JPS6312065B2

JPS6312065B2 -

Info

Publication number: JPS6312065B2
Application number: JP1721979A
Authority: JP
Inventors: Kazuya Sasaki; Yukio Inoe
Original assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1979-02-19
Filing date: 1979-02-19
Publication date: 1988-03-17
Also published as: JPS55111470A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はゲルダナマイシンの新規な誘導体、そ
の製法及びそれを有効成分とする抗腫瘍剤に関す
る。本発明の新規化合物は次式で表わされる。この式中R¹はメトキシ基又はジ低級アルキル
アミノ基、R²はジ低級アルキルアミノ基を意味
する。 R¹及びR²のためのジ低級アルキル基としては、
例えばジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジ
プロピルアミノ基、ジブチルアミノ基、メチルエ
チルアミノ基、エチルブチルアミノ基などがあげ
られ、ジメチルアミノ基が好ましい。ゲルダナマイシンはストレプトミセス・ヒグロ
スコピクス・バル・ゲルダヌス・バル・ノバ株の
生産する抗原虫性抗生物質であることが知られて
おり（ジヤーナル・オブ・アンチビオテイクス第
23巻442頁1970年参照）、次式の化学構造を有する
（ジヤーナル・オブ・ザ・アメリカン・ケミカ
ル・ソサイエテイ第92巻7591頁1970年参照）。本発明者らは、ゲルダナマイシンの誘導体を合
成して生体に対する種々の作用を試験した結果、
式の新規化合物が優れた抗腫瘍作用を有し、ま
た他の誘導体を合成するための中間体として有用
であることを見出した。式の新規化合物は、式の化合物にジ低級ア
ルキルアミンを作用させることにより製造でき
る。本反応は好ましくは有機溶媒中で行われる。溶
媒としては、例えばアルコール、塩素化炭化水素
などが用いられ、特にクロロホルム、ジクロルエ
タン、メタノールなどが好ましく、２種以上の溶
媒を併用することもできる。反応成分は等モル当
量で又は一方を過剰に用いて、好ましくは過剰の
ジアルキルアミンを用いて反応させることができ
る。ジアルキルアミンはそれ自体で又はその水溶
液の形で用いることができる。本反応は一般に室
温で充分に進行し、通常は１〜24時間後に終了す
る。本反応に際しては通常は、式においてR¹が
メトキシ基及びR²がジアルキルアミノ基である
化合物ならびにR¹及びR²がそれぞれジアルキル
アミノ基である化合物が同時に生成する。それぞ
れの目的物質は常法により単離、精製することが
できる。例えば反応混合物を希鉱酸で洗浄して過
剰のアミンを除去し、次いで減圧下に浴温35〜45
℃で蒸発乾固させ、残査をクロマトグラフイー好
ましくはシリカゲルクロマトグラフイーにより分
離精製したのち再結晶することにより、各目的物
を結晶状で単離することができる。式の化合物は褐色ないし青色の結晶性物質で
あり、水に難溶性であるが、例えばメタノール、
エタノール、アセトン、酢酸エチル、ハロゲン化
炭化水素、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジ
メチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ピ
リジン等の有機溶剤に容易に溶解する。本化合物は還元剤、例えば亜硫酸水素塩、亜二
チオン酸塩、亜鉛―酢酸又はアスコルビン酸等で
処理すると淡黄色又は白色となるが、酸素、空気
又は酸化剤等に接触すると急速に褐色ないし青色
となり、元の式の化合物になる。本発明の新規化合物は癌細胞のモデルとして広
く認められている実験腫瘍細胞Ｗ―2K―11細胞
に対し著しい生育阻止作用を有し、抗腫瘍剤とし
有用である。従つて本発明は更に、式の化合物を有効成分
とする抗腫瘍剤である。１種又は数種の式の化合物を単独で本発明の
抗腫瘍剤として用いてもよいが、通常は普通の賦
形剤又は補助剤を配合して、経口投与ならびに非
経口投与に適する製剤の形で用いることが好まし
い。賦形剤又は補助剤としては、例えば下記の有
機もしくは無機の固体ないし液状物質が用いられ
る。好適な賦形剤は、例えば水、ゼラチン、乳
糖、デンプン、繊維素グリコール酸カルシウム、
微結晶セルロース、ステアリルアルコール、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ベンジ
ルアルコール、プロピレングリコール、ゴム、ポ
リアルキレングリコール、白色石油、ゼリー、コ
レステロールなどである。補助剤としては、例え
ば保存剤、湿潤剤、乳化剤、溶解促進剤、浸透圧
調整用塩、緩衝剤、結合剤、懸濁分散剤などが用
いられる。製剤としては、例えば粉剤、顆粒剤、カプセル
剤、丸剤、錠剤、糖衣錠、注射剤、坐剤、軟膏な
どがあげられ、これらの製剤は常法により製造す
ることができる。本発明の抗腫瘍剤は人間の治療のためばかりで
なく、前記の形態で獣医用医薬として用いること
もできる。本発明の抗腫瘍剤を治療に用いる際には、有効
成分の投与量は成人につき１日当たり、非経口投
与の場合は一般に0.5〜80mg／Kg好ましくは１〜
40mg／Kg、経口的投与の場合は一般に１〜100
mg／Kg好ましくは２〜50mg／Kgである。実施例１ゲルダナマイシン560mgをクロロホルム―メタ
ノール（混合比３：２）100mlに溶解し、50％ジ
メチルアミン水溶液30mlを加えたのち室温で２時
間撹拌する。次いで反応混合物を冷水100ml中に
投入し、6N―塩酸でPH３〜４となし、クロロホ
ルムで２回抽出する。抽出液を水洗したのち、無
水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下に蒸発乾固
すると青色油状物が残る。この油状物をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフイーにより２％メタノー
ル―クロロホルムで展開し、第14〜32番目の分画
を集めて溶媒を留去したのちエーテルから再結晶
すると、17―デメトキシ―17，19―ビスジメチル
アミノ―ゲルダナマイシン52mgが褐色結晶として
得られる。融点：135〜137℃ 元素分析値：C₃₂H₅₀N₄O₈としてＣＨＮ計算値（％） 62.11 8.15 9.05 実測値（％） 62.01 8.00 8.87 NMRスペクトル（100MHz、CDCl₃中）： δ（ppm） 2.92（ジメチルアミノ）、2.93（ジ
メチルアミノ）、3.31（メトキシ）、
3.34（メトキシ）紫外部吸収スペクトル： λ^CH3OH _nax（nm）：246、380、540 質量分析法による分子量（ｍ／ｅ）：618 実施例２実施例１と同様にして反応を行い、反応混合物
を処理して得られた青色油状物を、シリカゲルカ
ラムクロマトグラフイーにより２％メタノール―
クロロホルムで展開し、第34〜70番目の分画を集
め、減圧下に溶媒を留去したのち残査をエーテル
―ｎ―ヘキサンから再結晶すると、19―ジメチル
アミノ―ゲルダナマイシン317mgが紺青色の結晶
として得られる。融点：153〜156℃ 元素分析値：C₃₁H₄₅N₃O₉としてＣＨＮ計算値（％） 61.67 7.51 6.96 実測値（％） 61.81 7.98 6.88 NMRスペクトル（100MHz、CDCl₃中）： δ（ppm） 3.00（ジメチルアミノ）、3.26（メ
トキシ）、3.33（メトキシ）、3.88（メト
キシ）紫外部吸収スペクトル： λ^CH3OH _nax（nm）：244、295、535 質量分析法による分子量（ｍ／ｅ）：603 製剤例実施例１の化合物2500ｇ、乳糖1375ｇ、微結晶
セルロース775ｇ及び繊維素グリコール酸カルシ
ウム375ｇを16メツシユの篩を用いて篩過し、均
一に混合したのち練合機に入れ、これに３％ヒド
ロキシプロピルセルロース溶液（イソプロピルア
ルコール：水＝３：７の混液中）３を添加して
練合する。混合物を押出造粒機を用いて造粒し、
50℃で６時間送風乾燥する。次いで16〜60メツシ
ユの範囲に整粒したのち、この粒状物に対し0.3
％のステアリン酸マグネシウムを混合して打錠
し、錠剤とする。試験例マウスの腎由来の線維芽細胞のC3H―2Kクロ
ーンをSV40発癌ウイルスによつて癌化させた癌
細胞Ｗ―2K―11を供試細胞とし、これを下記の
方法により培養した。 (1) 増殖培養液の調製：イーグルMEM培地（日水製薬製）9.4ｇを蒸留
水900mlに溶解し、120℃で15分間加圧滅菌し、冷
却したのち仔牛血清100ml及び滅菌した10％炭酸
水素ナトリウム溶液３〜５mlを加えてPH7.1〜7.2
に調整する。培地使用直前にミリポアフイルター
で過したＬ―グルタミン（2.92ｇ／100ml）溶
液10mlを加える。 (2) 移植細胞液の調整：ジープ・フリーザー（−80℃）で保存された供
試細胞を室温で溶解させ、670×ｇで５分間遠心
分離し、沈澱した細胞を(1)の増殖培養液50mlに懸
濁したのちルー・フラスコに移し、37℃で培養す
ると細胞が増殖を始め、３〜４日で充分に増殖す
る。培養液を傾瀉し、次いで0.2％トリプシン溶
液10mlを加え、室温で２〜３分間放置したのちト
リプシン溶液を傾瀉する。更に(1)の増殖培養液50
mlを加えて細胞浮遊液とする。 (3) 細胞培養と被験化合物の投与： (2)で得られた細胞浮遊液を1.8mlずつシヤーレ
に分注し、炭酸ガスインキユベーター（５％
CO₂、95％空気）中で37℃において培養する。培
養24時間後に被験化合物のエタノール溶液0.2ml
を投与して培養を継続する。培養48時間後に細胞増殖について顕微鏡下で細
胞の生存数を計測し、供試細胞増殖の抑制率を次
式により求めた。抑制率（％）＝（無投与シヤーレ中の細胞数）−（投与
シヤーレ中の細胞数）／（無投与シヤーレ中の細胞数）
×100 得られた結果を次表に示す。

【表】急性毒性：マウスに対する50％致死量（LD₅₀）は、腹腔
内投与で19―ジメチルアミノ―ゲルダナマイシン
は＞240mg／Kgであつた。ゲルダナマイシンの
LD₅₀は15mg／Kgであり、これと比較して毒性が
著しく低下している。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中R¹はメトキシ基又はジ低級アルキルア
ミノ基、R²はジ低級アルキルアミノ基を意味す
る）で表わされる化合物。２次式で表わされる化合物にジ低級アルキルアミンを作
用させることを特徴とする、一般式（式中R¹はメトキシ基又はジ低級アルキルア
ミノ基、R²はジ低級アルキルアミノ基を意味す
る）で表わされる化合物の製法。３一般式（式中R¹はメトキシ基又はジ低級アルキルア
ミノ基、R²はジ低級アルキルアミノ基を意味す
る）で表わされる化合物を有効成分とする抗腫瘍
剤。