JPH07300493A

JPH07300493A - ２′−エーテル基を有する、ヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド

Info

Publication number: JPH07300493A
Application number: JP7102074A
Authority: JP
Inventors: Pierre Dr Martin; マルタンピエール
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1994-04-27
Filing date: 1995-04-26
Publication date: 1995-11-14
Also published as: ES2203635T3; CN1115320A; AU682576B2; EP0679657B1; EP0679657A2; US5977332A; EP0679657A3; AU1765395A; CN1066456C; DE59510742D1; PT679657E; ATE244723T1; US5750673A; CY2498B1; ZA953383B; IL113482A0; KR950032263A; DK0679657T3; CA2147798A1

Abstract

(57)【要約】【構成】式（Ｉ）：【化５１】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素若
しくは保護基であるか、又はＲ₁ は、これらの意義を有
し、かつＲ₂ は、リンを含むヌクレオチド架橋基を形成
する基であり；Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又は
その類似基であり；Ｒ₃ は、ＯＨ、Ｆ又は（ＣＦ₂ ）_n
ＣＦ₃ （ここで、ｎは、０ないし７の数である）であ
る）で示される化合物、その製造方法、及びそれを含む
オリゴヌクレオチド。【効果】上記化合物は、抗ウイルス及び抗増殖性活性
を有し、従って医薬品として用いることができ、さら
に、それを含むオリゴヌクレオチドは、核酸との相互反
応のために有効な生物学的活性を有し、薬学的に活性な
成分又は診断薬として使用し得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、２′−ＯＨ基がヒドロ
キシエチル又はフルオロアルキル基によってエーテル化
されたリボヌクレオシド類似化合物、その製造法、それ
らのヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチド、及び分子
中に同一又は異なるヌクレオシド単位を有するオリゴヌ
クレオチド製造のためのそのヌクレオシドの用途に関す
る。

【０００２】ヌクレオシド類及びオリゴヌクレオチド類
は、抗ウイルス活性成分として、並びに核酸と相互反応
（「アンチセンス」オリゴヌクレオチド）する能力及び
それらと関連した生物学的活性の故の両面から、多くの
関心を惹きつけている；例えば、Uhlmann,E., Peyman,
A., Chemical Reviews 90:543-584(1990)参照。新規な
性質を有するヌクレオシドを提供し、又は「アンチセン
ス」オリゴヌクレオチドと天然の核酸との相互反応を改
善し、そしてヌクレアーゼに対する安定性を改善するた
めに、ヌクレオシド（又はオリゴヌクレオチドにおける
ヌクレオチド単位）の糖残基又はオリゴヌクレオチドの
ヌクレオチド間のリン酸結合は、多様な方法で修飾され
ている；例えば、Marquez, V.E., Lim, M.I., Medicina
l ResearchReviews 6:1-40(1986), Helene, C., Toulm
e, J.J., Biochimica et Biophysica Acta 1049:99-125
(1990), Englisch, U., Gauss, D.H., Angewandte Chem
ie 103:629-646(1991), Matteucci, M.D., Bischofberg
er, N., Annual Reports inMedicinal Chemistry 26:87
-296(1991) 参照。 Cook, P.D., Anti-Cancer DrugDesi
gn 6:585-607(1991) 及びWO 91/06556 には、糖の２′
−ＯＨ基が修飾されたヌクレオシドが記載されている。
報告された修飾によって、ヌクレアーゼ耐性が増加し
た；すなわち、アルキル基が長くなるに従いヌクレアー
ゼ耐性は高くなる。メチル、エチル又はプロピルのよう
な短いアルキル基では、結合親和性に僅かな増加が見ら
れるが、長い鎖では、結合親和性は劇的に低下する。
２′−ＯＨ基の側鎖としてヒドロキシエチル又はフルオ
ロアルキル基を有するヌクレオシドが、オリゴヌクレオ
チドに組み入れられたことは今までになかった。驚くべ
きことに、本発明の修飾は、同じ長さの非置換アルキル
鎖と比較して、相補性ＲＮＡに対する結合親和性を増加
する。この結果は、既存のデータに基づいて予測される
ものではない。２′−ＯＨが修飾されたオリゴリボヌク
レオチドに類似して、本発明の化合物は、同様に、顕著
なヌクレアーゼ耐性によって特徴付けられる。さらに、
本発明のヌクレオシドを含むオリゴヌクレオチドは、増
加した細胞性取込みを示し、その結果として生体内での
生体利用能及び活性を改善した。

【０００３】本発明は、式（Ｉ）：

【０００４】

【化１５】

【０００５】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立
して、水素又は保護基であるか、又はＲ₁ は、これらの
定義を有し、かつＲ₂ は、リンを含むヌクレオチド架橋
基を形成する基であり；Ｂは、プリン若しくはピリミジ
ン基又はその類似基であり；Ｒ₃ は、ＯＨ、Ｆ又は（Ｃ
Ｆ₂ ）_n ＣＦ₃ （ここで、ｎは、０ないし７の数であ
る）である）で示される化合物に関する。

【０００６】Ｒ₃ がＯＨである場合、この水酸基は、Ｒ
₁ 及びＲ₂ で定義した基によって保護されることができ
る。

【０００７】好適な態様において、ｎは０である。

【０００８】好適な態様において、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、水
素である。

【０００９】保護基及びそのような保護基による水酸基
の誘導体化の方法は、糖及びヌクレオチド化学において
一般に公知のものであり、例えば、Greene, B.T., Prot
ective Groups in Organic Synthesis, Wiley Intersci
ence, New York (1991), Sonoveaux, E., Bioorganic C
hemistry 14:274-325(1986) 又はBeaucage, S.L., Iye
r, R., Tetrahedron 48:2223-2311(1992)に記載されて
いる。そのような保護基は、ベンジル、メチルベンジ
ル、ジメチルベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシ
ベンジル、ブロモベンジル、２，４−ジクロロベンジ
ル；ジフェニルメチル、ジ（メチルフェニル）メチル、
ジ（ジメチルフェニル）メチル、ジ（メトキシフェニ
ル）メチル、ジ（ジメトキシフェニル）メチル、トリフ
ェニルメチル、トリス−４，４′，４″−ｔｅｒｔ−ブ
チルフェニルメチル、ジ−ｐ−アニシルフェニルメチ
ル、トリ（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフ
ェニル）メチル、メトキシフェニル（ジフェニル）メチ
ル、ジ（メトキシフェニル）フェニルメチル、トリ（メ
トキシフェニル）メチル、トリ（ジメトキシフェニル）
メチル；トリフェニルシリル、アルキルジフェニルシリ
ル、ジアルキルフェニルシリル及びアルキル基中に１な
いし２０個、好適には１ないし１２個、最も好適には１
ないし８個の炭素原子を有するトリアルキルシリル、例
えば、トリメチルシリル、トリエチルシリル、トリ−ｎ
−プロピルシリル、イソプロピルジメチルシリル、ｔｅ
ｒｔ−ブチルジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチルジフェ
ニルシリル、ｎ−オクチルジメチルシリル、（１，１，
２，２−テトラメチルエチル）ジメチルシリル；−（Ｃ
₁ −Ｃ₈ アルキル）₂ Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ（Ｃ₁ −Ｃ₈ アル
キル）₂ −（ここで、アルキルは、例えば、メチル、エ
チル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ
ブチル又はｔｅｒｔ−ブチルである）；Ｃ₂ −Ｃ₁₂−、
特にＣ₂ −Ｃ₈ アシル、例えば、アセチル、プロパノイ
ル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ベンゾ
イル、メチルベンゾイル、メトキシベンゾイル、クロロ
ベンゾイル、及びブロモベンゾイル；Ｒ_s1−ＳＯ₂ −
（ここで、Ｒ_s1は、Ｃ₁−Ｃ₁₂アルキル、特にＣ₁ −Ｃ₆
−アルキル、Ｃ₅ −又はＣ₆ −シクロアルキル、フェ
ニル、ベンジル、Ｃ₁ −Ｃ₁₂−及び特にＣ₁ −Ｃ₄ −ア
ルキルフェニル、又はＣ₁ −Ｃ₁₂−及び特にＣ₁ −Ｃ₄
−アルキルベンジル、又はハロフェニル又はハロベンジ
ルである）、例えば、メチル−、エチル−、プロピル
−、ブチル−、フェニル−、ベンジル−、ｐ−ブロモ
−、ｐ−メトキシ、ｐ−メチルフェニル−スルホニル；
非置換であるか又はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルコ
キシ、トリ（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル）シリル若しくはＣ₁
−Ｃ₄ アルキルスルホニルで置換されたＣ₁ −Ｃ₁₂−、
好適にはＣ₁ −Ｃ₈ アルコキシカルボニル、例えば、メ
トキシ−、エトキシ−、ｎ−プロポキシ−、イソプロポ
キシ−、ｎ−ブトキシ−、イソブトキシ−若しくはｔｅ
ｒｔ−ブトキシ−カルボニル、２−トリメチルシリルエ
トキシカルボニル、２−メチルスルホニルエトキシカル
ボニル、アリルオキシカルボニル、又は各々が非置換で
あるか若しくはアルコキシカルボニルについて記載した
のと同様に置換されたフェニルオキシカルボニル若しく
はベンジルオキシカルボニル、例えばメチル−若しくは
メトキシ−若しくはクロロ−フェニルオキシカルボニル
若しくは−ベンジルオキシカルボニル、及び９−フルオ
レニルメチルオキシカルボニルである。Ｒ₁ 及び／又は
Ｒ₂ がアルキルである場合、アルキルは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂ
ｒ、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルコキシ、フェニルオキシ、クロロフ
ェニルオキシ、メトキシフェニルオキシ、ベンジルオキ
シ、メトキシベンジルオキシ又はクロロフェニルオキシ
で置換されていてもよい。式（Ｉ）のＲ₁ 及びＲ₂ は、
同一又は異なる保護基であり得る。

【００１０】特に好適な態様において、保護基としての
Ｒ₁ 及びＲ₂ は、ベンジル、メチルベンジル、ジメチル
ベンジル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、ハ
ロゲン化ベンジル、特にブロモベンジル；ジフェニルメ
チル、ジ（メチルフェニル）メチル、ジ（ジメチルフェ
ニル）メチル、ジ（メトキシフェニル）メチル、ジ（メ
トキシフェニル）（フェニル）メチル、トリフェニルメ
チル、トリス−４，４′，４″−ｔｅｒｔ−ブチルフェ
ニルメチル、ジ−ｐ−アニシルフェニルメチル、トリ
（メチルフェニル）メチル、トリ（ジメチルフェニル）
メチル、トリ（メトキシフェニル）メチル、トリ（ジメ
トキシフェニル）メチル；トリメチルシリル、トリエチ
ルシリル、トリ−ｎ−プロピルシリル、イソプロピル−
ジメチルシリル、ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリル、
ｔｅｒｔ−ブチル−ジフェニルシリル、ｎ−オクチル−
ジメチルシリル、（１，１，２，２−テトラメチルエチ
ル）−ジメチルシリル、−（ＣＨ₃ ）₂ Ｓｉ−Ｏ−Ｓｉ
（ＣＨ₃ ）₂ −、−（イソ−Ｃ₃ Ｈ₇ ）₂ Ｓｉ−Ｏ−Ｓ
ｉ（イソ−Ｃ₃ Ｈ₇ ）₂ −；アセチル、プロパノイル、
ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイル、ベンゾイ
ル、メチルベンゾイル、メトキシベンゾイル、クロロベ
ンゾイル及びブロモベンゾイル；メチル−、エチル−、
プロピル−、ブチル−、フェニル−、ベンジル−、ｐ−
ブロモ−、ｐ−メトキシ−及びｐ−メチルフェニル−ス
ルホニル；メトキシ−、エトキシ、ｎ−又はイソプロポ
キシ−若しくはｎ−、イソ−若しくはｔｅｒｔ−ブトキ
シカルボニル、又はフェニルオキシカルボニル、ベンジ
ルオキシカルボニル、メチル−若しくはメトキシ−若し
くはクロロ−フェニルオキシカルボニル若しくは−ベン
ジルオキシカルボニル又は９−フルオレニルメチルオキ
シカルボニルである。

【００１１】ヌクレオチド架橋基を形成するリンを含む
基としてのＲ₂ は、式（Ｐ₁ ）又は（Ｐ₂ ）：

【００１２】

【化１６】

【００１３】（式中、Ｙ_a は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキ
ル、Ｃ₆ −Ｃ₁₂アリール、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アラルキル、Ｃ₇
−Ｃ₂₀アルカリール、−ＯＲ_b 、−ＳＲ_b 、−ＮＨ₂ 、
第一級アミノ、第二級アミノ、Ｏ^- Ｍ⁺ 又はＳ^- Ｍ⁺ で
あり；Ｘ_a は、酸素又は硫黄であり；Ｒ_a は、水素、Ｍ
⁺ 、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アルケニル、Ｃ₆
−Ｃ₁₂アリールであるか、又は基：Ｒ_a Ｏ−は、５員環
であり、かつ１ないし３のＮ原子を有するＮ−ヘテロア
リール−Ｎ−イルであり；Ｒ_b は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₂ア
ルキル又はＣ₆ −Ｃ₁₂アリールであり；Ｍ⁺ は、Ｎａ
⁺ 、Ｋ⁺ 、Ｌｉ⁺ 、ＮＨ₄ ⁺ 又は第一級、第二級、第三
級若しくは第四級アンモニウムであり；そしてＹ_a 、Ｒ
_a 及びＲ_b のアルキル、アリール、アラルキル及びアル
カリールは、非置換であるか又はアルコキシ、アルキル
チオ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ₂ 、フェニル、ニトロ
フェニル又はハロフェニルによって置換されている）を
有する。

【００１４】Ｙ_a は、第一級アミノとして好適に１ない
し１２個、最も好適に１ないし６個の炭素原子を含み、
第二級アミノとして好適に２ないし１２個、最も好適に
２ないし６個の炭素原子を含む。

【００１５】第一級アミノ及び第二級アミノは、例え
ば、式：Ｒ_c Ｒ_d Ｎ（式中、Ｒ_c は、Ｈ又は、独立し
て、Ｒ_d の意義を有し、Ｒ_d は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−、好適に
はＣ₁ −Ｃ₁₂−、最も好適にはＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、Ｃ
₁ −Ｃ₂₀−、好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、最も好適にはＣ₁
−Ｃ₆ −アミノアルキル、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−、好適にはＣ₁
−Ｃ₁₂−、最も好適にはＣ₁ −Ｃ₆ −ヒドロキシアルキ
ル；カルボキシアルキル又はカルボアルコキシアルキル
（ここで、カルボアルコキシ基は２ないし８個の炭素原
子を有し、アルキル基は１ないし６個、好適には１ない
し４個の炭素原子を有する）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀−、好適には
Ｃ₂ −Ｃ₁₂−、最も好適にＣ₂ −Ｃ₆ −アルケニル；フ
ェニル、モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル−
又は−アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−若しく
はジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル−又はアルコキシ）ベン
ジル；又は１，２−、１，３−、若しくは１，４−イミ
ダゾリル−Ｃ₁ −Ｃ₆ −アルキル、あるいはＲ_c とＲ_d
は、一緒になって、テトラ−又はペンタ−メチレン、３
−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ_e −Ｃ
Ｈ₂ ＣＨ₂ −又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ₁₉−ＣＨ₂ ＣＨ
₂ −（ここで、Ｒ_e は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであ
る）である）の基である。アミノアルキルのアミノ基
は、一つ若しくは二つのＣ₁ −Ｃ₄ −アルキル又は−ヒ
ドロキシアルキル基で置換されていてもよい。ヒドロキ
シアルキルのヒドロキシ基は、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルでエ
ーテル化されていてもよい。

【００１６】Ｍ⁺ の定義の説明におけるＹ_a の、第一
級、第二級、第三級及び第四級アンモニウムは、式：Ｒ
_f Ｒ_g Ｒ_h Ｒ_i Ｎ⁺ 〔ここで、Ｒ_f は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−、
好適にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、最も好適にはＣ₁ −Ｃ₆ −アル
キル、−アミノアルキル若しくは−ヒドロキシアルキ
ル；カルボキシアルキル又はカルバルコキシアルキル
（ここで、カルボアルコキシ基は２ないし８個の炭素原
子を有し、アルキル基は１ないし６個の炭素原子を有す
る）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀−、好適にはＣ₂ −Ｃ₁₂、最も好適に
はＣ₂ −Ｃ₆ −アルケニル；フェニル、モノ−若しくは
ジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル−又は−アルコキシ）フェ
ニル、ベンジル、モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −ア
ルキル−又は−アルコキシ）ベンジル；又は１，２−、
１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−Ｃ₁ −Ｃ₆ ア
ルキルであり、Ｒ_g 、Ｒ_h 及びＲ_i は、各々互いに独立
して、水素であるか又はＲ_f の意義を有し、あるいはＲ
_f とＲ_gは、一緒になって、テトラ−又はペンタ−メチ
レン、３−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −Ｎ
Ｒ_e −ＣＨ₂ ＣＨ₂ −又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ_e −Ｃ
Ｈ₂ ＣＨ₂ −（ここで、Ｒ_e は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ アル
キルである）、そしてＲ_h及びＲ_i は、各々互いに独立
して、Ｒ_f の意義を有する〕で示されるイオンであると
理解されるべきものである。アミノアルキルのアミノ基
は、一つ又は二つのＣ₁ −Ｃ₄ −アルキル又は−ヒドロ
キシアルキル基で置換されていてもよい。ヒドロキシア
ルキルのヒドロキシ基は、Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキルでエー
テル化されていてもよい。

【００１７】カルボキシアルキルの例は、カルボキシメ
チル、カルボキシエチル、カルボキシプロピル及びカル
ボキシブチルであり、カルボアルコキシアルキルの例
は、メチル又はエチルでエステル化された後者のカルボ
キシアルキルである。アルケニルの例は、アリル、ブタ
−１−エン−３−イル又は−４−イル、ペンタ−３−又
は−４−エン−１−イル、ヘキサ−３−又は−４−又は
−５−エン−１−イル又は−２−イルである。アルキル
−及びアルコキシ−フェニル及び−ベンジルの例は、メ
チルフェニル、ジメチルフェニル、エチルフェニル、ジ
エチルフェニル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、
エチルベンジル、ジエチルベンジル、メトキシフェニ
ル、ジメトキシフェニル及びエトキシフェニル、ジエト
キシフェニル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジ
ル、エトキシベンジル、ジエトキシベンジルである。ア
ルキル基が、好適に、２ないし４の炭素原子を有するイ
ミダゾリルアルキルの例は、１，２−、１，３又は１，
４−イミダゾリル−エチル又は−ｎ−プロピル又は−ｎ
−ブチルである。Ｒ₁₉は、好適には、Ｈ、メチル又はエ
チルである。

【００１８】第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例
は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、ジ
イソプロピル−、モノ−又はジ−（１−ヒドロキシ−エ
タ−２−イル）−、フェニル−及びベンジル−アミノ、
アセチルアミノ及びベンゾイルアミノ及びピペリジニ
ル、ピペラジニル及びモルホリニルである。

【００１９】第一級及び第二級アンモニウムの好適な例
は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、ジ
イソプロピル−、モノ−又はジ−（１−ヒドロキシ−エ
タ−２−イル）−、フェニル−及びベンジル−アンモニ
ウムである。

【００２０】アルキルとしてのＹ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b の例
は、メチル、エチル並びにプロピル、ブチル、ペンチ
ル、ヘキシル、ヘプチル及びオクチルの異性体；アリー
ルとしてのＹ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b の例は、フェニル及びナ
フチル；アルケニルとしてのＲ_a の例は、アリル及び
（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル）ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂ −；アラル
キルとしてのＹ_a の例は、フェニル−Ｃ_n Ｈ_2n−（ここ
で、ｎは１ないし６の数である）、特にベンジル；アル
カリールとしてのＹ_a の例は、モノ−、ジ−及びトリ−
（Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル）フェニルである。好適な置換基
は、塩素、臭素、メトキシ、−ＮＯ₂ 、−ＣＮ、２，４
−ジクロロフェニル及び４−ニトロフェニルである。Ｒ
_b の例は、２，２，２−トリクロロエチル、４−クロロ
フェニル、２−クロロフェニル及び２，４−ジクロロフ
ェニル；Ｎ−ヘテロアリールとしてのＲ_b Ｏ−の例は、
ピロロ−Ｎ−イル、トリアゾール−Ｎ−イル及びベンゾ
トリアゾール−Ｎ−イルである。

【００２１】特に好適な態様において、Ｒ_a は、β−シ
アノエチルであり、Ｙ_a は、ジ（イソプロピルアミノ）
である。

【００２２】Ｂが、プリン基又はその類似基である場
合、Ｂは、式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、
（IIｄ）、（IIｅ）又は（IIｆ）：

【００２３】

【化１７】

【００２４】（式中、Ｒ_b1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又
は−Ｏ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキルであり、Ｒ_b2、Ｒ_b3及びＲ
_b5は、各々互いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、
ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ
−アザシクロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂−
アルキル、ヒドロキシ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキ
シ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキ
ル、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −
Ｃ₁₂アルキルチオ（ここで、ヒドロキシ及びアミノ基
は、非置換であるか又は保護基、フェニル、ベンジル、
１ないし２０個の炭素原子を有する第一級アミノ若しく
は２ないし３０個の炭素原子を有する第二級アミノで置
換されている）であり、Ｒ_b4は、水素、ＣＮ又は−Ｃ≡
Ｃ−Ｒ_b7であり、そしてＲ_b6及びＲ_b7は、水素又はＣ₁
−Ｃ₄ アルキルである）で示される基である。

【００２５】適切な保護基は、上述の基である。好適な
保護基は、アセチル、プロピオニル、ブチロイル、ベン
ゾイルのようなＣ₁ −Ｃ₈ アシル基である。Ｒ_b6は、好
適には、Ｈ又はメチルである。

【００２６】第一級アミノは、好適には１ないし１２
個、最も好適には１ないし６個の炭素原子を含み、第二
級アミノは、好適には２ないし１２個、最も好適には２
ないし６個の炭素原子を含む。

【００２７】好適に１ないし６個の炭素原子を含む、ア
ルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアルキ
ル及びアミノアルキルの幾つかの例は、メチル、エチル
並びにプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチ
ル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル及びドデシ
ルの異性体、並びに相当するアルコキシ、アルキルチ
オ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル基である。
アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、ヒドロキシアル
キル及びアミノアルキルは、最も好適には、１ないし４
の炭素原子を含む。好適な、アルキル、アルコキシ、ア
ルキルチオ、ヒドロキシアルキル及びアミノアルキル基
は、メチル、エチル、ｎ−及びイソプロピル、ｎ−、イ
ソ−及びｔｅｒｔ−ブチル、メトキシ、エトキシ、メチ
ルチオ及びエチルチオ、アミノメチル、アミノエチル、
ヒドロキシメチル及びヒドロキシエチルである。

【００２８】第一級アミノ及び第二級アミノは、例え
ば、式：Ｒ_a1、Ｒ_a2Ｎ〔ここで、Ｒ_a1は、Ｈ又は、独立
して、Ｒ_a2の意義を有し、Ｒ_a2は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−、好適
にはＣ₁ −Ｃ₁₂−、最も好適にはＣ₁ −Ｃ₆ −アルキ
ル、−アミノアルキル若しくは−ヒドロキシアルキル；
カルボキシアルキル若しくはカルバルコキシアルキル
（ここで、カルボキシ基は２ないし８個の炭素原子を含
み、アルキル基は１ないし６個、好適には１ないし４個
の炭素原子を含む）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀−、好適にはＣ₂ −Ｃ
₁₂−、最も好適にはＣ₂ −Ｃ₆ −アルケニル；フェニ
ル、モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル−又は
−アルコキシ）フェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ
−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル−又は−アルコキシ）ベンジ
ル；又は１，２−、１，３若しくは１，４−イミダゾリ
ル−Ｃ₁ −Ｃ₆ −アルキル、あるいはＲ_a1とＲ_a2は、一
緒になって、テトラ−又はペンタ−メチレン、３−オキ
サ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ Ｃ
Ｈ₂ −又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −
（ここで、Ｒ_a3は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ −アルキルであ
る）である〕で示される基である。アミノアルキルのア
ミノ基は、一つ又は二つのＣ₁ −Ｃ₄ −アルキル又は−
ヒドロキシアルキル基で置換されていてもよい。ヒドロ
キシアルキルのヒドロキシ基は、Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル
でエーテル化されていてもよい。

【００２９】アルキルの例は、上述のものである。アミ
ノアルキルの例は、アミノメチル、アミノエチル、１−
アミノプロパ−２−イル又は−３−イル、１−アミノ−
ブタ−２−イル又は−３−イル又は−４−イル、Ｎ−メ
チル−又はＮ，Ｎ−ジメチル−又はＮ−エチル−又は
Ｎ，Ｎ−ジエチル−又はＮ−２−ヒドロキシエチル−又
はＮ，Ｎ−ジ−２−ヒドロキシエチル−アミノメチル又
は−アミノエチル又は−アミノプロピル又は−アミノブ
チルである。ヒドロキシアルキルの例は、ヒドロキシメ
チル、１−ヒドロキシエタ−２−イル、１−ヒドロキシ
−プロパ−２−又は−３−イル、１−ヒドロキシブタ−
２−イル、−３−イル又は−４−イルである。カルボキ
シアルキルの例は、カルボキシメチル、カルボキシエチ
ル、カルボキシプロピル及びカルボキシブチルであり、
カルボアルコキシアルキルの例は、メチル又はエチルで
エステル化された後者のカルボキシアルキル基である。
アルケニルの例は、アリル、ブタ−１−エン−３−イル
又は−４−イル、ペンタ−３−又は−４−エン−１−イ
ル又は−２−イル、ヘキサ−３−又は−４−又は−５−
エン−１−イル又は２−イルである。アルキル−及びア
ルコキシ−フェニル及び−ベンジルの例は、メチルフェ
ニル、ジメチルフェニル、エチルフェニル、ジエチルフ
ェニル、メチルベンジル、ジメチルベンジル、エチルベ
ンジル、ジエチルベンジル、メトキシフェニル、ジメト
キシフェニル、エトキシフェニル、ジエトキシフェニ
ル、メトキシベンジル、ジメトキシベンジル、エトキシ
ベンジル及びジエトキシベンジルである。アルキル基
が、好適に２ないし４の炭素原子を有するイミダゾリル
アルキルの例は、１，２−、１，３−又は１，４−イミ
ダゾリル−エチル又は−ｎ−プロピル又は−ｎ−ブチル
である。Ｒ_a3は、好適には、Ｈ、メチル又はエチルであ
る。

【００３０】第一級アミノ及び第二級アミノの好適な例
は、メチル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、ア
リル−、モノ−又はジ−（１−ヒドロキシ−エタ−２−
イル）−、フェニル−及びベンジル−アミノ、アセチル
−アミノ、イソブチリルアミノ及びベンゾイルアミノで
ある。

【００３１】好適な態様において、Ｒ_b1は水素である。
別の好適な態様において、Ｒ_b5は水素である。さらに別
の好適な態様において、Ｒ_b2及びＲ_b3は、各々互いに独
立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、Ｎ
ＨＯＨ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジメチルアミノ、
ベンゾイルアミノ、イソブチリルアミノ、メトキシ、エ
トキシ又はメチルチオである。

【００３２】プリン系列の０類似化合物の若干の例は、
プリンのほかに、キサンチン、ヒポキサンチン、アデニ
ン、Ｎ−メチルアデニン、Ｎ−ベンゾイルアデニン、２
−メチルチオアデニン、２−アミノアデニン、６−ヒド
ロキシプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２−ア
ミノ−６−メチルチオプリン、グアニン及びＮ−イソブ
チリルグアニンである。アデニン、２−アミノアデニン
及びグアニン、及びこれらの塩基−保護誘導体は、特に
好ましい。

【００３３】式（Ｉ）のＢが、ピリミジン基である場
合、Ｂは、好適には、式（III ）、（III ）、（III
ｂ）若しくは（III ｃ）：

【００３４】

【化１８】

【００３５】（式中、Ｒ_b6は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキ
ルであり、Ｒ_b8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ
₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝Ｃ
Ｈ−Ｎ（Ｃ₁ −Ｃ₁₂）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−アザシクロアル
キル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキ
シ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキ
ル、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −
Ｃ₁₂アルキルチオ（ここで、ヒドロキシ及びアミノ基
は、非置換であるか又は保護基、フェニル、ベンジル、
１ないし２０個の炭素原子を有する第一級アミノ、２な
いし３０個の炭素原子を有する第二級アミノ、Ｃ₂ −Ｃ
₁₂アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₁₂アルキニルで置換されてお
り、そして式（III ｂ）のＮＨ₂ の基は、非置換である
か又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、ベンゾイル若しくは保護基
で置換されている）で示されるウラシル、チミン又はシ
トシン基であるか、又は式（III ）、（III ａ）、（II
I ｂ）若しくは（III ｃ）で示される基のジヒドロ誘導
体である。好適には、式（III ）のＲ_b8は、Ｈ、Ｃ₁−
Ｃ₆ −アルキル若しくは−ヒドロキシアルキル、Ｃ₂ −
Ｃ₆ −アルケニル若しくは−アルケニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂ
ｒ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ、又はモノ−若しくはジ
−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである。好適には、式（II
I ｂ）及び（III ｃ）のＲ_b8は、Ｈ、Ｃ₁ −Ｃ₆ −アル
キル若しくは−アルコキシ若しくは−ヒドロキシアルキ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₆ −アルケニル若しくは−アルキニル、
Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ、又はモノ
−若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである。

【００３６】Ｒ_b6は、好適には、Ｈ又はメチルである。
式（III ）のＲ_b8は、好適には、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、
ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 、Ｃ₁ −Ｃ₄ アル
キル、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル又はＣ₂ −Ｃ₄ アルキン−
１−イルである。式（III ｂ）及び（III ｃ）のＲ
_b8は、好適には、Ｈ、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、特にメチ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル、特にビニル又はＣ₂ −Ｃ₄
アルキン−１−イル、特に１−プロピン−１−イル、又
はＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 若しくは（ＣＨ₃ ）₂ Ｎである。

【００３７】ピリミジン類似化合物の若干の例は、ウラ
シル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５−
クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラシ
ル、５−メチルシトシン、５−プロピンチミン及び５−
プロピンシトシンである。

【００３８】本発明は、また、式（Ｉ）：

【００３９】

【化１９】

【００４０】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立
して、水素又は保護基であり；そしてＢは、プリン若し
くはピリミジン基又はその類似基である）で示される化
合物を製造する方法であって、（ａ）Ｒ₃ が、ＯＨである場合には、式（IVａ）：

【００４１】

【化２０】

【００４２】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、同一又は異なる
保護基であり、Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又は
その類似基であり、そして塩基性基Ｂの官能基は、保護
基により保護されている）の化合物を、不活性溶媒中、
式（Ａ）：

【００４３】

【化２１】

【００４４】（式中、Ｒ₄ は、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルであ
り、そしてＸは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシ
ル−Ｏである）で示される化合物と反応させ；次いで、
エステル官能基を、ＮａＢＨ₄ 又はＬｉＡｌＨ₄ で還元
し、ここで生成したＯＨ基は、Ｒ₁ で定義された基で一
時的に保護し得；（ｂ）Ｒ₃ が、Ｆである場合には、式（Ｉ）（式中、Ｒ
₃ は、ＯＨである）で示される化合物を、式（Ｂ）：

【００４５】

【化２２】

【００４６】で示される化合物と反応させ；（ｃ）Ｒ₃ が、−（ＣＦ₂ ）_n −ＣＦ₃ （ここで、ｎが
０ないし７の数である）である場合には、式（IVａ）で
示される化合物を、式（Ｃ）、（Ｄ）又は（Ｅ）：

【００４７】

【化２３】

【００４８】で示される化合物を反応させ、次いで存在
してもよい二重結合又は塩素化二重結合を、ＣＨ₂ ＣＨ
₂ （ＣＦ₂ ）_n ＣＦ₃ へ接触還元し；（ｄ）Ｒ₃ が、ＯＨ、Ｆ又は−（ＣＦ₂ ）_n −ＣＦ₃ で
ある場合には、式（IVｂ）：

【００４９】

【化２４】

【００５０】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、上記と同義であ
り、そしてＡは、脱離基、好適にはアルコキシ、アシル
オキシ、メシル−Ｏ又はトシル−Ｏ、最も好適にはＯＣ
Ｈ₃ 、ＯＣＯＣＨ₃ 又はベンゾイルオキシである）で示
される化合物を、（ａ）ないし（ｃ）に記載された方法
の一つにより、２′−ＯＨ基で置換し、次いでそれ自体
が公知の方法により、置換によって塩基性基Ｂを導入し
〔E.Lukevics, A.Zablocka, Nucleoside Synthesis, El
lis Horwood, New York(1991) 〕；そして所望により、
保護基Ｒ₁₄及びＲ₁₅を除去することよりなる。

【００５１】式（IVａ）及び（IVｂ）、（Ａ）、
（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）及び（Ｅ）の化合物は、公知で
あり、幾つかの化合物は市販されており、又は公知若し
くは類似の方法によって製造することができる。

【００５２】不活性溶媒は、例えば、炭化水素、ハロゲ
ン化炭化水素、アルキル化カルボン酸アミド類及びラク
タム類、エーテル類、アセトニトリルのようなニトリル
類、ジアルキル−スルホン類又は−スルホキシド類又は
環状スルホン類及びスルホキシド類である。

【００５３】工程（ａ）ないし（ｄ）における反応温度
は、−５０ないし２００℃、好適には０ないし９０℃で
ある。

【００５４】Ｂとの反応のほかは、反応は、塩基、例え
ばアルカリ金属水素化物、アルコラート類、水酸化物若
しくは炭酸塩類、トリアルキルアミン又はジアザビシク
ロウンデセンの存在下に好都合に行なわれる。

【００５５】式（Ｉ）の化合物の単離及びそれらの精製
は、例えば、沈殿又は結晶化、濾過及びクロマトグラフ
ィーのような、それ自体公知の方法によって行なわれ
る。

【００５６】式（Ｉ）の化合物から、核酸との相互反応
のために有効な生物学的活性を有し、薬学的に活性な成
分又は診断薬として使用し得るオリゴヌクレオチドを構
築することができる。

【００５７】本発明は、さらに、式（Ｉ）の化合物の同
一又は異なるモノマー単位を含むか、又は別の天然又は
合成ヌクレオシドのモノマー単位と組合せて、式（Ｉ）
の化合物の少なくとも一つのモノマー単位を含む、２な
いし２００のモノマー単位よりなるオリゴヌクレオチド
の製造のための式（Ｉ）の化合物の用途に関する。オリ
ゴヌクレオチドは、好適には２ないし１００、より好適
には２ないし５０、最も好適には４ないし３０のモノマ
ー単位よりなる。式（Ｉ）の化合物の同一又は異なるモ
ノマー単位よりなるオリゴヌクレオチドが好ましい。Ｄ
−リボース又は２−デオキシリボースより誘導される合
成又は天然ヌクレオシドのモノマー単位をさらに含むオ
リゴヌクレオチドも、同様に好ましい。

【００５８】本発明は、さらに、式（Ｖ）：

【００５９】

【化２５】

【００６０】〔式中、ｘは、０ないし２００の数であ
り；Ｙは、ヌクレオチド架橋基であり；Ｕ、Ｖ及びＷ
は、各々独立して、天然又は合成ヌクレオシドの、同一
又は異なる基であり、Ｕ、Ｖ及び／又はＷの少なくとも
一つの基は、式（VI）：

【００６１】

【化２６】

【００６２】（式中、Ｂ及びＲ₃ は、式（Ｉ）の化合物
について定義したものと、好適な意義及び代表例を含め
て同義である）で示される基である〕で示されるオリゴ
ヌクレオチドに関する。

【００６３】好適な架橋基Ｙは、天然のオリゴヌクレオ
チドに見られる−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −の基である。その他の
架橋基の例は、−Ｐ（Ｏ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｓ）Ｓ^- −、
−Ｐ（Ｏ）Ｒ₁₆−、Ｐ（Ｏ）ＮＲ₁₇Ｒ₁₈及び−ＣＨ₂ −
（ここで、Ｒ₁₆は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキルであり、
Ｒ₁₇及びＲ₁₈は、各々互いに独立して、Ｒ₁₆の意義を有
する）である。式（Ｖ）において、ｘは、好適には０な
いし１００の数、より好適には１ないし５０の数、最も
好適には３ないし２９の数である。式（VI）の基は、ヌ
クレオチド配列の末端又はその配列中に結合し、式（V
I）の全部又は幾つか、例えば２ないし５個の基は交互
に配列するか、又は式（VI）の基は、天然又は合成ヌク
レオシド基の間に結合するか、又はヌクレオチド配列の
中に分散した形で混在することができる。

【００６４】最も特に好適な態様は、式（Ｖ）（式中、
ｘは、２ないし５０、好適には２ないし３０の数であ
り、Ｙは、基：−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −であり、Ｕ、Ｖ及びＷ
は、各々独立して、天然ヌクレオシドの、同一又は異な
る基であり、基Ｕ、Ｖ及びＷの少なくとも一つは、式
（VI）に相当する）のオリゴヌクレオチドよりなる。適
切な天然ヌクレオシドは、アデノシン、シチジン、グア
ノシン、ウリジン、２−アミノアデニン、５−メチルシ
トシン、２′−デオキシアデノシン、２′−デオキシシ
チジン、２′−デオキシグアノン及びチミジンである。
言及されるべき天然ヌクレオシド塩基は、特にアデニ
ン、シトシン、グアニン、チミン及びウラシルである。
式（VI）の基は、ヌクレオチド配列の末端又は配列の間
に結合されてよく、式（VI）の全部又は幾つか、例えば
２ないし５の同一又は異なる基は交互に配列するか、又
は式（VI）の同一又は異なる基は天然ヌクレオシド基の
間に結合するか、又はヌクレオチド配列の中に分散した
形で混在することができる。式（Ｖ）のオリゴヌクレオ
チドの別の好適な態様において、基Ｕ、Ｖ及びＷの全部
は、式（VI）の同一又は異なる基に相当する。ｘは、好
適には、３ないし２９の数であり、好適には、式（VI）
の基が、総計で１ないし１２存在する。

【００６５】本発明のオリゴヌクレオチドは、自動化さ
れているか又はされていない、そして合成法の説明書と
共に購入できるＤＮＡシンセサイザーで、各種の方法に
より、それ自体公知の方法で製造することができる。架
橋基−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −の場合、例えば、この技術分野に
精通した技術者によく知られている、リン酸トリエステ
ル法、亜リン酸トリエステル法又はＨ−ホスホン酸法を
用いることができる。亜リン酸トリエステル法の場合に
用いられる方法は、例えば、式（Ｉ）（ここで、Ｒ₁ 及
びＲ₂ は、各々Ｈである）のヌクレオシドを、保護基、
例えば４，４′−ジメトキシトリフェニルメチルクロリ
ドと反応させて、式（Ｆ）：

【００６６】

【化２７】

【００６７】のヌクレオシドを形成させ、式（Ｆ）の化
合物を、「リンカー」、例えば無水コハク酸によって、
長鎖アルキルアミノ基を含む固体の支持相、例えばCont
rolledPore Glass （ＣＰＧ）に結合させることを含
む。分離工程で、式（Ｆ）の化合物の水酸基は、例えば
Ｒ′ＯＰ〔Ｎ（イソプロピル）₂ 〕₂ を用いてホスホラ
スアミダイトに誘導し、式（Ｇ）：

【００６８】

【化２８】

【００６９】（式中、Ｒ′は、例えばβ−シアノエチル
である）の化合物を形成させる。

【００７０】支持相に結合した物質の、例えばＤＭＴ基
のような保護基の脱離後、式（Ｆ）の化合物へのカップ
リングは、後に除かれる−Ｎ（イソ−Ｃ₃ Ｃ₇ ）₂ を加
えて行い、遊離の水酸基があればふさぎ（キャップ）、
生成した亜リン酸エステルをリン酸エステルに酸化す
る。ダイマーを脱保護した後、所望のモノマー単位数を
有するオリゴマーが合成されるまで、式（Ｇ）の化合物
を加えて反応サイクルを繰り返し、生成物を支持相から
切り離する。この方法で、式（Ｖ）の基Ｕ、Ｖ及びＷの
全部が式（VI）の基よりなるオリゴヌクレオチドが得ら
れる。この方法で、天然及び合成ヌクレオシド及び本発
明のヌクレオシドを個々の反応サイクルに用いることに
より、所望の配列に所望のモノマー単位を有するオリゴ
ヌクレオチドを製造することが可能である。

【００７１】式（Ｉ）（ここで、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各
々、Ｈである）の本発明の化合物は、抗ウイルス及び抗
増殖性活性を有し、従って医薬品として用いることがで
きる。さらに、本発明のオリゴヌクレオチドは、ヌクレ
アーゼによる分解に対して高度な安定性を示す。特に驚
くべきことは、相補性核酸鎖、特にＲＮＡ型核酸鎖との
これらの優れたペアリングである。その上、これらは、
予期以上の高度な細胞性取込みを示す。それ故、本発明
のオリゴヌクレオチドは、アンチセンス技術、すなわち
ｍＲＮＡの適切な相補性ヌクレオチド配列に結合するこ
とにより望ましくない蛋白生成物の発現を抑制するのに
特に適している（EP 266,099号、WO 87/07300 及びWO 8
9/08146 ）。これらは、例えば核酸段階での生物学的に
活性な蛋白（例えば、がん遺伝子）の発現を抑制するこ
とにより、感染症及び疾患の治療に用いられる。本発明
のオリゴヌクレオチドは、診断薬としても適しており、
一本鎖又は二本鎖の核酸段階での選択的な相互反応によ
り、ウイスル感染症又は遺伝子性疾患の検出のための遺
伝子プローブとして用いることができる。特に、ヌクレ
アーゼに対する高度な安定性のために、診断目的のため
の使用は、生体外のみならず生体内（例えば、組織検
体、血漿及び血清）においても可能である。このような
可能な応用は、例えば、WO91/06556に記載されている。

【００７２】本発明は，さらに、ウイルス感染症又は遺
伝子性疾患の検出のための診断薬としての、本発明のオ
リゴヌクレオチドの用途に関する。

【００７３】本発明は，また、体内におけるヌクレオチ
ド配列の不活性化による、ヒトを含む温血動物における
疾患治療のための治療法に用いられる、式（Ｉ）の本発
明のヌクレオシド及び式（Ｖ）のオリゴヌクレオチドに
関する。体重約７０kgの温血動物に投与する１日の用量
は、例えば、０．０１ないし１０００mgである。投与
は、非経口的、例えば、静脈又は腹腔に、好適には薬学
的組成物の形で行なわれる。

【００７４】本発明は，さらに、有効量の、式（Ｉ）の
ヌクレオシド又は式（Ｖ）のオリゴヌクレオチド、それ
自体又はその他の活性な成分、薬学的担体、好適には有
意量で、及び適切な場合には賦形剤と共に含む薬学的組
成物に関する。

【００７５】本発明の薬理学的に有効なヌクレオシド及
びオリゴヌクレオチドは、非経口的に投与される製剤の
形又は注入液の形で用いられる。このような溶液は、好
適には、等張水溶液又は懸濁液であり、これらは、例え
ば、活性な成分をそれ自体又は担体、例えばマンニトー
ルと共に含む凍結乾燥した組成物の場合には、用時調製
される。薬学的組成物は、滅菌されていてもよく、及び
／又は賦形剤、例えば保存剤、安定剤、湿潤剤及び／又
は乳化剤、可溶化剤、浸透圧を調整する塩及び／又は緩
衝剤を含んでいてもよい。所望により、抗生物質のよう
なその他の薬理学的に活性な物質を含む薬学的組成物
は、それ自体公知の方法、例えば通常の溶解又は凍結乾
燥法によって調製され、約０．１％ないし９０％、特に
約０．５％ないし約３０％、例えば１％ないし５％の活
性成分を含んでもよい。

【００７６】

【実施例】以下の実施例により、本発明を説明する。 ¹
Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、以下の環状炭素構造における
炭素原子の番号付けに基づいている：原料化合物：

【００７７】

【化２９】

【００７８】ヌクレオシド（実施例）：

【００７９】

【化３０】

【００８０】明細書本文及び構造式に用いた略語：ＤＭＦジメチルホルムアミドＣｌＢｎＣｌ₂ 塩化２，４−ジクロロベンジルＢｎベンジルＡｃアセチル φ フェニルＢＳＡＮ，Ｎ−ビストリメチルシリルアセ
トアミドＤＢＵジアザビシクロ〔５．４．０〕ウン
デカ−７−エンＢＯＭ−Ｃｌ塩化ベンジルオキシメチルＤＭＴＣｌ塩化４，４′−ジメトキシトリチルＴＨＦテトラヒドロフラン

【００８１】Ａ）ヌクレオシド類似化合物の製造法実施例Ａ１：ＤＭＦ１３０mlに懸濁したＮａＨ１３．５
ｇに、１−メチルリボース２８．０ｇを滴下した。Ｈ₂
の発生終了後、ＣｌＢｎＣｌ₂ の１１０．０ｇを滴下
し、反応混合物を、２５℃でさらに１６時間撹拌した。
過剰のＮａＨを分解するため、注意しながらメタノール
を滴下し、次いで反応混合物を氷／水中に注加した。塊
状の沈殿を濾取し、アセトニトリルで十分に洗浄し、化
合物（Ａ１）：

【００８２】

【化３１】

【００８３】を得た。¹ H-NMR (250MHz, CDCl₃): 5.50〔s, H-C(1) 〕. MS: 638 (M⁺).

【００８４】実施例Ａ２：実施例Ａ１で得た生成物６
５．９ｇを塩化メチレン６００mlに溶解し、この溶液を
０℃に冷却し、塩化メチレン８００mlに溶解したＳｎＣ
ｌ₄ の１２１mlを滴下し、３℃で２６時間放置した。さ
らにＳｎＣｌ₄ の２mlを加え、総計で３５時間の経過
後、注意しながら、反応液をＮａＨＣＯ₃ の飽和溶液７
００mlに注加した。塩化メチレン４００mlで希釈した
後、Ｓｎを含む沈殿物を濾去し、濾液の有機層をＭｇＳ
Ｏ₄ で乾燥して溶媒を留去し、化合物（Ａ２）：

【００８５】

【化３２】

【００８６】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 4.90 〔d, J=5 Hz, H-C(1)
〕.

【００８７】実施例Ａ３：実施例Ａ２で得た生成物１２
５．９ｇをピリジン１リットルに溶解し、２０℃で、無
水酢酸２５．５ｇ及び４−ジメチルアミノピリジン１ｇ
を加えた。次いで、反応混合物を１７時間撹拌してか
ら、水１リットル中に注加し、濃塩酸で酸性にして酢酸
エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥して、溶
媒を留去した。最後に、残渣をヘキサンから結晶化し、
化合物（Ａ３）：

【００８８】

【化３３】

【００８９】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.15 〔d, J=4.5 Hz, H-C
(1)]; 3.50 (s, OCH₃); 2.17 (s, OCOCH₃). MS: 522 (M⁺). 〔α〕_Na(D)=87.4±1.0 °，ＣＨＣｌ_３（０．９９
８％）．

【００９０】実施例Ａ４：チミン２４ｇを１，２−ジク
ロロエタン１００ｍｌに懸濁し、ＢＳＡの１１６．４ｇ
を加え、透明な溶液が得られるまで、反応混合物を還流
加熱した。次いで、この溶液を５０℃に冷却し、実施例
Ａ３で得た生成物５０ｇ及びトリフルオロメタンスルホ
ン酸トリメチルシリルエステル２７．５ｇを加えた。反
応混合物を７０℃で２０時間撹拌してから、ＮａＨＣＯ
₃ の溶液３００ml中に注加し、濾過した。ジクロロメタ
ンで抽出した後、抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥して溶媒を
留去した。最後に、残渣をメタノールから結晶化し、化
合物（Ａ４）：

【００９１】

【化３４】

【００９２】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 8.25 (s, NH); 6.10 〔d, J
=4.5 Hz, H-C(1')〕; 2.13 (s, OCOCH₃); 1.66 (s, C
H₃). MS: 616 (M⁺).

【００９３】実施例Ａ５：実施例Ａ４で得た生成物８５
ｇをアセトニトリル８５０mlに懸濁し、室温で、ＤＢＵ
の２４．２ｇ及びＢＯＭ−Ｃｌの２４．９ｇを滴下し
た。２０時間撹拌した後、反応混合物を水中に注加して
酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄で乾燥して
溶媒を留去し、化合物（Ａ５）：

【００９４】

【化３５】

【００９５】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 6.05 〔d, J=4.5 Hz, H-C
(1')〕; 5.5 (AB, CH₂); 5.37 〔dd, H-C(2') 〕; 2.13
(s, OCOCH₃); 1.55 (s, CH₃). MS: 736 (M⁺).

【００９６】実施例Ａ６：実施例Ａ５で得た生成物１０
６ｇをＴＨＦの１リットルに懸濁し、３０％ＮａＯＣＨ
₃ ／ＣＨ₃ ＯＨの２６ｇを滴下した。２．５時間の撹拌
後、反応液を水中に注加し、塩化ナトリウムの飽和溶液
を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で
乾燥して溶媒を留去し、化合物（Ａ６）：

【００９７】

【化３６】

【００９８】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 5.93 〔d, J=5 Hz, H-C
(1')〕; 5.5 (AB, CH₂); 3.03 (d, J=6.5Hz, OH); 1.72
(s, CH₃). MS: 694 (M⁺).

【００９９】実施例Ａ７：実施例Ａ６で得た生成物７
９．４ｇをＴＨＦの８００mlに溶解し、ＮａＨの３．３
ｇを加えて短時間沸騰させた後、４０℃で、ブロモ酢酸
メチル２１ｇを滴下した。反応混合物を６０℃で総計２
７時間撹拌し、その間、１６時間及び２０時間後に、そ
れぞれＮａＨの１ｇ及びブロモ酢酸メチル２mlを加え
た。最後に、反応混合物を水中に注加し、酢酸エチルで
抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥して溶媒を留去
し、化合物（Ａ７）：

【０１００】

【化３７】

【０１０１】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.70 〔s, H-C(6) 〕; 5.92
〔s, H-C(1')〕；５．４８（ＡＢ，ＣＨ_２）；
３．７５（ｓ，ＯＣＨ_３）；１．５８（ｓ，
ＣＨ_３）．ＭＳ：７６６（Ｍ^＋）．

【０１０２】実施例Ａ８：実施例Ａ７で得た生成物３７
ｇをＴＨＦの４００ｍｌに溶解し、２０℃でＬｉＢＨ₄
の１．５ｇを小量づつ加えた。反応混合物を１時間撹拌
した後、注意しながら、水５００ml中に注加し、２N 塩
酸３２mlで中和した。酢酸エチルで抽出し、溶媒を留去
し、化合物（Ａ８）：

【０１０３】

【化３８】

【０１０４】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.65 〔s, H-C(6) 〕; 5.96
〔s, H-C(1')〕; 5.50 (AB, CH₂); 2.57 (巾広 s, OH);
1.60 (s, CH₃). MS: 738 (M⁺).

【０１０５】実施例Ａ９：実施例Ａ８で得た生成物２
０．０ｇをＴＨＦの２００mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５
％）の２ｇを加え、常圧下、２５℃で４．５時間水素化
した（Ｈ₂ の吸収量：１０２％）。濾過し、濾液から溶
媒を留去した後、残渣をメタノール１７０mlに溶解し、
３０％ＮａＯＣＨ₃ ／ＣＨ₃ ＯＨ溶液でpH１１に調整し
た。２４時間後、反応混合物を水２５０ml中に注加し、
２N 塩酸で酸性にして酢酸エチルで抽出した。抽出液を
ＭｇＳＯ₄ で乾燥して溶媒を留去し、化合物（Ａ９）：

【０１０６】

【化３９】

【０１０７】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 9.24 (s, NH); 7.90 〔s, H
-C(6) 〕; 5.99〔s, H-C(1')〕; 2.68 (t, OH); 1.60
(s, CH₃). MS: 618 (M⁺).

【０１０８】実施例Ａ１０：実施例Ａ９で得た生成物
４．２ｇを、ピリジン５０mlに溶解し、無水酢酸２．４
ｇを加え、室温で１９時間撹拌した。反応液を２N ＨＣ
ｌの１００ml中に注加し、酢酸エチルで抽出した。抽出
液を２N ＨＣｌ及び水で洗い、ＭｇＳＯ₄ で乾燥して溶
媒を留去し、化合物（Ａ１０）：

【０１０９】

【化４０】

【０１１０】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 9.28 (s, NH); 7.67 〔s, H
-C(6) 〕; 5.95〔s, H-C(1')〕; 2.00 (s, CH₃); 1.60
(s, CH₃). MS: 663 (M⁺).

【０１１１】実施例Ａ１１：実施例Ａ１０で得た生成物
４．２ｇをメタノール５０mlに溶解し、無水の酢酸ナト
リウム２．０９ｇ及びＰｄ／Ｃ（５％）の０．８ｇを加
えて、常圧下、２５℃で水素化した。５８時間後、水素
化混合物を濾過し、溶媒を留去した。塩を除去するた
め、残渣を小フリット上でのシリカゲルのクロマトグラ
フィー（溶出液：酢酸エチル／メタノール９：１）に付
し、化合物（Ａ１１）：

【０１１２】

【化４１】

【０１１３】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, DMSO): 10.1 (s, NH); 7.61〔s, H-C
(6) 〕; 5.64〔d, J=6 Hz, H-C(1')〕; 1.70 (s, CH₃);
1.57 (s, CH₃). MS: 379 (M+Cl)^-.

【０１１４】実施例Ａ１２：実施例Ａ１１で得た生成物
２．２７ｇをピリジン中に２回とり、溶媒を留去した。
残渣を、再びピリジン３０mlに溶解し、ＤＭＴＣｌの
２．５７ｇを加えた。室温で２０時間撹拌した後、反応
混合物を酢酸エチル２５０mlで希釈し、水５０ml中に注
加した。有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥して溶媒を留去し
た。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（溶出液：
トルエン／酢酸エチル／トリエチルアミン４９：４９：
２）に付し、化合物（Ａ１２）：

【０１１５】

【化４２】

【０１１６】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 9.22 (s, NH); 7.70 〔s, H
-C(6) 〕; 5.94〔d, J=1.5 Hz, H-C(1')〕; 3.78 (s, O
CH₃); 2.19 (s, CH₃); 1.36 (s, CH₃). MS: 706 (M+NH₄)⁺.

【０１１７】実施例Ａ１３：ジイソプロピルアンモニウ
ムテトラゾリド０．９３ｇ、２−シアノエチル−Ｎ，
Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトライソプロピルホスホラスジアミ
ダイト１．５１ｇ及び塩化メチレン３０mlの混合物に、
実施例Ａ１２で得た生成物２．７０ｇを加えた。反応混
合物を、室温で１７時間撹拌してから、ＮａＨＣＯ₃ の
飽和水溶液中に注加した。有機層をＭｇＳＯ₄ で乾燥し
て溶媒を留去した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフ
ィー（溶出液：エタノール／酢酸エチル１：１、トリエ
チルアミンを２％添加）に付した。得られた泡状物質を
メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル１mlに溶解し、０℃で
ペンタン中に滴下し、化合物（Ａ１３）：

【０１１８】

【化４３】

【０１１９】をジアステレオマー（１：１）として得
た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.74 〔s, H-C(6) 〕及び7.
68〔s, H-C(6) 〕; 6.08〔d, J=4 Hz, H-C(1) 〕; 5.97
〔d, J=4 Hz, H-C(1')〕.³¹ P-NMR (CDCl₃): 150.174及び 150.038. MS: 847 (M+H)⁺.

【０１２０】実施例Ａ１４：実施例Ａ８で得た生成物２
０．６ｇをＣＨ₂ Ｃｌ₂ の２００mlに溶解し、ジエチル
アミノ三フッ化硫黄（ＤＡＳＴ）４．３５ｇを５℃で滴
下した。反応混合物を５℃で３時間撹拌してから、Ｎａ
ＨＣＯ₃ の飽和水溶液３００ml中に注加し、ＣＨ₂ Ｃｌ
₂ で抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥して溶媒を留
去した。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（溶出
液：トルエン／酢酸エチル１：１）に付し、化合物（Ａ
１４）：

【０１２１】

【化４４】

【０１２２】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.68 〔s, H-C(6) 〕; 5.92
〔s, H-C(1')〕; 5.50 (AB, CH₂); 1.58 (s, CH₃). ¹⁹F
-NMR (CDCl₃): -223.74 (t, CH₂F). MS: 758 (M+NH₄)⁺.

【０１２３】実施例Ａ１５：実施例Ａ１４で得た生成物
１．３０ｇをＴＨＦの２６mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ（５
％）０．６５ｇを加えて、常圧下、２０℃で水素化し
た。０．５時間後、触媒を濾去し、濾液から溶媒を留去
した。残渣をメタノール（１５ml）に溶解し、ＮａＯＭ
ｅ／ＭｅＯＨ溶液でpH１１に調整した。２０時間撹拌
後、反応混合物を水２０ml中に注加し、酢酸エチルで抽
出した。抽出液から溶媒を留去して、化合物（Ａ１
５）：

【０１２４】

【化４５】

【０１２５】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 8.99 (s, NH); 7.61 〔s, H
-C(6) 〕; 5.88〔d, J=1.5 Hz, H-C(1')〕; 1.52 (s, C
H₃). MS: 621 (M+H)⁺.

【０１２６】実施例Ａ１６：（Ａ１１）、（Ａ１２）及
び（Ａ１３）の方法と同様にして、化合物（Ａ１５）を
ホスホラスアミダイト（Ａ１６）：

【０１２７】

【化４６】

【０１２８】のジアステレオマー（１：１）に変換し
た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.75 〔s, H-C(6) 〕及び7.
68〔s, H-C(6) 〕; 6.06〔d, J=4 Hz, H-C(1')〕及び6.
00〔d, J=4 Hz, H-C(1')〕.³¹ P-NMR (CDCl₃): 150.107.

【０１２９】実施例Ａ１７：化合物（Ａ６）２０．０ｇ
をＴＨＦの２００mlに溶解し、ＮａＨ（１００％）０．
８３ｇを加えて、Ｈ₂ の発生終了まで６０℃に維持し
た。冷後、この溶液をオートクレーブに入れ、トリフル
オロプロピン４８．０ｇを加えて、５０℃に加熱した。
４８時間後、反応混合物を半量まで濃縮し、水中に注加
して酢酸エチルで抽出した。抽出液をＭｇＳＯ₄ で乾燥
して溶媒を留去し、残渣をシリカゲルのクロマトグラフ
ィー（溶出液：ｎ−ヘキサン／酢酸エチル４：１）に付
し、化合物（Ａ１７）：

【０１３０】

【化４７】

【０１３１】を得た。¹ H-NMR (250 MHz, CDCl₃): 7.72 〔s, H-C(6) 〕; 6.80
(d, J=8 Hz, CH=C); 5.82〔s, H-C(1')〕; 5.48 (AB,
CH₂); 4.85 (m, CH=C); 1.58 (s, CH₃). MS: 789 (M+H)⁺.

【０１３２】実施例Ａ１８：化合物（Ａ１７）１０．０
ｇをＴＨＦの２００mlに溶解し、Ｐｄ／Ｃ２ｇを加え、
常圧下、室温で水素化した。１時間後、触媒を濾去し、
濾液から溶媒を留去した。次いで、実施例Ａ１５と同様
に、残渣をＮａＯＭｅで処理してからシリカゲルのクロ
マトグラフィー（溶出液：ｎ−ヘキサン／酢酸エチル
２：１）に付し、化合物（Ａ１８）：

【０１３３】

【化４８】

【０１３４】を得た。¹ H-NMR (CDCl₃): 9.00 (s, NH); 7.66〔s, H-C(6) 〕;
5.93〔d, J=1.5 Hz, H-C(1')〕; 1.61 (s, CH₃).¹⁹ F-NMR (CDCl₃): -65.23. MS: 705 (M+Cl)^-.

【０１３５】実施例Ａ１９：化合物（Ａ６）８．９ｇを
ＴＨＦの９０mlに溶解し、ＮａＨ（１００％）０．３４
ｇを加えて、短時間沸騰させた。Ｈ₂ の発生終了後、
１，１，２−トリクロロ−３，３，３−トリフルオロプ
ロペン５．１ｇを２０℃で滴下した。反応混合物を５５
℃で５時間撹拌してから、水中に注加し、酢酸エチルで
抽出した。抽出液から溶媒を留去し、残渣をシリカゲル
のクロマトグラフィー（溶出液：トルエン／酢酸エチル
４：１）に付し、化合物（Ａ１９）：

【０１３６】

【化４９】

【０１３７】をシス／トランス（約１：１）の混合物と
して得た。¹ H-NMR (CDCl₃): 7.63及び 7.60 〔それぞれ s, それぞ
れ H-C(6) 〕; 5.91及び5.87 〔それぞれ s, それぞれ
H-C(1')〕; 1.61及び 1.57 （それぞれ s, それぞれ CH
₃). MS: 891 (M+Cl)^-.

【０１３８】実施例Ａ２０：上記の実施例と同様に、化
合物（Ａ１８又はＡ１９）を脱保護し、ホスホラスアミ
ダイトに変換し、化合物（Ａ２０）：

【０１３９】

【化５０】

【０１４０】をジアステレオマー（１：１）として得
た。¹ H-NMR (CDCl₃): 8.6 ( 幅広 s, NH); 7.74 及び 7.69
〔それぞれ s, それぞれH-C(6) 〕; 5.97及び 5.94
〔それぞれ d, J=4 Hz, それぞれ H-C(1')〕.³¹ P-NMR (CDCl₃): 150.287及び 150.035 ppm.

【０１４１】実施例Ｂ：オリゴヌクレオチドの製造本発明のジメトキシトリチル化した３′−活性化〔３′
−（β−シアノエトキシ−ジ（イソプロピルアミノ）ホ
スホルアミダイト）〕ヌクレオシド及び同様の天然の活
性化ヌクレオシドを用い、オリゴヌクレオチドを固体の
支持相（Controlled Pore Glass 、ＣＰＧ）に結合し、
標準法〔"Oligonucleotide synthesis,a practical app
roach" M. J. Gait; IRL Press 1984 (Oxford-Washingt
on DC)〕により、ＤＮＡシンセサイザー（Applied Bios
ystems, Model 380 B, standard phosphorus amidite c
hemistry and iodoxidation ）で合成を行なった。最後
のヌクレオシドをカップリングさせた後、５′−位が保
護されたオリゴヌクレオチドを担体から一夜かけて切り
離し、同時に、濃アンモニア水で処理して他の保護基全
てを除去し、次いで、５０mM酢酸アンモニウム緩衝液
（pH７）／アセトニトリルを用いて逆相ＨＰＬＣにより
精製した。その後、８０％含水酢酸で２０分間処理して
５′−ジメトキシトリチル保護基を除去し、エタノール
を加えてオリゴヌクレオチドを沈殿させ、遠心分離して
単離した。オリゴヌクレオチドの純度は、ゲル電気泳動
（ポリアクリルアミド）で実証し、マトリックスアシス
トレーザー脱離飛行時間質量分光法（ＭＡＬＤＩ−ＴＯ
ＦＭＳ）により同定した。

【０１４２】実施例Ｃ１：親和性；オリゴヌクレオチド
（アンチセンス）と相補性オリゴリボヌクレオチド配列
（センス）との相互反応オリゴヌクレオチドと天然リボヌクレオチドの相当する
塩基−相補性オリゴマーとの相互反応は、ＵＶ融解曲
線、それから決定したＴｍ値を記録することにより特徴
付けた。この標準法は、例えばMarky,L.A., Breslauer,
K.J., Biopolymers 26:1601-1620(1987)に記載されてい
る。

【０１４３】１０mMリン酸緩衝液、１００mMＮａＣｌ、
０．１mMＥＤＴＡ、pH＝７．０に溶解したオリゴヌクレ
オチド及び相当する塩基−相補性天然オリゴリボヌクレ
オチドの溶液（ｃ＝４・１０^- ６M ／オリゴヌクレオチ
ド）を作り、２６０nmでの消光の変化を、温度の関数
（１５℃ないし９５℃）として記録した。融解曲線から
得たＴｍ値を測定した（第１表）。

【０１４４】

【表１】

【０１４５】

【表２】

【０１４６】実施例Ｄ２：特異性；オリゴヌクレオチド
と、不正ヌクレオシド（Ｙ）が挿入された塩基−相補性
オリゴリボヌクレオチドとの相互反応１０mMリン酸緩衝液、１００mMＮａＣｌ、０．１mMＥＤ
ＴＡ、pH＝７に溶解したオリゴヌクレオチド及び配列ｒ
（ＧＧＡＣＣＧＧＡＡＹＧＧＴＡＣＧＡＧ）を
有する相当する塩基−相補性オリゴリボヌクレオチドの
溶液（ｃ＝４・１０^- ６Ｍ／オリゴヌクレオチド）を作
り、２６０nmでの吸光の変化を、温度の関数（１５℃な
いし９５℃）として測定し、曲線からＴｍ値を決定し
た。結果を第２表に示した。

【０１４７】

【表３】

【０１４８】実施例Ｃ３：ヌクレアーゼ安定性；配列ｄ
（ＴＣＣＡＧＧＴＧＴＣＣＧｔｔｔＣ）を有す
る各種のオリゴヌクレオチドの酵素加水分解合成オリゴヌクレオチド及び相当する天然オリゴマー、
各々１４μg の分量を、１０％加熱不活性化したウシ胎
児血清２００μl 中、３７℃で培養した（ｃ＝７０μg/
ml）。０．５、１、２、４、６、２４及び４８時間後、
各反応溶液に９M 尿素２５μl 及びトリスボラート緩衝
液（pH７）を加えて反応を停止し、測定を行なうまで−
２０℃で貯蔵した。停止した反応液をポリアクリルアミ
ドゲル電気泳動によって分離し、開裂した生成物を、そ
れらのリン含量（リン酸画像法）によって同定した。特
定の時間（ｔ）において、完全に影響を受けていないオ
リゴヌクレオチド濃度（ｃ_n ^(t)）及び３′末端から天
然のＣ−単位を除去することによって得られたフラグメ
ント濃度（ｃ_n-1 ^(t)）の総計の、ｔ＝０時点における完
全に影響を受けていないオリゴヌクレオチドの最初の濃
度（ｃ_n ^(O) ）に対する比Ｒ（Ｒ＝（ｃ_n ^(t)＋ｃ_n-1 ^(t)
／ｃ_n ^(O)）を、時間に対しグラフ上に表示した。半減期
τ１／２、すなわちＲ＝０．５である時間を測定した：

【０１４９】

【表４】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ０７Ｈ 19/20 21/02 Ｇ０１Ｎ 33/50 Ｐ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）：【化１】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素若
しくは保護基であるか、又はＲ₁ は、これらの意義を有
し、かつＲ₂ は、リンを含むヌクレオチド架橋基を形成
する基であり；Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又は
その類似基であり；そしてＲ₃ は、ＯＨ、Ｆ又は（ＣＦ
₂ ）_n ＣＦ₃ （ここで、ｎは、０ないし７の数である）
である）で示される化合物。
【請求項２】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、各々、水素である請求
項１記載の化合物。
【請求項３】Ｒ₁ 及びＲ₂ が、同一の保護基である請
求項１記載の化合物。
【請求項４】プリン基又はその類似基としてのＢが、
式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（IIｄ）、
（IIｅ）又は（IIｆ）：【化２】（式中、Ｒ_b1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ₁
−Ｃ₁₂アルキルであり、Ｒ_b2、Ｒ_b3及びＲ_b5は、各々互
いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、
ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−
Ｎ（Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−アザシクロ
アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒド
ロキシ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アル
キル、Ｃ₁−Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁
−Ｃ₁₂アルキルチオ（ここで、ヒドロキシ及びアミノ基
は、非置換であるか又は保護基、フェニル、ベンジル、
１ないし２０個の炭素原子を有する第一級アミノ、若し
くは２ないし３０個の炭素原子を有する第二級アミノで
置換されている）であり、Ｒ_b4は、水素、ＣＮ又は−Ｃ
≡Ｃ−Ｒ_b7であり、そしてＲ_b6及びＲ_b7は、水素又はＣ
₁ −Ｃ₄ アルキルである）で示される基である請求項１
記載の化合物。
【請求項５】ヒドロキシ及びアミノ基の保護基が、Ｃ
₁ −Ｃ₈ アシルである請求項４記載の化合物。
【請求項６】第一級アミノが、１ないし１２個の炭素
原子を有し、そして第二級アミノが、２ないし１２個の
炭素原子を有する請求項４記載の化合物。
【請求項７】第一級アミノ及び第二級アミノが、式：
Ｒ_a1Ｒ_a2Ｎ〔式中、Ｒ_a1は、Ｈであるか、又は、独立し
て、Ｒ_a2の意義を有し、Ｒ_a2は、Ｃ₁ −Ｃ₂₀−アルキ
ル、−アミノアルキル若しくは−ヒドロキシアルキル；
カルボキシアルキル又はカルボアルコキシアルキル（こ
こで、カルボアルコキシ基は、２ないし８個の炭素原子
を有し、アルキル基は、１ないし６個の炭素原子を有す
る）；Ｃ₂ −Ｃ₂₀アルケニル；フェニル、モノ−若しく
はジ−（Ｃ₁ −Ｃ₄ −アルキル−若しくは−アルコキ
シ）フェニル、ベンジル、モノ−若しくはジ−（Ｃ₁ −
Ｃ₄−アルキル−若しくは−アルコキシ）ベンジル；又
は１，２−、１，３−若しくは１，４−イミダゾリル−
Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルであるか、あるいはＲ_a1とＲ_a2は、
一緒になって、テトラ−若しくはペンタ−メチレン、３
−オキサ−１，５−ペンチレン、−ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−Ｃ
Ｈ₂ ＣＨ₂ −又は−ＣＨ₂ ＣＨ₂ −ＮＲ_a3−ＣＨ₂ ＣＨ
₂ −（ここで、Ｒ_a3は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ −アルキルで
ある）であり、そしてアミノアルキルのアミノ基は、非
置換又は一つ若しくは二つのＣ₁ −Ｃ₄−アルキル又は
−ヒドロキシアルキル基で置換されており、ヒドロキシ
アルキルのヒドロキシ基は、遊離であるか又はＣ₁ −Ｃ
₄ −アルキルでエーテル化されている〕で示される基で
ある請求項４記載の化合物。
【請求項８】第一級アミノ及び第二級アミノが、メチ
ル−、エチル−、ジメチル−、ジエチル−、アリル−、
モノ−若しくはジ−（ヒドロキシエタ−２−イル）−、
フェニル−又はベンジル−、アセチル−、イソブチリル
−若しくはベンゾイル−アミノである請求項６記載の化
合物。
【請求項９】式（II）、（IIｂ）、（IIｃ）、（II
ｄ）及び（IIｅ）のＲ_b1が、水素である請求項４記載の
化合物。
【請求項１０】式（IIｄ）のＲ_b5が、水素である請求
項４記載の化合物。
【請求項１１】式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（II
ｃ）、（IIｄ）及び（IIｆ）のＲ_b2及びＲ_b3が、各々互
いに独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ
₂ 、ＮＨＯＨ、ＮＨＮＨ₂ 、メチルアミノ、ジメチルア
ミノ、ベンゾイルアミノ、メトキシ、エトキシ又はメチ
ルチオである請求項４記載の化合物。
【請求項１２】Ｂが、プリン基、又はアデニン、Ｎ−
メチルアデニン、Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−メチル
チオアデニン、２−アミノアデニン、６−ヒドロキシプ
リン、２−アミノ−６−クロロプリン、２−アミノ−６
−メチルチオプリン、グアニン及びＮ−イソブチリルグ
アニンの系列からのプリン類似基である請求項４記載の
化合物。
【請求項１３】ピリミジン基としての式（Ｉ）のＢ
が、式（III ）、（III ａ）、（III ｂ）若しくは（II
I ｃ）：【化３】（式中、Ｒ_b6は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり、Ｒ
_b8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−アザシクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオであり、ヒドロキシ及びアミノ基は、非置
換であるか又は保護基、フェニル、ベンジル、１ないし
２０個の炭素原子を有する第一級アミノ、２ないし３０
個の炭素原子を有する第二級アミノ、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アルケ
ニル又はＣ₂ −Ｃ₁₂アルキニルで置換されており、そし
て式（III ｂ）のＮＨ₂ 基は、非置換であるか又はＣ₁
−Ｃ₆ アルキル、ベンゾイル若しくは保護基で置換され
ている）で示されるウラシル、チミン若しくはシトシン
基であるか、又は式（III ）、（III ａ）、（III ｂ）
若しくは（III ｃ）で示される基のジヒドロ誘導体であ
る請求項１記載の化合物。
【請求項１４】Ｒ_b8が、Ｈ、Ｃ₁ −Ｃ₆ −アルキル若
しくは−ヒドロキシアルキル、Ｃ₂ −Ｃ₆ −アルケニル
若しくは−アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ₂ 、ベン
ゾイルアミノ、又はモノ−若しくはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アル
キルアミノである請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】Ｒ_b8が、Ｈ、Ｃ₁ −Ｃ₆ −アルキル若
しくは−アルコキシ若しくは−ヒドロキシアルキル、Ｃ
₂ −Ｃ₆ −アルケニル若しくは−アルキニル、Ｆ、Ｃ
ｌ、Ｂｒ、ＮＨ₂ 、ベンゾイルアミノ、又はモノ−若し
くはジ−Ｃ₁ −Ｃ₆ アルキルアミノである請求項１３記
載の化合物。
【請求項１６】Ｒ_b8が、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＮＨ
₂ 、ＮＨＣＨ₃ 、Ｎ（ＣＨ₃ ）₂ 、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキ
ル、Ｃ₂ −Ｃ₄ アルケニル−（１）又はＣ₂ −Ｃ₄ アル
キニル−（１）である請求項１４記載の化合物。
【請求項１７】Ｒ_b8が、Ｈ、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキル、Ｃ
₂ −Ｃ₄ アルケニル−（１）又はＣ₂ −Ｃ₄ アルキニル
−（１）、ＮＨ₂ 、ＮＨＣＨ₃ 又はＮ（ＣＨ₃ ）₂ であ
る請求項１５記載の化合物。
【請求項１８】ピリミジン類似の基としてのＢが、ウ
ラシル、チミン、シトシン、５−フルオロウラシル、５
−クロロウラシル、５−ブロモウラシル、ジヒドロウラ
シル、５−メチルシトシン、５−プロピンチミン及び５
−プロピンシトシンから誘導される請求項１記載の化合
物。
【請求項１９】ヌクレオチド架橋基を形成するリンを
含む基としてのＲ₂が、式（Ｐ₁ ）又は（Ｐ₂ ）：【化４】（式中、Ｙ_a は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₆ −Ｃ
₁₂アリール、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アラルキル、Ｃ₇ −Ｃ₂₀アルカ
リール、−ＯＲ_b 、−ＳＲ_b 、−ＮＨ₂ 、第一級アミ
ノ、第二級アミノ、Ｏ^- Ｍ⁺ 又はＳ^- Ｍ⁺ であり；Ｘ_a
は、酸素又は硫黄であり；Ｒ_a は、水素、Ｍ⁺ 、Ｃ₁ −
Ｃ₁₂アルキル、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アルケニル、Ｃ₆ −Ｃ₁₂アリ
ールであるか、又は基：Ｒ_a Ｏ−は、５員環であり、か
つ１ないし３のＮ原子を有するＮ−ヘテロアリール−Ｎ
−イルであり；Ｒ_b は、水素、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル又は
Ｃ₆ −Ｃ₁₂アリールであり；Ｍ⁺ は、Ｎａ⁺ 、Ｋ⁺ 、Ｌ
ｉ⁺ 、ＮＨ₄ ⁺ 又は第一級、第二級、第三級若しくは第
四級アンモニウムであり；そしてＹ_a 、Ｒ_a 及びＲ_b の
アルキル、アリール、アラルキル及びアルカリールは、
非置換であるか又はアルコキシ、アルキルチオ、ハロゲ
ン、−ＣＮ、−ＮＯ₂ 、フェニル、ニトロフェニル又は
ハロフェニルで置換されている）を有する請求項１記載
の化合物。
【請求項２０】Ｒ_a が、β−シアノエチルであり、そ
してＹ_a が、ジ（イソプロピル）アミノである請求項１
９記載の化合物。
【請求項２１】Ｒ₃ が、ＯＨである請求項１記載の化
合物。
【請求項２２】Ｒ₃ が、Ｆである請求項１記載の化合
物。
【請求項２３】Ｒ₃ が、（ＣＦ₂ ）_n ＣＦ₃ であり、
そしてｎが、０ないし７の数である請求項１記載の化合
物。
【請求項２４】ｎが、０である請求項２３記載の化合
物。
【請求項２５】式（Ｉ）：【化５】（式中、Ｒ₁ 及びＲ₂ は、各々互いに独立して、水素又
は保護基であり；Ｂはプリン若しくはピリミジン基又は
その類似基である）で示される化合物を製造する方法で
あって、（ａ）Ｒ₃ が、ＯＨである場合には、式（IVａ）：【化６】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、同一又は異なる保護基であ
り、Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又はその類似基
であり、そして塩基性基Ｂの官能基は、保護基によって
保護されている）で示される化合物を、不活性溶媒中、
式（Ａ）：【化７】（式中、Ｒ₄ は、Ｃ₁ −Ｃ₄ アルキルであり、Ｘは、Ｃ
ｌ、Ｂｒ、Ｉ、トシル−Ｏ又はメシル−Ｏである）で示
される化合物と反応させ、次いでエステル官能基をＮａ
ＢＨ₄ 又はＬｉＡｌＨ₄ で還元し、ここで生成したＯＨ
基は、Ｒ₁ で定義した基で一時的に保護し得；（ｂ）Ｒ₃ が、Ｆである場合には、式（Ｉ）（式中、Ｒ
₃ は、ＯＨである）で示される化合物を、式（Ｂ）：【化８】の化合物と反応させ；（ｃ）Ｒ₃ が、−（ＣＦ₂ ）_n −ＣＦ₃ （ここで、ｎ
は、０ないし７の数である）である場合には、式（IV
ａ）で示される化合物を、式（Ｃ）、（Ｄ）又は
（Ｅ）：【化９】で示される化合物と反応させ、次いで存在してもよい二
重結合又は塩素化二重結合を、ＣＨ₂ ＣＨ₂ （ＣＦ₂)_n
ＣＦ₃ へ接触還元し；（ｄ）Ｒ₃ が、ＯＨ、Ｆ又は−（ＣＦ₂ ）_n −ＣＦ₃
（ここで、ｎは、０ないし７の数である）である場合に
は、式（IVｂ）：【化１０】（式中、Ｒ₁₄及びＲ₁₅は、上記と同義であり、そしてＡ
は、脱離基である）で示される化合物を、（ａ）ないし
（ｃ）に記載された方法の一つにより、２′−ＯＨ基で
置換し、置換によって塩基性基Ｂを導入し；そして所望
により、保護基Ｒ ₁₄及びＲ₁₅を除去することを特徴とす
る方法。
【請求項２６】式（Ｉ）の化合物の同一又は異なるモ
ノマー単位を含むか、又は別の天然又は合成ヌクレオシ
ドの一つ以上と組合せて、式（Ｉ）の化合物の少なくと
も一つのモノマー単位を含む、２ないし２００モノマー
単位よりなるオリゴヌクレオチド製造のための、請求項
１記載の化合物の用途。
【請求項２７】２ないし１００モノマー単位を有する
オリゴヌクレオチド製造のための、請求項２６記載の用
途。
【請求項２８】２ないし５０モノマー単位を有するオ
リゴヌクレオチド製造のための、請求項２７記載の用
途。
【請求項２９】４ないし３０モノマー単位を有するオ
リゴヌクレオチド製造のための、請求項２８記載の用
途。
【請求項３０】式（Ｉ）の化合物の同一又は異なるモ
ノマー単位を有するオリゴヌクレオチド製造のための、
請求項２６記載の用途。
【請求項３１】式（Ｉ）の化合物の同一モノマー単位
及び天然又は合成ヌクレオシドの一つ以上のモノマー単
位を有するオリゴヌクレオチド製造のための、請求項２
６記載の用途。
【請求項３２】式（Ｖ）：【化１１】〔式中、ｘは、０ないし２００の数であり；Ｙは、ヌク
レオチド架橋基であり；Ｕ、Ｖ及びＷは、各々独立し
て、天然又は合成ヌクレオシドの、同一又は異なる基で
あり、基：Ｕ、Ｖ及び／又はＷの少なくとも一つは、式
（VI）：【化１２】（式中、Ｂは、プリン若しくはピリミジン基又はその類
似基であり、Ｒ₃ は、ＯＨ、Ｆ又は（ＣＦ₂ ）_n ＣＦ₃
（ここで、ｎは、０ないし７の数である）である）で示
される基である〕で示されるオリゴヌクレオチド。
【請求項３３】ｎが、０である請求項３２記載のオリ
ゴヌクレオチド。
【請求項３４】架橋基Ｙが、−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −、−Ｐ
（Ｏ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｓ）Ｓ^- −、−Ｐ（Ｏ）Ｒ₁₆−、
−Ｐ（Ｏ）ＮＲ₁₇Ｒ₁₈−又は−ＣＨ₂ −（ここで、Ｒ₁₆
は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₆ アルキルであり、そしてＲ₁₇及び
Ｒ₁₈は、各々互いに独立して、Ｒ₁₆の意義を有する）で
ある請求項３２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３５】架橋基Ｙが、−Ｐ（Ｏ）Ｏ^- −である
請求項３２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３６】ｘが、０ないし１００の数である請求
項３２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３７】ｘが、１ないし５０の数である請求項
３６記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３８】ｘが、３ないし２９の数である請求項
３７記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項３９】式（VI）の基が、ヌクレオチド配列の
末端及び／又はその配列中に結合している請求項３２記
載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４０】式（VI）の基が、天然又は合成ヌクレ
オシド基の間に結合している請求項３２記載のオリゴヌ
クレオチド。
【請求項４１】式（VI）の同一又は異なる、２ないし
５個の基が、交互に配列している、請求項３９又は４０
記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４２】総計で４ないし３０のヌクレオシド単
位及び式（VI）の１ないし１２個の基が存在する請求項
３２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４３】プリン基又はその類似基としてのＢ
が、式（II）、（IIａ）、（IIｂ）、（IIｃ）、（II
ｄ）、（IIｅ）又は（IIｆ）：【化１３】（式中、Ｒ_b1は、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＯＨ又は−Ｏ−Ｃ₁
−Ｃ₁₂アルキルであり；Ｒ_b2、Ｒ_b3及びＲ_b5は、各々互
いに独立して、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、
ＮＨＯＨ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−
Ｎ（Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロ
アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒド
ロキシ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アル
キル、Ｃ₁−Ｃ₁₂−アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁
−Ｃ₁₂アルキルチオ（ここで、ヒドロキシ及びアミノ
基は、非置換であるか又は保護基、フェニル、ベンジ
ル、１ないし２０の炭素原子を有する第一級アミノ若し
くは２ないし３０の炭素原子を有する第二級アミノで置
換されている）であり；Ｒ_b4は、水素、ＣＮ又は−Ｃ≡
Ｃ−Ｒ_b7であり；そしてＲ_b6及びＲ_b7は、水素又はＣ₁
−Ｃ₄ アルキルである）で示される基である請求項３２
記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４４】Ｂが、式（III ）、（III ａ）、（II
I ｂ）又は（III ｃ）：【化１４】（式中、Ｒ_b6は、Ｈ又はＣ₁ −Ｃ₄ アルキルであり；Ｒ
_b8は、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂ 、ＮＨＮＨ₂ 、ＮＨＯ
Ｈ、ＮＨＯ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ（Ｃ
₁ −Ｃ₁₂アルキル）₂ 、−Ｎ＝ＣＨ−Ｎ−シクロアルキ
ル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、ヒドロキシ
−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、アミノ−Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキル、
Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルコキシ、ベンジルオキシ又はＣ₁ −Ｃ₁₂
アルキルチオ（ここで、ヒドロキシ及びアミノ基は、非
置換であるか又は保護基、フェニル、ベンジル、１ない
し２０個の炭素原子を有する第一級アミノ、２ないし３
０個の炭素原子を有する第二級アミノ、Ｃ₂ −Ｃ₁₂アル
ケニル若しくはＣ₂ −Ｃ₁₂アルキニルで置換されてお
り、そして式（III ｂ）のＮＨ₂ は、非置換であるか又
はＣ₁ −Ｃ₆ アルキル、ベンゾイル又は保護基によって
置換されている）で示されるウラシル、チミン又はシト
シン基であるか、又は式（III ）、（III ａ）、（III
ｂ）又は（III ｃ）の基のジヒドロ誘導体である請求項
３２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４５】Ｒ₃ が、ＯＨである請求項３２記載の
オリゴヌクレオチド。
【請求項４６】Ｒ₃ が、Ｆである請求項３２記載のオ
リゴヌクレオチド。
【請求項４７】Ｒ₃ が、（ＣＦ₂ ）_n ＣＦ₃ である請
求項３２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４８】ｎが、０ないし３の数である請求項３
２記載のオリゴヌクレオチド。
【請求項４９】ｎが、０である請求項４８記載のオリ
ゴヌクレオチド。
【請求項５０】ウイルス性感染症又は遺伝子性疾患の
検出用診断薬としての、式（Ｖ）のオリゴヌクレオチド
の用途。
【請求項５１】体内におけるヌクレオチド配列との相
互反応による、ヒトを含む温血動物の疾患の治療に用い
る式（Ｖ）のオリゴヌクレオチド。
【請求項５２】有効量の、式（Ｉ）のヌクレオシド又
は式（Ｖ）のオリゴヌクレオチドそれ自体を、又はその
他の活性成分、薬学的担体、及び、適切な場合には賦形
剤と共に含む薬学的組成物。