JPH07505858A - 組織の修復および再生促進方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 組織の修復および再生促進方法 主凱皇丘景 ポリペプチド成長因子は、はとんど全てのタイプの細胞の増殖、分化、固有運動 性および基質合成を調節する、天然の生物学的調整物質の仲間である。インビボ で明らかなこれらの特性によって、そのような因子は、軟組織および硬組織の修 復に重要な役割を果たすということが提唱されるに至った。血小板由来成長因子 （ＰＤＧＦ）は、よく特性が調べられたそのようなポリペプチド成長因子の例で ある。

ＰＤＧＦは、血液血小板によって産生されるペプチドホルモンで、創傷修復、動 脈硬化症、新形成、胚形成および骨髄線維症を含む広範囲の生物学的システムに 影響を与える。ＰＤＧＦは有糸分裂促進因子（マイトジェン）、すなわち、細胞 の有糸分裂を誘発し、したがって細胞増殖を誘発する物質である。創傷修復では 、ＰＤＧＦは、線維芽細胞、平滑筋細胞、ダリア細胞等の化学走性反応および有 糸分裂促進反応の両方を誘発する。

血管壁に並ぶ内皮の損傷は、創傷部位の露出結合組織に血小板を吸着させ、同時 にＰＤＧＦを遊離させると考えられている。

この遊離ＰＤＧＦは、線維芽細胞、単球、ダリア細胞および平滑筋細胞を含む多 くのタイプの細胞を、化学走性的に創傷部位に集合させると考えられる。これら の細胞の分裂強化によって、組織再生および創傷治癒の促進が達成される。

ＰＤＧＦの有糸分裂促進特性は、成長因子の添加によって強化できることが示さ れた。例えば、アントネートら（米国特許第４８６１７５７号および４８７４７ ４６号）は、ＰＤＣＦとインシュリン様成長囚子１　（ＩＣ，Ｆ−１）または形 質転換成長因子アルファ（ＴＧＦ−α）との併用は、ＰＤＧＦ単独より細胞の有 糸分裂促進活性に対する効果を強化することを示した。

ＰＤＧＦと他の化合物を併用する効果は、それほど明瞭ではない。レベンソンら （Ｌｅｖｅｎｓｏｎら、Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、、　２６０：８０５６− ６３　（１９８５）　）は、合成のｔＪ！ｘコルチコイドであるデキサメタシン は、軟骨由来成長因子（ＣＤＣＦ）と和動的に作用して休止期にあるスイス３Ｔ ３細胞のＤＮＡ合成の活性化を強化するが、ＰＤＧＦとは曖昧な効果しかもたな いことを示した。さらに、レベンソンらは、ＣＤＣＦ刺激培養にデキサメタシン を添加しても、ＰＤＧＦ単独で認められた効果を越えるＤＮＡ合成に対する効果 を表さないことを示した。

髪班生斐丘 本発明は、哺乳類で組織の再生および／または創傷修復を強化する方法に関する が、該方法は、ｍ織または創傷に有効量の抗炎症性化合物およびＰＤＧＦを含む 組成物を適用することを含む、この方法は、創傷治癒を迅速に処理する細胞活性 を、創傷部位において促進する。

より具体的には、ＰＤＣ，Ｆと抗炎症性化合物との併用は、哺乳類細胞の該当部 位における分裂増殖を和動的に促進する。天然または遺伝子組み換え（リコンビ ナント）ＰＤＧＦのいずれも該組成物に用いることができる。多くの抗炎症性薬 剤が、細胞に対するＰＤＧＦの有糸分裂促進効果を和動的に強化することが見出 された。特に有用である抗炎症性剤は、糖質コルチコイドとして知られる種類で ある。糖質コルチコイドには、例えばコーチシン、ヒドロコーチシン（コーチゾ ル）、デキサメタシン、および薬理的に活性なそれらの誘導体が含まれる。

本発明の方法は、種々の組織の組織再生および／または創傷治癒を促進するため に用いることができる。当該方法は、上皮性組織の組織再生および創傷治癒の強 化、並びに骨および／または軟骨組織の再生促進のために有効である。一般に、 損傷または疾病による上皮、骨または軟骨の、例えば破壊、裂傷または庚濶部位 に該組成物を適用することによって、　該上皮、骨または軟骨の再生および修復 が促進される。

該方法は、歯根膜疾患に冒されている組織の治療に特に有効である。この方法は 、ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物の組成物を、冒された歯肉＆［Ｉ織および靭帯 に適用することによって実施される。該組成物は、歯肉組織、歯の組織（例えば 象牙質および歯髄）および歯肉内で歯を支える結合組織の再生を促進する。

本方法は、皮膚潰瘍、火傷、病巣を含む外傷の治療並びに結合組織および／また は骨の再生のために有効な治療組成物を提供する。該方法は、歯根膜疾患に冒さ れている歯の組織の治療に特に有効である。

ｎ象説泗− 図１は、ＰＤＣ，Ｆ単独およびＰＤＣ；Ｆ＋ＩＧＦ−１の有糸分裂促進活性にお けるデキサメタシンの影響を示すグラフである。

図２は、種々の濃度のデキサメタシンおよびＰＤＣ；Ｆ＋ＩＣ。

Ｆ−１の細胞集団密度における効果を示すグラフである。

図３は、参考コントロールとしてＰＤＧＦ＋ＩＧＦ−１を用いた、ＰＤＧＦの有 糸分裂促進活性におけるデキサメタシンの影響を示すグラフである。

図４は、ＰＤＧＦ−ααおよびＰＤＧＦ−ββの有糸分裂促進活性を比較するグ ラフである。

光里■笠に星に班 本方法は、ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物の組み合わせを組織に適用することを 含む。

天然のＰＤＧＦは、２個のポリペプチド鎖を含む二量体で、ポリペプチド鎖の１ つまたは２つ以上は垢付加されているかもしれない、この２つの鎖（アルファ（ α）およびベータ（β）と呼ぶ）は、相同ではあるが同一ではない、α鎖は分子 量がおよそ１７０００から１８０００で、β鎖は分子量がおよそ１３０００から １４０００である。αおよびβ鎖は、インビボでより大きな分子から合成され、 この分子は、続いてアミノ末端およびカルボキシ末端でプロセッシングを受ける 。成熟ヒトα鎖は、１１０から１２５個のアミノ酸および種々のＮ−結合糖側鎖 を含み、その長さおよびアミノ酸シーケンスは、それが由来した組織に依存する 。完全にプロセッングされたヒトβ鎖は、Ｃ−シス遺伝子によってコードされ、 １１２個のアミノ酸を含む。

生物学的に活性なＰＤＧＦは、同種二量体（例えばαα、ββ）または異種二量 体（αβ）として存在しえる。αα同種二量体およびββ同種二量体の分子量は 、それぞれ、およそ３５０００およびおよそ３２０００である。

本発明で有用なＰＤＧＦは天然由来でちりコンビナンド又は合成ＰＤＧＦでもよ い。天然由来は、例えば、ハイジンら（Ｈｅｉｄｉｎら（１９７９）Ｐｒｏｃ、 　Ｎａｔｌ、＾ｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　７６：３７２２−３７２６）、 アントニア−デスら（Ａｎｔｏｎｉａｄｅｓら、（１９７９）Ｐｒｏｃ、　Ｎａ ｔｌ、　Ａｃａｄ。

Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　７６：１８０９−１８１３）、アンドニア−デスら（Ａｎ 　ｔｏｎ　１ａｄｅｓら、米国特許第４．４７９，８９６号）およびリプトンら ＣＩｊｐｔｏｎら、米国特許第４，３５０，６８７号）によって記載されたよう に、ヒト血小板から抽出できる。リコンビナントＰＤＧＦは、形質転換した真核 細胞（例えば酵母）（ヨーロッパ特許出願公告第０１７７９５７号参照）または 原核細胞（例えばｌ−±土工上（大腸菌））を用いて製造することができる。Ｐ ＤＧＦは、また、当該技術分野で既知のペプチド合成技術を用いても合成するこ とができる。ＰＤＣ；Ｆの生物学的に活性なフラグメント、その誘導体または変 異形は、本発明において用いることができる。使用できるＦＤＣＦは、例えばア ムジエンコーポレーション（Ａｌｌｇｅｎ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ。

Ｔｈｏｕｓａｎｄ　０ａｋｓ、　カリフォルニア）　、ＦＤＣＦ社（ＰＤＧＦ　 Ｉｎｃ、。

ボストン、マサチューセッツ）、コラポラティプリサーチ社（Ｃｏｌｌａｂｏｒ ａｔｉｖｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｉｎｃ、＋　Ｗａｌｔｈａｍ、マサチューセッ ツ）およびクリアティブバイオモリキュールズ社（Ｃｒｅａｔｉｖｅ　Ｂｉ。

Ｍｏ１ｅｃｕｌｅｓ、　Ｉｎｃ、＋ホブキントン、マサチューセッツ）から市販 されている。

抗炎症性化合物は、原因物質に直接拮抗することなく身体機構に作用することに よって、炎症を減少させる化合物である。

本発明の方法で特に有用な抗炎症性化合物の種類には、糖質コルチコイドが含ま れる。＄Ｊ１質コルチコイドは、例えばコーチシン、ヒドロコーチシン（コーチ ゾル）、デキサメタシンおよび薬理学的に活性なこれら薬剤の誘導体（例えば、 酢酸ヒドロコーチシン）を含む、デキサメタシンおよびコーチゾルは、多数の発 売元、例えばシグマケミカル（セントルイス、ミグ−１月から市販されている。

創傷治癒および組織再生は、ＰＤＣ，Ｆおよび選択した抗炎症性化合物を含む有 効量の組成物を、冒された組織に対して直接、局所に適用することによって促進 することができる。当該組織は、外部上皮組織、内部上皮組織、骨、軟骨、歯肉 ｍｍ、象牙質、歯髄、セメント質または歯根膜結紮を含む歯の組織が可能である 。

ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物の濃度は、部分的には選択された化合物、その効 力およびそれを適用される組織に依存する。

その量は、低用量を通用し、その効果を観察し、さらに所望の効果が得られるま で用量を段々に増加させることによって、経験的に決定できる。ＰＤＧＦの量は およそ０．１Ｍｇ／ｍｌからおよそ！　Ｑ　ｍ　ｇ　／　ｍ　］が、殆どの通用 について有効である。多くの糖質コルチコイドについては、およそ１０−５Ｍか らおよそ１０−”Ｍの濃度を用いることができる０例えば、デキサメタシンは、 およそ１０−５Ｍからおよそ１０−”Ｍの濃度が、ＰＤＣ，Ｆの活性を顕著に増 強させることが示された。およそ３．９２ｇ／ｍ　Ｉ　（１０−’Ｍ）からおよ そＯ，０００３９２ｍｇ／ｍ１（１０−”Ｍ）のデキサメタシン（分子量がおよ そ３９２　ｇ／ｍｏｌｅ）を含む組成物が、殆どの適用について好ましい、およ そ１０−’Ｍからおよそ１０１Ｍの濃度が非常に好ましい。

他の成長因子、例えば形質転換成長因子α（ＴＧＦ−α）およびインシュリン様 成長因子（ＩＧＦ−１）は、ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物を含む組成物に加え ることにより、さらに損傷組織の治癒または再生を強化することができる。ＴＧ Ｆ−α、ＩＧＦ−１または他の成長因子は、重量／重量比、例えばおよそ１：４ および２５：１、好ましくはおよそ１：２から１０：１の間で、より好ましくは １：１または２：１でＰＤＣ；Ｆ混合物に加えることができる。

本発明の好ましい具体例では、ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物の組成物は、小域 的、局所的投与用に医薬的に許容できる担体物質と組み合わせられる。医薬的に 許容できる担体には、例えば市販の不活性ゲル、またはアルブミン補充液、メチ ルセルロースまたはコラーゲン基質が含まれる。そのような製剤の典型例は、軟 膏、クリームおよびゲルである。軟膏は、油性基剤例えば不揮発油または炭化水 素含む、例えば白色ワセリンもしくは鉱物油、または、吸湿基剤例えば吸湿性無 水物を含む、例えば無水ラノリンを用いて製造できる。基剤の生成に続いて、活 性成分を所望の濃度に加える。クリームは、典型的には不揮発油、炭化水素など を含む油相（内部相）、例えば、ワックス、ワセリン、鉱物油など、および水相 （連続相）を含むが、この水相は、水および水溶性物質のいずれか、例えば添加 塩を含んでいる。二〇二相は、乳化剤、例えば界面活性剤（例えばラウルル硫酸 ナトリウム）；親水性コロイド（例えばコロイド性アラビアゴム白土、ビーガム など）を用いて安定化させる。活性述べたように、ゲルは、油性基剤、水または 乳濁−懸濁基剤から選ばれる基剤を含む、この基剤に対して、ゲル化剤を加える 。

このゲル化剤は基剤のマトリクスとなり、基剤の粘性を半固形の固さにする。ゲ ル化剤の例は、ヒドロキシプロピルセルロース、アクリル酸ポリマーなどである 。活性成分は、ゲル化剤の添加前の時点で所望の濃度で製剤に加えられる。

本発明の製剤中に含まれるＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物の量は決定的なもので はない、該濃度は、所望量のＰＤＣ；Ｆおよび抗炎症性化合物を送達できる量で 、創傷領域に該組成物を容易に適用させることが十分に可能なものであるべきで ある。ＰＤＧＦおよびデキサメタシンの局所投与に有用な典型的なゲル組成物は 、例えば、以下のものを含む：重量％ 滅菌蒸留水　９２．３８ 二塩基燐酸ナトリウム　０．０３ カルバポル＠０．５ グリセリン　１．６ ｍ−クレゾール　０．２５ 水酸化ナトリウム（ＩＮ）　０．５ 米国特許第４９７５５２６号（本明細書に参考文献として含まれる）に記載され たように、骨コラーゲンマトリクスは、骨および／または軟骨への適用のための 担体として用いることができる。本特許出願に記載したコラーゲンマトリクスは 、生物分解性、生物適合性、鉱物非含有、不溶性タイプ−■骨コラーゲン粒子で 、非コラーゲン蛋白は除去されている。該コラーゲンマトリクス粒子は、平均直 径がおよそ７０μｍ−８５０μｍで、未処理物質と比較して粒子内表面積が大き い０本具体例では、ＰＤＧＦおよび抗炎症性薬剤は、まず適切な溶媒、例えば緩 衝滅菌食塩水に溶解され、続いてコラーゲンマトリクスに加えられる。混合物は 、ポルテックスミキサーで激しく攪拌され、さらにマトリクスは凍結乾燥され、 所望の通りに成形するか、または充填により骨または軟骨部分に埋め込まれる。

他の有用なマトリクス物質には、グリコール酸および乳酸の合成ホモポリマーお よびコポリマー、ヒドロキシアパタイト、燐酸三カルシウムおよび他の燐酸カル シウム、並びに粒子化脱ミネラル種特異的（アロジェニック）グアニジン抽出骨 が含まれる。ＰＤＧＦおよびステロイドを含むマトリクスは、骨または軟骨欠損 を補う形にして適用し、分化組繊細胞が固着し増殖するための基礎としての”一 時的足場”および土台として機能させることができる。

当該方法は、歯根膜疾患に冒された組織の治療に特にを用である。歯根膜疾患は 、歯肉炎、歯槽骨および歯根膜靭帯の破壊、歯根膜ポケットの形成をもたらす上 皮性の連結部の根尖移動という特徴をもつ。したがって、上皮、軟骨および骨を 含む多数の異なる組織が巻き込まれる。本発明の方法は、歯肉組織（上皮組織） 、歯根膜靭帯（軟骨）および顎の骨（骨）の治癒および再生を促進する。歯根膜 疾患によって浸食または攻撃される歯の内部の歯髄および象牙質の組織は、本発 明の方法を用いて再生させることができる。この方法の最も好ましい組成物は、 ＰＤＧＦおよびデキサメタシンの組み合わせである。

下記実施例で示したデータは全て、ＰＤＧＦ有糸分裂促進性は、Ｗ質コルチコイ ドの存在によって増強されることを明らかにしている０文献に記載されているこ れまでの方法は、別のヒト成長因子、ＩＧＦ−１をＰＤＧＦと併用して、インビ ボで組織修復を強化または再生を抑制するための薬剤としてのＰＤＧＦの使用を 開示している。これは、実際上、本明細書で述べたように少量（例えば１０−’ Ｍ）の糖質コルチコイド薬を用いるより、はるかに高価で効果はよ、り少ない、 さらに、糖質コルチコイドは抗炎症特性をもち、これは、炎症が存在する、例え ば多くの歯根膜疾患について有益である０本明細書で明らかにしたように、およ そ１０−’Ｍからおよそ１０−”Ｍの好ましい濃度での糖質コルチコイド薬の添 加は、１Ｍｇ　／　ｍ　１のＩＧＦ−１を添加するより、組織の再生および修復 の基礎である細胞増殖にとって常により効果的であった。

本発明は、説明のために本明細書に含まれる以下の非制限的特定例によって、よ り容易に理解されるであろう。

裏隻斑 ＸＪＬ３ＬＬ：ＦＤＣＦ゛よびＩＧＦ−１の　、＼　゛「　の−′キサメ　シン による 以下の実験は、摘出歯の歯根膜靭帯および歯髄から得られた低継代ヒト二倍体線 維芽細胞で、全て実施された。細胞は標準的培養条件下で培養し、ストックは、 成長因子のソースとして１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を用いて増殖させた。こ こで詳述する実験のために、細胞は１．８８ｃｍ”の表面積当たり１００００か ら１５０００細胞で２４穴（ウェル）培養プレートに撒き、処置前２４から４８ 時間、０．１％ＦＢＳ含有培養液で条件づけした。細胞は、続いて培養液中の指 示した濃度のＰＤＧＦ、ＩＣＦ−１および／またはデキサメタシンをＯ時間目に １度曝した。各ウェルから細胞を定量的に採集し、さらに全細胞集団密度を、標 準的方法によりコールタ−カウンターを用いてめた。これらの実験で用いたＰＤ ＧＦ−ββおよびＰＤＧＦ−ααは、大腸菌で産生されたヒトＰＤＧＦリコンビ ナント類似体で、これらはクリアテイブバイオモリキュールズ（Ｃｒｅａｔｉｖ ｅ　ＢｉｏＭｏｌｅｃｕｌｅｓ、ホブキントン、マサチューセラ・ン）から提供 された。デキサメタシンは、シグマケミカル（ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ　Ｃ ｏＢａｎｙ＋　セントルイス、ミズーリー）から購入した。

上記に述べたように調製した２４ウエルプレートの細胞培養を以下の物質で処理 し、細胞増殖度をめた。

プレート１は０．１％ＦＢＳを含み、 プレート２は０．１％ＦＢＳを含み、 プレート３は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββ＋２００　ｎｇ／ｍｌのＩＣＦ −１を含み、 プレート４は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββ＋２００　ｎｇ／ｍｌのＩ　Ｇ Ｆ−１＋１０−’Ｍのデキサメタシンを含み、プレート５は２００ｎｇ／ｍｌの ＰＤＧＦ−ββ＋２００　ｎｇ／ｍｌのＩＣＦ−１＋ｌＯ−ｂＭのデキサメタシ ンを含み、プレート６は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββ＋２００　ｎｇ／ｍ ｌのＩＧＦ−１＋１０−’Ｍのデキサメタシンを含み、プレート７は２００ｎｇ ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββ＋２００　ｎｇ／ｍｌのＩＧＦ−１＋１０−”Ｍのデキ サメタシンを含み、プレート８は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββ＋２００　 ｎｇ／ｍｌのＩ　ＣＦ−１＋１０−”Ｍのデキサメタシンを含み、プレート９は ２００ｎｇ／ｍｌのＦＤＣＦ−ββ＋２００　ｎｇ／ｍｌのＩ　ＣＦ−１＋１０ −”Ｍのデキサメタシンを含み、プレート１０は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ− ββ＋２００ｎｇ／ｍｌのＩ　ＧＦ−１＋１０−”Ｍのデキサメタシンを含み、 プレート１１は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββ＋１０−７Ｍのデキサメタシ ンを含み、 プレート１２は２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＧＦ−ββを含む。

プレート１を除くすべてのプレートは９６時間培養した。プレート１は３０分培 養した。細胞を続いてプレートから取り出し計測した。細胞の有糸分裂活性にお ける薬剤の効力は、培養後の１ｃｍ”当たりの細胞数によって測定された。

結果は図１−２に示す。図１は、ＰＤＧＦと組み合わせてデキサメタシンで処理 した培養は、ＰＤＧＦ単独およびＰＤＧＦ＋ＩＣＦ−１で処理した培養より速く 増殖することを示している０図２は、デキサメタシンは、１０−５から１０−” Ｍの間の濃度ですべての増殖を強化する効力があることを示している。

２００ｎｇ／ｍｌのＰＤＣＦの有糸分裂促進活性を最も強化するデキサメタシン の濃度は、およそ１０−’Ｍである。細胞の有糸分裂活性は、ＰＤＧＦ単独また はＰＤＧＦ＋ＩＧＦ−１よりもデキサメタシンとＰＤＧＦの併用によって強化さ れた。しかし、ＰＤＣ，ＦとデキサメタシンにＩＧＦ−１を加えても、有糸分裂 活性はさらに強化されはしなかった。デキサメタシン単独では、図４に示したよ うに細胞の有糸分裂活性に影響はなかった。

皇施土に一゛キサメ　シンとＩＣＦ−との　、〜　・　に・るｔ　の　日　゛に おしる ＰＤＧＦ−ββの有糸分裂促進活性におけるデキサメタシンの影響のタイムコー スを決定するために、培養を、ＰＤＧＦ＋ＩＧＦ−１並びに１０−７および１０ −”Ｍのデキサメタシン含有並びに非含有ＰＤＧＦで処理し、１６０時間にわた って指定された時間に培養を採集し計測した。明瞭さを期すために２つの別々の 図表に、同一実験からのデータを記入した。

図３に示したように、結果は、ただ１回０時間にＰＤＧＦ。

ββ＋デキサメタシンに培養細胞を曝すことにより、ＰＤＧＦ−ββ＋ＩＣＦ− １に細胞を曝すことによって得られる細胞集団の最終的増加と同じ細胞集団増加 をもたらすことを明らかにした。最終的全細胞数は、ＰＤＧＦ−ββＬｏｎｇ／ ｍｌおよび５００ｎｇ／ｍｌでの処理について同じであった。ＰＤＧＦ−ββ＋ Ｉ　ＧＦ−１処理培養は、９６時間で最大細胞集団密度に達したが、ＰＤＧＦ− ββ＋デキサメタシンに曝したものは１６０時間までには定常値に達せず、細胞 増殖におけるＰＤＧＦ＋デキサメタシン単回投与の持続効果を示した。

災施炭主：ＰＤＧＦ−ααおよびＰＤＧＦ−の　、遣間止見止較 上記のように調製したプレートを、ＰＤＧＦ−ααまたはＰＤｉｍ、Ｆ−ββお よびデキサメタシンまたはＩ　ＣＦ−１で処理し、細胞増殖度をめた。

ＰＤＣＦ− プレート１は０．１％ＦＢＳ＋１０−’Ｍデキサメタシンを含む、プレート２は ＰＤＣ；Ｆ−ββ５００ｎｇ／ｍｌを含む。プレート３は、ＰＤＣ，Ｆ−ββ５ ００ｎｇ／ｍｌ＋ＩＣＦ−１，５００ｎｇ／ｍｌを含む。プレート４は、ＰＤＧ Ｆ−ββ５００　ｎ　ｇ／ｍ　ｌ　＋　１０−’Ｍデキサメタシンを含む。

ＰＤＣ；Ｆ−αα プレート５は０．１％ＦＢＳ＋１０〜７Ｍデキサメタシンを含む。プレート６は ＰＤＧＦ−αｃｒ５００　ｎ　ｇ／ｍ　１を含む、プレート７は、ＰＤＧＦ−ｃ ｒｃｒ５００ｎｇ／ｍｌ＋Ｉｃ；Ｆ−１，５００ｎｇ／ｍｌを含む、プレート８ は、ＰＤＧＦ　−αα５００　ｎ　ｇ／ｍ　１　＋　１０−’Ｍデキサメタシン を含む。プレート８は、ＰＤＧＦ−αα５００ｎｇ／ｍ＋＋１０−’Ｍデキサメ タシンを含む。

図４に示す、この実験の結果は、デキサメタシンはＰＤＣ，Ｆ−ααおよびＰＤ ＧＦ−ββ両方の有糸分裂促進活性の効果を高めることを示した。図４に示した ように、ＰＤ（１，Ｆ＋デキサメタシンの単回通用後、１６８時間の細胞増殖速 度は減少するようには見えなかった。表１に示したデータは、ＰＤＧＦ−ββは 、ＰＤＧＦ−ααよりこれらの細胞に対してより強力なマイトジェンであり、さ らに、ＰＤＧＦ−ββ処理培養は、ＰＤＧＦ−αα処理培養よりもデキサメタシ ンに対して感受性がわずかに高いかもしれないことを提示している。

亙盗集皿１皮止 データは、繰り返し実験からの細胞／ｃｍ”の平均比である。

土坐也亘１．斑 当業者ならば、単なるルチーン実験により、ここで述べた具そのような相当例は 、以下の請求の範囲内に包含されるものである。

ＦＩＧ、　２ ＤＥＸＡＭＥＴＨＡＳＯＮＥ ＦＩＧ、３Ａ ０ＵＲ１３ ＋０．１％ＦＢＳ　−ｅ−ＰＤＧＦｂｂ＋ＩＧＦ−１５００ｒ＋ｑ／ｍｌ÷ＰＤ ＧＦＩ）ｂ　５００ｎｇ／ｍｌ＋ＩＱ−７ＭＤＥＸ＋　Ｐｂｂ　５００ｎｇ／ｍ ｌ　＋ｌ０−１２Ｍ　ＤＥＸＩＧ−３Ｂ ０ＬＩＲ３ ＋０１％ＦＢＳ　−ｅ−ＰＤＧＦｂｂ＋　ＩＧＦ−１５００ｎｇ／ｒｎｌＦＩＧ 、４Ａ ＯＵＲ３ ＦＩＧ、　４Ｂ ＰＣＴ／ＵＳ　９２１０２０４３ フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，６識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　４５１０６　 ８４１５−４Ｃ（７２）発明者　ルーサーフオード、ロバート　ブルースアメリ カ合衆国　０２０３２　コネチカット。

ファーミントン、キャンドルウッド　レーン１５ Ｉ （７２）発明者　チャレット、マーク　エフ。

アメリカ合衆国　０２１９２　マサチューセッツ、ニードハム、エリコツト　ス トリート

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. １．ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物を含む組成物の、哺乳類の組織の再生または 修復を促進する医薬の製造のための用途。
2. ２．ＰＤＧＦおよび抗炎症性化合物を含む組成物の、哺乳類の歯の組織を再生ま たは修復する医薬の製造のための用途。
3. ３．該組織が上皮を含む、請求の範囲第１項または第２項に記載の用途。
4. ４．該組織が骨または軟骨を含む、請求の範囲第１項または第２項に記載の用途 。
5. ５．該抗炎症性化合物が糖質コルチコイドを含む、請求の範囲第１項または第２ 項に記載の用途。
6. ６．該糖質コルチコイドがデキサメタゾンである、請求の範囲第５項に記載の用 途。
7. ７．該組成物がさらに医薬的に許容できる担体を含む、請求の範囲第１項または 第２項に記載の用途。