JPH07504923A

JPH07504923A - 新規医薬活性フラビリウム化合物

Info

Publication number: JPH07504923A
Application number: JP6507949A
Authority: JP
Inventors: シュリョク、ジョールヂュ; バーリント、ヤーノシュ; ボルベーリュ、イルディコー; キッシュ、ヨラーン; ドゥ・トート、フェレンツ
Original assignee: ビオガル・ジョージィセルジャール・エル・テー
Priority date: 1992-09-21
Filing date: 1993-09-08
Publication date: 1995-06-01
Also published as: AU660113B2; ATE177741T1; DE69323998D1; HU9203000D0; DE69323998T2; US5753695A; HUT65372A; CA2122897A1; EP0619817A1; GR3030538T3; ES2132255T3; IL107043A0; EP0619817B1; CA2122897C; WO1994006787A1; AU4832993A; HU219914B; DK0619817T3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】新規医薬活性フラビリウム化合物本発明は、一般式（Ｉ）：［式中、Ｘは、無毒性陰イオンであり；Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、または−〇Ｙ基（式中、Ｙは水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノ−アシル基またはアミノ−アルキル基）から選ばれ；Ｒ８は、水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノ−アシル基またはアミノ−アルキル基であり；Ｒ８、Ｒ４およびＲｔは、独立して、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり：Ｒ６は、水素、ヒドロキシ基、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である］で示される新規フェノール誘導体に関する。

一般式（１）中、ＹＳＲ３、Ｒ４、Ｒ１、Ｒ６およびＲ２は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であってもよく、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、５ｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルまたはイソペンチル基であり、好ましくは、メチル基である；人−アミノーアンル基は、必須アミノ酸のアシル残基であり、好ましくは、グリシル、アラニル、リジルまたはアルギニル基である。

一般式（Ｉ）で示される化合物は、特にすぐれた選択的抗ウイルス性作用を有する。ＨＩＶウィルスに対するそれらの作用は特に重要であり、ＡＺＴと比較しても、より効果的で、毒性もより少ないことが判明している。

フラボノイドは、植物群の中で広範囲にわたる色素物質であることは周知である。フラビリウム（ｆｌａｖｉｌｉｕＩ９）塩は、この種の化合物の１つ形態を形成している。これらの塩は、食品産業で広く使用されていて、例えば着色果実およびその他の野菜食品に用いられている（例えば、ドイツ特許第１，９０４．８１０号、ＧＤＲ特許第１４０．３５３号、アメリカ特許第３．３１４．９７５号）。

フラビリウム誘導体の医薬的利用は、脂質およびコレステリン減少効果が、ヨーロッパ特許第１９．５２４号、ドイツ特許第２．８０８．８２０号中に記載されているが、一方、ビタミンＰと類似するフラビリウム塩化物の効果は、ドイツ特許第２．００２、４２１号および第２．７０３，３７５号中に記載されている。

フラビリウム誘導体は、種々の抽出方法または合成方法により植物から得ることができる。合成方法の１つによれば、例えば、ドイツ特許第１，９０４．８１０号および第２，８０８，８２３号に従って、適当なフェノール誘導体を、置換カルコンまたはフェニル−β−ジケトンと縮合するか、またはＧＤＲ特許第１４０゜３５３号により、α−クロロ−β−Ｎ、Ｎ−ジメチル−ホルムイミドイル−スチレン過塩素酸塩を、７−アミツーフラビリウム塩を製造するための縮合相手として使用する。

他の可能な反応方法により、所望化合物を、種々の還元方法（Ｍｇ＋硫酸、ＬｉＡＩＨ，、Ｚｎ十無水酢酸）により天然植物性塩基物質から製造する（ドイツ特許第２．　ＯＯ２，４２１号および第２，７０３，３７５号、ヨーロッパ特許第１９，５２４号および日本特許第５５，０３６，６７９号）。

我々の経験から、・一般式（１）で示される化合物の製造は、適当な植物性塩基物質がないため、およびメチル化したクマリン誘導体およびメチル化したフェノール出発物質が通常の条件下、実際的に縮合反応を起こさないために、一部は上記方法により実現できない。

ゴスワミ・チャクラパルティ（Ｇｏｓｗａｍｉ−Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｉ）合成により、クマリンが、反応物質を触媒量のオキシ塩化リンの存在下で加熱するような方法でレゾルシンと縮合することは周知である（ジャーナル・オブ・インディアン・ケミカル・ソサイエティ、第９巻第５９９頁（１９３２年））。

我々は、一般式（Ｉ）で示される化合物が、ゴスワミ・チャクラパルティ合成に類似する方法によって製造され得ることを知った。この方法は、一般式（ＩＩ）：（式中、Ｒ４およびＲ７は、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり。

Ｒ，は、水素；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である）で示されるフェノール誘導体を、一般式（ＩＩＩ）　：（式中、Ｒ１およびＲ２は、水素、またはヒドロキシ基であり：Ｒ３は、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である）で示されるクマリン誘導体と縮合するものである。

縮合は、上記の反応で使用される量より非常に多量のオキシ塩化リンの存在下で行われる。

反応物質に対して算出されるオキシ塩化リンの１．０〜１．５モルを使用するのが好ましい。オキシ塩化リンの代わりに、ルイス酸、例えば塩化亜鉛も使用され得る。縮合は、反応中、７０〜１１５℃の範囲内の温度で行われる。

一層よい収率を得るためには、塩酸ガスを使用するのが好ましい。その場合、反応は室温下で十分行われる。

別法として、一般式（１）で示される化合物は、一般式（ＩＩ）　：（式中、Ｒ４およびＲ７は、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ８は、アセトアセチル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である）で示されるフェノールを、一般式（Ｉｖ）　：（式中、ＲＩおよびＲ２は、水素、またはヒドロキシ基である）で示される化合物と縮合することにより得ることができる。

好ましくは、縮合は、塩酸ガスの存在下、１５〜３０℃の間の温度で行われる。

上記方法の両方において、塩酸塩を分離し、所望の場合には別の薬学的に許容される塩を通常の方法により製造する。

所望により、一般式（Ｉ）：（式中、Ｙおよび／またはＲｓは、水素である）で示される化合物を、ｉ／α−アミノ酸とのエステルに変換するか、またはｉｉ／１〜５個の炭素原子を有するアミノ−アルキル−ハロゲン化物と反応させる。

エステル化は、例えば、ジシクロへキシルカルボジイミドのようなカップリング試薬を用いてＮ−保護−α−アミノ酸で式（Ｉ）で示される適当な化合物と、カップリングさせることにより行われる。アミノ保護基は、通常の保護基であり得、例えば第三級ブトキシ−カルボニル基は、カップリング反応後、酸性処理により除去される。

一般式（Ｉ）で示される化合物の抗−ＨＩＶ効果を実験するために、逆転写酵素活性を測定した（ホフマン、　Ａ、　Ｄ、ら、ピロロジー、第１４７巻第３２６ −３３５頁（１９８５年））。

その結果を、実施例１により得られたモデル化合物５．７．４’−トリヒドロキン−４，３’、　５°−トリメチルーフラビリウムクロリド（ビオガル６）を用いて示す。

細胞およびウィルス　活性試薬を実験するために、菌株ＨＩＶ−Ｉ　ＩＩＩＢに感染させたＭＴ−４細胞系を使用した。細胞を２０ＴＣＩＤｓｏＨＩＶ　１ウイルスで感染させた。

実験操作　下記の活性試薬の濃度、５μｇ／ｃｍ３．２０μｇ／ｃ＋ａ”および１００μｇ／Ｃｌ１１３で実験した。活性試薬を、最初の感染４時間前、ついで、感染後の２４および４８時間後に培養物に添加した。対照としてＨＩＶ感染かつ未処理ＭＴ−４細胞および未感染かつ未処理細胞を使用した。アジドチミジン（ＡＺＴ）一対照のために使用したレトロウィルスをウェルカム社から購入した。

逆転写酵素活性の検討　培養物の上清から５００μｍ部をとり、そのウィルス濃度を測定した。結果を！Ｈ−ＴＴＰを示すＣｐｒＡ／Ｃ１１３で示した。

結果第１表は、ウィルス産生における効果を示す逆転写酵素の活性濃度を示す。活性を３〜４日毎に測定したが、第１表は、７日月、１０日および１８日からの代表的結果だけを示す。

第１表ＨＩＶウィルス増殖に対するビオガル６およびＡＺＴの効果活性物質　用量　ＲＴ活性（ｃｐｓ／ｃ謹りμｇ／ｃ■１　７日　１０日　１８日５　１．７９５　１．２２８　１．１９８ビオガル６　２０　１．７４８　１．６２６　１．３００１００　１．６６６　１．３００　１．３５９５　２．１９５　２．１２７　３８．７９７ＡＺＴ　２０　２．３８６　２．２２４　１．９２１１００　２．２２０　２．１８１　１．８３８ＨＩＶ対照　−１１３，０００８４，０００２８，２１１この表から、ビオガル６化合物が、５μｇ／ｃｔｓ３濃度でＨＩＶ製造を完全に阻止したことが理解できる。ＡＺＴも、５μｇ／Ｃ１１３濃度でＨＩＶ増殖を抑圧したが、この効果はビオガル６化合物の効果よりも劣る。

ビオガル６化合物およびＡＺＴの効果の比較両方の化合物の効果を、以下の濃度で実験した＝５．０．２．５．１．０．０．５．０．１ｇｇ／ｃ−０第２表に代表的結果を要約する。この表から、ビオガル６化合物が１．０および１．０ｇｇ／ｃｌＩ３以下の濃度で全く効果がないことが理解できる。

しかしながら、５．０および２．５μｇ／ｃｍ”濃度でのビオガル６化合物の効果は、長期にわたって不変的であるけれども、ＡＺＴの投与は、より高濃度でさえも効果は一時的であった。

第２表２．５　６．２３１　８．９３８　６．８０３ビオガル６　１．０　９６．６３８　７５．９１７　３８．５９５０．５　１０８．８４６　９８．１５０　４３．８０４２．５　３．２３１　９．０８３　１１６．００１ＡＺＴ　１．０　３．９８９　１５．１１５　７５．５３９０．５　６．１４８　７５．０５１　８４．０４７図１は、ビオガル６化合物の効果の反応動態を示す。図１が示すように、ビオガル６化合物が５μｇ／ｃ＋＋’濃度でＨＩＶ産生を完全に阻止したが、同じ濃度でのＡＺＴは、ＨＩＶ産生を遅らせただけであり、増殖速度は変化がなかった。

ＡＺＴと比較したビオガル６化合物の効果は、長期間永続的である。この相違は、２つの化合物が異なる機構によってその作用を働かせていることを示す。

急性毒性実験によれば、ビオガル６化合物は、毒性がない（ＣＦＬＰ／ＳＰＦマウス；経口および静脈内注射）。

本発明を以下の限定されない実施例により詳細に説明する。

実施例１５、７．４″−トリヒドロキシ−４，３°、５°−トリメチルーフラビリウムクロリドの製造：４−メチル−５，７−シヒドロキシークマリン（３，８４２ｇ）および２．６− シメチルーフエノール（２，４４ｇ）を、ＰＯＣｌ２１００ｍ３およびＺｎＣ１＊　３ｇの存在下１００℃にて３０分間全還流で沸騰させ続広ついで混合物を氷水２００ｃｍ”中に注ぐ。沈殿物をメタノール１００ｃｍ”中に溶解する。メタノール溶液を酢酸エチル３６ｍ”で処理する。沈殿物を濾取し、メタノールに溶解し、フラクトゲルＰＧＭ　２０００吸着剤上クロマトグラフィーにかける。溶出物質を、回転蒸発器中６０℃にて減圧下回酸する。必要ならば、酢酸エチル分離およびクロマトグラフ精製工程を繰り返して行う。

生成物の同定データ：Ｒｆ：０．５８　メルク・セルロース（５６３２）水：塩酸：酢酸＝３：２：５　ｖ／ｖ ’ＨＮＭＲ（２００ＭＨ：ＤＭＳＯ−ｇ）：２．２５　ｐｐｍ：２ＣＨａ；　２．９６　ｐｐｍ：　ｌＣＨ３；６．８−６．９２５　ｐｐｍ：Ｈ６゜Ｈ８：　８．　Ｏｐｐｍ：　Ｈ２’、　Ｈ６’　：　８．０２５ｐｐＩｌ：Ｈ３実施例２５、７．４°−トリヒドロキシ−４，３°、５’−トリメチルーフラビリウムクロリドの製造：２．６−シメチルー４−アセトアセチル−フェノール４ｇおよびフロログルシノール４ｇを、無水エチルアルコール８０ｍ１中に溶解し、ついで塩酸ガスを導入し、溶液を室温にて撹拌する。反応の進行を薄層クロマトグラフィーにより観察する。閉環が終了したとき（約８時間）、反応混合物を水に注ぎ、沈殿物を濾取し、カラムクロマトグラフィーにより精製する。

収率：４．２３ｇ生成物の同定データは、実施例１に記載のものと同じである。

実施例３４°、５．７−ドリヒドロキシー４．３°、５°−トリメチルーフラビリウムクロリド−５，７−ジアラニルエステルの製造：実施例１により製造された化合物１．３ｇを、ジクロロへキシル−カルボジイミド１．６ｇの存在下、Ｎ−ＢＯＣ −アラニン（ＢＯＣ＝第３級ブトキシ−カルボニル基）１．５ｇと反応させる。

反応終了時に沈殿したジクロロヘキシル−ウレアを濾取し、溶媒を濾液から除去し、残渣を酢酸エチル中に溶解する。溶液を再度蒸発させ、酸性処理により保護基を除去後、標題生成物を得る。

収率：１．６ｇフロントページの続き（７２）発明者　ボルベーリュ、イルディコーハンガリー、バー−４０３２デブレツエン、ポルビーロー・テール２番（７２）発明者　キッシュ、ヨラーンハンガリー、バー−４０２９デブレツエン、ファラクタール１９・マーショト／１０番（７２）発明者　ドウ・トート、フェレンツハンガリー、バー−４０２８デブレツエン、ダムヤニツ３９・マーショト／４番

Claims

【特許請求の範囲】

１．式（Ｉ）： ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ〔式中、Ｘは、無毒性陰イオンであり；Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、または−ＯＹ基（式中、Ｙは水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノーアシル基またはアミノーアルキル基）から選ばれ；Ｒ５は、水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノーアシル基またはアミノーアルキル基であり；Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、独立して、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ基、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である］で示される化合物。
２．式（Ｉ）［式中、Ｘは塩化イオンであり；Ｒ１およびＲ２は、−ＯＹ基（式中、Ｙは１〜５個の炭素原子を有するアミノーアルキル基、またはグリシル、アラニル、リジルまたはアルギニル基）であり；Ｒ５は、水素であり；Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、水素、またはメチル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ基、またはメチル基である］で示される請求項１記載の化合物。
３．５，７，４′−トリヒドロキシ−４，３′，５′−トリメチル−フラビリウムクロリド。
４．式（Ｉ）［式中、Ｘは、無毒性陰イオンであり；Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、または−ＯＹ基（式中、Ｙは水素、１〜５個の炭素原子を有する、α −アミノーアシル基またはアミノーアルキル基）から選ばれ；Ｒ５は、水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノーアシル基またはアミノーアルキル基であり；Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、独立して、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ基、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である］で示される化合物の有効量および薬学的に許容され得る希釈剤または担体を含む医薬組成物。
５．活性成分として、式（Ｉ）［式中、Ｘは塩化イオンであり；Ｒ１およびＲ２は、−ＯＹ基（式中、Ｙは１〜５個の炭素原子を有するアミノーアルキル基、またはグリシル、アラニル、リジルまたはアルギニル基）であり；Ｒ５は、水素であり；Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、水素、またはメチル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ基、またはメチル基である］で示される化合物の有効量を含む、請求項４記載の組成物。
６．活性成分として、５，７，４′−トリヒドロキシ−４，３′，５′−トリメチルーフラビリウムクロリドを含む、請求項４記載の組成物。
７．式（Ｉ）： ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ［式中、Ｘは、無毒性陰イオンであり；Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、または−ＯＹ基（式中、Ｙは水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノーアシル基またはアミノーアルキル基）から選ばれ；Ｒ５は、水素、１〜５個の炭素原子を有する、α−アミノーアシル基またはアミノーアルキル基であり；Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、独立して、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ基、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である］で示される化合物の製造方法であって、ａ）式（ＩＩ）： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ（式中、Ｒ４およびＲ７は、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ８は、水素、ヒドロキシ、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である、Ｒ８は、水素である）で示されるフェノール誘導体を、式（ＩＩＩ）：▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩ（式中、Ｒ１およびＲ２は、水素、またはヒドロキシ基であり；Ｒ３は、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基である）で示されるクマリン誘導体と縮合させるか、またはｂ）式（ＩＩ）（式中、Ｒ４およびＲ７は、水素、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ６は、水素、ヒドロキシ、または１〜５個の炭素原子を有するアルキル基であり；Ｒ８はアセトアセチル基である）で示されるフェノール誘導体を、式（ＩＶ）： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＶ（式中、Ｒ１およびＲ２は、水素、またはヒドロキシ基である）で示される化合物と、オキシ塩化リンまたは塩酸ガスの存在下縮合させ、所望により、一般式（Ｉ）（式中、Ｙおよび／またはＲ５は、水素である）で示される化合物を、ｉ）α−アミノ酸とのエステルに変換するか、またはｉｉ）１〜５個の炭素原子を有するアミノーアルキル−ハロゲン化物と反応させることを特徴とする方法。