JPH07203994A - 血小板凝集の測定法 - Google Patents
血小板凝集の測定法Info
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- JPH07203994A JPH07203994A JP6326514A JP32651494A JPH07203994A JP H07203994 A JPH07203994 A JP H07203994A JP 6326514 A JP6326514 A JP 6326514A JP 32651494 A JP32651494 A JP 32651494A JP H07203994 A JPH07203994 A JP H07203994A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 改良された血小板凝集の測定法とトロンビン
阻害剤の血小板凝集を阻害する作用を測定するための診
断補助剤の提供。 【構成】 干渉するフィブリン凝塊の生成を防止するフ
ィブリン凝集阻害剤の存在下で血小板凝集を測定する方
法、およびトロンビン阻害剤およびフィブリン凝集阻害
剤を含有する、トロンビン阻害剤の血小板凝集を阻害す
る作用を測定するための診断補助剤。
阻害剤の血小板凝集を阻害する作用を測定するための診
断補助剤の提供。 【構成】 干渉するフィブリン凝塊の生成を防止するフ
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法、およびトロンビン阻害剤およびフィブリン凝集阻害
剤を含有する、トロンビン阻害剤の血小板凝集を阻害す
る作用を測定するための診断補助剤。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は干渉するフィブリン凝塊
の生成を防止するフィブリン凝集阻害剤の存在下で血小
板凝集を測定する方法、およびトロンビン阻害剤の血小
板凝集を阻害する作用を測定するための診断補助剤に関
する。
の生成を防止するフィブリン凝集阻害剤の存在下で血小
板凝集を測定する方法、およびトロンビン阻害剤の血小
板凝集を阻害する作用を測定するための診断補助剤に関
する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】トロ
ンビン阻害剤の血小板凝集を阻害する作用を測定するた
め、例えば血小板に富む血漿（ＰＲＰ）のような血小板
懸濁液およびトロンビンを含有する診断システムを使用
することができ、トロンビンは血小板の凝集を引き起こ
す。凝集の比率または程度は濁り測定、または比濁法に
より測定されうる。トロンビン阻害剤の添加により、血
小板の凝集は加えた量の関数として減速され、その結
果、阻害効果の定量が濁り測定から可能である。
ンビン阻害剤の血小板凝集を阻害する作用を測定するた
め、例えば血小板に富む血漿（ＰＲＰ）のような血小板
懸濁液およびトロンビンを含有する診断システムを使用
することができ、トロンビンは血小板の凝集を引き起こ
す。凝集の比率または程度は濁り測定、または比濁法に
より測定されうる。トロンビン阻害剤の添加により、血
小板の凝集は加えた量の関数として減速され、その結
果、阻害効果の定量が濁り測定から可能である。
【０００３】例えば血小板に富む血漿（ＰＲＰ）中でト
ロンビンにより引き起こされる血小板凝集の場合、トロ
ンビンにより引き起こされたフィブリン凝塊は測定技術
の障害となる。従来の方法においては、最大の血小板凝
集に到達しないように非常に低い濃度のトロンビンだけ
を使用することができる。しかしながら、低濃度のトロ
ンビンを用いても、干渉するフィブリン凝塊が一定時間
後に生じる。にも関わらず、より良い検出信号を与える
より高い濃度のトロンビンを使用できるように、手の込
んだ血小板洗浄工程を行う必要がある。
ロンビンにより引き起こされる血小板凝集の場合、トロ
ンビンにより引き起こされたフィブリン凝塊は測定技術
の障害となる。従来の方法においては、最大の血小板凝
集に到達しないように非常に低い濃度のトロンビンだけ
を使用することができる。しかしながら、低濃度のトロ
ンビンを用いても、干渉するフィブリン凝塊が一定時間
後に生じる。にも関わらず、より良い検出信号を与える
より高い濃度のトロンビンを使用できるように、手の込
んだ血小板洗浄工程を行う必要がある。
【０００４】したがって、本発明の目的は実験的に引き
起こされた血小板凝集の測定およびフィブリン凝塊の干
渉作用のないトロンビン阻害剤の測定を可能にする方法
を提供することである。Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ配列で
開始する短ペプチドはフィブリノーゲンと結合すること
が知られている（米国のNatl. Acad. Sci., 75, 3085〜
3089（1978年）を参照）。さらに、ペプチドＧｌｙ−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏは抗血小板試薬と組合せて血小板
離解実験において使用されている（Pharmacology and E
xperimental Therapeutics, 259, 1371〜1378（1991
年）を参照）。その上、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ
ｏ−Ａｌａ−ＮＨ2はフィブリン凝集阻害剤としてＦ XI
IIａおよびフィブリノーゲンの測定法において使用でき
ることが知られている。
起こされた血小板凝集の測定およびフィブリン凝塊の干
渉作用のないトロンビン阻害剤の測定を可能にする方法
を提供することである。Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ配列で
開始する短ペプチドはフィブリノーゲンと結合すること
が知られている（米国のNatl. Acad. Sci., 75, 3085〜
3089（1978年）を参照）。さらに、ペプチドＧｌｙ−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏは抗血小板試薬と組合せて血小板
離解実験において使用されている（Pharmacology and E
xperimental Therapeutics, 259, 1371〜1378（1991
年）を参照）。その上、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ
ｏ−Ａｌａ−ＮＨ2はフィブリン凝集阻害剤としてＦ XI
IIａおよびフィブリノーゲンの測定法において使用でき
ることが知られている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】今般、驚くべきことに、
高いトロンビン濃度でも、また実験的に必要な血小板凝
集に影響を及ぼすことなく、干渉するフィブリン凝塊の
生成がフィブリン凝集阻害剤を加えることにより抑制さ
れることを見い出した。したがって、本発明はフィブリ
ン凝集阻害剤の存在により干渉するフィブリン凝塊の生
成を防止することを包含する、トロンビンにより引き起
こされる血小板凝集の定性的または定量的測定法に関す
る。好適なフィブリン凝集阻害剤はペプチドまたはペプ
チド誘導体であり、特にヒトのα−フィブリン鎖のアミ
ノ末端と類似の構造を有するものである。このようなフ
ィブリン凝集阻害剤は例えばA.P. LaudanoらのProc. Na
tl. Acad. Sci., 75, 3085〜3089（1978年）に記載され
ている。好ましいペプチドはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇま
たはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏの配列を含有する
ものである。
高いトロンビン濃度でも、また実験的に必要な血小板凝
集に影響を及ぼすことなく、干渉するフィブリン凝塊の
生成がフィブリン凝集阻害剤を加えることにより抑制さ
れることを見い出した。したがって、本発明はフィブリ
ン凝集阻害剤の存在により干渉するフィブリン凝塊の生
成を防止することを包含する、トロンビンにより引き起
こされる血小板凝集の定性的または定量的測定法に関す
る。好適なフィブリン凝集阻害剤はペプチドまたはペプ
チド誘導体であり、特にヒトのα−フィブリン鎖のアミ
ノ末端と類似の構造を有するものである。このようなフ
ィブリン凝集阻害剤は例えばA.P. LaudanoらのProc. Na
tl. Acad. Sci., 75, 3085〜3089（1978年）に記載され
ている。好ましいペプチドはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇま
たはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏの配列を含有する
ものである。
【０００６】Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ−ＰｒｏまたはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｓａ
ｒの配列を有するペプチドまたはペプチド誘導体は特に
好ましい。さらに、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−
Ａｌａ−ＮＨ2はとりわけ好ましい。本発明はさらに、
測定対象のトロンビン阻害剤およびフィブリン凝集阻害
剤が同時に分析混合物に存在する、血小板阻害剤の血小
板凝集を阻害する作用を測定するための上記の方法の使
用に関する。驚くべきことに、この方法を用いて例えば
血漿中に存在するトロンビン阻害剤を検出するだけでな
く定量もまたすることができる。しかしながら、血漿以
外の液体で本発明の方法を使用する定性的または定量的
検出もまた可能である。
−Ａｒｇ−ＰｒｏまたはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｓａ
ｒの配列を有するペプチドまたはペプチド誘導体は特に
好ましい。さらに、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−
Ａｌａ−ＮＨ2はとりわけ好ましい。本発明はさらに、
測定対象のトロンビン阻害剤およびフィブリン凝集阻害
剤が同時に分析混合物に存在する、血小板阻害剤の血小
板凝集を阻害する作用を測定するための上記の方法の使
用に関する。驚くべきことに、この方法を用いて例えば
血漿中に存在するトロンビン阻害剤を検出するだけでな
く定量もまたすることができる。しかしながら、血漿以
外の液体で本発明の方法を使用する定性的または定量的
検出もまた可能である。
【０００７】本発明はさらに、トロンビンおよびフィブ
リン凝集阻害剤を含有する診断補助剤に関する。このタ
イプの診断補助剤は液体、例えば血漿中に存在するトロ
ンビン阻害剤の血小板凝集を阻害する作用の定性的また
は定量的測定のため本発明の方法を行うのに適してい
る。例えば緩衝液または患者の試料中の血小板凝集阻害
剤の測定法を以下の実施例により説明する。分析は次の
工程に従って行うことができる：血小板に富む血漿（Ｐ
ＲＰ）の投入、クエン酸塩溶液または血小板に乏しい血
漿（ＰＰＰ）の添加、フィブリン凝集阻害剤（場合によ
っては緩衝液中に溶解されている）の添加、 試験試料の添加；検出対象の阻害剤は例えば緩衝液また
はＰＰＰ中に溶解させることができ、あるいは血漿中に
存在させることができる；各種濃度（連続希釈）で分析
される、約３７℃で１〜２０分間のインキュベーショ
ン、血小板凝集の誘引物質、例えばトロンビンの添加、
血小板凝集の測定。
リン凝集阻害剤を含有する診断補助剤に関する。このタ
イプの診断補助剤は液体、例えば血漿中に存在するトロ
ンビン阻害剤の血小板凝集を阻害する作用の定性的また
は定量的測定のため本発明の方法を行うのに適してい
る。例えば緩衝液または患者の試料中の血小板凝集阻害
剤の測定法を以下の実施例により説明する。分析は次の
工程に従って行うことができる：血小板に富む血漿（Ｐ
ＲＰ）の投入、クエン酸塩溶液または血小板に乏しい血
漿（ＰＰＰ）の添加、フィブリン凝集阻害剤（場合によ
っては緩衝液中に溶解されている）の添加、 試験試料の添加；検出対象の阻害剤は例えば緩衝液また
はＰＰＰ中に溶解させることができ、あるいは血漿中に
存在させることができる；各種濃度（連続希釈）で分析
される、約３７℃で１〜２０分間のインキュベーショ
ン、血小板凝集の誘引物質、例えばトロンビンの添加、
血小板凝集の測定。
【０００８】この測定法に必要な量はほんの少しであ
る：ＰＲＰ好ましくは３００μl、フィブリン凝集阻害
剤溶液好ましくは２５μl；トロンビン阻害剤溶液、例
えばＣＲＣ ２２０（４−メトキシ−２,３,６−トリメ
チルフェニルスルホニル−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−４−
アミジノフェニル−アラニルピペリジド ＥＰ ０ ５１
３ ５４３）またはＰＰＰ好ましくは２５μl、全量は３
００〜１０００μl、好ましくは５００μlである。所定
量、例えば５００μlとするために、等張のＮａＣｌ溶
液で１０倍に希釈された０.３８％濃度のクエン酸塩溶
液からなる溶液を加えることができる。血小板凝集の測
定は好ましくは例えばLAbor社（Laborgeraete und Anal
ysesysteme Vertriebsgesellschaft mbH, ドイツ）製の
ＡＰＡＣＴ（自動化血小板凝集および凝固トレーサー）
のような凝集計（aggregometer）を用いて１mlのクヴェ
ット中、３７℃で撹拌しながら行われる。
る：ＰＲＰ好ましくは３００μl、フィブリン凝集阻害
剤溶液好ましくは２５μl；トロンビン阻害剤溶液、例
えばＣＲＣ ２２０（４−メトキシ−２,３,６−トリメ
チルフェニルスルホニル−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−４−
アミジノフェニル−アラニルピペリジド ＥＰ ０ ５１
３ ５４３）またはＰＰＰ好ましくは２５μl、全量は３
００〜１０００μl、好ましくは５００μlである。所定
量、例えば５００μlとするために、等張のＮａＣｌ溶
液で１０倍に希釈された０.３８％濃度のクエン酸塩溶
液からなる溶液を加えることができる。血小板凝集の測
定は好ましくは例えばLAbor社（Laborgeraete und Anal
ysesysteme Vertriebsgesellschaft mbH, ドイツ）製の
ＡＰＡＣＴ（自動化血小板凝集および凝固トレーサー）
のような凝集計（aggregometer）を用いて１mlのクヴェ
ット中、３７℃で撹拌しながら行われる。
【０００９】ＰＲＰは公知の方法によりクエン酸塩溶液
中で製造することができる。血小板の数は１０7〜１０9
／ml、好ましくは２×１０8／mlである。最適な凝集の
ための血小板濃度は慣用の血小板アゴニスト、例えばコ
ラーゲン、ＡＤＰまたはトロンボキサンＡ2を用いて測
定することができる。フィブリン凝集阻害剤の濃度は１
〜２０mM、好ましくは１０mMである。トロンビン濃度は
好ましくは４〜７nMであり、トロンビンを用いて達成す
ることのできる最大の血小板凝集の約８０％に相当す
る。
中で製造することができる。血小板の数は１０7〜１０9
／ml、好ましくは２×１０8／mlである。最適な凝集の
ための血小板濃度は慣用の血小板アゴニスト、例えばコ
ラーゲン、ＡＤＰまたはトロンボキサンＡ2を用いて測
定することができる。フィブリン凝集阻害剤の濃度は１
〜２０mM、好ましくは１０mMである。トロンビン濃度は
好ましくは４〜７nMであり、トロンビンを用いて達成す
ることのできる最大の血小板凝集の約８０％に相当す
る。
【００１０】略語： ＰＲＰ 血小板に富む血漿 ＰＰＰ 血小板に乏しい血漿 Ｇｌｙ グリシン Ｐｒｏ Ｌ−プロリン Ａｒｇ Ｌ−アルギニン Ａｌａ Ｌ−アラニン Ｓａｒ サルコシン ＮＨ2 アミド mM ミリモル／リットル nM ナノモル／リットル 以下の実施例により本発明を詳細に説明する。
【００１１】
〔実施例１〕 血小板凝集の測定 図１はフィブリン凝集阻害剤の存在下、トロンビン濃度
（nM）の関数としてＰＲＰ中のトロンビンにより引き起
こされる血小板凝集（非凝集血小板と凝集血小板の比
率、％）を示す。これにより従来技術よりも明確に高い
濃度のトロンビンを使用することができる。このように
拡張される参照プロットは血小板凝集の正確な測定に相
当寄与する。図１から明らかなように、血小板凝集は４
〜７nM（０.４〜０.７ＩＵ／ml）の濃度のトロンビンを
加えると、達成できる最大血小板凝集の約１０〜８０％
にわたり直線的に増加する。
（nM）の関数としてＰＲＰ中のトロンビンにより引き起
こされる血小板凝集（非凝集血小板と凝集血小板の比
率、％）を示す。これにより従来技術よりも明確に高い
濃度のトロンビンを使用することができる。このように
拡張される参照プロットは血小板凝集の正確な測定に相
当寄与する。図１から明らかなように、血小板凝集は４
〜７nM（０.４〜０.７ＩＵ／ml）の濃度のトロンビンを
加えると、達成できる最大血小板凝集の約１０〜８０％
にわたり直線的に増加する。
【００１２】〔実施例２〕 溶液Ａ（クエン酸塩溶液）
の調製 次の物質を１００mlの水に溶解する：３８０mgのクエン
酸三ナトリウム二水和物。場合によっては、溶液はさら
に５００mgのＤ−（＋）−グルコースおよび３５０mgの
アルブミンを含有してもよい。 溶液Ｂ（ＰＲＰ）の調製 ドナーからの９０mlの新鮮な全血をすでに１０mlの３.
８％濃度（ｗ／ｖ）のクエン酸三ナトリウム二水和物溶
液を含有するポリエチレン容器に入れる。この凝固防止
された血液をすぐに２００ｇで２０分間遠心分離する。
上澄液を新しいポリエチレン容器に移し、使用するまで
０℃で保存する。
の調製 次の物質を１００mlの水に溶解する：３８０mgのクエン
酸三ナトリウム二水和物。場合によっては、溶液はさら
に５００mgのＤ−（＋）−グルコースおよび３５０mgの
アルブミンを含有してもよい。 溶液Ｂ（ＰＲＰ）の調製 ドナーからの９０mlの新鮮な全血をすでに１０mlの３.
８％濃度（ｗ／ｖ）のクエン酸三ナトリウム二水和物溶
液を含有するポリエチレン容器に入れる。この凝固防止
された血液をすぐに２００ｇで２０分間遠心分離する。
上澄液を新しいポリエチレン容器に移し、使用するまで
０℃で保存する。
【００１３】溶液Ｃ（フィブリン凝集阻害剤）の調製 次の物質を１００mlの水に溶解する：１ｇのウシ血清ア
ルブミンおよび１０ｇのＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ
ｏ−Ａｌａ−ＮＨ2。溶液を使用するまで−２０℃で保
存する。 溶液Ｄ（トロンビン阻害剤）の調製 次の物質を１００mlの水に溶解する：１２７.６mgのト
ロンビン阻害剤 ＣＲＣ２２０（４−メトキシ−２,３,
６−トリメチルフェニルスルホニル−Ｌ−アスパルチル
−Ｄ−４−アミジノフェニルアラニルピペリジド）。生
理食塩水で希釈されたＣＲＣ ２２０溶液を分析に使用
するために調製する。すべての溶液を新しく作り、０℃
まで冷却する。
ルブミンおよび１０ｇのＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒ
ｏ−Ａｌａ−ＮＨ2。溶液を使用するまで−２０℃で保
存する。 溶液Ｄ（トロンビン阻害剤）の調製 次の物質を１００mlの水に溶解する：１２７.６mgのト
ロンビン阻害剤 ＣＲＣ２２０（４−メトキシ−２,３,
６−トリメチルフェニルスルホニル−Ｌ−アスパルチル
−Ｄ−４−アミジノフェニルアラニルピペリジド）。生
理食塩水で希釈されたＣＲＣ ２２０溶液を分析に使用
するために調製する。すべての溶液を新しく作り、０℃
まで冷却する。
【００１４】溶液Ｅ（トロンビン）の調製 ４.２μｇのヒトのα−トロンビンを１mlの水に溶解す
る（１０ＩＵ／ml）。生理食塩水で希釈されたトロンビ
ン溶液を分析に使用するために調製する。すべての溶液
を新しく作り、０℃まで冷却する。 分析手順 ３００μｌの溶液Ｂ、１００μｌの溶液Ａ、２５μｌの
溶液Ｃおよび２５μｌの溶液ＤをＡＰＡＣＴ凝集計（LA
bor）の１ml容量の測定用クヴェット（１cmの長さ、連
続撹拌）にピペットで移し、３７℃で１分間プレインキ
ュベートする。次に、５０μｌの溶液Ｅを加え、光の透
過率を時間の関数として記録する。測定を信号が一定に
なるまで継続し、それは通常５分後に到達する。増加す
る濃度のトロンビン阻害剤を各分析混合物に加える。ト
ロンビン阻害剤の添加量を知ることにより、例えばトロ
ンビン阻害剤についてのＩＣ50を定量的に測定すること
ができる（図２）。本実施例のＩＣ50は１０nMであっ
た。
る（１０ＩＵ／ml）。生理食塩水で希釈されたトロンビ
ン溶液を分析に使用するために調製する。すべての溶液
を新しく作り、０℃まで冷却する。 分析手順 ３００μｌの溶液Ｂ、１００μｌの溶液Ａ、２５μｌの
溶液Ｃおよび２５μｌの溶液ＤをＡＰＡＣＴ凝集計（LA
bor）の１ml容量の測定用クヴェット（１cmの長さ、連
続撹拌）にピペットで移し、３７℃で１分間プレインキ
ュベートする。次に、５０μｌの溶液Ｅを加え、光の透
過率を時間の関数として記録する。測定を信号が一定に
なるまで継続し、それは通常５分後に到達する。増加す
る濃度のトロンビン阻害剤を各分析混合物に加える。ト
ロンビン阻害剤の添加量を知ることにより、例えばトロ
ンビン阻害剤についてのＩＣ50を定量的に測定すること
ができる（図２）。本実施例のＩＣ50は１０nMであっ
た。
【図１】フィブリン凝集阻害剤の存在下、ＰＲＰ中のト
ロンビンにより引き起こされる血小板凝集を示すプロッ
ト。
ロンビンにより引き起こされる血小板凝集を示すプロッ
ト。
【図２】ＰＲＰ中の血小板凝集におけるトロンビン阻害
剤の効率（ＩＣ50）の測定結果を示すプロット。
剤の効率（ＩＣ50）の測定結果を示すプロット。
Claims (8)
- 【請求項１】 干渉するフィブリン凝塊の生成がフィブ
リン凝集阻害剤の存在により防止される、フィブリンの
存在下でトロンビンにより引き起こされる血小板凝集の
定性的または定量的測定法。 - 【請求項２】 フィブリン凝集阻害剤はペプチドまたは
ペプチド誘導体である請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 ペプチドまたはペプチド誘導体はそのア
ミノ末端にヒトのα−フィブリン鎖のアミノ末端と類似
の構造を含有する請求項２記載の方法。 - 【請求項４】 構造がＧｌｙ−Ｐｒｏ−ＡｒｇまたはＧ
ｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏの配列を有するペプチド
である請求項３記載の方法。 - 【請求項５】 ペプチドまたはペプチド誘導体はＧｌｙ
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ、
Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＳａｒまたはＧｌｙ−Ｐｒｏ
−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−ＮＨ2の配列を有する請求
項２記載の方法。 - 【請求項６】 ４〜７nMのトロンビンが使用される請求
項１記載の方法。 - 【請求項７】 トロンビン阻害剤およびフィブリン凝集
阻害剤が同時に分析混合物中に存在する、トロンビン阻
害剤の血小板凝集を阻害する作用の定性的または定量的
測定に使用される請求項１記載の方法。 - 【請求項８】 トロンビンおよびフィブリン凝集阻害剤
を含有する診断補助剤。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4344919A DE4344919A1 (de) | 1993-12-30 | 1993-12-30 | Verfahren zur Bestimmung der Thrombozytenaggregation |
| DE4344919:0 | 1993-12-30 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07203994A true JPH07203994A (ja) | 1995-08-08 |
| JP3684451B2 JP3684451B2 (ja) | 2005-08-17 |
Family
ID=6506496
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP32651494A Expired - Fee Related JP3684451B2 (ja) | 1993-12-30 | 1994-12-28 | 血小板凝集の測定法 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5563041A (ja) |
| EP (1) | EP0661383B1 (ja) |
| JP (1) | JP3684451B2 (ja) |
| KR (1) | KR950018482A (ja) |
| AT (1) | ATE199939T1 (ja) |
| AU (1) | AU702099B2 (ja) |
| CA (1) | CA2138931C (ja) |
| DE (2) | DE4344919A1 (ja) |
| ES (1) | ES2155842T3 (ja) |
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- 1993-12-30 DE DE4344919A patent/DE4344919A1/de not_active Withdrawn
-
1994
- 1994-12-15 DE DE59409698T patent/DE59409698D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-15 EP EP94119803A patent/EP0661383B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-15 ES ES94119803T patent/ES2155842T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-15 AT AT94119803T patent/ATE199939T1/de active
- 1994-12-22 CA CA002138931A patent/CA2138931C/en not_active Expired - Fee Related
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