JPH07291909A - 塩基不安定性アミノ保護基を用いるｐｎａの合成 - Google Patents
塩基不安定性アミノ保護基を用いるｐｎａの合成Info
- Publication number
- JPH07291909A JPH07291909A JP7054641A JP5464195A JPH07291909A JP H07291909 A JPH07291909 A JP H07291909A JP 7054641 A JP7054641 A JP 7054641A JP 5464195 A JP5464195 A JP 5464195A JP H07291909 A JPH07291909 A JP H07291909A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- formula
- group
- protecting group
- acid
- amino
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/47—One nitrogen atom and one oxygen or sulfur atom, e.g. cytosine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/52—Two oxygen atoms
- C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
- C07D473/18—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 one oxygen and one nitrogen atom, e.g. guanine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/32—Nitrogen atom
- C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
- C07K14/003—Peptide-nucleic acids (PNAs)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
- C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
- C08G69/02—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids
- C08G69/08—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids derived from amino-carboxylic acids
- C08G69/10—Alpha-amino-carboxylic acids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Polyamides (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【構成】 一般式のＰＮＡオリゴマー、例えばＮ−（９
−フルオレニルメチルオキシカルボニル−アミノエチ
ル）グリシンメチルエステル塩酸塩 の製造方法において、アミノ酸残基と構造成分 （ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、Ｂ′は環外
アミノ官能基が保護されているヌクレオチド塩基であ
る）を、アンカー基を備えたポリマー支持体上、固相法
に従って段階的にカップリングさせ、構築が完了したの
ちに、標的化合物を開裂剤を用いてポリマー支持体から
切断する方法、並びにＰＮＡオリゴマーの中間体および
それらの製造方法。 【効果】 ＰＮＡオリゴマーの構築に塩基不安定性の一
時的アミノ保護基を使用することにより、弱酸または中
等度の強さの酸を用いる固体支持体からのオリゴマーの
切断が可能になり、反応試薬の溶解性が改善される。
−フルオレニルメチルオキシカルボニル−アミノエチ
ル）グリシンメチルエステル塩酸塩 の製造方法において、アミノ酸残基と構造成分 （ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、Ｂ′は環外
アミノ官能基が保護されているヌクレオチド塩基であ
る）を、アンカー基を備えたポリマー支持体上、固相法
に従って段階的にカップリングさせ、構築が完了したの
ちに、標的化合物を開裂剤を用いてポリマー支持体から
切断する方法、並びにＰＮＡオリゴマーの中間体および
それらの製造方法。 【効果】 ＰＮＡオリゴマーの構築に塩基不安定性の一
時的アミノ保護基を使用することにより、弱酸または中
等度の強さの酸を用いる固体支持体からのオリゴマーの
切断が可能になり、反応試薬の溶解性が改善される。
Description
【０００１】ペプチド核酸（ＰＮＡ）はデオキシリボー
スホスフェート骨格がペプチドオリゴマーによって置換
されたＤＮＡ類縁体の化合物である。これまでに、文献
に報告されてきたその合成（Michael Egholm, Peter E.
Nielsen, Ole Buchardt & Rolf H. Berg, J. Am. Che
m. Soc, 1992, 114, 9677-9678；Ole Buchardt, Michae
l Egholm, Peter E. Nielsen & Rolf H. Berg, WO 92／
20702）では、モノマ−のアミノ基を一時的に保護する
ために、中等度の強度の酸、たとえばトリフルオロ酢酸
で除去される酸不安定性の三級ブチルオキシカルボニル
（Ｂｏｃ）保護基が用いられている。オリゴマーの固相
合成では、ついで慣用の、たとえばMerrifield（B. Mer
rifield, J. Am. Chem. Soc. 1963, 85, 2149）によっ
て記載されたペプチド合成法に従って行われる。この場
合、固体支持体からＰＮＡオリゴマーを切断するため
に、強酸、通常は液体フッ化水素が使用される。その結
果、これらの反応条件とくにトリフルオロ酢酸による反
復処理は、たとえば、多重ペプチドシンセサイザー［総
説：G. Jung & A. Sickinger, Angew. Chem. 104(1992)
375-391］が採用される場合のような開放反応容器での
反応は許容されない。
スホスフェート骨格がペプチドオリゴマーによって置換
されたＤＮＡ類縁体の化合物である。これまでに、文献
に報告されてきたその合成（Michael Egholm, Peter E.
Nielsen, Ole Buchardt & Rolf H. Berg, J. Am. Che
m. Soc, 1992, 114, 9677-9678；Ole Buchardt, Michae
l Egholm, Peter E. Nielsen & Rolf H. Berg, WO 92／
20702）では、モノマ−のアミノ基を一時的に保護する
ために、中等度の強度の酸、たとえばトリフルオロ酢酸
で除去される酸不安定性の三級ブチルオキシカルボニル
（Ｂｏｃ）保護基が用いられている。オリゴマーの固相
合成では、ついで慣用の、たとえばMerrifield（B. Mer
rifield, J. Am. Chem. Soc. 1963, 85, 2149）によっ
て記載されたペプチド合成法に従って行われる。この場
合、固体支持体からＰＮＡオリゴマーを切断するため
に、強酸、通常は液体フッ化水素が使用される。その結
果、これらの反応条件とくにトリフルオロ酢酸による反
復処理は、たとえば、多重ペプチドシンセサイザー［総
説：G. Jung & A. Sickinger, Angew. Chem. 104(1992)
375-391］が採用される場合のような開放反応容器での
反応は許容されない。
【０００２】本発明の目的は、ＰＮＡオリゴマーの構築
のために、塩基不安定性の一時的アミノ保護基を使用
し、弱いまたは中等度の強さの酸を用いる固体支持体か
らのオリゴマーの切断を可能にする合成方法を開発する
ことにある。
のために、塩基不安定性の一時的アミノ保護基を使用
し、弱いまたは中等度の強さの酸を用いる固体支持体か
らのオリゴマーの切断を可能にする合成方法を開発する
ことにある。
【０００３】本発明は、式Ｉ
【化９】 ［式中、Ｒ0は水素、Ｃ1〜Ｃ18−アルカノイル、Ｃ1〜
Ｃ18−アルコキシカルボニル、Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルカ
ノイル、Ｃ7〜Ｃ15−アロイル、Ｃ3〜Ｃ13−ヘテロアロ
イル、またはオリゴマーの細胞内取り込みに好ましいか
またはハイブリダイゼーションを誘導する標的核酸と相
互作用する基であり、Ａは、好ましくはグリシン、ロイ
シン、ヒスチジン、フェニルアラニン、システイン、リ
ジン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プ
ロリン、テトラヒドロキノリン−３−カルボン酸、オク
タヒドロインドール−２−カルボン酸およびＮ−（２−
アミノエチル）グリシンの群からのアミノ酸残基であ
り、ｋは０から２０まで、好ましくは０から１０までの
整数であり、Ｑは、好ましくはグリシン、ロイシン、ヒ
スチジン、フェニルアラニン、システイン、リジン、ア
ルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、
テトラヒドロキノリン−３−カルボン酸、オクタヒドロ
インドール−２−カルボン酸およびＮ−（２−アミノエ
チル）グリシンの群からのアミノ酸残基であり、ｌは０
から２０まで、好ましくは０から１０の整数であり、Ｂ
はヌクレオチド化学において慣用されるヌクレオチド塩
基、たとえばアデニン、シトシン、グアニン、チミンお
よびウラシルのような天然のヌクレオチド塩基、または
プリン、２,６−ジアミノプリン、７−デアザアデニ
ン、７−デアザグアニン、Ｎ4,Ｎ4−エタノシトシン、
Ｎ6,Ｎ6−エタノ−２,６−ジアミノプリン、５−メチル
シトシン、５−（Ｃ3〜Ｃ6）−アルキニル−ウラシル、
５−（Ｃ 3〜Ｃ6）−アルキニル−シトシン、５−フルオ
ロウラシルもしくはプソイドイソシトシン、２−ヒドロ
キシ−５−メチル−４−トリアゾロピリミジン、あるい
はそれらのプロドラッグ型であり、Ｑ0はヒドロキシ
ル、ＮＨ2またはＮＨＲ″（Ｒ″はＣ1〜Ｃ18−アルキ
ル、Ｃ2〜Ｃ18−アミノアルキルまたはＣ2〜Ｃ18−ヒド
ロキシアルキルである）であり、ｎは１〜５０、好まし
くは４〜３５の整数である］のＰＮＡオリゴマ−を製造
するにあたり、基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカー
基Ｌを備える式II Ｌ−［ポリマー］ （II） のポリマー支持体に、固相合成に慣用される方法を用い
て、いずれかのアミノ酸（Ｑ'）を最初にカップリング
させ、中間体として式III (Ｑ′)1−Ｌ−［ポリマー］ （III） （式中、Ｌは上に定義した通りであり、Ｑ′は必要に応
じて側鎖が保護されているアミノ酸Ｑであり、ｌは０か
ら２０までの整数である）を得、ついで、 ａ） 式IV
Ｃ18−アルコキシカルボニル、Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルカ
ノイル、Ｃ7〜Ｃ15−アロイル、Ｃ3〜Ｃ13−ヘテロアロ
イル、またはオリゴマーの細胞内取り込みに好ましいか
またはハイブリダイゼーションを誘導する標的核酸と相
互作用する基であり、Ａは、好ましくはグリシン、ロイ
シン、ヒスチジン、フェニルアラニン、システイン、リ
ジン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プ
ロリン、テトラヒドロキノリン−３−カルボン酸、オク
タヒドロインドール−２−カルボン酸およびＮ−（２−
アミノエチル）グリシンの群からのアミノ酸残基であ
り、ｋは０から２０まで、好ましくは０から１０までの
整数であり、Ｑは、好ましくはグリシン、ロイシン、ヒ
スチジン、フェニルアラニン、システイン、リジン、ア
ルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、プロリン、
テトラヒドロキノリン−３−カルボン酸、オクタヒドロ
インドール−２−カルボン酸およびＮ−（２−アミノエ
チル）グリシンの群からのアミノ酸残基であり、ｌは０
から２０まで、好ましくは０から１０の整数であり、Ｂ
はヌクレオチド化学において慣用されるヌクレオチド塩
基、たとえばアデニン、シトシン、グアニン、チミンお
よびウラシルのような天然のヌクレオチド塩基、または
プリン、２,６−ジアミノプリン、７−デアザアデニ
ン、７−デアザグアニン、Ｎ4,Ｎ4−エタノシトシン、
Ｎ6,Ｎ6−エタノ−２,６−ジアミノプリン、５−メチル
シトシン、５−（Ｃ3〜Ｃ6）−アルキニル−ウラシル、
５−（Ｃ 3〜Ｃ6）−アルキニル−シトシン、５−フルオ
ロウラシルもしくはプソイドイソシトシン、２−ヒドロ
キシ−５−メチル−４−トリアゾロピリミジン、あるい
はそれらのプロドラッグ型であり、Ｑ0はヒドロキシ
ル、ＮＨ2またはＮＨＲ″（Ｒ″はＣ1〜Ｃ18−アルキ
ル、Ｃ2〜Ｃ18−アミノアルキルまたはＣ2〜Ｃ18−ヒド
ロキシアルキルである）であり、ｎは１〜５０、好まし
くは４〜３５の整数である］のＰＮＡオリゴマ−を製造
するにあたり、基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカー
基Ｌを備える式II Ｌ−［ポリマー］ （II） のポリマー支持体に、固相合成に慣用される方法を用い
て、いずれかのアミノ酸（Ｑ'）を最初にカップリング
させ、中間体として式III (Ｑ′)1−Ｌ−［ポリマー］ （III） （式中、Ｌは上に定義した通りであり、Ｑ′は必要に応
じて側鎖が保護されているアミノ酸Ｑであり、ｌは０か
ら２０までの整数である）を得、ついで、 ａ） 式IV
【化１０】 （式中、ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、そし
てＢ′は環外アミノ官能基が保護されているヌクレオチ
ド塩基である）の化合物を、ペプチド化学において慣用
されるカップリング試薬を用いて、式IIIの化合物にカ
ップリングさせるか、または式IVの化合物を式IIのポリ
マー支持体に直接カップリングさせ、 ｂ） 一時的な、塩基不安定性保護基ＰＧを、適当な試
薬を用いて除去し、 ｃ） 工程ａおよびｂをｎ−１回反復し、 ｄ） Ａとして定義されたアミノ酸であるが、必要に応
じてそれらの側鎖が保護されたアミノ酸Ａ′をさらに、
固相合成に慣用される方法を用いてカップリングさせ、
ついでＲ0が水素ではない場合には慣用方法を用いて基
Ｒ0を導入し、 ｅ） 中間体として得られる式Ｉａ
てＢ′は環外アミノ官能基が保護されているヌクレオチ
ド塩基である）の化合物を、ペプチド化学において慣用
されるカップリング試薬を用いて、式IIIの化合物にカ
ップリングさせるか、または式IVの化合物を式IIのポリ
マー支持体に直接カップリングさせ、 ｂ） 一時的な、塩基不安定性保護基ＰＧを、適当な試
薬を用いて除去し、 ｃ） 工程ａおよびｂをｎ−１回反復し、 ｄ） Ａとして定義されたアミノ酸であるが、必要に応
じてそれらの側鎖が保護されたアミノ酸Ａ′をさらに、
固相合成に慣用される方法を用いてカップリングさせ、
ついでＲ0が水素ではない場合には慣用方法を用いて基
Ｒ0を導入し、 ｅ） 中間体として得られる式Ｉａ
【化１１】 （式中、Ｒ0、Ａ′、ｋ、Ｂ′、ｎ、Ｑ′およびｌは上
に定義した通りであり、Ｌはアンカー基である）の化合
物を開裂剤を用いてポリマー支持体から切断し、ヌクレ
オチド塩基の環外アミノ官能基およびアミノ酸の側鎖に
必要に応じて存在する保護基を同時にまたは別個に除去
することにより式Ｉの化合物を得る方法に関する。
に定義した通りであり、Ｌはアンカー基である）の化合
物を開裂剤を用いてポリマー支持体から切断し、ヌクレ
オチド塩基の環外アミノ官能基およびアミノ酸の側鎖に
必要に応じて存在する保護基を同時にまたは別個に除去
することにより式Ｉの化合物を得る方法に関する。
【０００４】オリゴマーの細胞内取り込みに好ましい基
の例には、各種の親油性基たとえば−(ＣＨ2)x−ＣＨ3
（式中、ｘは６〜１８の整数である）、−(ＣＨ2)n−Ｃ
Ｈ＝ＣＨ−(ＣＨ2)m−ＣＨ3（式中、ｎおよびｍは互い
に独立に６〜１２の整数である）、−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)4
−(ＣＨ2)9−ＣＨ3、−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)8−(ＣＨ2)13−
ＣＨ3および−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)7−(ＣＨ2)15−ＣＨ3、な
らびにステロイド残基たとえばコレステリル、またはビ
タミン残基たとえばビタミンＥ、ビタミンＡまたはビタ
ミンＤ、および天然のキャリアー系たとえば胆汁酸、葉
酸、２−（Ｎ−アルキル、Ｎ−アルコキシ）−アミノア
ントラキノンを使用する他のコンジュゲート、ならびに
マンノースおよびオリゴマーの受容体仲介エンドサイト
−シスに導く相当する受容体のペプチドたとえばＥＧＦ
（上皮増殖因子）、ブラジキニンおよびＰＤＧＦ（血小
板由来増殖因子）のコンジュゲートがある。標識基は、
たとえばダンシル−（Ｎ−ジメチル−１−アミノナフチ
ル−５−スルホニル−）誘導体、フルオレセイン誘導体
もしくはクマリン誘導体の蛍光基、またはたとえばアク
リジン誘導体の化学発光基ならびにＥＬＩＳＡを用いて
検出可能なジゴキシゲニン系、ビオチン／アビジン系を
用いて検出可能なビオチン基、または後で検出可能なレ
ポーター基によって誘導体化することが可能な官能基を
有する他のリンカーアームたとえば活性アクリジニウム
エステルと反応して化学発光プローブを形成するアミノ
アルキルリンカーを意味するものと理解すべきである。
の例には、各種の親油性基たとえば−(ＣＨ2)x−ＣＨ3
（式中、ｘは６〜１８の整数である）、−(ＣＨ2)n−Ｃ
Ｈ＝ＣＨ−(ＣＨ2)m−ＣＨ3（式中、ｎおよびｍは互い
に独立に６〜１２の整数である）、−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)4
−(ＣＨ2)9−ＣＨ3、−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)8−(ＣＨ2)13−
ＣＨ3および−(ＣＨ2ＣＨ2Ｏ)7−(ＣＨ2)15−ＣＨ3、な
らびにステロイド残基たとえばコレステリル、またはビ
タミン残基たとえばビタミンＥ、ビタミンＡまたはビタ
ミンＤ、および天然のキャリアー系たとえば胆汁酸、葉
酸、２−（Ｎ−アルキル、Ｎ−アルコキシ）−アミノア
ントラキノンを使用する他のコンジュゲート、ならびに
マンノースおよびオリゴマーの受容体仲介エンドサイト
−シスに導く相当する受容体のペプチドたとえばＥＧＦ
（上皮増殖因子）、ブラジキニンおよびＰＤＧＦ（血小
板由来増殖因子）のコンジュゲートがある。標識基は、
たとえばダンシル−（Ｎ−ジメチル−１−アミノナフチ
ル−５−スルホニル−）誘導体、フルオレセイン誘導体
もしくはクマリン誘導体の蛍光基、またはたとえばアク
リジン誘導体の化学発光基ならびにＥＬＩＳＡを用いて
検出可能なジゴキシゲニン系、ビオチン／アビジン系を
用いて検出可能なビオチン基、または後で検出可能なレ
ポーター基によって誘導体化することが可能な官能基を
有する他のリンカーアームたとえば活性アクリジニウム
エステルと反応して化学発光プローブを形成するアミノ
アルキルリンカーを意味するものと理解すべきである。
【０００５】代表的な標識基は以下の基である。
【化１２】
【０００６】オリゴマーの標的核酸とのハイブリダイゼ
ーションに際して、結合、架橋またはクリアリングによ
って核酸を攻撃する基はたとえば、アクリジン、ソラレ
ン、フェナントリジン、ナフトキノン、ダウノマイシン
またはクロロエチルアミノアリールのコンジュゲートで
ある。代表的な挿入残基および架橋残基は以下の通りで
ある。
ーションに際して、結合、架橋またはクリアリングによ
って核酸を攻撃する基はたとえば、アクリジン、ソラレ
ン、フェナントリジン、ナフトキノン、ダウノマイシン
またはクロロエチルアミノアリールのコンジュゲートで
ある。代表的な挿入残基および架橋残基は以下の通りで
ある。
【０００７】
【化１３】
【０００８】官能基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカ
ー基Ｌは、たとえば、George Barany，Nancy Kneib-Cor
donier & Daniel G．Mullen，Int．J．Peptide Protein
Res.，1987，30，705-739；Gregg B．Fields & Richar
d L．Noble，Int．J．PeptideProtein Res.，35，199
0，161-214；K．Barlos，D．Gatos，J．Hondrelis，J．
Matsoukas，G.J．Moore，W．Schaefer & P．Sotiriou，
Liebigs Ann．Chem．1989，951-955；H．Rink，Tetrahe
dron Lett．1987，3787-3790；G．Breiphol，J．Knolle
& R．Geiger，Tetrahedron Lett．1987，5647-5650；
G．Breipohl，J．Knolle & W．Stueber，Int．J．Pepti
de Protein Res.，1989，34，262-267；W．Stueber，
J．Knolle & G．Breipohl，Int．J．Peptide Protein R
es.，1989，34，215-220；またはEP-A-0 264 802（HOE
86／F259)，EP-A-0 287 882（HOE 86／F101）およびEP-
A-0 322 348（HOE 87／F386K）に記載されている。
ー基Ｌは、たとえば、George Barany，Nancy Kneib-Cor
donier & Daniel G．Mullen，Int．J．Peptide Protein
Res.，1987，30，705-739；Gregg B．Fields & Richar
d L．Noble，Int．J．PeptideProtein Res.，35，199
0，161-214；K．Barlos，D．Gatos，J．Hondrelis，J．
Matsoukas，G.J．Moore，W．Schaefer & P．Sotiriou，
Liebigs Ann．Chem．1989，951-955；H．Rink，Tetrahe
dron Lett．1987，3787-3790；G．Breiphol，J．Knolle
& R．Geiger，Tetrahedron Lett．1987，5647-5650；
G．Breipohl，J．Knolle & W．Stueber，Int．J．Pepti
de Protein Res.，1989，34，262-267；W．Stueber，
J．Knolle & G．Breipohl，Int．J．Peptide Protein R
es.，1989，34，215-220；またはEP-A-0 264 802（HOE
86／F259)，EP-A-0 287 882（HOE 86／F101）およびEP-
A-0 322 348（HOE 87／F386K）に記載されている。
【０００９】基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカー基
を備えたポリマ−支持体の例には、４−アルコキシベン
ジルアルコール樹脂、２−メトキシ−４−アルコキシベ
ンジルアルコール樹脂、２−クロロトリフェニルメチル
樹脂、２,４−ジメトキシベンズヒドリルアミン樹脂も
しくは４−（２′,４′−ジメトキシフェニルアミノメ
チル）フェノキシメチル樹脂、または第一アミノ基で官
能化されているポリマ−支持体、たとえばRpolyHIPE，R
Tentagel,RControlled Pore Glassもしくはポリスチレ
ン上に、基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカー基の一
つ、たとえば４−（４′−メトキシベンズヒドリル）フ
ェノキシ酢酸、４−（４′−メトキシベンズヒドリル）
フェノキシ酪酸、４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢
酸、２−メトキシ−４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢
酸、５−（４−アミノメチル−３,５−ジメトキシフェ
ノキシ）吉草酸、３−（アミノ−４−メトキシベンジ
ル）−４−メトキシフェニルプロピオン酸、５−（アミ
ノ−４−メトキシベンジル）−２,４−ジメトキシフェ
ニルプロピオン酸、４−（アミノ−（Ｃ2〜Ｃ8）アルキ
ルアミノカルボニルオキシメチル）フェノキシ酢酸、シ
ュウ酸モノ（アミノ−Ｃ 2〜Ｃ16−アルキル）エステル
またはコハク酸モノ（アミノ−Ｃ2〜Ｃ16−アルキル）
エステルがカップリングされたポリマー支持体がある。
を備えたポリマ−支持体の例には、４−アルコキシベン
ジルアルコール樹脂、２−メトキシ−４−アルコキシベ
ンジルアルコール樹脂、２−クロロトリフェニルメチル
樹脂、２,４−ジメトキシベンズヒドリルアミン樹脂も
しくは４−（２′,４′−ジメトキシフェニルアミノメ
チル）フェノキシメチル樹脂、または第一アミノ基で官
能化されているポリマ−支持体、たとえばRpolyHIPE，R
Tentagel,RControlled Pore Glassもしくはポリスチレ
ン上に、基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカー基の一
つ、たとえば４−（４′−メトキシベンズヒドリル）フ
ェノキシ酢酸、４−（４′−メトキシベンズヒドリル）
フェノキシ酪酸、４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢
酸、２−メトキシ−４−ヒドロキシメチルフェノキシ酢
酸、５−（４−アミノメチル−３,５−ジメトキシフェ
ノキシ）吉草酸、３−（アミノ−４−メトキシベンジ
ル）−４−メトキシフェニルプロピオン酸、５−（アミ
ノ−４−メトキシベンジル）−２,４−ジメトキシフェ
ニルプロピオン酸、４−（アミノ−（Ｃ2〜Ｃ8）アルキ
ルアミノカルボニルオキシメチル）フェノキシ酢酸、シ
ュウ酸モノ（アミノ−Ｃ 2〜Ｃ16−アルキル）エステル
またはコハク酸モノ（アミノ−Ｃ2〜Ｃ16−アルキル）
エステルがカップリングされたポリマー支持体がある。
【００１０】以下のアンカー基、または既にポリマ−支
持体に結合しているアンカー基の使用が好ましい。すな
わち、４−アルコキシベンジルアルコール樹脂、メトキ
シ−４−アルコキシベンジルアルコール樹脂もしくは２
−クロロトリフェニルメチル樹脂、または基Ｑ0を潜在
的様式で含有するアンカー基、４−（４′−メトキシベ
ンズヒドリル）フェノキシ酪酸、４−ヒドロキシメチル
フェノキシ酢酸、２−メトキシ−４−ヒドロキシメチル
フェノキシ酢酸、５−（アミノ−４−メトキシベンジ
ル）−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸、４−
（アミノ−（Ｃ2〜Ｃ8）−アルキルアミノカルボニルオ
キシメチル）フェノキシ酢酸、シュウ酸モノ（アミノ−
Ｃ2〜Ｃ16−アルキル）エステルもしくはコハク酸モノ
（アミノ−Ｃ2〜Ｃ16−アルキル）エステルがRTentage
l，RControlled Pore Glassもしくはポリスチレン型の
支持体上にカップリングされている樹脂であって第一ア
ミノ基で官能化されているポリマーである。
持体に結合しているアンカー基の使用が好ましい。すな
わち、４−アルコキシベンジルアルコール樹脂、メトキ
シ−４−アルコキシベンジルアルコール樹脂もしくは２
−クロロトリフェニルメチル樹脂、または基Ｑ0を潜在
的様式で含有するアンカー基、４−（４′−メトキシベ
ンズヒドリル）フェノキシ酪酸、４−ヒドロキシメチル
フェノキシ酢酸、２−メトキシ−４−ヒドロキシメチル
フェノキシ酢酸、５−（アミノ−４−メトキシベンジ
ル）−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸、４−
（アミノ−（Ｃ2〜Ｃ8）−アルキルアミノカルボニルオ
キシメチル）フェノキシ酢酸、シュウ酸モノ（アミノ−
Ｃ2〜Ｃ16−アルキル）エステルもしくはコハク酸モノ
（アミノ−Ｃ2〜Ｃ16−アルキル）エステルがRTentage
l，RControlled Pore Glassもしくはポリスチレン型の
支持体上にカップリングされている樹脂であって第一ア
ミノ基で官能化されているポリマーである。
【００１１】塩基不安定性アミノ保護基ＰＧの例として
は、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Fmoc）およ
び２,２−［ビス（４−ニトロフェニル）］エトキシカ
ルボニル（Bnpeoc）がある（W．Koenig，D．Buecher，
R．Knuettel，K．Lindner & A．Volk，Proceedings of
the Akabori Conference，Grainau-Eibsee／Bavaria，1
985年６月12〜13日、32頁およびR．Ramage，A.J．Blak
e，M.R．Florence，Th，Gray，G．Raphy & P.L．Roac
h，Tetrahedron 1991，37，8001-8024）、２−（２,４
−ジニトロフェニル）エトキシカルボニル(Dnpeoc)(M．
Acedo，F．Albericio，R．Eritja，Tetrahedron Lett．
1992，4989-4992）、２−メチルスルホニルエチルオキ
シカルボニル（Msc）および１−（４,４−ジメチル−
２,６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル（Dde）
（B.W．Bycroft，W.C．Chan，S.R．Chabra& N.D．Hom
e，J．Chem．Soc．Chem．Commun．1993，778-779）があ
る。Fmoc、BnpeocおよびDnpeocの使用が好ましく、Fmoc
保護基がとくにきわめて好ましく使用される。
は、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Fmoc）およ
び２,２−［ビス（４−ニトロフェニル）］エトキシカ
ルボニル（Bnpeoc）がある（W．Koenig，D．Buecher，
R．Knuettel，K．Lindner & A．Volk，Proceedings of
the Akabori Conference，Grainau-Eibsee／Bavaria，1
985年６月12〜13日、32頁およびR．Ramage，A.J．Blak
e，M.R．Florence，Th，Gray，G．Raphy & P.L．Roac
h，Tetrahedron 1991，37，8001-8024）、２−（２,４
−ジニトロフェニル）エトキシカルボニル(Dnpeoc)(M．
Acedo，F．Albericio，R．Eritja，Tetrahedron Lett．
1992，4989-4992）、２−メチルスルホニルエチルオキ
シカルボニル（Msc）および１−（４,４−ジメチル−
２,６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル（Dde）
（B.W．Bycroft，W.C．Chan，S.R．Chabra& N.D．Hom
e，J．Chem．Soc．Chem．Commun．1993，778-779）があ
る。Fmoc、BnpeocおよびDnpeocの使用が好ましく、Fmoc
保護基がとくにきわめて好ましく使用される。
【００１２】上述の合成方法の工程ａにおいて用いられ
た、ペプチド合成において慣用される活性化方法はたと
えば、Houben Wyle，Methoden der Organischen Chemie
（有機化学の方法）１５／２巻，Georg Thieme Verla
g，Stuttgart，1974に記載されている。その他の試薬た
とえばBOP（B．Castro，J.R．Dormoy，G．Evin & C．Se
lve，Tetrahedron Lett．1975，1219-1222)，PyBOP
（J．Coste，D．Le-Nguyen &B．Castro，Tetrahedron L
ett．1990，205-208)，BroP（J．Coste，M．-N．Dufou
r，A．Pantaloni & B．Castro，Tetrahedron Lett．199
0，669-672）またはPyBroP（J．Coste，E．Frerot，P．
Jouin & B．Castro，Tetrahedron Lett．1991，1967-19
70）およびウロニウム試薬たとえばHBTU（V．Dourtoglo
u，B．Gross，V．Lambropoulou，C．Zioudrou，Synthes
is，1984，572-574)，TBTU，TPTU，TSTU，TNTU（R．Kno
rr，A．Trezeciak，W．Bannwarth & D．Gillessen，Tet
rahedron Lett．1989，1927-1930)，TOTU(EP-A-0 460 4
46)，HATU(L.A．Carpino，J．Am．Chem．Soc．1993，11
5，4397-4398)，HAPyU，TAPipU（A．Ehrlich，S．Rothe
mund，M．Brudel，M．Beyermann，L.A．Carpino & M．B
ienert，Tetrahedron Lett．1993，4781-4784）またはB
OI（K．Akaji，N．Kuriyama，T．Kimura，Y．Fujiwara
& Y．Kiso，Tetrahedron Lett．1992，3177-3180)、ま
たは酸クロリドもしくは酸フルオリド（L.A．Carpino，
H.G．Chao，M．Beyermann & M．Bienert，J．Org．Che
m．56(1991)，2635)；J．-N．Bertho，A．Loffet，C．P
inel，F．Reuther & G．Sennyey，〔in E．Giralt &
D．Andreu(編)〕Peptides 1990，EscomScience Publish
ers B.V．1991，53-54頁；J．Green & K．Bradley，Tet
rahedron，1993，4141-4146)，２,４,６−メシチレンス
ルホニル−３−ニトロ−１,２,４−トリアゾリド（MSN
T)(B．Blankemeyer-Menge，M．Nimitz & R．Frank，Tet
rahedron Lett．1990，1701-1704)、２,５−ジフェニル
−２,３−ジヒドロ−３−オキソ−４−ヒドロキシチオ
フェンジオキシド(TDO)(R．Kirstgen，R.C．Sheppard，
W．Steglich，J．Chem．Soc．Chem．Commun．1987，187
0-1871)、あるいは活性化エステル（D．Hudson Peptide
Res．1990，51-55）が対応する参考文献に記載されて
いる。
た、ペプチド合成において慣用される活性化方法はたと
えば、Houben Wyle，Methoden der Organischen Chemie
（有機化学の方法）１５／２巻，Georg Thieme Verla
g，Stuttgart，1974に記載されている。その他の試薬た
とえばBOP（B．Castro，J.R．Dormoy，G．Evin & C．Se
lve，Tetrahedron Lett．1975，1219-1222)，PyBOP
（J．Coste，D．Le-Nguyen &B．Castro，Tetrahedron L
ett．1990，205-208)，BroP（J．Coste，M．-N．Dufou
r，A．Pantaloni & B．Castro，Tetrahedron Lett．199
0，669-672）またはPyBroP（J．Coste，E．Frerot，P．
Jouin & B．Castro，Tetrahedron Lett．1991，1967-19
70）およびウロニウム試薬たとえばHBTU（V．Dourtoglo
u，B．Gross，V．Lambropoulou，C．Zioudrou，Synthes
is，1984，572-574)，TBTU，TPTU，TSTU，TNTU（R．Kno
rr，A．Trezeciak，W．Bannwarth & D．Gillessen，Tet
rahedron Lett．1989，1927-1930)，TOTU(EP-A-0 460 4
46)，HATU(L.A．Carpino，J．Am．Chem．Soc．1993，11
5，4397-4398)，HAPyU，TAPipU（A．Ehrlich，S．Rothe
mund，M．Brudel，M．Beyermann，L.A．Carpino & M．B
ienert，Tetrahedron Lett．1993，4781-4784）またはB
OI（K．Akaji，N．Kuriyama，T．Kimura，Y．Fujiwara
& Y．Kiso，Tetrahedron Lett．1992，3177-3180)、ま
たは酸クロリドもしくは酸フルオリド（L.A．Carpino，
H.G．Chao，M．Beyermann & M．Bienert，J．Org．Che
m．56(1991)，2635)；J．-N．Bertho，A．Loffet，C．P
inel，F．Reuther & G．Sennyey，〔in E．Giralt &
D．Andreu(編)〕Peptides 1990，EscomScience Publish
ers B.V．1991，53-54頁；J．Green & K．Bradley，Tet
rahedron，1993，4141-4146)，２,４,６−メシチレンス
ルホニル−３−ニトロ−１,２,４−トリアゾリド（MSN
T)(B．Blankemeyer-Menge，M．Nimitz & R．Frank，Tet
rahedron Lett．1990，1701-1704)、２,５−ジフェニル
−２,３−ジヒドロ−３−オキソ−４−ヒドロキシチオ
フェンジオキシド(TDO)(R．Kirstgen，R.C．Sheppard，
W．Steglich，J．Chem．Soc．Chem．Commun．1987，187
0-1871)、あるいは活性化エステル（D．Hudson Peptide
Res．1990，51-55）が対応する参考文献に記載されて
いる。
【００１３】カルボジイミド、たとえばジシクロヘキシ
ルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミド
の使用が好ましい。ホスホニウム試薬、たとえばＰｙＢ
ＯＰもしくはＰｙＢｒｏＰ、ウロニウム試薬、たとえば
ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ、ＴＰＴＵ、ＴＳＴＵ、ＴＮＴＵ、
ＴＯＴＵもしくはＨＡＴＵ、ＢＯＩまたは酸クロリドも
しくは酸フルオリドも同様に好ましく使用される。
ルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミド
の使用が好ましい。ホスホニウム試薬、たとえばＰｙＢ
ＯＰもしくはＰｙＢｒｏＰ、ウロニウム試薬、たとえば
ＨＢＴＵ、ＴＢＴＵ、ＴＰＴＵ、ＴＳＴＵ、ＴＮＴＵ、
ＴＯＴＵもしくはＨＡＴＵ、ＢＯＩまたは酸クロリドも
しくは酸フルオリドも同様に好ましく使用される。
【００１４】この場合、カップリングは直接、樹脂に、
アミノ酸誘導体または式IVのＰＮＡモノマーを活性化試
薬とともに加え、必要に応じて添加物、たとえば１−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（W．Koeni
g，R．Geiger，Chem．Ber．103，788(1970)）もしくは
３−ヒドロキシ−４−オキソ−３,４−ジヒドロベンゾ
トリアゾール（ＨＯＯＢｔ）（W．Koenig，R．Geiger，
Chem．Ber．103，2034（1970)）を添加して行うことが
でき、または構造成分を別個に予め活性化して活性化エ
ステルを形成させ、活性化した種の溶液を適当な溶媒
中、カップリング可能なポリマーに添加することができ
る。
アミノ酸誘導体または式IVのＰＮＡモノマーを活性化試
薬とともに加え、必要に応じて添加物、たとえば１−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（W．Koeni
g，R．Geiger，Chem．Ber．103，788(1970)）もしくは
３−ヒドロキシ−４−オキソ−３,４−ジヒドロベンゾ
トリアゾール（ＨＯＯＢｔ）（W．Koenig，R．Geiger，
Chem．Ber．103，2034（1970)）を添加して行うことが
でき、または構造成分を別個に予め活性化して活性化エ
ステルを形成させ、活性化した種の溶液を適当な溶媒
中、カップリング可能なポリマーに添加することができ
る。
【００１５】塩基不安定性アミノ保護基ＰＧと適合性が
ある保護基は弱酸または中等度の強度の酸に不安定な保
護基、たとえばウレタン型たとえば三級ブチルオキシカ
ルボニル（Ｂｏｃ）、４−メトキシベンジルオキシカル
ボニル（Ｍｏｚ）もしくは３,５−ジメトキシフェニル
−２−プロピル−２−オキシカルボニル（Ｄｄｚ）、ま
たはトリチル型たとえばトリフェニルメチル（Ｔｒ
ｔ）、（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル（Ｍ
ｍｔ）、（４−メチルフェニル）ジフェニルメチル（Ｍ
ｔｔ）、ジ−（４−メトキシフェニル）フェニルメチル
（Ｄｍｔ）もしくは９−（９−フェニル）キサンテニル
（ｐｉｘｙｌ）が、環外アミノ機能が保護されるヌクレ
オチド塩基Ｂ′における環外アミノ機能を保護するため
に使用される．ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ト
リフェニルメチル（Ｔｒｔ）、（４−メトキシフェニ
ル）ジフェニルメチル（Ｍｍｔ）、（４−メチルフェニ
ル）ジフェニルメチル（Ｍｔｔ）またはジ−（４−メト
キシフェニル）フェニルメチル（Ｄｍｔ）の使用はとく
に好ましく、Ｔｒｔ、Ｍｔｔ、ＭｍｔおよびＤｍｔは驚
くべきことに、モノマーの溶解性に著しい改善を生じ
る。とくに、（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチ
ル（Ｍｍｔ）の使用はきわめて好ましい。
ある保護基は弱酸または中等度の強度の酸に不安定な保
護基、たとえばウレタン型たとえば三級ブチルオキシカ
ルボニル（Ｂｏｃ）、４−メトキシベンジルオキシカル
ボニル（Ｍｏｚ）もしくは３,５−ジメトキシフェニル
−２−プロピル−２−オキシカルボニル（Ｄｄｚ）、ま
たはトリチル型たとえばトリフェニルメチル（Ｔｒ
ｔ）、（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル（Ｍ
ｍｔ）、（４−メチルフェニル）ジフェニルメチル（Ｍ
ｔｔ）、ジ−（４−メトキシフェニル）フェニルメチル
（Ｄｍｔ）もしくは９−（９−フェニル）キサンテニル
（ｐｉｘｙｌ）が、環外アミノ機能が保護されるヌクレ
オチド塩基Ｂ′における環外アミノ機能を保護するため
に使用される．ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ト
リフェニルメチル（Ｔｒｔ）、（４−メトキシフェニ
ル）ジフェニルメチル（Ｍｍｔ）、（４−メチルフェニ
ル）ジフェニルメチル（Ｍｔｔ）またはジ−（４−メト
キシフェニル）フェニルメチル（Ｄｍｔ）の使用はとく
に好ましく、Ｔｒｔ、Ｍｔｔ、ＭｍｔおよびＤｍｔは驚
くべきことに、モノマーの溶解性に著しい改善を生じ
る。とくに、（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチ
ル（Ｍｍｔ）の使用はきわめて好ましい。
【００１６】塩基不安定性アミノ保護基ＰＧを除去する
ための試薬の例にはピペリジン、モルホリン、ヒドラジ
ンまたは１,８−ジアザビシクロ［５.４.０］ウンデカ
−７−エン（ＤＢＵ）のジメチルホルムアミド、Ｎ−メ
チルピロリジノン（ＮＭＰ）、アセトニトリル（ＡＣ
Ｎ）またはジクロロメタン（ＤＣＭ）中溶液がある。Ｄ
ＭＦまたはＮ−メチルピロリジノン中２０％ピペリジン
ならびにＤＭＦ中２％ＤＢＵおよび２％ピペリジンの混
合物、またはＤＭＦ中０.１ＭのＤＢＵもしくはジクロ
ロメタン中０.１ＭのＤＢＵの使用はＦｍｏｃ、Ｄｎｐ
ｅｏｃおよびＢｎｐｅｏｃ保護基にとくに好ましい。
ための試薬の例にはピペリジン、モルホリン、ヒドラジ
ンまたは１,８−ジアザビシクロ［５.４.０］ウンデカ
−７−エン（ＤＢＵ）のジメチルホルムアミド、Ｎ−メ
チルピロリジノン（ＮＭＰ）、アセトニトリル（ＡＣ
Ｎ）またはジクロロメタン（ＤＣＭ）中溶液がある。Ｄ
ＭＦまたはＮ−メチルピロリジノン中２０％ピペリジン
ならびにＤＭＦ中２％ＤＢＵおよび２％ピペリジンの混
合物、またはＤＭＦ中０.１ＭのＤＢＵもしくはジクロ
ロメタン中０.１ＭのＤＢＵの使用はＦｍｏｃ、Ｄｎｐ
ｅｏｃおよびＢｎｐｅｏｃ保護基にとくに好ましい。
【００１７】式Ｉａのアミノ酸残基Ｑ′およびＡ′のカ
ップリングは、好ましくは式IVの化合物にも使用される
同じアミノ保護基ＰＧをもつアミノ酸誘導体を用いて行
われるのが好ましい。存在するアミノ酸の側鎖の官能基
には、たとえばＢｏｃ、Ｍｏｚ、ＯｔＢｕ、ｔＢｕ、Ｔ
ｒｔ、ＭｔｒまたはＰｍｃのような弱酸ないし中等度の
強度の酸に不安定な保護基を付与する。この場合、ＰＧ
−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＰＧ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ、ＰＧ−
Ａｒｇ(Ｍｔｒ)−ＯＨ、ＰＧ−Ａｒｇ(Ｐｍｃ)−ＯＨ、
ＰＧ−Ａｒｇ(Ｔｒｔ)−ＯＨ、ＰＧ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−
ＯＨ、ＰＧ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ、ＰＧ−Ｇｌｕ
(ＯｔＢｕ)−ＯＨもしくはＰＧ−Ａｅｇ(Ｂｏｃ)−Ｏ
Ｈ、ＰＧ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ（ＰＧは上述の意味を
有する）のようなアミノ酸誘導体が好ましい。この場合
とくに、以下のアミノ酸誘導体、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｈ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒ
ｇ(Ｍｔｒ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｍｃ)−ＯＨ、
Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｔｒｔ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ
(Ｔｒｔ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ、
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ(ＯｔＢｕ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ａ
ｅｇ(Ｂｏｃ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ
がきわめて好ましい。
ップリングは、好ましくは式IVの化合物にも使用される
同じアミノ保護基ＰＧをもつアミノ酸誘導体を用いて行
われるのが好ましい。存在するアミノ酸の側鎖の官能基
には、たとえばＢｏｃ、Ｍｏｚ、ＯｔＢｕ、ｔＢｕ、Ｔ
ｒｔ、ＭｔｒまたはＰｍｃのような弱酸ないし中等度の
強度の酸に不安定な保護基を付与する。この場合、ＰＧ
−Ｇｌｙ−ＯＨ、ＰＧ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ、ＰＧ−
Ａｒｇ(Ｍｔｒ)−ＯＨ、ＰＧ−Ａｒｇ(Ｐｍｃ)−ＯＨ、
ＰＧ−Ａｒｇ(Ｔｒｔ)−ＯＨ、ＰＧ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−
ＯＨ、ＰＧ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ、ＰＧ−Ｇｌｕ
(ＯｔＢｕ)−ＯＨもしくはＰＧ−Ａｅｇ(Ｂｏｃ)−Ｏ
Ｈ、ＰＧ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ（ＰＧは上述の意味を
有する）のようなアミノ酸誘導体が好ましい。この場合
とくに、以下のアミノ酸誘導体、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｈ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒ
ｇ(Ｍｔｒ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｐｍｃ)−ＯＨ、
Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ(Ｔｒｔ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ
(Ｔｒｔ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ、
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ(ＯｔＢｕ)−ＯＨおよびＦｍｏｃ−Ａ
ｅｇ(Ｂｏｃ)−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ(Ｔｒｔ)−ＯＨ
がきわめて好ましい。
【００１８】上述の合成方法に用いられる式IV
【化１４】 （式中、ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、そし
てＢ′は環外アミノ官能基が保護されているヌクレオチ
ド塩基である）の化合物は新規である。
てＢ′は環外アミノ官能基が保護されているヌクレオチ
ド塩基である）の化合物は新規である。
【００１９】式IV
【化１５】 の化合物は、式Ｖ
【化１６】 （式中、ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、Ｒ1
は、メチル、エチル、ブチル、２−（メトキシエトキ
シ）エチル、ベンジル、好ましくはメチルまたは２−
（メトキシエトキシ）エチル、とくに好ましくはメチル
のエステル保護基である）の化合物を、式VI
は、メチル、エチル、ブチル、２−（メトキシエトキ
シ）エチル、ベンジル、好ましくはメチルまたは２−
（メトキシエトキシ）エチル、とくに好ましくはメチル
のエステル保護基である）の化合物を、式VI
【化１７】 （式中、Ｂ′は、ヌクレオチド塩基の環外アミノ官能基
が塩基不安定性アミノ保護基と適合性がある保護基、た
とえば弱酸に不安定なウレタン型たとえばＢｏｃもしく
はＭｏｚまたはトリチル型たとえばＴｒｔ、Ｍｍｔ、Ｄ
ｍｔもしくはｐｉｘｙｌのような保護基によって保護さ
れているヌクレオチド塩基である）の化合物と、適当な
溶媒たとえばＤＭＦ、アセトニトリル、ジクロロメタン
またはこれらの溶媒の混合物中、カルボジイミド、ホス
ホニウム試薬、ウロニウム試薬、酸ハライドまたは活性
化エステルのようなペプチド化学で慣用されるカップリ
ング試薬を用いて０〜４５℃、好ましくは室温で反応さ
せて式VII
が塩基不安定性アミノ保護基と適合性がある保護基、た
とえば弱酸に不安定なウレタン型たとえばＢｏｃもしく
はＭｏｚまたはトリチル型たとえばＴｒｔ、Ｍｍｔ、Ｄ
ｍｔもしくはｐｉｘｙｌのような保護基によって保護さ
れているヌクレオチド塩基である）の化合物と、適当な
溶媒たとえばＤＭＦ、アセトニトリル、ジクロロメタン
またはこれらの溶媒の混合物中、カルボジイミド、ホス
ホニウム試薬、ウロニウム試薬、酸ハライドまたは活性
化エステルのようなペプチド化学で慣用されるカップリ
ング試薬を用いて０〜４５℃、好ましくは室温で反応さ
せて式VII
【化１８】 （式中、ＰＧ、Ｂ′およびＲ1は上に定義した通りであ
る）の化合物を得、ついでエステル保護基のＲ1を、適
当な溶媒たとえばジオキサン、水、テトラヒドロフラ
ン、メタノール、水またはこれらの溶媒の混合物中、０
〜５０℃において、アルカリ金属水酸化物溶液を用いて
またはエステラーゼもしくはリパーゼを用いて酵素的に
除去して得られる。
る）の化合物を得、ついでエステル保護基のＲ1を、適
当な溶媒たとえばジオキサン、水、テトラヒドロフラ
ン、メタノール、水またはこれらの溶媒の混合物中、０
〜５０℃において、アルカリ金属水酸化物溶液を用いて
またはエステラーゼもしくはリパーゼを用いて酵素的に
除去して得られる。
【００２０】さらに式IVの化合物の合成には、式Ｖ
【化１９】 （式中、ＰＧは上述の意味を有する塩基不安定性アミノ
保護基であり、Ｒ1は水素または一時的なシリル保護基
たとえばトリメチルシリルである）の化合物を式VIII Ｂ′−ＣＨ2−ＣＯ−Ｒ2 （VIII） （式中、Ｂ′は式VIについて定義した通りであり、Ｒ2
は、ハロゲンたとえばフッ素、塩素もしくは臭素、また
は活性化エステル基たとえばＯＢｔ、ＯＯｂｔ、ＯＰｆ
ｐもしくはＯＮＳｕである）の化合物と、適当な溶媒た
とえばＤＭＦ、ＮＭＰ、アセトニトリル、ジクロロメタ
ンまたはこれらの溶媒の混合物中、０〜４０℃好ましく
は２０〜３０℃で反応させる方法を選択することもでき
る。この場合、式Ｖの化合物中の酸官能基の一時的保護
は、慣用のシリル化試薬たとえばビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミドとの反応によって行うことができる。
この一時的保護基は、式VIIIの化合物が反応したのちに
反応混合物に水またはアルコールを添加して除去され
る。
保護基であり、Ｒ1は水素または一時的なシリル保護基
たとえばトリメチルシリルである）の化合物を式VIII Ｂ′−ＣＨ2−ＣＯ−Ｒ2 （VIII） （式中、Ｂ′は式VIについて定義した通りであり、Ｒ2
は、ハロゲンたとえばフッ素、塩素もしくは臭素、また
は活性化エステル基たとえばＯＢｔ、ＯＯｂｔ、ＯＰｆ
ｐもしくはＯＮＳｕである）の化合物と、適当な溶媒た
とえばＤＭＦ、ＮＭＰ、アセトニトリル、ジクロロメタ
ンまたはこれらの溶媒の混合物中、０〜４０℃好ましく
は２０〜３０℃で反応させる方法を選択することもでき
る。この場合、式Ｖの化合物中の酸官能基の一時的保護
は、慣用のシリル化試薬たとえばビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミドとの反応によって行うことができる。
この一時的保護基は、式VIIIの化合物が反応したのちに
反応混合物に水またはアルコールを添加して除去され
る。
【００２１】式Ｖの化合物の合成には、アミノエチルグ
リシンまたは相当するアミノエチルグリシンエステルに
適当な塩基不安定性保護基が付与される。この場合、塩
基不安定性保護基は文献で知られている方法を一部改良
して用いて導入される。適当な試薬の例にはＦｍｏｃ−
Ｃｌ、Ｆｍｏｃ−ＯＮＳｕ、Ｂｎｐｅｏｃ−ＯＮＳｕ、
Ｄｎｐｅｏｃ−ＯＮＳｕ、Ｍｓｃ−Ｃｌおよび２−アセ
チルジメドン（Ｄｄｅ）がある。この反応では、アミノ
エチルグリシンの溶解性が改善できると同時に、慣用の
シリル化試薬たとえばビス（トリメチルシリル）アセト
アミドとの反応による酸官能基の保護が可能である。こ
の一時的な保護基は、保護基試薬との反応後、反応混合
物に水またはアルコールを添加することによって除去さ
れる。出発原料として用いられるアミノエチルグリシン
は文献で知られている方法により製造される（E.P．Hei
mer，H.E．Gallo-Torres，A.M．Felix，M．Ahmad，T.
J．Lambros，F．Scheidl & J．Meienhofer，Int．J．Pe
ptide Protein Res．23，1984，203-211）。
リシンまたは相当するアミノエチルグリシンエステルに
適当な塩基不安定性保護基が付与される。この場合、塩
基不安定性保護基は文献で知られている方法を一部改良
して用いて導入される。適当な試薬の例にはＦｍｏｃ−
Ｃｌ、Ｆｍｏｃ−ＯＮＳｕ、Ｂｎｐｅｏｃ−ＯＮＳｕ、
Ｄｎｐｅｏｃ−ＯＮＳｕ、Ｍｓｃ−Ｃｌおよび２−アセ
チルジメドン（Ｄｄｅ）がある。この反応では、アミノ
エチルグリシンの溶解性が改善できると同時に、慣用の
シリル化試薬たとえばビス（トリメチルシリル）アセト
アミドとの反応による酸官能基の保護が可能である。こ
の一時的な保護基は、保護基試薬との反応後、反応混合
物に水またはアルコールを添加することによって除去さ
れる。出発原料として用いられるアミノエチルグリシン
は文献で知られている方法により製造される（E.P．Hei
mer，H.E．Gallo-Torres，A.M．Felix，M．Ahmad，T.
J．Lambros，F．Scheidl & J．Meienhofer，Int．J．Pe
ptide Protein Res．23，1984，203-211）。
【００２２】アミノエチルグリシンを製造するための他
のもっと簡単な方法に、エチレンジアミンを用いるグリ
オキシル酸の還元アミノ化があり、その方法は、同時に
出願された発明の名称「アミノエチルグリシンの製造
法」（HOE 94／F 061、DE-P 4408 530.3）の出願に記載
されている。
のもっと簡単な方法に、エチレンジアミンを用いるグリ
オキシル酸の還元アミノ化があり、その方法は、同時に
出願された発明の名称「アミノエチルグリシンの製造
法」（HOE 94／F 061、DE-P 4408 530.3）の出願に記載
されている。
【００２３】式VIのヌクレオチド塩基−酢酸誘導体は相
当するヌクレオチド塩基またはそれらの環外アミノ官能
基が保護されているヌクレオチド塩基を、クロロ酢酸、
ブロモ酢酸、ヨード酢酸またはそれらのエステルでアル
キル化することによって得られる。同時に、一時的保護
基が、必要に応じて、選択的アルキル化のためにさらに
ヌクレオチド塩基に挿入される。塩基不安定性保護基Ｐ
Ｇと適合性のあるすべての保護基がヌクレオチド塩基の
保護基として使用できる。弱酸にに不安定なウレタン型
たとえばＢｏｃ、ＭｏｚもしくはＤｄｚまたはトリチル
型たとえばＴｒｔ、Ｍｍｔ、Ｄｍｔもしくｐｉｘｙｌの
ような保護基が環外アミノ官能基への使用に好ましい。
とくに好ましい保護基は弱酸にに不安定なトリチル型た
とえばＴｒｔ、ＭｍｔまたはＤｍｔ保護基であり、とく
にＭｍｔが好ましい。この後者の保護基は驚くべきこと
にモノマー構造成分の溶解性を著しく改善し、自動合成
装置たとえば多重ペプチドシンセサイザーに使用するた
めの溶液を調製できる。
当するヌクレオチド塩基またはそれらの環外アミノ官能
基が保護されているヌクレオチド塩基を、クロロ酢酸、
ブロモ酢酸、ヨード酢酸またはそれらのエステルでアル
キル化することによって得られる。同時に、一時的保護
基が、必要に応じて、選択的アルキル化のためにさらに
ヌクレオチド塩基に挿入される。塩基不安定性保護基Ｐ
Ｇと適合性のあるすべての保護基がヌクレオチド塩基の
保護基として使用できる。弱酸にに不安定なウレタン型
たとえばＢｏｃ、ＭｏｚもしくはＤｄｚまたはトリチル
型たとえばＴｒｔ、Ｍｍｔ、Ｄｍｔもしくｐｉｘｙｌの
ような保護基が環外アミノ官能基への使用に好ましい。
とくに好ましい保護基は弱酸にに不安定なトリチル型た
とえばＴｒｔ、ＭｍｔまたはＤｍｔ保護基であり、とく
にＭｍｔが好ましい。この後者の保護基は驚くべきこと
にモノマー構造成分の溶解性を著しく改善し、自動合成
装置たとえば多重ペプチドシンセサイザーに使用するた
めの溶液を調製できる。
【００２４】式Ｖの化合物の製造に用いられ、環外アミ
ノ官能基が保護されているヌクレオチド塩基Ｂ′は、相
当するヌクレオチド塩基から、それ自体文献から既知の
方法により、適当な保護基試薬たとえばＢｏｃ2Ｏ、Ｍ
ｏｚ−アジド、Ｔｒｔ−Ｃｌ、Ｍｔｔ−Ｃｌ、Ｍｍｔ−
Ｃｌ、Ｄｍｔ−Ｃｌまたはｐｉｘｙｌ−Ｃｌを用いて製
造される。必要に応じて、選択的アルキル化のために一
時的保護基をさらにヌクレオチド塩基に同時に挿入され
る。
ノ官能基が保護されているヌクレオチド塩基Ｂ′は、相
当するヌクレオチド塩基から、それ自体文献から既知の
方法により、適当な保護基試薬たとえばＢｏｃ2Ｏ、Ｍ
ｏｚ−アジド、Ｔｒｔ−Ｃｌ、Ｍｔｔ−Ｃｌ、Ｍｍｔ−
Ｃｌ、Ｄｍｔ−Ｃｌまたはｐｉｘｙｌ−Ｃｌを用いて製
造される。必要に応じて、選択的アルキル化のために一
時的保護基をさらにヌクレオチド塩基に同時に挿入され
る。
【００２５】式VIのヌクレオチド塩基−酢酸は、ペプチ
ド合成に慣用される上述の活性化方法を用いて、塩基不
安定性保護基で保護されている式Ｖのアミノエチルグリ
シン誘導体にカップリングされる。カルボジイミドたと
えばジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロ
ピルカルボジイミドの使用が好ましい。ホスホニウム試
薬たとえばＢＯＰ（B．Castro，J.R．Dormoy，G．Evin
& C．Selve，Tetrahedron Lett．1975，1219-1222）お
よびウロニウム試薬たとえばＨＢＴＵ（V．Dourtoglo
u，B．Gross，V．Lambropoulou，C．Zioudrou，Synthes
is，1984，572-574）；TBTU，TPTU，TSTU，TNTU（R．Kn
orr，A．Trezeciak，W．Bannwarth & D．Gillessen，Te
trahedron Lett．1989，1927-1930)、TOTU（EP-A-0 460
446)、または酸クロリドもしくは酸フルオリド（L.A．
Carpino，H.G．Chao，M．Beyermann& M．Bienert，J．O
rg．Chem．56 (1991)，2635)；J．-N．Bertho，A．Loff
et，C．Pinel，F．Reuther & G．Sennyey，〔in E．Gir
alt & D．Andreu(編)〕Peptides 1990，Escom Science
Publishers B.V．1991，53-54頁）も同様に好ましく使
用する。
ド合成に慣用される上述の活性化方法を用いて、塩基不
安定性保護基で保護されている式Ｖのアミノエチルグリ
シン誘導体にカップリングされる。カルボジイミドたと
えばジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロ
ピルカルボジイミドの使用が好ましい。ホスホニウム試
薬たとえばＢＯＰ（B．Castro，J.R．Dormoy，G．Evin
& C．Selve，Tetrahedron Lett．1975，1219-1222）お
よびウロニウム試薬たとえばＨＢＴＵ（V．Dourtoglo
u，B．Gross，V．Lambropoulou，C．Zioudrou，Synthes
is，1984，572-574）；TBTU，TPTU，TSTU，TNTU（R．Kn
orr，A．Trezeciak，W．Bannwarth & D．Gillessen，Te
trahedron Lett．1989，1927-1930)、TOTU（EP-A-0 460
446)、または酸クロリドもしくは酸フルオリド（L.A．
Carpino，H.G．Chao，M．Beyermann& M．Bienert，J．O
rg．Chem．56 (1991)，2635)；J．-N．Bertho，A．Loff
et，C．Pinel，F．Reuther & G．Sennyey，〔in E．Gir
alt & D．Andreu(編)〕Peptides 1990，Escom Science
Publishers B.V．1991，53-54頁）も同様に好ましく使
用する。
【００２６】上述のＰＮＡは、適当な支持材料（たとえ
ばポリスチレンまたはポリオキシエチレンで変性された
ポリスチレン、たとえば RTentagelまたは RControlled
Pore Glass）で、基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカ
ー基Ｌが与えられている支持体上、固相合成によって構
築される。固相合成はＰＮＡのＣ−末端において、塩基
不安定性保護基で保護されたモノマーまたは必要に応じ
てその側鎖官能基が保護されたアミノ酸の適当な樹脂へ
のカップリングによって開始する。
ばポリスチレンまたはポリオキシエチレンで変性された
ポリスチレン、たとえば RTentagelまたは RControlled
Pore Glass）で、基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカ
ー基Ｌが与えられている支持体上、固相合成によって構
築される。固相合成はＰＮＡのＣ−末端において、塩基
不安定性保護基で保護されたモノマーまたは必要に応じ
てその側鎖官能基が保護されたアミノ酸の適当な樹脂へ
のカップリングによって開始する。
【００２７】樹脂にカップリングされた構造成分の塩基
不安定性保護基を上述のような適当な試薬を用いて除去
したのち、以後の保護された構造成分（ＲＮＡモノマ−
およびアミノ酸誘導体）を順次、所望の配列で互いにカ
ップリングさせる。中間体として生じ、Ｎ末端が塩基不
安定性保護基で保護されているＰＮＡ樹脂は、次のＰＮ
Ａモノマーとの連結の前に、上述の試薬によって脱保護
される。
不安定性保護基を上述のような適当な試薬を用いて除去
したのち、以後の保護された構造成分（ＲＮＡモノマ−
およびアミノ酸誘導体）を順次、所望の配列で互いにカ
ップリングさせる。中間体として生じ、Ｎ末端が塩基不
安定性保護基で保護されているＰＮＡ樹脂は、次のＰＮ
Ａモノマーとの連結の前に、上述の試薬によって脱保護
される。
【００２８】アミノ酸誘導体のカップリングまたは上述
の活性化試薬の１種による活性化は、ジメチルホルムア
ミド、Ｎ−メチルピロリジノン、アセトニトリルもしく
はメチレンクロリド、または上記溶媒の混合物中におい
て実施できる。活性化された誘導体は通常１.５〜１０
倍過剰で使用される。不完全なカップリングが生じる場
合には、カップリングさせたばかりの構造成分のアミノ
基を脱保護することなく、そのカップリング反応を反復
する。
の活性化試薬の１種による活性化は、ジメチルホルムア
ミド、Ｎ−メチルピロリジノン、アセトニトリルもしく
はメチレンクロリド、または上記溶媒の混合物中におい
て実施できる。活性化された誘導体は通常１.５〜１０
倍過剰で使用される。不完全なカップリングが生じる場
合には、カップリングさせたばかりの構造成分のアミノ
基を脱保護することなく、そのカップリング反応を反復
する。
【００２９】基Ｒ0がカルボン酸官能基を含有する場合
に適用可能な基Ｒ0の挿入方法の例が、アミノ酸とＰＮ
Ａモノマーのカップリングのための上述の方法である。
他の方法には、イソシアネートたとえばフェニルイソシ
アネート、イソチオシアネートたとえばフルオレセイン
イソチオシアネート、クロロギ酸誘導体たとえばクロロ
ホルミルカルバゾール、活性化炭酸エステルたとえばコ
レステリル−４−ニトロフェニルカーボネートもしくは
アクリジニウムスクシンイミジルカーボネート、スルホ
ニルクロリドたとえばダンシルクロリド等の反応があ
る。
に適用可能な基Ｒ0の挿入方法の例が、アミノ酸とＰＮ
Ａモノマーのカップリングのための上述の方法である。
他の方法には、イソシアネートたとえばフェニルイソシ
アネート、イソチオシアネートたとえばフルオレセイン
イソチオシアネート、クロロギ酸誘導体たとえばクロロ
ホルミルカルバゾール、活性化炭酸エステルたとえばコ
レステリル−４−ニトロフェニルカーボネートもしくは
アクリジニウムスクシンイミジルカーボネート、スルホ
ニルクロリドたとえばダンシルクロリド等の反応があ
る。
【００３０】上述の合成操作は、通常使用されるプログ
ラムをわずかに改変すれば、市販の自動シンセサイザー
たとえばペプチドシンセサイザー、多重ペプチドシンセ
サイザーまたはＤＮＡシンセサイザーを用いて行うこと
もできる。上述の方法でＰＮＡが合成されたならば、Ｐ
ＮＡオリゴマ−は、適当な試薬たとえば弱酸または中等
度の強度の酸に不安定なアンカー基の場合にはトリフル
オロ酢酸を用いて、樹脂から切断することができる。使
用されたリンカーおよび保護基の性質に依存して、ヌク
レオチド塩基のオリゴマーと付加的な側鎖保護基が同時
に切断される。これらの環境下には開裂試薬はまた適当
な溶媒たとえばメチレンクロリドで希釈して使用するこ
とができる。必要に応じて、副反応を回避するために、
この開裂試薬にはさらに添加物を加えることもできる。
この場合に適当な陽イオン捕獲剤は、フェノール、クレ
ゾール、チオクレゾール、アニソール、チオアニソー
ル、エタンジチオール、ジメチルスルフィド、エチル−
メチル−スルフィド、トリエチルシラン、トリイソプロ
ピルシランのような物質または固相ペプチド合成に慣用
される類似の添加物である。これらの添加物は、個々に
またはこれらの補助物質の２種以上の混合物として添加
できる。
ラムをわずかに改変すれば、市販の自動シンセサイザー
たとえばペプチドシンセサイザー、多重ペプチドシンセ
サイザーまたはＤＮＡシンセサイザーを用いて行うこと
もできる。上述の方法でＰＮＡが合成されたならば、Ｐ
ＮＡオリゴマ−は、適当な試薬たとえば弱酸または中等
度の強度の酸に不安定なアンカー基の場合にはトリフル
オロ酢酸を用いて、樹脂から切断することができる。使
用されたリンカーおよび保護基の性質に依存して、ヌク
レオチド塩基のオリゴマーと付加的な側鎖保護基が同時
に切断される。これらの環境下には開裂試薬はまた適当
な溶媒たとえばメチレンクロリドで希釈して使用するこ
とができる。必要に応じて、副反応を回避するために、
この開裂試薬にはさらに添加物を加えることもできる。
この場合に適当な陽イオン捕獲剤は、フェノール、クレ
ゾール、チオクレゾール、アニソール、チオアニソー
ル、エタンジチオール、ジメチルスルフィド、エチル−
メチル−スルフィド、トリエチルシラン、トリイソプロ
ピルシランのような物質または固相ペプチド合成に慣用
される類似の添加物である。これらの添加物は、個々に
またはこれらの補助物質の２種以上の混合物として添加
できる。
【００３１】開裂が行われたならば、得られた粗製のオ
リゴマーは、たとえばＨＰＬＣ、イオン交換クロマトグ
ラフィー等、ペプチドまたはヌクレオチド化学に慣用さ
れる方法を用いて精製する。アミノ酸について使用する
略号はペプチド化学において慣用される、Eur．J．Bioc
hem．138，9（1984）に記載された三文字のコードに従
う。使用される他の略号を以下に掲げる。
リゴマーは、たとえばＨＰＬＣ、イオン交換クロマトグ
ラフィー等、ペプチドまたはヌクレオチド化学に慣用さ
れる方法を用いて精製する。アミノ酸について使用する
略号はペプチド化学において慣用される、Eur．J．Bioc
hem．138，9（1984）に記載された三文字のコードに従
う。使用される他の略号を以下に掲げる。
【００３２】ＡＣＮ＝ アセトニトリル Ａｅｇ＝ Ｎ−（２−アミノエチル）グリシル、−ＮＨ
−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ2−ＣＯ− Ａｅｇ（ＡMmt）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（９−（Ｎ6−４−メトキシフェニルジフェニル）ア
デノシル）アセチル）グリシル Ａｅｇ（ＣMmt）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（１−（Ｎ4−４−メトキシフェニルジフェニル）シ
トシル）アセチル）グリシル Ａｅｇ（Ｔ）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（１−チミニル）アセチル）グリシル Ａｅｇ（ＴBom）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（１−（Ｎ3−ベンジルオキシメチル）チミニル）ア
セチル）グリシル Ａｅｇ（Ｔtriazolo）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−
Ｎ−（（２−ヒドロキシ−５−メチル−４−トリアゾロ
ピリミジン−１−イル）アセチル）グリシル Ｂｎｐｅｏｃ＝ ２,２−［ビス（４−ニトロフェニ
ル）］エトキシカルボニル）三級ブチルオキシカルボニ
ル Ｂｏｃ＝ 三級ブチルオキシカルボニル ＢＯＩ＝ ２−（ベンゾトリアゾール−１−イル）オキ
シ−１,３−ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオ
ロホスフェート
−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ2−ＣＯ− Ａｅｇ（ＡMmt）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（９−（Ｎ6−４−メトキシフェニルジフェニル）ア
デノシル）アセチル）グリシル Ａｅｇ（ＣMmt）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（１−（Ｎ4−４−メトキシフェニルジフェニル）シ
トシル）アセチル）グリシル Ａｅｇ（Ｔ）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（１−チミニル）アセチル）グリシル Ａｅｇ（ＴBom）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−
（（１−（Ｎ3−ベンジルオキシメチル）チミニル）ア
セチル）グリシル Ａｅｇ（Ｔtriazolo）＝ Ｎ−（２−アミノエチル）−
Ｎ−（（２−ヒドロキシ−５−メチル−４−トリアゾロ
ピリミジン−１−イル）アセチル）グリシル Ｂｎｐｅｏｃ＝ ２,２−［ビス（４−ニトロフェニ
ル）］エトキシカルボニル）三級ブチルオキシカルボニ
ル Ｂｏｃ＝ 三級ブチルオキシカルボニル ＢＯＩ＝ ２−（ベンゾトリアゾール−１−イル）オキ
シ−１,３−ジメチルイミダゾリジニウムヘキサフルオ
ロホスフェート
【００３３】Ｂｏｍ＝ ベンジルオキシメチル ＢＯＰ＝ ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス
（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフ
ェート ＢｒｏＰ＝ ブロモトリス（ジメチルアミノ）ホスホニ
ウムヘキサフルオロホスフェート ＢＳＡ＝ Ｎ,Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトア
ミド Ｂｕｔ＝ 三級ブチル Ｂｚｌ＝ ベンジル Ｃｌ−Ｚ＝ ４−クロロベンジルオキシカルボニル ＣＰＧ＝ 制御多孔ガラス ＤＢＵ＝ １,８−ジアザビシクロ［５.４.０］ウンデ
カ−７−エン ＤＣＭ＝ ジクロロメタン Ｄｄｅ＝ １−（４,４−ジメチル−２,６−ジオキシシ
クロヘキシリデン）エチル Ｄｄｚ＝ ３,５−ジメトキシフェニル−２−プロピル
−２−オキシカルボニル ＤＭＦ＝ ジメチルホルムアミド ＤＭＴ＝ ４,４′−ジメトキシトリフェニルメチル Ｄｍｔ＝ ジ−（４−メトキシフェニル）フェニルメチ
ル Ｄｎｐｅｏｃ＝ ２−（２,４−ジニトロフェニル）エ
トキシカルボニル ＦＡＭ＝ フルオレセイン残基 Ｆｍｏｃ＝ ９−フルオレニルメチルオキシカルボニル Ｈ−Ａｅｇ−ＯＨ＝ Ｎ−（２−アミノエチル）グリシ
ン
（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフ
ェート ＢｒｏＰ＝ ブロモトリス（ジメチルアミノ）ホスホニ
ウムヘキサフルオロホスフェート ＢＳＡ＝ Ｎ,Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトア
ミド Ｂｕｔ＝ 三級ブチル Ｂｚｌ＝ ベンジル Ｃｌ−Ｚ＝ ４−クロロベンジルオキシカルボニル ＣＰＧ＝ 制御多孔ガラス ＤＢＵ＝ １,８−ジアザビシクロ［５.４.０］ウンデ
カ−７−エン ＤＣＭ＝ ジクロロメタン Ｄｄｅ＝ １−（４,４−ジメチル−２,６−ジオキシシ
クロヘキシリデン）エチル Ｄｄｚ＝ ３,５−ジメトキシフェニル−２−プロピル
−２−オキシカルボニル ＤＭＦ＝ ジメチルホルムアミド ＤＭＴ＝ ４,４′−ジメトキシトリフェニルメチル Ｄｍｔ＝ ジ−（４−メトキシフェニル）フェニルメチ
ル Ｄｎｐｅｏｃ＝ ２−（２,４−ジニトロフェニル）エ
トキシカルボニル ＦＡＭ＝ フルオレセイン残基 Ｆｍｏｃ＝ ９−フルオレニルメチルオキシカルボニル Ｈ−Ａｅｇ−ＯＨ＝ Ｎ−（２−アミノエチル）グリシ
ン
【００３４】ＨＡＰｙＵ＝ Ｏ−（７−アザベンゾトリ
アゾール−１−イル）−１,１,３,３−ビス（テトラメ
チレン）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート ＨＡＴＵ＝ Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−
イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサ
フルオロホスフェート ＨＢＴＵ＝ Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−
１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロ
ホスフェート ＨＯＢｔ＝ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＨＯＮＳｕ＝ Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド ＨＯＯｂｔ＝ ３−ヒドロキシ−４−オキソ−３,４−
ジヒドロベンゾトリアジン ＭｅＯＢｚ＝ ４−メトキシベンゾイル Ｍｍｔ＝ ４−メトキシトリフェニルメチル Ｍｏｚ＝ ４−メトキシベンジルオキシカルボニル ＭＳＮＴ＝ ２,４,６−メシチレンスルホニル−３−ニ
トロ−１,２,４−トリアゾリド Ｍｔｔ＝ ４−（メチルフェニル）ジフェニルメチル ＮＢＡ＝ ニトロベンジルアルコ−ル ＮＭＰ＝ Ｎ−メチルピロリジン Ｐｉｘｙｌ＝ ９−（９−フェニル）キサンテニル ＰｙＢＯＰ＝ ベンゾトリアゾリル−１−オキシトリピ
ロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート ＰｙＢｒｏＰ＝ ブロモトリピロリジノホスホニウムヘ
キサフルオロホスフェート
アゾール−１−イル）−１,１,３,３−ビス（テトラメ
チレン）ウロニウムヘキサフルオロホスフェート ＨＡＴＵ＝ Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−
イル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサ
フルオロホスフェート ＨＢＴＵ＝ Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−
１,１,３,３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロ
ホスフェート ＨＯＢｔ＝ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＨＯＮＳｕ＝ Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド ＨＯＯｂｔ＝ ３−ヒドロキシ−４−オキソ−３,４−
ジヒドロベンゾトリアジン ＭｅＯＢｚ＝ ４−メトキシベンゾイル Ｍｍｔ＝ ４−メトキシトリフェニルメチル Ｍｏｚ＝ ４−メトキシベンジルオキシカルボニル ＭＳＮＴ＝ ２,４,６−メシチレンスルホニル−３−ニ
トロ−１,２,４−トリアゾリド Ｍｔｔ＝ ４−（メチルフェニル）ジフェニルメチル ＮＢＡ＝ ニトロベンジルアルコ−ル ＮＭＰ＝ Ｎ−メチルピロリジン Ｐｉｘｙｌ＝ ９−（９−フェニル）キサンテニル ＰｙＢＯＰ＝ ベンゾトリアゾリル−１−オキシトリピ
ロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート ＰｙＢｒｏＰ＝ ブロモトリピロリジノホスホニウムヘ
キサフルオロホスフェート
【００３５】ＴＡＰｉｐｕ＝ Ｏ−（７−アザベンゾト
リアゾール−１−イル）−１,１,３,３−ビス（ペンタ
メチレン）ウロニウムテトラフルオロボレート ＴＢＴＵ＝ Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−
１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロ
ボレート ｔＢｕ＝ 三級ブチル ｔＢｕＢｚ＝ ４−三級ブチルベンゾイル ＴＤＢＴＵ＝ Ｏ−（３,４−ジヒドロ−４−オキソ−
１,２,３−ベンゾトリアジン−３−イル）−１,１,３,
３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート ＴＤＯ＝ ２,５−ジフェニル−２,３−ジヒドロ−３−
オキソ−４−ヒドロキシチオフェンジオキシド ＴＦＡ＝ トリフルオロ酢酸 ＴＨＦ＝ テトラヒドロフラン ＴＮＴＵ＝ Ｏ−（５−ノルボルネン−２,３−ジカル
ボキシイミド）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウ
ムテトラフルオロボレート ＴＯＴＵ＝ Ｏ−[（シアノ（エトキシカルボニル）メ
チレン）アミノ］−１,１,３,３−テトラメチルウロニ
ウムテトラフルオロボレート ＴＰＴＵ＝ Ｏ−（１,２−ジヒドロ−２−オキソ−１
−ピリジル）−１,１,３,３′−テトラメチルウロニウ
ムテトラフルオロボレート Ｔｒｔ＝ トリチル ＴＳＴＵ＝ Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）−１,１,
３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレー
ト Ｚ＝ ベンジルオキシカルボニル ＭＳ（ＥＳ+）＝ 静電スプレ−マススペクトル（陽イ
オン） ＭＳ（ＥＳ-）＝ 静電スプレ−マススペクトル（陰イ
オン） ＭＳ（ＤＣＩ）＝ 脱着化学イオン化マススペクトル ＭＳ（ＦＡＢ）＝ 高速原子衝突マススペクトル 以下の実施例は本発明の化合物を製造する好ましい方法
を説明することを意図するものであり、本発明をそれに
限定するものではない。
リアゾール−１−イル）−１,１,３,３−ビス（ペンタ
メチレン）ウロニウムテトラフルオロボレート ＴＢＴＵ＝ Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−
１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロ
ボレート ｔＢｕ＝ 三級ブチル ｔＢｕＢｚ＝ ４−三級ブチルベンゾイル ＴＤＢＴＵ＝ Ｏ−（３,４−ジヒドロ−４−オキソ−
１,２,３−ベンゾトリアジン−３−イル）−１,１,３,
３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート ＴＤＯ＝ ２,５−ジフェニル−２,３−ジヒドロ−３−
オキソ−４−ヒドロキシチオフェンジオキシド ＴＦＡ＝ トリフルオロ酢酸 ＴＨＦ＝ テトラヒドロフラン ＴＮＴＵ＝ Ｏ−（５−ノルボルネン−２,３−ジカル
ボキシイミド）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウ
ムテトラフルオロボレート ＴＯＴＵ＝ Ｏ−[（シアノ（エトキシカルボニル）メ
チレン）アミノ］−１,１,３,３−テトラメチルウロニ
ウムテトラフルオロボレート ＴＰＴＵ＝ Ｏ−（１,２−ジヒドロ−２−オキソ−１
−ピリジル）−１,１,３,３′−テトラメチルウロニウ
ムテトラフルオロボレート Ｔｒｔ＝ トリチル ＴＳＴＵ＝ Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）−１,１,
３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレー
ト Ｚ＝ ベンジルオキシカルボニル ＭＳ（ＥＳ+）＝ 静電スプレ−マススペクトル（陽イ
オン） ＭＳ（ＥＳ-）＝ 静電スプレ−マススペクトル（陰イ
オン） ＭＳ（ＤＣＩ）＝ 脱着化学イオン化マススペクトル ＭＳ（ＦＡＢ）＝ 高速原子衝突マススペクトル 以下の実施例は本発明の化合物を製造する好ましい方法
を説明することを意図するものであり、本発明をそれに
限定するものではない。
【００３６】例１ Ｎ−（Ｆｍｏｃ−アミノエチル）グリシンメチルエステ
ル塩酸塩 Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌ ８.２ｇのアミノエチルグリシンメチルエステルニ塩酸
塩を１００mlの水に溶解し、４００mlのジオキサン中１
３.４８ｇのＦｍｏｃ−ＯＮＳｕを激しく撹拌しながら
加える。ついで１５０mlの水中１０.０８ｇの炭酸水素
ナトリウムを１５分の間隔内に滴下して加える。混合物
を室温でさらに１５時間撹拌したままにしたのち、真空
中で約１００mlに濃縮する。この濃縮された混合物を酢
酸エチル６００mlで抽出し、有機相を各回５０mlの水で
３回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥しつい
で約５０mlの容量に濃縮する。１００mlのジクロロメタ
ンと２０mlの２Ｎメタノール性塩酸を加えると、生成物
が直ちに沈殿する。混合物を密閉フラスコ中４℃に一夜
放置する。沈殿を吸引ろ過し、乾燥する。 収量：９.８ｇ ＲF：０.５０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：３６１.２［Ｍ＋
Ｌｉ］+
ル塩酸塩 Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌ ８.２ｇのアミノエチルグリシンメチルエステルニ塩酸
塩を１００mlの水に溶解し、４００mlのジオキサン中１
３.４８ｇのＦｍｏｃ−ＯＮＳｕを激しく撹拌しながら
加える。ついで１５０mlの水中１０.０８ｇの炭酸水素
ナトリウムを１５分の間隔内に滴下して加える。混合物
を室温でさらに１５時間撹拌したままにしたのち、真空
中で約１００mlに濃縮する。この濃縮された混合物を酢
酸エチル６００mlで抽出し、有機相を各回５０mlの水で
３回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥しつい
で約５０mlの容量に濃縮する。１００mlのジクロロメタ
ンと２０mlの２Ｎメタノール性塩酸を加えると、生成物
が直ちに沈殿する。混合物を密閉フラスコ中４℃に一夜
放置する。沈殿を吸引ろ過し、乾燥する。 収量：９.８ｇ ＲF：０.５０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：３６１.２［Ｍ＋
Ｌｉ］+
【００３７】例２ Ｎ−（Ｆｍｏｃ−アミノエチル）グリシン塩酸塩 Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＨ・ＨＣｌ １１.２１ｇのアミノエチルグリシンを２５０mlのＤＭ
Ｆに懸濁し、撹拌しながら９８.８mlのビス（トリメチ
ルシリル）アセトアミドを加える。１５分間撹拌する
と、澄明な溶液が得られる。それに、３３.７ｇのＦｍ
ｏｃ−ＯＮＳｕのＤＭＦ２００ml中溶液を１５分の間隔
内に滴下して加える。ついで反応混合物をさらに１時間
撹拌したのち、それにメタノールおよび水各１００mlを
加える。１０分後、１６.６mlの６Ｎ塩酸も加え、混合
物をさらに１０分間撹拌する。次に混合物を真空中ロー
タリーエバポレーターで濃縮乾固し、２５０mlのジクロ
ロメタンを残留物に加え、この混合物を撹拌する。最初
は澄明な溶液を生じるが、約５分後にこれから生成物が
徐々に沈殿する。さらに２５０mlのジクロロメタンをゆ
っくりと加え、混合物を計１.５時間撹拌する。沈殿し
た生成物を速やかに吸引ろ過し、ついで吸引ろ斗上で各
回１５０mlのジクロロメタンを用いて２回撹拌し、吸引
ろ過する。沈殿をついでフラスコに移し、４５℃で約３
００mlの酢酸エチルと共に完全に撹拌し、沈殿を温溶液
からろ過し、ついで少量の温酢酸エチルで洗浄する。沈
殿を真空乾燥器中で完全に乾燥する。 収率：３４.４ｇ
Ｆに懸濁し、撹拌しながら９８.８mlのビス（トリメチ
ルシリル）アセトアミドを加える。１５分間撹拌する
と、澄明な溶液が得られる。それに、３３.７ｇのＦｍ
ｏｃ−ＯＮＳｕのＤＭＦ２００ml中溶液を１５分の間隔
内に滴下して加える。ついで反応混合物をさらに１時間
撹拌したのち、それにメタノールおよび水各１００mlを
加える。１０分後、１６.６mlの６Ｎ塩酸も加え、混合
物をさらに１０分間撹拌する。次に混合物を真空中ロー
タリーエバポレーターで濃縮乾固し、２５０mlのジクロ
ロメタンを残留物に加え、この混合物を撹拌する。最初
は澄明な溶液を生じるが、約５分後にこれから生成物が
徐々に沈殿する。さらに２５０mlのジクロロメタンをゆ
っくりと加え、混合物を計１.５時間撹拌する。沈殿し
た生成物を速やかに吸引ろ過し、ついで吸引ろ斗上で各
回１５０mlのジクロロメタンを用いて２回撹拌し、吸引
ろ過する。沈殿をついでフラスコに移し、４５℃で約３
００mlの酢酸エチルと共に完全に撹拌し、沈殿を温溶液
からろ過し、ついで少量の温酢酸エチルで洗浄する。沈
殿を真空乾燥器中で完全に乾燥する。 収率：３４.４ｇ
【００３８】例３ Ｆｍｏｃ−アミノエチルグリシンの遊離 Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＨ ２３ｇの上記Ｆｍｏｃ−アミノエチルグリシン塩酸塩
を、４００mlの熱メタノ−ルに溶解する。混合物を室温
まで冷却したのち、完全に撹拌しながら、８０mlのメタ
ノ−ル中２.２ｇのＮａＯＨの溶液を滴下して加える。
次いで生成物が直ちに沈殿する。溶液についで４０mlの
水を加え、この混合物を加熱すると澄明な溶液が得ら
れ、これを放置して室温までゆっくりと冷却させ、つい
でさらに１時間０℃に放置する。沈殿を吸引ろ過し、各
回７０mlの９０％含水メタノ−ルを用いて３回洗浄し、
ついで真空乾燥器中で十分に乾燥させる。 収率：１５.０ｇ ＲF：０.５５（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ２：１：
２） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ）：３４１.２［Ｍ＋Ｈ］+
を、４００mlの熱メタノ−ルに溶解する。混合物を室温
まで冷却したのち、完全に撹拌しながら、８０mlのメタ
ノ−ル中２.２ｇのＮａＯＨの溶液を滴下して加える。
次いで生成物が直ちに沈殿する。溶液についで４０mlの
水を加え、この混合物を加熱すると澄明な溶液が得ら
れ、これを放置して室温までゆっくりと冷却させ、つい
でさらに１時間０℃に放置する。沈殿を吸引ろ過し、各
回７０mlの９０％含水メタノ−ルを用いて３回洗浄し、
ついで真空乾燥器中で十分に乾燥させる。 収率：１５.０ｇ ＲF：０.５５（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ２：１：
２） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ）：３４１.２［Ｍ＋Ｈ］+
【００３９】例４ ２−アミノ−６−クロロプリン−９−イル酢酸メチルエ
ステル １.４３ｇの水素化ナトリウム（９５％）を最初に、ア
ルゴン雰囲気下、十分に乾燥したガラス装置中に取り、
２００mlの十分に乾燥したＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミ
ドを水素化物上に注ぐ。１０.０ｇの２−アミノ−６−
クロロプリンをついで加えると、気体と熱の発生が起こ
り、黄色の溶液が形成される。この溶液を１時間完全に
撹拌したのち、４０mlのＤＭＦ中１０.８ｇのブロモ酢
酸メチルエステルの溶液をそれに滴下して加える。反応
混合物をさらに２時間撹拌し、ついで油圧ポンプ真空下
にロータリーエバポレーターで濃縮する。残留物に水を
加え、この混合物をついで酢酸エチルで抽出する。有機
相を濃縮乾固し、粗生成物をシリカゲル上ジクロロメタ
ン／メタノ−ル（９５／５）を用いてフラッシュクロマ
トグラフィーにより精製する。 収量：生成物１１ｇ ＲF：０.４４（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＣＩ）：２４２（Ｍ＋Ｈ）+
ステル １.４３ｇの水素化ナトリウム（９５％）を最初に、ア
ルゴン雰囲気下、十分に乾燥したガラス装置中に取り、
２００mlの十分に乾燥したＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミ
ドを水素化物上に注ぐ。１０.０ｇの２−アミノ−６−
クロロプリンをついで加えると、気体と熱の発生が起こ
り、黄色の溶液が形成される。この溶液を１時間完全に
撹拌したのち、４０mlのＤＭＦ中１０.８ｇのブロモ酢
酸メチルエステルの溶液をそれに滴下して加える。反応
混合物をさらに２時間撹拌し、ついで油圧ポンプ真空下
にロータリーエバポレーターで濃縮する。残留物に水を
加え、この混合物をついで酢酸エチルで抽出する。有機
相を濃縮乾固し、粗生成物をシリカゲル上ジクロロメタ
ン／メタノ−ル（９５／５）を用いてフラッシュクロマ
トグラフィーにより精製する。 収量：生成物１１ｇ ＲF：０.４４（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＣＩ）：２４２（Ｍ＋Ｈ）+
【００４０】例５ ２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）
−６−クロロプリン−９−イル酢酸メチルエステル １１ｇの２−アミノ−６−クロロプリン−９−イル酢酸
メチルエステルをアルゴン下、７５mlのピリジンと９.
５mlのトリエチルアミンの混合物中に懸濁し、１５ｇの
４−メトキシフェニル−ジフェニルメチルクロリドを４
回に分けて１時間内に加える。混合物を一夜そのまま反
応させ、ついで濃縮乾固する。残留物を少量のトルエン
とともに１回共蒸留し、粗生成物をシリカゲル上ジクロ
ロメタン／メタノール（９８：２）を用いてフラッシュ
クロマトグラフィーにより精製する。 収量：１５.５ｇ ＲF：０.６０（ジクロロメタン／メタノール ９７：
３） ＭＳ（ＥＳ+）：５１４.２（Ｍ＋Ｈ）+
−６−クロロプリン−９−イル酢酸メチルエステル １１ｇの２−アミノ−６−クロロプリン−９−イル酢酸
メチルエステルをアルゴン下、７５mlのピリジンと９.
５mlのトリエチルアミンの混合物中に懸濁し、１５ｇの
４−メトキシフェニル−ジフェニルメチルクロリドを４
回に分けて１時間内に加える。混合物を一夜そのまま反
応させ、ついで濃縮乾固する。残留物を少量のトルエン
とともに１回共蒸留し、粗生成物をシリカゲル上ジクロ
ロメタン／メタノール（９８：２）を用いてフラッシュ
クロマトグラフィーにより精製する。 収量：１５.５ｇ ＲF：０.６０（ジクロロメタン／メタノール ９７：
３） ＭＳ（ＥＳ+）：５１４.２（Ｍ＋Ｈ）+
【００４１】例６ ２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）
−６−ヒドロキシプリン−９−イル酢酸 ０.５ｇの２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルアミノ）−６−クロロプリン−９−イル酢酸メチルエ
ステルを水酸化ナトリウムの１０％溶液１２ml中還流下
に３時間加熱する。この混合物をついで室温に冷却さ
せ、注意深く１０％の塩酸で中和する。沈殿した生成物
を吸引ろ過し、数回水で洗浄し、十分に乾燥する。 収量：４００mg ＲF：０.１（ジクロロメタン／メタノール ７：３） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４８８.２（Ｍ＋
Ｌｉ）+
−６−ヒドロキシプリン−９−イル酢酸 ０.５ｇの２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルアミノ）−６−クロロプリン−９−イル酢酸メチルエ
ステルを水酸化ナトリウムの１０％溶液１２ml中還流下
に３時間加熱する。この混合物をついで室温に冷却さ
せ、注意深く１０％の塩酸で中和する。沈殿した生成物
を吸引ろ過し、数回水で洗浄し、十分に乾燥する。 収量：４００mg ＲF：０.１（ジクロロメタン／メタノール ７：３） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４８８.２（Ｍ＋
Ｌｉ）+
【００４２】例７ ６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）
プリン １３.５ｇの６−アミノプリンおよび４６.２ｇの４−メ
トキシフェニル−ジフェニルメチルクロリドを５００ml
の乾燥ジメチルホルムアミドに懸濁し、トリエチルアミ
ン１３.９mlを添加したのち、この混合物を６０℃に短
時間加熱する。ほぼ澄明な緑色を帯びた溶液を一夜放置
する。ついで混合物を真空中ロータリーエバポレーター
を用いて濃縮し、５０mlのメタノールを加えてもう一度
濃縮する。残留物をシリカゲル上０.１％トリエチルア
ミン含有ジクロロメタン／メタノール混合物（９５／
５）を用いてクロマトグラフィーにより精製する． 収量：泡状物９.８ｇ ＲF：０.３５（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＭｅＯＨ／ＮＢＡ）：４０８.２（Ｍ＋
Ｈ）+
プリン １３.５ｇの６−アミノプリンおよび４６.２ｇの４−メ
トキシフェニル−ジフェニルメチルクロリドを５００ml
の乾燥ジメチルホルムアミドに懸濁し、トリエチルアミ
ン１３.９mlを添加したのち、この混合物を６０℃に短
時間加熱する。ほぼ澄明な緑色を帯びた溶液を一夜放置
する。ついで混合物を真空中ロータリーエバポレーター
を用いて濃縮し、５０mlのメタノールを加えてもう一度
濃縮する。残留物をシリカゲル上０.１％トリエチルア
ミン含有ジクロロメタン／メタノール混合物（９５／
５）を用いてクロマトグラフィーにより精製する． 収量：泡状物９.８ｇ ＲF：０.３５（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＭｅＯＨ／ＮＢＡ）：４０８.２（Ｍ＋
Ｈ）+
【００４３】例８ ６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）
プリン ２０.２５ｇの６−アミノプリンおよび６９.３ｇの４−
メトキシフェニル−ジフェニルメチルクロリドを５００
mlの乾燥ピリジンに懸濁し、次に１９.１mlの４−エチ
ルモルホリンを添加し、この混合物を約４０℃に短時間
加熱する。この混合物を一夜放置する。ついで懸濁液を
水およびジクロロメタンと撹拌し、沈殿を吸引ろ過す
る。ジクロロメタン相を真空中で濃縮乾固し、少量のジ
クロロメタンと磨砕する。沈殿を吸引ろ過し、最初に得
られた沈殿と合わせる。乾燥後、４７.３ｇの生成物が
得られる。 ＲF：０.５３（酢酸エチル） ＭＳ（ＦＡＢ、ＭｅＯＨ／ＮＢＡ）：４０８.２（Ｍ＋
Ｈ）+
プリン ２０.２５ｇの６−アミノプリンおよび６９.３ｇの４−
メトキシフェニル−ジフェニルメチルクロリドを５００
mlの乾燥ピリジンに懸濁し、次に１９.１mlの４−エチ
ルモルホリンを添加し、この混合物を約４０℃に短時間
加熱する。この混合物を一夜放置する。ついで懸濁液を
水およびジクロロメタンと撹拌し、沈殿を吸引ろ過す
る。ジクロロメタン相を真空中で濃縮乾固し、少量のジ
クロロメタンと磨砕する。沈殿を吸引ろ過し、最初に得
られた沈殿と合わせる。乾燥後、４７.３ｇの生成物が
得られる。 ＲF：０.５３（酢酸エチル） ＭＳ（ＦＡＢ、ＭｅＯＨ／ＮＢＡ）：４０８.２（Ｍ＋
Ｈ）+
【００４４】例９ ６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）
プリン−９−イル酢酸メチルエステル ６.２ｇの６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルアミノ）プリンを乾燥ジメチルホルムアミド７５ml中
に分散し、ついで０.３６ｇの水素化ナトリウムを加え
る。次にこの混合物を１時間撹拌し、ついで２.５２ｇ
のブロモ酢酸メチルエステルを加えて、撹拌をさらに２
時間継続する。反応混合物についで２mlのメタノールを
加えて１０分間撹拌し、真空中ロータリーエバポレータ
ーで濃縮する。残留物をシリカゲル上０.５％のトリエ
チルアミンを含む酢酸エチルを用いてクロマトグラフィ
ーにより精製する。 収量：泡状物４.０ｇ ＲF：０.６８（酢酸エチル／メタノール ３：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４８０.２（Ｍ＋
Ｈ）+；４８５.２（Ｍ＋Ｌｉ）+
プリン−９−イル酢酸メチルエステル ６.２ｇの６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルアミノ）プリンを乾燥ジメチルホルムアミド７５ml中
に分散し、ついで０.３６ｇの水素化ナトリウムを加え
る。次にこの混合物を１時間撹拌し、ついで２.５２ｇ
のブロモ酢酸メチルエステルを加えて、撹拌をさらに２
時間継続する。反応混合物についで２mlのメタノールを
加えて１０分間撹拌し、真空中ロータリーエバポレータ
ーで濃縮する。残留物をシリカゲル上０.５％のトリエ
チルアミンを含む酢酸エチルを用いてクロマトグラフィ
ーにより精製する。 収量：泡状物４.０ｇ ＲF：０.６８（酢酸エチル／メタノール ３：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４８０.２（Ｍ＋
Ｈ）+；４８５.２（Ｍ＋Ｌｉ）+
【００４５】例１０ ６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）
プリン−９−イル酢酸 ３.０ｇの６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルアミノ）プリン−９−イル酢酸メチルエステルを２０
mlのジメチルホルムアミドに溶解し、この溶液に水５ml
中０.２５ｇのＮａＯＨを撹拌しながら加える。１０分
後、加水分解は完結し、希酢酸を用いて反応混合物のpH
を６に調整する。混合物を水１００mlでさらに希釈し、
ついで真空中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮す
る。残留物を次に少量のトルエンと２回蒸留し、得られ
た残留物にジエチルエーテルを加えると生成物が析出す
る。沈殿した生成物を吸引ろ過し、ついで少量のジエチ
ルエーテルで洗浄し、乾燥する。 収量：３.２ｇ 融点：１５７−１６０℃（分解） ＲF：０.１５（酢酸エチル／メタノール ３：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４６５.１（Ｍ＋
Ｈ）+；４７２.１（Ｍ＋Ｌｉ）+；４７８.２（Ｍ＋２Ｌ
ｉ）+
プリン−９−イル酢酸 ３.０ｇの６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルアミノ）プリン−９−イル酢酸メチルエステルを２０
mlのジメチルホルムアミドに溶解し、この溶液に水５ml
中０.２５ｇのＮａＯＨを撹拌しながら加える。１０分
後、加水分解は完結し、希酢酸を用いて反応混合物のpH
を６に調整する。混合物を水１００mlでさらに希釈し、
ついで真空中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮す
る。残留物を次に少量のトルエンと２回蒸留し、得られ
た残留物にジエチルエーテルを加えると生成物が析出す
る。沈殿した生成物を吸引ろ過し、ついで少量のジエチ
ルエーテルで洗浄し、乾燥する。 収量：３.２ｇ 融点：１５７−１６０℃（分解） ＲF：０.１５（酢酸エチル／メタノール ３：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４６５.１（Ｍ＋
Ｈ）+；４７２.１（Ｍ＋Ｌｉ）+；４７８.２（Ｍ＋２Ｌ
ｉ）+
【００４６】例１１ １−アセチル−２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリ
ミジン １−アセチルチミン ７５ｇのチミンを３７５mlの無水酢酸に懸濁し、この懸
濁液を４５分間還流下に加熱する。ついで、この混合物
を０℃に冷却すると、生成物が沈殿する。沈殿を吸引ろ
過し、３７５mlの酢酸エチルと撹拌する。沈殿を吸引ろ
過し、ついで少量のジエチルエーテルで洗浄して乾燥す
る。 収量：８９.１ｇ 融点：１８７−１８９℃ ＲF：０.６７（ジクロロメタン／メタノール ９５：
５）
ミジン １−アセチルチミン ７５ｇのチミンを３７５mlの無水酢酸に懸濁し、この懸
濁液を４５分間還流下に加熱する。ついで、この混合物
を０℃に冷却すると、生成物が沈殿する。沈殿を吸引ろ
過し、３７５mlの酢酸エチルと撹拌する。沈殿を吸引ろ
過し、ついで少量のジエチルエーテルで洗浄して乾燥す
る。 収量：８９.１ｇ 融点：１８７−１８９℃ ＲF：０.６７（ジクロロメタン／メタノール ９５：
５）
【００４７】例１２ ３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキシ−５
−メチルピリミジン ３−ベンジルオキシメチルチミン ５２.０ｇの１−アセチル−２,４−ジヒドロキシ−５−
メチルピリミジンを３００mlのＤＭＦ中に懸濁し、４
７.５mlのトリエチルアミンを添加したのち、混合物を
０℃に冷却する。５０mlのＤＭＦ中１００mlのベンジル
クロロメチルエーテルをこの温度で、完全に撹拌した混
合物に徐々に滴下して加える。混合物をついでさらに１
時間撹拌したのち、一夜室温に放置する。反応混合物を
ついで真空中ロータリーエバポレーターで濃縮して、残
留物を４５０mlのメタノールおよび３００mlの４０％メ
チルアミン水溶液に取り、この混合物を１.５時間還流
下に煮沸する。ついで溶液を濃縮し、残留物を水６００
ml中１０.８ｇの炭酸水素ナトリウムとともに撹拌す
る。沈殿した生成物を吸引ろ過し、水およびエタノール
で洗浄し、エタノールから再結晶する。 収量：４６.６６ｇ 融点：１１９−１２０℃ ＲF：０.３８（ジクロロメタン／メタノール ９５：
５）
−メチルピリミジン ３−ベンジルオキシメチルチミン ５２.０ｇの１−アセチル−２,４−ジヒドロキシ−５−
メチルピリミジンを３００mlのＤＭＦ中に懸濁し、４
７.５mlのトリエチルアミンを添加したのち、混合物を
０℃に冷却する。５０mlのＤＭＦ中１００mlのベンジル
クロロメチルエーテルをこの温度で、完全に撹拌した混
合物に徐々に滴下して加える。混合物をついでさらに１
時間撹拌したのち、一夜室温に放置する。反応混合物を
ついで真空中ロータリーエバポレーターで濃縮して、残
留物を４５０mlのメタノールおよび３００mlの４０％メ
チルアミン水溶液に取り、この混合物を１.５時間還流
下に煮沸する。ついで溶液を濃縮し、残留物を水６００
ml中１０.８ｇの炭酸水素ナトリウムとともに撹拌す
る。沈殿した生成物を吸引ろ過し、水およびエタノール
で洗浄し、エタノールから再結晶する。 収量：４６.６６ｇ 融点：１１９−１２０℃ ＲF：０.３８（ジクロロメタン／メタノール ９５：
５）
【００４８】例１３ ３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキシ−５
−メチルピリミジン−酢酸エチルエステル ３−ベンジルオキシメチルチミニル酢酸エチルエステル ４.９７ｇの水素化ナトリウムを最初に１５０mlのＴＨ
Ｆ中に導入し、ついで５５０mlのＴＨＦに溶解した３−
ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキシ−５−メ
チルピリミジン４５.０４ｇを、Ｎ2雰囲気下０℃で滴下
して加え、ついでこの温度で、７００mlのＴＨＦ中２
１.４２ｇのブロモ酢酸エチルエステルを加える。つい
で混合物をさらに５時間室温に撹拌しながら放置し、次
に水を注意深く加える。有機相を分離し、水相をさらに
４回ジクロロメタンで抽出する。有機相を合わせて硫酸
マグネシウム上で乾燥し、濃縮し、残留物をヘプタンと
撹拌する。 収量：５２.４ｇ ＲF：０.１５（ジクロロメタン／メタノール ９５：
５） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ）：３１９.１（Ｍ＋Ｈ）+
−メチルピリミジン−酢酸エチルエステル ３−ベンジルオキシメチルチミニル酢酸エチルエステル ４.９７ｇの水素化ナトリウムを最初に１５０mlのＴＨ
Ｆ中に導入し、ついで５５０mlのＴＨＦに溶解した３−
ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキシ−５−メ
チルピリミジン４５.０４ｇを、Ｎ2雰囲気下０℃で滴下
して加え、ついでこの温度で、７００mlのＴＨＦ中２
１.４２ｇのブロモ酢酸エチルエステルを加える。つい
で混合物をさらに５時間室温に撹拌しながら放置し、次
に水を注意深く加える。有機相を分離し、水相をさらに
４回ジクロロメタンで抽出する。有機相を合わせて硫酸
マグネシウム上で乾燥し、濃縮し、残留物をヘプタンと
撹拌する。 収量：５２.４ｇ ＲF：０.１５（ジクロロメタン／メタノール ９５：
５） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ）：３１９.１（Ｍ＋Ｈ）+
【００４９】例１４ ２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン酢酸エチ
ルエステル チミニル酢酸エチルエステル ２５ｇの３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロ
キシ−５−メチルピリミジン−酢酸エチルエステルを１
０００mlのジクロロメタン中に溶解し、この混合物を−
７０℃に冷却し、ジクロロメタン中三塩化ホウ素の１Ｍ
溶液３７５mlをこの混合物に、この温度で、完全に撹拌
しながら滴下して加える。混合物をこの温度でさらに３
時間反応させたのち、３２０mlのメタノ−ルを−７０℃
〜−６０℃で滴下して加える。１時間後に、１９７.０
５mlのトリエチルアミンを加え、混合物の温度を室温ま
で上昇させる。ついで、少量の水を加え、混合物をロー
タリーエバポレーターで濃縮する。残留物を酢酸エチル
に取り、この混合物を水で洗浄する。有機相を硫酸マグ
ネシウム上で乾燥し、ついで濃縮乾固する。 収量：１２ｇ ＲF：０.４５（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＤＣＩ）：１９９（Ｍ＋Ｈ）+
ルエステル チミニル酢酸エチルエステル ２５ｇの３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロ
キシ−５−メチルピリミジン−酢酸エチルエステルを１
０００mlのジクロロメタン中に溶解し、この混合物を−
７０℃に冷却し、ジクロロメタン中三塩化ホウ素の１Ｍ
溶液３７５mlをこの混合物に、この温度で、完全に撹拌
しながら滴下して加える。混合物をこの温度でさらに３
時間反応させたのち、３２０mlのメタノ−ルを−７０℃
〜−６０℃で滴下して加える。１時間後に、１９７.０
５mlのトリエチルアミンを加え、混合物の温度を室温ま
で上昇させる。ついで、少量の水を加え、混合物をロー
タリーエバポレーターで濃縮する。残留物を酢酸エチル
に取り、この混合物を水で洗浄する。有機相を硫酸マグ
ネシウム上で乾燥し、ついで濃縮乾固する。 収量：１２ｇ ＲF：０.４５（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＤＣＩ）：１９９（Ｍ＋Ｈ）+
【００５０】例１５ ２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン酢酸 チミニル酢酸 １０ｇの２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン
酢酸エチルエステルをジオキサン／水（１：１）１３０
mlに溶解し、ついで６０mlの１Ｎ−ＬｉＯＨを加えたの
ち、混合物を室温で一夜撹拌する。ついでこれを小容量
に濃縮し、水相をエーテルで洗浄し、ついでpHを２.５
に調整する。この時点で生成物が沈殿する。これを吸引
ろ過すると生成物４.９ｇが得られる。母液をペンタノ
ールで抽出しヘプタン／エ−テルで沈殿させるとさらに
１.５ｇの生成物が得られる。 収量：６.４ｇ ＲF：０.３０（ジクロロメタン／メタノール ３：２） ＭＳ（ＤＣＩ）：１８５（Ｍ＋Ｈ）+
酢酸エチルエステルをジオキサン／水（１：１）１３０
mlに溶解し、ついで６０mlの１Ｎ−ＬｉＯＨを加えたの
ち、混合物を室温で一夜撹拌する。ついでこれを小容量
に濃縮し、水相をエーテルで洗浄し、ついでpHを２.５
に調整する。この時点で生成物が沈殿する。これを吸引
ろ過すると生成物４.９ｇが得られる。母液をペンタノ
ールで抽出しヘプタン／エ−テルで沈殿させるとさらに
１.５ｇの生成物が得られる。 収量：６.４ｇ ＲF：０.３０（ジクロロメタン／メタノール ３：２） ＭＳ（ＤＣＩ）：１８５（Ｍ＋Ｈ）+
【００５１】例１６ Ｎ1−クロロカルボキシメチルチミン チミニルアセチルクロリド 例１６ａ ２ｇの２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン酢
酸を１５mlのチオニルクロリドと、６０℃で３時間、も
早気体が発生しなくなるまで撹拌する。ついで過剰のチ
オニルクロリドを真空中ロータリーエバポレーターを用
いて留去し、残留物をついで、少量のトルエンとともに
３回蒸留する。得られた生成物はそのまま次の反応に使
用する。 収量：２.４ｇ ＭＳ（ＤＣＩ）：２０３（Ｍ＋Ｈ）+
酸を１５mlのチオニルクロリドと、６０℃で３時間、も
早気体が発生しなくなるまで撹拌する。ついで過剰のチ
オニルクロリドを真空中ロータリーエバポレーターを用
いて留去し、残留物をついで、少量のトルエンとともに
３回蒸留する。得られた生成物はそのまま次の反応に使
用する。 収量：２.４ｇ ＭＳ（ＤＣＩ）：２０３（Ｍ＋Ｈ）+
【００５２】例１６ｂ Ｎ1−カルボキシメチルチミン（３.０ｇ；１６.３ミリ
モル）をチオニルクロリド（９０ml）に懸濁する。この
懸濁液を７０℃に１.５時間加熱し、ついで室温に１６
時間放置する。過剰のチオニルクロリドを真空中で除去
し、残留物をトルエンとともに３回共蒸留する。得られ
た生成物をｎ−ヘキサンと２回磨砕し、真空中で乾燥す
る。化合物は淡橙色の粉末として得られる。 収量：３.３０ｇ ＭＳ（ＣＩ；ジクロロメタン）：２０３（Ｍ＋Ｈ）+ ＲF：０.１０（ジクロロメタン／メタノール ７：３）
モル）をチオニルクロリド（９０ml）に懸濁する。この
懸濁液を７０℃に１.５時間加熱し、ついで室温に１６
時間放置する。過剰のチオニルクロリドを真空中で除去
し、残留物をトルエンとともに３回共蒸留する。得られ
た生成物をｎ−ヘキサンと２回磨砕し、真空中で乾燥す
る。化合物は淡橙色の粉末として得られる。 収量：３.３０ｇ ＭＳ（ＣＩ；ジクロロメタン）：２０３（Ｍ＋Ｈ）+ ＲF：０.１０（ジクロロメタン／メタノール ７：３）
【００５３】例１７ ２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェニルジフェニ
ルメチルアミノ）ピリミジン Ｎ4−Ｍｍｔ−シトシン １１.６ｇの４−アミノ−２−ヒドロキシピリミジンお
よび４６.２ｇの４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルクロリドを５００mlの乾燥ピリジンに懸濁して、１
２.８mlの４−エチルモルホリンを添加したのち、この
混合物を約４０℃に短時間加熱する。この混合物を一夜
放置する。ついで懸濁液を水およびジクロロメタンと撹
拌し、沈殿を吸引ろ過する。ジクロロメタン相を真空中
で濃縮乾固し、残留物を少量のジクロロメタンと磨砕す
る。沈殿を吸引ろ過し、最初に得られた沈殿と合わせ
る。乾燥後、１６.８ｇの生成物が得られる。 ＲF：０.４５（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＭｅＯＨ／ＮＢＡ）：３８４.２（Ｍ＋
Ｈ）+
ルメチルアミノ）ピリミジン Ｎ4−Ｍｍｔ−シトシン １１.６ｇの４−アミノ−２−ヒドロキシピリミジンお
よび４６.２ｇの４−メトキシフェニルジフェニルメチ
ルクロリドを５００mlの乾燥ピリジンに懸濁して、１
２.８mlの４−エチルモルホリンを添加したのち、この
混合物を約４０℃に短時間加熱する。この混合物を一夜
放置する。ついで懸濁液を水およびジクロロメタンと撹
拌し、沈殿を吸引ろ過する。ジクロロメタン相を真空中
で濃縮乾固し、残留物を少量のジクロロメタンと磨砕す
る。沈殿を吸引ろ過し、最初に得られた沈殿と合わせ
る。乾燥後、１６.８ｇの生成物が得られる。 ＲF：０.４５（ジクロロメタン／メタノール ９：１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＭｅＯＨ／ＮＢＡ）：３８４.２（Ｍ＋
Ｈ）+
【００５４】例１８ ２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェニルジフェニ
ルメチルアミノ）ピリミジン−１−イル酢酸メチルエス
テル Ｎ4−Ｍｍｔ−シトシル酢酸メチルエステル １１.５ｇの２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェ
ニルジフェニルメチルアミノ）ピリミジンを乾燥ジメチ
ルホルムアミド１２０ml中に分散し、ついで０.７２ｇ
の水素化ナトリウムを加える。次にこの混合物を１時間
撹拌したのち５.０５ｇのブロモ酢酸メチルエステルを
加えて、撹拌をさらに２時間継続する。反応混合物につ
いで２mlのメタノールを加えて１０分間撹拌し、真空中
ロータリーエバポレーターで濃縮する。残留物を水と磨
砕し、吸引ろ過して乾燥する。 収量：１０.７ｇ ＲF：０.３９（酢酸エチル） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４６２.２（Ｍ＋
Ｌｉ）+
ルメチルアミノ）ピリミジン−１−イル酢酸メチルエス
テル Ｎ4−Ｍｍｔ−シトシル酢酸メチルエステル １１.５ｇの２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェ
ニルジフェニルメチルアミノ）ピリミジンを乾燥ジメチ
ルホルムアミド１２０ml中に分散し、ついで０.７２ｇ
の水素化ナトリウムを加える。次にこの混合物を１時間
撹拌したのち５.０５ｇのブロモ酢酸メチルエステルを
加えて、撹拌をさらに２時間継続する。反応混合物につ
いで２mlのメタノールを加えて１０分間撹拌し、真空中
ロータリーエバポレーターで濃縮する。残留物を水と磨
砕し、吸引ろ過して乾燥する。 収量：１０.７ｇ ＲF：０.３９（酢酸エチル） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４６２.２（Ｍ＋
Ｌｉ）+
【００５５】例１９ ２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェニルジフェニ
ルメチルアミノ）ピリミジン−１−イル酢酸 Ｎ4−Ｍｍｔ−シトシル酢酸 １０.５ｇの２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェ
ニルジフェニルメチルアミノ）ピリミジン−１−イル酢
酸メチルエステルを１００mlのジメチルホルムアミドに
溶解し、この溶液に撹拌しながら、水５ml中０.９４ｇ
のＮａＯＨを加える。１０分後、加水分解は完結し、希
酢酸を用いて反応混合物のpHを６に調整する。ついで混
合物を水１００mlで希釈し、真空中ロータリーエバポレ
ーターを用いて濃縮する。残留物を次に少量のトルエン
と２回蒸留し、これらの蒸留から得られた残留物にジエ
チルエーテルを加えると生成物が沈殿する。沈殿した生
成物を吸引ろ過し、ついで少量のジエチルエーテルで洗
浄し、乾燥する。 収量：８.５５ｇ ＲF：０.２７（酢酸エチル） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４４８（Ｍ＋Ｌ
ｉ）+
ルメチルアミノ）ピリミジン−１−イル酢酸 Ｎ4−Ｍｍｔ−シトシル酢酸 １０.５ｇの２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェ
ニルジフェニルメチルアミノ）ピリミジン−１−イル酢
酸メチルエステルを１００mlのジメチルホルムアミドに
溶解し、この溶液に撹拌しながら、水５ml中０.９４ｇ
のＮａＯＨを加える。１０分後、加水分解は完結し、希
酢酸を用いて反応混合物のpHを６に調整する。ついで混
合物を水１００mlで希釈し、真空中ロータリーエバポレ
ーターを用いて濃縮する。残留物を次に少量のトルエン
と２回蒸留し、これらの蒸留から得られた残留物にジエ
チルエーテルを加えると生成物が沈殿する。沈殿した生
成物を吸引ろ過し、ついで少量のジエチルエーテルで洗
浄し、乾燥する。 収量：８.５５ｇ ＲF：０.２７（酢酸エチル） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：４４８（Ｍ＋Ｌ
ｉ）+
【００５６】例２０ Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−Ｎ1−カルボキ
シメチルシトシン Ｎ4−Ｂｏｃ−シトシル酢酸 例２０ａ Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−シトシン Ｎ4−Ｂｏｃ−シトシン シトシン（１１.１ｇ）を乾燥ピリジン（２５０ml）に
懸濁する。ついで、ジ三級ブチルジカルボネート（２
１.８ｇ）とスパーテルの先端量の４−ジメチルアミノ
ピリジンを添加する。この混合物を６０℃で６時間撹拌
すると、濃厚な沈殿が出現する。反応液を冷却し、沈殿
を吸引ろ過する。沈殿を温水と撹拌し、吸引ろ過し、真
空中で乾燥する。 収量：１０.２６ｇ ＭＳ（ＤＣＩ）：２１２（Ｍ＋Ｈ）+ ＲF：０.６（ジクロロメタン／メタノール ６：４）
シメチルシトシン Ｎ4−Ｂｏｃ−シトシル酢酸 例２０ａ Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−シトシン Ｎ4−Ｂｏｃ−シトシン シトシン（１１.１ｇ）を乾燥ピリジン（２５０ml）に
懸濁する。ついで、ジ三級ブチルジカルボネート（２
１.８ｇ）とスパーテルの先端量の４−ジメチルアミノ
ピリジンを添加する。この混合物を６０℃で６時間撹拌
すると、濃厚な沈殿が出現する。反応液を冷却し、沈殿
を吸引ろ過する。沈殿を温水と撹拌し、吸引ろ過し、真
空中で乾燥する。 収量：１０.２６ｇ ＭＳ（ＤＣＩ）：２１２（Ｍ＋Ｈ）+ ＲF：０.６（ジクロロメタン／メタノール ６：４）
【００５７】例２０ｂ Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−Ｎ1−メトキシ
カルボニルメチルシトシン Ｎ4−Ｂｏｃ−シトシル酢酸メチルエステル Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−シトシン（１.
６ｇ）を乾燥ＤＭＦ（３０ml）中に懸濁し、水素化ナト
リウム（０.１９ｇ）を少量ずつ加え、混合物を室温で
１.５時間、水素の発生が完結するまで撹拌する。次
に、ブロモ酢酸メチルエステル（０.８４ml）を室温で
シリンジを用いて滴下して加える。混合物を室温でさら
に５時間撹拌し、ついでメタノール（１ml）を加える。
溶媒を真空中で留去し、残った残留物をシリカゲル上溶
出液としてジクロロメタンを用いてカラムクロマトグラ
フィーにより精製する。生成物を含有する分画を合わせ
て真空中で濃縮する。 収量：１.１ｇ ＭＳ（ＤＣＩ）：２８４（Ｍ＋Ｈ）+ ＲF：０.５（ジクロロメタン／メタノール ９５：５）
カルボニルメチルシトシン Ｎ4−Ｂｏｃ−シトシル酢酸メチルエステル Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−シトシン（１.
６ｇ）を乾燥ＤＭＦ（３０ml）中に懸濁し、水素化ナト
リウム（０.１９ｇ）を少量ずつ加え、混合物を室温で
１.５時間、水素の発生が完結するまで撹拌する。次
に、ブロモ酢酸メチルエステル（０.８４ml）を室温で
シリンジを用いて滴下して加える。混合物を室温でさら
に５時間撹拌し、ついでメタノール（１ml）を加える。
溶媒を真空中で留去し、残った残留物をシリカゲル上溶
出液としてジクロロメタンを用いてカラムクロマトグラ
フィーにより精製する。生成物を含有する分画を合わせ
て真空中で濃縮する。 収量：１.１ｇ ＭＳ（ＤＣＩ）：２８４（Ｍ＋Ｈ）+ ＲF：０.５（ジクロロメタン／メタノール ９５：５）
【００５８】例２０ｃ Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−Ｎ1−カルボキ
シメチルシトシン Ｎ4−（Ｂｏｃ−シトシル酢酸） Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−Ｎ1−メトキシ
カルボニルメチルシトシン（４.２ｇ）を水（３０ml）
に懸濁し、０℃でpHを制御（pH１２）しながら、メチル
エステルが加水分解されるまで、水酸化ナトリウムの２
Ｎ水溶液を滴下して加える。反応の進行はＴＬＣによっ
てモニターする。反応溶液のpHを酢酸で３に調整し、溶
媒を真空中で留去する。粗生成物をシリカゲル上溶出液
としてジクロロメタン／メタノール／トリエチルアミン
８：１：１を用いてカラムクロマトグラフィーにより
精製する。生成物を含有する分画を合わせて真空中で濃
縮する。 収量：３.５ｇ 融点：９５−９８℃（分解） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ）：２７０.２（Ｍ＋Ｌｉ）+ ＲF：０.３５(ジクロロメタン／メタノ−ル／トリエチ
ルアミン ８：１：１)
シメチルシトシン Ｎ4−（Ｂｏｃ−シトシル酢酸） Ｎ4−（三級ブチルオキシカルボニル）−Ｎ1−メトキシ
カルボニルメチルシトシン（４.２ｇ）を水（３０ml）
に懸濁し、０℃でpHを制御（pH１２）しながら、メチル
エステルが加水分解されるまで、水酸化ナトリウムの２
Ｎ水溶液を滴下して加える。反応の進行はＴＬＣによっ
てモニターする。反応溶液のpHを酢酸で３に調整し、溶
媒を真空中で留去する。粗生成物をシリカゲル上溶出液
としてジクロロメタン／メタノール／トリエチルアミン
８：１：１を用いてカラムクロマトグラフィーにより
精製する。生成物を含有する分画を合わせて真空中で濃
縮する。 収量：３.５ｇ 融点：９５−９８℃（分解） ＭＳ（ＦＡＢ、ＮＢＡ）：２７０.２（Ｍ＋Ｌｉ）+ ＲF：０.３５(ジクロロメタン／メタノ−ル／トリエチ
ルアミン ８：１：１)
【００５９】例２１ Ｎ−［２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルア
ミノ）−６−ヒドロキシプリン−９−イルアセチル］−
Ｎ−２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルア
ミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＧMmt)−ＯＨ １ｇの２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルア
ミノ）−６−ヒドロキシプリン−９−イル酢酸をＤＭＦ
に溶解し、６８２mgのＴＯＴＵおよび２３９mgのＮ−エ
チルモルホリンを、順次、予め０℃に冷却した上記溶液
に添加する。混合物をついで室温で２０分間撹拌する。
１.０６ｇのＦｍｏｃ−アミノエチルグリシンの４mlの
ジメチルホルムアミドと１.５ｇのビス（トリメチルシ
リル）アセトアミド中溶液を別のフラスコ中に調製す
る。この溶液をついで、２−（４−メトキシフェニルジ
フェニルメチルアミノ）−６−ヒドロキシプリン−９−
イル酢酸の予め活性化した溶液に加える。混合物をさら
に２時間撹拌し、ついで濃縮乾固する。次に残留物を３
０mlの酢酸エチルに取り、この混合物を各回１５mlの水
で３回抽出する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、
シリカゲル上メタノール／ジクロロメタン／水／氷酢酸
（１.５：１０：０.２５：０.０７５）を用いてクロマ
トグラフィーによって精製する。 収量：６００mg ＲF：０.３５（メチレンクロリド：メタノール／７：
３） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：８１
０.３（Ｍ＋Ｌｉ）+
ミノ）−６−ヒドロキシプリン−９−イルアセチル］−
Ｎ−２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルア
ミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＧMmt)−ＯＨ １ｇの２−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルア
ミノ）−６−ヒドロキシプリン−９−イル酢酸をＤＭＦ
に溶解し、６８２mgのＴＯＴＵおよび２３９mgのＮ−エ
チルモルホリンを、順次、予め０℃に冷却した上記溶液
に添加する。混合物をついで室温で２０分間撹拌する。
１.０６ｇのＦｍｏｃ−アミノエチルグリシンの４mlの
ジメチルホルムアミドと１.５ｇのビス（トリメチルシ
リル）アセトアミド中溶液を別のフラスコ中に調製す
る。この溶液をついで、２−（４−メトキシフェニルジ
フェニルメチルアミノ）−６−ヒドロキシプリン−９−
イル酢酸の予め活性化した溶液に加える。混合物をさら
に２時間撹拌し、ついで濃縮乾固する。次に残留物を３
０mlの酢酸エチルに取り、この混合物を各回１５mlの水
で３回抽出する。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、
シリカゲル上メタノール／ジクロロメタン／水／氷酢酸
（１.５：１０：０.２５：０.０７５）を用いてクロマ
トグラフィーによって精製する。 収量：６００mg ＲF：０.３５（メチレンクロリド：メタノール／７：
３） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：８１
０.３（Ｍ＋Ｌｉ）+
【００６０】例２２ Ｎ−［６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルア
ミノ）プリン−９−イルアセチル］−Ｎ−２−（９−フ
ルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）エチルグリ
シンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＭｅ ８４８mg（２.６ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭ
ｅ・ＨＣｌおよび４０７mg（２.５ミリモル）のＨＯＯ
Ｂｔの混合物を５mlのＤＭＦに溶解し、ついでこの溶液
に、５mlのＤＭＦに溶解した６４０μｌ（５ミリモル）
のＮＥＭおよび１.２ｇ（２.５ミリモル）の６−（４−
メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）プリン−９
−イル酢酸の溶液を加える。その後、４７１μｌ（３ミ
リモル）のジイソプロピルカルボジイミドを加え、混合
物を室温で４時間撹拌する。ついで混合物をろ過し、ろ
液を真空中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮す
る。無定形の残留物をジクロロメタンに取り、この混合
物を水および炭酸水素ナトリウム溶液で抽出する。有機
相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮乾固す
る。残留物を４.５mlの酢酸エチルに溶解し、ジイソプ
ロピルエーテル２０mlを加をえて沈殿を生じさせる。得
られた半固体の沈殿を２０mlのメタノールに溶解し、３
０mlの水を加えて沈殿させ、ついで真空中で乾燥させ
る。 収量：１.０５ｇ ＲF：０.８５（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：８０２.４（Ｍ＋
Ｈ）+
ミノ）プリン−９−イルアセチル］−Ｎ−２−（９−フ
ルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）エチルグリ
シンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＭｅ ８４８mg（２.６ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭ
ｅ・ＨＣｌおよび４０７mg（２.５ミリモル）のＨＯＯ
Ｂｔの混合物を５mlのＤＭＦに溶解し、ついでこの溶液
に、５mlのＤＭＦに溶解した６４０μｌ（５ミリモル）
のＮＥＭおよび１.２ｇ（２.５ミリモル）の６−（４−
メトキシフェニルジフェニルメチルアミノ）プリン−９
−イル酢酸の溶液を加える。その後、４７１μｌ（３ミ
リモル）のジイソプロピルカルボジイミドを加え、混合
物を室温で４時間撹拌する。ついで混合物をろ過し、ろ
液を真空中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮す
る。無定形の残留物をジクロロメタンに取り、この混合
物を水および炭酸水素ナトリウム溶液で抽出する。有機
相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮乾固す
る。残留物を４.５mlの酢酸エチルに溶解し、ジイソプ
ロピルエーテル２０mlを加をえて沈殿を生じさせる。得
られた半固体の沈殿を２０mlのメタノールに溶解し、３
０mlの水を加えて沈殿させ、ついで真空中で乾燥させ
る。 収量：１.０５ｇ ＲF：０.８５（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：８０２.４（Ｍ＋
Ｈ）+
【００６１】例２３ Ｎ−［６−（４−メトキシフェニルジフェニルメチルア
ミノ）プリン−９−イルアセチル］−Ｎ−２−（９−フ
ルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）エチルグリ
シンの合成 Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＨ ９００mg（１.１２５ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ(Ａ
Mmt)−ＯＭｅを５mlのジオキサンおよび２.５mlの水の
混合物中に溶解し、氷水で冷却しながら、２.４mlの１
Ｎ−ＮａＯＨと２.５mlのジオキサンの混合物を少量ず
つ添加して加水分解する。反応が完了したならば、混合
物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝化し、わずかに
起こっていたＦｍｏｃの除去をＦｍｏｃ−ＯＮＳＵを添
加して逆転させる。ついで大部分のジオキサンを真空中
で留去し、溶液を水で希釈し、酢酸エチル／ｎ−ブタノ
ール（１：１）で覆う。混合物を氷水で冷却しながら、
硫酸水素カリウムの溶液を加えてpHを５〜６の酸性にす
る。有機相を分離し、水相はさらに２回酢酸エチル／ｎ
−ブタノール（１：１）で抽出する。有機相を合わせて
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中ロータリーエバポレ
ーターを用いて濃縮する。残留物を５mlの酢酸エチルに
溶解し、メチルブチルエーテル２０mlを加えて沈殿させ
る。 収量：１.０２ｇ ＲF：０.７３（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：７８７(Ｍ＋
Ｈ)+、７９４(Ｍ＋Ｌｉ)+
ミノ）プリン−９−イルアセチル］−Ｎ−２−（９−フ
ルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）エチルグリ
シンの合成 Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＨ ９００mg（１.１２５ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ(Ａ
Mmt)−ＯＭｅを５mlのジオキサンおよび２.５mlの水の
混合物中に溶解し、氷水で冷却しながら、２.４mlの１
Ｎ−ＮａＯＨと２.５mlのジオキサンの混合物を少量ず
つ添加して加水分解する。反応が完了したならば、混合
物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝化し、わずかに
起こっていたＦｍｏｃの除去をＦｍｏｃ−ＯＮＳＵを添
加して逆転させる。ついで大部分のジオキサンを真空中
で留去し、溶液を水で希釈し、酢酸エチル／ｎ−ブタノ
ール（１：１）で覆う。混合物を氷水で冷却しながら、
硫酸水素カリウムの溶液を加えてpHを５〜６の酸性にす
る。有機相を分離し、水相はさらに２回酢酸エチル／ｎ
−ブタノール（１：１）で抽出する。有機相を合わせて
硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中ロータリーエバポレ
ーターを用いて濃縮する。残留物を５mlの酢酸エチルに
溶解し、メチルブチルエーテル２０mlを加えて沈殿させ
る。 収量：１.０２ｇ ＲF：０.７３（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：７８７(Ｍ＋
Ｈ)+、７９４(Ｍ＋Ｌｉ)+
【００６２】例２４ Ｎ−（２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン−
１−イルアセチル）−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチ
ルオキシカルボニルアミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ ４.０３ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＨを８０mlのＤＭＦ
に懸濁し、４.３９mlのＮ,Ｏ−ビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミドを加え、この混合物を室温で４０分間
撹拌する。ついで澄明な溶液に、０℃で撹拌しながら、
２.４ｇの２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン
アセチルクロリドを加える。この混合物を室温でさらに
３時間反応させ、ついでロータリーエバポレーターで溶
媒を留去する。生成した粗生成物に水を加え、この混合
物を０℃に一夜放置する。ついで水を傾瀉し、残留物を
高真空下に乾燥し、シリカゲル上ジクロロメタン／メタ
ノール／氷酢酸／水（５００／１００／２５／２）を用
いてクロマトグラフィーによって精製する。生成物の分
画を合わせて濃縮乾固し、ついでさらに３回少量のトル
エンとともに蒸留する。 収量：３.８ｇ ＲF：０.４２（ジクロロメタン／メタノール／酢酸 １
００：２０：５） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：５０７.３（Ｍ＋
Ｈ）+
１−イルアセチル）−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチ
ルオキシカルボニルアミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ ４.０３ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＨを８０mlのＤＭＦ
に懸濁し、４.３９mlのＮ,Ｏ−ビス（トリメチルシリ
ル）アセトアミドを加え、この混合物を室温で４０分間
撹拌する。ついで澄明な溶液に、０℃で撹拌しながら、
２.４ｇの２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン
アセチルクロリドを加える。この混合物を室温でさらに
３時間反応させ、ついでロータリーエバポレーターで溶
媒を留去する。生成した粗生成物に水を加え、この混合
物を０℃に一夜放置する。ついで水を傾瀉し、残留物を
高真空下に乾燥し、シリカゲル上ジクロロメタン／メタ
ノール／氷酢酸／水（５００／１００／２５／２）を用
いてクロマトグラフィーによって精製する。生成物の分
画を合わせて濃縮乾固し、ついでさらに３回少量のトル
エンとともに蒸留する。 収量：３.８ｇ ＲF：０.４２（ジクロロメタン／メタノール／酢酸 １
００：２０：５） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：５０７.３（Ｍ＋
Ｈ）+
【００６３】例２５ Ｎ−（２,４−ジヒドロキシ−５−メチルピリミジン−
１−イルアセチル）−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチ
ルオキシカルボニルアミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ ３８６mg（２ミリモル）の２,４−ジヒドロキシ−５−
メチルピリミジン酢酸および６５２mg（４ミリモル）の
ＨＯＯＢｔの混合物を６mlのＤＭＦ中７０〜８０℃に短
時間加熱する。混合物を室温まで冷却したのち、３１４
μｌ（２ミリモル）のジイソプロピルカルボジイミドを
加え、混合物を３０分間撹拌する。その後、６８６mg
（２ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＨを加え、３０
分間隔で混合物を約７０℃に短時間３回加熱する。つい
で溶媒を真空中ロータリーエバポレーターを用いて蒸発
させ、残った残留物を水と磨砕する。得られた粗生成物
をｎ−ブタノールと水に分配する。有機相を硫酸水素カ
リウム溶液、炭酸水素カリウム溶液および水で抽出す
る。有機相をついで真空中ロータリーエバポレーターを
用いて濃縮すると、生成物が沈殿する。 収量：２６０mg ＲF：０.４０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：５０７.３（Ｍ＋
Ｈ）+
１−イルアセチル）−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチ
ルオキシカルボニルアミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ ３８６mg（２ミリモル）の２,４−ジヒドロキシ−５−
メチルピリミジン酢酸および６５２mg（４ミリモル）の
ＨＯＯＢｔの混合物を６mlのＤＭＦ中７０〜８０℃に短
時間加熱する。混合物を室温まで冷却したのち、３１４
μｌ（２ミリモル）のジイソプロピルカルボジイミドを
加え、混合物を３０分間撹拌する。その後、６８６mg
（２ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＨを加え、３０
分間隔で混合物を約７０℃に短時間３回加熱する。つい
で溶媒を真空中ロータリーエバポレーターを用いて蒸発
させ、残った残留物を水と磨砕する。得られた粗生成物
をｎ−ブタノールと水に分配する。有機相を硫酸水素カ
リウム溶液、炭酸水素カリウム溶液および水で抽出す
る。有機相をついで真空中ロータリーエバポレーターを
用いて濃縮すると、生成物が沈殿する。 収量：２６０mg ＲF：０.４０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：５０７.３（Ｍ＋
Ｈ）+
【００６４】例２６ Ｎ−［２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェニルジ
フェニルメチルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチ
ル］−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニルアミノ）エチルグリシンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＭｅ １.７ｇ（５ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・
ＨＣｌ、および６７５mg（５ミリモル）のＨＯＯＢｔの
混合物を１０mlの乾燥ＤＭＦに溶解し、これに、１.２
８ml（１０ミリモル）のＮＥＭを加える。ついでこの混
合物を０℃に冷却し、２.２１ｇ（５ミリモル）の２−
ヒドロキシ−４−(４−メトキシフェニルジフェニルメ
チルアミノ）ピリミジン−１−イル酢酸、続いて５ミリ
モルのジイソプロピルカルボジイミドを加え、この混合
物をついで０℃で３０分間撹拌する。次に室温で４.５
時間撹拌したのち、溶媒を真空中ロータリーエバポレー
ターを用いて留去する。残留物をジクロロメタンと水に
分配し、有機相を炭酸水素ナトリウムの溶液および水で
洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中ロータリー
エバポレーターを用いて濃縮乾固する。残留物を１０ml
のメタノールに溶解し、水１５mlを加えて沈殿させる。
得られた生成物を少量の水と磨砕し、水酸化カリウム上
真空乾燥器中で乾燥する。 収量：３.１９ｇ ＲF：０.７９（ｎ−ブタノール／ピリジン／水／酢酸
８：２：２：１０） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：７７８.４（Ｍ）+
フェニルメチルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチ
ル］−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニルアミノ）エチルグリシンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＭｅ １.７ｇ（５ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・
ＨＣｌ、および６７５mg（５ミリモル）のＨＯＯＢｔの
混合物を１０mlの乾燥ＤＭＦに溶解し、これに、１.２
８ml（１０ミリモル）のＮＥＭを加える。ついでこの混
合物を０℃に冷却し、２.２１ｇ（５ミリモル）の２−
ヒドロキシ−４−(４−メトキシフェニルジフェニルメ
チルアミノ）ピリミジン−１−イル酢酸、続いて５ミリ
モルのジイソプロピルカルボジイミドを加え、この混合
物をついで０℃で３０分間撹拌する。次に室温で４.５
時間撹拌したのち、溶媒を真空中ロータリーエバポレー
ターを用いて留去する。残留物をジクロロメタンと水に
分配し、有機相を炭酸水素ナトリウムの溶液および水で
洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中ロータリー
エバポレーターを用いて濃縮乾固する。残留物を１０ml
のメタノールに溶解し、水１５mlを加えて沈殿させる。
得られた生成物を少量の水と磨砕し、水酸化カリウム上
真空乾燥器中で乾燥する。 収量：３.１９ｇ ＲF：０.７９（ｎ−ブタノール／ピリジン／水／酢酸
８：２：２：１０） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：７７８.４（Ｍ）+
【００６５】例２７ Ｎ−［２−ヒドロキシ−４−（４−メトキシフェニルジ
フェニルメチルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチ
ル］−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニルアミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＨ ３.０ｇ（３.８６ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ
(ＣMmt)−ＯＭｅを１５mlのジオキサンおよび１０mlの
水の混合物中に溶解し、この溶液を氷水で冷却しなが
ら、１０.２mlの１Ｎ−ＮａＯＨとジオキサンの混合物
（１：１）を少量ずつ添加して加水分解する。反応が完
了したならば、混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて
緩衝化し、わずかに起こっていたＦｍｏｃの除去を０.
５ｇのＦｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加ついで４５分間の撹拌
により逆転させる。次に、混合物に硫酸水素カリウムの
２Ｍ溶液０.５mlを加えてpHを６.５に調整する。ついで
大部分のジオキサンを真空中で留去し、溶液を水で希釈
し、酢酸エチルで覆う。混合物を氷水で冷却しながら、
硫酸水素カリウムの溶液を加えてpHを５の酸性にする。
有機相を分離し、水相はさらに２回酢酸エチルで抽出す
る。有機相を合わせて硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空
中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮する。残留物
を５mlのメタノールと１５mlの酢酸エチルの混合物に溶
解し、メチルブチルエーテル８０mlを加えて沈殿させ
る。生成物をろ過し、真空中で乾燥する。 収量：１.９５ｇ ＲF：０.８０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：７７
０.３(Ｍ＋Ｌｉ)+
フェニルメチルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチ
ル］−Ｎ−２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボ
ニルアミノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＨ ３.０ｇ（３.８６ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ
(ＣMmt)−ＯＭｅを１５mlのジオキサンおよび１０mlの
水の混合物中に溶解し、この溶液を氷水で冷却しなが
ら、１０.２mlの１Ｎ−ＮａＯＨとジオキサンの混合物
（１：１）を少量ずつ添加して加水分解する。反応が完
了したならば、混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて
緩衝化し、わずかに起こっていたＦｍｏｃの除去を０.
５ｇのＦｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加ついで４５分間の撹拌
により逆転させる。次に、混合物に硫酸水素カリウムの
２Ｍ溶液０.５mlを加えてpHを６.５に調整する。ついで
大部分のジオキサンを真空中で留去し、溶液を水で希釈
し、酢酸エチルで覆う。混合物を氷水で冷却しながら、
硫酸水素カリウムの溶液を加えてpHを５の酸性にする。
有機相を分離し、水相はさらに２回酢酸エチルで抽出す
る。有機相を合わせて硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空
中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮する。残留物
を５mlのメタノールと１５mlの酢酸エチルの混合物に溶
解し、メチルブチルエーテル８０mlを加えて沈殿させ
る。生成物をろ過し、真空中で乾燥する。 収量：１.９５ｇ ＲF：０.８０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ／ＬｉＣｌ）：７７
０.３(Ｍ＋Ｌｉ)+
【００６６】例２８ Ｎ−［２−ヒドロキシ−４−（三級ブチルオキシカルボ
ニルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチル］−Ｎ−２
−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）
エチルグリシンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣBoc)−ＯＭｅ ０.８５（３ミリモル）のＮ4−（三級ブチルオキシカル
ボニル）−Ｎ1−カルボキシメチルシトシンおよび０.４
９ｇ（３ミリモル）のＨＯＯＢｔの混合物を５mlの乾燥
ＤＭＦに溶解し、ついで、７８６μｌ（６ミリモル）の
ＮＥＭを、続いて１.０２ｇ（３ミリモル）のＦｍｏｃ
−Ａｅｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌを加える。この混合物を０℃
に冷却し、５６４μｌ（３.６ミリモル）のジイソプロ
ピルカルボジイミドを加え、この混合物を０℃で３０分
間、室温で４時間撹拌する。溶媒をついで真空中ロータ
リーエバポレーターを用いて留去する。残留物をジクロ
ロメタンと水に分配し、有機相を炭酸水素ナトリウムの
溶液および水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真
空中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮乾固する。
残留物を２０mlの酢酸エチルから再結晶する。 収量：１.１９ｇ ＲF：０.８８（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：６０６.３（Ｍ）+
ニルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチル］−Ｎ−２
−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）
エチルグリシンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣBoc)−ＯＭｅ ０.８５（３ミリモル）のＮ4−（三級ブチルオキシカル
ボニル）−Ｎ1−カルボキシメチルシトシンおよび０.４
９ｇ（３ミリモル）のＨＯＯＢｔの混合物を５mlの乾燥
ＤＭＦに溶解し、ついで、７８６μｌ（６ミリモル）の
ＮＥＭを、続いて１.０２ｇ（３ミリモル）のＦｍｏｃ
−Ａｅｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌを加える。この混合物を０℃
に冷却し、５６４μｌ（３.６ミリモル）のジイソプロ
ピルカルボジイミドを加え、この混合物を０℃で３０分
間、室温で４時間撹拌する。溶媒をついで真空中ロータ
リーエバポレーターを用いて留去する。残留物をジクロ
ロメタンと水に分配し、有機相を炭酸水素ナトリウムの
溶液および水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真
空中ロータリーエバポレーターを用いて濃縮乾固する。
残留物を２０mlの酢酸エチルから再結晶する。 収量：１.１９ｇ ＲF：０.８８（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：６０６.３（Ｍ）+
【００６７】例２９ Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣBoc)−ＯＭｅ ２.８７ｇ（８.４７ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ−Ｏ
Ｍｅ・ＨＣｌと１.３８ｇ（８.４７ミリモル）のＨＯＯ
Ｂｔの混合物を１５mlの乾燥ＤＭＦに溶解し、これに、
１.０８ml（８.４７ミリモル）のＮＥＭ、続いて２.４
ｇ（８.４７ミリモル）のＮ4−（三級ブチルオキシカル
ボニル）−Ｎ1−カルボキシメチルシトシンを加える。
この混合物をついで０℃に冷却し、１.３３ml（８.４７
ミリモル）のジイソプロピルカルボジイミドを加え、０
℃で３０分間、室温で３時間撹拌する。ついで溶媒を真
空中ロータリーエバポレーターを用いて留去する。残留
物を１００mlのジクロロメタンに取り、有機相を水、炭
酸水素ナトリウムの溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナ
トリウム上で乾燥し、真空中ロータリーエバポレーター
を用いて濃縮乾固する。残留物をメチル三級ブチルエー
テルと磨砕する。 収量：４.５ｇ ＲF：０.８８（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１）
Ｍｅ・ＨＣｌと１.３８ｇ（８.４７ミリモル）のＨＯＯ
Ｂｔの混合物を１５mlの乾燥ＤＭＦに溶解し、これに、
１.０８ml（８.４７ミリモル）のＮＥＭ、続いて２.４
ｇ（８.４７ミリモル）のＮ4−（三級ブチルオキシカル
ボニル）−Ｎ1−カルボキシメチルシトシンを加える。
この混合物をついで０℃に冷却し、１.３３ml（８.４７
ミリモル）のジイソプロピルカルボジイミドを加え、０
℃で３０分間、室温で３時間撹拌する。ついで溶媒を真
空中ロータリーエバポレーターを用いて留去する。残留
物を１００mlのジクロロメタンに取り、有機相を水、炭
酸水素ナトリウムの溶液および水で順次洗浄し、硫酸ナ
トリウム上で乾燥し、真空中ロータリーエバポレーター
を用いて濃縮乾固する。残留物をメチル三級ブチルエー
テルと磨砕する。 収量：４.５ｇ ＲF：０.８８（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１）
【００６８】例３０ Ｎ−［２−ヒドロキシ−４−（三級ブチルオキシカルボ
ニルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチル］−Ｎ−２
−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）
エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣBoc)−ＯＨ ７００mg（１.１５ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｃ
Boc)−ＯＭｅを６mlのジオキサンおよび３mlの水の混合
物中に溶解して、０℃で２時間の間隔内に、計０.９５m
lの２Ｎ−ＮａＯＨを少量ずつ加える。反応が完了した
ならば混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝化
し、わずかに起こっているＦｍｏｃの除去を５おmgのＦ
ｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加ついで４５分間の撹拌により逆
転させる。次に、混合物に硫酸水素カリウムの２Ｍ溶液
０.５mlを加えてpHを６.５に調整する。ついで大部分の
ジオキサンを真空中で留去し、この溶液を水で希釈し、
酢酸エチルで覆う。混合物を氷水で冷却しながら、硫酸
水素カリウムの溶液を加えてpHを５の酸性にする。有機
相を分離し、水相はさらに２回酢酸エチルで抽出する。
有機相を合わせて硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中ロ
ータリーエバポレーターを用いて濃縮すると、生成物が
沈殿する。生成物をろ過し、真空中で乾燥する。 収量：４８５mg ＲF：０.５５（ｎ−ブタノール／ピリジン／酢酸／水
８：２：２：１０） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：５９２(Ｍ+)
ニルアミノ）ピリミジン−１−イルアセチル］−Ｎ−２
−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）
エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣBoc)−ＯＨ ７００mg（１.１５ミリモル）のＦｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｃ
Boc)−ＯＭｅを６mlのジオキサンおよび３mlの水の混合
物中に溶解して、０℃で２時間の間隔内に、計０.９５m
lの２Ｎ−ＮａＯＨを少量ずつ加える。反応が完了した
ならば混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝化
し、わずかに起こっているＦｍｏｃの除去を５おmgのＦ
ｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加ついで４５分間の撹拌により逆
転させる。次に、混合物に硫酸水素カリウムの２Ｍ溶液
０.５mlを加えてpHを６.５に調整する。ついで大部分の
ジオキサンを真空中で留去し、この溶液を水で希釈し、
酢酸エチルで覆う。混合物を氷水で冷却しながら、硫酸
水素カリウムの溶液を加えてpHを５の酸性にする。有機
相を分離し、水相はさらに２回酢酸エチルで抽出する。
有機相を合わせて硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中ロ
ータリーエバポレーターを用いて濃縮すると、生成物が
沈殿する。生成物をろ過し、真空中で乾燥する。 収量：４８５mg ＲF：０.５５（ｎ−ブタノール／ピリジン／酢酸／水
８：２：２：１０） ＭＳ（ＦＡＢ、ＤＭＳＯ／ＮＢＡ）：５９２(Ｍ+)
【００６９】例３１ Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＭｅ １１.７３ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・ＨＣｌを５.
５２ｇのチミニル酢酸とともに１００mlの乾燥ＤＭＦに
溶解し、９.８４ｇのＴＯＴＵおよび２０.４mlのジイソ
プロピルエチルアミンを順次加える。混合物を室温で３
時間撹拌し、真空中ロータリーエバポレーターを用いて
濃縮する。残留物を酢酸エチルに取り、この混合物を炭
酸水素ナトリウム溶液および硫酸水素カリウム溶液でそ
れぞれ３回抽出する。有機相を濃縮し、残留物を少量の
酢酸エチルに溶解しこの溶液にエーテルを加えると、生
成物が沈殿する。 収量：１２.３ｇ ＲF：０.６３（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：５２１.４(Ｍ＋Ｈ)+
５２ｇのチミニル酢酸とともに１００mlの乾燥ＤＭＦに
溶解し、９.８４ｇのＴＯＴＵおよび２０.４mlのジイソ
プロピルエチルアミンを順次加える。混合物を室温で３
時間撹拌し、真空中ロータリーエバポレーターを用いて
濃縮する。残留物を酢酸エチルに取り、この混合物を炭
酸水素ナトリウム溶液および硫酸水素カリウム溶液でそ
れぞれ３回抽出する。有機相を濃縮し、残留物を少量の
酢酸エチルに溶解しこの溶液にエーテルを加えると、生
成物が沈殿する。 収量：１２.３ｇ ＲF：０.６３（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：５２１.４(Ｍ＋Ｈ)+
【００７０】例３２ Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ １２.０ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＭｅを、１００m
lのジオキサンと５０mlの水の混合物に懸濁し、３２ml
の２Ｎ−ＮａＯＨを少量ずつ加えて加水分解する。反応
が完了後、混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝
化し、部分的に起こっているＦｍｏｃの除去を、２.７m
gのＦｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加により逆転させる。次
に、混合物をろ過し、ろ液を酢酸エチルで抽出する。水
相に１Ｎ−ＨＣｌを加えてpHを２に調整すると、生成物
が沈殿する。沈殿を吸引ろ過し、真空中で乾燥する（粗
生成物１１.６ｇ）。塩を除去するため、粗生成物を穏
やかに加温したＤＭＦ７０mlに取り、溶解しない物質を
ろ去し、ろ液を濃縮乾固する。残留物を酢酸エチルに取
り、イソプロピルエーテルを加えて沈殿させる。生成物
を吸引ろ過し、真空中で乾燥する。 収量：１０.４ｇ ＲF：０.４０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：５０７.３(Ｍ＋Ｈ)+
lのジオキサンと５０mlの水の混合物に懸濁し、３２ml
の２Ｎ−ＮａＯＨを少量ずつ加えて加水分解する。反応
が完了後、混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝
化し、部分的に起こっているＦｍｏｃの除去を、２.７m
gのＦｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加により逆転させる。次
に、混合物をろ過し、ろ液を酢酸エチルで抽出する。水
相に１Ｎ−ＨＣｌを加えてpHを２に調整すると、生成物
が沈殿する。沈殿を吸引ろ過し、真空中で乾燥する（粗
生成物１１.６ｇ）。塩を除去するため、粗生成物を穏
やかに加温したＤＭＦ７０mlに取り、溶解しない物質を
ろ去し、ろ液を濃縮乾固する。残留物を酢酸エチルに取
り、イソプロピルエーテルを加えて沈殿させる。生成物
を吸引ろ過し、真空中で乾燥する。 収量：１０.４ｇ ＲF：０.４０（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：５０７.３(Ｍ＋Ｈ)+
【００７１】例３３ ３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキシ−５
−メチルピリミジン酢酸 ３−ベンジルオキシメチルチミニル酢酸 １３.６５ｇの３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒ
ドロキシ−５−メチルピリミジン酢酸エチルエステルを
４００mlのジオキサン、２００mlの水、１００mlのメタ
ノールおよび４０mlの２Ｎ−ＮａＯＨの混合物中に溶解
する。混合物を室温で２時間撹拌すると、加水分解は完
結する。混合物を真空中ロータリーエバポレーターを用
いて容量約２００mlに濃縮し、ついで水２００mlを加
え、混合物を１回酢酸エチルで抽出する（捨てる）。水
相のpHを１Ｎ−ＨＣｌにより１.５に調整し、１００ml
の酢酸エチルで３回抽出する。酢酸エチル相を合わせ
て、硫酸ナトリウム上で乾燥する。乾燥剤をろ過後、ろ
液を濃縮乾固する。粘稠な油状物が残り、これをそのま
ま次の反応に使用する。比較的長期間放置すると、油状
物は固化する。 収量：１１.３５ｇ ＲF：０.６４（２−ブタノン／ピリジン／水／酢酸 ７
０：１５：１５：２） ＭＳ（ＥＳ+）：３０５.２(Ｍ＋Ｈ)+
−メチルピリミジン酢酸 ３−ベンジルオキシメチルチミニル酢酸 １３.６５ｇの３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒ
ドロキシ−５−メチルピリミジン酢酸エチルエステルを
４００mlのジオキサン、２００mlの水、１００mlのメタ
ノールおよび４０mlの２Ｎ−ＮａＯＨの混合物中に溶解
する。混合物を室温で２時間撹拌すると、加水分解は完
結する。混合物を真空中ロータリーエバポレーターを用
いて容量約２００mlに濃縮し、ついで水２００mlを加
え、混合物を１回酢酸エチルで抽出する（捨てる）。水
相のpHを１Ｎ−ＨＣｌにより１.５に調整し、１００ml
の酢酸エチルで３回抽出する。酢酸エチル相を合わせ
て、硫酸ナトリウム上で乾燥する。乾燥剤をろ過後、ろ
液を濃縮乾固する。粘稠な油状物が残り、これをそのま
ま次の反応に使用する。比較的長期間放置すると、油状
物は固化する。 収量：１１.３５ｇ ＲF：０.６４（２−ブタノン／ピリジン／水／酢酸 ７
０：１５：１５：２） ＭＳ（ＥＳ+）：３０５.２(Ｍ＋Ｈ)+
【００７２】例３４ Ｎ−（３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキ
シ−５−メチルピリミジン−１−イルアセチル）−Ｎ−
２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミ
ノ）エチルグリシンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＴBom)−ＯＭｅ ３.０４ｇの３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒド
ロキシ−５−メチルピリミジン酢酸を１００mlの乾燥Ｄ
ＭＦに溶解、し３.９ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・
ＨＣｌ、３.２８ｇのＴＯＴＵおよび５.１mlのジイソプ
ロピルエチルアミンを順次加える。混合物を室温で２時
間撹拌し、次いで真空中ロータリーエバポレーターを用
いて濃縮乾固する。残留物を酢酸エチルに取り、この混
合物を炭酸水素ナトリウム溶液および硫酸水素カリウム
溶液でそれぞれ３回抽出する。有機相を硫酸ナトリウム
上で乾燥し、乾燥剤をろ過したのち濃縮する。残った泡
状の残留物を石油エーテルと磨砕し、吸引ろ過し、真空
中で乾燥する。 収量：４.６８ｇ ＲF：０.７５（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：６４１.４(Ｍ＋Ｈ)+
シ−５−メチルピリミジン−１−イルアセチル）−Ｎ−
２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミ
ノ）エチルグリシンメチルエステル Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＴBom)−ＯＭｅ ３.０４ｇの３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒド
ロキシ−５−メチルピリミジン酢酸を１００mlの乾燥Ｄ
ＭＦに溶解、し３.９ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ−ＯＭｅ・
ＨＣｌ、３.２８ｇのＴＯＴＵおよび５.１mlのジイソプ
ロピルエチルアミンを順次加える。混合物を室温で２時
間撹拌し、次いで真空中ロータリーエバポレーターを用
いて濃縮乾固する。残留物を酢酸エチルに取り、この混
合物を炭酸水素ナトリウム溶液および硫酸水素カリウム
溶液でそれぞれ３回抽出する。有機相を硫酸ナトリウム
上で乾燥し、乾燥剤をろ過したのち濃縮する。残った泡
状の残留物を石油エーテルと磨砕し、吸引ろ過し、真空
中で乾燥する。 収量：４.６８ｇ ＲF：０.７５（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：６４１.４(Ｍ＋Ｈ)+
【００７３】例３５ Ｎ−（３−ベンジルオキシメチル−２,４−ジヒドロキ
シ−５−メチルピリミジン−１−イルアセチル）−Ｎ−
２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミ
ノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＴBom)−ＯＨ ２.３ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ(ＴBom)−ＯＭｅを３０mlの
ジオキサンと１５mlの水の混合物に溶解し、７.３６ml
の１Ｎ−ＮａＯＨを少量ずつ加えて加水分解する。反応
完結後、混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝化
し、部分的に起こっているＦｍｏｃの除去を０.４１ｇ
のＦｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加により逆転させる。次に、
混合物をろ過し、ジオキサンを真空中ロータリーエバポ
レーターを用いて留去し、残留溶液を３０mlの水で希釈
し、まだアルカリ性の得られた溶液を酢酸エチルで１回
抽出する。水相を１Ｎ−ＨＣｌでpH３に調整すると、生
成物が沈殿する。混合物を冷室に４℃で一夜放置したの
ち、沈殿を吸引ろ過し、真空中で乾燥する。ろ液を小容
量に濃縮すると、ろ液からさらに生成物が沈殿する。 収量：１.４７ｇ ＲF：０.３７（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：６２７.２(Ｍ＋Ｈ)+
シ−５−メチルピリミジン−１−イルアセチル）−Ｎ−
２−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミ
ノ）エチルグリシン Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＴBom)−ＯＨ ２.３ｇのＦｍｏｃ−Ａｅｇ(ＴBom)−ＯＭｅを３０mlの
ジオキサンと１５mlの水の混合物に溶解し、７.３６ml
の１Ｎ−ＮａＯＨを少量ずつ加えて加水分解する。反応
完結後、混合物に少量の固体二酸化炭素を加えて緩衝化
し、部分的に起こっているＦｍｏｃの除去を０.４１ｇ
のＦｍｏｃ−ＯＮＳＵの添加により逆転させる。次に、
混合物をろ過し、ジオキサンを真空中ロータリーエバポ
レーターを用いて留去し、残留溶液を３０mlの水で希釈
し、まだアルカリ性の得られた溶液を酢酸エチルで１回
抽出する。水相を１Ｎ−ＨＣｌでpH３に調整すると、生
成物が沈殿する。混合物を冷室に４℃で一夜放置したの
ち、沈殿を吸引ろ過し、真空中で乾燥する。ろ液を小容
量に濃縮すると、ろ液からさらに生成物が沈殿する。 収量：１.４７ｇ ＲF：０.３７（ｎ−ブタノール／酢酸／水 ３：１：
１） ＭＳ（ＥＳ+）：６２７.２(Ｍ＋Ｈ)+
【００７４】例３６ Ｈ−(Ａｅｇ(Ｔ)）8−Ｌｙｓ−ＮＨ2(Ｃ49Ｈ127Ｎ35Ｏ
33、式量２２７５.２６) 合成は、Abimed製の多重ペプチドシンセサイザー中、ア
ンカー基として５−（Ｆｍｏｃ−アミノ−４−メトキシ
ベンジル）−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸
を用い、アミノメチル−ポリスチレン樹脂上で行う。１
４.７mg（１０マイクロモル）のＦｍｏｃ−アミドアン
カー樹脂をＤＭＦ中で予め膨潤させ、多重ペプチドシン
セサイザーの反応容器に導入する。合成には以下の反応
溶液を使用する。 １） アクティベーター溶液：乾燥ＤＭＦ中０.８７６
モルＰｙＢＯＰ溶液 ２） 活性化用塩基：乾燥ＤＭＦ中３.９５モルＮＥＭ
溶液 ３） Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.６５モル溶液 ４） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ１ml中
２５０mg ５） ピペリジン：ＤＭＦ中２０％溶液 ピペリジン溶液によるＦｍｏｃの除去およびＤＭＦでの
洗浄ののち、アクティベーター溶液、Ｆｍｏｃ誘導体お
よび塩基を、反応容器中の脱保護樹脂に加える。カップ
リング時間は４０分とする。反応を２８分間進行させた
のち、１００μｌのジクロロメタンを加える。ついで樹
脂をＤＭＦで５回洗浄すると、ピペリジンによる次の処
理が実施できる。Ｆｍｏｃの最後の除去後に、樹脂を乾
燥し、計４mlの９５％ＴＦＡを少量ずつ加えて処理する
（約２.５時間）。ＴＦＡ溶液を真空中で濃縮し、残留
物を２５０μｌのＴＦＡに溶解する。この溶液を５個の
エッペンドルフチューブに分配し、各チューブあたり６
００μｌのメチル三級ブチルエーテルを加えて沈殿させ
る。遠心分離して沈殿を沈降させ、ついで上清を傾瀉し
て除去する。沈殿を少量のメチル三級ブチルエーテルに
懸濁し、再び遠心分離して沈降させ、上清をもう一度傾
瀉する。この操作をもう一度繰り返して生成物を真空中
で乾燥する。精製はRＭｏｎｏＱカラム（Pharmacia，Mu
nzingen）上、１０ｍＭ−ＮａＯＨ（pH１２）中０.１７
〜０.４４Ｍの食塩勾配を用いるクロマトグラフィーに
よって行い、限外ろ過によって脱塩する。 収量：１９８ ＯＤ260 ＭＳ（ＦＡＢ、ＡｃＯＨ／ＮＢＡ）：２２９８（Ｍ＋Ｎ
ａ）+
33、式量２２７５.２６) 合成は、Abimed製の多重ペプチドシンセサイザー中、ア
ンカー基として５−（Ｆｍｏｃ−アミノ−４−メトキシ
ベンジル）−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸
を用い、アミノメチル−ポリスチレン樹脂上で行う。１
４.７mg（１０マイクロモル）のＦｍｏｃ−アミドアン
カー樹脂をＤＭＦ中で予め膨潤させ、多重ペプチドシン
セサイザーの反応容器に導入する。合成には以下の反応
溶液を使用する。 １） アクティベーター溶液：乾燥ＤＭＦ中０.８７６
モルＰｙＢＯＰ溶液 ２） 活性化用塩基：乾燥ＤＭＦ中３.９５モルＮＥＭ
溶液 ３） Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.６５モル溶液 ４） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ１ml中
２５０mg ５） ピペリジン：ＤＭＦ中２０％溶液 ピペリジン溶液によるＦｍｏｃの除去およびＤＭＦでの
洗浄ののち、アクティベーター溶液、Ｆｍｏｃ誘導体お
よび塩基を、反応容器中の脱保護樹脂に加える。カップ
リング時間は４０分とする。反応を２８分間進行させた
のち、１００μｌのジクロロメタンを加える。ついで樹
脂をＤＭＦで５回洗浄すると、ピペリジンによる次の処
理が実施できる。Ｆｍｏｃの最後の除去後に、樹脂を乾
燥し、計４mlの９５％ＴＦＡを少量ずつ加えて処理する
（約２.５時間）。ＴＦＡ溶液を真空中で濃縮し、残留
物を２５０μｌのＴＦＡに溶解する。この溶液を５個の
エッペンドルフチューブに分配し、各チューブあたり６
００μｌのメチル三級ブチルエーテルを加えて沈殿させ
る。遠心分離して沈殿を沈降させ、ついで上清を傾瀉し
て除去する。沈殿を少量のメチル三級ブチルエーテルに
懸濁し、再び遠心分離して沈降させ、上清をもう一度傾
瀉する。この操作をもう一度繰り返して生成物を真空中
で乾燥する。精製はRＭｏｎｏＱカラム（Pharmacia，Mu
nzingen）上、１０ｍＭ−ＮａＯＨ（pH１２）中０.１７
〜０.４４Ｍの食塩勾配を用いるクロマトグラフィーに
よって行い、限外ろ過によって脱塩する。 収量：１９８ ＯＤ260 ＭＳ（ＦＡＢ、ＡｃＯＨ／ＮＢＡ）：２２９８（Ｍ＋Ｎ
ａ）+
【００７５】例３７ Ｈ−（Ａｅｇ(Ｔtriazolo)）8−Ｌｙｓ−ＮＨ2（Ｃ110
Ｈ134Ｎ58Ｏ26、式量２６８２.６５） 合成は３８０Ｂ ＡＢＩ ＤＮＡシンセサイザー中、アン
カー基として５−（Ｆｍｏｃ−アミノ−４−メトキシベ
ンジル）−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸を
用い、アミノメチル−ポリスチレン樹脂上で行う。１
４.７mg（１０マイクロモル）のＦｍｏｃ−アミドアン
カー樹脂を、小合成カラム中、以下の溶液を添加するプ
ログラムコントロールにより反応させる。 位置１：Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ：ＤＭＦ中
０.６６モル溶液 位置２：乾燥ＤＭＦ２ml中Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ
triazolo)−ＯＨ ７３５mg 位置５：１.３５mlのＮＥＭと１.７mlのＤＭＦの混合物
（３.４６モル） 位置６：ＰｙＢＯＰ：乾燥ＤＭＦ中０.９１モル溶液 位置１４：ＭＦ中２０％ピペリジン 位置１６：樹脂洗浄用ＤＭＦ 位置１７：反応用ＤＭＦ（乾燥） 充填に使用する量は流速により、リジン誘導体またはア
ミノエチルグリシン誘導体の５倍過剰に調整する。カッ
プリングは各場合２回行う。化合物を樹脂から切断する
ためには、計約５mlの９０％ＴＦＡを小カラムから手動
で２時間を要して押出す。ＴＦＡを真空中で濃縮し、残
留物を３００μｌのＴＦＡに溶解する。この溶液を６個
のエッペンドルフチューブに分配する。各チューブにメ
チル三級ブチルエーテル１mlを加えて生成物を沈殿させ
る。遠心分離して沈殿を沈降させ、ついで上清を傾瀉し
て除去する。沈殿を少量のメチル三級ブチルエーテルに
懸濁し、再び遠心分離して沈降させ、上清をもう一度傾
瀉する。この操作をもう一度繰り返して生成物を真空中
で乾燥する。最後に、生成物をメチル三級ブチルエーテ
ルにもう一度懸濁し、遠心分離して乾燥する。 収量：２７０ ＯＤ260 ＭＳ（ＦＡＢ／ＮＢＡ）：２６８４（Ｍ+）
Ｈ134Ｎ58Ｏ26、式量２６８２.６５） 合成は３８０Ｂ ＡＢＩ ＤＮＡシンセサイザー中、アン
カー基として５−（Ｆｍｏｃ−アミノ−４−メトキシベ
ンジル）−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸を
用い、アミノメチル−ポリスチレン樹脂上で行う。１
４.７mg（１０マイクロモル）のＦｍｏｃ−アミドアン
カー樹脂を、小合成カラム中、以下の溶液を添加するプ
ログラムコントロールにより反応させる。 位置１：Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ：ＤＭＦ中
０.６６モル溶液 位置２：乾燥ＤＭＦ２ml中Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ
triazolo)−ＯＨ ７３５mg 位置５：１.３５mlのＮＥＭと１.７mlのＤＭＦの混合物
（３.４６モル） 位置６：ＰｙＢＯＰ：乾燥ＤＭＦ中０.９１モル溶液 位置１４：ＭＦ中２０％ピペリジン 位置１６：樹脂洗浄用ＤＭＦ 位置１７：反応用ＤＭＦ（乾燥） 充填に使用する量は流速により、リジン誘導体またはア
ミノエチルグリシン誘導体の５倍過剰に調整する。カッ
プリングは各場合２回行う。化合物を樹脂から切断する
ためには、計約５mlの９０％ＴＦＡを小カラムから手動
で２時間を要して押出す。ＴＦＡを真空中で濃縮し、残
留物を３００μｌのＴＦＡに溶解する。この溶液を６個
のエッペンドルフチューブに分配する。各チューブにメ
チル三級ブチルエーテル１mlを加えて生成物を沈殿させ
る。遠心分離して沈殿を沈降させ、ついで上清を傾瀉し
て除去する。沈殿を少量のメチル三級ブチルエーテルに
懸濁し、再び遠心分離して沈降させ、上清をもう一度傾
瀉する。この操作をもう一度繰り返して生成物を真空中
で乾燥する。最後に、生成物をメチル三級ブチルエーテ
ルにもう一度懸濁し、遠心分離して乾燥する。 収量：２７０ ＯＤ260 ＭＳ（ＦＡＢ／ＮＢＡ）：２６８４（Ｍ+）
【００７６】例３８ Ｈ−(Ａｅｇ(Ｃ))7−Ｌｙｓ−ＮＨ2(Ｃ76Ｈ106Ｎ
38Ｏ22、式量１９０３.９２) １５mlの乾燥ＤＭＦに溶解した７５０mgのＦｍｏｃ−Ａ
ｅｇ(ＣMmt)−ＯＨを用いるほかは例３６の記載と同様
に合成を行う。切断および沈殿は上述のように実施す
る。 収量：１６mgまたは２１８ ＯＤ260 ＭＳ（ＦＡＢ、ＴＦＡ／ＮＢＡ）：１９０５（Ｍ＋Ｈ）
+
38Ｏ22、式量１９０３.９２) １５mlの乾燥ＤＭＦに溶解した７５０mgのＦｍｏｃ−Ａ
ｅｇ(ＣMmt)−ＯＨを用いるほかは例３６の記載と同様
に合成を行う。切断および沈殿は上述のように実施す
る。 収量：１６mgまたは２１８ ＯＤ260 ＭＳ（ＦＡＢ、ＴＦＡ／ＮＢＡ）：１９０５（Ｍ＋Ｈ）
+
【００７７】例３９ Ａｃ−Ａｅｇ(Ａ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ａ)−Ａｅｇ
(Ｔ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ａ)−Ａｅｇ(Ｔ)−Ａｅｇ
(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｔ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ
(Ｇ)−Ｌｙｓ−ＮＨ2（Ｃ137Ｈ176Ｎ72Ｏ38、式量３４
３９.３９） ＰＮＡはEcosyn Ｄ３００ ＤＮＡシンセサイザー（Eppe
ndorf／Biotronik製、Maintal）により、アンカー基と
して５−（Ｆｍｏｃ−アミノ−４−メトキシベンジル）
−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸を負荷した
アミノプロピル−ＣＰＧ、１００mg（５マイクロモル）
を用いて合成する。
(Ｔ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ａ)−Ａｅｇ(Ｔ)−Ａｅｇ
(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｔ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ
(Ｇ)−Ｌｙｓ−ＮＨ2（Ｃ137Ｈ176Ｎ72Ｏ38、式量３４
３９.３９） ＰＮＡはEcosyn Ｄ３００ ＤＮＡシンセサイザー（Eppe
ndorf／Biotronik製、Maintal）により、アンカー基と
して５−（Ｆｍｏｃ−アミノ−４−メトキシベンジル）
−２,４−ジメトキシフェニルプロピオン酸を負荷した
アミノプロピル−ＣＰＧ、１００mg（５マイクロモル）
を用いて合成する。
【００７８】合成には以下の溶液を使用した。 １） アクティベーター溶液：乾燥ＤＭＦ中０.３モル
ＨＡＴＵ溶液 ２） 活性化用塩基：乾燥ＤＭＦ中０.３モルＮＥＭ溶
液 ３） Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ：ＤＭＦ中０.
３モル溶液 ４） Ｆｍｏｃの除去：ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液 ５） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中０.
３モル溶液 ６） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ７） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ８） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＧMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ピペリジン溶液によるＦｍｏｃの除去およびＤＭＦでの
洗浄ののち、アクティベーター溶液、Ｆｍｏｃ誘導体お
よび塩基を、反応容器中の脱保護支持体に加える。カッ
プリング時間は２０分とする。ついでＣＰＧをＤＭＦで
５回洗浄すると、ピペリジンによる次の処理が実施でき
る。合成完了後、ＰＮＡ−ＣＰＧ支持体を乾燥し、つい
で上述のように後処理する。 収量：２１０ ＯＤ260 ＭＳ：３４３９.４（ＥＳ+）：（Ｍ）+
ＨＡＴＵ溶液 ２） 活性化用塩基：乾燥ＤＭＦ中０.３モルＮＥＭ溶
液 ３） Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ(Ｂｏｃ)−ＯＨ：ＤＭＦ中０.
３モル溶液 ４） Ｆｍｏｃの除去：ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液 ５） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中０.
３モル溶液 ６） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ７） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ８） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＧMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ピペリジン溶液によるＦｍｏｃの除去およびＤＭＦでの
洗浄ののち、アクティベーター溶液、Ｆｍｏｃ誘導体お
よび塩基を、反応容器中の脱保護支持体に加える。カッ
プリング時間は２０分とする。ついでＣＰＧをＤＭＦで
５回洗浄すると、ピペリジンによる次の処理が実施でき
る。合成完了後、ＰＮＡ−ＣＰＧ支持体を乾燥し、つい
で上述のように後処理する。 収量：２１０ ＯＤ260 ＭＳ：３４３９.４（ＥＳ+）：（Ｍ）+
【００７９】例４０ Ｈ−Ａｓｐ−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ａ)−Ａ
ｅｇ(Ｔ)−Ａｅｇ(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｔ)−Ａｅ
ｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｓｐ−ＮＨ−(Ｃ
Ｈ2)6−ＯＨ（Ｃ119Ｈ157Ｎ57Ｏ38，式量２９９３.９
４） ＰＮＡはEcosyn Ｄ３００ ＤＮＡシンセサイザー（Eppe
ndorf／Biotronik製、Maintal）により、６−メチルア
ミノヘキス−１−イルヘミスクシネートを負荷したアミ
ノプロピル−ＣＰＧ、１３３mg(５マイクロモル)を用い
て合成する。
ｅｇ(Ｔ)−Ａｅｇ(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｇ)−Ａｅｇ(Ｔ)−Ａｅ
ｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｅｇ(Ｃ)−Ａｓｐ−ＮＨ−(Ｃ
Ｈ2)6−ＯＨ（Ｃ119Ｈ157Ｎ57Ｏ38，式量２９９３.９
４） ＰＮＡはEcosyn Ｄ３００ ＤＮＡシンセサイザー（Eppe
ndorf／Biotronik製、Maintal）により、６−メチルア
ミノヘキス−１−イルヘミスクシネートを負荷したアミ
ノプロピル−ＣＰＧ、１３３mg(５マイクロモル)を用い
て合成する。
【００８０】合成には以下の溶液を使用した。 １） アクティベーター溶液：乾燥ＤＭＦ中０.３モル
ＨＡＴＵ溶液 ２） 活性化用塩基：乾燥ＤＭＦ中０.３モルＮＥＭ溶
液 ３） Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ：ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ４） Ｆｍｏｃの除去：ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液 ５） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中０.
３モル溶液 ６） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ７） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ８） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＧMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ピペリジン溶液によるＦｍｏｃの除去およびＤＭＦでの
洗浄ののち、アクティベーター溶液、Ｆｍｏｃ誘導体お
よび塩基を、反応容器中の脱保護支持体に加える。カッ
プリング時間は２０分とする。ついでＣＰＧをＤＭＦで
５回洗浄すると、ピペリジンによる次の処理が実施でき
る。合成完了後、ＰＮＡ−ＣＰＧ支持体を乾燥し、塩基
上のＭｍｔ保護基をまず３％トリクロロ酢酸を用いて除
去し、ついでアスパラギン酸上の三級ブチル基をジクロ
ロメタン中６０％ＴＦＡを用いて除去する。次にＰＮＡ
を６５℃でアンモニア溶液によって処理して支持体から
切断し、ついで上述のように後処理する。 収量：１００ ＯＤ260 ＭＳ：２９９４.４（ＥＳ+）：（Ｍ＋Ｈ）+
ＨＡＴＵ溶液 ２） 活性化用塩基：乾燥ＤＭＦ中０.３モルＮＥＭ溶
液 ３） Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ(ＯｔＢｕ)−ＯＨ：ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ４） Ｆｍｏｃの除去：ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液 ５） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(Ｔ)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中０.
３モル溶液 ６） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＡMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ７） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＣMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ８） Ｆｍｏｃ−Ａｅｇ(ＧMmt)−ＯＨ：乾燥ＤＭＦ中
０.３モル溶液 ピペリジン溶液によるＦｍｏｃの除去およびＤＭＦでの
洗浄ののち、アクティベーター溶液、Ｆｍｏｃ誘導体お
よび塩基を、反応容器中の脱保護支持体に加える。カッ
プリング時間は２０分とする。ついでＣＰＧをＤＭＦで
５回洗浄すると、ピペリジンによる次の処理が実施でき
る。合成完了後、ＰＮＡ−ＣＰＧ支持体を乾燥し、塩基
上のＭｍｔ保護基をまず３％トリクロロ酢酸を用いて除
去し、ついでアスパラギン酸上の三級ブチル基をジクロ
ロメタン中６０％ＴＦＡを用いて除去する。次にＰＮＡ
を６５℃でアンモニア溶液によって処理して支持体から
切断し、ついで上述のように後処理する。 収量：１００ ＯＤ260 ＭＳ：２９９４.４（ＥＳ+）：（Ｍ＋Ｈ）+
Claims (7)
- 【請求項１】 式Ｉ 【化１】 ［式中、 Ｒ0は水素、Ｃ1〜Ｃ18−アルカノイル、Ｃ1〜Ｃ18−ア
ルコキシカルボニル、Ｃ3〜Ｃ8−シクロアルカノイル、
Ｃ7〜Ｃ15−アロイル、Ｃ3〜Ｃ13−ヘテロアロイル、ま
たはオリゴマーの細胞内取り込みに好ましい基であり、 Ａはアミノ酸残基であり、 ｋは０から２０までの整数であり、 Ｑはアミノ酸残基であり、 ｌは０から２０までの整数であり、 Ｂはヌクレオチド化学において慣用されるヌクレオチド
塩基またはそのプロドラッグ型であり、 Ｑ0はヒドロキシル、ＮＨ2またはＮＨＲ″（Ｒ″はＣ1
〜Ｃ18−アルキル、Ｃ2〜Ｃ18−アミノアルキルまたは
Ｃ2〜Ｃ18−ヒドロキシアルキルである）であり、 ｎは１〜５０の整数である］のＰＮＡオリゴマ−を製造
するにあたり、 基Ｑ0を潜在的様式で含有するアンカー基Ｌを備える式I
I Ｌ−［ポリマー］ （II） のポリマー支持体に、固相合成に慣用される方法を用い
て、いずれかのアミノ酸（Ｑ′）を最初にカップリング
させ、中間体として式III （Ｑ'）1−Ｌ−［ポリマ−］ （III） （式中、Ｌは上に定義した通りであり、Ｑ′は必要に応
じて側鎖が保護されているアミノ酸Ｑであり、ｌは０か
ら２０までの整数である）を得、ついで、 ａ） 式IV 【化２】 （式中、 ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、 Ｂ′は環外アミノ官能基が保護されているヌクレオチド
塩基である）の化合物を、ペプチド化学において慣用さ
れるカップリング試薬を用いて、式IIIの化合物にカッ
プリングさせるか、または式IVの化合物を式IIのポリマ
ー支持体に直接カップリングさせ、 ｂ） 一時的な塩基不安定性保護基ＰＧを、適当な試薬
を用いて除去し、 ｃ） 工程ａおよびｂをｎ−１回反復し、 ｄ） Ａとして定義されたアミノ酸であるが必要に応じ
てそれらの側鎖が保護されたアミノ酸Ａ'をさらに、固
相合成に慣用される方法を用いてカップリングさせ、つ
いでＲ0が水素ではない場合には慣用方法を用いて基Ｒ0
を導入し、 ｅ） 中間体として得られた式Ｉａ 【化３】 (式中、Ｒ0、Ａ′、ｋ、Ｂ′、ｎ、Ｑ′およびｌは上に
定義した通りであり、Ｌはアンカー基である）の化合物
を切断剤を用いてポリマー支持体から切断し、ヌクレオ
チド塩基の環外アミノ官能基およびアミノ酸の側鎖に必
要に応じて存在する保護基を同時にまたは別個に除去す
ることにより、式Ｉの化合物を得る方法。 - 【請求項２】 式Ｉにおいて、 Ａは、グリシン、ロイシン、ヒスチジン、フェニルアラ
ニン、システイン、リジン、アルギニン、アスパラギン
酸、グルタミン酸、プロリン、テトラヒドロキノリン−
３−カルボン酸、オクタヒドロインドール−２−カルボ
ン酸およびＮ−（２−アミノエチル）グリシンの群から
のアミノ酸残基であり、 ｋは、０から１０までの整数であり、 Ｑは、グリシン、ロイシン、ヒスチジン、フェニルアラ
ニン、システイン、リジン、アルギニン、アスパラギン
酸、グルタミン酸、プロリン、テトラヒドロキノリン−
３−カルボン酸、オクタヒドロインドール−２−カルボ
ン酸およびＮ−（２−アミノエチル）グリシンの群から
のアミノ酸残基であり、 ｌは０から１０までの整数であり、 Ｂは、アデニン、シトシン、グアニン、チミンおよびウ
ラシルの群からの天然のヌクレオチド塩基、もしくはプ
リン、２,６−ジアミノプリン、７−デアザアデニン、
７−デアザグアニン、Ｎ4,Ｎ4−エタノシトシン、Ｎ6,
Ｎ6−エタノー２,６−ジアミノプリン、５−メチルシト
シン、５−（Ｃ3〜Ｃ6）−アルキニル−ウラシル、５−
（Ｃ3〜Ｃ6）−アルキニル−シトシン、５−フルオロウ
ラシル、プソイドイソシトシンおよび２−ヒドロキシ−
５−メチル−４−トリアゾールピリミジン、またはそれ
らのプロドラッグ型であり、 ｎは４〜３５の整数である］である請求項１に記載の式
ＩのＰＮＡオリゴマーの製造方法。 - 【請求項３】 式IV 【化４】 （式中、 ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、 Ｂ′は環外アミノ官能基が塩基不安定性アミノ保護基と
適合性のある保護基によって保護されているヌクレオチ
ド塩基である）の化合物。 - 【請求項４】 ＰＧはＦｍｏｃまたはＢｎｐｅｏｃまた
はＤｎｐｅｏｃ保護基であり、Ｂ′は環外アミノ官能基
が弱酸または中等度の強度の酸に不安定なウレタン型ま
たはトリチル型の基である保護基によって保護されてい
るヌクレオチド塩基である請求項３に記載の式IV化合
物。 - 【請求項５】 ＰＧはＦｍｏｃ保護基であり、Ｂ′は環
外アミノ官能基が弱酸または中等度の強度の酸に不安定
なウレタン型またはトリチル型の基である保護基によっ
て保護されているヌクレオチド塩基である請求項４に記
載の式IV化合物。 - 【請求項６】 請求項３〜５に記載の式IVの化合物を製
造するにあたり、 ａ） 式Ｖ 【化５】 （式中、 ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基であり、 Ｒ1はエステル保護基である）の化合物を、式VI 【化６】 （式中、 Ｂ′は環外アミノ官能基が塩基不安定性アミノ保護基と
適合性のある保護基によって保護されているヌクレオチ
ド塩基である）の化合物と適当な溶媒中またはこれらの
溶媒の混合物中、ペプチド化学において慣用されるカッ
プリング試薬を用いて、０〜４５℃で反応させて式VII
の 【化７】 （式中、ＰＧ、Ｂ′およびＲ1は上に定義した通りであ
る）の化合物を得、そしてエステル保護基のＲ1を、適
当な溶媒中またはこれらの溶媒の混合物中０〜５０℃に
おいて、アルカリ金属水酸化物溶液で、またはエステラ
ーゼもしくはリパーゼを用いて酵素的に除去するか、ま
たは ｂ） 式Ｖ 【化８】 （式中、 ＰＧは上述の意味を有する塩基不安定性アミノ保護基で
あり、 Ｒ1は水素または一時的なシリル保護基である）の化合
物を、式VIII Ｂ′−ＣＨ2−ＣＯ−Ｒ2 （VIII） （式中、 Ｂ′は式VIについて定義した通りであり、 Ｒ2はハロゲンまたは活性化エステル基である）の化合
物と適当な溶媒中またはこれらの溶媒の混合物中、０〜
４０℃において反応させる方法。 - 【請求項７】 請求項６に記載の式IVの化合物を製造す
るにあたり、 ａ） 式Ｖ（式中、ＰＧは塩基不安定性アミノ保護基で
あり、Ｒ1は、メチル、エチル、ブチル、２−（メトキ
シエトキシ）エチルおよびベンジルの群からのエステル
保護基である）の化合物を、式VI（式中、Ｂ′は、環外
アミノ官能基が弱酸または中等度の強度の酸に不安定な
ウレタン型またはトリチル型の保護基によって保護され
ているヌクレオチド塩基である）の化合物と、ＤＭＦ、
アセトニトリルおよびジクロロメタンの群からの溶媒中
またはこれらの溶媒の混合物中、カルボジイミド、ホス
ホニウム試薬、ウロニウム試薬、酸ハライドまたは活性
化エステルを用いて室温で反応させて式VII（式中、Ｐ
Ｇ、Ｂ′およびＲ1は上に定義した通りである）の化合
物を得、ついでエステル保護基Ｒ1を、ジオキサン、
水、テトラヒドロフラン、メタノールおよび水の群から
の溶媒中またはこれらの溶媒の混合物中、０〜５０℃に
おいて、アルカリ金属水酸化物溶液でまたはエステラー
ゼもしくはリパーゼを用いて酵素的に除去するか、また
は ｂ） 式Ｖ（式中、ＰＧは上述の意味を有する塩基不安
定性アミノ保護基であり、Ｒ1は水素またはトリメチル
シリルである）の化合物を式VIII（式中、Ｂ′は式VIに
ついて定義した通りであり、Ｒ2はフッ素、塩素、臭素
またはＯＢｔ、ＯＯｂｔ、ＯＰｆｐおよびＯＮＳｕの群
からの活性エステル基である）の化合物と、ＤＭＦ、Ｎ
ＭＰ、アセトニトリルおよびジクロロメタンの群からの
溶媒中またはこれらの溶媒の混合物中、２０〜３０℃に
おいて反応させる方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4408533:8 | 1994-03-14 | ||
| DE4408533A DE4408533A1 (de) | 1994-03-14 | 1994-03-14 | PNA-Synthese unter Verwendung einer basenlabilen Amino-Schutzgruppe |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07291909A true JPH07291909A (ja) | 1995-11-07 |
| JP4098836B2 JP4098836B2 (ja) | 2008-06-11 |
Family
ID=6512697
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP05464195A Expired - Fee Related JP4098836B2 (ja) | 1994-03-14 | 1995-03-14 | 塩基不安定性アミノ保護基を用いるｐｎａの合成 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6121418A (ja) |
| EP (1) | EP0672701B1 (ja) |
| JP (1) | JP4098836B2 (ja) |
| AT (1) | ATE182602T1 (ja) |
| AU (1) | AU683714B2 (ja) |
| CA (1) | CA2144473C (ja) |
| DE (2) | DE4408533A1 (ja) |
| DK (1) | DK0672701T3 (ja) |
| ES (1) | ES2136755T3 (ja) |
| FI (1) | FI120262B (ja) |
| GR (1) | GR3031265T3 (ja) |
| NO (1) | NO321035B1 (ja) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7825215B1 (en) * | 1993-04-26 | 2010-11-02 | Peter E. Nielsen | Substituted nucleic acid mimics |
| US6133444A (en) * | 1993-12-22 | 2000-10-17 | Perseptive Biosystems, Inc. | Synthons for the synthesis and deprotection of peptide nucleic acids under mild conditions |
| EP0840741B1 (en) | 1995-06-07 | 2004-04-28 | Perseptive Biosystems, Inc. | Pna-dna chimeras and pna synthons for their preparation |
| DE19712530A1 (de) * | 1997-03-25 | 1998-10-01 | Boehringer Mannheim Gmbh | Neue Monomerbausteine zur Markierung von peptidischen Nukleinsäuren |
| US20030228619A1 (en) * | 2002-06-10 | 2003-12-11 | Xenoport, Inc. | Peptide nucleic acids as tags in encoded libraries |
| JP4588451B2 (ja) * | 2002-09-08 | 2010-12-01 | アプライド バイオシステムズ， エルエルシー | Ｐｎａダイマーおよびｐｎａオリゴマー合成に関する方法、組成物およびライブラリー |
| CA2640976A1 (en) * | 2006-02-01 | 2007-08-09 | Merck & Co., Inc. | Potassium channel inhibitors |
| US9193758B2 (en) | 2011-04-08 | 2015-11-24 | Carnegie Mellon University Center For Technology Transfer & Enterprise | Conformationally-preorganized, miniPEG-containing γ-peptide nucleic acids |
| CN104211619B (zh) * | 2014-08-19 | 2016-08-17 | 苏州维泰生物技术有限公司 | 一种N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯盐酸盐的合成方法 |
| AU2018240467B2 (en) * | 2017-03-23 | 2022-09-15 | Neubase Therapeutics, Inc. | Peptide nucleic acid (PNA) monomers with an orthogonally protected ester moiety |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HUT41715A (en) * | 1984-12-28 | 1987-05-28 | Monsanto Co | Process for preparing n-substituted alpha-aminoacids and derivatives thereof |
| DE3635670A1 (de) | 1986-10-21 | 1988-04-28 | Hoechst Ag | Synthese von peptid-aminoalkylamiden und peptidhydraziden mittels festphasenmethode |
| DE3713433A1 (de) | 1987-04-22 | 1988-11-03 | Werner Grossmann | Einrichtung zum entfernen von schmutzteilchen vom plattenzylinder einer offsetdruckmaschine |
| EP0322348B1 (de) | 1987-12-22 | 1994-02-02 | Hoechst Aktiengesellschaft | Säurelabile Ankergruppen zur Synthese von Peptidamiden mittels Festphasenmethode |
| DE4016596A1 (de) | 1990-05-23 | 1991-11-28 | Hoechst Ag | Ein neues kupplungsreagenz fuer die peptidsynthese |
| DK51092D0 (da) * | 1991-05-24 | 1992-04-15 | Ole Buchardt | Oligonucleotid-analoge betegnet pna, monomere synthoner og fremgangsmaade til fremstilling deraf samt anvendelser deraf |
| US5539082A (en) * | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
| MX9207334A (es) * | 1991-12-18 | 1993-08-01 | Glaxo Inc | Acidos nucleicos peptidicos y formulacion farma- ceutica que los contiene |
| US5527675A (en) * | 1993-08-20 | 1996-06-18 | Millipore Corporation | Method for degradation and sequencing of polymers which sequentially eliminate terminal residues |
| US5539083A (en) * | 1994-02-23 | 1996-07-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Peptide nucleic acid combinatorial libraries and improved methods of synthesis |
-
1994
- 1994-03-14 DE DE4408533A patent/DE4408533A1/de not_active Withdrawn
-
1995
- 1995-03-08 AT AT95103319T patent/ATE182602T1/de active
- 1995-03-08 EP EP95103319A patent/EP0672701B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-03-08 DK DK95103319T patent/DK0672701T3/da active
- 1995-03-08 ES ES95103319T patent/ES2136755T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-03-08 DE DE59506432T patent/DE59506432D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-03-10 AU AU14800/95A patent/AU683714B2/en not_active Ceased
- 1995-03-10 FI FI951129A patent/FI120262B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-03-13 NO NO19950958A patent/NO321035B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-03-13 CA CA002144473A patent/CA2144473C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-03-14 JP JP05464195A patent/JP4098836B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-10-29 US US08/967,197 patent/US6121418A/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-09-22 GR GR990402363T patent/GR3031265T3/el unknown
-
2000
- 2000-02-01 US US09/495,457 patent/US6316595B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2144473C (en) | 2008-07-15 |
| US6316595B1 (en) | 2001-11-13 |
| ATE182602T1 (de) | 1999-08-15 |
| AU1480095A (en) | 1995-09-21 |
| DE59506432D1 (de) | 1999-09-02 |
| EP0672701B1 (de) | 1999-07-28 |
| GR3031265T3 (en) | 1999-12-31 |
| AU683714B2 (en) | 1997-11-20 |
| JP4098836B2 (ja) | 2008-06-11 |
| US6121418A (en) | 2000-09-19 |
| NO950958L (no) | 1995-09-15 |
| NO950958D0 (no) | 1995-03-13 |
| ES2136755T3 (es) | 1999-12-01 |
| FI120262B (fi) | 2009-08-31 |
| FI951129A0 (fi) | 1995-03-10 |
| CA2144473A1 (en) | 1995-09-15 |
| EP0672701A1 (de) | 1995-09-20 |
| NO321035B1 (no) | 2006-03-06 |
| DK0672701T3 (da) | 2000-01-03 |
| FI951129A (fi) | 1995-09-15 |
| DE4408533A1 (de) | 1995-09-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4098837B2 (ja) | 弱酸に不安定であるアミノ保護基を使用するｐｎａの合成 | |
| TWI655213B (zh) | 自我組織化肽衍生物的製造方法 | |
| US6265559B1 (en) | PNA synthons | |
| JP4089979B2 (ja) | 合成用の改良されたシントンと、緩やかな条件下でのペプチド核酸の保護解除方法 | |
| US20030195332A1 (en) | PNA monomer and precursor | |
| JP4098836B2 (ja) | 塩基不安定性アミノ保護基を用いるｐｎａの合成 | |
| KR20110059743A (ko) | 펩티드 핵산 단량체 및 올리고머 | |
| Bialy et al. | Dde-protected PNA monomers, orthogonal to Fmoc, for the synthesis of PNA–peptide conjugates | |
| Breipohl et al. | Synthesis of polyamide nucleic acids (PNAs) using a novel Fmoc/Mmt protecting-group combination | |
| Kofoed et al. | PNA synthesis using a novel Boc/acyl protecting group strategy | |
| JP2001500387A (ja) | ペプチド核酸のモノマー及びオリゴマー | |
| US6075143A (en) | Substituted N-ethylglycine derivatives for preparing PNA and PNA/DNA hybrids | |
| Kuwahara et al. | Synthesis of δ-amino acids with an ether linkage in the main chain and nucleobases on the side chain as monomer units for oxy-peptide nucleic acids | |
| JP2001519432A (ja) | クロロプリン中間体の合成法 | |
| EP0736027B1 (en) | Guanine synthons for peptide nucleic acid synthesis and method for production | |
| Tan et al. | Homopolymeric pyrrolidine-amide oligonucleotide mimics: Fmoc-synthesis and DNA/RNA binding properties | |
| US6541626B2 (en) | Process for selective N-acylation of purine nucleosides | |
| US6465650B1 (en) | Substituted N-ethylglycine derivatives for preparing PNA and PNA/DNA hybrids | |
| EP1085020A1 (en) | Synthesis of modified diaminopurines and their incorporation into oligomers | |
| JPH10231290A (ja) | 核酸結合化合物の調製方法 | |
| JP2000001478A (ja) | 核酸塩基を側鎖にもつ新規δ−アミノ酸およびそれらの誘導体 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20050331 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050628 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20050927 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20050930 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20051228 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20051228 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20071023 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080118 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20080219 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20080314 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110321 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110321 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120321 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130321 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130321 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140321 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |