JPH07285877A - Ｈｉｖ−１の逆転写酵素阻害剤 - Google Patents
Ｈｉｖ−１の逆転写酵素阻害剤Info
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- JPH07285877A JPH07285877A JP6075839A JP7583994A JPH07285877A JP H07285877 A JPH07285877 A JP H07285877A JP 6075839 A JP6075839 A JP 6075839A JP 7583994 A JP7583994 A JP 7583994A JP H07285877 A JPH07285877 A JP H07285877A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 式（Ｉ）：
【化１】
（式中、Ｒは水酸基または水素原子を示す）で表される
化合物から選ばれる少なくとも一種の化合物、該化合物
含有海藻の溶媒抽出エキスを有効成分とするヒト免疫不
全ウィルス−１の逆転写酵素阻害剤。 【効果】 該化合物および該溶媒抽出エキスは、優れた
ヒト免疫不全ウィルス−１の逆転写酵素阻害活性を有
し、ＡＩＤＳの治療薬または予防薬を天然物から提供で
きると期待される。
化合物から選ばれる少なくとも一種の化合物、該化合物
含有海藻の溶媒抽出エキスを有効成分とするヒト免疫不
全ウィルス−１の逆転写酵素阻害剤。 【効果】 該化合物および該溶媒抽出エキスは、優れた
ヒト免疫不全ウィルス−１の逆転写酵素阻害活性を有
し、ＡＩＤＳの治療薬または予防薬を天然物から提供で
きると期待される。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は後天性免疫不全症候群
（ＡＩＤＳ）の原因ウィルスであるヒト免疫不全ウィル
ス−１（ＨＩＶ−１と略す）の逆転写酵素（ＲＴと略
す）の阻害剤、即ちＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤に関するも
のである。
（ＡＩＤＳ）の原因ウィルスであるヒト免疫不全ウィル
ス−１（ＨＩＶ−１と略す）の逆転写酵素（ＲＴと略
す）の阻害剤、即ちＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤に関するも
のである。
【０００２】
【従来の技術・発明が解決しようとする課題】ＨＩＶ−
１は、ウィルス複製に必要な行程である自己ＲＮＡゲノ
ムの逆転写を逆転写酵素によって行う。従って、この逆
転写酵素の阻害剤は抗ＨＩＶ物質となり得る。現在、ア
ジドチミジン（ＡＺＴ）がこの目的でエイズおよび類似
疾患の治療に使用されている。しかしながら、ＡＺＴの
欠点はその毒性による副作用であり、かくしてより優れ
た抗エイズ薬の探索は続いている。本発明は、ＨＩＶ−
１逆転写酵素の新規な阻害剤を天然物から提供すること
を目的とするものである。
１は、ウィルス複製に必要な行程である自己ＲＮＡゲノ
ムの逆転写を逆転写酵素によって行う。従って、この逆
転写酵素の阻害剤は抗ＨＩＶ物質となり得る。現在、ア
ジドチミジン（ＡＺＴ）がこの目的でエイズおよび類似
疾患の治療に使用されている。しかしながら、ＡＺＴの
欠点はその毒性による副作用であり、かくしてより優れ
た抗エイズ薬の探索は続いている。本発明は、ＨＩＶ−
１逆転写酵素の新規な阻害剤を天然物から提供すること
を目的とするものである。
【０００３】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、食用とし
て使用されている海藻由来の物質であり、従って極めて
毒性・副作用の少ない、下記式（Ｉ）で表される化合物
が強いＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性を有することを見い出
し、本発明を完成した。
て使用されている海藻由来の物質であり、従って極めて
毒性・副作用の少ない、下記式（Ｉ）で表される化合物
が強いＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性を有することを見い出
し、本発明を完成した。
【０００４】本発明の要旨は次の通りである。 式（Ｉ）：
【０００５】
【化２】
【０００６】（式中、Ｒは水酸基または水素原子を示
す）で表される化合物〔以下、化合物（Ｉ）という）か
ら選ばれる少なくとも一種の化合物を有効成分とするＨ
ＩＶ−１ＲＴ阻害剤。 化合物（Ｉ）から選ばれる少なくとも一種を含有す
る海藻の溶媒抽出エキスを有効成分とする上記に記載
のＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。 海藻が褐藻アミジグサ（Dictyotaceae) 科アミジグ
サ (Dictyota) 属に属する海藻である上記に記載のＨ
ＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。 褐藻アミジグサ科アミジグサ属に属する海藻がアミ
ジグサ（Dictyota dichotoma) あるいはコモンアミジ
（Dictyota patens)である上記に記載のＨＩＶ−１
ＲＴ阻害剤。 溶媒抽出に用いる抽出溶媒が酢酸エチル、クロロホ
ルム、アセトン、イソプロパノール、ペンタン、ヘキサ
ン、ヘプタン、エーテルおよびトルエンから選ばれる少
なくとも一種の溶媒であることを特徴とする上記に記
載のＨＩＶ−１ＲＴ阻害剤。
す）で表される化合物〔以下、化合物（Ｉ）という）か
ら選ばれる少なくとも一種の化合物を有効成分とするＨ
ＩＶ−１ＲＴ阻害剤。 化合物（Ｉ）から選ばれる少なくとも一種を含有す
る海藻の溶媒抽出エキスを有効成分とする上記に記載
のＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。 海藻が褐藻アミジグサ（Dictyotaceae) 科アミジグ
サ (Dictyota) 属に属する海藻である上記に記載のＨ
ＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。 褐藻アミジグサ科アミジグサ属に属する海藻がアミ
ジグサ（Dictyota dichotoma) あるいはコモンアミジ
（Dictyota patens)である上記に記載のＨＩＶ−１
ＲＴ阻害剤。 溶媒抽出に用いる抽出溶媒が酢酸エチル、クロロホ
ルム、アセトン、イソプロパノール、ペンタン、ヘキサ
ン、ヘプタン、エーテルおよびトルエンから選ばれる少
なくとも一種の溶媒であることを特徴とする上記に記
載のＨＩＶ−１ＲＴ阻害剤。
【０００７】本発明に関して、化合物（Ｉ）としては、
式（Ｉ）におけるＲが水酸基であるヒドロキシジクチオ
ジアルと、Ｒが水素原子であるジクチオジアルが挙げら
れる。化合物（Ｉ）は、通常、化合物（Ｉ）を含有する
海藻、例えば褐藻アミジグサ科アミジグサ属に属する海
藻より分離精製することによって得ることができ、また
自体既知の方法にて合成することによっても得ることが
できる。化合物（Ｉ）は、海藻よりの溶媒抽出エキスの
態様として本発明に供してもよい。化合物（Ｉ）を含有
する海藻としては、例えば褐藻アミジグサ科アミジグサ
属に属する海藻が例示され、特にアミジグサ、コモング
サが好ましいものとして例示される。
式（Ｉ）におけるＲが水酸基であるヒドロキシジクチオ
ジアルと、Ｒが水素原子であるジクチオジアルが挙げら
れる。化合物（Ｉ）は、通常、化合物（Ｉ）を含有する
海藻、例えば褐藻アミジグサ科アミジグサ属に属する海
藻より分離精製することによって得ることができ、また
自体既知の方法にて合成することによっても得ることが
できる。化合物（Ｉ）は、海藻よりの溶媒抽出エキスの
態様として本発明に供してもよい。化合物（Ｉ）を含有
する海藻としては、例えば褐藻アミジグサ科アミジグサ
属に属する海藻が例示され、特にアミジグサ、コモング
サが好ましいものとして例示される。
【０００８】褐藻アミジグサ科アミジグサ属の海藻から
の化合物（Ｉ）の分離精製は、常法に従い適当な有機溶
媒で抽出することによって行うことができる。海藻は、
乾燥粉末状でも生の海藻体の状態でも用いることがで
き、溶媒と攪拌後一定時間室温に放置し、濾過ないし遠
心分離によって得られた粗抽出液を減圧濃縮、乾固する
ことにより、溶媒抽出物（溶媒抽出エキス）を得ること
ができる。抽出溶媒としては、メタノール、エタノー
ル、イソプロパノール、ブタノール、アセトン等の親水
性溶媒、およびクロロホルム、酢酸エチル、ペンタン、
ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、トルエン、アセトニト
リル、エーテル等の親油性溶媒が好ましい。これらの中
で特に好ましい抽出溶媒としては、酢酸エチル、クロロ
ホルム、アセトン、イソプロパノール、エーテル、ｎ−
ヘキサン、トルエン等が挙げられる。上記の溶媒は、各
々単独で用いてもよいし、複数で用いてもよい。
の化合物（Ｉ）の分離精製は、常法に従い適当な有機溶
媒で抽出することによって行うことができる。海藻は、
乾燥粉末状でも生の海藻体の状態でも用いることがで
き、溶媒と攪拌後一定時間室温に放置し、濾過ないし遠
心分離によって得られた粗抽出液を減圧濃縮、乾固する
ことにより、溶媒抽出物（溶媒抽出エキス）を得ること
ができる。抽出溶媒としては、メタノール、エタノー
ル、イソプロパノール、ブタノール、アセトン等の親水
性溶媒、およびクロロホルム、酢酸エチル、ペンタン、
ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン、トルエン、アセトニト
リル、エーテル等の親油性溶媒が好ましい。これらの中
で特に好ましい抽出溶媒としては、酢酸エチル、クロロ
ホルム、アセトン、イソプロパノール、エーテル、ｎ−
ヘキサン、トルエン等が挙げられる。上記の溶媒は、各
々単独で用いてもよいし、複数で用いてもよい。
【０００９】溶媒抽出エキスから化合物（Ｉ）の単離精
製と同定は、常法にて行われる。例えば、抽出液あるい
はその濃縮液をシリカゲルカラムクロマトグラフィー、
ＯＤＳカラムクロマトグラフィーや高速液体クロマトグ
ラフィーなどで分離・精製できる。各画分を、核磁気共
鳴（ＮＭＲ）法および質量分析（ＭＳ）法等により同定
を行う。ＮＭＲに関しては、２００ＭＨｚ以上の超伝導
フーリエ変換（ＦＴ）ＮＭＲ装置を用い、水素（ 1Ｈ）
と炭素（13Ｃ）のＮＭＲスペクトルを、さらにはシフト
相関二次元ＮＭＲスペクトル等をとるのが同定には有効
である。また、ＭＳに関しては、フィールドデソープシ
ョン質量分析（ＦＤ−ＭＳ）が同定には有効である。
製と同定は、常法にて行われる。例えば、抽出液あるい
はその濃縮液をシリカゲルカラムクロマトグラフィー、
ＯＤＳカラムクロマトグラフィーや高速液体クロマトグ
ラフィーなどで分離・精製できる。各画分を、核磁気共
鳴（ＮＭＲ）法および質量分析（ＭＳ）法等により同定
を行う。ＮＭＲに関しては、２００ＭＨｚ以上の超伝導
フーリエ変換（ＦＴ）ＮＭＲ装置を用い、水素（ 1Ｈ）
と炭素（13Ｃ）のＮＭＲスペクトルを、さらにはシフト
相関二次元ＮＭＲスペクトル等をとるのが同定には有効
である。また、ＭＳに関しては、フィールドデソープシ
ョン質量分析（ＦＤ−ＭＳ）が同定には有効である。
【００１０】化合物（Ｉ）および該溶媒抽出エキスは、
抗ＨＩＶ−１ ＲＴ活性を有する。抗ＨＩＶ−１ ＲＴ
活性の測定は、トリチウム化チミジンモノホスフェート
のｃＤＮＡへの取り込み量を調べることで行う。本発明
の阻害剤はこの取り込みを阻害する。ＩＣ50は、反応液
に阻害剤試料を０．５〜１００μｇ／ｍｌの濃度で加
え、阻害率が５０％の時の濃度とした。化合物（Ｉ）、
溶媒抽出エキスは、単独または配合物と混合して製剤化
される。製剤化、少なくとも一種類の活性成分または溶
媒抽出エキスを、一種類かそれ以上の製薬上許容できる
キャリヤーおよび賦形剤とともに含み、任意に他の治療
薬を含むことができる。キャリヤーには、経口、経直
腸、経鼻、局所的、口腔、舌下、経膣または非経口的
（皮下、筋肉内、静脈内、および皮内を含む）投与に適
したキャリヤーが含まれる。本発明のＨＩＶ−１逆転写
酵素阻害剤をエイズおよび類似疾患の治療用に使用する
場合、経口の場合、化合物（Ｉ）として、成人１日当た
り１〜２００μｇ／ｋｇ（体重）を１〜数回に分けて投
与される。
抗ＨＩＶ−１ ＲＴ活性を有する。抗ＨＩＶ−１ ＲＴ
活性の測定は、トリチウム化チミジンモノホスフェート
のｃＤＮＡへの取り込み量を調べることで行う。本発明
の阻害剤はこの取り込みを阻害する。ＩＣ50は、反応液
に阻害剤試料を０．５〜１００μｇ／ｍｌの濃度で加
え、阻害率が５０％の時の濃度とした。化合物（Ｉ）、
溶媒抽出エキスは、単独または配合物と混合して製剤化
される。製剤化、少なくとも一種類の活性成分または溶
媒抽出エキスを、一種類かそれ以上の製薬上許容できる
キャリヤーおよび賦形剤とともに含み、任意に他の治療
薬を含むことができる。キャリヤーには、経口、経直
腸、経鼻、局所的、口腔、舌下、経膣または非経口的
（皮下、筋肉内、静脈内、および皮内を含む）投与に適
したキャリヤーが含まれる。本発明のＨＩＶ−１逆転写
酵素阻害剤をエイズおよび類似疾患の治療用に使用する
場合、経口の場合、化合物（Ｉ）として、成人１日当た
り１〜２００μｇ／ｋｇ（体重）を１〜数回に分けて投
与される。
【００１１】
【実施例】以下、実施例および試験例を示し、本発明を
より具体的に説明する。 実施例１ 溶媒抽出エキスの調製 愛媛県の沿岸にて採取した褐藻アミジグサ科アミジグサ
（Dictyota) 属の海藻アミジグサ（Dictyota dichotom
a) を水で洗浄した後、凍結乾燥し粉砕した。この凍結
粉砕物２３４ｇに、酢酸エチル２リットルを加え、３時
間よく攪拌して抽出した。抽出液を濾過し、不溶分を除
去するとともに濾液を集め溶媒を減圧除去した。緑褐色
の溶媒抽出エキス２．５ｇを取得した。この抽出エキス
の一部をジメチルスルホキサイド（ＤＭＳＯ）に溶解
し、１０％のＤＭＳＯ溶液を調製した。
より具体的に説明する。 実施例１ 溶媒抽出エキスの調製 愛媛県の沿岸にて採取した褐藻アミジグサ科アミジグサ
（Dictyota) 属の海藻アミジグサ（Dictyota dichotom
a) を水で洗浄した後、凍結乾燥し粉砕した。この凍結
粉砕物２３４ｇに、酢酸エチル２リットルを加え、３時
間よく攪拌して抽出した。抽出液を濾過し、不溶分を除
去するとともに濾液を集め溶媒を減圧除去した。緑褐色
の溶媒抽出エキス２．５ｇを取得した。この抽出エキス
の一部をジメチルスルホキサイド（ＤＭＳＯ）に溶解
し、１０％のＤＭＳＯ溶液を調製した。
【００１２】 ＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性の測定 反応液（５０ｍＭトリス−塩酸緩衝液ｐＨ８．３ ６０
μｌ中に、１．２μｇＰｏｌｙ（ｒＡ）・ｐ（ｄＴ）
12-18 （テンプレート・プライマー；ファルマシア社
製）、６．０ｎｍｏｌｅｓチミジントリホスフェート、
１μＣｉトリチウム化チミジントリホスフェート、１０
ｍＭ塩化マグネシウム、５０ｍＭ塩化カリウム、３ｍＭ
ジチオトレイトール、０．１％ノニデットＰ−４０（商
品名：ナカライテスク（株）社製）、１０ｎｇＨＩＶ−
１逆転写酵素を含む）中に、で調製した溶媒抽出エキ
スのＤＭＳＯ溶液を１％となるように加え、３７℃で１
時間反応後生成したｃＤＮＡをイオン交換濾紙で濾過し
て集め、次いで５％Ｎａ2 ＨＰＯ4 、エタノールで洗浄
して液体シンチレーションカウンターで計数した。コン
トロールとして、ＤＭＳＯを１％となるように加えて同
様に測定した。溶液抽出エキスは、この濃度でＨＩＶ−
１ ＲＴ活性を完全に阻害した。
μｌ中に、１．２μｇＰｏｌｙ（ｒＡ）・ｐ（ｄＴ）
12-18 （テンプレート・プライマー；ファルマシア社
製）、６．０ｎｍｏｌｅｓチミジントリホスフェート、
１μＣｉトリチウム化チミジントリホスフェート、１０
ｍＭ塩化マグネシウム、５０ｍＭ塩化カリウム、３ｍＭ
ジチオトレイトール、０．１％ノニデットＰ−４０（商
品名：ナカライテスク（株）社製）、１０ｎｇＨＩＶ−
１逆転写酵素を含む）中に、で調製した溶媒抽出エキ
スのＤＭＳＯ溶液を１％となるように加え、３７℃で１
時間反応後生成したｃＤＮＡをイオン交換濾紙で濾過し
て集め、次いで５％Ｎａ2 ＨＰＯ4 、エタノールで洗浄
して液体シンチレーションカウンターで計数した。コン
トロールとして、ＤＭＳＯを１％となるように加えて同
様に測定した。溶液抽出エキスは、この濃度でＨＩＶ−
１ ＲＴ活性を完全に阻害した。
【００１３】実施例２ 抽出エキスの分離・精製 実施例１において、酢酸エチルにて抽出した溶媒抽出エ
キス２ｇを用いて化合物（Ｉ）の分離・精製を行った。
すなわち、この抽出物をＯＤＳカラムクロマトグラフィ
ー（コスモシール７５Ｃ１８プレップ；カラムサイズ、
３０ｍｍ×５００ｍｍ；展開溶媒、アセトニトリル：水
＝９５：５）、シリカゲルカラムクロマトグラフィー
（ＭＥＲＣＫ社シリカゲル６０：カラムサイズ、２０ｍ
ｍ×３００ｍｍ；展開溶媒、ヘキサン：酢酸エチル＝
８：１）で粗精製した結果、ＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性
のある粗精製物Ａが得られた。 精製物質Ａの単離 粗精製物Ａを、更にセミ分取高速液体クロマトグラフィ
ー（カラム、ＹＭＣＰａｃｋ Ｒ＆Ｄ Ｄ−ＯＤＳ−５
Ｓ−５ １２０Ａ ２０ｍｍ×２５０ｍｍ；溶離剤、
アセトニトリル：水＝６０：４０からアセトニトリル１
００％のリニアグラジエント；検出器、ＵＶ２３０ｎ
ｍ；流速、９．０ｍｌ／ｍｉｎ）で分画して精製物質Ａ
を０．１２ｇ単離した。 精製物質ＡのＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性の測定 上記精製物質Ａの一部をＤＭＳＯに溶解し、５％のＤＭ
ＳＯ溶液を調製した。このＤＭＳＯ溶液を用いて実施例
１と全く同様にしてＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性を測定し
た。コントロールとして、ＤＭＳＯを１％となるように
加えて同様に測定した。精製物質Ａは、この濃度でＨＩ
Ｖ−１ ＲＴ活性を完全に阻害した。 精製物質ＡのＩＣ50 精製物質Ａを反応液に０．５〜１００μｇ／ｍｌの濃度
で加え、阻害率が５０％の時の濃度を求めた結果、ＩＣ
50＝４．３μｇ／ｍｌであった。 精製物質Ａの構造の解析 上記精製物質Ａを２７０ＭＨｚのＮＭＲ、およびＦＤ−
ＭＳを駆使して同定を行った。 1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−Ｎ
ＭＲおよびＦＤ−ＭＳの主なシグナルを以下に示した。
キス２ｇを用いて化合物（Ｉ）の分離・精製を行った。
すなわち、この抽出物をＯＤＳカラムクロマトグラフィ
ー（コスモシール７５Ｃ１８プレップ；カラムサイズ、
３０ｍｍ×５００ｍｍ；展開溶媒、アセトニトリル：水
＝９５：５）、シリカゲルカラムクロマトグラフィー
（ＭＥＲＣＫ社シリカゲル６０：カラムサイズ、２０ｍ
ｍ×３００ｍｍ；展開溶媒、ヘキサン：酢酸エチル＝
８：１）で粗精製した結果、ＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性
のある粗精製物Ａが得られた。 精製物質Ａの単離 粗精製物Ａを、更にセミ分取高速液体クロマトグラフィ
ー（カラム、ＹＭＣＰａｃｋ Ｒ＆Ｄ Ｄ−ＯＤＳ−５
Ｓ−５ １２０Ａ ２０ｍｍ×２５０ｍｍ；溶離剤、
アセトニトリル：水＝６０：４０からアセトニトリル１
００％のリニアグラジエント；検出器、ＵＶ２３０ｎ
ｍ；流速、９．０ｍｌ／ｍｉｎ）で分画して精製物質Ａ
を０．１２ｇ単離した。 精製物質ＡのＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性の測定 上記精製物質Ａの一部をＤＭＳＯに溶解し、５％のＤＭ
ＳＯ溶液を調製した。このＤＭＳＯ溶液を用いて実施例
１と全く同様にしてＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性を測定し
た。コントロールとして、ＤＭＳＯを１％となるように
加えて同様に測定した。精製物質Ａは、この濃度でＨＩ
Ｖ−１ ＲＴ活性を完全に阻害した。 精製物質ＡのＩＣ50 精製物質Ａを反応液に０．５〜１００μｇ／ｍｌの濃度
で加え、阻害率が５０％の時の濃度を求めた結果、ＩＣ
50＝４．３μｇ／ｍｌであった。 精製物質Ａの構造の解析 上記精製物質Ａを２７０ＭＨｚのＮＭＲ、およびＦＤ−
ＭＳを駆使して同定を行った。 1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−Ｎ
ＭＲおよびＦＤ−ＭＳの主なシグナルを以下に示した。
【００１４】1Ｈ−ＮＭＲ δｐｐｍ：９．６９（１
Ｈ，ｓ），９．３３（１Ｈ，ｓ），７．００（１Ｈ，ｄ
ｄ），５．２８（１Ｈ，ｂｒｄ），４．９６（１Ｈ，ｂ
ｒｔ），４．３０（１Ｈ，ｂｒｔ），１．９２（３Ｈ，
ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．５１（３Ｈ，ｓ），
１．１０（３Ｈ，ｄ）13 Ｃ−ＮＭＲ δｐｐｍ：２０３．９（ｄ），１９４．
６（ｄ），１５８．２（ｄ），１４８．０（ｓ），１３
８．４（ｓ），１３１．４（ｓ），１２４．７（ｄ），
１２４．４（ｄ），７３．７（ｄ），５２．２（ｄ），
５０．５（ｄ），４７．９（ｔ），３９．７（ｔ），３
３．３（ｄ），２９．６（ｔ），２５．７（ｔ），２
５．６（ｑ），２０．３（ｑ），１７．７（ｑ），１
７．６（ｑ） ＦＤ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：３１８（Ｍ+ ），１６１，１０
９，６９
Ｈ，ｓ），９．３３（１Ｈ，ｓ），７．００（１Ｈ，ｄ
ｄ），５．２８（１Ｈ，ｂｒｄ），４．９６（１Ｈ，ｂ
ｒｔ），４．３０（１Ｈ，ｂｒｔ），１．９２（３Ｈ，
ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．５１（３Ｈ，ｓ），
１．１０（３Ｈ，ｄ）13 Ｃ−ＮＭＲ δｐｐｍ：２０３．９（ｄ），１９４．
６（ｄ），１５８．２（ｄ），１４８．０（ｓ），１３
８．４（ｓ），１３１．４（ｓ），１２４．７（ｄ），
１２４．４（ｄ），７３．７（ｄ），５２．２（ｄ），
５０．５（ｄ），４７．９（ｔ），３９．７（ｔ），３
３．３（ｄ），２９．６（ｔ），２５．７（ｔ），２
５．６（ｑ），２０．３（ｑ），１７．７（ｑ），１
７．６（ｑ） ＦＤ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：３１８（Ｍ+ ），１６１，１０
９，６９
【００１５】上記のＦＤ−ＭＳの結果から、精製物質Ａ
は分子量３１８の物質であることが確認できる。 1Ｈ−
ＮＭＲと13Ｃ−ＮＭＲのデータおよび文献〔J. Tanaka
andT. Higa. Chemistry Letters, 231 〜232 頁, 1984
年〕等と併せて検討すると、精製物質Ａは化合物（Ｉ）
の一つであるヒドロキシジクチオジアルであることがわ
かる。
は分子量３１８の物質であることが確認できる。 1Ｈ−
ＮＭＲと13Ｃ−ＮＭＲのデータおよび文献〔J. Tanaka
andT. Higa. Chemistry Letters, 231 〜232 頁, 1984
年〕等と併せて検討すると、精製物質Ａは化合物（Ｉ）
の一つであるヒドロキシジクチオジアルであることがわ
かる。
【００１６】実施例３ 抽出エキスの分離・精製 実施例１において、酢酸エチルにて抽出した溶媒抽出エ
キス２ｇを用いて有効成分の分離・精製を行った。すな
わち、この抽出物をＯＤＳカラムクロマトグラフィー
（コスモシール７５Ｃ１８プレップ；カラムサイズ、３
０ｍｍ×５００ｍｍ；展開溶媒、アセトニトリル：水＝
９５：５）、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍ
ＥＲＣＫ社シリカゲルカラム６０：カラムサイズ、２０
ｍｍ×３００ｍｍ；展開溶媒、ヘキサン：酢酸エチル＝
８：１）で粗精製した結果、ＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性
のある粗精製物Ｂが得られた。 精製物質Ｂの単離 粗精製物Ｂを、更にセミ分取高速液体クロマトグラフィ
ー（カラム、ＹＭＣＰａｃｋ Ｒ＆Ｄ Ｄ−ＯＤＳ−５
Ｓ−５ １２０Ａ ２０ｍｍ×２５０ｍｍ；溶離剤、
アセトニトリル：水＝６０：４０からアセトニトリル１
００％のステップワイズグラジエント；検出器、ＵＶ２
３０ｎｍ；流速、９．０ｍｌ／ｍｉｎ）で分画して精製
物質Ｂを０．４７ｇ単離した。 精製物質ＢのＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性の測定 上記精製物質Ｂの一部をＤＭＳＯに溶解し、５％のＤＭ
ＳＯ溶液を調製した。このＤＭＳＯ溶液を用いて実施例
１と全く同様にしてＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性を測定し
た。コントロールとして、ＤＭＳＯを１％となるように
加えて同様に測定した。精製物質Ｂは、この濃度でＨＩ
Ｖ−１ ＲＴ活性を完全に阻害した。 精製物質ＢのＩＣ50 精製物質Ｂを反応液に０．５〜１００μｇ／ｍｌの濃度
で加え、阻害率が５０％の時の濃度を求めた結果、ＩＣ
50＝９．２μｇ／ｍｌであった。 精製物質Ｂの構造の解析 上記精製物質Ｂを２７０ＭＨｚのＮＭＲ、およびＦＤ−
ＭＳを駆使して同定を行った。主なシグナルを以下に示
した。
キス２ｇを用いて有効成分の分離・精製を行った。すな
わち、この抽出物をＯＤＳカラムクロマトグラフィー
（コスモシール７５Ｃ１８プレップ；カラムサイズ、３
０ｍｍ×５００ｍｍ；展開溶媒、アセトニトリル：水＝
９５：５）、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（Ｍ
ＥＲＣＫ社シリカゲルカラム６０：カラムサイズ、２０
ｍｍ×３００ｍｍ；展開溶媒、ヘキサン：酢酸エチル＝
８：１）で粗精製した結果、ＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性
のある粗精製物Ｂが得られた。 精製物質Ｂの単離 粗精製物Ｂを、更にセミ分取高速液体クロマトグラフィ
ー（カラム、ＹＭＣＰａｃｋ Ｒ＆Ｄ Ｄ−ＯＤＳ−５
Ｓ−５ １２０Ａ ２０ｍｍ×２５０ｍｍ；溶離剤、
アセトニトリル：水＝６０：４０からアセトニトリル１
００％のステップワイズグラジエント；検出器、ＵＶ２
３０ｎｍ；流速、９．０ｍｌ／ｍｉｎ）で分画して精製
物質Ｂを０．４７ｇ単離した。 精製物質ＢのＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性の測定 上記精製物質Ｂの一部をＤＭＳＯに溶解し、５％のＤＭ
ＳＯ溶液を調製した。このＤＭＳＯ溶液を用いて実施例
１と全く同様にしてＨＩＶ−１ ＲＴ阻害活性を測定し
た。コントロールとして、ＤＭＳＯを１％となるように
加えて同様に測定した。精製物質Ｂは、この濃度でＨＩ
Ｖ−１ ＲＴ活性を完全に阻害した。 精製物質ＢのＩＣ50 精製物質Ｂを反応液に０．５〜１００μｇ／ｍｌの濃度
で加え、阻害率が５０％の時の濃度を求めた結果、ＩＣ
50＝９．２μｇ／ｍｌであった。 精製物質Ｂの構造の解析 上記精製物質Ｂを２７０ＭＨｚのＮＭＲ、およびＦＤ−
ＭＳを駆使して同定を行った。主なシグナルを以下に示
した。
【００１７】1Ｈ−ＮＭＲ δｐｐｍ：１０．１９（１
Ｈ，ｄ），９．３２（１Ｈ，ｄ），６．９３（１Ｈ，ｄ
ｄ），５．３４（１Ｈ，ｂｒｄ），５．０５（１Ｈ，ｂ
ｒｔ），３．２８（１Ｈ，ｄｄｄ），１．７９（３Ｈ，
ｓ），１．６７（３Ｈ，ｓ），１．５９（３Ｈ，ｓ），
０．９０（３Ｈ，ｄ）13 Ｃ−ＮＭＲ δｐｐｍ：２０３．９（ｄ），１９４．
７（ｄ），１５７．８（ｄ），１４８．８（ｓ），１３
８．２（ｓ），１３１．２（ｓ），１２４．６（ｄ），
１２２．５（ｄ），５６．７（ｄ），４８．８（ｄ），
４１．０（ｔ），３７．８（ｔ），３２．９（ｄ），２
９．４（ｔ），２９．０（ｄ），２６．０（ｔ），２
５．７（ｑ），１７．７（ｑ），１７．５（ｑ），１
７．３（ｑ） ＦＤ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ+ ），１６１，１０
９，６９
Ｈ，ｄ），９．３２（１Ｈ，ｄ），６．９３（１Ｈ，ｄ
ｄ），５．３４（１Ｈ，ｂｒｄ），５．０５（１Ｈ，ｂ
ｒｔ），３．２８（１Ｈ，ｄｄｄ），１．７９（３Ｈ，
ｓ），１．６７（３Ｈ，ｓ），１．５９（３Ｈ，ｓ），
０．９０（３Ｈ，ｄ）13 Ｃ−ＮＭＲ δｐｐｍ：２０３．９（ｄ），１９４．
７（ｄ），１５７．８（ｄ），１４８．８（ｓ），１３
８．２（ｓ），１３１．２（ｓ），１２４．６（ｄ），
１２２．５（ｄ），５６．７（ｄ），４８．８（ｄ），
４１．０（ｔ），３７．８（ｔ），３２．９（ｄ），２
９．４（ｔ），２９．０（ｄ），２６．０（ｔ），２
５．７（ｑ），１７．７（ｑ），１７．５（ｑ），１
７．３（ｑ） ＦＤ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ+ ），１６１，１０
９，６９
【００１８】上記のＦＤ−ＭＳの結果から、精製物質Ｂ
は分子量３０２の物質であることが確認できる。 1Ｈ−
ＮＭＲと13Ｃ−ＮＭＲのデータおよび文献〔J. Finer,
J. Clardy, W. Fenical, L. Minale, R. Riccio, J. Ba
ttafle, M. Kirkup and R.E.Moore, J. Org. Chem., 44
巻, 2044〜2047, 1979年〕等と併せて検討すると、精
製物質Ｂは化合物（Ｉ）の一つであるジクチオジアルで
あることがわかる。
は分子量３０２の物質であることが確認できる。 1Ｈ−
ＮＭＲと13Ｃ−ＮＭＲのデータおよび文献〔J. Finer,
J. Clardy, W. Fenical, L. Minale, R. Riccio, J. Ba
ttafle, M. Kirkup and R.E.Moore, J. Org. Chem., 44
巻, 2044〜2047, 1979年〕等と併せて検討すると、精
製物質Ｂは化合物（Ｉ）の一つであるジクチオジアルで
あることがわかる。
【００１９】
【発明の効果】化合物（Ｉ）は、優れたＨＩＶ−１逆転
写酵素阻害活性を有し、ＡＩＤＳの治療薬または予防薬
を天然物から提供できると期待される。
写酵素阻害活性を有し、ＡＩＤＳの治療薬または予防薬
を天然物から提供できると期待される。
フロントページの続き (72)発明者 美籐 望 愛媛県伊予市森728番地 株式会社海藻資 源研究所内
Claims (5)
- 【請求項１】 式（Ｉ）： 【化１】 （式中、Ｒは水酸基または水素原子を示す）で表される
化合物から選ばれる少なくとも一種の化合物を有効成分
とするヒト免疫不全ウィルス−１の逆転写酵素（ＨＩＶ
−１ ＲＴと略す）阻害剤。 - 【請求項２】 式（Ｉ）で表される化合物から選ばれる
少なくとも一種を含有する海藻の溶媒抽出エキスを有効
成分とする請求項１記載のＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。 - 【請求項３】 海藻が褐藻アミジグサ（Dictyotaceae)
科アミジグサ (Dictyota) 属に属する海藻である請求項
２記載のＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。 - 【請求項４】 褐藻アミジグサ科アミジグサ属に属する
海藻がアミジグサ（Dictyota dichotoma) またはコモン
アミジ（Dictyota patens)である請求項３記載のＨＩＶ
−１ ＲＴ阻害剤。 - 【請求項５】 溶媒抽出に用いる抽出溶媒が酢酸エチ
ル、クロロホルム、アセトン、イソプロパノール、ペン
タン、ヘキサン、ヘプタン、エーテルおよびトルエンか
ら選ばれる少なくとも一種の溶媒であることを特徴とす
る請求項２記載のＨＩＶ−１ ＲＴ阻害剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6075839A JPH07285877A (ja) | 1994-04-14 | 1994-04-14 | Ｈｉｖ−１の逆転写酵素阻害剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6075839A JPH07285877A (ja) | 1994-04-14 | 1994-04-14 | Ｈｉｖ−１の逆転写酵素阻害剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07285877A true JPH07285877A (ja) | 1995-10-31 |
Family
ID=13587777
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6075839A Pending JPH07285877A (ja) | 1994-04-14 | 1994-04-14 | Ｈｉｖ−１の逆転写酵素阻害剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07285877A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2760192A1 (fr) * | 1997-03-03 | 1998-09-04 | Inovat Sarl | Procede d'obtention de nouvelles substances biologiquement actives, les substances ainsi obtenues et les compositions en refermant |
| KR100786358B1 (ko) * | 2007-01-12 | 2007-12-17 | 재단법인 제주하이테크산업진흥원 | 항염활성을 나타내는 참그물바탕말 추출물 |
| US7662852B2 (en) | 2003-05-22 | 2010-02-16 | Lead Chemical Co., Ltd. | Compounds and preparations having antiviral effect |
-
1994
- 1994-04-14 JP JP6075839A patent/JPH07285877A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2760192A1 (fr) * | 1997-03-03 | 1998-09-04 | Inovat Sarl | Procede d'obtention de nouvelles substances biologiquement actives, les substances ainsi obtenues et les compositions en refermant |
| WO1998039019A1 (fr) * | 1997-03-03 | 1998-09-11 | Inovat S.A.R.L. | Procede d'obtention de substances biologiquement actives, les substances ainsi obtenues et les compositions en renfermant |
| US7662852B2 (en) | 2003-05-22 | 2010-02-16 | Lead Chemical Co., Ltd. | Compounds and preparations having antiviral effect |
| KR100786358B1 (ko) * | 2007-01-12 | 2007-12-17 | 재단법인 제주하이테크산업진흥원 | 항염활성을 나타내는 참그물바탕말 추출물 |
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