JPH07500350A

JPH07500350A - マクロライド系抗生物質の２−アミノ糖誘導体

Info

Publication number: JPH07500350A
Application number: JP5515659A
Authority: JP
Inventors: コーチ，ケヴィン; シュルト，ゲイリー・アール
Original assignee: ファイザー・インコーポレーテッド
Priority date: 1992-03-02
Filing date: 1993-01-27
Publication date: 1995-01-12
Anticipated expiration: 2011-12-11
Also published as: CA2131373C; WO1993018048A1; DE69314947T2; FI944015A; EP0636136B1; JP2562001B2; EP0636136A1; US5631235A; DK0636136T3; FI944015A0; DE69314947D1; GR3025672T3; CA2131373A1; FI107537B; ATE159725T1; ES2108261T3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明の式（１）の化合物は容易に製造される。最も一般的には、下記の式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質を次式の適切な糖ハロゲン化誘導体（式中のＸはハロ、たとえばブロモまたはヨードである）と結合させる。次いで結合した（すなわちグリコジル化された）マクロライド系抗生物質を下記に従ってさらに修飾する。

式（１目）および（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質の製法は文献中で周知である。これらのマクロライド系抗生物質に至る一般的に好ましい経路は、ストレプトミセス属（ＳｔｒｅｐＬｏｍｙｅｅｓ）に属する微生物の生物発酵によるものである。Ｒ３がアリルである式（Ｉ　Ｉ　Ｉ）および（ＩＶ）の化合物は、ストレプトミセス・ツタバエンシス（Ｓ、ｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓ）Ｎｏ、９９９３（Ｆｅ　ｒｍ　ＢＰ−９２７）の発酵により得られる。Ｒｓがエチルである式（Ｉ　ｆ　Ｉ）の化合物およびＲ１がメチルである式（Ｉ　Ｉ　ｒ）の化合物は、ストレプトミセス・パイグロスコピカス亜種アスコミセチヵス（Ｓ、ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓｓｕｂｓｐ、ａｓｃｏｍｙｃｅｔｉｃｕｓ）ＡＴＣＣ１４８９１の発酵により得られる。

ストレプトミセス・パイグロスコピカス亜種アスコミセチヵスＡＴＣＣ１４８９１の凍結試料は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクショス米国、２０８５２、マリーランド州ロックビル、バークローン・ドライブ１２３０１に１９９２年１月１３日にブダペスト条約の条項のもとに寄託された。この新たに寄託された培養物には新たな受託番号ＡＴＣＣ５５２７６が与えられた。

目１−３）にブダペスト条約の規定のもとに寄託されている。新鮮な微生物試料がブダペスト条約の条項に従ってアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクシシンに寄託されるであろう。

上記の微生物を別個に栄養培地水溶液に装入すると、前記式ＩＩＩおよびＩＶの化合物が産生されるであろう。これらのマクロライド系抗生物質を産生ずるための上記微生物の発酵は、実質的に米国特許第４，８９４，３６６号明細書の記載に従って行われる。これを本明細書に参考として引用する。そこに示された方法に対してなされた変更はいずれも当施設に既存の装置を用いるためになされたものであり、後記の製造例１および２に記載される。

式（１）においてＲｏがＨであり、かつＲ１が式（ＩＩ）のＷ１置換基である化合物を製造するためには、式（Ｉ　ｆ　Ｄまたは（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質を式（ｖ）の糖ハロゲン化物と結合させる。式（ｖ）の糖ハロゲン化物と式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質の結合（すなわちグリコジル化）反応は、当業者に周知の化学によって直接的に行うことができる。この結合反応は、一般にペルアセチル化形の糖を用いて実施される。約２−４モル当量の適宜な式ｆｆ）の糖ハロゲン化物を、反応不活性溶剤中で式（Ｉ　Ｉ　ｉ）または（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質と混合する。この型の反応に用いられる反応不活性溶剤には、塩素化された溶剤、たとえばクロロホルム、塩化メチレンおよび二塩化エチレン、エーテル系溶剤、たとえばジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンおよびジメトキシエタン、芳香族溶剤、たとえばベンゼン、トルエンおよびキシレン：ならびに双極−升プロトン溶剤、たとえばＮ、　Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリルおよびＮ−メチルピロリドンが含まれる。好ましい溶剤は塩素化された溶剤であり、特に好ましい溶剤は塩化メチレンである。一般に、反応体が溶剤により溶解または懸濁されるのに十分な溶剤を用いることが望ましい。一般に用いられる溶剤は１０＝−１０”モル濃度のマクロライド系抗生物質溶液を与える範囲であり、１０−１モル濃度が好ましい。無水溶剤を使用し、また反応混合物に乾燥剤を添加することにより、反応に際して乾燥状態を維持する。

一般にこの目的で用いられる乾燥剤は分子ふるい、硫酸カルシウムおよび硫酸マグネシウムである。好ましい乾燥剤は４人分子ふるいである。

試薬の最初の混合は約−７８℃から約７０℃までの温度で実施される。好ましいのは約−７８℃から約０℃までの範囲の温度である。製造の容易さのために特に好ましいのは、反応温度を一７８℃に維持する冷却浴である。

上記の反応体を混合し、温度を一７８℃に平衡化したのち、反応混合物を適切な塩基、たとえば炭酸水銀、炭酸銀、硝酸水銀または硝酸銀で処理する。この反応に好ましい塩基は炭酸銀である。塩基を添加したのち、反応混合物を触媒で処理する。この反応のための代表的な触媒には、用いたその塩基に付随するカチオンのトリフレート（ｔｒｉｆｌａｔｅ）、過塩素酸塩およびテトラフルオロ硼酸塩が含まれる。好ましい触媒は銀トリフレートである。

すべての反応体および試薬を添加したのち、反応混合物を０℃に加温し、０℃で０．５−２４時間撹拌し、次いで徐々に室温に加温する。反応混合物を室温でさらに領　５−２４時間撹拌する。一般に反応混合物を０℃で５時間撹拌し、３時間にわたって室温にまで昇温させ、次いで室温で１６時間撹拌する。次いで生成物を当業者に慣用される手法で反応混合物から単離する。たとえば濾過助剤、たとえばセライト（Ｃｅｌｉｌｅ、登録商標）を通して単純に濾過し、次いで蒸発させると残渣が得られ、これをカラムクロマトグラフィーにより精製する。カラムクロマトグラフィーはシリカゲルなどの固相成分、および化合物を混合物から分ＨＭ製するために有利な溶剤混合物からなる液相成分の使用を伴うことは当業者に自明であろう。クロマトグラフィー後に溶剤を除去することにより、グリコジルマクロライドが得られる。一般にこの結合反応はマクロライド系抗生物質の３箇所のアルコール部位のうち１箇所においてのみ起こり、この部位はＣ−４″ アルコール性官能基である（式ｒ’ｉｌ照）。この選択性は、恐らくマクロライド系抗生物質の優先配座においてこの位置のヒドロキシル基がより利用されやすいことによるものであろう。しカル場合により、特に反応性の高い糖）ｚロゲン化物を用いると、少量のシグリコシル化物’ｊｔ（その場合Ｒ２＝ＯＲ’）が形成される。この物質は、標準法に従って一般に薄層クロマトグラフィーにより行われる反応進行の監視に際して検出される。ングリコシル化物質はモノグリコジル化物質の場合と同様に単Ｎ精製されるが、ジグリコシル化物質は一般にクロマトグラフィーで単離される最初の物質であり、モノグリコジル化物質はその後の両分中に’１１１１１されるという顕著な相異がある。添加された当量の糖塩化物の使用、または他のパラメーター、たとえば溶剤、塩基もしくは触媒の変更が、ジグリコシル化物質の収率に影響を及ぼす可能性がある。

式（１）においてＲ１がＨであり、かつＲｏが式（ＩＩ）の糖置換基である化合物を製造するためには、式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質をまずＣ−４＃位においてヒドロキシル保護基で保護する。この目的に適したヒドロキシル保護基には、該アルコールのシリルエーテル、カルボン酸エステルおよび炭酸エステルが含まれるが、これらに限定されない。保護基は周知の有機化学的方法によってアルコールに懸垂される。嵩高なシリルエーテルがそれらの選択性、結合の容易さ、および除去の容易さのため好ましい。式（Ｉ　Ｉ　Ｉ）または（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質を反応不活性溶剤に約〇−約３０℃の温度で溶解するのが好都合である。この型の反応に用いられる反応不活性溶剤には双極−非プロトン溶剤、たとえばジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドおよびＮ−メチルピロリドン、塩素化された溶剤、たとえばクロロホルム、ジクロロメタンおよび１．２−ジクロロエタン：ならびにエーテル系溶剤、たとえばジエチルエーテル、ジオキソランおよびテトラヒドロフランが含まれる。溶剤は特にジメチルホルムアミドである場合が多い。シリル化剤、通常はシリルトリフルオロメタンスルホネート、たとえば【−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート、またはシリルクロリド、たとえばジメチル−［−ブチルシリルクロリド、トリメチルクロロシランもしくはトリフェニルクロロシランを、有機アミン、たとえばトリエチルアミン、トリメチルアミン、４−ジメチルアミノピリジンまたはイミダゾールと共に添加する。通常はイミダゾールが好ましい塩基である。反応混合物を約１−約２４時間、一般的には室温で撹拌し、次いで生成物を反応液から当業者に周知の方法で単離する。

この時点でＣ−４′位において保護されているマクロライド系抗生物質を、前記式（Ｖ）の糖ハロゲン化物と結合させることができる。この結合反応の生成物は、糖誘導体がＣ−１４位に酸素により結合し、かつＣ−４′位が保護された式（１）の化合物の誘導体である。Ｃ−４＃位を当業者に周知の有機化学的標準法により脱保護して、遊離ヒドロキシ化合物を得ることができる。一般に、好ましいシリルエーテル系保護基を除去するためには、Ｃ−４＃シリル保護された式（Ｉ）の化合物をアセトニトリル、または反応不活性溶剤、たとえばエーテル系溶剤、たとえばテトラヒドロフランまたはジエチルエーテルに約０−３０°Ｃの温度で溶解し、フッ化物供給源、たとえばフッ化水素またはテト、ラーＮ−プチルアンモニウムフルオリドで処理する。反応物を約１−約２４時間撹拌し、次いで生成物を当業者に周知の有機化学的標準法で単離する。

式（Ｉ）においてＡおよびＢが別個のものであって、それぞれＨである本発明化合物（以下、Ｃ−２デスオキソ−マクロライドと呼ぶ）を製造するためには、式（Ｔ）においてＡとＢが一緒になって一〇である化合物をα−ケトアミドの還元のための標準的条件を用いて還元する。この還元法によって、アミドに隣接するカルボニルが、分子内の他のカルボニルに影響を及ぼすことなく選択的に還元される。一般に式（Ｉ）のＣ−２オキソ−マクロライドを反応不活性溶剤または溶剤混合物に溶解し、硫化水素ガスを混合物に６−２４時間、室温で吹き込む。

簡便には、このガスを反応混合物に一夜吹き込む。この反応に適した反応不活性溶剤には以下のものが含まれるが、これらに限定されない：有機塩基、たとえばジエチルアミン、トリエチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピベリンン、モルホリンおよびアニリン、双極−非プロトン溶剤、たとえばＮ、　Ｎ −ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドおよびＮ−メチルピロリドン、ならびにアルコール系溶剤、たとえばメタノール、エタノールおよびプロパツール。

最適収率を達成するために、または還元経路に影響を及ぼすために、これらの溶剤２Ｐ！以上の組み合わせがしばしば用いられる。たとえばＡがＨであり、かつＢがＯＨであるマクロライド系抗生物質は、メタノールを溶剤として用いて製造される。Ｃ−２デスオキソ−マクロライドを得るために特に好ましい溶剤系は、等量のピリジンおよびＮ、　Ｎ−ジメチルホルムアミドである。反応が完了した時点で、生成物を当業者に自明の有機化学的標準法で単離する。

あるいは式（Ｉ　Ｉ　Ｉ）または（ＩＶ）のマクロライド系抗生物質を、グリコジル化の前に上記方法で還元してもよい。還元後にこのマクロライド系抗生物質を前記に従ってグリコジル化することができる。

式（１）において点線が結合を表し、かつＲ２が水素である本発明化合物を製造するためには、式（１）においてＲ２が−ＯＨであり、かつ点線が結合を表さない化合物（以下、β−ヒドロキシケトンと呼ぶ）を、欧州特許出願第３２３０４２号明細書の記載に従って脱水する。一般に触媒量の有機酸を含有する反応不活性溶剤に、β−ヒドロキシケトンを溶解する。適切な反応不活性溶剤は芳香族溶剤、たとえばベンゼン、トルエン、キシレンなどであり、トルエンが好ましい。

有機酸は一般にトルエンスルホン酸、ショウノウ（樟脳）スルホン酸などの酸から選ばれ、トルエンスルホン酸が好ましい。反応混合物を約５０−約１２０℃で約５分ないし約１時間加熱する。一般に蒸気浴温度（約１００℃）が好ましく、反応を簡潔させるには一般に５分で十分である。反応生成物を当業者に周知の方法に従って単離する。反応は一般に既にグリコジル化されている化合物について実施される。

式（Ｉ）においてＲ５およびＲ６がヒドロキシであり、かつＲ４がヒドロキシメチルである本発明化合物を製造するためには、式（１）においてＲ６およびＲ６がアセトキシであり、かつＲ４がアセトキシメチルである化合物を、後記に示すように当業者に知られている標準的条件で脱アセチル化する。この選択的脱アセチル化は存在するアミドには影響を及ぼさず、アルコキシド塩基をアルコール系溶剤中の脱アセチル化すべき物質の溶液に０℃で添加することによって容易に達成される。一般に触媒量、たとえば０．０１当量の塩基を用いる。通常はそのアルコール系溶剤のアルコキシド塩基を用いることが好ましい。使用しやすさおよび反応性に関して最も好ましいものは、メタノールが溶剤であり、かつナトリウムメトキシドが塩基である系である。生成物の単離は当業者に周知の標準法に従って行われる。

式（ｖ）の糖ハロゲン化物は、容易に人手し得ない場合には、容易に入手しうる式（ＶＩ）の２−アミノ糖・（式中のＲ１１はＨ，（ＣＩ　Ｃ＜）アルキル、または（Ｃ２Ｃ４）アルカノイルである）から、当業者に周知の標準的／１０ゲン化法を用いて簡便に製造することができる。

臭素化が好ましい方法である。場合により塩素化も採用しうる。臭素化は、式（Ｖｌ）の１−ヒドロキシ、アルコキシまたはアルカノイルオキシ糖誘導体を有機酸系溶剤、たとえば酢酸に溶解することにより行われる。糖が１−ヒドロキシまたは１−アルコキシ糖である場合、一般に１−１０当量の無水酢酸が添加される。好ましい基質は１−アセトキシ糖誘導体である。反応温度が約−２０℃ないし約Ｏ℃の範囲になるように、反応混合物を冷却する。一般に好ましい温度は約０ ℃である。冷却された反応混合物を酢酸溶剤中の臭化水素酸溶液で処理する。

一般に大過剰、たとえば１０−４０モル当量の臭化水素酸が用いられる。反応混合物を室温にまで昇温させ、反応が完了するまで撹拌する。一般に便宜上、反応混合物を一夜撹拌する。臭素化生成物のＦＩＩＭは当業者に周知の直接的方法で行われる。しばしばこれは真空中で溶剤の除去するにすぎない。場合により、溶剤の除去をより完全に行うために、反応溶剤を共沸させる補助溶剤、たとえばトルエンを用いる。時にはカラムクロマトグラフィーを用いて、それ以上の精製が行われる。

式（Ｖｌ）においてＲ７およびＲ８がそれぞれ（ＣＩ−Ｃ４）アルキルである化合物を製造するためには、式（Ｖｌ）においてＲ７およびＲ８がそれぞれＨである化合物を当業者に知られているｅＡ準的アルキル化条件下で反応させる。同様に、式（Ｖｒ）１．１ｍおいてＲ７カ用であり、かつＲ＠が−ＣＯＲ’、−ＣＣｈＲ’、−ＣＯＣＨ！Ｒ’、または−５Ｏ！Ｒ’である化合物を製造するためには、式（Ｖｌ）においてＲ７およびＲ８がそれぞれＨである化合物を、標準的なアミノ−アシル化または一スルホン化法により反応させる。たとえば式（ｖ■）においてＲ７およびＲ１がそれぞれＨである化合物を、反応不活性溶剤中で下記の過剰のアシル化剤またはスルホン化剤（これらに限定されない）と反応させる：無水酢酸、無水トリフルオロ酢酸、（ＣＩ　Ｃｇ）アルカノイルクロリド、（Ｃｓ　Ｃａ）シクロアルカノイルクロリド、ベンゾイルクロリド、クロトニルクロリド、ニコチノイルクロリド、インニコチノイルクロリド、ピコリノイルクロリド、チオフェンカルボニルクロリド、フルフリルクロリド、またはＲ９−置換スルホニルクロリド。この型の反応に適した反応不活性溶剤には、塩素化された溶剤、たとえばクロロホルム、塩化メチレンおよび二塩化エチレン、芳香族溶剤、たとえばベンゼン、トルエンおよびキシレン：ならびに双極−非プロトン溶剤、たとえばＮ、　Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドおよびＮ− メチルピロリドンが含まれる。好ましいのは塩素化された溶剤であり、特に好ましいのは塩化メチレンである。酸付加塩形のアミノ糖を用いて反応を実施する場合、プロトンスカベンジャーとして塩基を添加する必要がある。一般に弱塩基、たとえばピリジン、または有機アミン、たとえばジエチルアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、もしくはピペリジンの使用で十分である。この反応に極めて好ましい塩基はピリジンである。当業者に周知の標準法で生成物を中継すると、アミノ糖のアシル誘導体が得られる。

式（ＶＩ）においてＲ４が−ＣＯｚ　Ｒ’または−ＣＯ２Ｈであるアミノ糖誘導体を製造するためには、式ｆｆ１）においてＲ７およびＲｓがそれぞれＨであり、Ｒ４が−ＣＨ２０Ｈであり、かつＲ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＨであるアミノ糖の１−ヒドロキシ基を当業者に知られている標準的保護方法で保護する。一般にペンシル基などが保護基として用いられる。次いで式ｆｆＩ）においてＲ７およびＲ６がそれぞれＨであるこの保護されたアミノ糖を、前記に従ってＮ−アルキル化、Ｎ−アシル化、またはＮ−スルホン化する。次いで式（Ｍｌ）においてＲ４が−ＣＨ２０Ｈであり、かつＲ３およびＲ６がそれぞれ−ＯＨである、Ｎ −置換、１−保護されたこのアミノ糖を、当業者に知られている糖酸化化学の標準法１こより酸化する。一般に式（Ｖｌ）においてＲ６およびＲ６がそれぞれ− ＯＨであり、Ｒ４が−ＣＨ２０Ｈであり、Ｒ７がＨであり、Ｒ８が−ＣＯＲ’、 −ＣＯ２Ｒ’、−Ｃ（ｈＣＨＡＲ’、または−５Ｏ２Ｒ９であり：かつＲ”が保護基であるこのアミノ糖を、反応不活性溶剤、たとえばベンゼン、アセトニトリルまたは酢酸エチル１こ溶解し、そして触媒量の酸化白金で処理する。酸素ガスを約２−約２４時間、室温で反応混合物に吹き込む。このウロン酸誘導体を当業者に知られている標準法で反応液から中継する。

式（Ｖｌ）においてＲ５およびＲ６がそれぞれ一０ＣＯＲ’または一〇Ｃ０２Ｒ ”である化合物を製造するためには、式ｖｌにおいてＲ５およびＲ６がそれぞれ −Ｏ■１である化合物を、当業者に知られている標準的なアシル化条件下または有機化学方法で反応させる。一般に式（Ｖ’Ｉ）においてＲ５およびＲ＠がそれぞれ−ＯＨである化合物を、適切なアシル化剤、たとえば無水酢酸（これに限定されな−リと、反応不活性溶剤、たとえば酢酸中で、約〇−約２５℃において反応させる。

当業者に知られている化学的標準法で生成物を中継する。

式（■１）においてＲ″が−Ｃ）１２０　ＣＯＲ’または−ＣＨｚＯＣＣｈＲ’ であり、かつＲ５およびＲ儂がそれぞれ一０ＣＯＲ’または一０ＣＯ，Ｒ’である化合物を製造するためには、式（Ｖｌ）においてＲ″が−ＣＨ２０Ｈであり、かつＲ５およびＲ８がそれぞれ−ＯＨである化合物から出発して、上記節の方法を用いる。

あるいは式（１）の化合物は、上記の結合（グリコジル化）反応を採用し、ただし式（Ｖ）の糖！・ロゲン化物の代わりに次式のアジド置換された糖誘導体を用いて製造することができる゛（ＶＩＥ）この式のアンド化合物は、レミュ−（Ｌｅｍｉｕｅｘ）ら［Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　５７．１２４４−５１（１９７９）］が述べた方法で製造される。

こうしてアシド糖クロリドと結合させたのち得られたマクロライド系抗生物質をその場で水素化およびアシル化して、式（１）においてＲ４が−ＣＨ２０ＣＯＲ ”または−ＣＨ２０ＣＯ２Ｒ’であり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ一〇ＣＯＲ’ または一０ＣＣｈＲ’であり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＲ’または− Ｃｏ！Ｒ’である化合物が得られる。

水素化は一般に、水素化すべき物質（基質）を反応不活性溶剤中で、貴金属触媒の存在下に撹拌または振盪することにより実施される。反応は一般に約〇−約６０℃、好ましくは約２５℃の温度で実施される。水素圧は一般にほぼ大気圧から約６０ＰＳＩ　（約４．２ｋｇ／ｃｍりまでの範囲に維持され、約２０−約５０Ｐｓｉ（約１．４−３．５ｋｇ／ｃｍりがより好ましい。極めて好ましいのは５０ＰＳＩ　（約３．５ｋｇ／ｃｍりの圧力である。反応不活性溶剤はジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、１．２−ジメトキシエタン、ジメチルホルムアミド、エタノール、メタノール、蟻酸、酢酸およびプロピオン酸などの溶剤から選ばれる。この水素化に特に好ましい溶剤は酢酸である。この反応に用いるために好ましい貴金属触媒は、パラジウム、白金、ロジウムおよびエチルである。その反応性のため特に好ましいのはパラジウムである。触媒は不活性媒質、たとえば炭素に担持させるのが好都合であり、触媒は通常は約０．０１−約２５重量％の量で存在する。特に好ましいのはアジド化合物の重量に対して０．１−約１０重量％である。反応は一般に密閉フラスコ、たとえば水素を導入し、かつ希望する圧力を維持するためのパル・シェーカー装置に取り付けた／くルボトル内で実施される。これらの条件下で反応を実施すると、反応は通常数時間以内、たとえば約２−約２４時間で完了する。

水素化が完了した時点で反応フラスコをパル・シェーカーから取りはずし、その内容物をこの新たに形成されたアミンとの完全な反応を保証するのに十分な無水酢酸で処理する。反応容器を数分間、たとえば３−３０分間回転させ、その時点で反応混合物をセライトおよび木炭により濾過する。濾液を有機化学的標準法に従って精製して、目的とするマクロライド系抗生物質を得る。

Ｒ４が−ＣＯｚＨである場合のように本発明の式（１）の化合物が酸性である場合、本発明は式（１）の化合物の薬剤学的に受容しうる塩類をも包含する。

それに用いられる薬剤学的に受容しうる代表的カチオン塩類には下記のものが含まれる・アルカリ金属塩（たとえばナトリウムおよびカリウム）、アルカリ土類金属塩（たとえばマグネシウムおよびカルシウム）、アルミニウム塩、アンモニウム塩、ならびに有機アミン、たとえばベンザチン（Ｎ、　Ｎ’　−ジベンジルエチレンシアミン）、コリン、ジェタノールアミン、エチレンシアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、ヘネタミン（Ｎ−ベンジルフェネチルアミン）、ジエチルアミン、ピペラジン、トロメタミン（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）、およびブｐカインとの塩類。この種の特に好ましい塩はナトリウム塩である。

本発明の薬剤学的に受容しうる塩類は、酸形のものを、通常は１当量の適宜な塩基と、補助溶剤中で反応させることによって容易に製造される。代表的な塩基は水酸化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、ベンザチン、コリン、ジェタノールアミン、ピペラジンおよびトロメタミンである。上記の塩は濃縮乾固することにより、または非溶剤の添加により単離される。多くの場合、塩類は好ましくは上記酸の溶液と、そのカチオンの異なる塩類（エチルへキサン酸ナトリウムまたはカリウム、オレイン酸マグネシウム）の溶液を、目的とするカチオン塩がそれから沈殿する溶剤（たとえば酢酸エチル）を用いて混合することにより製造されるか、さもなければ濃縮および／または非溶剤の添加により単離することができる。

Ｒ７およびＲ１がそれぞれＨもしくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであるか、またはＲ７がＨであり、かつＲ８が（Ｃ，−Ｃ，）アルキルである場合のように、本発明の式（１）の化合物が塩基性である場合、本発明は式（１）の化合物の薬剤学的に受容しうる酸付加塩類をも包含する。

薬剤学的に受容しつる代表的な酸付加塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩、酢酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、メジラード（メタンスルホン酸塩）、およびトシラート（ｐ−トルエンスルホン酸塩）が含まれる。これらの塩類は塩基形のものを適宜な酸と反応させることによって容易に製造される。塩が一塩基酸のもの（たとえば塩酸塩、臭化水素酸塩、ｐ−１−ルエンスルホン酸塩または酢酸塩）、二塩基酸の水素形のもの（たとえば硫酸水素塩またはコハク酸塩）、または三塩基酸の水素形のもの（たとえばリン酸二水素塩またはクエン酸塩）である場合、少なくとも１モル当量、通常は過剰モルの酸を用いる。しカル、硫酸塩、ヘミコハク酸塩、リン酸水素塩、リン酸塩などの塩類を目的とする場合、適切な、かつ厳密な化学当量が一般に用いられるであろう。通常は目的とする塩がそれから沈殿する補助溶剤中で遊離の塩基と酸を混相するか、さもなければ濃縮および／または非溶剤の添加によりｆＩＩＭすることができる。

本発明の式（１）のマクロライド系抗生物質に関しては、非対称炭素原子および二重結合のため、配座異性体または立体異性体形、たとえば光学異性体および幾何異性体が存在すると解すべきであり、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。

こうして製造された式（Ｉ）の化合物は、移植に対する抵抗、および自己免疫疾患、たとえば慢性関節リウマチまたは乾磨の処置に特に有用である。移植に対する抵抗を処置する際には、式（１）の化合物を予防的に、または移植された器官もしくは組織に対するヒト対象者の不都合な反応に応じて用いることができる。

予防的に用いる場合、式（Ｉ）の化合物を移植手術に先立って患者に投与するか、または移植すべき組織もしくは器官に投与する。予防処置には、移植手術後ではあるが移植に対する不都合な反応の徴候が見られる前の薬剤投与も含まれる。

不都合な反応に応じて投与する場合は、抵抗の外的徴候が明らかになったのちに、移植に対するこの抵抗を処置するために式（１）の化合物を患者に直接に投与する。

ヒトを含む哺乳動物において移植に対する抵抗、および自己免疫疾患、たとえば慢性関節リウマチまたは乾１の治療に用いるためには、式（１）の化合物を疾患の治療に有効な量で含有する適切な薬剤組成物として配合する。投与される個々の式（１）の化合物の効力に応じて、約０，０５−約３０ｍｇ／ｋｇ体重／日を１日１回または多数回の投与で、治療すべき哺乳動物に投与する。より好ましい範囲は０．１−約２０ｍｇ／ｋｇ体重／日であるが、特別な場合には担当医師の判断において、上記の広い方の範囲外の用量が必要になる場合がある。好ましい投与経路は一般に経口によるが、特別な場合、たとえばその標的に対して経口投与が不適切である場合、または患者が種々の理由で薬物を摂取し得ない場合には、非経口投与（たとえば静脈内、筋肉内、皮下または骨髄内（ｉｎＬｒａｍｅｄｕｌｌａｒｙ））が好ましいであろう。患者が皮膚疾患、たとえば転層を患っている場合、または組織もしくは器官の表面に薬剤を付与するのが最良であると医師が判断した場合、局所投与も指示しうる。

こうして製造された式（１）の化合物は真菌により引き起こされた感染症の治療にも有用である。ヒトを含む哺乳動物においてこれらの真菌感染症の治療に用いるためには、式（Ｉ）の化合物を疾患の治療に有効な量で含有する薬剤組成物として配合する。投与される個々の式（１）の化合物の効力に応じて、約０．０５ −約３０ｍｇ／ｋｇ体重／日、１日１回または多数回の投与が、治療すべき哺乳動物に投与する量である。より好ましい範囲は０．　１−約２０ｍｇ／ｋｇ体重／日であるが、特別な場合には担当医師の判断において、上記の広い方の範囲外の用量が必要になる場合がある。好ましい投与経路は一般に経口によるが、特別な場合、たとえばその標的に対して経口投与が不適切である場合、または患者が種々の理由で薬物を摂取し得ない場合には、非経口投与（たとえば静脈内、筋肉内、皮下または骨髄内）が好ましいであろう。組織もしくは器官の表面に薬剤を付与するのが最良であると医師が判断した場合、局所投与も指示しうる。

本発明の化合物は一般に式（Ｉ）の化合初歩なくとも１種、および薬剤学的に受容しつるベヒクルまたは希釈剤を含む薬剤組成物の形で投与される。これらの組成物は一般に常法により、投与様式に適した固体または液体のベヒクルまたは希釈剤を用いて配合される°経口投与のためには錠剤、硬または軟ゼラチンカプセル、懸濁剤、顕粒剤、散剤などの形、非経口投与のためには注射用の液剤または懸濁剤などの形：局所投与のためには液剤、ローション剤、軟責剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ、５ａｌｖｅ）などの形。

移植に対する抵抗、および自己免疫疾患、たとえば慢性関節リウマチまたは乾１の治療における薬剤としての本発明化合物の有用性は、後記の生物学的スクリーニング法におけるそれらの化合物の有効性により証明される。これらの生物学的スクリーニング法は、式（１）の化合物の有効性を他の既知化合物の有効性と比較する手段をも提供する。これらの比較の結果は、ヒトを含む哺乳動物において移植に対する抵抗、および自己免疫疾患、たとえば慢性関節リウマチまたは乾磨の治療に用いるための用量を比較するのに有用である。

ヒト混合リンパ球反応（ＭＬＲ）は、インビトロで免疫反応を生じさせ、これを３Ｈ−チミジンの取り込みにより測定するために用いられる。このスクリーニング法は改良二方向ＭＬＲ（ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｔｗｏ−ｗａｙ　ＭＬＲ）において末梢血単核球を用いる。ＨＬＡタイプＤ抗原の不同性（ｄｉｓｐａｒｉＬｙ）を保証し、従ってｉ！２＋１激を最大にするために、凍結したドナー細胞のプールを刺激細胞（ｓｔｉｍｕｌａｊｏｒ）集団として用い、新たに単離した細胞を応答細胞（ｒｅ　５ｐｏｎｄｅ　ｒ）Ｓ団として用いる。

新たに採取した単核球を、下記を富化したＲＰＭＩ−１６４０に懸濁する。０゜５％ＭＥＭ非必須アミノ酸（１００Ｘ）溶液、１％　Ｌ−グルタミン（２００ｍＭ）、１％　ＭＥＭビタミン類（１００Ｘ）、１％ペニシリン　ストレプトマイシン溶Ｍ（１０，００１位／ｍＬ）、および１５％熱不活性化ヒトＡＢ血清（ＮＡＢ　Ｉ）。細胞を計数し、濃度を５Ｘ１０’細胞／ｍＬに調整する。次いでこの溶液を丸底９６ウエルプレートに１００μＬ／ウエルの量で移す。こうしてこれらのプレートは応答細胞を収容している。

刺激細胞は、数種類の異なる個体から採集した単核球をプールすることにより調製される。細胞を９０％ヒトＡＢ血清および１０％ＤＭＳＯに、細胞数が２×１０７細胞／ｍＬになるように懸濁する。この細胞を液体窒素中に保存する。ＭＬＲについては、生存細胞を５×１０５細胞／ｍＬに希釈し、応答細胞を収容したプレートに１００μＬ／ウエルを添加する。応答細胞と刺激細胞の混合物を収容した各ウェルに５０μＬの化合物溶液を添加する。各用量につき３個のウエルで実験する。プレートを３７℃で５％ＣＯ２の雰囲気下に５日間インキュベートし、加湿する。各ウェルに１μＣｉの３Ｈ−チミジンを添加し、さらに１８時間、インキュベーションを継続する。細胞をＬＫＢベータ・プレートシステムにより採取する。

刺激された対照に対する抑制率パーセントは下記の方程式により得られる・略号Ｃｐｍはカウント毎分として定義される。ＲＰＭＩ−１６４０はシグマから人手される組織培地である。

上記のＭＬＲスクリーニング法における有効性は、これらの有効化合物が移植に対する抵抗、ならびに自己免疫疾患、たとえば慢性関節リウマチおよび乾廚の治療に有用であることを示唆する。

種々の真菌に対する本発明のマクロライド系抗生初雪の抗微生物活性は、サブロー寒天における系列寒天希釈法により測定される。最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）は３０℃で２４時間のインキュベーション後にめる。

本発明を以下の実施例により説明する。ただし本発明はこれらの例の個々の詳細事項に限定されないと解すべきである。特に明記しない限り、反応はすべて不ｔ＆性雰囲気、たとえば窒素中で実施される。略号ＴＨＦ、ＤＭＳＯ，ＤＡＳＴ。

ＤＭＡＰおよびＡｃを用いた場合、それらはそれぞれテトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、ジメチルアミノースルファートリフルオリド、４−シメチルアミノビリンンおよびアセチルを意味する。特に明記しない限り、糖ハロゲン化物は糖類と同様に、信顛できる業者、たとえばシグマまたはアルドリッヒから購入された。無水溶剤を使用し、無水とは実質的に水を含有しないことであると定義される。

″反応不活性溶剤″という表現を上記で用いた場合、それは目的生成物の収率に不都合な影響を及ぼす様式で出発原料、試薬、中間体または生成物と相互作用しないいずれかの溶剤を意味する。

製造例１および２に見られる用語または頭字語については、後にさらに詳述する。

ＰＹＥＡ寒天は、ディフコマルトース（１０ｇ）、ディフコ酵母エキス（４ｇ）、ブドウ糖（４ｇ）、ディフコ寒天（１５ｇ）および新鮮なココナツミルク（５０ｍＬ）を、１リツトル溶液が得られるのに十分な脱イオン水に溶解し；この溶液をｌＮＮａＯＨでｐＨ７，３に調整することにより調製される。

ＡＴＣＣ１７２培地は、グルコース（１０ｇ）、可溶性デンプン（２０ｇ）、酵母エキス（５ｇ）　、ＮＺ−アミンＡ（ディフコ、５ｇ）および炭酸カルシウム（１ｇ）を、１リツトル溶液が得られるのに十分な脱イオン水に溶解し；この溶液をＩＮ　ＫＯＨでｐＨ７，０に調整することにより調製される。

ＪＤＹＴＴ培地は、セレローズ（１０ｇ）、トウモロコシデンプン（５ｇ）、コーンスチープリカー（５ｇ）　、ＮＺ−アミンＹＴＴ　（５ｇ）　、塩化コバルト（０，００２ｇ）および炭酸カルシウム（３ｇ）を、１リツトル溶液が得られるのに十分な脱イオン水に溶解し、この溶液をＩＮ　ＮａＯＨでｐＨ７，２に調整することにより調製される。

ＮＺ−アミンＡおよびＮＺ−アミンＹＴＴは、上記培地の他の大部分の成分と同様にディフコから人手される。

上記のＰｖＩ　Ｌ　Ｒプロトコールにおいて、ＲＰＭＩ−１６４０はＭＬＲ研究に用いられる標準的培地であり：ＭＥＭは′最小必須培地″と定義され、ＮＡＢＩは供給業者である。

実施例１１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４″−（２″′−デオキシ−２”−トリフルオロアセトアミド−３″′、４″′、６″′−トリー０ −アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−３’−メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チトラメチルー１１．２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０’　９］−オクタゴス−１８−エン−２，３，１０，１６−チトラオン製造例１の表題化合物（２，４８ｇＬ製造例３の表題化合物（２，９ｇ）、および４人モレキュラーシーブ（破砕、５．０ｇ）の、塩化メチレン（無水、１５０ｍＬ）中における撹拌されたスラリーに、−７８℃で炭酸銀（５，１５ｇ）、次いで銀トリフレート（０，８３ｇ）を添加した。反応混合物を８時間にわたって室温にまで昇温させ、次いでさらに５時間撹拌した。得られた淡褐色のスラリーをセライト（登録商標）によりｌｌ！過し、１１！液を真空中で蒸発させた。残渣をシリカゲル上で、ヘキサン／酢酸エチル（２／１）により溶離して精製し、生成物（０，９３ｇ、２５％）を得た。

”ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｉｓ）　（主ローチー？　−（ｒｏｔａｍｅｒ）　）δ２１３．３６．１９７．１．１９２．８２．１７０．９４．１７０．７７、１６９．４４．１６９．０３．１６４．９２および１３８、８５゜質量スペクトル（ＦＡＢ）　：１１９７．２　（分子イオン＋Ｎａ’）実施例２および３実施例１に示したものと実質的に同じ方法で、ただし製造例３の表題化合物の代わりに適宜な糖ハロゲン化物１モル当量を用いて、下記の化合物を製造した。

２．１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４’−（２″′ −デオキシ−２２−アセトアミド−３″′、４″′、６″′−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−３２−メトキトジシクロヘキシル）− １′−メチルビニル］−２３，２５−ンメトキシー１３．１９．２１．２７−チトラメチルー１１．２８−シ第４４−４−７ザト’Ｊ　シクロ［２２，３，１，０”　］−ｔり９コス（８−ｙ−ン−２゜”ＣＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＯＣＤり（主０−テーマ−）：δ２１１．９４．１９７．９３．１７０．７５．１７０．４７８．１７０．２１．１７０．０１３．１６９．８０．１６６．１．１３８゜８８、１３２．８０および１３２．２１゜質量スペクトル（ＦＡＢ）　：　１１４３．５　（分子イオン＋Ｎａ”）３、　１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４’−（２” −デオキシ−２１′−アジド−３”、４”、６”−トリー缶アセチルーβ−Ｄ− ガラクトピラノシルオキシ）−３′−メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル −１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０４１］−オクタゴス−１８−エン−２，３゜１０、１６−チトラオン質量スペクトル（ＦＡＢ）　：　１１２７　（分子イオン＋Ｎａつ実施例４１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４″−（２″−デオキシ−２＃′−アセトアミド−３”、４”、６”−トリー〇−アセチルーβ−Ｄ −ガラクトピラノシルオキシ）−３１−メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０４９］−オクタゴス−１８−エン−２，３゜１０、１６−チトラオン製造例３の表題化合物（１ｇ）および５％炭素上パラジウム（１００ｍｇ）を酢酸（１０ｍＬ）で希釈し、反応混合物を５０ＰＳＩ　（約３．５ｋｇ／ｃｍ２）の水素圧および室温で１６時間水素化した。反応混合物を２ｍＬの無水酢酸で処理し、５分間回転させた。反応混合物をセライトおよび木炭により濾過し、真空中で濃縮し、シリカゲル上でクロマトグラフィー処理して［まず酢酸エチル／ヘキサン（１／１）　、次いで酢酸エチル／ヘキサン（２／１）により溶ｆＩｓ］、この実施例の表題化合物　ｍｇを得た。

質量スペクトル（ＦＡＢ）　：　１１４３．３　（分子イオン十Ｎａつ実施例５１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４’−（２”−デオキシ−２１−アセトアミド−３″′、４″′、６″′−トリー〇−アセチルーβ −Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−３１−メトキトジシクロヘキシル）−１′− メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チトラメチルー１１．２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０４ｇ］− オクタゴス−１８−エン−３，１０，１６ｌ２造例２の表題化合物（１，０ｇ）をＤＭＦ　（１５ｍＬ）およびピリジン（１５ｒｎＬ）に溶解し、硫化水素（ＨｚＳ）ガスを反応混合物に室温で一夜吹き込んだ、過剰のＨＩＳ力吠気中へ散逸するのをタロロツクス（Ｃｈｌｏｒｏｘ）　トラップにより防止した。１６時間後に反応混合物をトルエン（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（５０ｍ、Ｉ、）で洗浄した。溶剤をＭｇＳＯ４で乾燥さぜ、溶剤を真空中で除去した。残渣をシリカゲルのパッドに導通し、酢酸エチル／ヘキサン（２／１）により溶離して、この実施例の表題化合物４９０ｍｇ　（５０％）を得た。

Ｉ″ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤｚＣｈ）（主ローテーマ−））δ２１５．１４．１７４．０８．１７１．７４．１７０．４８．１７０．３９．１６９．９３．１６９．３６．１６９．１３７．１４０゜７６、１３２．０４゜１２８．４５および１２２．２３゜質量スペクトル（ＦＡＢ）　：　１１２９．７　（分子イオン＋Ｎａ′″）害廊例互１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４’−（２”−デオキシ−２＃′−トリフルオロアセトアミド−β−トグルコビラノシルオキシ）− ３′−メトキトジシクロヘキシル）−１’　−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チトラメチルー１１．２８−ジオキサ−４ −アザトリシクロ［２２，３，１，０”　］−］オクタスス−１８−エン−２３，１０，１６−チトラオン実施例１の表題化合物（１，０ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（２０ｍｇ）で処理した。反応混合物を０℃で８時間撹拌し、次いで使い捨てビペツ）・がらの１滴の酢酸で処理した。溶剤を真空中で除去し、残渣をシリカゲル−Ｌで、ＴＨＦにより溶離して精製し、６１０ｍｇの泡状物（５０％）を得た。

実施例７および８実施例６に示したものと実質的に同じ方法で、ただし実施例１の表題化合物の代わりに実施例２−５の生成物のうちいずれかを１モル当量用いて、下記の化合物を製造した。

７．１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２４２’−（４’−（２′′〜デオキシ−２１′−アセトアミド−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−３５− メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ −１３，１９，２Ｊ、、　２７−テトラメチル用、２Ｂ−ジオキサ＋アザトリシクロ［２２，３，１０’　９］−オクタニス−１８−エン−２，３，１０，１，６−チトラオン”ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ３０Ｄ）（主ローチー−ｑ＝）：　δ２１．２．０２゜１９６、８，１７２．２６．１６９．２９．および１６６゜０８．　’ｉｔ量スペクトル（ＦＡＢ）　：１０１７．６（分子イオン＋Ｎａ”）８．１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４″〜（２″′ −デオキシ−２１−アセトアミド−β−〇−グルコピラノシルオキシ）−３＃− メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ −１３，１９，２１，２７−チトラメチルー１１゜２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２，３，１，０’　９１−オクタニス−１８−エン−３，１０，１６−チトラオンＩ３ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ２Ｃ１ｔ）（主ローテーマ− ）・　δ２１５．０゜１？４．１．１７２．６．１６９．５．１４１．１゜製造例１１７−エチル−１，１４−ジヒドロキシ〜１２−［２’−（４″−ヒドロキシ− ３″−メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル−１１，２８−ジオキサ−４− アザトリシクロ［２２，３，１，０’　９］−オクタニス−１８−エン−２，３，１０，１，６−チトラオンストレプトミセス・パイグロスコピカス亜種アスコミセチカス培養物ＡＴＣＣ１４８９１を、ＰＹＥＡ寒天斜面（１０ｇ／Ｌ　ディフコマルトース、４ｇ／Ｌディフコ酵母エキス、４ｇ／Ｌ　ブドウ糖、１５ｇ／Ｌ　ディフコ寒天、および５０ｍＬ　新鮮なココナツミルク、これを脱イオン水で１リツトルに希釈し、次いでＩＮ　ＮａＯＨでｐＨ７，３に調整した）に乗せた。この調製物を２８℃で１０−１２日間インキュベートし、次いで１０ｍＬのＡＴＣＣ１７２培地（１０ｇ／Ｌ　グルコース、２０ｇ／Ｌ　可溶性デンプン、５ｇ／Ｌ　酵母エキス、５ｇ／Ｌ　ＮＺ−アミンＡ５およびＩｇ／Ｌ　炭酸カルシウム。ＩＮ　ＫＯＨでｐＨを７．０に調整した）を入れた無菌のＩＸ６振盪試験管に胞子を移した。試験管を２８℃でインキュベートし、回転振盪機上において約１．５０−２００回転／分で振盪した。４−５日後にブロスをグリセリンおよびＡＴＣＣ１７２培地で４０％に希釈し、次いで無菌的に冷却試験管（ｃｒｙｏｔｕｂｅ）に移した。

各試験管に１　／　２　ｍ　Ｌのブロスを装填した。保存期間中はこれらの試験管を一８０℃に凍結した。

超低調貯蔵庫からの試験管を接種用フラスコの調製のための接種材料として、３００ｍＬの振盪フラスコ中の５０ｍＬの無菌ＪＤＹＴＴ培地当た培地水の試験管を用いた。ＪＤＹＴＴ培地の組成は、１０ｇ／Ｌ　セレローズ、５ｇ／ＬＮＺ− アミンＹＴＴ、０．００２ｇ／Ｌ　塩化コバルト、および３ｇ／Ｌ　炭酸カルシラムチあった。ＪＤＹＴＴ培地のｐ　ＨをＩＮ　ＮａＯＨでｐＨ７，２に調整した。振盪試験管を約１５０−２００回転／分および２８℃で回転振盪機上において振盪およびインキュベートした。

約３−５日令の振盪フラスコ接種材＄４２ｍＬを、８０ｍＬのＪＤＹＴＴ培地を入れた第２段階フラスコ接種材料の接種に用い、これを３Ｌのジャーファーメンタ−内で用いた。ファーメンタ−培地は４５ｇ／Ｌ　コーンスターチ、］、Ｏｇ／Ｌコーンスチーブリカー、］、Ｏｇ／Ｌ　アンバー（ａｍｂｅｒ）またはベーカー乾燥酵母、３ｇ／Ｌ　炭酸カルシウム、および０．００５ｇ／Ｌ　塩化コバルトであった。ｐＨをＩＮ　ＮａＯＨで約６．　４−６．　８に調整した。１ｍＬの消泡剤Ｐ−２０００を１００ｍＬの大豆油と共にシャーファーメンタ−に添加した。

ｐＨをＩＮ　ＮａＯＨで約６．　４−６．　８に調整し、材料を１７０Ｏｒｐｍで撹拌した。温Ｉを２８°Ｃに維持し、無菌の空気を１容量／容量／分の速度で培地に吹き込んだ。

接種後に、無菌の大豆油を用いて発泡を制御した。長期間の発酵の場合、用いた培地によっては糖含量を監視し、低下する糖水率を０．０５％以上に維持するために４０．６０および９０時間目に糖供給材料を用いることができる。発酵を４６時間行った。

薄層クロマトグラフィーおよびＨＰＬＣの標準法により発酵ブロスを監視し、相対力価を計算した。

生成物は主として菌糸中に見られたが、ブロス全体を仕上げ処理することが好ましい。従って、発酵過程が終了したのち、ブロス全体をその容量の１／３−１／２のメチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）で２回抽出した。各層をデラバル（ＤｅＬａｖａｌ）分Ｍ器またはポトビエルニアク抽出器により分離した。溶剤層を清澄化し、まず真空がま内で、次いで回転蒸発器内で濃縮した。濃縮物を２ＯＬのカーボイ（ｃａｒｂｕｏｙ）内で、カーボイ当たりＩＯＬの上層およびＩＬの下層のへブタン／アセトニトリル　１０／１系を用いて、試験管４本の向流分配を行った。有効な下層を採集し、合わせて濃縮した。この材料をさらにフロリシル（Ｆｌｏｒｉｓｉｌ）を通して濾過することによりＭ製した（塩化メチレン濃度を漸増させながら、順次へキサン、ヘキサン／塩化メチレン、および塩化メチレンで洗浄）。有効性は大部分が塩化メチレン画分中に見られた。これらを合わせて濃縮した。２回目の濾過工程を実施し、この場合はシリカゲルを通した（ヘプタン、塩化メチレン、塩化メチレン／酢酸エチル、および酢酸エチルで洗浄）。有効性は大部分が塩化メチレン／酢酸エチル混合物を含有する両分、および酢酸エチルのみを含有する画分中に見られた。これらを合わせて濃縮し、塩化メチレンに再溶解し、ＤＡＲＣＯＧ６０で処理した。次いで試料を１２−４５ｇずつに分け、各試料をさらにＰｒｅｐ　５００Ｍ体クロマトグラフ上でシリカゲルカラムを用い、１００％塩化メチレンから開始して１００％酢酸エチルで終了する線状濃度勾配を用いてクロマトグラフィー処理した。有効画分を合わせて濃縮し、Ｐｒｅｐ　５００上で逆相Ｃ３Ｃ）シリカゲルを用い、アセトンから開始して１００の％水で終了する線状濃度勾配により溶離するクロマトグラフィー処理を行った。清浄な生成物がカラムからｌｌ１１１１ｔｌされた最終成分として得られた。

上記発酵法の有効画分は下記のバイオアッセイにより判定された。

１２．５ｍｍのディスクを寒天表面に直接に乗せた。カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）ＡＴＣＣ１４０５３、サツカロミセス・バストリアヌス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｐａｓｔｒｉａｎｕｓ）ＦＤ３７３７、ならびに感受性菌株パイソクラミス・フルバ（Ｂｙｓｓｏｃｈｌａｍｉｓｆｕｌｖａ）ＦＭ　１０．３００　（Ｓ）およびＦＭ　１０．４６４　（Ｒ）を用いた。これらカンジダおよびサツカロミセスの平板を３７℃で１８時間インキュベートし、次いで平板を有効性に関して試験した。バイソクラミスの平板は２８℃でインキュベートし、１８時間後に読み取った。ＦＫ５０６およびＦＫ５２０（ＣＰ−１０５０５１）のみを含有する平板がパイソクラミス菌株に対して有効であった。不純な画分にゲリシンを含有）は他の菌株に対しても有効であった。

画分の純度を判定するためにＨＰＬＣ法をも採用した。この方法はデュポン、ゾルパックス（Ｚｏｒｂａｘ）ＣＮカラム（４，６ｍｍＸ２５ｃｍ）　、および５５／４５　水／アセトニトリルからなる系、および流量１ｍＬ／分の使用を伴った。検出は２１４ｎｍで行われた。ブロス試料（２０ｍＬ）をＭＩＢＫ（２０ｍＬ）と混合し、約４−５分間振盪した。層を分離し、溶剤をほぼ乾燥するまで濃縮した。残渣を１ｍＬの純アセトニトリルに装入し、５μＬの試料をＨＰＬＣに注入した。ＦＫ５２０の保持時間はこれらの条件下で約１２．７分である。

製造例２１７−アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［２’−（４’−ヒドロキシ− ３′−メトキトジシクロヘキシル）−１′−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−チトラメチルー１１．２８＝ジオキサ−４− アザトリシクロ［２２，３，１，０４”］−］オクタスス−１８−エン−２３，１０，１６−チトラオンストレプトミセス・ツクバエンシスＮｏ、９９９３　Ｆ’ＥＲＭ　ＢＰ−９２７を、ＰＹＥＡ寒天斜面（Ｌｏｇ／Ｌ　ディフコマルトース、４ｇ／Ｌディフコ酵母エキス、４ｇ／Ｌ　ブドウ糖、１５ｇ／Ｌ　ディフコ寒天、および５０ｍＬの新鮮なココナツミルク、これを脱イオン水で１リツトルに花釈し、次いでＩＮ　ＮａＯＨでｐＨ７，３に調整した）に乗せた。この調製物を２８℃で１０−１．２日間インキュベートし、次いで１０ｍＬのＡＴＣＣ１７２培地（Ｌｏｇ／Ｌ　グルコース、２０ｇ／Ｌ　可溶性デンプン、５ｇ／Ｌ　酵母エキス、５ｇ／Ｌ　ＮＺ−アミンＡ１およびＩｇ／Ｌ　炭酸カルシウム。ＩＮ　ＫＯＨでｐＨを７．０に調整した）を入れた無菌のＩＸ６振盪試験管に胞子を移した。試験管を２８ ℃でインキュベートし、回転振盪機上において約１５０−２００回転／分で振盪した。

４−５日後にブロスをグリセリンおよびＡＴＣＣ１７２培地で４０％に希釈し、次いで無菌的に冷却試験管に移した。各試験管に１７２ｍＬのブロスを装填した。

保存期間中はこれらの試験管を一８０℃に凍結した。

超低温貯蔵庫からの試験管を接種用フラスコの調製のための接種材料として、３００ｒｎＬの振盪フラスコ中の５０ｍＬの無菌ＪＤＹＴＴ培地当たり１本の試験管を用いた。ＪＤＹＴＴ培地の組成は、１０ｇ／Ｌ　セレローズ、５ｇ／ＬＮＺ −７ミンＹＴＴ、０．００２ｇ／Ｌ　塩化コノ（ルト、および３　ｇ／Ｌ　炭酸カルシウムであった。ＪＤＹＴＴ培地のｐＨをＩＮ　ＮａＯＨでｐＨ７，２＋こ調整した。振盪試験管を約１５０−２００回転／分および２８℃で回転振盪機上（こおいて振盪およびインキュベートした。

約３−５日令の振盪フラスコ接種材料２ｍＬを、８０ｍＬのＪＤＹＴＴ培地を入れた第２段階フラスコ接種材料の接種に用い、これを３Ｌのジャーファーメンタに用いた。ファーメンタ−培地は４５ｇ／Ｌ　コーンスターチ、１０ｇ／Ｌコーンスチープリカー、Ｌｏｇ／Ｌ　アンノく−またはベーカー乾燥酵母、３ｇ／ＬＩｊ２酸カルシウム、および０．００５ｇ／Ｌ　塩化コノくルトであった。ｐＨをＩＮ　ＮａＯＨで約６．　４−６．　８に調整した。１ｍＬの消泡剤Ｐ−２０００を１００ｍＬの大豆油と共にジャーファーメンタ−に添加した。ｐＨをＩＮ　ＮａＯＨで約６．　４−６．　８に調整し、材料を１７０Ｏｒｐｍで撹拌した。温度を２８℃に維持し、無菌の空気を１容量／容量／分の速度で培地に吹き込んだ。

接種後に、無菌の大豆油を用いて発泡を制御した。長期間の発酵の場合、用０た培地によっては糖含量を監視し、低下する糖水率を０，０５％以上に維持するために４０．６０および９０時間目に糖供給材料を用いることができる。発酵を４６時間行った。

発酵槽を停止し、その容量の１／２のメチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）で２回抽出した。各層をアスビレーションにより分離し、真空中で濃縮して粘稠な油を得た。この油をヘキサン、ジエチルエーテルおよび塩化メチレンで摩砕処理し、有効画分（ジエチルエーテル画分）を７０リシル上でクロマトグラフィー処理した。フロリシルを順次ジエチルエーテル、塩化メチレン、酢酸エチルおよびアセトンで溶離した。溶出液を濃縮し、活性炭で処理した。濃縮物を濾過し、酢酸エチルに溶解した。ヘキサンを添加して生成物を結晶化した。

ブロスおよび後続の回収液流の生物活性は、ノ（イソクラミス・フルノくの菌株を用いて追跡された。ブロスおよび後続の回収液流中の成分を、アナルテク（Ａｎａｌｔｅｃｈ）シリカゲルＧＦ（商標）プレート上で純アセトニトリルを溶離剤として用いるクロマトグラフィーにより視覚化した。展開したプレートにノτ ニリン試薬（エタノール７５ｍＬおよび８５％リン酸２５ｍＬ中のバニリン３ｇ）を噴霧し、８０℃に加熱した。生成物は紫色のスポットとして現れた。

型菫例１３、４．６−トリーローアセチル−２〜デオキシ−２−トリフルオロアセトアミド−α−Ｄ−グルコシルブロミドウォルフロムｆｆｏｌｆｒｏｍ）ら、　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３２．１８２１−２３（１９６７）の方法に従って製造した。

製造例４２−アシド−３，４，６−１−ソー０−アセチル−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトシルクロリドレミュー（Ｌｅｍｉｅｕｘ）　ら、Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　５７．１２４４−５１（１９７９）■ 方法に従って製造した。

補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成　６年　９月　２■創

Claims

【特許請求の範囲】

１．次式の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ またはそれらの薬剤学的に受容しうる塩類：［式中のｎは、１または２であり；点線は、Ｒ２がＨである場合に任意の２重結合を表し；ＡおよびＢは別個のものであって、ＡがＨであり、かつＢがＨもしくはＯＨであるか、またはＡとＢは一緒になって＝Ｏを形成し；Ｒ２は、Ｈ、（Ｃ２−Ｃ５）アルカノイルオキシまたは−ＯＲ０であり；Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはアリルであり；Ｒ１およびＲ０は、それぞれＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ であり；Ｒ４は、それぞれの場合独立して−ＣＯ２Ｒ９、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＮＲ２９、−ＣＨ２ＯＣＯＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯ２Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＨＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＲ２９、または−ＣＨ２ＯＲ９であり；Ｒ５およびＲ６は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ベンジルオキシ、−ＯＨ、−ＯＣＯＲ９、−ＯＣ０２Ｒ９、または−ＯＳｉＲ３１０であり；Ｒ７およびＲ８は、それぞれの場合独立してＨ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＣＨ２Ｒ９、−ＣＯＲ９、−ＣＯ２Ｒ９、または−ＳＯ２Ｒ９であり；Ｒ９は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、アリル、−ＣＦ３、ピリジル、チェニル、チェニルメチレン、フラニル、ベンジル、置換ベンジル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）、フェニル、または置換フェニル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）であり；かつＲ１０は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルであり；ただしＲ１およびＲ０の両方がＨであることはない］。
２．ｎが２であり；ＡとＢが一緒になって＝Ｏを形成し；点線が結合を表さず；かつＲ２がＯＨである、請求項１に記載の化合物。
３．Ｒ３がメチル、エチルまたはアリルである、請求項２に記載の化合物。
４．Ｒ３がエチルである、請求項３に記載の化合物。
５．Ｒ１が ▲数式、化学式、表等があります▼または▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項４に記載の化合物。
６．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＨまたは−ＣＨ２ＯＣＯＣＨ３であり；Ｒ５およびＲ６がそれぞれ独立して−ＯＨまたは−ＯＣＯＣＨ３であり；Ｒ７がＨであり、かつＲ８がＨ、−ＣＯＣＨ３、または−ＣＯＣＦ３である、請求項５に記載の化合物。
７．Ｒ１が ▲数式、化学式、表等があります▼ である、請求項６に記載の化合物。
８．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＣＯＣＨ３であり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＣＯＣＨ３であり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＣＨ３である、請求項７に記載の化合物。
９．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＣＯＣＨ３であり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＣＯＣＨ３であり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＣＦ３である、請求項７に記載の化合物。
１０．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＨであり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＣＨ３である、請求項７に記載の化合物。
１１．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＨであり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＣＦ３である、請求項７に記載の化合物。
１２．Ｒ１が ▲数式、化学式、表等があります▼ である、請求項６に記載の化合物。
１３．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＣＯＣＨ３であり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＣＯＣＨ３であり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＣＨ３である、請求項１２に記載の化合物。
１４．Ｒ４が−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ５およびＲ６がそれぞれ−ＯＨであり、Ｒ７がＨであり、かつＲ８が−ＣＯＣＨ３である、請求項１２に記載の化合物。
１５．ｎが２であり；ＡおよびＢがそれぞれＨであり；点線が結合を表さず；Ｒ２が−ＯＨであり；かつＲ３がエチルである、請求項１に記載の化合物。
１６．移植に対する抵抗を処置する必要のある哺乳動物におけるその処置方法であって、該哺乳動物に移植に対する抵抗を処置するのに有効な量の請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に受容しうる塩を投与することを含む方法。
１７．自己免疫疾患を治療する必要のある哺乳動物におけるその治療方法であって、該哺乳動物に自己免疫疾患を治療するのに有効な量の請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に受容しうる塩を投与することを含む方法。
１８．真菌性疾患を治療する必要のある哺乳動物におけるその治療方法であって、該哺乳動物に真菌性疾患の治療に有効な量の請求項１に記載の化合物またはその薬剤学的に受容しうる塩を投与することを含む方法。
１９．移植に対する抵抗を処置するのに有効な量の請求項１に記載の化合物、および薬剤学的に受容しうるキャリヤーを含む薬剤組成物。
２０．自己免疫疾患を治療するのに有効な量の請求項１に記載の化合物、および薬剤学的に受容しうるキャリヤーを含む薬剤組成物。
２１．真菌性疾患を治療するのに有効な量の請求項１に記載の化合物、および薬剤学的に受容しうるキャリヤーを含む薬剤組成物。
２２．次式の化合物の製造方法： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中のｎは、１または２であり；Ｒ２は、（Ｃ２−Ｃ５）アルカノイルオキシまたは−ＯＲ０であり；Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはアリルであり：Ｒ１およびＲ０は、それぞれＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ であり；Ｒ４は、それぞれの場合独立して−ＣＯ２Ｒ９、−ＣＯ２Ｈ、Ｈ、−ＣＨ９、− ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＮＲ２９、−ＣＨ２ＯＣＯＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯ２Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＨＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＲ２９、または−ＣＨ２ＯＲ９であり；Ｒ５およびＲ６は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ベンジルオキシ、−ＯＣＯＲ９、−ＯＣＯ２Ｒ９、または−ＯＳｉＲ３１０であり；Ｒ７およびＲ８は、それぞれの場合独立してＨ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＣＨ２Ｒ９、−ＣＯＲ９、−ＣＯ２Ｒ９、または−ＳＯ２Ｒ９であり；Ｒ９は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、アリル、−ＣＦ３、ピリジル、チェニル、チェニルメチレン、フラニル、ベンジル、置換ベンジル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）、フェニル、または置換フェニル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）であり；かつＲ１０は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルであり；ただしＲ１およびＲ０の両方がＨであることはない］であって、次式の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中のＲ３は（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、かつｎは１または２である］と２−４モル当量の次式の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中のＸはハロであり；Ｒ４は、それぞれの場合独立して−ＣＯ２Ｒ９、−ＣＯ２Ｈ、Ｈ、−ＣＨ３、− ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＮＲ２９、−ＣＨ２ＯＣＯＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯ２Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＨＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＲ２９、または−ＣＨ２ＯＲ９であり；Ｒ５およびＲ６は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ベンジルオキシ、−ＯＣＯＲ９、−ＯＣＯ２Ｒ９、または−ＯＳｉＲ３１０であり；Ｒ７およびＲ６は、それぞれの場合独立してＨ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＣＨ２Ｒ９、−ＣＯＲ９、−ＣＯ２Ｒ９、または−ＳＯ２Ｒ９であり；Ｒ９は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、アリル、−ＣＦ３、ピリジル、チェニル、チェニルメチレン、フラニル、ベンジル、置換ベンジル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）、フェニル、または置換フェニル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）であり；かつＲ１０は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルである］を、分子ふるい、硫酸カルシウムおよび硫酸マグネシウムよりなる群から選ばれる乾燥剤；炭酸水銀、炭酸銀、硝酸水銀および硝酸銀よりなる群から選ばれる塩基：ならびに銀トリフレート、過塩素酸銀、テトラフルオロ硼酸銀、水銀トリフレート、過塩素酸水銀、およびテトラフルオロ硼酸水銀よりなる群から選ばれる触媒の存在下に、反応不活性溶剤中で約−７８℃ないし約−７０ ℃の温度において反応させ、約０℃に約０．５−約２４時間加温し、次いで室温で約０．５−約２４時間撹拌することを含む方法。
２３．次式の化合物の製造方法： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中のｎは、１または２であり；Ｒ２は、（Ｃ２−Ｃ５）アルカノイルオキシまたは−ＯＲ０であり；Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはアリルであり：Ｒ１およびＲ０は、それぞれＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ であり；Ｒ４は、それぞれの場合独立して−ＣＯ２Ｒ９、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＮＲ２９、−ＣＨ２ＯＣＯ２Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＨＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＲ２９、または−ＣＨ２ＯＲ８であり；Ｒ６およびＲ６は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ベンジルオキシ、−ＯＨ、−ＯＣＯ７Ｒ９、または−ＯＳｉＲ３１０であり；Ｒ７およびＲ８は、それぞれの場合独立してＨ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、 −ＣＯＣＨ２Ｒ９、−ＣＯＲ９、−ＣＯ２Ｒ９、または−ＳＯ２Ｒ９であり；Ｒ９は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、アリル、−ＣＦ３、ピリジル、チェニル、チェニルメチレン、フラニル、ベンジル、置換ベンジル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）、フェニル、または置換フェニル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）であり；かつＲ１０は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルであり；ただしＲ１およびＲ０の両方がＨであることはない］であって、次式の化合物： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中のｎは１または２であり；Ｒ２は、（Ｃ２−Ｃ５）アルカノイルオキシまたは−ＯＲ０であり；Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはアリルであり；Ｒ１およびＲ０は、それぞれＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼ であり；Ｒ４は、それぞれの場合独立して−ＣＯ２Ｒ９、−ＣＯ２Ｈ、Ｈ、−ＣＨ３、− ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＮＲ２９、−ＣＨ２ＯＣＯＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯ２Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＨＲ９、−ＣＨ２ＯＣＯＮＲ２９、または−ＣＨ２ＯＲ９であり；Ｒ５およびＲ６は、それそれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、ベンジルオキシ、−ＯＣＯＲ９、−ＯＣＯ２Ｒ９、または−ＯＳｉＲ３１０であり；Ｒ７およびＲ８は、それぞれの場合独立してＨ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−ＣＯＣＨ２Ｒ９、−ＣＯＲ９、−ＣＯ２Ｒ９、または−ＳＯ２Ｒ９であり；Ｒ９は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、アリル、−ＣＦ３、ピリジル、チェニル、チェニルメチレン、フラニル、ベンジル、置換ベンジル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）、フェニル、または置換フェニル（１−５個のハロゲン原子、−ＯＨ基、または（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ基で種々に置換されている）であり；かつＲ１０は、それぞれの場合独立して（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたはベンジルであり；ただしＲ１およびＲ０の両方がＨであることはない］を、アルコール系溶剤中で０℃において触媒量のアルコキシド塩基と反応させることを含む方法。