクトン官能基材。
17. １７．前記基材がセルロース、改質セルロース誘導体、アガロース、デキストラ ン、キチン、キトサン；ヒドロキシエチルメタクリレート、ヒドロキシプロピル アクリレート、Ｎ−メチルロールアクリルアミド、アリルアルコール、アリルア ミン及びＮ−〔３−（Ｎ′−イソプロピル〕アミノプロピル〕メタクリルアミド を含んで成るモノマーに由来するポリマー；並びにシリカゲル及びガラス粒子の 如きのポリマーの改良により誘導されたポリマーであってそのエポキシド成分の 加水分解後にγ−トリエトキシシリルプロピルアミン、γ−トリエトキシシリル プロバン−１−チオール又はγ−グリシドキシプロピルトリメトキシランと反応 させたものを含んで成る、請求項１６記載のアズラクトン官能基材。
18. １８．前記基材がポリ（ビニルアルコール）コポリマーを含んで成る水和ケルで ある、請求項１４記載のアズラクトン官能基材。
19. １９．請求項１４記載のアズラクトン官能基材と生物学的に活性な物質との反応 生成物を含んで成る、生物学的に活性な基材。
20. ２０．前記基材が次式を有する、請求項１４記載の基材▲数式、化学式、表等が あります▼ （式中、 Ｒ１及びＲ２は独立して１〜１４個の炭素原子を有するアルキル基、３〜１４個 の炭素原子を有するシクロアルキル基、５〜１２個の環原子を有するアリール基 、６〜２６個の炭素原子並びに０〜３個のＳ，Ｎ及び非過酸化Ｏヘテロ原子を有 するアレニル基であるか、又はＲ１及びＲ２はそれらが結合している炭素原子と 共に４〜１２個の環原子を含む炭素環を形成していてよく、そしてｎは０又は１ の整数であり： ｙは少なくとも１であり、且つアズラクトン成分の数より少なくとも１少なく； Ｒ２は複数のアズラクトン成分を共有結合させることのできる架橋基であり；そ して Ｂはアズラクトン反応性求核面を有する基材であり、そしてＡはこの基材の上の アズラクトン反応性求核基の残基であり、そのアズラクトン基求核基はＯ，Ｓ又 はＮＲ４を含んで成り、ここでＲ４は水素であるか、又は１〜４個の炭素原子を 含むアルキル基である）。
21. ２１．アズラクトン官能水和ゲルの製造方法であって：（ａ）アズラクトン反応 性求核面を有する組成物を含んで成る水和ゲルを脱水状態で形成し： （ｂ）更なる求核反応にとって有効な少なくとも一のアズラクトン成分が残るこ とを維持するように多価アズラクトン組成物を脱水状態の水和ゲルのアズラクト ン反応性求核面と反応させる；ことを含んで成る方法。
22. ２２．哺乳動物身体移植片を形成する方法であって：（ａ）請求項２１記載の方 法に従ってアズラクトン官能水和ゲルを形成し；そして （ｂ）生物学的に活性な物質を少なくとも一のアズラクトン成分と反応させる； ことを含んで成る方法。
23. ２３．前記反応段階の後に、前記生物学的に活性な物質に哺乳動物細胞をかぶせ る段階を更に含んで成る、請求項２２記載の方法。
24. ２４．前記移植片が義角膜を含んで成り、そしてここで前記水和ゲルが外周を有 する光学要素を含んで成り、そして前記方法が多孔質外部スカートをその外周に 固定する段階を更に含んで成る、請求項２２記載の方法。