JPH07503474A

JPH07503474A - ３−セフェム−４−カルボン酸誘導体の精製方法

Info

Publication number: JPH07503474A
Application number: JP5513698A
Authority: JP
Inventors: ルデシエール，ヨハネス; プラゲール，ベルンハルト; ウオルフ，シークフリード
Original assignee: バイオケミ・ゲゼルシヤフト・エム・ベー・ハー
Priority date: 1992-02-05
Filing date: 1992-12-21
Publication date: 1995-04-13
Anticipated expiration: 2013-11-18
Also published as: KR950700311A; DE69233249T2; DE69232048T2; DE69232048D1; CA2124322A1; US6136967A; ATE205214T1; EP1103555A1; ATE253583T1; US5869648A; EP0630380A1; EP0630380B1; SG48415A1; EP1103555B1; DE69233249D1; PT630380E; JP2825655B2; ES2162812T3; WO1993016084A1; ES2210047T3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】３−セフェム−４−カルボン酸誘導体の精製方法本発明は、式ＩのＺ／Ｅ　（シス／トランス）７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル）− ３−セフェム−４−カルボン酸中のＥ−（トランス）異性体量を減少させる方法に関する。

Ｚ異性体、つまり式Ｉａの７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム−４− カルボン酸は、例えば式おいては、トランス異性体を高性能液体クロマトグラフィ３５２２のような有効性の高い広スペクトル抗生物質の製造のための中心的中間体である。

２（すなわちシス）配置が、グラム陰性菌におけるセファロスポリン系最終生成物の有利な抗菌性を決定する性質を表すことは公知である。従って、可能な限り少量のＥ（すなわちトランス）異性体を有する活性物質が最適な効力のために所望される。ＵＳ薬局方によれば、例えばセフプロジル中の望ましくないＥ異性体は１１％を越えてはいけない。

上記抗生物質の製造のための合成方法からはＥ異性体が混合したＺ異性体が生じる。

対応するセファロスポリン核からアセトアルデヒドとのウィツテイヒ反応によって２重結合を合成する間に、Ｅ異性体に対するＺ異性体比を所望の通りに高めることはできない。イギリス特許出願２　１３５　３０５には、７β−［Ｄ−２− （ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（ｐ−ヒドロキシフェニル）アセトアミド］−３−セフェム−４−カルボン酸ベンズヒドリルエステルからのセフプロジルの製造が記載されている。上記イギリス出願の手順８に−によって分離している。

ＵＳＰ４　７２７　０７０では、アセトンとの反応後活性物質への再開裂させることによって、７−　［Ｄ−２−アミノ−２−（Ｚ及びＥ）−１−プロペン−１ −イル）セフ−３−エム−４−カルボン酸（セフプロジル）のＺ／Ｅ混合物から所望されないＥ異性体を除去している。最終生成物に近い中間体のクロマトグラフィーによる精製は高価であり、最終生成物の化学的誘導体化による精製がもちろんもっとも高価な態様である。

より安価なのは、比較的異性体の無い中間生成物、つまり７−アミノ−３−［ＣＺ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム−４−カルボン酸の製造である。しかし、必要なオレフィン化反応は所望の２化合物の方に十分選択的に進行し得ない。例えばイギリス特許出願　２１７３７９８では、抗生物質セフプロジルへの中間段階としてのウィツテイヒ反応においてＺ／Ｅが最大９０／１０の混合物として７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸ペンズヒドリルエステル異性体の割合が９．７％の７−アミノ−３−［（Ｚ）　−１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸゛が生成される。実施例４ではＺ／Ｅの割合が８３／１７である。ＥＰ−Ａ−０２９２８０６では、７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４− カルボン酸が、Ｚ／Ｈの最大比９１／９で製造される。この中心的中間生成物段階での更なる精製は記載されていない。

８割合の非常に高い式ＩのＺ／Ｅ７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル） −３−セフェム−４−カルボン酸が、前記式Ｉの化合物の塩酸塩又は金属もしくはアミン塩を介して、又は前記式■の化合物の吸着クロマトグラフィーによって、Ｅ含有量の低い前記式Ｉの化合物に転化し得ることが驚くべきことに見いだされた。　特に本発明は、（式中、プロペニル基はＺ及びＥ配置を有する）の化合物の塩酸塩を、式Ｉの化合物及び塩酸がら、式１′のＺ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中で形成すること、又は、Ｚ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中に、式Ｉ′の化合物のＺ／Ｅ混合物中の７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イル］− ３−セフェムー４−カルボン酸の塩酸塩の少なくとも一部を溶解させ、式ビの濃縮されたＺ異性体を回収すること、及び任意で、ｐＨを調整することによりて、式■′の得られた化合物をＥ量の少ない式Ｉの遊離化合物に転化すること、あるいは［式中、プロペニル基はＺ及びＥ配置を有し、ＸｌはＬｉ１、Ｎａ”、Ｒ４、アンモニウム又は式■ （式中、ＲｔＳＲｚ及びＲｓは独立して水素、（Ｃ＋−＋＋）フルキル、任意に置換されたベンジル、（Ｃ＜−ａ）シクロアルキルであるか又は、Ｒ１とＲ２及び窒素原子は任意で１又は２個の付加へテロ原子を含む５又は６員の複素環を表し、Ｒ３が上記定義の通りであり、ここでＲｔ、ＲｔもしくはＲ８の１つは水素でない）の陽イオンである］の塩を、式■のＺ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中で、式Ｉの化合物をリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基又はアンモンニア又は式■ （式中、Ｒ１、Ｒ１及びＲ８は上記定義の通りである）のアミンと反応させ、得られた式■の化合物を任意で補助溶剤を添加することで沈殿させることによってか、又はリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基又はアンモンニアを用いて溶剤もしくは溶剤混合物中に式１の化合物を溶解し、リチウム、ナトリウムもしくはカリウム源又は式■のアミン及び任意で補助溶剤を添加することで式■の化合物を沈殿させることによって形成し、次いで酸を添加して式■の化合物をＥ量の少ない式■の化合物又は式Ｉ′のその塩酸塩に転化すること、あるいはＣ）式Ｉの化合物の溶液を吸着クロマトグラフィーにかけることによって、７− アミノ−３−［１−プロペン−１−イル］−３−セフェムー４−カルボン酸のＺ／Ｅ混合物中の７−アミノ−３−［（Ｅ）＝１−プロペン−１−イル］−３−セフェムー４−カルボン酸を枯渇させる簡単且つ有効な方法に関する。

方法ａ）は以下のように実施し得る：塩酸塩の形成は式Ｉ′のＺ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中で実施される。

式■′の塩酸塩はプロトン性及び非プロトン性媒体において形成し得る。水性系で実施する場合、式Ｉの化合物のＺ／Ｅ混合物を水又は、例えばインプロパツールである水性アルコール、水性アセトンもしくはアセトニトリルのような水性有機溶剤に塩酸を添加することによって溶解させ、有機補助溶剤の添加によって塩酸塩を沈殿させる。適切な有機補助溶剤は特に、アセトニトリルのような有機ニトリル；例えばアセトンであるケトン；例えばメタノール、エタノール、イソプロパツール、イソブタノールであるアルコール；例えば第３ブチルメチルエーテル、ジエチルエーテルもしくはテトラヒドロフランであるエーテル；例えば酢酸エチルもしくは酢酸イソプロピルであるエステル又はそれらの混合物である。はとんど無水の系で実施する場合、式ＩのＺ／Ｅ混合物を水を含まない塩酸によって、濃縮された形で例えばメタノール又はイソプロパツールであるアルコールに溶解し、次に上記の補助溶剤の１つで希釈することによって、結晶性のＺ濃縮生成物が晶出する。

別の変形例によれば、式Ｉ′の塩酸塩を、７−アミノ−３−（１−プロペン−１ −イル）−３−セフェム−４−カルボン酸塩酸塩のＥ異性体が対応するＺ異性体よりもよく溶解する溶剤又は溶剤混合物に懸濁又は溶解させてもよい。

適切な溶剤は、例えばメタノール、エタノールもしくはイソプロパツールであるアルコール又は例えばスルホランであるスルホンである。次に例えば、任意に上述の補助溶剤の１つを添加することによってＺ又はＥ異性体生成物の溶解度を調整することによって沈殿させて、Ｅ量の少ない式Ｉ′の化合物の塩酸塩が得られる。

上記によってＺ／Ｅの割合がかなり改良された塩酸塩を、例えば水中での等電点へのｐＨ調整のような従来の方法によって、再び式■の化合物に転化してもよい。

式■の７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸のＺ及びＥの混合物をアルカリ又は酸中で水に溶解して、ｐＨを等電点に設定することによって再び沈殿させた場合、改善はなく、むしろＺ／Ｅの割合を悪化させる（例１１ａ及びｌｌｂの対照実験参照）。一方、式Ｉ′の７−アミノ −３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸の結晶性塩酸塩を使用すると、Ｚ／Ｅ比は驚くべきほど著しく改善される。好ましくないＥ化合物の枯渇割合は７％以下である。

式■′の化合物は、例えば９１：９以下、９２：８以下、便利には９４：６以上９５：５以下、９７：３以下又は９９：１以下の割合で種々の量のＺ／Ｅ異性体を含み、ここに記載の方法によって記載のように製造され得る。

式Ｉ′の結晶性塩酸塩は新規で本発明の一部を形成する。

Ｚ／Ｅ比が少な（とも９１：９以下である、式１′の塩酸塩もまた新規で本発明の一部を形成する。

方法ｂ）は以下のように実施し得る：式■の化合物はプロトン性又は非プロトン性の媒体中で形成され得る。水性系で実施する場合、例えば水酸化物、炭酸塩もしくは炭酸水素塩であるリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基のような塩基、又は、アンモニアのような窒素含有塩基を添加することによって、式Ｉの化合物のＺ／Ｅ混合物を水又は、アセトンもしくは例えばイソプロパツールであるアルコールのような水性有機溶剤に溶解する。次に式■のアミン又はリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源を添加し、前記溶液を有機補助溶剤で任意に希釈することによって、式Ｈの化合物が沈殿する。あるいは、式■の化合物のＺ／Ｅ混合物を、水又は、アセトンもしくは例えばイソプロパツールであるアルコールのような水性有機溶剤に懸濁してもよく、前記懸濁液をまずリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源、又はアンモニア、又は式■の化合物、次に有機補助溶剤によって処理し、リチウム、ナトリウムもしくはカリウムアセテートのようなリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源が使用される場合は、例えば水酸化物、炭酸塩もしくは炭酸水素塩であるリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基によって任意でｐＨを調整しながら処理する。

有機補助溶剤の例は上記方法ａ）に与えられている。

典型的なリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源は、酢酸のナトリウムもしくはカリウム塩又は２−エチルヘキサン酸のリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩のようなカルボン酸のリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩を包含する。

非プロトン性媒体で実施する場合、式ＩのＺ／Ｅ混合物を有機溶剤に懸濁し、式 ■の塩基を添加し、任意に補助溶剤又は補助溶剤の混合物で希釈する。有機溶剤の例は、例えばジメチルホルムアミドであるアミド；例えばジメチルスルホキシドであるスルホキシド；例えばスルホランであるスルホン；例えばジクロロメタンであるハロゲン化炭化水素；例えばアセトンであるケトン：エステル；例えばテトラヒドロフランであるエーテル；例えばメタノール、エタノール、イソプロパツール、インブタノールであるアルコール；例えばアセトニトリルであるニトリル又はこれらの溶剤の混合物である。さらに溶剤を、例えばジエチルエーテル又は第三ブチルメチルエーテルと混合して添加してもよい。

式■の化合物の例は第三ブチルアミン、ベンジルアミン、ジベンジルアミン、ジシクロヘキシルアミン又は２，４゜４−トリメチルペンチル−２−アミンである。

式■の化合物においてＲ１とＲ２及び窒素原子が任意で１又は２個の付加へテロ原子を含む５又は６員の複素環を表すならば、これらは好ましくは酸素又は硫黄原子である。

複素環の例はモルホリン、Ｎ−メチル−モルホリン、オキサゾリンン又はチアゾリジンである。

式■の化合物の好ましい例はジシクロヘキシルアミン及び２．４．４−トリメチルペンチル−２−アミンである。

式■の化合物は、式■の化合物を水に溶解又は懸濁し酸性化することによって、Ｅ量の少ない式Ｉの化合物に容易に転化することができ、窒素含有塩基は、最初のアルカリニ程で抽出によって任意で除去してもよいし、前記塩基が水にほとんど溶解しない塩を生成するときには、アルコール又はケトンのような有機溶剤の添加によって溶液中に保存しておいてもよい。

式■の化合物は化合物１′に転化し得る。

式■（式中、Ｘ＋はアンモニア又は式■のカチオンである）の化合物は新規で本発明の一部を形成する。ジシクロヘキシルアンモニウム塩及び（２，４，４−トリメチルペンチルー２）アンモニウム塩が好ましい。

方法ｂ）はいくつかの利点を有する。式Ｈの化合物は容易に沈殿及び結晶化する。方法ｂ）は、例えば方法ａ）からの、高いＥ量を有する及び／又は母液等からの副産物を含む式ＩのＺ／Ｅ混合物、又は、副産物を含む方法Ｃ）からの初期溶離画分に適用して、低いＥ量及び高い純度を有する生成物を得る場合（実施例４ｂ参照）、特に有利である。前記方法を母液から誘導される生成物に適用しうることは総収量の改善という利点をも有する。

所望のＺ／Ｅ割合を得るために方法ａ）及びｂ）を任意で繰り返してもよいし、式■の化合物を式Ｉ′の化合物に転化してもよい。

方法Ｃ）は以下のように実施し得る：例えばアンモニアである塩基を添加することによって式Ｉの化合物を水に溶解する。吸着剤には例えば、Ｎｏｒｉｔｃｃ−１，５Ｘ−ｐｌｕｓ、Ｃ−ｇｒａｎｕｌａｒ又はＣｅｃａｒｂｏｎ　ＧＡＣ４０である活性炭；　（例えば三菱型の）ＨＰ−２０、ＨＰ−２１もしくはＳＰ　２０７、（例えばＲｏｈｍ−Ｈａａｓ製の）ＸＡＤ−１１８０、ＸＡＤ−１６００もしくはＸＡＤ　１６、又は（例えばＴｏｓｏ−Ｈａａｓ製の）Ａｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅ　ＣＧ１６１のような吸着樹脂が包含される。好ましくは吸着樹脂はＸＡＤ−１６００又はＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅ　ＣＧ１６１である。溶離は水で実施される。本方法ではＥ異性体はＺ異性体より高い吸着性を示し、このためＺ異性体より遅く溶離する。その結果、最初の溶離画分は主にＺ異性体を含み、−力量後の画分は主にＥ異性体を含む。それ故、ｐＨ値を等電点、つまり２．５〜４．５、好ましくは３．０〜３．７付近に調整することによって結晶化が起こり、所望の生成物を得ることができる。どの画分を合わせるかによって、Ｅ異性体の量が非常に少ない（く３％）生成物又は７〜９％のＥ異性体を有する生成物が得られる。

吸着剤の量は、所望の溶解度及び式Ｉの出発化合物のＺ／Ｅ比による。

方法Ｃ）は非常に簡単で経済的な方法である。吸着剤は再利用し得る。溶離は水で実施され、有機溶離剤は使用しない。装置は単純である。勾配溶離又は逐次溶離、及びｐＨの変化は必要ない。

方法ａ）　、ｂ）及びＣ）は工業的規模に適している。

本発明を一層詳しく説明するがその範囲を決して限定するものでない以下の実施例では、全ての温度は℃で与えられている。

実施例では、以下の略語が使用されている。

ＰＡＣＡ＝７−アミノ−３−［（Ｚ／Ｅ）　−１−プロペン−１−イル］−３− セフェムー４−カルボン酸７−ＡＣＡ＝７−アミノ−セファ０スポラン酸７−ＡＤＣＡ＝７−アミツーゾスアセトキシーセフアロスボラン酸１、Ｅ−枯渇　７−アミノ−３−［（Ｚ／Ｅ）−１−プロペン−１−イル］−３ −セフェムー４−カルボン酸塩酸塩実施例１ａ）１５ｍｌのメタノール中５Ｎ−ＨＣ１と３０ｍ１のアセトニトリルとの混合物を氷水で冷却する。１５ｇのＰＡＣＡ　（Ｚ／Ｅ比＝８５．４／１４．６）を前記溶液に投入する。５分間撹拌後、溶液を得る。冷却浴を除去し、前記溶液を３００　ｍ　ｌのアセトニトリルの滴下添加によって３０分かけてゆっ（り希釈する。約７０ｍ１のアセトニトリルを添加後、前記溶液にＰＡＣＡ塩酸塩を種晶として添加する。生じた結晶性懸濁液を氷で冷やしながらさらに１時間撹拌する。生成物を吸引フィルターを通して単離し、４０ｍ１ずつのアセトニトリルで２回洗浄して真空乾燥室で乾燥する。

収量：　１４．１ｇ塩化物：　１２．８％Ｚ／Ｅ　比　二　８９．　９／１０．　１実施例１ｂ）１０ｍｌのアセトニトリルと５ｍｌの濃ＨＣＩの水溶液とを氷水で冷却し、Ｚ／Ｅ比が８５．４／１４．６のＰＡＣＡ５ｇを撹拌しながら投入する。約２０分後、溶液が得られる。前記溶液に１００ｍ１のアセトニトリルをゆっくり混合するが、そのアセトニトリル３０ｍ１を添加した後、溶液にＰＡＣＡ塩酸塩を種晶として添加する。前記アセトニトリルの添加完了後、生じた結晶性懸濁液を氷で冷却しながら更に１時間撹拌し、次いでろ過する。続いて塩酸塩を、１５ｍ１ずつのアセトニトリルで２回洗浄し、乾燥する。

収量：　３．４ｇＺ／Ｅ比：　９２．８／７．２実施例１ｃ）Ｚ／Ｅ比が８９．１／１０．１のＰＡＣＡ塩酸塩１ｇを２ｍｌのメタノールで処理して溶液を簡単に得る。急速に再結晶化する。懸濁液を２０ｍ１のアセトニトリルとゆっ（り混合する。結晶性懸濁液を氷で冷却しながら更に１時間撹拌し、次いでろ過する。生成物を５ｍｌずつのアセトニトリルで２回洗浄し、乾燥する。

収量：　０．６ｇＺ／Ｅ　比　二　９５．　５／４．　５実施例１ｄ）Ｚ／Ｅ比が８９．９／１０．１のＰＡＣＡ塩酸塩１ｇを２ｍｌのメタノール、エタノール又はインプロパツールに懸濁させる。１時間撹拌し、氷で冷却後、通常の方法で固形物を単離し、乾燥する。

Ｚ／Ｅ比ａ）メタノール　９７．２／２．８ｂ）エタノール　９１．１／８．９０）イソプロパツール　９２．５／７．５２．７−アミノ−３−［（Ｚ／Ｅ）− １−プロペン−１−イルコー３−セフェムー４−カルボン酸塩酸塩の７−アミノ −３−［（Ｚ／Ｅ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェムー４−カルボン酸への転化実施例２）Ｚ／Ｅ比が８９．９／１０．１のＰＡＣＡ塩酸塩２ｇを２０ｍ１の水に投入する。懸濁液のｐＨ値は０．９である。

懸濁液を２ＮのＮａＯＨでｐＨ３，５に注意深く調整する。

懸濁液を氷で冷却しながら更に１時間撹拌し、生成物をろ別し、５ｍｌずつの水で２回洗浄し、乾燥する。

収量：　１．７ｇＺ／Ｅ比：　８９．７／１０．３実施例３）飽和酢酸カリウム水溶液２０ｍ１とイソプロパツール２０ｍ１との混合物に、含有率９０％（主な副生成物　７−ＡＤＣＡｌ、９％）のＰＡＣＡ　（母液生成物＞　（Ｚ／Ｅ比＝６３　：　３７）１０ｇを添加する。得られた懸濁液のｐＨを５Ｎ−ＫＯＨでｐＨ８，８に調整し、生じた溶液を１００ｍ１のイソプロパツールで希釈する。生じた懸濁液を室温で１時間撹拌し、続いて冷蔵庫に一晩放置する。沈殿物をろ別し、イソプロパツールで洗浄し乾燥する。

収量：　５．１ｇＰＡＣＡ含有率（ＨＰＬＣ）：　カリウム塩として８６％／’９９．７％Ｚ／Ｅ比：　７０．８／２９．２７−ＡＤＣＡ含有率二　０．４％実施例４ａ）１０ｇのＰＡＣＡ　（Ｚ／Ｅ比９２／８）（ＨＰＬＣ含有率９９％）を３０ｍ１の水と３０ｍ１のアセトンとの混合物に懸濁する。溶液が生じるまでアンモニア水を添加する。

塩基性溶液（ｐＨ約８．８）を９．１ｍｌのジシクロヘキシルアミンで処理し、次に２５０ｍ１のアセトンを滴下添加し、それによってＰＡＣＡ−ジシクロヘキシルアンモニウム塩が沈殿する。懸濁液を更に１時間室温で撹拌し生成物をろ別し、アセトンで洗浄し、真空室で乾燥する。

収量：　１３．５ｇＰＡＣＡ含有率（ＨＰＬＣ）：　５３．３％ジシクロヘキシルアミン含有率（ＧＣ）：　３９．３％水含有率：　１．７％アセトン含有率：　１．１％Ｚ／Ｅ比：　９６／４実施例４ｂ）Ｚ／Ｅ比が５６．４／４３．６のＰＡＣＡ　（母液生成物）の２００ｇ　（ＨＰＬＣ含有率９０．１％、７−ＡＤＣＡ３．２％、７−ＡＣＡ　１．６％）を１６００ｍ１のアセトンと４００ｍ１の水との混合物に懸濁する。撹拌しながら、１８２．４ｍｌのジシクロヘキシルアミンを添加し、それによって数分後に溶液が生じる。ＰＡＣＡジシクロヘキシルアンモニウム塩の種晶を添加し、生じた懸濁液を室温で２時間撹拌する。前記懸濁液を一晩冷蔵庫に放置し、生成物をろ別し、アセトンで洗浄し、真空室で４５℃で乾燥する。

収量：　２００．２ｇＺ／Ｅ比：　７８．３／２１．７ＰＡＣＡ含有率（ＨＰＬＣ）：　４８％７−ＡＤＣＡ含有率：　０．２２％７−ＡＣＡ含有率：　０．’１９％実施例４ｃ）ジクロロメタン５０ｍＩ中の、Ｚ／Ｅ比が８６／１４ノＰＡＣＡ　（ＨＰＬＣ含有率　９３．４％）１０ｇの懸濁液を、１２．４ｍｌのジシクロヘキシルアミンで処理し、それによって少し濁った溶液が生じる。結晶化が始まると、懸濁液を冷却し、生成物をろ別し、冷ジクロロメタンで洗浄し、真空室で乾燥する。

収量：　１１．２ｇＰＡＣＡ含有率（ＨＰＬＣ）：　５６．２％Ｚ／Ｅ比：　９０．２／９．８実施例５）アセトン８０ｍ１と水４０ｍ１との混合物中の、　Ｚ／Ｅ比が８６．３／１３．７のＰＡＣＡ　（ＨＰＬＣ含有率　９５％）１０ｇの懸濁液を、７．６ｍｌの第三オクチルアミンで処理する。更に５２０ｍ１のアセトンを添加する。得られた懸濁液を室温で２時間撹拌する。ＰＡＣＡの第三オクチルアンモニウム［（２，４，４−トリメチルペンチル−２）アンモニウム］塩をろ別し、アセトンで洗浄し、真空室で乾燥する。

収量：　１０．４ｇＰＡＣＡ含有率（ＨＰＬＣ）：　５９．８％Ｚ／Ｅ比：　９２．５／７．５第三オクチルアミン含有率（ＧＣ）：　３１．６％水：１，６％アセトン（ＧＣ）：　２％実施例６ａ）Ｚ／Ｅ比が７８．３／２１．７＋７）ＰＡＣＡ−’）シクｏヘキシルアンモニウム塩［実施例４ｂ）の生成物］　（ＰＡＣＡのＨＰＬＣ含有率　４８５％）１００ｇを１０００ｍ１００Ｏ水で懸濁する。懸濁液のｐＨを８５％のリン酸で４５分以内にｐＨ３，５に調整する。懸濁液を室温で更に３０分間撹拌する。表題生成物をろ別し、水、次にアセトンで洗浄し、真空室で乾燥する。

収量：４５．７ｇＨＰＬＣ含有率：　１００．８％Ｚ／Ｅ比：　７７、８／２２．２実施例６ｂ）１００ｇのＰＡＣＡ−ジシクロヘキシルアンモニウム塩（Ｅ含有率　７．６％、ＰＡＣＡ含有率　５３．１１％）を３０℃の水４０００ｍ１に添加する。約２分後に溶液が生じたら、そこに５ｇの活性炭を添加する。混合物を１０分間撹拌し、前記炭素をろ別し、２５０ｍ１の水で洗浄する。合わせたろ液及び洗液のｐＨを５Ｎ−硫酸で３．５にゆっくり調整する。得られた結晶性懸濁液を水浴で冷却し、冷却しながら２時間撹拌する。生成物をろ別し、合計２゜Ｏｍｌの水、１００ｍ１の水／アセトン（１：　１）及び２５０ｍ１のアセトンで連続して洗浄する。生成物を真空室で４０℃で乾燥する。

収量’　５０．３ｇＨＰＬ（４有率：　１０１．５％Ｅ含有率ニア、４％７、Ｅ−枯渇７−アミノ−３−［（Ｚ／Ｅ）−１−プロペシー１−イル〕−３− セフエム−４−カルボン酸の製造〔方法Ｃ）コ実施例７）アンモニアをｐＨ８，０になるまで添加することによって得られる、２ｋｇ（ＤＰＡＣＡ　ｌ有率９３．４％、Ｅ含有率　１５％）の水溶液７．８１を流速６ｏｌ／ｈでＨＰ−２０樹脂を充填した７５１のカラムに導入する。溶離は水で実施する。（ＰＡＣＡ溶液導入開始から計算して）５０１の溶出液を得る。これは生成物を含んでおらず（ＨＰＬＣコントロール）、廃棄する。次に、各５１分ずつの画分を取り、ＨＰＬＣで分析する。最初の２個の両分は少量のＺ−ＰＡＣＡを含むが、初期に溶離する、７−ＡＣＡ及び７−ＡＤＣＡのような副生成物をも含み、これらを合わせてプールＩとする。次の６個の画分（ε＝３０１）は主に所望（７）Ｚ−ＰＡＣＡ（１１０８ｇ　Ｚ−ＰＡＣＡ＋２７ｇ　Ｅ−ＰＡＣＡ）を含む。

次の７個の画分（ε＝３５１）はまだＺ−ＰＡＣＡを含むが、Ｅ−ＰＡＣＡの量も増大しつつある（２９７ｇのＺ及び９３ｇのＥ）。これら１３個の画分のＨＰＬＣ分析から、Ｅ含有量は７．９％と算定される。これらの１３個を合わせ、５Ｎ−ＨＣＩの添加によってｐＨを３．５に調整する。沈殿結晶をろ別し、水及びアセトンで洗浄し、４５℃の真空で乾燥する。１４５１ｇのＰＡＣＡが得られる（収率７７．６％）。

ＰＡＣＡ含有率：　９９．９％Ｅ含有率＝　７．８％プール■から、ｐＨを３．５に調整することによって、主にＺ−ＰＡＣＡから成る１３７．５ｇの材料が得られる。

もっと遅く溶離する両分（１６〜１９番目の画分）から、ｐＨを３．５に調整することによって、主にＥ−ＰＡＣＡから成る６２．４ｇを単離する。

実施例８）２０ｇの活性炭（Ｎｏ　ｒ　ｉ　ｔ　ＣＧ−１）を水に懸濁し、吸引フィルター（直径　４ｃｍ）上でろ過し、真空で水ですすぐ。ｐＨ８，０になるまでアンモニアを添加することによって、４ｇのＰＡＣＡ　（含有率　９３．４％、Ｅ含有率１５％）を４０ｍ１の水に溶解する。この溶液を活性炭を通してゆっくり吸引させる（約１５分以内）。その後２５０ｍ１の水で同様にして炭素ケークを溶離する。

ろ液をそれぞれ約４０ｍ１の両分で集める。最初の２個の画分は生成物を含まない（ＨＰＬＣコントロール）。３〜７番目の両分は主にＺ−ＰＡＣＡ及び非常に少量のＥ−ＰＡＣＡのみを含み、これらを合わせる。これら２３０ｍ１を２Ｎ− ＨＣＬで、生成物が結晶化するｐＨ３，４に調整する。生成物をろ別し、水及びアセトンで洗浄し、乾燥して２．８ｇの、Ｅ異性体をく０．１％含むＰＡＣＡ　（含有率９６゜７％）を生じる。

収率、　７２．５％実施例９）１００ｍｌの吸着剤樹脂”Ａｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅ　ＣＧ　１６１　ｍｄ”を、実施例７に記載のように、５０ｍ１水中の５ｇＰＡＣＡ　（含有率９３，４％、Ｅ含有率１５％）の溶液とともに導入する。それから溶離を水で実施し、Ｚ−ＰＡＣＡ画分を含む溶出液を集める。ｐＨを３．５に調整すると、生成物が結晶化し、前記生成物をろ過し、洗浄及び乾燥して、３．８７ｇ（収率　８２．８％）の、Ｅ異性体をく５％含むＰＡＣＡ　（含有率９８％）を生じる。

前記樹脂を、いくらかのアンモニアを添加した水性イソプロパツールでの溶離によって再生し、水ですすぎ、再び使用してもよい。

実施例１０）実施例９の再生された樹脂”ＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅＣＧ　１６１　ｍｄ”　（容積１００ｍ１）に、ｐｕｓ、１のアンモニア溶液によって６０ｍ１の水に溶解することによって製造される８ｇのＰＡＣＡ　（含有率９３．４％、Ｅ含有率１５％）の水溶液を注入する。次に２４０ｍ１の水での溶離を実施する。１１０ｍ１の「空の」溶出液及び更に、７−ＡＣＡ、７−ＡＤＣＡ等のような初期に流出する副生成物を主に含む１０ｍ１の溶出液を廃棄する。その後、プール内のＥ含有率がプール内のＰＡＣＡの総量に対して９％のＥ−ＰＡＣＡに増加するまで、溶出液をプールする。

このプール（２００ｍ　ｌ　）から、塩酸によってｐＨを３゜４に調整することによって生成物を結晶化させる。生成物をろ過し、水で洗浄し、真空で乾燥する。Ｅ含有率８．８％を有する６、４ｇのＰＡＣＡ　（収率８５．６％、含有率９９％）が得られる。

その後、前記吸着樹脂を実施例９で述べたように再生する。

１１．７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸を溶解し再び沈殿させることによる、枯渇に関する比較試験実施例１１ａ）Ｚ／Ｅ比が８５．４／１４．６のＰＡＣＡ３ｇを３０ｍ１の水に懸濁する。溶液が得られるまで、約６　ｍ　ｌの濃ＨＣＩを氷で冷却しながら添加する。次に、外部から冷却せずに５Ｎ−ＮａＯＨを注意深く添加することによって、ｐＨ値を３．５に調整する。結晶性懸濁液・を氷で冷却しながら１時間撹拌し、生成物をろ別し、１０ｍ１ずつの水で２回洗浄し、真空乾燥室で乾燥する。

収量、　２．８ｇＺ／Ｅ比：　８４．５／１５．５実施例１１ｂ）Ｚ／Ｅ比が８２．６／１７．６のＰＡＣＡ３ｇを５０ｍ１の水に懸濁する。溶液が得られる（ｐＨ８，７）まで、撹拌しながら５Ｎ−ＮａＯＨ（約２．５ｍ１）を添加する。

次に、濃ＨＣＩを注意深く添加することによってｐＨを３゜５に調整し、１／１に希釈する。結晶性懸濁液を氷で冷却しながら更に１時間撹拌した後に、実施例３ａ）に記載のように単離して乾燥する。

収量、　２．９ｇＺ／Ｅ比：　８１．８／１８．２補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）平成６年８月５日１、特許出願の表示　ＰＣＴ／ＥＰ　９２１０２９６５２、発明の名称　３−セフェム−４−カルボン酸誘導体の精製方法３、特許出願人住　所　オーストリア国、アー−６２５０・クンドル（番地なし）名　称　バイオケミ・ゲゼルシャフト・エム・ベー・バー４、代　理　人　東京都新宿区新宿１丁目１番１４号　山田ビル５、補正書の提出年月日　１９９３年１２月１日別の変形例によれば、式１′の塩酸塩を、７−アミノ−３−（１−プロペン−１− イル）−３−セフェム−４−カルボン酸塩酸塩のＥ異性体が対応するＺ異性体よりもよく溶解する溶剤又は溶剤混合物に懸濁又は溶解させてもよい。

上記によってＺ／Ｅの割合がかなり改良された塩酸塩を、例えば水中でＲ，点へのｐＨ調整のような従来の方法によって、再び式Ｉの化合物に転化してもよい。

式Ｉの７−アミノ−３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸のＺ及びＥの混合物をアルカリ又は酸中で水に溶解して、ｐＨを等電点に設定することによって再び沈殿させた場合、改善はなく、むしろＺ／Ｅの割合を悪化させる（例１１ａ及びｌｌｂの対照実験参照）。一方、弐ビの７−アミノ− ３−（１−プロペン−１−イル）−３−セフェム−４−カルボン酸の結晶性塩酸塩を使用すると、Ｚ／Ｅ比は驚（べきほど著しく改善される。好ましくないＥ化合物の枯渇割合は７％以下である。

式Ｉ′の化合物は、例えば少なくとも９１：９、好ましくは９２：８、便利には少なくとも９４：６、少なくとも９５：５；少なくとも９７：３；又は少なくとも９９：１の割合で種々の量のＺ／Ｅ異性体を含み、ここに記載の方法によって記載のように製造され得る。

式Ｉ′の結晶性塩酸塩は新規で本発明の一部を形成する。

Ｚ／Ｅ比が少なくとも９１：９である、式１′の塩酸塩もまた新規で本発明の一部を形成する。

方法ｂ）は以下のように実施し得る：式■の化合物はプロトン性又は非プロトン性の媒体中で形成され得る。水性系で実施する場合、例えば水酸化物、炭酸塩もしくは炭酸水素塩であるリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基のような塩基、又は、アンモニアのような窒素含有塩基を添加することによって、式Ｉの化合物のＺ／Ｅ混合物を水又は、アセトンもしくは例えばイソプロパツールであるアルコールのような水性有機溶剤に溶解する。次に式■のアミン又はリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源を添加し、前記溶液を有機補助溶剤で任意に希釈することによって、式■の化合物が沈殿する。あるいは、式Ｉの化合物のＺ／Ｅ混合物を、水又は、アセトンもしくは例えばイソプロパツールであるアルコールのような水性有機溶剤に懸濁してもよく、前記懸濁液をまずリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源、又はアンモニア、又は式■の化合物、次に有機補助溶剤によって処理し、リチウム、ナトリウムもしくはカリウムアセテートのようなリチウム、ナトリウムもしくはカリウム源が使用される場合は、例えば水酸化物、炭酸塩もしくは炭酸水素塩であるリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基によって任意でｐＨを調整しながら処理する。

有機補助溶剤の例は上記方法ａ）に与えられている。

非プロトン性媒体で実施する場合、式１のＺ／Ｅ混合物を有機溶剤に懸濁し、弐 ■の塩基を添加し、任意に補助溶２、　式Ｉ′の濃縮されたＺ異性体を、任意に補助溶剤を添加することで生成物の溶解度を調整することによって溶液から回収する請求項１ａ）に記載の方法。

３、　結晶性の７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム−４−カルボン酸塩酸塩。

４、　Ｚ／Ｅ比が少なくとも９１：９の７−アミノ−３−［ＣＺ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム−４−カルボン酸塩酸塩。

５、　酢酸又は２−エチルヘキサン酸のリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩のようなカルボン酸のリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩がＬｉ＋、Ｎａ”又はに′″源として使用される請求項１ｂ）に記載の方法。

５、　Ｌｉ”、Ｎａ”又はに″″塩基して、その水酸化物、炭酸水素塩又は炭酸塩が使用される請求項１ｂ）に記載の方法。

７、　活性炭、ＨＰ−２０、ＨＰ−２１、ＳＰ　２０７、ＸＡＤ　１１８０、ＸＡＤ　１６、ＸＡＤ　１６００又はＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅ　ＣＧ　１６１を吸着剤として使用する請求項１ｃ）に記載の方法。

８、　７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェムー４−カルボン酸ジシクロヘキシルアンモニウム塩。

９、　７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イルコー３−セフェムー４−カルボン酸（２，４，４−）リメチルベンチルー２）アンモニウム塩。

１０、　７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム −４−カルボン酸及び７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム−４−カルボン酸の混合物中の７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イルゴー３−セフェム−４−カルボン酸を枯渇させるための方法において使用される式Ｉ′又は■の化合物。

国＠膓査磐失、　ｌ１ｌｓ　ＰＣＴ／ＥＰ　９２１０２９６５フロントページの続き（８１）指定国　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。

ＤＫ、ＥＳ、ＦＲ，ＧＢ、ＧＲ，ＩＥ、ＩＴ、ＬＵ、ＭＣ，ＮＬ、　ＰＴ、ＳＥ）、　ＣＡ、ＪＰ、　ＫＲ，ＵＳ（７２）発明者　ウオルフ、シークフリートオーストリア国、アー−６２３０・ブリクスレッグ、ブリュツガーストラーセ・４

Claims

【特許請求の範囲】１．７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４ −カルボン酸及び７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イル］−３− セフェム−４−カルボン酸の混合物中の７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４−カルボン酸を枯渇させる方法であって、ａ）式Ｉ′ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ′（式中、プロペニル基はＺ及びＥ配置を有する）の化合物の塩酸塩を、式Ｉ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ（式中、プロペニル基はＺ及びＥ配置を有する）の化合物及び塩酸から式Ｉ′のＺ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中で形成すること、又は、Ｚ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中に、式Ｉ′ の化合物のＺ／Ｅ混合物中の７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４−カルボン酸の塩酸塩の少なくとも一部を溶解させ、式Ｉ′の濃縮されたＺ異性体を回収すること、及び任意で、ｐＨを調整することによって、得られた式Ｉ′の化合物をＥ量の少ない式１の遊離化合物に転化すること、あるいはｂ）式ＩＩ ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ［式中、プロペニル基はＺ及びＥ配置を有し、Ｘ＋はＬｉ＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、アンモニウム又は式ＩＩＩ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩＩ（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は独立して水素、（Ｃ１〜８）アルキル、任意に置換されたベンジル、（Ｃ４〜８）シクロアルキルであるか、又は、Ｒ１とＲ２及び窒素原子は、任意で１又は２個の付加ヘテロ原子を含む５又は６員の複素環を表し、Ｒ３が上記定義の通りであり、ここでＲ１，Ｒ２もしくはＲ３の１つが水素でない）の陽イオンである］の塩を、式ＩＩのＺ及びＥ異性体が異なる溶解度を有する溶剤又は溶剤混合物中で式Ｉの化合物をリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基又はアンモンニア又は式ＩＶ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＶ（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記定義の通りである）のアミンと反応させ、得られた式ＩＩの化合物を任意で補助溶剤を添加することで沈殿させることによって、又はリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩基又はアンモンニアによって溶剤もしくは溶剤混合物中に式Ｉの化合物を溶解させ、リチウム、ナトリウムもしくはカリウム源又は式ＩＶのアミン及び任意で補助溶剤を添加することで式ＩＩの化合物を沈殿させることによって形成し、及び酸を添加して、式ＩＩの化合物をＥ量の少ない式Ｉの化合物又は式Ｉ′のその塩酸塩に転化すること、あるいはＣ）式Ｉの化合物の溶液を吸着クロマトグラフィーにかけることを含む、前記方法。２，式Ｉ′の濃縮されたＺ異性体を、任意に補助溶剤を添加することで生成物の溶解度を調整することによって溶液から回収する請求項１ａ）に記載の方法。３．結晶性の７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４−カルボン酸塩酸塩。４．Ｚ／Ｅ比が９１：９以下の７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１− イル］−３−セフェム−４−カルボン酸塩酸塩。５．酢酸又は２−エチルヘキサン酸のリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩のようなカルボン酸のリチウム、ナトリウムもしくはカリウム塩がＬｉ＋、Ｎａ＋又はＫ＋源として使用される請求項１ｂ）に記載の方法。６．Ｌｉ＋、Ｎａ＋又はＫ＋塩基として、その水酸化物、炭酸水素塩又は炭酸塩が使用される請求項１ｂ）に記載の方法。７．活性炭、ＨＰ−２０、ＨＰ−２１、ＳＰ２０７、ＸＡＤ１１８０、ＸＡＤ１６、ＸＡＤ１６００又はＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅ　ＣＧ１６１を吸着剤として使用する請求項１ｃ）に記載の方法。８．７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４ −カルボン酸ジシクロヘキシルアンモニウム塩。９．７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４ −カルボン酸（２，４，４−トリメチルペンチル−２）アンモニウム塩。１０．式Ｉの化合物から請求項１に記載の方法によって製造されるセファノスポリン。１１．７−アミノ−３−［（Ｚ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム− ４−カルボン酸及び７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロベン−１−イル］−３ −セフェム−４−カルボン酸の混合物中の７−アミノ−３−［（Ｅ）−１−プロペン−１−イル］−３−セフェム−４−カルボン酸を枯渇させるための方法において使用される式Ｉ′又はＩＩの化合物。