SK111694A3

SK111694A3 - Fatty acid microspheres containing enteroccocus for use to enhance growth and improve meat quality

Info

Publication number: SK111694A3
Application number: SK1116-94A
Authority: SK
Inventors: William M Rutherford; Jack E Allen; Scott M Dennis; Mark A Hinds; Gregory R Dana
Original assignee: Pioneer Hi Bred Int
Priority date: 1992-03-17
Filing date: 1993-02-03
Publication date: 1995-07-11
Also published as: EP0631616A1; RU2109052C1; HU9402673D0; JPH07505056A; CZ225394A3; RO112896B1; JP2849877B2; RU94043791A; MX9301017A; BR9306121A; WO1993019162A1; CA2131790A1; SI9300128A; HUT67965A; EP0631616A4; BG99113A

Description

Mikrosféry na báze mastných kyselín obsahujúce enterokoky, pre použitie k podpore rastu a zlepšeniu kvality mäsa

Doterajší stav techniky

Prostriedky pre podporu rastu vo forme antibiotík sa široko používajú pre hydinu, predovšetkým kurence a morky. Prostriedky pre podporu rastu, ako je Stafac a BMD (bacitracinmetylendisalicylát) sú známe antibiotiká a používajú sa v subterapeutických dávkach, napríklad 10 g/ΐ a 25 g/t, ako prísady do krmív za účelom podpory žiadúcich charakteristík rastu u hydiny. Používanie antibiotík k tomuto účelu sa však stalo v nedávnej dobe predmetom určitej kritiky. Jednou z námietok je možnosť, že si hydina časom vyvinie toleranciu voči antibiotikám a nakoniec už antibiotikum nepôsobí pri podpore rastu priaznivo. Ďalšie námietky sa týkajú zdravotných rizík neprirodných antibiotických prísad a zhoršujúcich účinkov, ktoré môžu mať. Predsa len vzhľadom k svojim výhodám sa antibiotiká doteraz bežne používajú za účelom zlepšenia konverzie krmiva, zlepšenia zloženia mäsa a pre podporu rastu.

Je známe, že určité baktérie pri pridaní ku krmivu potenciálne priaznivý účinok. Tento priaznivý účinok spočíva v dodaní prirodzenej črevnej mikroflóry. Niektoré spoločnosti ponúkajú na predaj priamo skrmované mikrobiálne prostriedky, ktoré obsahujú požadované baktérie. Priamo skrmované mikrobiálne prostriedky však vytvárajú určité ťažkosti pri dodržaní stability produktu. Typicky sa priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok pridáva ku krmivu v pomerne nízkom množstve, napríklad asi 0,1 %. Nepoužité krmivo alebo kŕmna prísada, obsahujúca priamo skrmovaný mikrobiálny prípravok, sa však často skladuje na farmách dlhú dobu. Toto skladovanie často krát prebieha za podmienok, v ktorých sa vyskytuje určitá vlhkosť a vysoká teplota. V mnohých prípadoch je prítomné práve dos tatočné množstvo vlhkosti, aby bolo aktivované zahájenie rastu baktérií, ale množstvo zatiaľ nedostatočné pre jeho podporu. V dôsledku toho baktérie zahynú a aktivita priamo skrmovaného mikrobiálneho prípravku zmizne. V iných prípadoch antibiotiká, pridávané ku krmivu alebo kŕmnej prísade, obsahujúce priamo skrmovaný mikrobiálny prípravok, nepriaznivo interagujú s baktériami, predovšetkým ak je prítomné malé množstvo vlhkosti, a baktérie znova hynú. Existuje teda významný problém dlhodobej skladovacej stability priamo skrmovaných mikrobiálnych prípravkov.

V inom prostredí, ak je priamo skrmovaný mikrobiálny prípravok pridávaný napríklad ku krmivu pre kuratá, je obvyklé materiál peletizovať a priamo skrmovaný mikrobiálny prípravok pridávať pred peletizáciou. Vlhkosť z pary, používanej pri. pelet i záci i , čiastočne aktivuje baktérie, avšak môže pri nedostatočnom množstve vlhkosti spôsobiť ich zánik. Baktérie môžu zahynúť taktiež v dôsledku tepla pri peletizácií. Potom je tu taktiež problém kyslého prostredia v žalúdku, potenciálne inaktivujúceho baktérie, kým sa reálne dostanú do čriev. Existuje teda trvalá potreba priamo skrmovaných mikrobiálnych prípravkov, ktoré by uvoľňovali mikroorganizmy len v správnom čase v čreve a nie skôr vplyvom vlhkosti alebo nepriaznivých podmienok pH, aké existujú v tráviacom trakte pred tenkým črevom.

U hydiny je zvlášť žiadúce pokiaľ možno dosahovať určité charakteristiky. Patrí medzi ne zvýšený hmotnostný prírastok, lepšia konverzia krmiva, zloženie mäsa a napokon jednotná hmotnosť kŕdľa. Zvýšený hmotnostný prírastok a lepšia konverzia krmiva sú samozrejme žiadúce pre súvisiace úspory, ktoré sprevádzajú tieto žiadúce výsledky. Zloženie mäsa je dôležité preto, že najvhodnejšou oblasťou pre ukladanie tkaniva za účelom získania výberového mäsa je hruď. Nie je teda dôležitý púhy hmotnostný prírastok, ale i miesto, kde sa ukladá. Jednotná hmotnosť kŕdľa je dôležitá preto, že ak má viac vtákov normálnu veľkosť, je treba menej ručnej práce a spracovateľ sa môže viac spoliehať na strojné spracovanie. Naproti tomu, pokiaľ sa vtáci značne líšia čo do veľkosti od veľmi malých po veľmi veľké i pri zachovaní celkovej hmotnosti kŕdľa, vyžadujú menší a väčší vtáci oveľa viac ručnej práce a pre nejednotnú veľkosť nemôžu byť ľahko spracovávané strojom. Jednotná veľkosť kŕdľa s vysokým percentom distribúcie v rozmedzí normálnej veľkosti, umožňujúcej spracovanie kuriat normalizovaným zariadením, je teda žiadúcou charakteristikou.

Podobne by bol veľkým prínosom priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok, ktorý by bol vhodný nie len pre hydinu, ako sú kurčatá a morky, ale taktiež vhodný pre prasatá.

Primárnym účelom vynálezu je nájsť priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok pre hydinu, neobsahujúci antibiotiká, ktorý obsahuje Len mikrosféry na báze mastných kyselín s obsahom prirodzene sa vyskytujúcich organizmov.

Ďalším primárnym účelom vynálezu je nájsť priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok, ktorý obsahuje dva organizmy, totiž Enterococcus faecium 301, č. DSM DSM-Nr. 4789, a Enterococcus faecium 202, č. DSM DSM-Nr. 4788. DSM je skratka nemeckej zbierky bakteriálnych kultúr Deutsche Sammlung von Mikroorganismen, umiestnenej v Braunschweigu, Nemecko. Tieto organizmy budú uložené v ATCC s uvoľnením všetkých obmedzení po správe o prípustných nárokoch.

Ďalším účelom vynálezu je priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok, ktorý u hydiny poskytuje zvýšený hmotnostný prírastok, ktorý poskytuje lepšiu konverziu krmiva, ktorý poskytuje vyšší výťažok hrudného mäsa a ktorý poskytuje jednotnú hmotnosť kŕdľa v rozmedzí normálnych veľkostí.

Ďalším primárnym účelom vynálezu je priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok vhodný ako prísada do kŕmnej dávky pre hydinu, obsahujúca baktérie, ktoré sú vo forme mikrosfér, s použitím špeciálnej rotačnej techniky pomocou matrice voľných mastných kyselín.

Ďalším účelom vynálezu je priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok, ktorý je stabilný po dobu v rozsahu 3 až 6 mesiacov bez významného zníženia počtu organizmov.

bak tér i i

Ďalším účelom vynálezu je spôsob rotačného formovania guktorý umožňuje dosiahnúť jednot1.iči.ek zo sušených nú veľkosť.

Ďalším účelom vynálezu ktoré sú rotačných diskoch, dávok pre hydinu sú guličky baktérií, sušených na voľne sypké a ľahko spracovateľné do kŕmnych

Ďalš im účelom vynálezu urči té bak té r i e obsahuj úca ako priamo skrmované a prasatá.

je mikrosféra pričom mikrobiálne z mastnej kyseliny tieto guličky sú vhodné pre hydinu prostriedky

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je spôsob a kompozícia pre podporu rastu hydiny a prasiat, pozostávajúce v tom, že sa k bežnej kŕmnej dávke pridá malé, avšak pre podporu rastu účinné množstvo priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku, ktorý obsahuje sušené mikrosféry Enterococcus faecium 301, č, DSM

DSM-Nr. 4789, na báze mastných kyselín a sušené mikrosféry Enterococcus faecium 202, č, DSM DSM-Nr. 4788, na báze mastných kyselín, kde sú mikrosféry výhodne formované sušením na rotačných diskoch.

Bolo prekvapivo zistené, že podporu rastu hydiny a prasiat je možné dosiahnúť tak, že sa k bežným kŕmnym dávkam pridáva určité množstvo mikrosfér Enterococcus faecium 301, č. DSM DSM-Nr. 4789, na báze mastných kyselín a určité množstvo mikrosfér Enterococcus faecium 202, č. DSM DSM-Nr. 4788, na báze mastných kyselín. Použitou mastnou kyselinou môže byť ktorákoľvek z voľných mastných kyselín C^₂ až C₂₄, výhodne kyselina stearová. Organizmy sú výhodne prítomné v približne rovnakom množstve, ale ich zastúpenie sa môže pohybovať od asi 30 do asi 70 % jedného z organizmov, pričom zvyšok tvorí druhý organizmus.

Nie je presne známe, prečo tieto dva organizmy poskytujú ž.iadúce charakteristiky podľa vynálezu, zvlášť pre hydinu, predovšetkým zvýšený hmotnostný prírastok, lepšiu konverziu krmiva, zvýšený výťažok hrudného mäsa a zvýšenú jednotnosť hmotnosti kŕdľa. Je skutočnosťou, že sa tak deje, pokiaľ sú obidve prítomné v takej kombinácii, aby mohli navzájom nejako interagovať, a za predpokladu, že ich množstvo je vo vyššie uvedenom rozmedzí. Práve určitou interakciou a vzájomným pôsobením uvedených faktorov sa dosahujú žiadúce charakteristiky vynálezu, ktoré umožňujú významne zlepšiť u hydiny zloženie, kvalitu a spracovanie mäsa. Podobné výsledky je možné dosiahnúť i u prasíat, ako je dokumentované v príkladoch.

skrmovaného mikrobiálneho prostriedku, sa môže značne meniť, avšak obrozmedzí asi 0,5 až asi 2,0 libry na tonu asi 1,2 Libry na tonu krmiva Libru na tonu krmiva. Počet organizmov, prítomný asi 1.ÍO^

0,8 až

Množstvo priamo pridávaného ku kŕmnej dávke, vykle by ma.Lo byť v krmiva, obvykle asi a najčastejšie asi 1

t.j. počet jednotiek tvoriacich kolóniu na gram, v probiotiku, sa môže rovnako pohybovať v rozmedzí až asi 2.10^ CFU/g a výhodne asi 2.10& CFU/g.

Ak sa vyššie opísaný priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok zvolí pre skrmovanie v kŕmnej dávke, chová sa kombinácia vyššie uvedených dvoch kmeňov ako promotor rastu. Teraz používané rastové promotory zahŕňajú antibiotiká, ako je Sta6 p

fac a BMD. Výhody subterapeutických množstiev antibiotík ako rast podporujúcich prísad je možné dosiahnuť pomocou prirodzene sa vyskytujúcich organizmov podľa vynálezu, pokiaľ sa priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok vyrába v súlade s vynálezom a pridáva ku krmivu spôsobom podľa vynálezu. Boli ďalej uskutočnené určité pokusy, poukazujúce na to, že spoločná kombinácia priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku a promotoru rastu presahuje svojimi výhodami každú z jednotlivých zložiek, a preto je možné ich používať spoločne, ak je to žiadúce. Vo väčšine prípadov je však výhodné používať priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok samotný, pretože jedným z účelov vynálezu je eliminovať používanie rastových promotorov vôbec.

Spôsob spracovania organizmov nie je rozhodujúci, pokiaľ je možné organizmy udržať nažive až do dodania zvieratám a uviesť do takej formy, že sa dobre spoja s krmivom a majú všeobecne jednotnú veľkosť, aby bolo možné kontrolovať dávkovan ie.

Výhodným prostriedkom pre splnenie týchto požiadavkov je spracovanie organizmov do mikrosfér s matricou z mastnej kyseliny. Mikrosféra označuje matricu z mastnej kyseliny, do ktorej sú zapracované rôzne organizmy. Líši sa od mikrokapsLe, v ktorej sú vždy zapuzdrené jednotlivé organizmy. V mikrosfére funguje v kompozite matrica z mastnej kyseliny podobne vzťahu medzi matricou cesta sušienky a čokoládovými úlomkami, kde čokoládové úlomky predstavujú skupiny organizmov. Tento postup je opísaný v základnej prihláške spolupôvodcu Rutherforda et al. Pri tomto postupe sa baktérie kombinujú so zahriatou mastnou kyselinou. Teplota mastnej kyseliny a doba vystavenia baktérií pôsobeniu mastnej kyseliny sa reguluje tak, aby sa baktérie udržali nažive, avšak aby bolo možné ich s mastnou kyselinou premiesiť. Zmes sa umiestni na rotujúci disk za vzniku mikrosfér s obsahom baktérií, kde mastná kyselina pôsobí ako matrica. Použitím tejto metódy sa dosahuje niekoľkých významných výhod. Za prvé sa baktérie počas spracovania udržia nažive; za druhé proces v kombinácii s technikou rotačného disku umožňuje získať jednotnú veľkosť mikrosfér pre lepšie dávkovanie. Za tretie umožňuje charakter matrice, t-j- mastnej kyseliny, tvorbu jedinečných mikrosfér. Kombinácia týchto faktorov vedie s maximálnou efektívnosťou k vysoko stabilnému priamo skrmovanému mikrobiálnemu prostriedku .

V procese podľa základnej prihlášky je dôležité si povšimnúť, že vznikajú mikrosféry, kde každú guličku tvorí množstvo baktérií v matrici z voľnej mastnej kyseliny skôr než aby bola každá jednotlivá baktéria zapuzdrená v povlaku alebo filmu podobnej vrstve mastnej kyseliny. To prináša výhody stability a účinnejšieho dávkovania pri spracovaní baktérií.

Výhodným materiálom matrice je voľná mastná kyselina až C24· Je možné používať i zmesi mastných kyselín, ale výhodné je používať jednotlivú čistú mastnú kyselinu. Je rovnako výhodné, ak je voľnou mastnou kyselinou nenasýtená mastná kyselina; najvýhodnejšia je kyselina stearová.

Všeobecne povedané je dôležité, aby mastná kyselina mala teplotu topenia nižšiu ako 75 °C, výhodne v rozmedzí 40 až °C. Aby mohla účinne pôsobiť ako matrica, musí byť samozrejme pevná za teploty miestnosti. Týmto požiadavkám vyhovujú všetky voľné mastné kyseliny v medziach doteraz uvedenej chemickej definície.

Za účelom zvýšenia stability produktu sa baktérie do produktu obvykle pridávajú v lyofilizovanej forme. Potom je možné ich oživiť prídavkom vlhkosti.

Mikrosféry, vyrobené ďalej popísaným spôsobom, sú obvykle z asi 50 až viac ako 90 % hmotnostných tvorené zložkou mastnej kyseliny a zvyšok je bakteriálna kultúra. Výhodné rozme dzie je asi 60 až asi. 75 % mastnej kyseliny. Ak je použité príliš málo mastnej kyseliny, nie je matrica vhodná pre ochranu. Naproti tomu pri použití prílišného množstva je matrica príliš silná a neumožňuje adekvátne uvoľňovanie v čreve.

Spôsob podľa vynálezu používa pre vytváranie mikrosfér rotačný disk. Technológia rotačného disku spočíva všeobecne v tom, že sa suspenzia baktérií a mastnej kyseliny dokonale premieša a zmes sa rovnakou rýchlosťou privádza na stred rotujúceho disku z nehrdzavejúcej ocele. Vplyvom odstredivej sily je zmes vrhaná smerom von a tvorí mikrosféry. Tie sa potom zbierajú v chladiacej komore, udržované na podmienkach okolia alebo mierne nižších, triedia a pripravujú k baleniu.

Zatiaľ čo zapuzdrovanie na rotačných diskoch je známe, nie je známe vyrábať mikrosféry, obsiahnuté v matrici bez obklopujúceho obalu, ani použitie výroby mikrosfér alebo zapuzdrovanie u lyof i. lizovaných baktérií. O zapuzdrovani s použitím rotačného disku všeobecne pojednáva Johnson et al. zo Southwest Research Inštitúte of San Antonio v Journal of Gas Chromatography, október 1965, str. 345-347. Zariadenie s rotačným diskom, vhodné pre použitie podľa vynálezu, je podrobne opísané v patente US 4 675 140, vydanom Sparksovi 23.6.1987 a nazvanom Spôsob povliekania častíc pre kvapky kvapaliny, na ktorý sa tu odkazuje. Najvýhodnejší je však postup, opísaný v základnej prihláške.

Je nutné zdôrazniť, že rotačná tvorba mikrosfér poskytuje zreteľne odlišný produkt ako od bežného rozprašovacieho sušenia, tak od mikrozapuzdrovania. Pri bežnom rozprašovacom sušení vo veži existuje tendencia k zhlukovaniu častíc a vzniku nepravidelného povlaku, čo významne ovplyvňuje stabilitu produktu, snáď na úroveň dni až týždňov. Mikrozapuzdrovaním vzniká okolo objektu vrstva a ukázalo sa, že baktérie sú potom príliš malé, príliš ťažko sa udržujú pri živote alebo získavajú v jednotnej veľkosti, aby boli prakticky použitel né. Pri výrobe mikrosfér, predovšetkým s použitím prostriedkov opísaných v tomto vynáleze, sa dosahuje stabilita získaných baktérii, a to i pri vystavení pôsobeniu vlhkosti a antibiotík, po dobu troch až šiestich mesiacov a životnosť baktérií v časticiach s rovnomernou distribúciou zostáva zachovaná .

Ak sa používajú mikrosféry na báze voľných mastných kyselín podľa vynálezu v uvedených rozmedziach, môže rotačný disk, najčastejšie s rozmerom 4 - 6, rotovať rýchlosťou 2 000 až 4 000 min^-^, výhodne asi 2 500 až 3 200 min”l, a rýchlosť podávania môže byť 50 až 200 g/min. Výhodné podmienky podľa súčasných znalostí zahŕňajú použitie kyseliny stearovej, použitie dvoch vyššie uvedených organizmov, štvorpalcový rotačný disk, 3 000 min^-^ a rýchlosť podávania suspenzie baktérií, obsahujúcej 35 % baktérií a 65 % kyseliny stearovej, 100 g/min. Za týchto podmienok sa získa produkt s veľkosťou častíc 75 až 300 μιη, s výhodnou veľkosťou pod 250 μτη .

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obr. 1, 2 a 3 graficky znázorňujú stabilitu kmeňov s použitím matrice kyseliny stearovej.

Obr. 4 predstavuje graf, znázorňujúci distribúciu hrudného mäsa pri kŕmnych pokusoch s priamo skrmovanou mikrobiálnou kompozíciou podľa vynálezu.

Na obr. 5 je graf, znázorňujúci distribúciu telesnej hmotnosti pri kŕmnych pokusoch s priamo skrmovanou mikrobiálnou kompozíciou podľa vynálezu.

Na obr. 4 a 5 je znázornený kontrolný pokus, pokus s použitím antibiotika a pokus s použitím priamo skrmovaného mi krobiálneho prostriedku podľa vynálezu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Vynález je bližšie vysvetlený na príkladoch uskutočnení, ktoré však neobmedzujú jeho rozsah. Príklady sú opísané v súvislosti s obrázkami 1, 2 a 3 na pripojených výkresoch. Príklady 1 až 4 a obr. 1, 2 a 3 sa vzťahujú k skoršiemu vynálezu rovnakého pôvodcu. Príklad 5 a tabuľky 2 až 10 sa vzťahujú ku spôsobu podľa tohoto vynálezu pre hydinový priamo skrmovaný prostriedok. Príklad 6 sa vzťahuje konkrétne na morky a príklad 7 sa vzťahuje na prasatá.

Príklad 1

Príklad 1 korel.uje s obr. 1. Osvetľuje stabilitu produktu pri použití dvoch rôznych kmeňov Enterococcus faecium pri teplotách 4 a 27 °C. Na obr. 1 je znázornená stabilita zapuzdrených kmeňov Enterococcus faecium po zapuzdrení pomocou zariadení s rotujúcim diskom s použitím kyseliny stearovej a pri hmotnosti kultúry 35 %. Tvorba mikrosfér prebiehala za vyššie uvedených podmienok, t.j. suspenzia baktérií v kyseline stearovej 35/65 pri teplote 60 °C s použitím štvorpalcového rotačného disku s rýchlosťou otáčania 3 000 min'^ a rýchlosťou podávania 100 g/min. Guličky boli vytvorené, vložené do teplom zatavených sáčkov s parnou bariérou a týždenne boli deštruktívne odoberané vzorky pre stanovenie CFU. Je zrejmé, že produkt podľa vynálezu si podržal vynikajúce počty jednotiek tvoriacich kolónie organizmov (CFU) po dobu skladovania dosahujúcu až 70 dní.

Príklad 2

Príklad 2 je nutné interpretovať v spojení s obr. 2. Obrázok znázorňuje stabilitu jednotlivých kmeňov vo forme mikrosfér pri primiešaní k obvyklému krmivu v prítomnosti troch

hydinových antibiotík. Krmivo	malo	zloženie:
	jemne drvená	kukurica	54 %
	sój ová múka		26 %
	rybia múčka		2 %
	fosforečnan	d i.vápenatý	1,5	%
	vápenec		1 %
	sójový olej		5,5	%
	obsah vlhkosti	12 %
Bol i	pridané tri	antibiotiká v	tomto	množstve: dekochionát
6 %	(454 ppm),	sal. inomycin	(50	ppm) t	i sodná soľ monensinu

(120 ppm).

K zmesi bola pridaná kultúra v množstve, poskytujúcom približne 1.10^ CFU/g krmiva. Krmivo bolo balené do teplom zatavených sáčkov a ínkubované pri teplote miestnosti. Týždenne boli odoberané vzorky pre stanovenie CFU. Graf na obr. 2 ukazuje výbornú stabilitu.

Príklad 3

Príklad 3 je treba interpretovať v spojení s obr. 3. Osvetľuje stabilitu mikrosfér Enterococcus faecium v krmive v prítomnosti. rôznych antibiotík. Krmivo bolo tvorené 60 % jemne drvenej kukurice, 38 % sójovej múky a 2 % vápenca s obsahom vlhkosti asi 14 %. Bola pridaná kultúra do hodnoty približne 10^ CFU/g krmiva a zmes premiesená. Desaťlibrové alikvotné diely boli skladované v zatavených sáčkoch pri 20 °C a týždenne po dobu 16 týždňov boli odobrané vzorky. Do kr miva boli zahrnuté antibiotiká v tomto množstve:

metylendisalicylát bacitracinu	50	g/t
carbadox	50	g/t
chlórtetracyklín	200	g/t
lasalocid	30	g/t
1ineomycin	100	g/t
neomycin	140	g/t
oxytetracyklin	150	g/t
sulfametazin	100	g/t
tylosin	100	g/t
virginiamycin	20	g/t
ASP250	100	g/t
furadox	10	g/t
V tabuľke 1 sú uvedené minimálne	doby pre	stratu 1 log
jednotiek tvoriacich kolónie (CFU).

Tabuľka 1. Doba v týždňoch pre stratu 1 log počtu CFU pri 20 °C v hnetenom krmive s 14 % vlhkosti

antibiotikum	doba skladovania (dni)
kontrola	103
bacitracin	88
carbadox	54
chlórtetracyklín	60
lasalocid	57
1 incomyci. n	75
neomycin	53
oxytetracyklin	59
sulfamethazin	62
tylosin	52
virginiamycin	112
ASP250	67
furadox	53

Príklad 4

V príklade 4 bola stanovovaná stabilita produktu po peleti.zácii pre použitie v krmive pre kurčatá. Mikrosféry boli vytvorené za vyššie uvedených podmienok. V tomto pokuse boli, ďalej použité tieto podmienky:

surový protein, nie menej ako 18,0 % surový tuk, nie menej ako 5,0 % surová vláknina 6,0 %

S ďalej uvedenými prísadami a podmienkami boli vyrobené pelety s antibiotikom (CTC 50 g/t) a bez neho: kukurica, SBM, srvátka, sójový olej, fosforečnan divápenatý, vápenec, stopový minerálny premix. vitamínový premix, selén, síran meďnatý. Kultúra bola pridaná v množstve približne 5.10$ CFU/g krmiva. Teplota kondi c ionovani a bola 70 °C a pelety za tryskou mali 78 °C. Pelety bol i skladované v nezatavených sáčkoch a týždenne boli odoberané vzorky pre stanovenie CFU.

V žiadnom z prípadov nebola podmienkami peletizácie nepriaznivo ovplyvnená stabilita produktu. Peletizovaný produkt mal konkrétne stabilitu rovnú stabilite nepeletizovaného produktu .

Príklad 5

560 jednodenných kuracích brojlerov Peterson x Arbor Acres bolo náhodne rozdelených do podlahových kŕmnikov (tabuľka 2) s upravovaným stelivom a kŕmené 45 dní. Všetky vtáky uhynuté počas prvých 5 dní, boli nahradené vtákmi rovnakého pohlavia z tej istej dodávky a rovnako ošetrenými. Zloženie základných výživných iniciačných, rastových a útlmových dávok je uvedené v tabuľke 3. Tieto kŕmne dávky boli formulované tak, aby obsahovali 1 425 (iniciačné), 1 450 (rastové) a 1 475 (útlmové) kcal ME/lb spolu s 90 g/ΐ monezinu. Iniciačná dávka bola podávaná od 1. do 21. dňa veku, rastová od 21. do 42 dňa veku a útlmová od 42. do 49. dňa veku. Ako jednotlivé pokusy boli hodnotené: drvená negatívna kontrola (kontrola M); vybrané zapuzdrené priamo skrmované mikrobiálne kultúry obsahujúce Enterococcus faecium 301, č. DSM-Nr. 4789 a Enterococcus faecium 202, č. DSM-Nr. 4788, zapuzdrené mastnou kyselinou pomocou rotačného disku podľa príkladu 1 a prítomné jednotlivo v množstve 50 % priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku, dodávaného k drvenému krmivu v dávke 1.10⁵ CFU/g (probiotikum M); peletizovaná negatívna kontrola (kontrola P); priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok v množstve 1.10^ CFU/g drveného krmiva, peletizovaný (priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok P) a pozitívna kontrola s obsahom 10 g/t virginiamycinu, peletizovaná (Stafac 10). Iniciačná dávka bola v pokusoch, kde bola uskutočnená peletizácia, rozdrobená. Pre každú pokusnú dávku bolo použité zdvojene dvanásť kŕmni kov s 35 kohútikmi a 35 sliepočkami.

Pre každý kŕmni k bola zaznamenávaná telesná hmotnosť, spotreba krmiva a úmrtnosť po prvých 5 dňoch. Pre každý kŕmn.i.k bola vypočítaná konverzia krmiva, upravená konverzia krmiva a konverzia krmiva upravená na telesnú hmotnosť.

Všetky údaje boli podrobené rozptylovej analýze a rozdiely boli stanovené pomocou Fisherovho LSD.

Pred pokusom bol koncentrát priamo skrmovanej mikrobiálnej kultúry nastavený uhličitanom vápenatým. Teoretické výpočty boli u priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku

Q

M 1.10 CFU/g produktu a u priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku P 2.10^ CFU/g produktu. Pre stanovenie skutočného počtu bola u každého produktu meraná duplicitne vzorka 11 g. Každá vzorka bola povlečená štandardnou metódou Pioneer pre baktérie zapuzdrené kyselinou mliečnou.

Pre každú výrobnú fázu bola urobená skúška premiešania. Skúška bola určená pre zaistenie rovnomernej distribúcie priamo skrinovaného mikrobiálneho prostriedku v príslušnom zastúpení v krmive a zachovanie jeho životnosti počas peletizácie. Z každej šarže boli odobrané vzorky v dobe vrecovania; u drvených produktov 4 rovnomerne rozmiestnené vzorky a u peletovaných produktov 10 rovnomerne rozmiestnených vzoriek (t.j. sáčky 1, 3, 5,..., 35, 37 a 39).

a 4.

týždňa pokusu boli odobrané vzorky nekontazo striedavo umiestnených távajúcich kŕmnikov boli odobrané vzorky kŕmneho pokusu.

Počas 1.

minovaného krmiva kŕmnikov; zo zosv 2. a 6. týždni

Rovnaký počet vtákov oboch pohlaví bol usmrtený pre stanovenie hmotnosti hrudného mäsa, telesnej hmotnosti a hmotnosti a dĺžky tenkého čreva. U každého vtáka bol vypočítaný výťažok hrudného mäsa a pomer hmotnosti a dĺžky čreva.

Všetky údaje boli podrobené rozptylovej analýze a rozdiel bol stanovený pomocou kontrastu a odhadovaných hodnôt požadovaných účinkov.

Šesťdesiat vtákov z každého pokusu bolo dopravených na univerzitu k senzorickému chuťovému hodnoteniu.

Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok bez ohľadu na spracovanie zlepšoval (P < 0,05) konverziu krmiva oproti príslušnej kontrole, zatiaľčo hmotnostný prírastok zvyšoval (P < 0,05) proti kontrole len u drveného krmiva (tabuľka 4). Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok P zlepšoval (P > 0,05) konverziu krmiva oproti Stafacu^ 10, ktorý mal podobnú hodnotu (P > 0,05), ako kontrola P.

Produkt mal požadované zloženie, pokiaľ ide o zastúpenie a kmeň (tabuľka 5).

Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok bol v krmive rovnomerne distribuovaný. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok M mal požadované zastúpenie, zatiaľčo priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok P bol v množstve o 1 až 1 1/2 log vyššom, ako sa požaduje pre (tabuľka 6). Vysoké počty u prostriedku P boli dôsledkom istenie dostatočného výťažku iniciačnú a rastovú kŕmnu dávku priamo skrmovaného mikrobiálneho predimenzovania produktu pre zaorganizmov po peletizácii.

prostriedku podlahových kŕmnikov tesne počtom zo 7). Priamo skrmovaný mikrobiálny rastových a útlmových zmesiach v 4. 2 log.

V prípade priamo skrmovaného mikrobiálneho P zodpovedali vzorky skúšky premiešania (tabuľka prostriedok a 6. týždn i

M však v skrmovaný (P < 0,05) proti kontrole M ako hmotnosť, ho mäsa (tabuľka 8), prostriedok P vykázal

Zlepšen i e v skoršom

Pr i amo u drveného mikrobiálny prostriedok M zvýšil tak výťažok hrudnézatiaľčo priamo skrmovaný mikrobiálny zlepšenie (P > 0,05) oproti kontrole P. krmiva súhlasí s výsledkami zistenými pokuse. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podobnú veľkosť zlepšenia výťažku hrudného mäsa,

P nevykázal ako v prípade priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku M. byť dôsledkom ponecháva

Toto zlyhanie môže peletizáciou, ktoré lepšieho využitia energie menej priestoru pre zlepšenie.

Pelet izáciou sa

P^r iemerná hmotnosť krmivu zvýšila o 96 dok zvýšil jednotnosť zlepšením u drveného krmiva.

gP r i amo skrmovaný hmotnosti vtákov vtáka oproti drvenému mikrobiálny (obr. 5) s prostrienaj väčším

Peletizáciou sa oprot i hmotnosť hrudného mäsa o prostriedok zvýšil oproti ho mäsa a jednotnosť (obr. ho krmiva. Stafac^ drvenému krmivu zvýšila

g. Priamo skrmovaný mikrobiálny kontrole priemernú hmotnosť hrudné4) s najväčším zlepšením u drvené10 vykázal najväčšie zlepšenie jednotnosti priemerná u peletizovaných krmív.

Peletizáciou sa oproti drvenému krmivu zvýšil výťažok hrudného mäsa o 0,53 percentných jednotiek. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok M vykázal zvýšenie o 0,84 percentných jednotiek oproti kontrole M, u ktorej bola veľkosť podobná výsledku peletizácie.

Spracovaním priamo skrmovaným mikrobiálnym prostriedkom sa dosiahla kratšia (P > 0,05) dĺžka tenkého čreva, ako pri R oboch kontrolách a u Stafacu , vyjadrené skutočnou dĺžkou, pomerom telesnej hmotnosti i hmotnosti hrudného mäsa (tabuľka

9) . Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok M mal menšiu (P > 0,05) hmotnosť tenkého čreva ako kontrola M, vyjadrené buď ako skutočná hmotnosť alebo percento telesnej hmotnosti alebo hmotnosti hrudného mäsa. Zníženie hmotnosti a dĺžky čreva v prípade priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku ukazuje na menšie množstvo energie nutnej pre výživu a viac energie k dispozícii pre rast, čo potvrdzuje zlepšená konverzia krmiva a výťažok hrudného mäsa (tabuľka 7 až 8).

Vtáky ošetrené priamo skrmovaným mikrobiálnym prostriedD kom P, nemali v porovnaní so Stafacom 10 cudzí pach (tabuľka

10) . V druhom pokuse bolo zistené, že priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok P zlepšil oproti kontrole P chuť stehenného mäsa. Toto zlepšenie však nebolo pozorované v prvom poku se .

Tabuľka 2. Rozvrhnut ie kŕmni kov ošetrenie čísla kŕmnikov kontrola P prostriedok P Stafac 10 kontrola M prostriedok M

2.6.15.17.22.26.104.109.113.117.122.126

4,8,12,16,21,28,105,106,112,118,125,130

5,7,11,18,23,27,101,107,111,116,123,129

3.9.13.20.24.30.102.108.114.119.121.127

1,10,14,19,25,29,103,110,115,120,124,128

Veľkosť kŕmni.ka 4,2’ x 15,5’, jedno rúrkové krmitko, jedna zavesená napájačka, borové hobliny ako stelivo, energetický a odparný chladiaci systém, dobre izolované kúrenie núteným obehom vzduchu, konštrukcia so závesovými prepážkami.

Tabuľka 3. Zloženie základných krmív

zložkv	produkčná fáza
iniciačná	rastová	útlmová
mletá kukurica	65,37	% 67,89	74,29
sójová múka	25,58	23,53	17,83
mäsokostná múčka	3,00	3,00	3,00
tuk	3,36	3,32	2,59
defluorovaný fosfát	0,95	0,79	0,73
uhličitan vápenatý	0,61	0,62	0,63
soľ	0,35	0,31	0,32
stopové minerály	0,05	0,05	0,05
met i on in	0,39	0,28	0,33
lyží n	0,19	0,06	0,18
vitamínový oremix	0,05	0,05	0,05

Tabuľka 4. Produkčné údaje pre podlahové kŕmniky

Peletované Drvené

	Kontrola	P*	Stafac^lO	Kontrola	M*
	hmotnosť, lb	4,79^a	4,81^a	4,79^a	4,54^b	4,68^a _L
	konverzia krmiva	1,871^b	1,827^a	1,855^ab	1,917^c	l,856^ab
	upravená konver- zia krmiva^{1 2 *}	1,832^b	1,789^a	1,807^ab	1,887^c	1,812^ab
	konverzia krmiva
•	upravená na 2 hmotnost	1,801^b	1,755^a	1,775^ab	1,897^c	1,798^b
«	úmrtnosť, %	4,40	4,64	5,95	3,33	5,60

upravená konverzia krmiva = celkové krmivo/(živá + mŕtva hmotnosť) konverzia krmiva upravená na hmotnosť = upravená konverzia krmiva - ((hmotnosť-4,60)/6) ^abc P < 0,05 * podľa vynálezu

Tabuľka 5. Kontrola a zaistenia kvality produktu

Ošet ren i. a	Počet QC^	Počet QA⁷	Pomer kmeňov
prostriedok P	-----^CFU/g produktu 5,75.10° 1,01.10⁸	SF202:SF301 50:50
prostriedok M	9,54.10^z	9,60.10'	57 : 43

kontrola kvality zaistenie kvality

Tabuľka 6. Test premiešania krmiva a výťažok

Produkčná fáza a ošetrenie	Drvené	Peletované	Výťažok^
		---CFU/g	produktu---	% drvený
Iniciačná
kontrola P		NA²	1,06.10³	-
prostriedok Stafac^ 10	P	2,02.10⁶ NA	1,67.10° 6,46.10³	98,69
kontrola M		2,51.10³
prostriedok	M	1,34.10⁵
Rastová
kontrola P p rošt r iedok Stafac^ 10	P	NA 3,89.10⁶ 5,25.10⁴	4.86.10² 1,09.10⁶ 6.42.10³	91,62
kontrola M		1,00.10²
prost r i edok	M	1,48.10⁵
Út l.mová
kontrola P		8,50.10²	1,11.10³	-
prost r iedok Stafac 10	P	7,04.10⁴	4,91.10⁵	117,40
	8,80.10³	1,79.10⁴	-
kontrola M		8,92.10²
p rošt r i edok	M	1,33.10⁵
S t red
kontrola P		8,50.10²	8,28.10²	-
p rošt r iedok Stafac 10	P	8,21.10⁵ 2,15.10⁴	9,64.10⁶ 9,05.10³	118,09
kontrola M		8,72.10²
p rošt r i edok	M	1,38.10⁵

výťažok vypočítaný z údajov transformovaných do log^g

NA = nie je k dispozícii

Tabuľka 7. Zaistenie kvality v podlahových kŕmnikoch ____________Týždeň____________________ Stred

Ošet renie________1_________2__________4__________6_______________

--------------------C F U / g krmív a------------------

kont rola		3,78.10~	3,83.10~	8,60.10^	2,21.10^z	4,08.10
prostriedok	P	9,23.10⁵	9,37.10ζ	8,77.10³	8,48.10⁵	8,96.10
Stafac 10		8,73.10²	1,29.10²	6,46.10²	8,63.10²	8,89.10
kontrola M		3,46.10²	1,26.10²	2,79.10³	2,00.10?	5,08.10
prostriedok	M	1,43.10⁵	1,25.10⁵	1,75.10³	1,00.10³	2,32.10

Tabuľka 8. Hodnotenie výťažku hrudného mäsa

Drvené

Peletované

	Kontrola	P*	Stafac^lO	Kontrola	M’
telesná hmotnosť, g	2240,7	2230,1	2195,9	2143,8	2149,9
hmotnosť hrudného mäsa, g	234,4^a	239,6^a	232,0^a	213,3^b	229,6^a
výťažok hrudného mäsa, % telesnej hmotnosti.	10,51^a	10,68^a	10,58^a	9,93^b	10,67^a

ab

P < 0,05 * podľa vynálezu

Tabuľka 9. Hmotnosť a dĺžka čreva ________Peletované_____ Drvené kontrola P* Stafac^R 10 kontrola M* telesná hmot-

nosť, g	2240,7	2230,1	2195,9	2143,8	2149,9
hmotnosť	hrúd -
ného mäsa, g	234,4^a	239,6^a	232,0^a	213,3^b	229,6^a
hmotnos ť	TS, g	92,6	93,3	93,4	91,4	87,4
dĺžka TS	, i. n	76,3	75,3	76,6	76,1	75,3
TS, g/in		1,21	1 , 23	1,22	1,20	1 , 16
hmotnos ť	TS, g/100	g
telesnej	hmotnost i	4,17	4,18	4,27	4,29	4,08
dĺžka TS	, in/100 g
telesnej	hmotnos t i	3,47	3,40	3,53	3,61	3,53
hmotnosť	TS ,
g/100 g	hmotnost i
h rudného	mäsa	40,19	39,70	40,97	43,96	38,69
dĺžka TS	, in/100 g
hmotnos t	i hrudného
mäsa		33,41^a	32,27^a	33,72^a	36,89^b	33,41

^ab P < 0.05 podľa vynálezu TS tenké črevo

Tabuľka 10. Chuťové panelové hodnotenie

Počet	správnych	identifikácií
Tkanivo	Porovnanie skupín	Pokus 1	Pokus 2	Súčet
stehno	D Stafac 10 vs. kontrola P	6	3	9
	Stafac^R 10 vs. XINOC P	3	4	7
	prostriedok P vs. kontrola P	2	8*	10
hrudné	Stafac^ 10 vs. kontrola P	2	6	8
	Stafac^R 10 vs. XINOC P	1	3	4
	prostriedok P vs. kontrola P	5	4	9

hodnotiaci boli schopný detekovať jednotlivú vzorku v šta titicky významnom (P < 0,05) počte prípadov ¹ počet správnych identifikácií jednotlivého vzorku nutný pre významnosť na úrovni 5 % bol 7 pre n=10 a 11 pre n=20

Bol uskutočnený pokus s brojlermi pre stanovenie účinnosti priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku v drvenom a peletizovanom krmive. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok bez ohľadu na spracovanie zlepšoval (P < 0,05) konverziu krmiva oproti zodpovedajúcej kontrole a súčasne zvyšoval (P < 0,05) prírastok hmotnosti oproti kontrole len u drveného krmiva. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok

D

P zlepšoval (P > 0,05) konverziu krmiva oproti Stafacu 10, ktorý mal podobný výsledok (P > 0,05) ako kontrola P. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok M zvyšoval (P < 0,05) proti kontrole M ako hmotnosť, tak výťažok hrudného mäsa, zatiaľčo priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok P vykázal zlepšenie (P > 0,05) oproti kontrole P. Vtáky ošetrené priamo skrmovaným mikrobiálnym prostriedkom P nemali oproti ošetreniu Stafacom 10 cudziu prichut.

Príklad 6

144 zmiešaných kŕmnych prasiat (priemerná počiatočná hmotnosť 41,5 lb) bolo náhodne rozdelených podľa hmotnosti a pohlavia do kotercov (tabuľka 11) s bridlicovou podlahou a kŕmených 119 dní. Zloženie základnej rastovej a konečnej dávky je uvedené v tabuľke 12. Rastové dávky boli podávané do priemernej hmotnosti 120 lb a potom do porážky nasledovali konečné dávky. Všetky dávky až do 75 lb telesnej hmotnosti obsahovali Mecadox (50 g/t) a potom do 120 lb živej hmotnosti 100 g/ΐ chlortetracyklinu. Ošetrenie zvierat bolo jednak negatívne (kontrola) a jednak vybranými priamo skrmovanými mikrobiálnymi kultúrami vo forme mikrosfér, podávanými v množstve 1 . 10⁴ CFU/g krmiva. Všetky dávky krmiva boli, podávané v drvenej forme. Pre každé experimentálne krmivo bolo použitých šesť zdvojených kotercov po 12 kŕmnych prasatách.

Po príchode do výskumného zariadenia bol prasatám podaný D

Ivomec proti vnútorným a vonkajším parazitom. Po štyroch D týždňoch bol podaný Safeguard proti hlístam.

Pre jednotlivé koterce boli zaznamenané telesné hmotnosti, spotreba krmiva a úmrtnosť. Pre každý koterec bola vypočítaná konverzia krmiva.

Pred pokusom bol koncentrát kultúry vo forme mikrosfér 7 nastavený uhličitanom vápenatým. Teoretický počet bol 2.10 CFU/g produktu. K stanoveniu skutočného počtu bola u produktu skúmaná duplicitná 11 g vzorka. Vzorka bola potiahnutá štandardnou poťahovou metódou pre baktérie v mikrosférach s kyselinou mliečnou.

Naviac bola duplicitne testovaná 1 g vzorka pre overenie počtu a zloženia kmeňov v produkte.

Pre každé ošetrenie boli jeden krát týždenne odoberané vzorky a testované na baktérie v mikrosférach s kyselinou m l.iečnou .

Pri produkte bol potvrdený požadovaný počet organizmov (tabuľka 14) .

Výťažok jednotlivých kotercov sa pohyboval od 1.10^ do Ι,ό.ΙΟ^ cpy/g k_rmiva (tabuľka 15). Obidve extrémne vzorky boli priradené ku chybám pr i. odbere alebo poťahovaní. Zvyšok vzoriek bol. rovnomerne rozložený okolo cieľovej hodnoty 1.1()4 (jpu/g krmiva.

Produkt vo forme mikrosfér oproti kontrole po 28 dňoch zlepšoval (P > 0,05) hmotnostný prírastok a konverziu krmiva (tabuľka 13). V prvom týždni pokusu boli prasatá postihnuté nástupom TGE. To spolu s dobou nutnou k adaptácii tráviaceho traktu prasiat na produkte môže byť dôvodom 28 denného oneskorenia pozorovanej odpovede. Z výsledkov je zrejmé, že mikrosféry priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku podľa vynálezu, rovnako ako pre kuratá a morčatá, fungujú účinne i pre prasatá.

Tabuľka 11. Rozvrhnutie kotercov, pokus 670-9102

ošetrenie	čísla kotercov
kontrola priamo skrmovaný	pros t r i edok	3, 4, 6, 9, 11,12 1, 2, 5, 7, 8, 10
Veľkosť koterca	4,62’ x 16,0’,	jedno štvorotvorové

Smidley, jedna sacia napájačka, teplota kontrolovaná kropením, čiastočne bridlicová podlaha a upravená budova s otvorenou prednou stenou

Tabuľka 12. Zloženie základných krmív

Zložky	Produkčná fáza
Rastová	Útlmová
mletá kukurica	% 76,30	82,20
sójová múka	21,25	15,50
fosforečnan divápenatý	1,05	0,90
uhličitan vápenatý	0,85	0,85
soľ	0,30	0,30
vitamínový a minerálny premix	0,25	0,25

Tabuľka 13. Produkčné údaje pre koterce, pokus 760-9102

	Kontrola	Priamo skrmovaný prostriedok
14. deň
pr i rastok	hmotnosti,	ľ b	9,6	9,2
konverzia	krmiva		2,439	2,483
úmrtnosť,	%		1,41	1,39
28. deň
prírastok	hmotnosti,	lb	26,3	27,9
konverzia	k rm i va		2,405	2,212
úmrtnosť,	%		2,82	1,39
42. deň
pri rastok	hmotnost i	, Lb	45,8	46,8
konverz i a	k rm.i va		2,497	2,428
úmrtnosť,	%		2,82	2,78
56. deň
p r í rastok	hmotnost i ,	lb	69,1	71,5
konve rz i a	k rm i va		2,507	2,457
úmrtnosť,	%		4,23	2,78
70. deň
pri rastok	hmotnosti,	lb	89,4	91,2
konve rz i a	k rm i va		2,735	2,674
úmrtnosť,	%		5,63	2,78
84. deň
pr i rastok	hmotnosti,	lb	111,0	112,0
konve rzia	k r m.i va		2,904	2,882
úmrtnosť,	%		5,63	2,78
98. deň
pri rastok	hmotnosti,	lb	129,9	134,7
konverzia	krmiva		3,071	2,988
úmrtnos ť,	%		5,63	2,78
112. deň
p r i rastok	hmotnosti,	lb	152,2	154,7
konve rz i a	k rm i va		3,164	3,134
úmrtnosť,	%		5,63	2,78
119. deň
pri rastok	hmotnosti,	lb	162,4	165,6
konverzia	k rmiva		3,217	3,177
úmrtnosť,	%		5,63	4,17

Tabuľka 14. Kontrola a zaistenie kvality produktu, pokus

670-9102

Produkt	Počet QC	Počet QA	Pomer	kmeňov
priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok	---CFU/g 4,3	produktu— .10⁷	SF202:	: SF301

Tabuľka 15. Zaistenie kvality v kotercoch, pokus 670-9102

Dátum	Kontrola	Priamo skrmovaný prostriedok
3.5.91	1,7.10³	7.4.10f
8.5.91	1,8.10⁴	1,6.10⁵
22.5.91	0	1,0.10¹
30.5.91	o	2,6.10³
5.6.91	2,0.10²	2,2.10⁴
12.6.91	1,0.10¹	2,0.10⁴
19.6.91	0	9,6.10³
26.6.91	6,7.10²	5,6.10³
3.7.91	4,9.10²	3,2.10³
10.7.91	5,2.10¹	3,0.10⁴
17.7.91	1,0.10²	4,5.10³
24.7.91	0	1,0.10⁴
31.7.91	0	1,2.10⁴
7.8.91	0	6,4.10⁴
14.8.91	0	7,7.10³
21.8.91	0	1,2.10⁴
28.8.91	0	9,1.10³
4.9.91	0	2,9.10⁴
18.9.91	0	8,9.10³
25.9.91	0	5,5.10³
Stred	9,5.10°	8,4.10³

/ k 7 7 7 b - 7¥

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Spôsob podpory rastu zvierat, vyznačujúci sa tým, že sa ku krmivu pridá pri podpore rastu účinné množstvo priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku tvoreného v podstate sušenými životaschopnými stabilnými mikrosférami Enterococcus faecium 301, č. ATCC 55059, na báze mastnej kyseliny a sušenými životaschopnými stabilnými mikrosférami Enterococcus faecium 202, č. ATCC 53519, na báze mastnej kyse 1. iny.
2. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že mikrosféry mastnej kyseliny sa vytvárajú pomocou rotačného disku.
3. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok je tvorený asi 30 až asi 70 % jedných a zbytok tvoria druhé z uvedených mikrosfér na báze mastnej kyseliny.
4. Spôsob podľa nároku 3. vyznačujúci sa tým, že mastnou kyselinou je voľná mastná kyselina C^ ^24^-
5. Spôsob podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že mastnou kyselinou je kyselina stearová.
6. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že množstvo priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku, pridávané ku krmivu, je asi 0,5 libier až asi. 2,0 lb/ΐ krmiva.
7. Spôsob podľa nároku 6, vyznačujúca sa tým, že množstvo priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku je asi 0,8 až asi. 1,2 Ib/t krmiva.
8. Spôsob podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že počet organizmov priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku je asi. 1.10^ až asi 2.10^ CFU/g.
9. Spôsob podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že počet organizmov priamo skrmovaného mikrobiálneho prostriedku je • asi 1.10⁵ CFU/g.

10. Spôsob kura. pod ľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zviera je 11 . Spôsob podľa nároku 1, vyznačuj úci sa tým, že zviera je

prasa.

12.

Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok pre podporu rastu zvierat, vyznačujúci sa tým, že je tvorený v podstate sušenými životaschopnými stabilnými mikrosférami Enterococcus faecium 301 ATCC č. 55059 na báze mastnej kyseliny a sušenými životaschopnými stabilnými mikrosférami Enterococcus faecium 202 ATCC č. 53519 na báze mastnej kyseliny.

13. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podľa nároku
12, vyznačujúci sa tým, že mastnou kyselinou je voľná mastná kyselina C^ až C24 .
14. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podľa nároku 13, vyznačujúci sa tým, že voľnou mastnou kyselinou je kyselina stearová.
15. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že zviera je kura.
16. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podľa nároku

12, vyznačujúci sa tým, že zviera je prasa.
17. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že Enterococcus faecium 301 a Enterococcus faecium 202 sú prítomné v asi rovnakých množstvách.
18. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podľa nároku

12, vyznačujúci sa tým, že obsahuje asi 20 až asi 30 % jedného a zvyšok tvorí druhý z uvedených organizmov Enterococcus faecium 301 a Enterococcus faecium 202.
19. Priamo skrmovaný mikrobiálny prostriedok podľa nároku

16, vyznačujúci sa tým, že mikrosféry Enterococcus faecium 301 a Enterococcus faecium 202 sú prítomné v asi rovnakých množstvách.