JPH07505056A - 成育促進及び肉質改善用の腸球菌含有脂肪マイクロカプセル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 成育促進及び肉質改善用の腸球菌含有脂肪マイクロカプセル 発明の背景 抗生物質としての成長促進剤は家禽乳　すなわちニワトリや七面鳥に広く利用さ れている。これら抗生物質としては（シサリチル酸パンドラシンメチレンである ）ＳｔａｆａｃやＢＭＤ　（いずれも登録商標）が公知であり、家禽類の望まし い成長特質を促進するために、飼料配合剤として例えば１トンにつき１０グラム や２５グラムの獣医学レヘル以下で使用されている。ところが、抗生物質をこれ ら目的に使用することについて近年いくつの批判がある。例えば、家禽類が抗生 物質耐性を示すようになる結果、これら抗生物質が成長促進剤として作用しなく なる恐れかある。また、合成の抗生物質配合剤やこれらがもつかもしれない不純 物混和作用について健康上の懸念が指摘されている。にもかかわらす、抗生物質 の使用にはいくつかの利点かあるため、飼料転換の改善、肉組成の改善や成長促 進を目的として依然として利用されている。

一方、ある種の細菌について、動物飼料に配合した場合、それが潜在的に有益で あることか知られている。すなわち、これら細菌は天然の腸内マイクロフローラ を与える点で有益である。いくつかの会社は望ましい細菌を含む共生物質を市販 している。ところが、共生物質の大きな欠点は安定な製品を維持できないことで ある。例えば、共生物質の配合量はかなり低く、飼料に配合する場合はおよそ０ ．　１％レベルである力（農家などでは、共生物質含有飼料や飼料配合物を、使 用しない場合、長期間保存しなければならない。多くの場合、この保存条件下で は温度が高く、湿度が相当ある。また、細菌が活性（１，即ち成長を開始するの にちょうどよい湿度であっても、この湿度が細菌を維持するのに不十分な場合が ある。

この結果、細菌が死滅する。換言すれば、共生物質の活性が失われる。さらに、 共生物質含有飼料や飼料配合物に抗生物質を配合すると、悪いことに、これが細 菌と相互作用することがある。これは特に湿度が低い場合にいえ、同じように細 菌が死滅することになる。このように、共生物質の長期間保存安定性には大きな 問題かある。

また、例えばニワトリの飼料に共生物質を配合する場合、普未　共生物質を配合 してから飼料をペレット化する。このペレット化時に使用する蒸気からの水分が 細菌を活性化するが、水分が細菌を維持するには不十分である結果、この水分に より細菌が死滅することになる。ここでもまた、細菌が実際に腸に達する前に、 細菌か胃の酸性環境によって潜在的に不活性化する問題がある。このように、小 腸の前にある消化管に存在する湿度条件や不利なｐＨ条件により早めに放出され る前Ｅ、共生物質が腸内において適当な時期でのみ微生物を放出する必要が依然 としである。

家禽類の場合、可能な限り、実現すべき特質がある。

即ち、体重増加臥　すぐれた飼料変換臥　肉組成や羽毛量の均一性である。いう までもなく、高い体重増加率やすぐれた飼料変換率はこれら望ましい結果を伴う 経済性にとって望ましいものである。肉組成も重要である。理由は組織付着にと って最も望ましい領域は上等肉が多量に得られる胸部であるからである。従って 、体重増加だけが重要ではなく、胴体のどこの体重が増加するかも重要である。

羽毛量の均一性も重要である。なぜなら、通常サイズの家禽類が多いほど、手作 業が少なくなる。換言すれば、機械作業量を増やすことができる。一方、家禽類 のサイズに極小から極大までバラツキがあるなら６ｆ１例えば全体の羽毛量が同 じであっても、手作業量が増え、またサイズが不揃いなので、機械作業が容易で はない。

従って、羽毛量の均一性が標準的な機械類で処理できる通常サイズ範囲内に高い 分布率をもっであることも望ましい特質である。

同様く　ニワトリや七面鳥などの家禽類だけでなく、豚などにも有用な直接配合 微生物も非常に利益が高いものである。

本発明の第１目的は脂肪酸で微小球化（マイクロカプセル）化した天然微生物の みを含んで、抗生物質を含まない家禽用直接配合共生物質を提供することにある 。

本発明の第２目的は２種類の微生蝋　即ち、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅ ｃｉｕｍ　３０１、ＤＳＭＮｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４７８９及びＥｎｔｅｒｏｃｏ ｃ（ｕ３　ｆ３６ｃｉｕｍ　２０２、ＤＳＭ　Ｎｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４７８８を 含む直接配合共生物質を提供することである。ＤＳＭは西独ブラウンシュワイク にある“Ｄｅｕｔｓｃｈｅ　Ｓａｍｍｌｕｎｇ　ｖｏｎ　Ｍｉｋｒｏｏｒｇａｎ ｉｓｍｅｎ”を表す。これら微生物はＡＴＣＣに寄託される予定であり、本願の 査定通知があり次狐　あらゆる制限を解除する予定である。

本発明の第３目的は、家禽類について、高い体重増加臥　すぐれた飼料転換駄　 高い胸肉収載　及び通常サイズの範囲内における羽毛量の均一性を与える直接配 合共生物質を提供することにある。

本発明の第４目的は基質として遊離脂肪酸を使用する特殊な回転法によって微小 球化した細菌を含む家禽用飼料配合物として好適な直接配合共生物質を提供する ことにある。

本発明の第５目的は微生物を実質的に減らすことなく３〜６月間にわたり所定レ ベルの安定性を維持する直接配合共生物質を提供することにある。

本発明の第６目的は、サイズの均一な、乾燥細菌の微小球を回転形成する方法を 提供することにある。

本発明の第７目的は易流動性であるため、家禽用飼料に容易に配合できる、回転 法によって形成した乾燥細菌の微小球を提供することにある。

本発明の第８目的は所定の細菌を含む脂肪酸基質の微小球であって、家禽類及び 豚両者に有用な微小球を提供することにある。

図面の簡単な説明 図１．２及び３は基質としてステアリン酸を使用した菌糸体の安定性を示すグラ フである。

図４は本発明の直接配合共生物質組成物を使用する飼育実験における胸肉収率分 布を示すグラフである。

図５は本発明の直接配合共生物質組成物を使用する飼育実験における体重分布を 示すグラフである。

図４及び５は対照抗生物質の使用と本発明の共生物質の使用を説明する図である 。　゛ 発明の要約 本発明はＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃｊｕｍ３０１、ＤＳＭ　Ｎｏ、Ｄ ＳＭ−Ｎｒ、４７８９の乾燥脂肪酸微小球　及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆ ａｅｃｉｕｍ２０２、ＤＳＭ　Ｎｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４７８８の乾燥脂肪酸微小 球を含む共生物質を少量ではあるが、成育促進に有効な量で通常の家禽及び豚用 飼料に配合することからなる成育促進方法、及びこれら微小球を配合した成長促 進組成物を提供するものである。本発明では、これら微小球を回転ディスク回転 法で形成するのが好ましい。

発明の詳細な説明 驚くべきことに、所定量のＥｎｔｅ、ｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍ　３０１ 、ＤＳＭ　Ｎｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４７８９及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅ ｃｉｕｍ　２０２、ＤＳＭ　Ｎｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４７８８の脂肪酸微小球を通 常の家禽用飼料に配合すると、家禽類及び豚の成育を促進できることが見いたさ れへ　用いる脂肪酸は炭素原子数か１２〜２４の遊離脂肪酸であり、好ましくは ステアリン酸である。また、微生物はほぼ等量で使用するのが好ましいが、一方 の微生物を約３０〜約７０％の量で使用し、残りを他方の微生物としてもよい。

これら２種類の微生物かなぜ本発明の特徴、即ち、高い体重増加臥　すぐれた飼 料転換眠　高い胸肉収載　及び高い羽毛量の均一性を与えるかについては正確に わかっているわけではない。しかし、両微生物を相互作用するように併用する限 りは、またこれらを本発明の範囲内で使用する限りは、これは事実である。相互 作用して、家禽類の胴体を改善し、肉質を改良し、かつ作業を容易にする本発明 の望ましい特徴を達成できるのはこれら特徴を組み合わせた結果である。同様な 結果は、実施例によって示されるように、豚についても達成できる。

飼料に配合する直接配合共生物質の量は広い範囲で調節できるが、一般には、飼 料１トンにつき約０．　５〜約２．０ポンド、好ましくは約０８〜約１，２ボン ド、特に約１ポンドである。また、微生物数、即ち、直接配合共生物質１グラム につき存在する微生物のコロニー形成単位数は約１ｘ１０６ＣＦＵ／グラム〜約 ２ｘ１０９ＣＦＵ／ダラムの範囲内にあるか、好ましくは約２Ｘ１０８ＣＦＵ／ グラムである。

前記の直接配合共生物質を任意に家禽用飼料に配合すると、併用したこれら２種 類の微生物が成育促進剤として作用する。従来から公知の成育促進剤には、既述 の５ｔａｆａｃやＢＭＤ等の抗生物質がある。成育促進配合剤として抗生物質を 薬用レベル以下で使用する場合、本発明による天然微生物を使用する必要かある 。ただし、いうまでもなく、直接配合共生物質を本発明に従い調製し、本明細書 に開示する方法で配合しなければならない。

事態　直接配合共生物質と成育促進剤とを併用した方がよい場合かあることを示 す実験例があり、所望ならば、併用することもできるが、多くの場合、共生物質 を単独で使用するほうが好ましい。なぜなら、本発明の目的の一つは成育促進剤 の併用を避けることであるからである。

微生物か生きたまま動物に運ば札　飼料と良好に結合する形をとり、また配合量 の調節を可能にするほぼ均一なサイズであれば、微生物の処理方法には制限はな い。

これら条件を実現する好ましい手段は基質として脂肪酸を使用して微生物を微小 球化することである。ここで、微小球とは複数種の微生物を配合した脂肪酸基質 を指もので、個々の微生物をそれぞれカプセル化してマイクロカプセルとは別な ものである。微小球の場合、チョコレート片か微生物群を示すクツキー生地とチ ョコレート片との関係になぞることができる複合的な機能を示す。この方法は共 同発明者であるＲｕｔｈｅｒｆｏｒｄらによる本願の親出願明細書に記載しであ る。この方法を用いると、微生物を加熱された脂肪酸に結合させることができる 。脂肪酸の温度、及び微生物と脂肪酸との接触時間については、微生物か生きた まま、脂肪酸と混合されるように設定する。基質として作用する脂肪酸で微生物 を微小球化するには、混合物を回転している回転ディスクで処理する。この方法 の使用には、いくつかの大きな利点かある。第１に、微生物を処理中生かしてお くことができる。第二に、回転ディスク方法を併用すると、微小球のサイズを均 一にできるので、配合を改善できる。第３に、基質として脂肪酸を使用するので 、特徴のある微小球を形成できる。これらによって直接配合共生物質を高度に安 定化でき、従って最大の効率を実現できる。

上記の親出願明細書の方法では、脂肪酸の被膜状層に各微生物を微小球化するの ではなく、複数の微生物を脂肪酸基質に微小球化することが重要である。こうす ると安定性が高くなり、配合効率をいっそう高くできる。

好ましい基質は炭素原子数が１２〜２４の遊離脂肪酸である。これら脂肪酸は混 合物としても使用できるが、単独使用か好ましい。また、脂肪酸としては不飽和 脂肪酸か好ましく、最適なのはステアリン酸である。

一般的にいって重要なことは、脂肪酸が７５℃以下の融点、好ましくは４０℃〜 ７５℃の融点をもつことである。また、いうまでもなく、有効な基質であるため には、室温で固体でなければならない。このような遊離脂肪酸はすべて本発明に 使用できる。

飼料の安定性を高くするために、微生物は飼料中に凍結乾燥状態で配合する。再 生するには、水分を加えればよい。

微小球を以下に述べる方法で得た場合、脂肪酸成分の含有量は約５０％〜９０％ 以上で、残りが微生物になる。

脂肪酸の好ましい含有量は約６０％〜約７５％である。

脂肪酸か過小な場合には、保護が不十分になる。また、過剰な場合には、厚くな り過ぎ、腸への放出が不十分になる。

本発明に使用する方法は回転ディスク微小球化法である。一般的にいって、この 方法では、微生物と脂肪酸成分のスラリーを完全に混合するか、混合物はステン レススチール製の回転ディスクの中心に一定の速度で加える。

遠心力により微小球化が生じる。次に、周囲条件かそれ以下の条件に維持された 冷却室にマイクロカプセル即ち微小球を回収し、包装に合う大きさにする。

回転ディスクカプセル化方法は知られているが、外皮のない基質で微小球を得る ことは知られていない。ましてや、カプセル化方法に凍結乾燥微生物を使用する ことは知られていない。一般的な回転ディスク微小球化方法については、サン・ アントニオのサウスウエスト研究所のＪｏｈｎｓｏｎ等の“Ｊｏｕｒｎａ、Ｉ　 ｏｆ　ＧａｓＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ”、第３４５〜３４７頁（１９６５ 年１０月）を参照すればよい。また、ＵＳＰ４．　６７５．　１４０　（１９８ ７年６月２３日発行、発明者Ｓ　ｐ　ａ　ｒ　ｋ　ｓ、発明の名称：　液滴粒子 の被覆方法）には、本発明に好適な回転ディスク微小球化装置が詳しく記載され ている。しかし、最適なのは前記の親出願明細書に記載されているものである。

この微小球化方法の場合、得られる微小球は従来のタワー・スプレー式乾燥法や マイクロカプセル化方法の場合と非常に異なっている。従来のタワー・スプレー 式乾燥法の場合、粒子が塊状化したり、被膜が不均一になる傾向があり、このた め製品の安定性が数日〜数週間で大幅に変化する傾向がある。また、従来のマイ クロカプセル化方法の場合には、外皮被膜を目的物の周囲に形成するので、細菌 等の微生物を処理するのが難しい。というのは、微生物は実際の用途にあうよう な均一なサイズで生かしておくにはあまりにも小さく、また固いからである。本 発明の配合剤を特に使用する微小球化方法の場合には、例えある程度の水分や抗 生物質の作用を受けても、微生物は３〜６ケ月の間安定であり、また微生物の生 存力は均一に分布している粒子に維持される。

本発明の遊離脂肪酸微小球を前記の範囲内で使用する場合、回転ディスク、例え ば４〜６インチの回転ディスクの回転速度は２．　０００〜４．　ＯＯＯｒｐｍ 好ましくは約２．　５００〜３．　２０Ｏｒｐｍで、供給量は５０〜２００グラ ム／分である。本発明による好ましい条件は、ステアリン酸、上記２種類の微小 球　４インチの回転ディスク、３．　ＯＯＯｒｐｍの回転速度、１００グラム／ 分の供給量、微生物３５％及びステアリン酸６５％からなる微生物／ステアリン 酸スラリーである。これら条件で得られる微小球のサイズは７５〜３００ミクロ ンであるが、好ましいレベルは２５０ミクロン以下である。

以下、実施例により本発明の詳細な説明する力（これらは本発明を制限するもの ではない。実施例は図１．２．３について説明する。なお、実施例１〜４及び図 １．２．３は本発明の先発間に関する。即ち、家禽用直接配合共生物質について の本発明に関するのは実施例５及び表２〜１０である。また、実施例６は七面鳥 に、実施例７は豚に関する 実施例１ 実施例１に対応する図は図１である。図１には４℃及び２７℃における２種類の 微生物Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃｉｕｍの安定性を示も　図１には、 ３５重量％レベルでステアリン酸を使用する回転ディスク装置でカプセル化した Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍの安定性を示す。微小球化条件は前述 と同じである。即ち、６０℃の温度で３５／６５微生物／ステアリン酸スラリー を使用し、４インチの回転ディスクを３．　０００ｒｐｍで回転させ、供給量を １００グラム／分にしｔム　形成したマイクロカプセルをヒートシーリングした 上記バリヤ式袋に８札　１週間に一度破壊サンプリングしてＣＦＵをめ九　本発 明のよるマイクロカプセルは最長７０日にわたる保存期間中すぐれたコロニー形 成単位（ＣＦ　Ｕ）を示し總 実施例２ 次に、実施例２を図２について説明する。図２には、３種類の家禽用抗生物質を 存在させた状態で代表的な飼料と混合した場合の個々の微小球化微生物の安定性 を示す。飼料成分を以下に示す。

細かくひき割りしたコーン：　５４％ 大豆粉＝　２６％ 魚粉、　２％ 燐酸二カルシウム：１．５％ 石灰＝　１％ 大豆油＝５．５％ 水分：　１２％ 以下の３種類の抗生物質を以下の配合量で配合し總デコキノエ−）　（ｄｅｃｏ ｑｕｉｎｏａｔｅ）６％（４５４ｐｐｍ）、サリノマイシン（ｓａｌｉｎｏｍｙ ｃｉｎ）（５０ｐｐｍ）及びモネンシン（ｍｏｎｅｎｓｉｎ）ナトリウム（１２ ０ｐｐｍ）である。

約ｌＸ１０６ＣＦＵ／グラムになるレベルで混合物に培養物を加え九　これを　 ヒートシーリングした袋に包装し、室温で保温し九　１週間に１度サンプリング し、ＣＦＵをめ九　図２のグラフかられかるように、安定性は優れている。

実施例３ 次に、実施例３を図３について説明する。図３に、異なる抗生物質の存在下にお ける飼料中のＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃｉｕｍの安定性を示す。飼料 成分は細かくひき割りしたコーン６０蛛　大豆粉３８覧　石灰２％で、水分は約 １４％であつ九　２０℃で１０ボンドのアリコツトをシーリング処理した袋に保 存し、１６週間にわたり１週間に１度サンプリングし九　以下の抗生物質を以下 のレベルで配合し總 ジサリチル酸バシトラシンメチレン　５０グラム／トンカルバドツクス　５０グ ラム／トン クロルテトラサイクリン　２００グラム／トンラサロシド（Ｉａｓａｌｏｃｉｄ ）　３０グラム／トンリンコマイシン　１００グラム／トン ネオマイシン　１４０グラム／トン オキシテトラサイクリン　１５０グラム／トンスルフアメタシン　１００グラム ／トンチロシン　１００グラム／トン バージニアマインン　２０グラム／トンＡＳＰ２５０　１００グラム／トン フラドツクス　１０グラム／トン 表１に、コロニー形成単位（ＣＦｔＪ）におけるｌｌ。

ｇ減少の最短時間を示す。

表１ 水分か１４％のマノシュ飼料における２　０　’ＣでめたＣＦＬＪ１１ｏｇ減少 の最短時間 抗生物質　保存日数 対照　１０３ ジサリチル酸ハントランンメチレン　８８カルハドソクス　５４ クロルテトラサイクリン　６０ ラサロント（Ｉａｓａｌｏｃｉｄ）　５７オキシテトラサイクリン　５９ ＡＳＰ２５０　６７ フラドツクス　５３ 実施例４ 実施例４では、ニワトリの飼料として使用するベレット化後の飼料の安定性を調 べ總　微小球化条件は前述の通りであり九　本例では一以下のものを使用し總粗 タンパク　１８．０％以上 粗脂肪　５．０％以上 粗繊維　６．　０％以下 以下の成分及び条件を用いて、抗生物質（ＣＴＣ５０グラム／トン）を含むベレ ット及び抗生物質を含まないベレットを調製しｆ、　コーン、ＳＢＭ、；ｈニー 、大豆本　燐酸二カルシウム、石灰、微量ミネラルプリミック入　ビタミンプリ ミック人　セレス　硫酸札　飼料１グラムについて約５ｘ１０５ＣＦＵのレベル で培養物を加え總 状態温度は７０℃で、ベレット化装置から７８℃でベレットを取り出しへ 次に、ベレットをシーリング処理していない袋に保存し、１週間１度にサンプリ ングしてＣＦｔＪをめへいずれの場合も、ベレットの安定性はベレット条件の影 響を受けなかっｔ：６　特に、ベレットの安定性はペレット化していないもの同 等であっ總 実施例５ ５．５６０匹のＰｅｔｅｒｓｏｎＸＡｒｂｏｒ　Ａｃｒｅｓブロイラーをランダ ムにフロア・ペン（表２）に割当て、４５日間飼育し總　最初の５日間に死亡し たブロイラーはすべて同性のブロイラーと交換し九　基本的な初乳　中期及び終 期飼料の組成を表３に示す。初乳中期及び終期飼料は９０グラム／トンのモネリ ンと共に、それぞれ１，４２５．１，４５０及び１．　４７５ｋｃａｌのＭＥ／ ｌｂを含むように配合しｔ：Ｏ初期飼料は１〜２１日齢のものに、中期飼料は２ １〜４２日齢のものに、そして終期飼料は４２〜４９日齢のものに与え總　配合 剤は陰性対照であるマツシュ（対照Ｍ）、実施例１で説明した回転ディスク脂肪 酸カプセル化方法で得た、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃｉｕｍ３０１、 ＤＳＭＮｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４．７８９及びＥｎｔｅｒｏｃ。

ｃｃｕｓ　ｆａｅｃｉｕｍ２０２、ＤＳＭ　Ｎｏ、ＤＳＭ−Ｎｒ、４７８８を含 むカプセル化直接配合共生物質培養物（共生物質は飼料１グラムにつき１ｘ１０ ５ＣＦＵで使用、（共生物質Ｍ））、陰性対照であるベレット（対照Ｐ）、マツ シュ１グラムにつき１ｘ１０６ＣＦＵレベルで使用するベレット化共生物質（共 生物質Ｐ）、及びパージニアマイシン１トンにつき１０グラムで使用する陽性対 照（ＳｔａｆａｃｌＯ）であり九　初期飼料は砕いてから、ペレット化しｆ、： 、、各実験飼料と共に１２の複製したペンに３５匹の１３５匹の雌をいれｔ−体 重、飼料消費量、最初の５日後の死亡率をペン毎に記録しｔミ　各ペン毎に飼料 転換￥３．．調節飼料転換へ　体重調節飼料転換率を計算し總 データすべてを分散分析し、フィッシャーＬＳＤを使用して差をめ總 研究する前に、直接配合共生物質の濃厚培養物を炭酸カルシウムで展開しｔ：６ 　共生物質Ｍ及びＰの理論値はそれぞれ１ｘ１０８及び２ｘ１０９ＣＦＵ／ダラ ムであッ？Ｑ）それぞれ１１グラムのサンプルを２度評価して、実際の値をめ總 　パイオニア標準平板培養法によって各サンプルを平板培養して、乳酸菌をカプ セル化し九各段階毎に混合試験を実施し總　共生物質を飼料中に適当なレベルで 均一に分散し、ベレット化後に生存するようにしｆ、各試験で、マツシュ配合剤 の場合には等間隔の４つのサンプル、そしてベレット化配合剤の場合には等間隔 の１０のサンプルを袋にいれるときにサンプリングした（即ち、袋１．３．５、 　・・・、３５．３７．３９）。

汚染されていない飼料をいれたフロア・ペンを１週間毎及び４週間毎でサンプリ ングし、残りのペンを２週間毎及び６週間毎にサンプリングしｔも 性別毎に等数のブロイラーを犠牲にして、胸部重さ、体重、小腸の重さ、小腸の 長さをめｔ＝　ブロイラー毎に胸肉収取　及び小腸の重さ／長さ比を算出し總デ ータはすべて分散分割分析し、対比評価法により差をめ總　処理毎に６０匹のブ ロイラーを大学に送り直接配合共生物質は、処理にかかわらず、飼料転換率がい ずれの対照よりも改善（Ｐ＜０．　０５）Ｌ、一方、マツシュ飼料の対照の場合 だけ体重が増加（Ｐ＜０．０５）した（表４）。直接配合共生物質Ｐは、飼料転 換率が、対照Ｐと同じ（Ｐ　＞　０．　０５　）である５ｔａｆａｃｔｌｏより も改善（Ｐ＞０．　０５）Ｌ總飼料製品は所望レベルにあり、微生物組成を有し ていた（表５）。　直接配合共生物質は飼料中に均一に分散し總　直接配合共生 物質Ｍはその所望レベルにあったが、直接配合共生物質Ｐは初期及び中期飼料に とって望ましいレベルよりも１〜１−１　／　２　ｌ　ｏ　ｇ高かった（表６） 。

これは、ベレット化後に微生物を十分回収するために、オーバーエンジニアリン グした結果である。

直接配合共生物質Ｐのフロア・ペンサンプルは混合試験の値と密接に対応してい た（表７）。しかし、直接配合共生物質Ｐは中期及び終期混合飼料では４及び６ 週間で２１ｏｇ低下し總 直接配合共生物質Ｍは胸肉重さ及び収率が対照Ｍより高＜　（Ｐｒｏ、０５）（ 表８）、また直接配合共生物質Ｐも対照Ｐよりも高かった（　Ｐ　＞　０．０５ 　）。マツシュ飼料における改善は以前の実験の結果と一致してぃ１゜直接配合 共生物質Ｐは、共生物質Ｍに比較した場合、胸肉収率に改善が認められなかっ總 　これはペレット化によるエネルギー利用率か向上したためであり、改善の余地 が小さい。　ペレット化の場合は、マツシュの場合よりも体重増加か平均で９６ グラム大きい。直接配合共生物質は体重を均一化しく図５）、最大の改善はマツ シュ飼料で認められる。

ペレット化の場合は、−マツシュの場合よりも胸肉増加が平均で１５グラム大き い。直接配合共生物質の場合は、対照よりも平均胸肉重さ及び均一性ですぐ札　 最大の改善はマツシュで認められ總　５ｔａｆａｃｌＯはペレット化飼料の場合 に最大の改善を示し九 マツシュに比較した場合、ペレット化により胸肉収率が０．５３％高くなり總　 直接配合共生物質Ｍは対照Ｍに比較した０、　８４％高くなっ總　この対照は大 きさにおいてペレット化と同等である。　体重あるいは胸肉の重さとの比として 表した場合、直接配合共生物質の場合、対照や５ｔａｆａｃｌＯの場合よりも小 腸の長さが短いＣＰ＞０．　０５）（表９）。体重あるいは胸肉の重さの比とし て表した場合、直接配合共生物質の場合、対照や５ｔａｆａｃｌＯよりも小腸の 重さが小さかった（ｐ＞０．０５）。腸の重さが小さくなり、また長さが短くな るのは、維持に必要なエネルギーが少なくなり、また改善された飼料転換率及び 胸肉収率で表されるように、成長に利用できるエネルギーが増えることを意味す る。

直接配合共生物質Ｐで処理したものは５ｔａｆａｃｌＯに比較して異臭が少なか った（表１０）。第２回の実験で、共生物質Ｐは、対照Ｐと比較した場合、もも 肉／脚肉の風味を改、善し九　この風味の改善は第１回の実験では認められなか っｆ、：。

表　２ べ／の割り当て 配合剤　ペンの数 °ぺ／プサイズは４．２’　＊　１５．ｓ・で、このペンは飼料供給管、吊り形 給水器、地面に敷いた松材層、電動蒸発！Ｓ２冷却装置、及び１鵡性にすぐれた 、強制温風加熱型カーテン状側壁からなる。

表　３ 基礎飼料の組成 表　５ 品質管理及び品質保証 配合剤　品質Ｗ埋カウ／ト　品質保証カウント　微生物比１、品質管理 ２、品質保証 表　６ ナベ１４行混合試験及び回収基 □Ｃｕ／９　引μ　□　−１２７，− 中間 番ヤ期 ！ｌ！７ フロア・ぺ／品質保証 ｃｇ　□ 表　８ 町肉収寡の評価 ＠Ｉｎｖ−本発明 ｔｉ、９ Ｐ−１１・さ及ブ長さ 表１Ｏ 試食パネル評価 ０　統計的に有意味（Ｐ＜、ｏｓ）な回数でＡ常なサンプルを識別でき１４＋　 ５チレベルで有意性に必要な異常なサンプルの職別数１ｉｎ−１０で７、モして ド２０で１１でありな。

マツシュ及びペレット化飼料における直接配合共生物質の効果をめるためにブロ イラー試験を行っ九　直接配合共生物質は、処理にかかわらず、飼料転換率がい ずれの対照よりも改善（Ｐ＜０．　０５）Ｌ、一方マッシュ飼料の対照の場合だ け体重が増加（Ｐｒｏ、０５）ＬｔＱ。

直接配合共生物質Ｐは、飼料転換率が、対照Ｐと同じ（Ｐ＞０．０５）である５ ｔａｆａｃｔｌＯよりも改善（Ｐ〉０゜　０５）Ｌ九　直接配合共生物質Ｍは胸 肉重量及び収量が対照Ｍよりも増加（Ｐｒｏ、０５）Ｌ、また直接配合共生物質 Ｐはその対照Ｐに比較した場合改善（Ｐ＞０．　０５）を示し丸　さらに、直接 配合共生物質Ｐは５ｔａｆａｃｌＯに比較した場合、異臭がなかっ一実施例６ （平均初期体重が４１．５ポンドの）１４４頭の飼育豚を床がスレート製のペン に体重・性別にランダムに割当て（表１１）、１１９日間飼育し總　基本的な飼 育飼料及び最終飼料の組成を表１２に示す。成育飼料をペンの平均体重が１２０ ポンドになるまで与えてから、最終飼料を与え、その後層殺し總　いずれの飼料 にも、体重が７５ボンドになるまでＭｅｃａｄｏｘ（登録商標）（５０ｇ／ｌ） を配合し、その後体重が１２０ポンドになるまでクロルテトラサイクリンを１０ ０ｇ／を配合しｔも（対照）として陰性対照を使用し、所定の微小球状直接配合 共生物質を飼料１ｇにつき１ｘ１０４ｃｆｕで配合し總　すべての飼料はマツ　 シュの形で与え總　各実験飼料毎に１２頭の豚について６の複製ペンを使用し一 研究施設で、　Ｉｖｏｍｅｃ（登録商標）を与えて内部及び外部寄生虫を殺し總 　また、４週間後にＳａ　ｆ　ｅｇｕａｒｄ　（登録商標）を与えてベンチュウ を殺し總体重、飼料消費量、及び死亡率をペン別に記録し九また、ペン毎に飼料 転換率を算出し一 研究する前に、微小球濃厚培養物を炭酸カルシウムで展開し九　理論値は２×１ ０７ｃｆｕ／ｇであっ九　それぞれ１１グラムのサンプルを２度評価して、実際 の値をめ總　標準平板培養法によって各サンプルを平板培養して、乳酸菌を微小 球化し九 また、さらに１ｇのサンプルを２度評価して、コロニー形成単位数及び菌糸体の 組成を調へ九飼育中１週間１度サンプルを取り、微小球状乳酸細菌について試験 しｔ島 所望の微生物レベルにあることが確認された（表１４）ペンのサンプル回収率は 飼料につき１ｘ１０１〜１．６×１０５ｃｆｕ／ｇであった（表１５）。２つの 極端なサンプルはサンプリングエラー／平板培養エラーが原因であっ九　これら 以外のサンプルはいずれも平均して１×１０４ｃｆｕ／ｇの目的レベルにあっｔ ら２８日後の時点で、体重増加及び飼料転換率において微小球配合飼料は対照よ りも改善を示した（表１３）。

実験の第１透口では、ＴＧＥが大発生し九　この大発生か、豚の消化管が飼料に 対応するのに必要な時間とともに、反応が見られる前に２８日の遅れがあった理 由であると考えられる。本発明−による直接配合共生物質の微小球は豚だけでな く、ニワトリ及び七面鳥にも有効である。

以上の実施例から、本発明によれば、上記目的のいずれも達成できることが理解 できるはずである。

１＋小期　終期 ｉ　１４ 品Ｔ’Ｊ：’Ｎ　ＰＩ’）ＡＭ治質（’ｌ：ａＶＪ３Ｉ　：　６７０−９１０２ 配置’ｉ／ｌ’ｌ　１１＋’訂管ｉｌｌ！カウ／１゛　品’Ｎｆｆ１−ｌ力・プ ／ト　微、１−１砒瓦　１５ ７ｔ１アベ７品ｆｌＣ４ｕｌ ）Ｍ　：　６７０−９１０２ 刀ヒＩＪＪｒ＋　２４昭　四訪ｈＪ叩霜゛１′均　９．５　ｘ　１００Ｂ、４　 ｘ　１０３西暦１９９４年１月６日付でＰＣＴ法３４条に基づい平成　６年　９ 月１９

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. １．本質的にＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍ３０１、ＡＴＣＣＮｏ． の生存力のある、安定な乾燥脂肪酸微小球及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅ ｃｉｕｍ２０２、ＡＴＣＣＮｏ．の生存力のある、安定な乾燥脂肪酸微小球から なる直接配合共生物質を少量ではあるが、成育促進に有効な量で通常の動物用飼 料に配合することからなる動物の成育促進方法。
2. ２．脂肪酸微小球を回転ディスクを使用して形成する請求の範囲第１項に記載の 方法。
3. ３．直接配合共生物質が該脂肪酸微小球の一方を約３０％〜約７０％含み、残り が他方の微小球である請求の範囲第１項に記載の方法。
4. ４．脂肪酸が炭素原子数が１２〜２４の遊離脂肪酸である請求の範囲第３項に記 載の方法。
5. ５．脂肪酸がステアリン酸である請求の範囲第４項に記載の方法。
6. ６．該連鎖球菌それぞれを等量使用する請求の範囲第１項に記載の方法。
7. ７．飼料に配合する直接配合共生物質の量が飼料１トンにつき約０．５ポンド〜 約２．０ポンドである請求の範囲第１項に記載の方法。
8. ８．直接配合共生物質の量が飼料１トンにつき約０．８ポンド〜約１．２ポンド である請求の範囲第７項に記載の方法。
9. ９．直接配合共生物質の微生物数が約１ｘ１０５ＣＦＵ／グラム〜約２ｘ１０８ ＣＦＵ／グラムである請求の範囲第７項に記載の方法。
10. １０．直接配合共生物質の微生物数が約１ｘ１０５ＣＦＵ／グラムである請求の 範囲第９項に記載の方法。
11. １１．動物がニワトリである請求の範囲第１項に記載の方法。
12. １２．動物が豚である請求の範囲第１項に記載の方法。
13. １３．本質的にＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍ３０１の生存力のある 、安定な乾燥脂肪酸微小球及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕｍ２０２ の生存力のある、安定な乾燥脂肪酸微小球からなる動物の成育促進用直接配合共 生物質組成物。
14. １４．一方の連鎖球菌が約３０％〜約２０％で、残りが他方の連鎖菌である請求 の範囲第１３項に記載の直接配合共生物質組成物。
15. １５．脂肪酸が炭素原子数が１２〜２４の遊離脂肪酸である請求の範囲第１４項 に記載の直接配合共生物質。
16. １６．脂肪酸がステアリン酸である請求の範囲第１５項に記載の直接配合共生物 質。
17. １７．該連鎖球菌をほぼ等量使用する請求の範囲第１６項に記載の直接範囲共生 物質組成物。
18. １８．動物がニワトリである請求の範囲第１３項に記載の組成物。
19. １９．動物が豚である請求の範囲第１３項に記載の組成物。