JPS6349067A - 電気細胞融合用電源 - Google Patents
電気細胞融合用電源Info
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- JPS6349067A JPS6349067A JP61192722A JP19272286A JPS6349067A JP S6349067 A JPS6349067 A JP S6349067A JP 61192722 A JP61192722 A JP 61192722A JP 19272286 A JP19272286 A JP 19272286A JP S6349067 A JPS6349067 A JP S6349067A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、電気的な場と電気刺激とによって細胞の誘導
、及び細胞を融合又は、細胞に微細孔を設けろ時(エレ
クトロボーレーション)等に用いる細胞融合用電源に関
する。
、及び細胞を融合又は、細胞に微細孔を設けろ時(エレ
クトロボーレーション)等に用いる細胞融合用電源に関
する。
従来、電気的な場を利用して電極上に細胞を数珠状配列
に整列せしめる誘電泳動(dielectr。
に整列せしめる誘電泳動(dielectr。
phoresis : ジエレクトロフオレーシス)法
による細胞融合は、PEG(ポリエチレングリコール)
、センダイウィルス等を用いて行なう細胞融合に比べ、
操作性が良く、しかも使用する媒質に細胞に対する毒性
がない為、融合直後の細胞の洗浄が不用で、極めて簡易
で且つ確実な方法として近時注目され、その応用例に於
いては細胞質膜に穴をあけるエレクトロボーレーション
があげられる等、利用用途の幅は極めて広い。
による細胞融合は、PEG(ポリエチレングリコール)
、センダイウィルス等を用いて行なう細胞融合に比べ、
操作性が良く、しかも使用する媒質に細胞に対する毒性
がない為、融合直後の細胞の洗浄が不用で、極めて簡易
で且つ確実な方法として近時注目され、その応用例に於
いては細胞質膜に穴をあけるエレクトロボーレーション
があげられる等、利用用途の幅は極めて広い。
しかしながら、誘電泳動力を生じせしめる為には、細胞
の大きさ、種類等に応じ、100Hz〜100 M H
zの交流電圧を出力する電源が必要であることから、そ
の幅広い周波数帯を利用する電源 。
の大きさ、種類等に応じ、100Hz〜100 M H
zの交流電圧を出力する電源が必要であることから、そ
の幅広い周波数帯を利用する電源 。
構成は非常に複雑で、且つ電源自体が高価になってしま
う。
う。
更に、従来方法に於いては、約50〜150v/cmの
矩形波パルスを印加することによって、電極間に配置さ
れた隣接する1対の細胞の隣接部分に於ける細胞膜が破
壊され、事実上1ケの雑種又は同種細胞が生成される。
矩形波パルスを印加することによって、電極間に配置さ
れた隣接する1対の細胞の隣接部分に於ける細胞膜が破
壊され、事実上1ケの雑種又は同種細胞が生成される。
しかしながら同時に細胞と電極との間が結合してしまう
現象が生じ、融合してできた1ケの細胞を融合空間から
取り出す時、水流等の機械的操作によって電極から細胞
を剥離することは可能であるとしても、この過程は細胞
にしばしば損傷を与え、融合効率の低下を招く一因とな
っている。
現象が生じ、融合してできた1ケの細胞を融合空間から
取り出す時、水流等の機械的操作によって電極から細胞
を剥離することは可能であるとしても、この過程は細胞
にしばしば損傷を与え、融合効率の低下を招く一因とな
っている。
これに対し、電極表面をテフロン、シリコン等の細胞が
付着しにくい高分子膜で被覆すれば、細胞の付着を阻止
することが可能であるが、これらの膜は導電性を有しな
い為、この膜を通してパルス電圧を印加することが困難
となる。
付着しにくい高分子膜で被覆すれば、細胞の付着を阻止
することが可能であるが、これらの膜は導電性を有しな
い為、この膜を通してパルス電圧を印加することが困難
となる。
上記に鑑み本発明者らは、刺激パルスを10011z〜
100 M It zで変調する刺激パルス変調部を設
けた電気細胞融合装置が、該電極に細胞が付着する問題
を解消し融合の安定性と操作性とを向上させろのみなら
ず、電源の構成をより簡素にせしめることを見い出し、
本発明に到達したものである。
100 M It zで変調する刺激パルス変調部を設
けた電気細胞融合装置が、該電極に細胞が付着する問題
を解消し融合の安定性と操作性とを向上させろのみなら
ず、電源の構成をより簡素にせしめることを見い出し、
本発明に到達したものである。
以下、本発明電気細胞融合装置の実施例につき詳細に説
明する。
明する。
基準発振部(11)は、水晶発振子等を用いて正確なパ
ルス発振を行なう部分である。誘電泳動出力部(13)
は、基準発振部(11)の発振出力を分周し、所定の周
波数に変換したパルス信号に変換する。融合信号出力部
(12)は、外部からの動作信号Stが入力されると、
基準発振部(11)の発振出力をカウントし、所定の時
間幅を有するパルス信号を出力する。刺激パルス変調部
(14)は、融合信号出力部(12)の出力パルス電圧
を分周回路等を用いて10011zから100Hz〜1
00MHzの間の周波数で分周、変調された変調パルス
電圧を出力する。
ルス発振を行なう部分である。誘電泳動出力部(13)
は、基準発振部(11)の発振出力を分周し、所定の周
波数に変換したパルス信号に変換する。融合信号出力部
(12)は、外部からの動作信号Stが入力されると、
基準発振部(11)の発振出力をカウントし、所定の時
間幅を有するパルス信号を出力する。刺激パルス変調部
(14)は、融合信号出力部(12)の出力パルス電圧
を分周回路等を用いて10011zから100Hz〜1
00MHzの間の周波数で分周、変調された変調パルス
電圧を出力する。
尚、融合信号出力部(12)及び刺激パルス変調部(1
4)は、その回路構成に於いてその第1図のブロック図
に示すように分離構成されるのみてはなく、基準発振部
(11)からの発振出力を100Hz −100Hz〜
100MHzの間の周波数で分周し、その分周された出
力を所定の時間と所定の電圧値を持つパルス電圧とする
ような変換器を用いて1つの回路構成としてまとめても
よい。
4)は、その回路構成に於いてその第1図のブロック図
に示すように分離構成されるのみてはなく、基準発振部
(11)からの発振出力を100Hz −100Hz〜
100MHzの間の周波数で分周し、その分周された出
力を所定の時間と所定の電圧値を持つパルス電圧とする
ような変換器を用いて1つの回路構成としてまとめても
よい。
電圧変換部(15)(16)は各々誘電泳動出力部(1
3)、及び融合信号出力部(12:lから出力されたパ
ルス信号を、所定の電圧値を有する電圧パルスに変換す
るものである。
3)、及び融合信号出力部(12:lから出力されたパ
ルス信号を、所定の電圧値を有する電圧パルスに変換す
るものである。
第3図は、第1図に示す本発明電気細胞融合装置を用い
た態様を示す。図中、(1)は第1図に示す装置である
。2は白金等の導電材料からなる電極対である。第1図
の出力端が第3図に於ける電極対に接続されている。尚
、融合室及び細胞社濁液は省略した。
た態様を示す。図中、(1)は第1図に示す装置である
。2は白金等の導電材料からなる電極対である。第1図
の出力端が第3図に於ける電極対に接続されている。尚
、融合室及び細胞社濁液は省略した。
重畳部(17)は、電圧変換部(15)及び(16)の
各々の出力を重畳し、第2図(b)に示す出力波形を形
成する。
各々の出力を重畳し、第2図(b)に示す出力波形を形
成する。
次に、上記構成よりなる本発明電気細胞融合装置の動作
を図面を参照して詳細に説明する。
を図面を参照して詳細に説明する。
基準発振部(11)からの出力は、2分されそれぞれ誘
電泳動出力部(13)及び融合信号出力部(12)に入
力される。融合電圧出力部(12)は、外部からの動作
開始の信号Stが来るまで停止している。
電泳動出力部(13)及び融合信号出力部(12)に入
力される。融合電圧出力部(12)は、外部からの動作
開始の信号Stが来るまで停止している。
誘電泳動出力部(13月こ於いて基準発振部(11)か
らの出力を分周し、100Hz〜loOMHzのパルス
信号に変換され、電圧変換部(16)に於いて所定の電
圧値を有するパルス信号として第3図に示す電極対(2
)に出力される。電極対(43)の間でこのパルス電圧
による誘電泳動力が生じ、第・1図(a)に示す如く電
極間に細胞A、Bが数珠状に配列する。
らの出力を分周し、100Hz〜loOMHzのパルス
信号に変換され、電圧変換部(16)に於いて所定の電
圧値を有するパルス信号として第3図に示す電極対(2
)に出力される。電極対(43)の間でこのパルス電圧
による誘電泳動力が生じ、第・1図(a)に示す如く電
極間に細胞A、Bが数珠状に配列する。
数珠状に配列した後、融合電圧出力部(12)に、外部
からの動作開始記号Stが人力され、融合電圧出力部(
12)が動作を開始し、予め設定された計数値に到達す
るまで基準発振部(11)からの出力をカウントする。
からの動作開始記号Stが人力され、融合電圧出力部(
12)が動作を開始し、予め設定された計数値に到達す
るまで基準発振部(11)からの出力をカウントする。
計数値に到達した後、その計数値に見合ったパルス幅を
有するパルス信号が融合電圧出力部(12)より出力さ
れる。このパルス信号は、刺激パルス変調部(14)に
て10011z〜100Hz〜100MHz間の所定の
周波数に変調され、電圧変換部(15)にて所定の電圧
に変換された後、重畳部(I7)を介して電極(43)
に出力される。電極(43)間に数珠状に配列した細胞
は、このパルス電圧を印加され、第4図(b)に示す如
(融合が生ずる。
有するパルス信号が融合電圧出力部(12)より出力さ
れる。このパルス信号は、刺激パルス変調部(14)に
て10011z〜100Hz〜100MHz間の所定の
周波数に変調され、電圧変換部(15)にて所定の電圧
に変換された後、重畳部(I7)を介して電極(43)
に出力される。電極(43)間に数珠状に配列した細胞
は、このパルス電圧を印加され、第4図(b)に示す如
(融合が生ずる。
このパルス電圧は、従来の融合パルス電圧である単一パ
ルスを100Hz −100MHz間の所定の周波数に
よって変調した変調パルスである為、電極表面をテフロ
ン、シリコン等の高分子膜で被覆した電極を用いた場合
においても細胞の融合を誘導することが可能である。従
って、この電極との組合せにおいて、電極に細胞が付着
しない細胞融合装置を形成することができる。
ルスを100Hz −100MHz間の所定の周波数に
よって変調した変調パルスである為、電極表面をテフロ
ン、シリコン等の高分子膜で被覆した電極を用いた場合
においても細胞の融合を誘導することが可能である。従
って、この電極との組合せにおいて、電極に細胞が付着
しない細胞融合装置を形成することができる。
又、その各ブロックを構成する素子は、水晶発振器、カ
ウンター、分周器程度のもので容易に構成できることか
ら、簡単な構成でしかも電極に細胞が付着しない等、そ
の効果は絶大である。
ウンター、分周器程度のもので容易に構成できることか
ら、簡単な構成でしかも電極に細胞が付着しない等、そ
の効果は絶大である。
第1図は本発明の一実施例を示すブロック図、第2図は
出力波形図、第3図は本発明の一実施態様を示す図、第
4図は細胞融合の経過を示す図である。 (11)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・基早
発振部、(12)・・・・・・・・・・・・・・・・・
・融合信号出力部、(13)・・・・・・・・・・・・
・・・・・誘電泳動出力部、(14)・・・・・・・・
・・・・・・・・・・・刺激パルス変調部、(15)(
16)・・・・・電圧変換部、2 ・・・・・・・・・
・・・・・・・・・・・・・・・・電極。 特許出願人 株式会社アドバンス開発研究所第3図
出力波形図、第3図は本発明の一実施態様を示す図、第
4図は細胞融合の経過を示す図である。 (11)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・基早
発振部、(12)・・・・・・・・・・・・・・・・・
・融合信号出力部、(13)・・・・・・・・・・・・
・・・・・誘電泳動出力部、(14)・・・・・・・・
・・・・・・・・・・・刺激パルス変調部、(15)(
16)・・・・・電圧変換部、2 ・・・・・・・・・
・・・・・・・・・・・・・・・・電極。 特許出願人 株式会社アドバンス開発研究所第3図
Claims (1)
- (1)誘電泳動力を生じさせる為のパルス信号を生成す
る誘電泳動信号出力手段と、細胞融合を生じさせる為の
刺激パルスのパルス幅を設定する融合パルス信号出力手
段と、該融合パルス信号出力手段の出力パルスを100
Hz〜100MHzで変調する変調パルス信号出力手段
とよりなることを特徴とする電気細胞融合用電源。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP61192722A JPH074217B2 (ja) | 1986-08-20 | 1986-08-20 | 電気細胞融合用電源 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP61192722A JPH074217B2 (ja) | 1986-08-20 | 1986-08-20 | 電気細胞融合用電源 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS6349067A true JPS6349067A (ja) | 1988-03-01 |
JPH074217B2 JPH074217B2 (ja) | 1995-01-25 |
Family
ID=16295974
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP61192722A Expired - Lifetime JPH074217B2 (ja) | 1986-08-20 | 1986-08-20 | 電気細胞融合用電源 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH074217B2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6252844B1 (en) | 1996-09-13 | 2001-06-26 | Nec Corporation | Phase-change type optical recording medium and method of optically recording with the same |
WO2014098182A1 (ja) * | 2012-12-19 | 2014-06-26 | 国立大学法人東京医科歯科大学 | 心筋毒性検査および心筋細胞評価のための方法および装置 |
-
1986
- 1986-08-20 JP JP61192722A patent/JPH074217B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6252844B1 (en) | 1996-09-13 | 2001-06-26 | Nec Corporation | Phase-change type optical recording medium and method of optically recording with the same |
WO2014098182A1 (ja) * | 2012-12-19 | 2014-06-26 | 国立大学法人東京医科歯科大学 | 心筋毒性検査および心筋細胞評価のための方法および装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH074217B2 (ja) | 1995-01-25 |
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