JPH06502992A - 新しいヒト組み換えガンマ−インターフェロン - Google Patents
新しいヒト組み換えガンマ−インターフェロンInfo
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Abstract
Description
Claims (17)
- 1.以下のアミノ酸配列を持つポリペプチドIFN−ガンマC−10L: 【配列があります】
- 2.以下のアミノ酸配列を持つポリペプチドをコードするDNA配列: 【配列があります】
- 3.以下のアミノ酸配列をコードする寄託番号DSM6238のプラスミドDN A: 【配列があります】
- 4.請求項3に記載のプラスミドDNAを調製する方法であって、 前記5′非翻訳領域ならびに1194bpおよび143個のアミノ酸をもったc DNAのコード領域の一部が制限エンドヌクレアーゼによる開裂によって取り除 かれ、そして、前記3′非翻訳領域およびcDNAのコード領域の一部もまた制 限エンドヌクレアーゼによる開裂によって取り除かれ、そして、プラスミドにお けるこの遺伝子がバクテリア細胞に導入される、方法。
- 5.前記バクテリア細胞が、E.coliである、請求項4に記載の方法。
- 6.前記プラスミドがpKK233−2である、請求項4および5に記載の方法 。
- 7.前記5′領域およびリーダー配列の開裂のために使用された制限エンドヌク レアーゼが、AvaIIである、請求項4から6に記載の方法。
- 8.前記3′非翻訳領域およびコード領域の一部の開裂に使用された制限エンド ヌクレアーゼが、HinfIである、請求項4から7に記載の方法。
- 9.以下のの特性が結び付いた、請求項1に記載のポリペプチドの調製の方法で あって; a)IFN−ガンマC−10Lが請求項3に記載のプラスミドDNAによって発 現され、そして b)うまく発現したバクテリア細胞が壊され、得られた封入体が洗浄により可溶 性のバクテリアタンパク質がない状態にされ、そして c)封入体は変性によって溶液中にもたらされ次に復元工程が行われ、そして d)インターフェロン−ガンマC−10しが精製される、方法。
- 10.前記ガンマーインターフェロンがバッチ法(陽イオン交換法による)を使 って濃縮され、次にゲル濾過によって高度に精製される、請求項9に記載の方法 。
- 11.前記バクテリア細胞が機械的方法、例えば超音波によって破壊される、請 求項9および10に記載の方法。
- 12.樹脂中に等しく分布するために、陽イオン交換物質をIFN−ガンマC− 10Lと一様に接触させ、次に、洗浄されバッチ法で抽出される、請求項9から 11までに記載の方法。
- 13.一般的に使用される陽イオン交換物質(例えば、CM−セルロースあるい は【配列があります】が使われる、方法。
- 14.請求項1に記載のポリペプチドの薬剤における使用。
- 15.請求項14に記載の薬剤としての使用。
- 16.請求項14および15に記載のリウマチおよび腎臓癌の処置のための薬剤 としての使用。
- 17.請求項1に記載のポリペプチドのインビトロ実験、例えばインターフュロ ンレベルの測定、のための精密化成品としての使用。
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