JPH0641191A - ペプチド及びこれを含む生理活性剤 - Google Patents
ペプチド及びこれを含む生理活性剤Info
- Publication number
- JPH0641191A JPH0641191A JP5043047A JP4304793A JPH0641191A JP H0641191 A JPH0641191 A JP H0641191A JP 5043047 A JP5043047 A JP 5043047A JP 4304793 A JP4304793 A JP 4304793A JP H0641191 A JPH0641191 A JP H0641191A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- activity
- peptide
- lactic acid
- pro
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 血圧低下活性、カルシウム吸収促進活性及び
抗酸化活性等を有する新規なペプチド及び、該ペプチド
若しくは獣乳を乳酸菌産生プロティナーゼ又は特定の乳
酸菌産生プロティナーゼで分解して得られるペプチド又
はペプチド混合物を有する生理活性剤。 【効果】 本発明の新規ペプチドは、血圧低下活性、カ
ルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性等を示す生理活性
剤等に有用であり、また本発明の生理活性剤は、毒性が
なく、優れた血圧低下活性、カルシウム吸収促進活性及
び抗酸化活性を示す。
抗酸化活性等を有する新規なペプチド及び、該ペプチド
若しくは獣乳を乳酸菌産生プロティナーゼ又は特定の乳
酸菌産生プロティナーゼで分解して得られるペプチド又
はペプチド混合物を有する生理活性剤。 【効果】 本発明の新規ペプチドは、血圧低下活性、カ
ルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性等を示す生理活性
剤等に有用であり、また本発明の生理活性剤は、毒性が
なく、優れた血圧低下活性、カルシウム吸収促進活性及
び抗酸化活性を示す。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規なペプチド及びこ
れを含み、且つ血圧低下活性、カルシウム吸収促進活性
及び抗酸化活性の少なくとも１つの活性を示す生理活性
剤に関する。
れを含み、且つ血圧低下活性、カルシウム吸収促進活性
及び抗酸化活性の少なくとも１つの活性を示す生理活性
剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、発酵乳が種々の生理活性作用を示
すことが知られているが（特開昭６１−５３２１６号公
報、特開昭６１−５３２１７号公報、特公平３−６４４
８６号公報等）、発酵乳中の如何なる成分が活性に関与
しているかはあまり確認されていない。
すことが知られているが（特開昭６１−５３２１６号公
報、特開昭６１−５３２１７号公報、特公平３−６４４
８６号公報等）、発酵乳中の如何なる成分が活性に関与
しているかはあまり確認されていない。
【０００３】一方、カゼインのトリプシン、ペプシン等
の酵素分解物が、例えば血圧低下活性、カルシウム可溶
化活性等の生理活性を示すことも知られているが、発酵
乳中に含まれるペプチド及びそのペプチドの機能に関し
てはほとんど知られていないのが現状である。
の酵素分解物が、例えば血圧低下活性、カルシウム可溶
化活性等の生理活性を示すことも知られているが、発酵
乳中に含まれるペプチド及びそのペプチドの機能に関し
てはほとんど知られていないのが現状である。
【０００４】乳酸菌は、乳中で生育し、菌体外プロティ
ナーゼを産生し、カゼイン等の乳蛋白質を分解すると考
えられており、最近、乳酸菌産生プロティナーゼによる
カゼインの切断部位について一部報告がなされている[M
onnetら(FEMS MicrobiologyLetters),36,127-131(198
6),Zevacoら(Le Lait),68,393-408(1988)]。
ナーゼを産生し、カゼイン等の乳蛋白質を分解すると考
えられており、最近、乳酸菌産生プロティナーゼによる
カゼインの切断部位について一部報告がなされている[M
onnetら(FEMS MicrobiologyLetters),36,127-131(198
6),Zevacoら(Le Lait),68,393-408(1988)]。
【０００５】しかしながら、前記カゼインの切断部位に
関しては、未だ不明な点が多く、生成ペプチドの生理機
能に関する報告はなされていない。
関しては、未だ不明な点が多く、生成ペプチドの生理機
能に関する報告はなされていない。
【０００６】また従来カゼインをトリプシン、ペプシン
等により分解して得られるペプチドは、苦味の生成が大
きな問題となっている。
等により分解して得られるペプチドは、苦味の生成が大
きな問題となっている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、血圧
低下活性、カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性等の
生理活性等を示す新規なペプチド及びその塩を提供する
ことにある。
低下活性、カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性等の
生理活性等を示す新規なペプチド及びその塩を提供する
ことにある。
【０００８】本発明の別の目的は、苦みがなく、且つ毒
性がなく、優れた血圧低下活性、カルシウム吸収促進活
性及び抗酸化活性を示す生理活性剤を提供することにあ
る。
性がなく、優れた血圧低下活性、カルシウム吸収促進活
性及び抗酸化活性を示す生理活性剤を提供することにあ
る。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明によれば、配列表
の配列番号１〜１９に記載されるアミノ酸配列で表わさ
れるいずれかのペプチド及びその塩が提供される。
の配列番号１〜１９に記載されるアミノ酸配列で表わさ
れるいずれかのペプチド及びその塩が提供される。
【００１０】また本発明によれば、血圧低下活性、カル
シウム吸収促進活性及び抗酸化活性の少なくとも１つの
活性を示す生理活性剤であって、有効成分として配列表
の配列番号１〜２３に記載されるアミノ酸配列で表わさ
れるペプチド又はこれらの混合物及びそれらの医薬品又
は食品上許容される塩を含有することを特徴とする生理
活性剤が提供される。
シウム吸収促進活性及び抗酸化活性の少なくとも１つの
活性を示す生理活性剤であって、有効成分として配列表
の配列番号１〜２３に記載されるアミノ酸配列で表わさ
れるペプチド又はこれらの混合物及びそれらの医薬品又
は食品上許容される塩を含有することを特徴とする生理
活性剤が提供される。
【００１１】更に本発明によれば、カルシウム吸収促進
活性及び抗酸化活性の少なくとも１つの活性を示す生理
活性剤であって、有効成分として、カゼインを乳酸菌産
生プロティナーゼで分解して得られるペプチド又はペプ
チド混合物を含有することを特徴とする生理活性剤が提
供される。
活性及び抗酸化活性の少なくとも１つの活性を示す生理
活性剤であって、有効成分として、カゼインを乳酸菌産
生プロティナーゼで分解して得られるペプチド又はペプ
チド混合物を含有することを特徴とする生理活性剤が提
供される。
【００１２】更にまた本発明によれば、少なくとも血圧
低下活性を示す生理活性剤であって、有効成分として、
乳又は乳酸菌生育用培地を、ラクトコッカス・ラクティ
ス、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・
カゼイ・サブスペシィーズカゼイ、ラクトバチルス・デル
ブルィキィ・サブスペシィーズブルガリカス、ロイコノ
ストック・ラクテス及びこれらの混合物からなる群より
選択される乳酸菌を用いて発酵させて得られる乳酸菌産
生プロティナーゼにより、獣乳カゼインを分解して得ら
れるペプチド又はペプチド混合物を含有することを特徴
とする生理活性剤が提供される。
低下活性を示す生理活性剤であって、有効成分として、
乳又は乳酸菌生育用培地を、ラクトコッカス・ラクティ
ス、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・
カゼイ・サブスペシィーズカゼイ、ラクトバチルス・デル
ブルィキィ・サブスペシィーズブルガリカス、ロイコノ
ストック・ラクテス及びこれらの混合物からなる群より
選択される乳酸菌を用いて発酵させて得られる乳酸菌産
生プロティナーゼにより、獣乳カゼインを分解して得ら
れるペプチド又はペプチド混合物を含有することを特徴
とする生理活性剤が提供される。
【００１３】以下本発明を更に詳細に説明する。
【００１４】本発明のペプチドは、配列表の配列番号１
〜１９に記載されるアミノ酸配列で表わされるペプチド
であり、またその塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸
塩等の無機酸塩;酢酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、
フマル酸塩、酒石酸塩、乳酸塩等の有機酸塩等を挙げる
ことができる。
〜１９に記載されるアミノ酸配列で表わされるペプチド
であり、またその塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸
塩等の無機酸塩;酢酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、
フマル酸塩、酒石酸塩、乳酸塩等の有機酸塩等を挙げる
ことができる。
【００１５】本発明のペプチドを製造するには、例えば
カゼインを乳酸菌産生プロティナーゼで分解、精製する
方法又は通常の化学合成法等により得ることができる。
カゼインを乳酸菌産生プロティナーゼで分解、精製する
方法又は通常の化学合成法等により得ることができる。
【００１６】前記乳酸菌産生プロティナーゼは、例えば
牛乳、山羊乳、脱脂乳等の乳又は乳酸菌用培地、例えば
ＢＬ培地、Briggs liver broth培地、ＭＲＳ培地、ＧＡ
Ｍ培地、ＴＴＹ培地、ＭＧＬＰ培地等を、乳酸菌で発酵
させ、好ましくは対数増殖期の中期に集菌し、次いでカ
ルシウムイオンを含むリン酸緩衝液又はトリス−塩酸緩
衝液等により洗浄した後、カルシウムイオンを含まない
リン酸緩衝液又はトリス−塩酸緩衝液等により抽出する
方法又は更にＤＥＡＥ−セファロースカラム、ゲル濾過
カラム等により精製する方法等により得られるプロティ
ナーゼ等を好ましく挙げることができる。
牛乳、山羊乳、脱脂乳等の乳又は乳酸菌用培地、例えば
ＢＬ培地、Briggs liver broth培地、ＭＲＳ培地、ＧＡ
Ｍ培地、ＴＴＹ培地、ＭＧＬＰ培地等を、乳酸菌で発酵
させ、好ましくは対数増殖期の中期に集菌し、次いでカ
ルシウムイオンを含むリン酸緩衝液又はトリス−塩酸緩
衝液等により洗浄した後、カルシウムイオンを含まない
リン酸緩衝液又はトリス−塩酸緩衝液等により抽出する
方法又は更にＤＥＡＥ−セファロースカラム、ゲル濾過
カラム等により精製する方法等により得られるプロティ
ナーゼ等を好ましく挙げることができる。
【００１７】前記乳酸菌産生プロティナーゼを調製する
際の乳酸菌としては、好ましくはラクトコッカス・ラク
ティスJCM-5805(Lactococcus lactis JCM-5805)等のラ
クトコッカス属、ラクトバチルス・ヘルベティカスJCM-1
003(Lactobacillus helveticus JCM-1003)、ラクトバチ
ルス・カゼイ・サブスペシィーズカゼイJCM-1134(Lactoba
cillus casei subsp.casei JCM-1134)、ラクトバチルス
・デルブルィキィ・サブスペシィーズブルガリカスJCM-10
02(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus JCM-
1002)等のラクトバチルス属、ロイコノストック・ラクテ
スJCM-6123(Leuconostoc lactis JCM-6123)等のロイコ
ノストック属等を挙げることができる。また発酵は、好
ましくは２５〜４５℃にて、３〜１２時間の条件下行う
ことができる。また得られる発酵乳は、通常ｐＨ３〜４
を示すが、目的とするプロティナーゼの収率を増加させ
るために、前記発酵を中性域のｐＨに保ち行うのが好ま
しい。更に前記抽出は、好ましくは５〜４０℃にて１０
〜６０分間抽出する工程を２〜５回繰り返すことにより
行うことができる。
際の乳酸菌としては、好ましくはラクトコッカス・ラク
ティスJCM-5805(Lactococcus lactis JCM-5805)等のラ
クトコッカス属、ラクトバチルス・ヘルベティカスJCM-1
003(Lactobacillus helveticus JCM-1003)、ラクトバチ
ルス・カゼイ・サブスペシィーズカゼイJCM-1134(Lactoba
cillus casei subsp.casei JCM-1134)、ラクトバチルス
・デルブルィキィ・サブスペシィーズブルガリカスJCM-10
02(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus JCM-
1002)等のラクトバチルス属、ロイコノストック・ラクテ
スJCM-6123(Leuconostoc lactis JCM-6123)等のロイコ
ノストック属等を挙げることができる。また発酵は、好
ましくは２５〜４５℃にて、３〜１２時間の条件下行う
ことができる。また得られる発酵乳は、通常ｐＨ３〜４
を示すが、目的とするプロティナーゼの収率を増加させ
るために、前記発酵を中性域のｐＨに保ち行うのが好ま
しい。更に前記抽出は、好ましくは５〜４０℃にて１０
〜６０分間抽出する工程を２〜５回繰り返すことにより
行うことができる。
【００１８】該乳酸菌産生プロティナーゼでカゼインを
分解するには、該乳酸菌産生プロティナーゼと、例えば
リン酸緩衝液等の緩衝液に溶解したカゼインとを混合
し、３０〜４５℃にて、１〜１２時間反応させ、次い
で、遠心分離し、好ましくは分子量分画１００００〜５
００００の限外濾過膜等で限外濾過し、更に逆相液体カ
ラムクロマトグラフィを用いて精製する方法等により、
目的とする配列表の配列番号１〜１９に記載されるアミ
ノ酸配列で表わされるペプチドを精製させることがで
き、更には配列表の配列番号２０〜２３に記載されるア
ミノ酸配列で表わされるペプチドを精製することもでき
る。この際乳酸菌産生プロティナーゼとカゼインとの混
合割合は、重量比で１：１０〜１０００であるのが好ま
しい。
分解するには、該乳酸菌産生プロティナーゼと、例えば
リン酸緩衝液等の緩衝液に溶解したカゼインとを混合
し、３０〜４５℃にて、１〜１２時間反応させ、次い
で、遠心分離し、好ましくは分子量分画１００００〜５
００００の限外濾過膜等で限外濾過し、更に逆相液体カ
ラムクロマトグラフィを用いて精製する方法等により、
目的とする配列表の配列番号１〜１９に記載されるアミ
ノ酸配列で表わされるペプチドを精製させることがで
き、更には配列表の配列番号２０〜２３に記載されるア
ミノ酸配列で表わされるペプチドを精製することもでき
る。この際乳酸菌産生プロティナーゼとカゼインとの混
合割合は、重量比で１：１０〜１０００であるのが好ま
しい。
【００１９】本発明の生理活性剤は、前記ペプチド(1)
〜(23)又はこれらの混合物及びそれらの医薬上許容され
る塩（以下有効成分１と称す）、若しくは獣乳カゼイン
を乳酸菌産生プロティナーゼで分解して得られるペプチ
ド又はペプチド混合物（以下有効成分２と称す）を有効
成分とし、カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性の少
なくとも１つの活性を示すもの、あるいは乳又は乳酸菌
生育用培地を、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトバ
チルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・カゼイ・サブ
スペシィーズカゼイ、ラクトバチルス・デルブルィキィ・
サブスペシィーズブルガリカス、ロイコノストック・ラ
クテス及びこれらの混合物からなる群より選択される乳
酸菌を用いて発酵させて得られる乳酸菌産生プロティナ
ーゼにより、獣乳カゼインを分解して得られるペプチド
又はペプチド混合物（以下有効成分３と称す）を有効成
分とし、少なくとも血圧低下活性を示すものである。
〜(23)又はこれらの混合物及びそれらの医薬上許容され
る塩（以下有効成分１と称す）、若しくは獣乳カゼイン
を乳酸菌産生プロティナーゼで分解して得られるペプチ
ド又はペプチド混合物（以下有効成分２と称す）を有効
成分とし、カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性の少
なくとも１つの活性を示すもの、あるいは乳又は乳酸菌
生育用培地を、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトバ
チルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・カゼイ・サブ
スペシィーズカゼイ、ラクトバチルス・デルブルィキィ・
サブスペシィーズブルガリカス、ロイコノストック・ラ
クテス及びこれらの混合物からなる群より選択される乳
酸菌を用いて発酵させて得られる乳酸菌産生プロティナ
ーゼにより、獣乳カゼインを分解して得られるペプチド
又はペプチド混合物（以下有効成分３と称す）を有効成
分とし、少なくとも血圧低下活性を示すものである。
【００２０】前記有効成分１は、前述のカゼインを乳酸
菌産生プロティナーゼで分解、精製する方法又は通常の
化学合成法等により得ることができる。また前記有効成
分２は、前述の獣乳カゼインを乳酸菌産生プロティナー
ゼで分解、精製する方法により得られるペプチドの他
に、該方法の精製工程を行わず、遠心分離工程迄によっ
て得られるペプチド混合物成分を有効成分とすることが
でき、前記有効成分３は、前述の獣乳カゼインを前記特
定の乳酸菌産生プロティナーゼで分解、精製する方法に
より得られるペプチドの他に、該方法の精製工程を行わ
ず、遠心分離工程迄によって得られるペプチド混合物成
分を有効成分とすることができる。
菌産生プロティナーゼで分解、精製する方法又は通常の
化学合成法等により得ることができる。また前記有効成
分２は、前述の獣乳カゼインを乳酸菌産生プロティナー
ゼで分解、精製する方法により得られるペプチドの他
に、該方法の精製工程を行わず、遠心分離工程迄によっ
て得られるペプチド混合物成分を有効成分とすることが
でき、前記有効成分３は、前述の獣乳カゼインを前記特
定の乳酸菌産生プロティナーゼで分解、精製する方法に
より得られるペプチドの他に、該方法の精製工程を行わ
ず、遠心分離工程迄によって得られるペプチド混合物成
分を有効成分とすることができる。
【００２１】本発明の生理活性剤において、前記有効成
分１、２又は３の含有割合は、０．１〜１００重量％、
特に０．５〜１０重量％とするのが好ましい。
分１、２又は３の含有割合は、０．１〜１００重量％、
特に０．５〜１０重量％とするのが好ましい。
【００２２】本発明の生理活性剤の投与形態は、主に経
口投与等で行うことができる。剤形は、錠剤、顆粒剤、
カプセル剤等として、更には液体製剤として用いること
もできる。また有効成分１、２又は３を、通常の医薬品
あるいは医療食品、更には一般食品に添加、配合して用
いることもできる。
口投与等で行うことができる。剤形は、錠剤、顆粒剤、
カプセル剤等として、更には液体製剤として用いること
もできる。また有効成分１、２又は３を、通常の医薬品
あるいは医療食品、更には一般食品に添加、配合して用
いることもできる。
【００２３】本発明の生理活性剤の投与量は、患者の年
齢、症状等により異なるが、前記有効成分１、２又は３
をペプチド混合物として用いる場合には、有効成分１、
２又は３を基準として１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ・日の
範囲で投与するのが好ましい。更に具体的には、前記有
効成分１又は３の個々のペプチドを用いて、血圧低下活
性を主目的とする場合には、有効成分１又は３を基準と
して１ｍｇ／体重ｋｇ・日以上で使用するのが好まし
く、前記有効成分１又は２の個々のペプチドを用いて、
カルシウム吸収促進活性又は抗酸化活性を主目的とする
場合には、有効成分１又は２を基準として５ｍｇ／体重
ｋｇ・日以上で使用するのが好ましい。
齢、症状等により異なるが、前記有効成分１、２又は３
をペプチド混合物として用いる場合には、有効成分１、
２又は３を基準として１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ・日の
範囲で投与するのが好ましい。更に具体的には、前記有
効成分１又は３の個々のペプチドを用いて、血圧低下活
性を主目的とする場合には、有効成分１又は３を基準と
して１ｍｇ／体重ｋｇ・日以上で使用するのが好まし
く、前記有効成分１又は２の個々のペプチドを用いて、
カルシウム吸収促進活性又は抗酸化活性を主目的とする
場合には、有効成分１又は２を基準として５ｍｇ／体重
ｋｇ・日以上で使用するのが好ましい。
【００２４】本発明の生理活性剤には、前記有効成分以
外に、乳糖、デキストリン等の賦形剤、安定剤等を配合
することができ、更にカルシウム吸収促進剤として用い
る場合には、乳酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カ
ルシウム等のカルシウム塩等を併用するのが好ましい。
外に、乳糖、デキストリン等の賦形剤、安定剤等を配合
することができ、更にカルシウム吸収促進剤として用い
る場合には、乳酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カ
ルシウム等のカルシウム塩等を併用するのが好ましい。
【００２５】
【発明の効果】本発明の新規ペプチドは、血圧低下活
性、カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性等を示す生
理活性剤等に有用であり、また本発明の生理活性剤は、
毒性がなく、優れた血圧低下活性、カルシウム吸収促進
活性及び抗酸化活性を示す。
性、カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性等を示す生
理活性剤等に有用であり、また本発明の生理活性剤は、
毒性がなく、優れた血圧低下活性、カルシウム吸収促進
活性及び抗酸化活性を示す。
【００２６】
【実施例】以下本発明を実施例に基づいて具体的にする
が、本発明はこれらに限定されるものではない。
が、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２７】
【実施例１】ラクトバチルスヘルベティカスJCM-1003
を、９重量％の脱脂乳中でｐＨを６．０に保ち培養し、
濁度（５９０nmの吸収度）１．０において、クエン酸ナ
トリウムを１重量％添加し室温にて２０分間保持した。
次に５０００回転、２０分間の遠心分離を行い集菌し、
２０ｍＭ塩化カルシウム、５０ｍＭβ−グリセロリン酸
ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．０）で洗浄した後、５０ｍ
Ｍトリス−塩酸（ｐＨ８．０）を５０ｍｌ加えて３７℃
で、３０分間保温、抽出した。次いで１００００回転、
１０分間の遠心を行い上清液を採取した。同じ操作を合
計４回行い上清液約２００ｍｌを採集した（粗抽出
液）。この粗抽出液を、予め５ｍＭエチレンジアミンテ
トラ酢酸溶液（ＥＤＴＡ）、２０ｍＭトリス−塩酸緩衝
液（ｐＨ７．８、ＴＥ緩衝液）で平衡化したＤＥＡＥ−
セファロースカラム（５ｍｌ）に通した。カラムを０．
３Ｍの塩化ナトリウムを含むＴＥ緩衝液３０ｍｌで洗浄
後、１．０Ｍ塩化ナトリウムを含むＴＥ緩衝液１５ｍｌ
で溶出し、この活性画分（溶出画分）から約１５０μｇ
の乳酸菌産生プロティナーゼをほぼ単一なものとして得
た。
を、９重量％の脱脂乳中でｐＨを６．０に保ち培養し、
濁度（５９０nmの吸収度）１．０において、クエン酸ナ
トリウムを１重量％添加し室温にて２０分間保持した。
次に５０００回転、２０分間の遠心分離を行い集菌し、
２０ｍＭ塩化カルシウム、５０ｍＭβ−グリセロリン酸
ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．０）で洗浄した後、５０ｍ
Ｍトリス−塩酸（ｐＨ８．０）を５０ｍｌ加えて３７℃
で、３０分間保温、抽出した。次いで１００００回転、
１０分間の遠心を行い上清液を採取した。同じ操作を合
計４回行い上清液約２００ｍｌを採集した（粗抽出
液）。この粗抽出液を、予め５ｍＭエチレンジアミンテ
トラ酢酸溶液（ＥＤＴＡ）、２０ｍＭトリス−塩酸緩衝
液（ｐＨ７．８、ＴＥ緩衝液）で平衡化したＤＥＡＥ−
セファロースカラム（５ｍｌ）に通した。カラムを０．
３Ｍの塩化ナトリウムを含むＴＥ緩衝液３０ｍｌで洗浄
後、１．０Ｍ塩化ナトリウムを含むＴＥ緩衝液１５ｍｌ
で溶出し、この活性画分（溶出画分）から約１５０μｇ
の乳酸菌産生プロティナーゼをほぼ単一なものとして得
た。
【００２８】次に、２０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ７．
５）に溶解したカゼイン１ｇを上記得られたプロティナ
ーゼあるいは比較としてトリプシン（和光純薬株式会社
製）５０μｇと混合し、４０℃で５時間反応させた。そ
れぞれの反応液を１００００回転、１０分間の遠心後、
限外ろ過（商品名「アドバンテック東洋ＵＨＰ−１５
０」、限外ろ過膜：分子量分画１００００、富士フィル
ター工業株式会社製）を行ったところ、カゼイン１ｇか
らプロティナーゼ分解ペプチド約７００ｍｇ（収率約７
０％）とトリプシン分解ペプチド約８００ｍｇ（収率約
８０％）のペプチドがろ過外液中に得られた。
５）に溶解したカゼイン１ｇを上記得られたプロティナ
ーゼあるいは比較としてトリプシン（和光純薬株式会社
製）５０μｇと混合し、４０℃で５時間反応させた。そ
れぞれの反応液を１００００回転、１０分間の遠心後、
限外ろ過（商品名「アドバンテック東洋ＵＨＰ−１５
０」、限外ろ過膜：分子量分画１００００、富士フィル
ター工業株式会社製）を行ったところ、カゼイン１ｇか
らプロティナーゼ分解ペプチド約７００ｍｇ（収率約７
０％）とトリプシン分解ペプチド約８００ｍｇ（収率約
８０％）のペプチドがろ過外液中に得られた。
【００２９】次いで得られたカゼイン分解ペプチド混合
物を用いて、自然発症高血圧ラット（ＳＨＲラット、日
本チャールズリバー社）に対する血圧降下作用を調べ
た。１５週令雄ラット（１群５匹）に上記カゼイン分解
ペプチド各々を胃ゾンデで強制投与（各１４０ｍｇ／ｋ
ｇ）し、未投与群と血圧の経時変化を比較した。血圧測
定は、非観血式血圧測定装置（商品名「ＰＥ−３０
０」、ナルコバイオシステム社製）を用い、ｔａｉｌ−
ｃｕｆｆ法で最高血圧を求めた。結果を図１に示す。
物を用いて、自然発症高血圧ラット（ＳＨＲラット、日
本チャールズリバー社）に対する血圧降下作用を調べ
た。１５週令雄ラット（１群５匹）に上記カゼイン分解
ペプチド各々を胃ゾンデで強制投与（各１４０ｍｇ／ｋ
ｇ）し、未投与群と血圧の経時変化を比較した。血圧測
定は、非観血式血圧測定装置（商品名「ＰＥ−３０
０」、ナルコバイオシステム社製）を用い、ｔａｉｌ−
ｃｕｆｆ法で最高血圧を求めた。結果を図１に示す。
【００３０】図１の結果より本発明ペプチドが、経口投
与により約４〜７時間後において有意に血圧低下作用を
示す事が確認された。トリプシン分解ペプチドには、こ
のような強い効果は認められなかった。
与により約４〜７時間後において有意に血圧低下作用を
示す事が確認された。トリプシン分解ペプチドには、こ
のような強い効果は認められなかった。
【００３１】
【実施例２】実施例１にて得られたプロティナーゼで分
解したカゼイン分解物を、さらに高速液体クロマトグラ
フ（ＨＰＬＣ）により精製した。該精製は、逆相系樹脂
を充填したカラム（Ｍ＆Ｓ ＰＡＣＫ Ｃ−１８、０．
４６ψ×１５０ｍｍ）にカゼイン分解物を通し、０．１
重量％ＴＦＡ水溶液で洗浄後、０．１重量％ＴＦＡ水溶
液〜０．０６重量％ＴＦＡ／（アセトニトリル：イソプ
ロパノール＝３：７）溶液により６０％迄の直線濃度勾
配で溶出した。流速は、１ｍｌ／分、濃度勾配は１％／
分とした。２１５ｎｍの主な吸収ピークを各々集めた。
さらにこれらのペプチドからそれぞれ溶媒を除去し、同
条件により、再クロマトによりさらに精製した。それぞ
れのペプチドについて、減圧下でアセトニトリルを除去
し、凍結乾燥により本発明のペプチドを得た。これらの
ペプチドについて、６Ｎ塩酸で１２０℃、２４時間加水
分解し、アミノ酸分析（高速アミノ酸分析装置、商品名
「ＭＬＣ−２０３型」、アトー株式会社製）を行った。
アミノ酸分析よりα−カゼイン及びβ−カゼイン内の位
置を特定した。これらのペプチドは、α−カゼイン各々
についてＨＰＬＣの溶出順にそれぞれ表１に示すα−１
〜８、β−１〜１５のペプチドであることが確認され
た。これらのペプチド及び実施例１で調製したプロティ
ナーゼで分解したカゼイン分解物（ペプチド混合物）の
血圧降下活性（ＡＣＥＩ活性）、カルシウム可溶化活性
（ＣＳ活性）及び抗酸化活性（ＳＯＤ様活性）を、以下
に示す方法に従って測定した。比較のためにα−カゼイ
ン及びβ−カゼインのトリプシン分解物についても、同
様にそれぞれの活性を調べた。結果を表２に示す。
解したカゼイン分解物を、さらに高速液体クロマトグラ
フ（ＨＰＬＣ）により精製した。該精製は、逆相系樹脂
を充填したカラム（Ｍ＆Ｓ ＰＡＣＫ Ｃ−１８、０．
４６ψ×１５０ｍｍ）にカゼイン分解物を通し、０．１
重量％ＴＦＡ水溶液で洗浄後、０．１重量％ＴＦＡ水溶
液〜０．０６重量％ＴＦＡ／（アセトニトリル：イソプ
ロパノール＝３：７）溶液により６０％迄の直線濃度勾
配で溶出した。流速は、１ｍｌ／分、濃度勾配は１％／
分とした。２１５ｎｍの主な吸収ピークを各々集めた。
さらにこれらのペプチドからそれぞれ溶媒を除去し、同
条件により、再クロマトによりさらに精製した。それぞ
れのペプチドについて、減圧下でアセトニトリルを除去
し、凍結乾燥により本発明のペプチドを得た。これらの
ペプチドについて、６Ｎ塩酸で１２０℃、２４時間加水
分解し、アミノ酸分析（高速アミノ酸分析装置、商品名
「ＭＬＣ−２０３型」、アトー株式会社製）を行った。
アミノ酸分析よりα−カゼイン及びβ−カゼイン内の位
置を特定した。これらのペプチドは、α−カゼイン各々
についてＨＰＬＣの溶出順にそれぞれ表１に示すα−１
〜８、β−１〜１５のペプチドであることが確認され
た。これらのペプチド及び実施例１で調製したプロティ
ナーゼで分解したカゼイン分解物（ペプチド混合物）の
血圧降下活性（ＡＣＥＩ活性）、カルシウム可溶化活性
（ＣＳ活性）及び抗酸化活性（ＳＯＤ様活性）を、以下
に示す方法に従って測定した。比較のためにα−カゼイ
ン及びβ−カゼインのトリプシン分解物についても、同
様にそれぞれの活性を調べた。結果を表２に示す。
【００３２】＜アンジオテンシン変換酵素阻害（ＡＣＥ
Ｉ）活性＞ 〔ＡＣＥＩ活性の測定方法〕ペプチドを含む試料２０μ
ｌと、５ｍＭ Ｈｉｐｒｏｉｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ（ＨＨ
Ｌ、シグマ社）、０．３Ｍ ＮａＣｌ，０．１Ｍ ホウ酸
緩衝液（ｐＨ8.3）２６０μｌを試験管内で３７℃で１
０分間保温する。その後０．０５Ｕ／ｍｌのアンジオテ
ンシン変換酵素（ＡＣＥ：シグマ社）を２０μｌ加え、
３７℃で３０分間反応させた。その後、１Ｎ塩酸２５０
μｌを加え、反応を停止させた。酢酸エチル１．７ｍｌ
を加え２０秒間撹拌した後、３０００回転で１０分間遠
心を行い酢酸エチル層１．４ｍｌを採取した。その酢酸
エチルを１２０℃で３０分間加熱し乾燥後、蒸留水１ｍ
ｌを加え２０秒間撹拌し、抽出されたＨＨＬの吸収（２
２８ｎｍの吸光度）を測定した。
Ｉ）活性＞ 〔ＡＣＥＩ活性の測定方法〕ペプチドを含む試料２０μ
ｌと、５ｍＭ Ｈｉｐｒｏｉｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ（ＨＨ
Ｌ、シグマ社）、０．３Ｍ ＮａＣｌ，０．１Ｍ ホウ酸
緩衝液（ｐＨ8.3）２６０μｌを試験管内で３７℃で１
０分間保温する。その後０．０５Ｕ／ｍｌのアンジオテ
ンシン変換酵素（ＡＣＥ：シグマ社）を２０μｌ加え、
３７℃で３０分間反応させた。その後、１Ｎ塩酸２５０
μｌを加え、反応を停止させた。酢酸エチル１．７ｍｌ
を加え２０秒間撹拌した後、３０００回転で１０分間遠
心を行い酢酸エチル層１．４ｍｌを採取した。その酢酸
エチルを１２０℃で３０分間加熱し乾燥後、蒸留水１ｍ
ｌを加え２０秒間撹拌し、抽出されたＨＨＬの吸収（２
２８ｎｍの吸光度）を測定した。
【００３３】阻害率は、次式により算出した。
【００３４】
【数１】
【００３５】Ａ：試料を含まない場合の２２８ｎｍの吸
光度 Ｂ：試料を添加した場合の２２８ｎｍの吸光度 Ｃ：酵素および試料を添加しない場合の２２８ｎｍの吸
光度 ＡＣＥIの酵素活性を５０％阻害するために必要な試料
の濃度（μｇ／ｍｌ）をＩＣ50として示す。
光度 Ｂ：試料を添加した場合の２２８ｎｍの吸光度 Ｃ：酵素および試料を添加しない場合の２２８ｎｍの吸
光度 ＡＣＥIの酵素活性を５０％阻害するために必要な試料
の濃度（μｇ／ｍｌ）をＩＣ50として示す。
【００３６】＜カルシウム可溶化（ＣＳ）活性＞ 〔ＣＳ活性の測定方法〕カルシウムの定量は、キレート
法（オルトクレゾールフタレインコンプレキソン、ＯＣ
ＰＣ法）により行った。
法（オルトクレゾールフタレインコンプレキソン、ＯＣ
ＰＣ法）により行った。
【００３７】ペプチドを含む試料５０μｌと、２０ｍＭ
塩化カルシウム、１０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ
７．０）１０μｌを混合し、室温にて５分間保温する。
さらに２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を４０μｌ
加えて３７℃でさらに３０分間保温する。その後、１５
０００回転で５分間遠心を行い上清液１０μｌを採取
し、商品名「カルシウムＣ−テストワコー」（和光純
薬）に含まれる緩衝液８００μｌと同封のＯＣＰＣ試薬
８０μｌを加えて発色させ、５７０ｎｍの吸光度を測定
した。
塩化カルシウム、１０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ
７．０）１０μｌを混合し、室温にて５分間保温する。
さらに２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を４０μｌ
加えて３７℃でさらに３０分間保温する。その後、１５
０００回転で５分間遠心を行い上清液１０μｌを採取
し、商品名「カルシウムＣ−テストワコー」（和光純
薬）に含まれる緩衝液８００μｌと同封のＯＣＰＣ試薬
８０μｌを加えて発色させ、５７０ｎｍの吸光度を測定
した。
【００３８】
【数２】
【００３９】Ａ：リン酸緩衝液を加えない場合の５７０
ｎｍの吸光度 Ｂ：試料を添加した場合の５７０ｎｍの吸光度 Ｃ：試料を添加しない場合の５７０ｎｍの吸光度 カルシウムの可溶化率を５０％とするために必要な試料
の濃度（μｇ／ｍｌ）をＳＣ50として表２に示す。
ｎｍの吸光度 Ｂ：試料を添加した場合の５７０ｎｍの吸光度 Ｃ：試料を添加しない場合の５７０ｎｍの吸光度 カルシウムの可溶化率を５０％とするために必要な試料
の濃度（μｇ／ｍｌ）をＳＣ50として表２に示す。
【００４０】＜スーパーオキサイドディスムターゼ（Ｓ
ＯＤ）様活性＞ 〔ＳＯＤ様活性の測定〕ジエチレントリアミンペンタ酢
酸（ＤＥＴＡＰＡＣ）溶液（５ｍｇ ＤＥＴＡＰＡＣ、
９．８ｍｌの５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液、０．３７
ｍｌの４μｇ／ｍｌカタラーゼ、０．３７ｍｌの１．８
３ｍｇ／ｍｌニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）、
１．２６ｍｌの１．０ｍＭキサンチン）４００μｌと、
ペプチドを含む試料２０μｌと、キサンチンオキシダー
ゼ（シグマ社製を４００倍希釈）５０μｌとを混合し、
３０℃で保温した。この際３分間で変化する吸光度（５
６０ｎｍの吸光度）の差を測定した。キサンチンオキシ
ダーゼの阻害率は次式により算出した。
ＯＤ）様活性＞ 〔ＳＯＤ様活性の測定〕ジエチレントリアミンペンタ酢
酸（ＤＥＴＡＰＡＣ）溶液（５ｍｇ ＤＥＴＡＰＡＣ、
９．８ｍｌの５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液、０．３７
ｍｌの４μｇ／ｍｌカタラーゼ、０．３７ｍｌの１．８
３ｍｇ／ｍｌニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）、
１．２６ｍｌの１．０ｍＭキサンチン）４００μｌと、
ペプチドを含む試料２０μｌと、キサンチンオキシダー
ゼ（シグマ社製を４００倍希釈）５０μｌとを混合し、
３０℃で保温した。この際３分間で変化する吸光度（５
６０ｎｍの吸光度）の差を測定した。キサンチンオキシ
ダーゼの阻害率は次式により算出した。
【００４１】
【数３】
【００４２】Ａ：試料を加えないときの５６０ｎｍの吸
光度 Ｂ：試料を加えたときの５６０ｎｍの吸光度 Ｃ：酵素添加しない場合の５６０ｎｍの吸光度 キサンチンオキシダーゼの酵素活性を５０％阻害するた
めに必要な試料の濃度（μｇ／ｍｌ）をＩＣ50として表
２示す。
光度 Ｂ：試料を加えたときの５６０ｎｍの吸光度 Ｃ：酵素添加しない場合の５６０ｎｍの吸光度 キサンチンオキシダーゼの酵素活性を５０％阻害するた
めに必要な試料の濃度（μｇ／ｍｌ）をＩＣ50として表
２示す。
【００４３】
【表１】
【００４４】
【表２】
【００４５】
配列番号：１ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ala Tyr Pro Ser 1
【００４６】配列番号：２ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ala Tyr Phe Tyr Pro Glu 1 5
【００４７】配列番号：３ 配列の長さ：８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Val Ala Pro Phe Pro Gln Val Phe 1 5
【００４８】配列番号：４ 配列の長さ：８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Gly Ala Trp Tyr Tyr Val Pro Leu 1 5
【００４９】配列番号：５ 配列の長さ：１４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Gln Leu Asp Ala Tyr Pro Ser Gly Ala Trp Tyr Tyr Val Pro 1 5 10
【００５０】配列番号：６ 配列の長さ：３０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Gly Thr Gln Tyr Thr Asp Ala Pro Ser Phe Ser Asp Ile Pro Asn Pro 1 5 10 15 Ile Gly Ser Glu Asn Ser Glu Lys Thr Thr Met Pro Leu Trp 20 25 ３０
【００５１】配列番号：７ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ｌ
ｙｓ １ 5
ｙｓ １ 5
【００５２】配列番号：８ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Gly Ser Glu Asn 1
【００５３】配列番号：９ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Lys Ala Val Pro Tyr Pro Gln 1 5
【００５４】配列番号：１０ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ala Val Pro Tyr Pro Gln 1 5
【００５５】配列番号：１１ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Gln Ser Leu Thr Leu 1 5
【００５６】配列番号：１２ 配列の長さ：１５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Lys Tyr Pro Val Gln Pro Phe Thr Glu Ser Gln Ser Leu Thr Leu 1 5 10 15
【００５７】配列番号：１３ 配列の長さ：８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ser Lys Val Leu Pro Val Pro Glu 1 5
【００５８】配列番号：１４ 配列の長さ：１８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Pro Pro Gln Ser Val Leu Ser Leu Ser Gln Ser Lys Val Leu Pro Val 1 5 10 15 Pro Glu
【００５９】配列番号：１５ 配列の長さ：８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Gly Pro Val Arg Gly Pro Phe Pro 1 5
【００６０】配列番号：１６ 配列の長さ：２８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Leu Pro Gln Asn Ile Pro Pro Leu Thr Gln Thr Pro Val Val Val Pro 1 5 10 15 Pro Phe Leu Gln Pro Glu Val Met Gly Val Ser Lys 20 25
【００６１】配列番号：１７ 配列の長さ：５４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Leu Ser Ser Ser Glu Glu Ser Ile Thr Arg Ile Asn Lys Lys Ile Glu 1 5 10 15 Lys Phe Gln Ser Glu Glu Gln Gln Gln Thr Glu Asp Glu Leu Gln Asp 20 25 30 Lys Ile His Pro Phe Ala Gln Thr Gln Ser Leu Val Tyr Pro Phe Pro 35 40 45 Gly Pro Ile Pro Asn Ser 50
【００６２】配列番号：１８ 配列の長さ：８２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Leu Ser Ser Ser Glu Glu Ser Ile Thr Arg Ile Asn Lys Lys Ile Glu 1 5 10 15 Lys Phe Gln Ser Glu Glu Gln Gln Gln Thr Glu Asp Glu Leu Gln Asp 20 25 30 Lys Ile His Pro Phe Ala Gln Thr Gln Ser Leu Val Tyr Pro Phe Pro 35 40 45 Gly Pro Ile Pro Asn Ser Leu Pro Gln Asn Ile Pro Pro Leu Thr Gln 50 55 60 Thr Pro Val Val Val Pro Pro Phe Leu Gln Pro Glu Val Met Gly Val 65 70 75 80 Ser Lys
【００６３】配列番号：１９ 配列の長さ：２７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Asp Glu Leu Gln Asp Lys Ile His Pro Phe Ala Gln Thr Gln Ser Leu 1 5 10 15 Val Tyr Pro Phe Pro Gly Pro Ile Pro Asn Ser 20 ２５
【００６４】配列番号：２０ 配列の長さ：８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ａｒｇ Ａｓｐ Ｍｅｔ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｇｌｎ Ａ
ｌａ Ｐｈｅ １ 5
ｌａ Ｐｈｅ １ 5
【００６５】配列番号：２１ 配列の長さ：１４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 His Lys Glu Met Pro Phe Pro Lys Tyr Pro Val Gln Pro Phe 1 5 10
【００６６】配列番号：２２ 配列の長さ：１７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Tyr Gln Gln Pro Val Leu Gly Pro Val Arg Gly Pro Phe Pro Ile Ile 1 5 10 15 Val
【００６７】配列番号：２３ 配列の長さ：１９ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Leu Leu Tyr Gln Gln Pro Val Leu Gly Pro Val Arg Gly Pro Phe Pro 1 5 10 15 Ile Ile Val
【図１】図１は、実施例１でｔａｉｌ−ｃｕｆｆ法によ
り測定した最高血圧と投与後の時間との関係を示すグラ
フである。
り測定した最高血圧と投与後の時間との関係を示すグラ
フである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 7/10 7537−4Ｈ // Ａ２３Ｊ 3/10 7236−4Ｂ 3/34 7236−4Ｂ Ａ２３Ｌ 1/305 Ｃ１２Ｐ 21/06 8214−4Ｂ Ｃ０７Ｋ 99:00
Claims (4)
- 【請求項１】 配列表の配列番号１〜１９に記載される
アミノ酸配列で表わされるいずれかのペプチド及びその
塩。 - 【請求項２】 血圧低下活性、カルシウム吸収促進活性
及び抗酸化活性の少なくとも１つの活性を示す生理活性
剤であって、有効成分として配列表の配列番号１〜２３
に記載されるアミノ酸配列で表わされるペプチド又はこ
れらの混合物及びそれらの医薬品及び食品上許容される
塩を含有することを特徴とする生理活性剤。 - 【請求項３】 カルシウム吸収促進活性及び抗酸化活性
の少なくとも１つの活性を示す生理活性剤であって、有
効成分として、獣乳カゼインを乳酸菌産生プロティナー
ゼで分解して得られるペプチド又はペプチド混合物を含
有することを特徴とする生理活性剤。 - 【請求項４】 少なくとも血圧低下活性を示す生理活性
剤であって、有効成分として、乳又は乳酸菌生育用培地
を、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトバチルス・ヘ
ルベティカス、ラクトバチルス・カゼイ・サブスペシィー
ズカゼイ、ラクトバチルス・デルブルィキィ・サブスペシ
ィーズブルガリカス、ロイコノストック・ラクテス及び
これらの混合物からなる群より選択される乳酸菌を用い
て発酵させて得られる乳酸菌産生プロティナーゼによ
り、獣乳カゼインを分解して得られるペプチド又はペプ
チド混合物を含有することを特徴とする生理活性剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP04304793A JP3488722B2 (ja) | 1992-03-04 | 1993-03-03 | カルシウム吸収促進活性剤及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4-47340 | 1992-03-04 | ||
| JP4734092 | 1992-03-04 | ||
| JP04304793A JP3488722B2 (ja) | 1992-03-04 | 1993-03-03 | カルシウム吸収促進活性剤及びその製造法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2003156238A Division JP3949613B2 (ja) | 1992-03-04 | 2003-06-02 | 血圧低下剤及びその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0641191A true JPH0641191A (ja) | 1994-02-15 |
| JP3488722B2 JP3488722B2 (ja) | 2004-01-19 |
Family
ID=26382794
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP04304793A Expired - Lifetime JP3488722B2 (ja) | 1992-03-04 | 1993-03-03 | カルシウム吸収促進活性剤及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3488722B2 (ja) |
Cited By (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002013850A1 (en) * | 2000-08-17 | 2002-02-21 | The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof as oxidative stress regulators |
| WO2000075173A3 (en) * | 1999-06-02 | 2002-07-11 | Regen Therapeutics Plc | Peptide fragments of colostrinin |
| EP1231279A1 (en) * | 1999-11-11 | 2002-08-14 | Calpis Co., Ltd. | Process for producing tripeptides |
| US6465432B1 (en) * | 2000-08-28 | 2002-10-15 | Kraft Food Holdings, Inc. | Isolated antioxidant peptides form casein and methods for preparing, isolating, and identifying antioxidant peptides |
| US6500798B1 (en) | 1999-08-17 | 2002-12-31 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof, as oxidative stress regulators |
| WO2002046211A3 (en) * | 2000-12-06 | 2003-03-13 | Regen Therapeutics Plc | Peptides derived from colostrinin |
| WO2003070267A1 (en) * | 2002-02-25 | 2003-08-28 | Valio Ltd | Enhancing the availability of minerals by using biologically active peptides |
| US6852685B1 (en) | 1999-08-17 | 2005-02-08 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof to promote neuronal cell differentiation |
| US6903068B1 (en) | 1999-08-17 | 2005-06-07 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof for inducing cytokines |
| US7119064B2 (en) | 1999-08-17 | 2006-10-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof as modulators of intracellular signaling molecules |
| WO2007080962A1 (ja) * | 2006-01-13 | 2007-07-19 | Meiji Dairies Corporation | 抗炎症組成物および抗炎症組成物の製造法 |
| JP2007529206A (ja) * | 2004-03-19 | 2007-10-25 | カンピーナ ネーダーランド ホールディング ビー．ブイ． | アンジオテンシン−ｉ−変換酵素阻害特性を有する食品成分及び食品の調製方法、並びにその方法により得られる製品 |
| WO2011080947A1 (ja) * | 2009-12-28 | 2011-07-07 | カルピス株式会社 | 脳機能改善用組成物および脳機能を改善する方法 |
| WO2011102310A1 (ja) * | 2010-02-16 | 2011-08-25 | 株式会社明治 | 血中尿酸値低下剤 |
| US8343925B2 (en) | 2009-12-28 | 2013-01-01 | Calpis Co., Ltd. | Composition for improving brain function and method for improving brain function |
| WO2020188181A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-24 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l'absorption du calcium - peptides et produits associes |
| FR3094013A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| FR3093923A1 (fr) | 2020-05-04 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| FR3094015A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| FR3094014A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| WO2024071404A1 (ja) * | 2022-09-30 | 2024-04-04 | 森永乳業株式会社 | 新規ペプチド、及び抗酸化用組成物 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3130059B2 (ja) | 1991-02-16 | 2001-01-31 | カルピス株式会社 | ペプチド混合物、カルシウム吸収促進剤及び血清カルシトニン濃度向上剤 |
-
1993
- 1993-03-03 JP JP04304793A patent/JP3488722B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000075173A3 (en) * | 1999-06-02 | 2002-07-11 | Regen Therapeutics Plc | Peptide fragments of colostrinin |
| US6939847B2 (en) | 1999-08-17 | 2005-09-06 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof, as oxidative stress regulators |
| US6500798B1 (en) | 1999-08-17 | 2002-12-31 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof, as oxidative stress regulators |
| US7119064B2 (en) | 1999-08-17 | 2006-10-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof as modulators of intracellular signaling molecules |
| US6852685B1 (en) | 1999-08-17 | 2005-02-08 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof to promote neuronal cell differentiation |
| US6903068B1 (en) | 1999-08-17 | 2005-06-07 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof for inducing cytokines |
| EP1231279A1 (en) * | 1999-11-11 | 2002-08-14 | Calpis Co., Ltd. | Process for producing tripeptides |
| US6994987B1 (en) | 1999-11-11 | 2006-02-07 | Calpis Co., Ltd. | Process for producing tripeptides |
| EP1231279A4 (en) * | 1999-11-11 | 2004-07-21 | Calpis Co Ltd | PROCESS FOR OBTAINING TRIPEPTIDES |
| WO2002013850A1 (en) * | 2000-08-17 | 2002-02-21 | The University Of Texas System | Use of colostrinin, constituent peptides thereof, and analogs thereof as oxidative stress regulators |
| US6465432B1 (en) * | 2000-08-28 | 2002-10-15 | Kraft Food Holdings, Inc. | Isolated antioxidant peptides form casein and methods for preparing, isolating, and identifying antioxidant peptides |
| WO2002046211A3 (en) * | 2000-12-06 | 2003-03-13 | Regen Therapeutics Plc | Peptides derived from colostrinin |
| EP1935900A1 (en) * | 2000-12-06 | 2008-06-25 | ReGen Therapeutics Plc | Peptides derived from colostrinin |
| WO2003070267A1 (en) * | 2002-02-25 | 2003-08-28 | Valio Ltd | Enhancing the availability of minerals by using biologically active peptides |
| JP2007529206A (ja) * | 2004-03-19 | 2007-10-25 | カンピーナ ネーダーランド ホールディング ビー．ブイ． | アンジオテンシン−ｉ−変換酵素阻害特性を有する食品成分及び食品の調製方法、並びにその方法により得られる製品 |
| JP5025491B2 (ja) * | 2006-01-13 | 2012-09-12 | 株式会社明治 | 抗炎症組成物および抗炎症組成物の製造法 |
| WO2007080962A1 (ja) * | 2006-01-13 | 2007-07-19 | Meiji Dairies Corporation | 抗炎症組成物および抗炎症組成物の製造法 |
| US8569241B2 (en) | 2009-12-28 | 2013-10-29 | Calpis Co., Ltd. | Composition for improving brain function and method for improving brain function |
| WO2011080947A1 (ja) * | 2009-12-28 | 2011-07-07 | カルピス株式会社 | 脳機能改善用組成物および脳機能を改善する方法 |
| JP2012031139A (ja) * | 2009-12-28 | 2012-02-16 | Calpis Co Ltd | 脳機能改善作用を有するペプチド |
| JP4824841B2 (ja) * | 2009-12-28 | 2011-11-30 | カルピス株式会社 | 脳機能改善用組成物および脳機能を改善する方法 |
| US8343925B2 (en) | 2009-12-28 | 2013-01-01 | Calpis Co., Ltd. | Composition for improving brain function and method for improving brain function |
| JP5752108B2 (ja) * | 2010-02-16 | 2015-07-22 | 株式会社明治 | 血中尿酸値低下剤 |
| JPWO2011102310A1 (ja) * | 2010-02-16 | 2013-06-17 | 株式会社明治 | 血中尿酸値低下剤 |
| WO2011102310A1 (ja) * | 2010-02-16 | 2011-08-25 | 株式会社明治 | 血中尿酸値低下剤 |
| WO2020188181A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-24 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l'absorption du calcium - peptides et produits associes |
| FR3094013A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| FR3094015A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| FR3094014A1 (fr) | 2019-03-20 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| FR3093923A1 (fr) | 2020-05-04 | 2020-09-25 | Vf Bioscience | Nouvelles souches de bacteries lactiques favorisant l’absorption du calcium – peptides et produits associes |
| WO2024071404A1 (ja) * | 2022-09-30 | 2024-04-04 | 森永乳業株式会社 | 新規ペプチド、及び抗酸化用組成物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3488722B2 (ja) | 2004-01-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3488722B2 (ja) | カルシウム吸収促進活性剤及びその製造法 | |
| JP2782142B2 (ja) | アンジオテンシン変換酵素阻害剤及びその製造法 | |
| AU728565B2 (en) | Antistress agents and functional foods | |
| JP4713053B2 (ja) | 血圧降下剤 | |
| KR20080045108A (ko) | 우유 카제인의 효소 가수분해물에서 식별된 생물활성펩티드 및 그것을 얻는 방법 | |
| JP3782837B2 (ja) | 血圧降下剤及びその製造法 | |
| JP3949613B2 (ja) | 血圧低下剤及びその製造法 | |
| JP3665663B2 (ja) | 血圧降下剤及びその製造法 | |
| JP2782153B2 (ja) | アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドの製造法 | |
| EP2036922B1 (en) | Antihypertensive peptide and use thereof | |
| EA017609B1 (ru) | Применение гидролизата казеина молока животных и продукта ферментации исходного материала, содержащего молочный белок, включающих ile-pro-pro и/или val-pro-pro, в производстве профилактического средства от артериосклероза | |
| ES2277468B1 (es) | Peptidos bioactivos y derivados, procedimiento de produccion, cepas de enterococcus faecalis productoras de dichos peptidos bioactivos y sus aplicaciones. | |
| JP3110075B2 (ja) | アンギオテンシン変換酵素阻害剤含有組成物の製造方法 | |
| JP5292632B2 (ja) | 心不全予防剤 | |
| JP4268785B2 (ja) | カルシウム吸収促進及びリン酸カルシウム結晶成長促進剤 | |
| JP3770659B2 (ja) | 新規ペプチド及びその製造方法 | |
| JPH04139196A (ja) | 新規ペプチド、その製造法及び用途 | |
| JP3992143B2 (ja) | 新規生理活性ペプチド | |
| JPH04139194A (ja) | 新規ペプチド、その製造法及び用途 | |
| JPH0469397A (ja) | 新規ペプチド及び用途 | |
| JPH02282394A (ja) | 新規ペプチド及び血圧降下剤 | |
| MXPA00002839A (en) | Antistress agents and functional foods |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20071031 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081031 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091031 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101031 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111031 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121031 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131031 Year of fee payment: 10 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |