JPH07264947A

JPH07264947A - レンチナス・エドダスに属する新規な菌株、それを用いた菌床およびそれを栽培して得られる子実体

Info

Publication number: JPH07264947A
Application number: JP6062987A
Authority: JP
Inventors: Yoshihiko Yamauchi; 吉彦山内; Yutaka Suzuki; 豊鈴木; Ryuzo Shishido; 隆三宍戸
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1994-03-31
Filing date: 1994-03-31
Publication date: 1995-10-17

Abstract

(57)【要約】【構成】レンチナス・エドダス（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ
ｅｄｏｄｅｓ）に属する寄託番号FERM Ｐ−１３２４４
を菌株として用いてシイタケ菌床とする。【効果】培養期間６０〜７５日、発生期間４０〜６０
日、収率３０〜４０％と短期間に高い収穫が得られる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、菌床栽培に適した新規
なシイタケ菌株（レンチナス・エドダス（Lentinus edo
des）属）に関し、特に、短期高収穫性のシイタケ菌
株、それを用いた菌床およびその菌株を栽培して得られ
るシイタケに関する。

【０００２】

【従来技術】シイタケ菌床栽培は、オガクズを主体とし
た培養基に種菌を接種し、一定期間培養後に発茸させる
方式で行われている。即ち、まずオガクズにフスマ、米
糠等を混合し、水分を調整した培地を容器に詰め、オー
トクレーブ等で加熱滅菌して培養基を調製する。その
後、種菌を接種し（接種後の培養基を菌床という。）、
これを培養して菌糸を蔓延させ、次いで発生処理を施す
ことにより茸を生産するのである。

【０００３】上記菌床栽培において、種菌に用いるシイ
タケ菌株としては、（１）ＫＢ２００１（登録第２７４
５号）、（２）北研６００（登録第１７９１号）等が知
られている。（１）は、約１ｋｇの培養基に接種し、約
２０〜２５℃で約４ヵ月間培養して完熟させ、発生期間
約６〜７ヵ月の間に３７５〜４００ｇ（菌床重量の３
７．５〜４０％）の子実体を収穫できる特色を持った菌
株である。（２）は、培養基に接種し、約２０〜２５℃
で約３ヵ月間培養した後、発生期間約３〜４ヵ月の間に
菌床重量の約２１〜２９％の子実体を収穫できる特色を
持った菌株である。何れの場合も、培養に３〜４ヵ月
間、発生に３〜７ヵ月間を要し、菌床重量の２１〜４０
％の子実体を収穫できる。

【０００４】このように、現在、菌床栽培に使用されて
いる菌株は、種菌を接種してから子実体を収穫するまで
の期間が約６〜１０ヵ月と長期に渡り、そのために栽培
施設面積あたりの子実体収穫率が低いという問題があ
る。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記従来技
術の有する問題点に鑑み、新規なシイタケ菌株を創製す
ることにより、従来に比べ栽培期間を大幅に短縮して
も、従来と同等量の子実体を収穫することを目的とす
る。

【０００６】また、本発明の他の目的は、かかるシイタ
ケ菌株を種菌として菌床を調製することにより、施設利
用効率を向上させ、かつ安定して高い収量を得ることを
目的とする。

【０００７】また、本発明の更に他の目的は、かかる菌
床を栽培することにより、傘の色、形、柄の色、長さ等
に優れた子実体を得ることを目的とする。

【０００８】

【課題を解決するための手段】かかる目的を達成する本
発明は、細胞破砕上清を電気泳動し、活性染色により得
られるエステラーゼアイソザイムのバンドを１２本有す
る子実体を形成するレンチナス・エドダス（Lentinus e
dodes）に属する新規な菌株（寄託番号FERMＰ−１３２
４４）である。該菌株を用いることにより、菌床栽培に
おいて培養期間を６０〜７５日、発生期間を約４０〜６
０日まで大幅に短縮することが可能となる。

【０００９】また、本発明は、培養基に上記の菌株が種
菌として接種されている菌床である。優れた特性を持つ
上記菌株を種菌とした該菌床を用いることにより、上記
のような短期間に菌床重量の３０〜４０％と高い収量を
安定して達成することができ、しかもその５０〜７０％
がＭ〜Ｌサイズであり、さらに、発生開始後、１０〜１
５日間に集中的に発生し、菌床の上面および側面から比
較的分散して発生するので品質のよい子実体が収穫でき
る。また、これを浸水処理により３次発生まで発生させ
ても約４０〜６０日程度であり、従来の発生期間（３〜
７ヶ月間）と比較して約１／２〜１／３に短縮できるの
で、大きな設備を持たなくてもシイタケの計画生産がこ
れまでに比べ大幅に容易となり、効率的な生産が可能と
なる。

【００１０】また、本発明は、上記の菌株を栽培して得
られるシイタケ子実体である。該シイタケ子実体は、傘
の色、形、柄の色、長さ等に優れた形状を示すなどの特
徴を有してるものである。

【００１１】なお、本発明において、「菌床」とは茸の
栽培を目的として調製された培養基に種菌を接種したも
の、またはその菌が蔓延したものをいい、「種菌」とは
茸の栽培において種として使用することを目的とし、適
度な条件下で純粋に培養した菌体または培養物をいい、
「培養期間」とは種菌接種後から菌床完熟までの期間、
「発生期間」とは子実体の芽出しから収穫までの期間、
「栽培期間」とは培養期間と発生期間を合わせた期間を
いい、また、「収率」とは菌床重量に対する収穫できる
シイタケ生産量の百分率をいう。

【００１２】以下、本発明を詳述する。

【００１３】［育種方法］発明者らは、従来より短い栽
培期間で子実体を収穫できるシイタケが存在し得ると考
え、まず、培養期間を６０日に設定し、開封後５０±５
日間に発生する子実体を集計する方法で菌床栽培による
スクリーニングを行った。スクリーニングには、道内を
始め国内各地より入手した野性菌株（総計２０株）を使
用した。

【００１４】まず、カバオガクズ、フスマおよび水を
５：１：５の重量比で混合し、これをポリプロピレン製
のビン（８００ｍｌ）に４５０ｇ充填し、蓋をしてオー
トクレーブにて１２１℃、１００分間加圧蒸気滅菌し
た。室温まで放冷した後、供試菌株を接種し、２５℃、
湿度７０％にて２５〜３０日間培養してオガクズ種菌を
製造した。

【００１５】培養基としては、カバオガクズとフスマを
重量比５：２で混合し、この水分を６５％前後に調整
し、フィルター付培養袋に１．２ｋｇ詰め込み、１２１
℃、９０分間オートクレーブ滅菌したものを用いた。冷
却後、自動接種機を使用して上記種菌１７ｇを無菌的に
接種し、ヒートシーラーにて速やかに袋を閉じて、温度
２２〜２５℃、湿度７０％の条件下で６０日間培養し
た。なお、培養後期（培養開始後約３０日以降）には、
５０〜３００ルクスの光を照射（１２時間毎）しながら
培養した。その後、開封して菌床を取出し、温度１６
℃、湿度８５％の条件下で子実体を発生させた。１回目
の発生が終了後、浸水処理（約１６時間）を施し、２回
目の発生を連続して行い、５０±５日間に発生した子実
体を大きさ（Ｌ，Ｍ，Ｓ）別に重量、個数を集計した。
サイズＭは傘径が４〜６ｃｍのもの、サイズＬは同６ｃ
ｍを超えるもの、サイズＳは同４ｃｍ未満のものをい
う。

【００１６】その結果、表１に示したように、各地より
採取したシイタケ菌株（便宜上その一部を示した）は、
培養期間６０日、発生期間５０±５日の短期間では、子
実体収量が２３〜２１８ｇ／１．２ｋｇ菌床（収率２〜
１８％）という低い値であった。

【００１７】

【表１】そこで、次にこれらを親株として、常法に基づき交配に
より育種を行った。即ち、親株の子実体から担子胞子を
無菌的に採取し、単胞子分離により各々の一次菌糸を
得、それらの一次菌糸をポリデキストロース寒天平板上
で２５℃にて対峙培養し、二次菌糸を得た。交配率は８
０〜１００％であった。このようにして交配により新菌
株約４００株を取得し、上述の要領でスクリーニングを
実施した。その結果、これらの菌株の中から子実体収量
が約４００ｇ／１．２ｋｇ菌床（収率約３３％）である
菌株（これをＳＢＴ９０５３株と命名）の１株だけを取
得することができた。その他のものは、いずれも、培養
期間６０日、発生期間５０±５日の短期間では、子実体
収量が０〜２７８ｇ／１．２ｋｇ菌床（収率０〜２３
％）という低い値であった。

【００１８】ＳＢＴ９０５３株は、各々北海道苫小牧市
の山中より採取した菌株ＹＪＳ１１１とＹＪＳ００５の
一核菌糸を交配させて作製した二核菌糸の菌株である
が、該親株それぞれの収穫量（表１）からは予測し得な
い極めて高い短期収穫量が実現されており、親株の有す
る形質の単なる組合せでないことが判る。このようにし
て創製されたＳＢＴ９０５３株は、培養期間が６０〜
７５日、発生期間が約４０〜６０日と短い、収量が菌
床重量の３０〜４０％と多い、収量が安定している、
子実体の傘の色、形、柄の色、長さ等に優れた形状を
示すなどの性質を有していた。

【００１９】また、ＳＢＴ９０５３株は、Ｌｅｎｔｉｎ
ｕｓｅｄｏｄｅｓＳＢＴ９０５３と表示し、工業技
術院生命工学技術研究所に寄託番号ＦＥＲＭＰ−１３
２４４として寄託されている。

【００２０】［ＳＢＴ９０５３株の特性］ＳＢＴ９０５
３株の子実体の特徴を以下に、また、写生図を図１に示
す。傘色：茶褐色形：円形で肉厚鱗皮：繊維状ひだ：密柄色：肌色形：円形で短い次に、ＳＢＴ９０５３株の菌学的諸性質ならびに生化学
的性質をそれぞれ以下に示す。（１）ポテト・デキストロース寒天培地における生育状
態（２５℃）７日目のコロニー直径は８９ｍｍ。菌糸は白色で放射状
に伸びる。裏面は一様で変色はない。（２）デンプン寒天培地（２％可溶性デンプン，０．３
％酵母エキス，１．５％寒天）における生育状態（２５
℃）７日目のコロニー直径は７２ｍｍ。菌糸は白色で放射状
に伸びる。裏面は一様で変色はない。（３）キシラン寒天培地（２％キシラン，０．３％酵母
エキス，１．５％寒天）における生育状態（２５℃）７日目のコロニー直径は７２ｍｍ、白色で密な菌糸。裏
面は一様で変色はない。（４）フェノールオキシダーゼ検定用培地（０．１％没
食子酸添加ポテト・デキストロース寒天培地）における
生育状態（２５℃）７日目のコロニー直径は５３ｍｍ。菌糸は白色で気菌糸
が多い。裏面は黄褐色になり、褐変直径は４８ｍｍ。（５）最適生育温度ならびに各温度における生育速度ポテト・デキストロース寒天培地（スラント）に菌糸を
接種し、予め２５℃で３〜４日間培養した後、温度勾配
培養装置を使用して各温度で１０日間培養し、その間、
菌糸の伸長を測定した。その結果、温度２０〜２８℃の
範囲で良く生育し、最適生育温度は２３〜２７℃付近で
あった。また、５℃以下では生育が悪く、３２℃以上で
は全く生育しなかった。（６）最適生育ｐＨ各ｐＨに調整して滅菌したポテト・デキストロース寒天
培地（液体）に直径６ｍｍの菌糸片を接種して２５℃で
１４日間培養した。集菌後、乾燥重量を測定し、各ｐＨ
における菌糸生育を調べた。その結果、最適生育ｐＨは
６付近であり、また、本菌株の生育範囲はｐＨ３．５〜
７であった。（７）帯線形成の有無供試菌株１０株の２核菌糸をそれぞれポテト・デキスト
ロース寒天培地の中央部に対峙して接種し、２５℃、３
０〜４０日間培養後、両コロニー境界部に帯線を生じる
か否かを判定した。本菌株は供試菌株すべてと帯線を形
成した。（８）ポリフェノールオキシダーゼ（ＰＰＯ）活性基質としてグアイアコールを添加（終濃度で１ｍＭ）し
たポテト・デキストロース寒天培地（液体）４０ｍｌを
滅菌後、直径８ｍｍの菌糸片を接種して２５℃で６日間
培養した。経時的に培養液上清の４７０ｎｍにおける吸
光度を測定してポリフェノールオキシダーゼ活性（ＯＤ
４７０と表示）を求めた。活性（ＯＤ４７０）は、培養
４日目に０．２９、培養６日目に０．６３であった。（９）アイソザイム分析（エステラーゼ）Ｔ．Ｔｏｙｏｍａｓｕの方法（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．
Ｃｈｅｍ．，５０，２２３−２２５，１９８６）によ
り、細胞破砕上清を８％ポリアクリルアミドゲルで電気
泳動（１８ｍＡ／ゲル）後、１ｍＭα−ナフチルアセテ
ート、１ｍＭβ−ナフチルアセテートを基質としてエス
テラーゼの活性染色を行った。本菌株は、エステラーゼ
アイソザイムのバンドを１２本有し、図２のような泳動
パターンを示し、本菌株を特徴づける性質の一つであ
る。（１０）子実体形成における最適温度前述したように、フスマを１２％添加したカバオガクズ
を用いた培地（水分６５％）から調製した１．２ｋｇ菌
床（培養期間６０日）を温度１３〜２０℃、湿度８５％
の条件下で子実体を発生させ、子実体収量を比較した。
本菌株は、１３〜２０℃の何れの範囲でも約４００〜５
００ｇの子実体を発生し、適応温度範囲が広い特性を有
していた。

【００２１】［菌床の調製及び栽培方法］本発明のＳＢ
Ｔ９０５３株を種菌として以下のような方法で菌床を調
製することができる。即ち、ＳＢＴ９０５３株を主菌と
して従来のオガクズ種菌と同様に使用でき又液体種菌と
しても使用できる。液体種菌とは、例えば、滅菌済みの
ポテト・デキストロース寒天培地（液体）２００ｍｌ／
５００ｍｌ容坂口フラスコにシイタケＳＢＴ９０５３株
を接種し、２５℃、１２０〜１５０ｒｐｍ（振盪数）の
条件で好気的に５〜７日間培養した培養液をディスパー
サー処理して菌糸を分散させて製造したもの等である。
滅菌済みの培養基に、液体培地にて調製した該液体種菌
あるいはホモジナイズ等の処理を更に施して菌糸を断片
化した液体種菌を接種する。この液体種菌を１．２ｋｇ
培養基に１０〜２０ｍｌ接種して上記の培養条件に従っ
て培養すると、培養約６０〜７５日前後で菌床が完熱す
る。オガクズ種菌の場合も全く同様である。

【００２２】また、本発明の菌床の大きさは特に限定さ
れるものではないが、０．８〜３．０ｋｇの範囲で製造
可能であり、菌床重量当りの子実体収量は、菌床の大き
さに影響せず、ほぼ一定である。しかし、菌床の運搬、
子実体の採取等の作業性を考慮すると、菌床の大きさは
１．２〜２．５ｋｇが好ましい。また、培養基の密度
は、０．６〜０．７ｇ／ｃｍ³ （水分６２〜６５％にお
いて）の範囲で成形するのが好ましく、それよりも大き
いと菌糸の成育が抑制される場合があり、また、小さい
と菌床が崩れ易く、扱いにくい。又、形状は直方体が一
般的であるが、円柱形等であってもよい。

【００２３】本発明の菌床に用いる培養基の培地組成
は、フスマ、米糠、コーンコブ等の栄養剤、市販の培地
栄養剤等を単独あるいは二種以上を混合し、重量比でオ
ガクズ５に対し、栄養剤を１．５〜２の割合で混合する
のが好ましい。使用するオガクズは樹脂成分が少なく、
シイタケにより分解され易いものがよく、クヌギ、コナ
ラ、シイ、ブナ、シラカバ、マカバ、ダテカンバ等のカ
バ類等の広葉樹由来のものが好ましい。また、培地栄養
剤としては、菌糸の生育ならびに子実体の発生等の点
で、フスマ、ビール酵母、ビートパルプを一種類あるい
は複数種使用するのが好ましい。培養基の水分は菌糸の
生育に適当な６２〜６５％が好ましい。

【００２４】本発明の菌床を培養するための容器は、袋
あるいはビン等、特に制限されないが、容器内への通気
性の面から、フィルターが１カ所あるいは２カ所ついた
耐熱性の透明あるいは半透明の袋が好ましい。また、培
養基には、その大きさに応じて底部に達する穴を数ヶ所
に設けるとよい。この穴により、培養基の滅菌効率を向
上させると共に、培養基内に種菌を効率よく拡散させる
ことができる。

【００２５】また、上述の菌床を完熟させるには、培養
施設の温度は２０〜２５℃が好ましい。ＳＢＴ９０５３
株は、温度２０〜２８℃の範囲でよく生育し、至適成育
温度は２３〜２７℃である。また、菌床生育時には呼吸
熱により菌床内温度が上昇することから、至適生育温度
より１〜４℃、好ましくは２〜３℃低い温度（湿度６５
〜７５％）で培養するのが好ましく、培養期間は６０〜
７５日で終了する。

【００２６】このように調製した菌床を温度１３〜２０
℃（湿度８０〜９０％）で発生させると、４０〜６０日
の間に子実体が集中的に発生し、その収量は約３７０〜
５００ｇ／１．２ｋｇ菌床に達する。しかも、子実体
は、Ｍサイズ（傘が４〜６ｃｍ）が中心（収率の約５０
〜７０％）となり、肉厚であり、菌床の上面あるいは側
面に分散して発生するため傘の重なりが少なく、品質が
よい。

【００２７】以上のように、ＳＢＴ９０５３株を使用す
ると、従来の１／２〜１／３という極めて短期間に従来
の収量と同等以上の収量で、かつ高品質の子実体が安定
的に収穫できる菌床を提供することができる。

【００２８】

【実施例】以下、本発明を実施例により説明する。

【００２９】（実施例１）［オガクズ種菌の製造］カバオガクズ、フスマおよび水
を５：１：５の重量比で混合し、これをポリプロピレン
製のビン（８００ｍｌ）に４５０ｇ充填し、蓋をしてオ
ートクレーブにて１２１℃、１００分間加圧蒸気滅菌し
た。室温まで放冷した後、シイタケＳＢＴ９０５３株の
液体培養液を６ｍｌ接種し、２５℃、湿度７０％にて２
５〜３０日間培養してオガクズ種菌を製造した。

【００３０】［菌床の製造］カバオガクズ：フスマ（５：２）から成る培地の水分を
６５％に調整し、フィルター付きポリプロピレン製袋に
培地を１．２ｋｇ詰め込み、直方体に成形（密度０．７
ｇ／ｃｍ³ ）した。培地中央部に直径２ｃｍの穴を底部
に到達するまで開け、これをオートクレーブにて１２１
℃、９０分間滅菌し、室温で一晩放冷した。自動接種機
を使用して上記のオガクズ種菌を約１７ｇ接種し、速や
かに袋をヒートシールした。これを室温２２〜２５℃、
湿度７０％の条件下で６０日間培養した。尚、培養後期
には、５０〜３００ルクスの光を照射（１２時間毎）し
ながら、３０日間培養した。

【００３１】［菌床から子実体の発生］袋を開封して菌
床を取り出し、温度１６℃、湿度８５％、照度３００ル
クス（１２時間毎）の条件下で子実体を発生させた。１
回目の発生終了後、浸水処理（約１６時間）を施し、連
続して２回目の発生を行い、同様にして３回目の発生を
行った。合計４６日間の発生で４０８ｇ／１．２ｋｇ菌
床（収率３４％）の子実体が収穫でき、その子実体は、
Ｍ〜Ｌサイズが５３％を占めた。

【００３２】このように、本実施例ではＳＢＴ９０５３
株から、栽培日数１０６日と極めて短期間に収率３４％
もの子実体が収穫できた。

【００３３】（実施例２）培養期間を７５日とした他は
実施例１と同じ条件で菌床を製造し、栽培試験を行っ
た。合計５５日間の発生（栽培日数１３０日）で３９８
ｇ／１．２ｋｇ菌床（収率３３％）の子実体が収穫でき
た。子実体は、Ｍ〜Ｌサイズが全体の７３％を占めた。

【００３４】（実施例３）培養基を２．５ｋｇとし、滅
菌時間を１２０分間とした他は実施例１と同じ条件で菌
床を製造し、栽培試験を行った。合計５２日間の発生
（栽培日数１１２日）で８５６ｇ／２．５ｋｇ菌床（収
率３４％）の子実体が収穫できた。Ｍ〜Ｌサイズは全体
の６１％であった。

【００３５】（実施例４）実施例３と同様にして栽培を
６回繰り返し、安定性を試験した。合計４３〜６４日間
の発生（栽培日数１０３〜１２４日）で８１３〜１００
７ｇ／２．５ｋｇ菌床（収率３３〜４０％）の子実体が
収穫できた。Ｍ〜Ｌサイズは全体の５３〜６９％であっ
た。このように、ＳＢＴ９０５３株は、収量の安定性に
優れていた。

【００３６】（実施例５）培地栄養剤の組成をフスマ１
００％からフスマ７５％、タイロン５００（メルシャン
社製）２５％に変えた他は実施例３と同様の条件で栽培
を５回繰り返し、安定性を試験した。合計４３〜５１日
間の発生（栽培日数１０３〜１１１日）で７５１〜８７
２ｇ／２．５ｋｇ菌床（収率３０〜３５％）の子実体が
収穫できた。Ｍ〜Ｌサイズは全体の６１〜６９％であっ
た。このように、ＳＢＴ９０５３株は、収量の安定性に
優れていた。

【００３７】実施例１〜５の結果を表２にまとめた。

【００３８】

【表２】

【００３９】

【発明の効果】以上のように、本発明のシイタケＳＢＴ
９０５３株ならびにそれを用いた菌床は、培養期間が６
０〜７５日と非常に短く、従来用いられているシイタケ
菌床に比べ、培養期間を２０〜５０日も短縮できた。こ
れにより、培養施設は、年間約４回転の使用が可能とな
り、効率的に製造量を確保できる。

【００４０】しかも、本発明の菌床では、子実体収穫量
が菌床重量の３０〜４０％と高収量、かつ、その５３〜
６９％がＭ〜Ｌサイズであり、さらに、発生開始後、１
０〜１５日間に集中的に発生し、菌床の上面および側面
から比較的分散して発生するので品質のよい子実体が収
穫できる。これを浸水処理により３次発生まで発生させ
ても約４０〜６０日程度であり、従来の発生期間（３〜
７ヶ月間）と比較して約１／２〜１／３に短縮できる。
そのため、シイタケの計画生産がこれまでよりも容易と
なり、効率的な生産が可能となる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＳＢＴ９０５３株の子実体を示す写生図（ａ）
及びその縦断面模式図（ｂ）を示し、図中、Ａは約５〜
６ｃｍ、Ｂは約３〜４ｃｍ、Ｃは約２．５〜３ｃｍ、Ｄ
は約１．５〜２ｃｍである。

【図２】ＳＢＴ９０５３株の子実体のエステラーゼアイ
ソザイムのバンドを示す。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】細胞破砕上清を電気泳動し活性染色によ
り得られるエステラーゼアイソザイムのバンドを１２本
有する子実体を形成するレンチナス・エドダス（Lentin
us edodes）に属する新規な菌株（寄託番号FERM Ｐ−
１３２４４）。
【請求項２】培養基に請求項１記載の菌株が種菌とし
て接種されている菌床。
【請求項３】請求項２において、菌株が、液体種菌お
よび／またはオガクズ種菌として接種されており、密度
が０．６〜０．７ｇ／ｃｍ³（水分６２〜６５％におい
て）である菌床。
【請求項４】請求項２または３記載の菌株を栽培し得
られるシイタケ子実体。