JPH0657140B2 - 細胞融合装置 - Google Patents

細胞融合装置

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JPH0657140B2
JPH0657140B2 JP60280566A JP28056685A JPH0657140B2 JP H0657140 B2 JPH0657140 B2 JP H0657140B2 JP 60280566 A JP60280566 A JP 60280566A JP 28056685 A JP28056685 A JP 28056685A JP H0657140 B2 JPH0657140 B2 JP H0657140B2
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electric field
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cell fusion
parallel plate
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崇孝 望月
健三 戸田
守 古賀
好志 十川
慎一郎 高山
克行 今井
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N13/00—Treatment of microorganisms or enzymes with electrical or wave energy, e.g. magnetism, sonic waves
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
    • C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion

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Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は異種の細胞を電気刺激を利用して融合させる細
胞融合装置に関するものである。
（従来の技術） ２種類の細胞を電気刺激を利用して融合する場合、一対
の電極でしかも不平等電界がかけられる形状の電極（例
えばワイヤー電極や針型円筒電極）をもったチャンバに
細胞液を入れ、電極間でＡＣ（交流）電界を印加する。
これにより、電界強度の差を利用して、細胞液中に浮遊
している細胞どうしを密着させ、細胞融合を容易にでき
るようにしている。この現象は細胞が数珠つなぎになる
ことからパールチェーンと呼ばれ、多くの文献、論文な
どで発表されている、そしてこの状態でＤＣ（直流）電
界を印加して細胞を融合させる。
また、一対の平行平板電極をもつ細胞融合チャンバを用
い、その一対の平行平板電極にＤＣ電圧を印加するよう
にした例もある。
（発明が解決しようとする問題点） ワイヤー電極等をもつ細胞融合チャンバを用いた装置で
は、次のような問題点がある。
（１）電界強度が不平等となっているため細胞への有効
電界強度が正確につかめない。
（２）細胞が電極に付着し、細胞をとる時に細胞が壊れ
る。
（３）マルチ融合（３個以上の細胞が数珠つなぎになる
こと）になりやすい。
また、一対の平行平板電極を用い、ＤＣ電圧を印加する
装置では、上記の（２），（３）の問題点の他に、密着
性が低く融合率が低いという問題点がある。
本発明では細胞融合の重要なファクターである電界強度
（ＤＣ電界強度）を平等にして細胞への有効電界強度を
明確にし、電極に細胞を付着させず、電極と電極の間で
細胞どうしを密着させ、かつ、マルチ融合ではなくシン
グルペア（１対１の融合）を実現することのできる細胞
融合装置を提供することを目的とするものである。
（問題点を解決するための手段） 本発明の細胞融合装置は、細胞融合チャンバと電源・制
御部とを備えている。
細胞融合装置は極端な不平等電界とならない高さの一対
の平行平板電極をもち、これらの電極間に細胞液を収容
するようになっているとともに、それらの電極間の底面
が平滑な材料で形成され、又は平滑仕上面となってい
る。電源・制御部は一対の平行平板電極に交流電圧と直
流電圧とを切り換えて印加できるようになっている。
（実施例） 第１図は一実施例を表わす概略図、第２図は第１図中の
細胞融合チャンバ９のＡ−Ｂ切断位置での断面図であ
る。
この細胞融合装置は細胞融合チャンバ９と電源・制御部
１０とから構成されている。
細胞融合チャンバ９のチャンバ本体３には一定の間隔を
もつ一対の平行平板電極１ａ，１ｂが設けられている。
平行平板電極１ａと１ｂの間隔は電源電圧との関係で必
要な電界強度が実現できる範囲でできるだけ広くする。
平行平板電極１ａ，１ｂの高さを高くすると細胞液４が
多く必要となるので、極端な不平等電界とならない高さ
に抑えておく。２ａ，２ｂは電源接続端子である。
一対の平行平板電極１ａ，１ｂ間で挟まれたチャンバ本
体３の平面は平滑になっている。平行平板電極１ａ，１
ｂ間には細胞５を懸濁した細胞液４が収容される。
電源・制御部１０にはＡＣ電源６とＤＣ電源７とが備え
られており、それぞれ切換えスイッチ８ａ，８ｂを介し
て細胞融合チャンバ９の一対の平行平板電極１ａ，１ｂ
に電圧を印加するようになっている。
細胞５はチャンバ本体３の底面に沈殿する。電源接続端
子２ａ，２ｂを通してある周波数（５００ＫHz〜５ＭHz
程度）を有するＡＣ電界を印加すると、細胞５は電界の
方向に並び、その後隣り合った細胞間で密着をする。
この状態でＡＣ電界を印加することをやめ、ＤＣ電界を
印加する。これにより細胞は融合する。この時電極１
ａ，１ｂは平行平板電極間であるため、細胞５にかかる
電界強度は電極間では一定となる。しかもチャンバ本体
３の底面ではＡＣ電界が印加されたことにより電極１
ａ，１ｂと直角の方向、すなわち電界と同じ方向に細胞
が並ぶため、電界強度は計算値とほぼ等しくなり、細胞
５にかかった電界強度を正しくつかむことができる。
チャンバ本体３の底面を平滑にしてあるのは、ＡＣ電界
をかけた時に細胞の移動を容易にするためである。また
平行平板電極１ａ，１ｂの高さを抑え、電極間距離を広
げているのは、この方法はチャンバ本体３の底面を利
用、すなわち細胞を沈殿させてから行なう（浮遊させな
い）ためであり、そして一定の細胞液４の容量と細胞の
量をできる限り多くするためである。
シングルペアを実現するには、細胞密度を調節する必要
がある。好ましい細胞密度は１０４〜１５５／ml程度で
ある。
（発明の効果） 本発明の細胞融合装置では、細胞融合チャンバの一対の
電極を平行平板電極とし、電極間のチャンバ本体底面を
平滑にするとともに、一対の電極間にはＡＣ電界とＤＣ
電界とを切り換えて印加できるようにした。その結果、
次のような効果を達成することができる。
（１）細胞を融合するための有効電界強度が正確につか
める。
（２）ＡＣ電界を印加して細胞を密着することができ、
融合効率を高められる。
（３）電極と電極の間で細胞を密着することが可能であ
り、細胞を注出するとき損傷を与えない。
（４）シングルペアが実現できる。
【図面の簡単な説明】
第１図は一実施例を表わす概略図、第２図は第１図中の
細胞融合チャンバ９のＡ−Ｂ切断位置での断面図であ
る。 １ａ，１ｂ……平行平板電極、 ３……チャンバ本体、 ４……細胞液、 ６……ＡＣ電源、 ７……ＤＣ電源、 ８……切換えスイッチ、 ９……細胞融合チャンバ、 １０……電源・制御部。
フロントページの続き (72)発明者 十川 好志 京都府京都市中京区西ノ京桑原町１番地 株式会社島津製作所三条工場内 (72)発明者 高山 慎一郎 京都府京都市中京区西ノ京桑原町１番地 株式会社島津製作所三条工場内 (72)発明者 今井 克行 京都府京都市中京区西ノ京桑原町１番地 株式会社島津製作所三条工場内 (56)参考文献 特開 昭60−12969（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−251874（ＪＰ，Ａ)

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】極端な不平等電界とならない高さの一対の
    平行平板電極をもち、これらの電極間に細胞液を収容す
    るようになっているとともに、それらの電極間の底面が
    平滑な材料で形成され、又は平滑仕上面となっている細
    胞融合チャンバと、 前記一対の平行平板電極に交流電圧と直流電圧とを切り
    換えて印加する電源・制御部と、を備えた細胞融合装
    置。
JP60280566A 1985-12-11 1985-12-13 細胞融合装置 Expired - Fee Related JPH0657140B2 (ja)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP60280566A JPH0657140B2 (ja) 1985-12-13 1985-12-13 細胞融合装置
KR1019860010305A KR890003947B1 (ko) 1985-12-11 1986-12-03 세포융합장치
EP86117156A EP0225636B1 (en) 1985-12-11 1986-12-09 Apparatus for fusing cells
DE8686117156T DE3687889T2 (de) 1985-12-11 1986-12-09 Apparat fuer zellfusion.
US06/940,119 US4804450A (en) 1985-12-11 1986-12-10 Apparatus for fusing cells
CN86108459A CN1021460C (zh) 1985-12-11 1986-12-11 细胞融合装置

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JP60280566A JPH0657140B2 (ja) 1985-12-13 1985-12-13 細胞融合装置

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JPS62171667A JPS62171667A (ja) 1987-07-28
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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US6010312A (en) * 1996-07-31 2000-01-04 Kabushiki Kaisha Toyoda Jidoshokki Seiksakusho Control valve unit with independently operable valve mechanisms for variable displacement compressor

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DE3321239C2 (de) * 1983-06-11 1985-05-09 Kernforschungsanlage Jülich GmbH, 5170 Jülich Kammer zur Behandlung von Zellen im elektrischen Feld
JPS60251874A (ja) * 1984-05-30 1985-12-12 Hitachi Ltd 微粒子取扱い装置

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JPS62171667A (ja) 1987-07-28

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