JPH07188035A

JPH07188035A - 軟骨保護剤

Info

Publication number: JPH07188035A
Application number: JP5347338A
Authority: JP
Inventors: Takatoshi Watanabe; 孝寿渡辺; Katsumi Kawaguchi; 克己河口; Satoshi Fujimoto; 智藤本
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1993-12-24
Filing date: 1993-12-24
Publication date: 1995-07-25

Abstract

(57)【要約】【構成】本物質は多糖類で、菌類、特にクレブシェラ
属に属する菌の培養により得られる。主要構成糖はラム
ノース、ガラクトース、グルコース、マンノース、グル
クロン酸で、白色ないし淡褐色の粉末であり、分子量は
１０³〜１０⁷、元素分析はＣ、Ｈ、Ｎ、Ｓ等を示す。【効果】本物質は、軟骨マトリックスを構成するグリ
コサミノグリカンの減少を強く抑制し、軟骨保護作用を
示し、低毒性である。従って、慢性関節リウマチ、変形
性関節症、肩関節周囲炎、頸肩腕症候群、腰痛症等の関
節症の治療に極めて有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は軟骨保護剤に関する。詳
しくは多糖類を含有する軟骨保護剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】関節症には、慢性関節リウマチ、リウマ
チ熱、及び変形性関節症等がある。中でも慢性関節リウ
マチ及び変形性関節症は患者数が多く、主要な関節症と
して検討されてきた。変形性関節症は、先天性のもの或
いは二次性のものと、老化による関節軟骨の退行変性に
よる一次性のものがある。一次性の変形性関節症は、近
年老齢者人口の増加につれて増加している。慢性関節リ
ウマチと変形性関節症では、病因、病態に大きな違いが
ある。しかし何れも最終的には、軟骨破壊により関節機
能が障害される点では共通している。慢性関節リウマ
チ、リウマチ熱、全身性エリテマトーデス、変形性関節
症等のリウマチ性疾患に対する第一選択薬は、アスピリ
ン、インドメタシン等の鎮痛抗炎症剤である。慢性関節
症治療薬としては、他にシオゾール等の金製剤、免疫調
節剤、ステロイド剤、Ｄ−ペニシラミン等が使用され
る。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記鎮
痛抗炎症剤は、関節軟骨の破壊抑制効果がなく、軟骨細
胞を用いた実験においては、逆に、増悪する場合もあ
る。更に、上記慢性関節症治療薬にも、関節軟骨の破壊
抑制作用は見だされていない。本発明者等は、関節軟骨
の破壊を抑制する軟骨保護剤を開発すべく鋭意検討した
結果、下記の多糖類（以下本物質と称する）が、軟骨マ
トリックスを構成するグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）
の減少を強く抑制することを見出し、軟骨保護剤として
有用である事を知り、本発明を完成するに至った。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本物質の起源はいずれの
ものであってもよいが、一般に菌より生産される。特に
クレブシェラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）の菌より生産
される。本物質の一部は特開平４ー２９９９８６号公
報、特願平４ー３１０９５６号公報、特願平５ー８２５
１１号公報、特願平５ー１６７３５７号公報、特願平５
ー１２３１４９号公報等に記載されている。

【０００５】クレブシェラ属に属する本物質産生菌とし
ては、クレブシェラ・ニューモニア（Ｋｌｅｂｓｉｅｌ
ｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシェラ・プラン
ティコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｌａｎｔｉｃｏ
ｌａ）、クレブシェラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌ
ｌａｏｘｙｔｏｃａ）、及びクレブシェラ・テリゲナ
（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｔｅｒｒｉｇｅｎａ）があげ
られる。なお、クレブシェラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌ
ａ）菌株は、紫外線、Ｘ線、放射線などの照射及び突然
変異源（例えば、ニトロソグアニジン、ナイトロジェン
マスタード、アクリジンオレンジ）などの変異手段によ
り容易に変異し得るので、このようにして得られる変異
株であっても、本物質の産生能を有するものは利用でき
る。

【０００６】次に、クレブシェラ属の菌株を用いての本
物質の製造方法を説明する。本物質は、上記菌株を、炭
素源、窒素源、およびその他の成育に必要な栄養成分を
含む固体培地もしくは液体培地中で、振盪培養や通気攪
拌培養のような好気的培養を行うことにより生産され
る。炭素源は、ラクトース、シュークロース、マルトー
ス、ガラクトース、グルコース、フラクトース等の糖類
又はグリセロール等が例示し得るが、なかでもラクトー
スが好ましい。これら糖類の培地中における濃度は使用
菌株が成育し得る程度あれば特に限定されないが、通常
１〜１０重量％、好ましくは３〜７重量％である。また
窒素源は、ポリペプトン、酵母エキス、肉エキス、もし
くはトリプチケースペプトンのような有機物、または硝
酸塩、アンモニウム塩のような無機物を例示し得るが、
有機態の窒素源が好ましい。更に、必要に応じて、リン
酸一カリウムやリン酸二カリウムのようなリン酸塩；
鉄、銅、マグネシウム、マンガン、モリブデン、亜鉛、
ホウ素等の微量金属類；ビオチン、チアミン、ビタミン
B₁₂等のビタミン類；及び核酸類等を添加してもよい。

【０００７】培養温度は２０〜３７℃、好ましくは２５
〜３２℃である。培地のｐＨは３〜１１、好ましくは４
〜１０．５である。培養時間は培地の粘度が最大に達す
るまで行えば良いが、通常は１〜７日間培養する。

【０００８】培養終了後、培地中の本物質を分離する。
液体培地の場合には、培養終了後培養液を水で希釈し、
遠心分離などにより菌体等の不純物を除去する。培養液
にメタノール、エタノール、イソプロパノール、及びア
セトンのような有機溶媒；セチルトリメチルアンモニウ
ム塩のような第４級アンモニウム塩；又はブチルアマイ
ドのような酸アマイドを加えると本物質が沈殿してく
る。この沈殿を乾燥することにより本物質を得る事が出
来る。

【０００９】本物質を必要に応じてクロロスルホン酸、
ピペリジンーＮ−スルホン酸等を含む溶液中で３５〜１
４０℃好ましくは５０〜９０℃で処理してもよい。反応
物を、例えば、中和、濃縮、沈殿、クロマトグラフィー
等により精製して、スルホン化物を得ても良い。本物質
は次の特性を有する。ａ外観：白色乃至淡褐色粉末ｂ溶解性：水に易溶、メタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルム、及びベンゼンに難溶、鉱酸で加水分解ｃ主要構成糖：ラムノース０．０〜３７．３％、ガ
ラクトース１６．８〜７０．０％、グルコース０．０〜
３６．６％、グルクロン酸１２．３〜３７．０％、マン
ノース０．０〜２７．９％ｄ分子量：１×１０³〜１×１０⁷ ｅ元素分析値：Ｃ５．０〜４０．０％、Ｈ２．
０〜６．０％、Ｎ０．０〜１．０％、Ｓ０．０〜
２．０％

【００１０】上述の本物質は更に水に溶解し、溶質をメ
タノール、エタノール、イソプロパノールやアセトンの
ような有機溶媒；セチルトリメチルアンモニウム塩のよ
うな第４級アンモニウム塩；又はブチルアマイドのよう
な酸アマイドを用いて繰り返し再析出させる。更に必要
に応じて透析又はクロマトグラフィーを行い精製処理に
より本物質を得る事が出来る。これらをスルホン化して
もよい。精製した本物質の特性は次の通りである。

【００１１】ａ外観：白色粉末ｂ溶解性：水に易溶、メタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルム、及びベンゼンに難溶、鉱酸で加水分解ｃ主要構成糖：ラムノース０．０〜３３．０％、ガ
ラクトース１６．８〜６５．０％、グルコース０．０〜
３６．６％、グルクロン酸１４．５〜３５．０％、マン
ノース０．０〜２７．０％ｄ分子量：１×１０⁴〜１×１０⁷ ｅ元素分析値：Ｃ３１．０〜４０．０％、Ｈ
４．０〜６．０％、Ｎ０．０〜０．２％、Ｓ０．０
〜２．０％

【００１２】本物質の急性毒性は次の通りである。ＪＣ
Ｌ／ＩＣＲマウス（雄、４週齢）に、本物質（１０００
ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した後、１週間観察したが、死
亡も、何等異常も見られなかった。本物質は、培養軟骨
細胞（家兎の肩、膝関節軟骨細胞）における軟骨破壊抑
制作用を有する（後記実施例４乃至５参照）。従って、
本物質は関節の軟骨破壊を伴う各種関節症のための軟骨
保護剤として有用である。このような関節症の例は、慢
性関節リウマチ、変形性関節症、肩関節周囲炎、頸肩腕
症候群、腰痛症等である。

【００１３】製剤形態は、一般的な形態でよい。本物質
は単独又は製剤上許容し得る担体もしくは希釈剤との混
合物の何れでも、製剤として使用できる。製剤中の有効
成分の量は、０．０１〜１００重量％、好ましくは０．
１〜７０重量％である。この軟骨保護剤は、経口、非経
口何れでも投与できる。投与量は、対象（動物あるいは
ヒト）、年齢、個人差、病状等に依るので、下記範囲外
量を投与する場合もある。しかしながら、一般にヒトを
対象とする場合、本物質の経口投与量は、１日当たり
０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ（体重）、好ましくは０．５
〜３００ｍｇ／ｋｇ（体重）である。通常、１日量を、
１回または２〜４回に分けて投与する。

【００１４】

【実施例】

実施例１本物質（Ｎｏ．１〜Ｎｏ．３）の製造：クレブシェラ・
プランチコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｌａｎｔｉ
ｃｏｌａ）（ＫＰＳ５００３，微工研条寄第３３００
号）を、ラクトース（３重量％）、トリプチケースペプ
トン（０．３５重量％）、リン酸一カリウム（０．６重
量％）、硫酸マグネシウム（０．０７重量％）、塩化マ
ンガン（０．０００１重量％）、および寒天（１．４重
量％）から成る斜面培地において増殖させたものを白金
耳でかき取り、上記培地において寒天を除いた液体培地
（１０ｍｌ）に接種し、３０℃で１日間前培養を行っ
た。次いで、上記培地（ｐＨ１０、１０００ｍｌ）を１
２０℃で１５分間加熱滅菌した。これに上記培養菌を接
種し、３０℃で５日間振盪培養（１２０ｒｐｍ）を行っ
た。培養液を遠心分離（３１０００ｇ、１５分間）し、
菌体を除去した。培養液にエタノール（２倍量）を加え
て沈殿を得た。この沈殿を遠心分離により採取し、エタ
ノール洗浄を繰り返した。洗浄物にアセトンを加えてホ
モジナイズし、次にアセトンを除去し、本物質（Ｎｏ．
１）（１３．３ｇ）を得た。

【００１５】本物質（Ｎｏ．１）（４．０ｇ）及びＤＭ
ＳＯ（３００ｍｌ）をナス型フラスコ（１５００ｍｌ）
に加えて、室温で２時間攪拌した。ピペリジン−Ｎ−ス
ルホン酸（８．８ｇ）をこの溶液に加え、８５℃で４５
分間攪拌した。ナス型フラスコを氷浴上に移し、飽和炭
酸水素ナトリウム（３００ｍｌ）を加え、中和した。こ
の中和液をビーカー（５０００ｍｌ）に移し、アセトン
（２０００ｍｌ）を加え、沈殿を得た。この沈殿を採取
し、アセトンで３回洗浄した。次に洗浄物を水に溶解
し、透析し、凍結乾燥をして、本物質（Ｎｏ．２）
（３．５ｇ）を得た。

【００１６】本物質（Ｎｏ．１）（４．０ｇ）を蒸留水
に溶解し、遠心分離（４℃，３１０００ｇ）にかけた。
この上清にエタノールを加えて白色固体を析出させた。
更に析出を２回繰り返した。析出物を蒸留水に溶解し、
純水に対して２４時間透析を行い、続いて真空凍結乾燥
を行い、本物質（Ｎｏ．３）（３．６ｇ）を白色物とし
て得た。本物質（Ｎｏ．１〜Ｎｏ．３）の特性を表１及
び表２に示す。

【００１７】

【表１】

【００１８】

【表２】

【００１９】構成糖：加水分解物のアルディトール・
アセテート化物をガスクロ（島津ＧＣ−８ＡＰＦ）で分
離、測定した。元素分析：柳本ＭＴ３型元素分析器を用いた。Ｓは堀
場炭素硫黄分析装置（ＥＭＩＡー５１０）を用いた。分子量：ＧＰＣ（カラムはＡｓａｈｉｐａｋＧＳＭ
７００Ｈ２連）を用いた。

【００２０】実施例２本物質（Ｎｏ．４〜Ｎｏ．７）の製造：クレブシェラ・
オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ）
ＪＣＭ１６６５、クレブシェラ・テリゲナ（Ｋｌｅｂｓ
ｉｅｌｌａｔｅｒｒｉｇｅｎａ）ＪＣＭ１６８７（Ａ
ＴＣＣ３３２５７）、クレブシェラ・ニューモニア（Ｋ
ｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ＫＰＳ５
００２（微工研条寄第６２５号）、及びクレブシェラ・
プランチコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｌａｎｔｉ
ｃｏｌａ）ＪＣＭ７２５１（ＡＴＣＣ１５０５０）の各
々を、ラクトース（３重量％）、トリプチケースペプト
ン（０．３５重量％）、リン酸一カリウム（０．６重量
％）、硫酸マグネシウム（０．０７重量％）、及び寒天
（１．４重量％）から成る斜面培地において増殖させ
た。これらを白金耳でかき取り、上記培地において寒天
を除いた液体培地（１０ｍｌ）の各々に接種し、２８℃
で１日間前培養を行った。次いで、上記培地（ｐＨ１
０、１００ｍｌ）を１２０℃で１５分間加熱滅菌し、こ
れに上記培養菌の各々を接種し、２８℃で、１日間振盪
培養（１８０ｒｐｍ）を行った。培養液を遠心分離（３
１０００ｇ、１５分間）し、菌体を除去した。培養液に
エタノール（２倍量）を加えて沈殿を得た。この沈殿を
遠心分離にかけた。遠沈物をエタノールで３回洗浄し
た。洗浄物を蒸留水に溶解し、真空凍結乾燥し、本物質
（Ｎｏ．４、Ｎｏ．５、Ｎｏ．６、及びＮｏ．７）
（１．４５ｇ、０．９５ｇ、１．０ｇ、及び０．９５
ｇ）を白色乃至淡褐色物として得た。特性を表３及び表
４に示す。

【００２１】

【表３】

【００２２】

【表４】

【００２３】本物質（Ｎｏ７）を実施例１と同様にして
スルホン化して本物質（Ｎｏ．８）を得た。更に本物質
（Ｎｏ．４、Ｎｏ．５、及びＮｏ．７）を蒸留水に溶解
し、遠心分離（４℃、３１０００ｇ）にかけた。この上
清にエタノールを加えて白色固体を析出させた。更に析
出を２回繰り返した。析出物を蒸留水に溶解し、純水に
対して２４時間透析を行い、続いて真空凍結乾燥を行
い、本物質（Ｎｏ．９〜Ｎｏ．１１）を得た。特性を表
５に示す。

【００２４】

【表５】

【００２５】実施例３急性毒性（ＬＤ₅₀）：４週齢のマウス（雄、ＪＣＬ／Ｉ
ＣＲ）を２２〜２５℃の飼育室でゲージに１０匹ずつ収
容し、固型飼料及び水を自由に摂取させた。本物質を生
理食塩水溶液（２．５ｗ／ｖ％）とし、４０ｍｌ／ｋｇ
量を胃ゾンデにより強制経口投した。本物質（Ｎｏ．１
〜Ｎｏ．１１）の各々の投与群について試験マウスを―
週間観察したが、異常も、死亡も認められなかった。Ｌ
Ｄ₅₀値は１０００ｍｇ／ｋｇ以上であった。

【００２６】実施例４培養軟骨細胞における軟骨破壊抑制作用：ａ）培養軟骨細胞の調製家兎（ＮｅｗＺｅａｌａｎｄＷｈｉｔｅＲａｂｂ
ｉｔ）（体重１〜１．５ｋｇ）の肩膝関節等より無菌的
に軟骨を取り出した。これをＰＢＳ（Ｃａ²⁺、Ｍｇ²⁺フ
リー）、ハンクス、及びＥＤＴＡ（０．１％）含有ＰＢ
Ｓでよく洗浄した後、約１ｍｍ角に刻んだ。これにＥＤ
ＴＡ（０．１％）含有ＰＢＳ（Ｃａ²⁺、Ｍｇ²⁺フリー）
を加え、３７℃の恒温槽で３０分間処理した。更に、ト
リプシン溶液（０．２５％）を用いて３７℃で１時間処
理し、軟骨に付着した結合組織を取り除いた。上清を除
去した後、軟骨を０．２％コラゲナーゼＨａｍＦ−
１２（ＦＢＳ１０％含有）溶液で約２〜２．５時間処理
した。このコラゲナーゼ溶液を遠心分離（１５００ｒｐ
ｍ）した後、ＦＢＳ（１０％）含有ハムメディウム（軟
骨メディウム）で２回洗浄し、最終的に軟骨細胞を３×
１０⁵個／ｍｌにした。この分散液（１ｍｌずつ）をプ
レート（２４穴）に播種し、４日後コンフルエントに達
した後、２週間以内に実験に供した。

【００２７】ｂ）被験物質及び軟骨破壊因子の添加これまで軟骨細胞の培養に使用した軟骨メディウムを取
り除き、新たに血清フリーのＳ−ｃｌｏｎｅ培地８００
μｌ（０．１％ヒト血清アルブミン含有）を加え、これ
に各濃度の被験物質（１００μｌ）を加えた。分散液を
二酸化炭素（５％）と空気（９５％）の存在下で２時間
培養した後、軟骨破壊因子のインターロイキンー１α
（ＩＬ−１α）（最終濃度２０ｕ／ｍｌ）を軟骨細胞培
養液中に加えた。

【００２８】ここで使用した被験物質は以下の通りであ
る。本物物質：Ｎｏ．１〜Ｎｏ．３比較物質：インドメタシン（ＩＭ）

【００２９】ｃ）グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の定
量２日後、軟骨細胞培養上清を取り除いた。残りの軟骨マ
トリックス層に、パパイン溶液（０．０３％、１ｍｌ）
を加え、６５℃で１時間反応させ、マトリックス層から
ＧＡＧを遊離させた。処理したパパイン溶液中のＧＡＧ
含有量を、１，９−ジメチルメチレンブルー法を用いて
定量した（Ｒ．Ｗ．Ｆａｒｎｄａｌｅ，Ｂｉｏｃｈｉ
ｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．，Ｖｏｌ．８８３，ｐ
ｐ．１７３〜１７７，１９８６参照）。軟骨破壊因子無
添加群（コントロール）の軟骨マトリックス中のＧＡＧ
含有量を１００とした時の、各被験物質のＧＡＧ相対量
を下記の式で求めた。コントロールのＧＡＧ含有量は、
軟骨細胞がコンフルエントに達した後実験に供するまで
の経過日数の違いにより、ある幅を示した。

【００３０】

【数１】ＧＡＧ相対量％＝（Ｂ／Ａ）×１００Ａ：軟骨破壊因子無添加群（コントロール）のＧＡＧ含
有量Ｂ：軟骨破壊因子添加群又は（軟骨破壊因子＋被験物
質）添加群のＧＡＧ含有量

【００３１】結果を表６示す。ＧＡＧ含有量はｎ＝３の
平均値である。各実験について、コントロール及び軟骨
破壊因子添加群を入れた。軟骨破壊因子無添加群（コン
トロール）のＧＡＧ含有量に対して、軟骨破壊因子であ
るＩＬー１αを添加することにより、ＧＡＧの減少が誘
導された。この条件下で、本物質は、ＧＡＧの減少を抑
制し、軟骨破壊抑制作用を有することが確認された。こ
れに対して、従来の鎮痛抗炎症剤であるインドメタシン
では、軟骨破壊抑制作用は見られなかった。

【００３２】

【表６】 ─────────────────────────────────── 被験物質量ＧＡＧ量（μｇ／ｍｌ）ＧＡＧ相対量 ─────────────────────────────────── コントロール１７．４１００ＩＬ−１α ２０ｕ／ｍｌ７．１６４１＋Ｎｏ．１１ｍｇ／ｍｌ１３．８７９＋Ｎｏ．２１ｍｇ／ｍｌ１２．８７４コントロール８．３０１００ＩＬ−１α ２０ｕ／ｍｌ６．３１７６＋Ｎｏ．３１ｍｇ／ｍｌ９．１５１１０コントロール２８．０１００ＩＬ−１α ２０ｕ／ｍｌ１５．４５５＋ＩＭ１０μＭ１３．２４７＋ＩＭ３３μＭ１２．０４２ ───────────────────────────────────

【００３３】実施例５軟骨マトリックス中のプロテオグリカン（ＰＧ）の分解
抑制：ＰＧの分解はＳｏｌｕｒｓｈとＭｅｉｅｒ（Ｊ．
Ｅｘｐ．Ｚｏｏｌ．，１８１，２５３ー２６２，１９７
２）及び加藤（Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ．Ｒｅｓ．，１３０，
７３ー８１，１９８０）の方法を用いた。軟骨マトリッ
クス中のあらかじめラベルされた³⁵Ｓ−ＧＡＧの培地中
への放出量で示した。軟骨細胞がコンフルエントに達し
た後、これを７４ｋＢｑのＮａ₂ＳＯ₄含有ＨａｍＦ−
１２（１０％ＦＢＳ含有）中で２４時間培養してＧＡＧ
を硫酸化した。培養後、大部分のフリーの³⁵ＳＯ₄ ^2-を
含有している培地を除いた。更にマトリックス画分をＨ
ａｍＦ−１２培地で洗浄して、０．１％人アルブミン
含有のＳ−Ｃｌｏｎｅ培地（８００μｌ）を加えた。２
時間後、被験物質（Ｎｏ．１〜Ｎｏ．２、Ｎｏ．４〜Ｎ
ｏ．１１）（最終濃度、１ｍｇ／ｍｌ）及び／又はフォ
ルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）（最終濃
度、０．１μｇ／ｍｌ）を加えて、２４時間培養した。
培地５００μｌを当量の１０％ＴＣＡで沈殿させた。沈
殿物を遠心分離してプロナーゼＥ（１ｍｇ／ｍｌ、０．
２ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ溶液）で５５℃、２４時間処理
した。処理物に非放射性のコンドロイチンサルフェート
（１００μｌ）を加えた後、³⁵Ｓ−ＧＡＧをＣＰＣ（１
％）にて沈降させ、遠心分離にかけた。沈殿物をＰＢＳ
（ー）に再溶解し、次に放射能を測定して³⁵Ｓ−ＧＡＧ
量を求めた。結果を表７に示す。

【００３４】

【表７】 ──────────────────────────────── 被験物質量 ³⁵Ｓ−ＧＡＧ量（ｄｐｍ×１０^ー3）／ｃｕｌｔｕｒｅ ──────────────────────────────── コントロール２５ＰＭＡ０．１μｇ／ｍｌ７１＋Ｎｏ．１１ｍｇ／ｍｌ９＋Ｎｏ．２〃５０＋Ｎｏ．４〃６６＋Ｎｏ．５〃４９＋Ｎｏ．６〃５１＋Ｎｏ．７〃３７＋Ｎｏ．８〃５９＋Ｎｏ．９〃５３＋Ｎｏ．１０〃４０＋Ｎｏ．１１〃３０ ────────────────────────────────

【００３５】実施例６製剤例（顆粒剤）：本物質（Ｎｏ．１）２０重量部乳糖６８重量部低置換ヒドロキシプロピルセルロース１０重量部ヒドロキシプロピルセルロース２重量部を均一に混合した後、湿潤剤(エタノール)３２重量部を
用いて練合した。次いで湿式造粒を行い、乾燥して顆粒
剤を得た。

【００３６】

【発明の効果】本物質は、軟骨マトリックスを構成する
ＧＡＧの減少を強く抑制し、軟骨保護作用を示し、更に
低毒性である。従って、本物質は、軟骨保護剤として、
慢性関節リウマチ、変形性関節症、肩関節周囲炎、頸肩
腕症候群、腰痛症等の関節症の治療に極めて有用であ
る。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記特性を有する多糖類を含有する軟骨
保護剤。ａ外観：白色乃至淡褐色粉末ｂ溶解性：水に易溶、メタノール、酢酸エチル、クロ
ロホルム、及びベンゼンに難溶、鉱酸で加水分解ｃ主要構成糖：ラムノース０．０〜３７．３％、ガ
ラクトース１６．８〜７０．０％、グルコース０．０〜
３６．６％、グルクロン酸１２．３〜３７．０％、マン
ノース０．０〜２７．９％ｄ分子量：１×１０³〜１×１０⁷ ｅ元素分析値：Ｃ５．０〜４０．０％、Ｈ２．
０〜６．０％、Ｎ０．０〜１．０％、Ｓ０．０〜
２．０％
【請求項２】多糖類はクレブシェラ属に属する菌より
得られたものである請求項１に記載の軟骨保護剤。
【請求項３】多糖類は下記特性を有すものである請求
項１に記載の軟骨保護剤。ａ外観：白色粉末ｂ溶解性：水に易溶、メタノール、酢酸エチル、ク
ロロホルム、及びベンゼンに難溶、鉱酸で加水分解ｃ主要構成糖：ラムノース０．０〜３３．０％、ガ
ラクトース１６．８〜６５．０％、グルコース０．０〜
３６．６％、グルクロン酸１４．５〜３５．０％、マン
ノース０．０〜２７．０％ｄ分子量：１×１０⁴〜１×１０⁷ ｅ元素分析値：Ｃ３１．０〜４０．０％、Ｈ
４．０〜６．０％、Ｎ０．０〜０．２％、Ｓ０．０
〜２．０％