JPH07316182A - ヌクレオチド化合物及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】式（Ｉ）のヌクレオチド化合物及び薬学的に許
容されるその塩、ならびに当該化合物又は薬学的に許容
されるその塩を含有する薬剤学的組成物。 （Ｒ¹は炭素数６〜２２の飽和又は不飽和アルキル基、
Ｒ²は炭素数１２〜２０の飽和又は不飽和アルキル基、
Ｒ³及びＲ⁴は水素またはヒドロキシ基、Ｂは式（ａ）の
塩基であり、 Ｒ⁵は水素、ハロゲン、またはヒドロキシ、アミノ、メ
ルカプト、炭素数１〜４のアルキルアミノ基、Ｒ⁶は水
素、ハロゲンまたはアミノ基、Ｗは窒素またはＣ−Ｒ⁸
で、Ｒ⁸は水素、ハロゲン或いはアミノ、炭素数１〜４
のアルキルである。） 【効果】この化合物は、代謝による不活性化が少なく、
有利な膜透過特性を有するので優れた抗ビールス効果を
示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、抗ビールス性薬剤とし
て有効な次の一般式（Ｉ）の新規なるヌクレオチド化合
物、または薬学的に許容されるその塩及び、これら化合
物を製造する方法に関する。

【０００２】

【化３】 （上記式で、Ｒ¹は炭素数が６〜２２個である飽和又は
不飽和アルキル基であり、Ｒ²は炭素数が１２〜２０個
である飽和又は不飽和アルキル基を示し、Ｒ³及びＲ⁴は
水素原子またはヒドロキシ基であり、Ｂは下記一般式
（ａ）で示される塩基中の一つであり、

【化４】 ここで、Ｒ⁵は水素原子、ハロゲン原子またはヒドロキ
シ、アミノ、メルカプト、炭素数が１〜４個であるアル
キルアミノ基であり、Ｒ⁶は水素原子、ハロゲン原子ま
たはアミノ基であり、Ｗは窒素原子またはＣ−Ｒ⁸であ
り、ここでＲ⁸は水素原子、ハロゲン原子或いはアミ
ノ、炭素数が１〜４個であるアルキル基である。） 上記一般式（Ｉ）中、燐脂質部分はＤ，ＬそしてＤＬ型
の光学異性質体であることができる。本発明において、
一般式（Ｉ）で示される新規なる化合物は、１−Ｓ−ア
ルキル燐脂質とヌクレオシドとの複合体である。

【０００３】

【従来の技術】ヌクレオチドと燐脂質間の複合体を合成
することにより、標的となるビールス感染細胞或いは癌
細胞内へ、ヌクレオシド送達の効率を高め、薬理効果を
強化しようとする試み等は従来にもあった。

【０００４】例えば、ヌクレオシド−５’−モノフォス
フォモルホリデイトと、１−２−ジアシルグリセロ−３
−フォスフェイトが反応して生成されるジアシルグリセ
ロ−ヌクレオシド複合体が発表されたことがある［Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ ２５，１３２２（１９８２），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃ
ａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒ
ｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｏｎ ８５，７１５（１９
７８）及びＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙ
ｓｉｃａ Ａｃｔａ ６９，６０４（１９８０）］。
又、本出願人の研究所においては、燐脂質中でそれ自体
が抗癌及び免疫調節作用を有していて、ヌクレオチドと
複合体を形成する場合、優秀な相乗的或いは相加的効果
を期待し得る物質に関し研究調査した結果、１−０−ア
ルキル燐脂質が其れに適する化合物であることを見い出
し、これから新規なる１−０−アルキル−２−０−アシ
ルグリセロ−３−フォスフェイトとヌクレオシドとの複
合体を合成して、既に特許を受けたことがある（大韓民
国特許第２５６３４号；公告第８８−９３号）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかし一方、このよう
な既存の薬物について特定群の患者の副作用の発現可能
性を排除し得なく、又適用疾病の特性上、複合処方が普
遍的であるので、それに対する代替薬品の開発が求めら
れ、本発明者らはそのような目的の下で、特に抗ビール
スの効果が優れた物質開発に焦点を合わせ研究を続けた
結果、新たな１−Ｓ−アルキル燐脂質−ヌクレオチド複
合体を合成し、本発明を完成することに至った。

【０００６】従って、本発明の目的は、特有で有益な物
理化学的性質を有する抗ビールス剤を開発することにあ
り、この如き目的は、上記一般式（Ｉ）の１−Ｓ−アル
キル燐脂質とヌクレオシドとの複合体を提供することに
よって達成される。

【０００７】

【課題を解決するための手段】以下、本発明をさらに詳
しく説明する。

【０００８】本発明による一般式（Ｉ）の化合物は、次
の反応図式で示される如く二つの方法によって製造でき
る。

【０００９】第１方法によると（反応図式１）、ヌクレ
オチド（II）をモルホリデイト（III）又はＰ¹−ヌクレ
オチド−５’−Ｐ²−ジフェニルピロフォスフェイト（I
V）で作製し、１−Ｓ−アルキル−２−０−アシル−１
−チオグリセリン−３−フォスフェイト（Ｖ）と反応さ
せることにより、一般式（Ｉ）の複合体が製造される。
第２方法によると（反応図式２）、燐脂質（V）をその
モルホリデイト（VI）又は、Ｐ¹−グリセリン−５’−
Ｐ²−ジフェニルピロフォスフェイト（VII）に作製し、
ヌクレオチド（II）と反応させることにより一般式
（Ｉ）の複合体が製造される。

【００１０】次の反応図式中のＲ¹，Ｒ²，Ｒ³，Ｒ⁴及び
Ｂは、前で定義した如きであり、ＤＣＣ，ＴＢＤＭＳＣ
及びＴＢＡＦは、各々Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカー
ボマイド、３次−ブチルジメチルシリルクロライド及び
４次−ブチルアンモニウムクロライドの略字である。

【００１１】

【化５】

【化６】 以上のような方法で製造し得る本発明によるヌクレオシ
ド化合物を生体に投与すると、感染された細胞内でこの
化合物が酵素によって分解され、そこから主な活性部分
であるヌクレオチド、またはヌクレオシドが放出されて
抗ビールス効果を示す。ヌクレオチドが放出される場
合、ヌクレオチドキナーゼが欠けた耐性細胞においても
効果が示される。ヌクレオチドの他に燐脂質自体度、血
小板凝集、過敏症、炎症に関与するばかりでなく、各種
循環器の障害及びアレルギー性疾患の予防剤ないし治療
剤として使用され、抗神生物剤として重要な役割を果た
すと広く知られているので、全体的に見るとき、ヌクレ
オチドの効力と合わせ相加ないし相乗効果を期待し得
る。

【００１２】本発明による一般式（Ｉ）の化合物が、元
の複合体形態で残っている間には、該塩基部分の−ＮＨ
₂基がジアミナーゼにより除去されるのが防止されるの
で、単純なヌクレオチドの場合よりももっと多量のヌク
レオチド（複合体形態）が活性を保持しつつ形で標的細
胞に到達できる。複合体中、燐脂質部分によりリポゾー
ムが形成されることができるので、このような効果はさ
らに強化できる。

【００１３】また、本発明による化合物は、ヌクレオチ
ドが燐脂質に結合されている構造であるので、脂肪親和
性が増加され膜透過において有利な特性を持つようにな
り、燐脂質を認識する結合部位が細胞に存在すれば、細
胞特異的化合物としての付加的効果も示すことができ
る。

【００１４】一般式（Ｉ）の化合物を塩とすると、水に
対する溶解度が増加して注射剤のような液状製剤として
製造することが容易になる。

【００１５】本発明の化合物及びこれら塩は、薬学的に
許容される有機または無機担体と共に薬学的製剤形態で
製剤化され使用できる。製剤の類型は、通常の薬学的製
剤の形態即ち、注射剤、乳化剤、懸濁剤、カプセル剤、
顆粒剤、粉末剤、錠剤及び丸剤等となる。同製剤は通常
の賦形剤、分散剤、安定剤、保存剤、湿潤剤または乳化
剤のような補助剤、着色剤、緩衝剤、充填剤等を包含で
きる。

【００１６】本発明による１−Ｓ−アルキル燐脂質とヌ
クレオシドの複合体及びその塩は、代謝による不活性化
が少なく、有利な膜透過特性を有するので、単純なヌク
レオシド化合物に比べ、顕著に優れた抗ビールス効果を
示す。

【００１７】

【実施例】本発明を次の実施例によりさらに詳しく説明
する。しかし、これら実施例は本発明の理解をもっと容
易にするために提供されるもので、本発明がこれら実施
例に限られるのではない。

【００１８】

【実施例１】 ラセミ（以下、‘ｒａｃ’）−１−Ｓ−オクタデシル−
１−チオグリセリンの製造 ３−メルカプト−１，２−プロパンジオール１３．６３
ｇ（１２６ｍＭ）をメタノール７０ｍｌに溶解させ、こ
こに核酸１４０ｍｌに溶かしたスチリルブロマイド２
７．６７ｇ（８３ｍＭ）を加えた後、撹拌しながら１Ｎ
ＫＯＨ−ＣＨ₃ＯＨ２１６ｍｌを室温で１時間滴下
し、さらに２４時間撹拌した。１０℃まで冷却させて２
時間撹拌した後、減圧濾過しメタノールと水で洗浄して
の目的物２７ｇを得た（収率：９０％；融点：７５〜７
７℃）。この物質を分析した結果、次の如きであった。

【００１９】¹Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃） δ ０．８０−０．９５（３Ｈ，ｔ，ＣＨ₃），１．０
５−１．９５（３２Ｈ，ｍ，１６ＣＨ₂），２．４５−
２．８５（４Ｈ，ｍ，ＣＨ₂ＳＣＨ₂），３．４２−３．
９０（３Ｈ，ｍ，２−ＣＨ，３−ＣＨ₂）

【００２０】

【実施例２】 ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−３−０−（３次−ブチ
ルジメチルシリル）−１−チオグリセリンの製造 実施例（１）の収得物１８ｇ（５０ｍＭ）と３次−ブチ
ルジメチルシリルクロライド９．０４ｇ（６０ｍＭ）及
びイミダゾール８．１７ｇ（１２０ｍＭ）を、Ｎ，Ｎ−
ジメチルホルムアミド１００ｍｌに加えた後、室温で２
８時間撹拌した。４０℃で減圧濃縮して溶媒を除去し、
残留物にエテル１００ｍｌと水１００ｍｌを加え、層分
離した後、有機層を硫酸ナトリウムにて乾燥し続いて濾
過、減圧濃縮してオイル状態の目的物２２．２８ｇを得
た。

【００２１】

【実施例３】 ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０−パルミトイル
−３−０−（３次−ブチルジメチルシリル）−１−チオ
グリセリンの製造 実施例（２）の収得物２１ｇ（４４．２ｍＭ）とピリジ
ン４．６５ｇ（５８．８ｍＭ）を、トルエン１１２ｍｌ
に加え得られた混合物に、パルミトイルクロライド１
４．５９ｇ（５３．１ｍＭ）を室温で１時間滴下した
後、室温で２０時間撹拌した。反応混合物にエテル５６
ｍｌと水５６ｍｌを加え、層分離して有機層を硫酸０．
５Ｎ ２８ｍｌ、重炭酸ナトリウム２８ｍｌ飽和溶液、
水２８ｍｌの手順で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥
し、続いて減圧濃縮して目的物３０．２８ｇを得た（収
率：９６％）。この物質を分析した結果、次の如きであ
った。¹ Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃） δ ０．１０（６Ｈ，ｓ，（ＣＨ₃）₂Ｓｉ），０．７０
−１．００（１５Ｈ，ｍ，２ＣＨ₃，（ＣＨ₃）₃Ｃ），
１．１０−１．９０（５８Ｈ，ｍ，２９ＣＨ₂），２．
２２−２．８０（６Ｈ，ｍ，ＣＨ₂ＳＣＨ₂，ＣＨ₂Ｃ
Ｏ），３．７６−３．９４（２Ｈ，ｄ，３−ＣＨ₂），
４．９０−５．１０（１Ｈ，ｑ，２−ＣＨ）

【００２２】

【実施例４】 ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０−パルミトイル
−１−チオグリセリンの製造 実施例（３）の収得物２８ｇ（３９．３ｍＭ）と酢酸
５．６７ｍｌ、テトラハイドロフラン８４ｍｌの混合物
を１０分間撹拌した後、１５〜１８℃で１Ｍテトラブチ
リルアンモニウムフルオライド−テトラハイドロフラン
５８．９ｍｌを１時間滴下した後、室温で２０時間撹拌
した。撹拌した混合物を３０℃で減圧濃縮し溶媒を除去
した後、残留物をアセトニトリル７０ｍｌと９５％エタ
ノール７０ｍｌを加え、４０℃に加温した後、さらに室
温で徐冷し続いて０℃に冷却した。冷却物を２時間撹拌
した後、減圧濾過して白色沈澱物を得た。乾燥された白
色沈澱物を９５％エタノール７００ｍｌに加え、５分間
加熱、還流させ続いて一晩撹拌して室温まで徐冷させた
後、２０℃でさらに５時間撹拌した後、減圧濾過した。
濾液を取って溶媒の半ば程除去されるまで減圧濃縮した
後、０℃に冷却し３時間撹拌した後、減圧濾過して１
２．４６ｇの目的物を得た（収率：５３％；融点：４２
〜４５℃）。この物質を分析した結果、次の如きであっ
た。

【００２３】¹Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃） δ ０．８０−０．９５（６Ｈ，ｔ，２ＣＨ₃），１．
１０−１．９０（５８Ｈ，ｍ，２９ＣＨ₂），２．２６
−２．４４（２Ｈ，ｔ，ＣＨ₂ＣＯ），２．５０−２．
６４（２Ｈ，ｔ，ＳＣＨ₂），２．６８−２．８２（２
Ｈ，ｄ，１−ＣＨ₂），３．７６−３．９４（２Ｈ，
ｄ，３−ＣＨ₂），４．９０−５．１０（１Ｈ，ｑ，２
−ＣＨ）

【００２４】

【実施例５】 ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０−パルミトイル
−１−チオグリセリン−３−フォスフェイトの製造 フォスフォリルクロライド３．９７ｇ（２５．９ｍＭ）
を、核酸９．６ｍｌに加え得られた混合物を０℃に冷却
した。ここに核酸９．６ｍｌに溶かしたトリエチルアミ
ンを２０分間滴下し、０℃で２０分間撹拌した後、トル
エン９６ｍｌに溶かした実施例（４）の収得物１０．６
８ｍｇ（１７．８ｍＭ）を０〜５℃で１時間滴下した
後、２０〜２５℃でさらに５時間撹拌した。その結果の
反応混合物に水９．６ｍｌを加え１時間撹拌した後、エ
テル１９２ｍｌと水４８ｍｌを加えて層分離し、有機層
を硫酸ナトリウムで乾燥した後、３０℃で減圧濃縮し溶
媒を除去した。得られた残留物にアセトン１９２ｍｌを
加え、室温で３０分、０℃で２時間撹拌した後、減圧濾
過して目的物７．３８ｇを得た（収率：６１％；融点：
６４〜６６℃）この物質を分析した結果は、次の如きで
あった。

【００２５】¹Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃） δ ０．８０−０．９５（６Ｈ，ｔ，２ＣＨ₃），１．
１０−１．９０（５８Ｈ，ｍ，２９ＣＨ₂），２．２６
−２．４４（２Ｈ，ｔ，ＣＨ₂ＣＯ），２．５０−２．
６４（２Ｈ，ｔ，ＳＣＨ₂），２．６８−２．８２（２
Ｈ，ｄ，１−ＣＨ₂），４．０４−４．５５（２Ｈ，
ｍ，３−ＣＨ₂），５．０４−５．２２（１Ｈ，ｍ，２
−ＣＨ）

【００２６】

【実施例６】 ｒａｃ−１−Ｓ−ヘキサデシル−２−０−パルミトイル
−１−チオグリセリン−３−フォスフェイトの製造 スチリルブロマイドに代わりセチルブロマイドを使用
し、実施例（１）から実施例（５）までの工程と同一の
方法で製造した結果、目的物を５６％の収率にて得た
（融点：６８〜７１℃）。この物質を分析した結果、次
の如きであった。

【００２７】¹Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃） δ ０．８０−０．９５（６Ｈ，ｔ，２ＣＨ₃），１．
１０−１．９０（５４Ｈ，ｍ，２７ＣＨ₂），２．２６
−２．４４（２Ｈ，ｔ，ＣＨ₂ＣＯ），２．５０−２．
６４（２Ｈ，ｔ，ＳＣＨ₂），２．６８−２．８２（２
Ｈ，ｄ，１−ＣＨ₂），４．０４−４．５５（２Ｈ，
ｍ，３−ＣＨ₂），５．０４−５．２２（１Ｈ，ｍ，２
−ＣＨ）

【００２８】

【実施例７】 ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン−５’−モノ
フォスフェイト＜ａｒａ−ＡＭＰ＞の製造 ５０ｍｌアセトニトリルに、フォスフォリルクロライド
１６ｍｌ（１７２ｍＭ）とピリジン１５．６ｍｌ（１９
３ｍＭ）を加え、得られた混合物を０℃に冷却した。こ
こに水２ｍｌを滴下し０℃で４０分間撹拌した後、さら
にビダラビン（以下、’ａｒａ−Ａ’）１０．６８ｇ
（４０ｍＭ）を加え、０〜５℃で６時間撹拌した。その
結果、得られた反応液を氷水９００ｍｌに加えた後、濃
アンモニア水で全体溶液のｐＨを７．０に調節した。溶
液を減圧濃縮して得られた残留物を水９００ｍｌに入れ
溶解した後、ＡＧ１−Ｘ８（フォメイト）カラム（５×
５０ｃｍ）に吸着させ、水２，０００ｍｌとホルム酸
０．５Ｎ ５，０００ｍｌに溶理させ分液し、初めの１
〜３，０００ｍｌのホルム酸分液を集めた。集められた
分液を３０℃以下で白色結晶が析出されるまで減圧濃縮
させ０℃に冷却し、さらに２時間撹拌した後、減圧濾過
しアセトンで洗浄した結果、目的物１２．２２ｇを得た
（収率：８８％；融点：１８７〜１８９℃）。

【００２９】

【実施例８】 ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン−５’−ジフ
ォスフェイト−ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０
−パルミトイル−１−チオグリセリン＜ａｒａ−ＡＤＰ
−ＤＬ−ＰＴＢＡ＞の製造 水７０ｍｌと３次−ブタノール７０ｍｌにモルホリン
２．０９ｍｌ（２４ｍＭ）と、上記実施例（７）の収得
物であるａｒａ−ＡＭＰ ２．０８ｇ（６ｍＭ）を加
え、５５〜５５℃に加温した後、３次−ブタノール１０
０ｍｌに溶かしたＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド４．９５ｇ（２４ｍＭ）を滴下した。その結果、
生成された混合物を８時間還流させた後、室温で一晩撹
拌して沈澱物を濾過し除去した後、濾液を減圧濃縮して
５０ｍｌ残るようにした。濃縮された懸濁液をエテル１
５０ｍｌで２回抽出した後、水層を取って減圧濃縮し
た。その結果、残留物にエテルを加え一晩撹拌した後、
減圧濾過し乾燥させた結果、３．９５ｇの９−β−Ｄ−
アラビノフラノシルアデニン−５’−モノフォスフォロ
モルホリデイト−４−フォルポリン−Ｎ，Ｎ’−ジシク
ロヘキシルカルボキシアミジニウム塩を得た（収率：９
３％）。

【００３０】この化合物をピリジン２．７８ｇ（３．９
ｍＭ）で共沸蒸発し、乾燥させた実施例（５）の収得物
であるｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０−パルミ
トイル−１−チオグリセリン−３−フォスフェイト２．
６７ｇ（３．９ｍＭ）を無水ピリジン２５０ｍｌに溶解
させた後、６日間室温で撹拌し反応させた。反応計を減
圧濃縮してピリジンを１次除去した後、残りの微量のピ
リジンはトルエンと共沸させ除去した。氷酢酸３０ｍｌ
とクロロホルム−メタノール−水（２：３：１）の３０
０ｍｌ混合溶媒に、その結果の残留物を入れ溶解させて
室温で２時間撹拌した後、さらにクロロホルム５００ｍ
ｌを加えた。有機溶媒層を分離して減圧濃縮させ、ここ
から微量の氷酢酸を除去するためにトルエン１５ｍｌと
４回共沸蒸発させた。残留物をクロロホルム−メタノー
ル−水（２：３：１）２００ｍｌに溶解させた後、ＤＥ
−５２（アセテイト）セルロ−スカラム（５×６０ｃ
ｍ）に吸着させ、続いて０〜０．１５Ｍ ＮＨ₄ＯＡ_c線
形勾配を含む溶媒クロロホルム−メタノール−水（２：
３：１）５，０００ｍｌに溶理させ分液した。１，８０
０ｍｌ〜２，９００ｍｌの分液を集め白色結晶が析出さ
れるまで減圧濃縮させた後、０℃に冷却し３時間撹拌し
た後、減圧濾過して水洗した。結晶をナトリウム塩に転
換させるために、クロロホルム−メタノール−水（２：
３：１）の混合溶媒に溶かした後、アンバーライトＣＧ
−５０（Ｎａ⁺）カラム（５×６０ｃｍ）を通過させ、
溶理液を集めて減圧濃縮した。その残留物をアセトンと
クロロホルムに結晶化して濾過し、５酸化燐（Ｐ₂Ｏ₅）
の存在下で真空乾燥した結果、１．７２ｇの目的物を得
た（収率：４２％；融点：１９７〜２００℃）。この物
質を分析した結果、次の如きであった。

【００３１】 ¹Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃−
ＣＤ₃ＯＤ−Ｄ₂Ｏ＝２：３：１） δ ０．８０−０．９５（６Ｈ，ｔ，２ＣＨ₃），１．
１０−１．９０（５８Ｈ，ｍ，２９ＣＨ₂），２．２５
−２．４５（２Ｈ，ｔ，ＣＨ₂ＣＯ），２．５０−２．
６４（２Ｈ，ｔ，ＳＣＨ₂），２．７５−２．９０（２
Ｈ，ｄ，１−ＣＨ₂），４．０２−４．６５（７Ｈ，
ｍ，３−ＣＨ₂，Ｈ−２’，Ｈ−３’，Ｈ−４’，Ｈ−
５’），５．０７−５．１５（１Ｈ，ｍ，２−ＣＨ），
６．３５−６．４５（１Ｈ，Ｄ，Ｈ−１’），８．２０
（１Ｈ，ｓ，アデニン Ｈ−２），８．５０（１Ｈ，
ｓ，アデニン Ｈ−８）元素分析：Ｃ₄₇Ｈ₈₅Ｎ₅Ｏ₁₂Ｐ₂ＳＮ_A2 Ｃ Ｈ Ｎ Ｓ 理論値 ５３．６５ ８．１４ ６．６５ ３．０５ 実験値 ５２．８２ ９．０５ ６．４８ ２．８６

【００３２】

【実施例９】 ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン−５’−ジフ
ォスフェイト−ｒａｃ−１−Ｓ−ヘキサデシル−２−０
−パルミトイル−１−チオグリセリン＜ａｒａ−ＡＤＰ
−ＤＬ−ＰＴＣＡ＞の製造 ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０−パルミトイル
−１−チオグリセリン−３−フォスフェイトに代わりｒ
ａｃ−１−Ｓ−ヘキサデシル−２−０−パルミトイル−
１−チオグリセリン−３−フォスフェイトを使用し、実
施例（８）と同一の方法で製造した結果、４８％の収率
で目的物を得た（融点：２０１〜２０６℃）。この物質
を分析した結果は、次の如きであった。

【００３３】 ¹Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃−
ＣＤ₃ＯＤ−Ｄ₂Ｏ＝２：３：１） δ ０．８０−０．９５（６Ｈ，ｔ，２ＣＨ₃），１．
１０−１．９０（５４Ｈ，ｍ，２７ＣＨ₂），２．２５
−２．４５（２Ｈ，ｔ，ＣＨ₂ＣＯ），２．５０−２．
６０（２Ｈ，ｔ，ＳＣＨ₂），２．７５−２．９０（２
Ｈ，ｄ，１−ＣＨ₂），４．０２−４．６５（７Ｈ，
ｍ，３−ＣＨ₂，Ｈ−２’，Ｈ−３’，Ｈ−４’，Ｈ−
５’），５．０７−５．１５（１Ｈ，ｍ，２−ＣＨ），
６．３５−６．４５（１Ｈ，Ｄ，Ｈ−１’），８．２０
（１Ｈ，ｓ，アデニン Ｈ−２），８．５０（１Ｈ，
ｓ，アデニン Ｈ−８）元素分析：Ｃ₄₅Ｈ₈₁Ｎ₅Ｏ₁₂Ｐ₂ＳＮ_A2 Ｃ Ｈ Ｎ Ｓ 理論値 ５２．７７ ７．９７ ６．８４ ３．１３ 実験値 ５２．６４ ８．１３ ６．５７ ２．９２

【００３４】

【実施例１０】 ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン−５’−ジフ
ォスフェイト−ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０
−パルミトイル−１−チオグリセリン＜ａｒａ−ＡＤＰ
−ＤＬ−ＰＴＢＡ＞の製造 ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−２−０−パルミトイル
−１−チオグリセリン−３−フォスフェイト４．０７ｇ
（６ｍＭ）と、モルホリン２．４４ｍｌ（２８ｍＭ）及
び３次−ブタノール７０ｍｌの還流混合液に、Ｎ，Ｎ’
−ジシクロヘキシルカルボジイミド５．７７ｇ（２８ｍ
Ｍ）を３次−ブタノール１００ｍｌに溶かした溶液を滴
下し、還流条件下で５時間反応させた。反応液を室温で
一晩撹拌した後、水３０ｍｌを加えさらに３時間撹拌し
て多量のＤＣＣを分解させた。白色結晶を濾過除去して
濾過液を減圧濃縮した後、エテルで抽出した。この抽出
液を減圧濃縮してその残留物をトルエンで３回共沸蒸留
して乾燥させた。続いてａｒａ−ＡＭＰ ２．７１ｇ
（７．８ｍＭ）とトリオクチルアミン６．８２ｍｌ（１
５．６ｍＭ）を加え、ピリジンで４回共沸蒸留し乾燥さ
せた後、ピリジン３００ｍｌに溶解させ室温で８日間撹
拌反応させた。減圧濃縮してピリジンを除去し、残存す
る微量のピリジンはトルエンで３回共沸蒸留して除去し
た。残留物を氷酢酸４５ｍｌとクロロホルム−メタノー
ル−水（２：３：１）の４５１ｍｌ混合溶媒に溶解さ
せ、室温で１時間撹拌した後、クロロホルム７５０ｍｌ
を加えた。

【００３５】有機溶媒層を分離し減圧濃縮させ、そこか
ら微量のの氷酢酸を除去するためにトルエン１５ｍｌと
４回共沸蒸留した。残留物をクロロホルム−メタノール
−水（２：３：１）の混合溶媒２００ｍｌに溶かし、Ｄ
Ｅ−５２（アセテイト）セルロースカラム（３×６０ｃ
ｍ）に吸着させた後、０〜０．１５Ｍ ＮＨ₄ＯＡ_C線形
勾配を含むクロロホルム−メタノール−水（２：３：
１）の混合溶媒を使用して、実施例（８）と同一の方法
で溶理分液し分離した結果、２．１５ｇの目的物を得た
（収率：３４％）。これの分析データは、上記実施例
（８）と同一である。

【００３６】

【実施例１１】 ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン−５’−ジフ
ォスフェイト−ｒａｃ−１−Ｓ−ヘキサデシル−２−０
−パルミトイル−１−チオグリセリン＜ａｒａ−ＡＤＰ
−ＤＬ−ＰＴＢＡ＞の製造 ａｒａ−ＡＭＰ １．７４ｇ（５ｍＭ）とトリオクチル
アミン２．１９ｍｌをメタノール５０ｍｌに加え加温し
て溶かした後、減圧濃縮して溶媒を除去した。微量の水
分を除去するために、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド
に、その結果の残留物を溶かした後、減圧濃縮した。乾
燥されたａｒａ−ＡＭＰ−トリ−０−オクチルアンモニ
ウム塩を、ジオクシン６０ｍｌとＮ，Ｎ’−ジメチルホ
ルムアミド３０ｍｌに溶かした後、ジフェニルクロロホ
ルムフォスフェイト１．５ｍｌ（７．２ｍＭ）と、トリ
ブチルアミン２．２５ｍｌ（９．４ｍＭ）を加え、室温
で６時間反応させた後、減圧濃縮した。残留物であるＰ
¹−（９−β−Ｄ−アラノビルフラノシル−５’−イー
ル）−Ｐ²−ジフェニルピロフォスフェイトジオクサン
１２ｍｌを加えた後、減圧濃縮し水分を除去して、さら
にジオクサン６ｍｌに溶解させた。この溶液とピリジン
１０ｍｌに溶解させたｒａｃ−１−Ｓ−ヘキサデシル−
２−０−パルミトイル−１−チオグリセリン−３−フォ
スフェイト２．７１ｇ（４．２ｍＭ）を混合して、室温
で５日間反応させた後、減圧濃縮し溶媒を除去した。こ
れをクロロホルム−メタノール−水（２：３：１）６０
０ｍｌに溶解させ、ＤＥ−５２（アセテイト）セルロー
スカラム（３．５×６０ｃｍ）に吸着させた後、実施例
（８）と同一の方法で溶理分液した結果、１．５３ｇの
目的物を得た（収率：３６％）。これの分析データは、
上記実施例（９）と同一である。

【００３７】活性試験 本発明による１−Ｓ−アルキル燐脂質とヌクレオチドと
の複合体を、実際の生体に投与する時、どんな抗ビール
ス効果を示すかを調べるために、第１形の単純泡疹ビー
ルス（ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｍｓ ｔｙ
ｐｅ−１）に感染されたマウスに、同物質を投与した
後、日程期間投与群における体重増減及び生存率を観察
した。

【００３８】ＢＡＬＢ／Ｃマウス（♀，４週）の腹腔
に、第１形単純泡疹ビールス、ミヤマ菌株を２，０００
ＰＦＵ／マウスの容量で投与して同マウスを感染させ
た。感染されたマウスに、感染直後から４日間試験薬物
を投与しつつ、２週間各投与群及び対照群における体重
増減及び生存率を観察した。投与経路としては静脈（尾
静脈）及び経口投与の経路を選択し、各々の場合、試験
薬物は次の如く製造した。

【００３９】○ 静脈内投与：電子天秤で精密に秤量し
た試験薬物を生理食塩水に懸濁した後、２０分間超音波
に露出させ（Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ）、完全
に溶解させた。この溶液を０．２２ ｍＭＥＭＢフィル
タを利用し濾過感菌した後、使用した。薬物の投与量
は、１０ｍｇ／ｋｇと５０ｍｇ／ｋｇになるようにし
た。コントロール群には生理食塩水を投与した。

【００４０】○ 経口投与：電子天秤で精密に秤量した
試験薬物を、０．５％のカルボキシメチルセルロース
（以下、‘ＣＭＣ’）溶液に加え懸濁化した。投与量
は、５０ｍｇ／ｋｇと２５０ｍｇ／ｋｇを使用し、コン
トロール群には０．５％ ＣＭＣを投与した。

【００４１】図１及び図２は、ビールス感染後の生存率
を示すグラフであり（縦軸は生存率、横軸はビールス感
染日からの日数）、図３及び図４は、感染に伴う体重の
変化を示すグラフである（縦軸は体重の変化、横軸はビ
ールス感染日からの日数）。

【００４２】先ず、体重変化に関する結果を調べると、
静脈内投与の時、生理食塩水を投与したコントロール群
は、５日目以降激しい体重減少を示され、６日目は全滅
された。ａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ投与群も感染
後５日目から体重が減少したとしても、その減少傾向は
生理食塩水投与群に比べ緩やかなものであり、特に５０
ｍｇ／ｋｇ投与群において著しく緩慢であった（図
３）。５０ｍｇ／ｋｇ投与群においては、死亡個体の出
現率も緩やかであった（図１）。経口投与の時、０．５
％ＣＭＣ投与群は、５日目から激しい体重減示され、１
２日目には全滅された。ａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢ
Ａ投与群も、感染後５日目から体重減少が見られたが、
ａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ ２５０ｍｇ／ｋｇ投
与群は、０．５％ ＣＭＣ投与群に比べ、緩やかな体重
変化を見せた。ａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ ５０
ｍｇ／ｋｇ投与群の体重減少は、通計誤差に勘案されて
見るとき、０．５％ ＣＭＣの投与群とほとんど類似で
あった。陽性対照薬物であるａｒａ−Ａ投与群における
体重減少が、ａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ投与群や
０．５％ ＣＭＣ投与群の場合に比べ、さらに緩やかに
示された。

【００４３】生存率に関する結果において、生理食塩水
投与群よりはａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ ５０ｍ
ｇ／ｋｇ静脈内投与群において、０．５％ ＣＭＣ投与
群よりａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ ２５０ｍｇ／
ｋｇ経口投与群において、死亡個体の出現が緩やかであ
ることを見せる（図１及び図２）。これと関連し、薬剤
投与群と各々の対照群の間に、生存期間の長さを全期間
を通じて比較するために、通計処理プログラムを利用
し、Ｌｏｇ−Ｒａｎｋ検定を実施してその結果を次の表
１に示した。

【００４４】表１．通計プログラム ＳＡＳ（Ｓｔａ
ｔｉｓｔｉｃａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍ）
を利用した薬物投与群と各々のコントロール群との間の
生存期間検定、Ｌｏｇ−Ｒａｎｋ検定。

【００４５】

【表１】 その結果を見ると、静脈投与の時、ａｒａ−ＡＤＰ−Ｄ
Ｌ−ＰＴＢＡの１０ｍｇ／ｋｇ投与群と５０ｍｇ／ｋｇ
投与群の両方ですべて危険率５％以下の有意性のある生
存期間の延長があることがわかる。これによりａｒａ−
ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡは、静脈注射により第１形の単
純泡疹ビールス感染に効果を発揮し得る抗ビールス薬物
であることを確認できる。

【００４６】経口投与の陽性対照薬物として使用したａ
ｒａ−Ａは、危険率５％以下で有意性の有る生存期間の
延長を見せているのに対し、ａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−Ｐ
ＴＢＡの経口投与群は、生存期間の延長の傾向だけを見
せているものの、危険率５％以下の有意性を見せなかっ
た。経口投与時には、消化管における分解及び不活性
化、肝代謝等の影響でａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ
のＢＡ（Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）が低いため
であると解釈され、これは投与量の調節及び剤形の改善
で克服できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】第１形の単純泡疹ビールスで感染させた後、本
発明によるａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡを静脈投与
した場合、時日経過によるマウスの生存率を示したグラ
フ。

【図２】第１形の単純泡疹ビールスで感染させた後、本
発明によるａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡを経口投与
した場合、時日経過によるマウスの生存率を示したグラ
フ。

【図３】第１形の単純泡疹ビールスで感染させた後、本
発明によるａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡを静脈投与
した場合、時日経過によるマウスの体重変化を示したグ
ラフ。

【図４】第１形の単純泡疹ビールスで感染させた後、本
発明によるａｒａ−ＡＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡを経口投与
した場合、時日経過によるマウスの体重変化を示したグ
ラフ。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｈ 19/20 (72)発明者 ジェイ・シューン・リー 大韓民国ソウル，ヤンダンポー−ク，シン ギル−１−ドン，120−７ (72)発明者 ヒー・サン・チャイ 大韓民国キョンキ−ド，クンポ，ダン・ド ン 790−25

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記一般式（Ｉ）で示されるヌクレオチ
   ド化合物または薬学的に許容されるその塩。 【化１】 （上記式で、Ｒ¹は炭素数が６〜２２個である飽和又は
   不飽和アルキル基であり、Ｒ²は炭素数が１２〜２０個
   である飽和又は不飽和アルキル基を示し、Ｒ³及びＲ⁴は
   水素原子またはヒドロキシ基であり、Ｂは下記一般式
   （ａ）で示される塩基中の一つであり、 【化２】 ここで、Ｒ⁵は水素原子、ハロゲン原子またはヒドロキ
   シ、アミノ、メルカプト、炭素数が１〜４個であるアル
   キルアミノ基であり、Ｒ⁶は水素原子、ハロゲン原子ま
   たはアミノ基であり、Ｗは窒素原子またはＣ−Ｒ⁸であ
   り、ここでＲ⁸は水素原子、ハロゲン原子またはアミ
   ノ、炭素数が１〜４個であるアルキル基である。）
2. 【請求項２】 請求項１において、Ｒ¹は炭素数が１２
   〜２０個である飽和または不飽和アルキル基であること
   を特徴とする一般式（Ｉ）の化合物、又は薬学的に許容
   されるその塩。
3. 【請求項３】 請求項１または請求項２のいずれか１項
   において、一般式（Ｉ）の化合物の塩が、ナトリウムで
   あることを特徴とする化合物。
4. 【請求項４】 請求項１において、一般式（Ｉ）の化合
   物が、９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニン−５’
   −ジフォスフェイト−ｒａｃ−１−Ｓ−オクタデシル−
   ２−０−パルミトイル−１−チオグリセリン、９−β−
   アラビノフラノシルアデニン−５’−ジフォスフェイト
   −ｒａｃ−１−Ｓ−ヘキサデシル−２−０−パルミトイ
   ル−１−チオグリセリン、９−β−Ｄ−アラビノフラノ
   シルアデニン−５’−ジォスフェイト−ｒａｃ−１−Ｓ
   −テトラデシル−２−０−パルミトイル−１−チオグリ
   セリン、または薬学的に許容されるこれらの塩であるこ
   とを特徴とする化合物。
5. 【請求項５】 請求項１〜請求項４のいずれか１項によ
   る一般式（Ｉ）の化合物、又は薬学的に許容されるその
   塩が、抗ビールス剤として使用される方法。
6. 【請求項６】 請求項１〜請求項４のいずれか１項によ
   る一般式（Ｉ）の化合物と、薬学的に許容可能な担体ま
   たは賦形剤を含む薬剤学的組成物。
7. 【請求項７】 請求項６において、注射剤及びカプセル
   剤の形態に製剤化されている薬剤学的組成物。