JPH02282394A - 新規ペプチド及び血圧降下剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はいちじく樹木由来の新規オリゴペプチド、及び
それらのオリゴペプチド、またはいちじく樹液もしくは
果肉由来の物質を含有する液またはその濃縮物を有効成
分として含有する血圧降下剤に関する。上記有効成分は
一般に安全性が極めて高く、安価かつ人足に供給できる
ので、本血圧降下剤は医薬品としてのみならず、血圧降
下作用を持たせた機能性食品として用いることができる
。

〔従来の技術〕

高血圧症は近年増加の傾向にあり対策が望まれている。

従来、高血圧症の予防、治療に有効な物質は数多く知ら
れている。また一方、日常の食物の１■取を通して病気
の主として予防に役立てようとする機能性食品に対する
関心が高まっている。

これらの観点から安全性の高い食品またはそれらの加水
分解物等から血圧降下作用を有する物質を見い出すこと
が行われている。例えば牛乳カゼインのトリプシン加水
分解物から単離されたアンジオテンシン変換酵素（Ａ　
ＣＥ）阻害物質またはそのペプチダーゼ処理物を血圧降
下剤として用いることが提案されている（特公昭６ｏ−
２３ｏｓｓ−ｑ、同６０−２３０８６号、同６０−２３
０８７号、牛、′」開閉６１−３６２２６す、同６１−
３６２２７号）。また最近では、魚類タンパク質または
大豆タンパク質のバチルス属細菌由来のセリンプロテア
ーゼ、バチルス属細菌由来の金属プロテアーゼまたは植
物由来のチオ−ホゾ１：Ｉテアーセによる加水分解物を
血圧降下剤として用いることが提案されている（特開昭
６２．−１．６９７３２号）。

（発明が解決しようとする課題〕 新規有用な血圧降下剤は常に求められている。

また医薬品としてのみならず、日常の摂取を通して高血
圧等の種々の症状の予防等を図る機能性食品も求められ
る昨今である。

本発明は優れたＡＣＥ阻害作用ならびに血圧降下作用を
有し、安全性が極めて高く、医薬品としてのみならず機
能性食品としても使用可能な特定のオリゴペプチド及び
それらを含有する血圧降下剤を提供ずろことを目的とす
る。また本発明は、優れたＡＣＥ阻害作用ならびに血圧
降下作用合有し、安全性が極めて高く、安価かつ大量に
供給でき、医薬品としてのみならず機能性食品としても
有用な血圧降下剤を提供することをも目的とする。

〔課題を解決するだめの手段〕

本発明者らは、血圧降下作用を有する物質を種々検索し
た結果、いちしく樹木に由来する特定新規メリゴペプチ
ト、いらじく樹液もしくはいちじく樹液由来画分例えぽ
いぢしく樹液の比較的低分子量画分、及びいちしく果肉
（いわゆる可食部としてのいもしく）由来画分、例えぽ
いらしく果肉液の比較的低分子量画分が血圧降下作用を
有すること、及びこれらを用いることによって上記課題
を解決できることを見い出した。

すなわち請求項１記載の本発明は新規なオリゴペラブチ
１−であるＬ−Ａｌａ−１，−シａｌ−Ｌ−へ５ｎ−Ｌ
−Ｐｒｏ−Ｌ−１１ｅＬ−／ｌｒｇ　、　Ｌ−Ｌｅｕ−
Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｌｙｓ及び
ＬＬｅｕ−Ｌ−νａ　Ｉ　−Ｌ　−Ａ　ｒ　１２及びそ
れらの酸付加塩を提供し、請求項２記載の本発明はＬ−
Ａｌａ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−八５ｎ−Ｌ−Ｐｒ。

Ｌ−１１ｅ−Ｌ−八ｒＨ，，ｌ、−１，ｅｕ−Ｌ−Ｔｙ
ｒ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｌｙｓ及びＬ−Ｌｅ
ｕ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｒｇ及びそれらの酸付加塩から
なる群から選ばれる少なくとも１つを有効成分として含
有する血圧降下剤を提供し、請求項３記載の本発明はい
ちじく樹液、いちじく果肉を粉砕し固液分離して得られ
る液、またはいちじく樹液もしくはいらしく果肉を粉砕
し固液分離して得られる液を分別して得られる分子１１
００００以下の物質を含有する液、またはそれらのいず
れかの濃縮物を有効成分として含有する血圧降下剤を提
供する。

以下、本発明を請求項１及び２の発明と請求項３の発明
とに分けて説明する。

請求項１及び２の発明におりる酸付加塩は、製薬−ヒ許
容される酸（無機酸及び４１機酸）付加塩、例えば塩酸
塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩、安息香酸
塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩
、クエン酸塩、シュウ酸塩、メタンスルポン酸塩、ｔ〜
ルエンスルポンＨ塩、−７スバラギン酸塩、グルタミン
酸塩等を特徴する請求項１及び２のオリゴペプチドはイ
チジク樹木特にイチジク樹液中に存在するので、そこか
り単離精製するか有機化学的な合成方法によりアミノ酸
を段階的に導入することによって製造される。

また、加水分解酵素の逆反応を利用したペプチド合成法
、遺伝子工学的手法等によっても製造することができる
。

すなわち、いししくの木に傷をつけて得られる乳液状の
イチジク樹液を好ましくは含有されるフィシン等のプロ
テアーゼの作用を封じるため加熱処理（例えば１００°
Ｃ１１５分）し、操作性の観点から必要に応じ水で希釈
し、濾過、遠心分離等適当な手段で固液分離し、得られ
る液を限外濾過、ゲル濾過等の分離処理に付して高分子
物質（例えば分子量１００００より大の物質）を除外し
、得られる水溶液をペプチドの分茄精裂、分別に通常用
いられるカラムクロマトグラフィー（例えばＳＰ−セフ
ァデックスＣ２５カラムクロマトグラフイー、セファデ
ックス１．１１−２０カラムク１コーントグシフイ＝（
ファルマシア社製）等）、高速液体クロマトグラフィー
〔例えばアクアボアＴＭ　ｐｒｅｐ−１０（アプライド
・ハイオシステムズ社製）カラム、リクロソルブ１律−
セレクＩ−Ｂ　（メルク社製）カラム等を用いる高速液
体クロマトグラフィー〕゛ζ分離精製、分別して目的と
する個々のオリゴペプチドを得ることができる。

有機化学的合成法として【Ｊ液相法、固相法の２利■が
あり、１ｉｉ１．ＦｆでばＢｏｃ　（クーラ・トリーゾ
ナルオー１−ジカルボニル）基などで保護したアミノ酸
をＤＭｌ＋（ジメチルホルムアミド）に溶解し、１）Ｃ
Ｃ（ジシクロへキシルカルボジイミド）及び１１叶（（
１−ヒトＩコキシヘンヅトリアゾール）の存在下で一昼
夜反応させ、カルボキシ末端側から順次結合させる。ま
た、後者ではアプライ１−・ハイオシステムス社製ペプ
チド合成装置（４３０Δ型）なとて、ＰＡＭ（フェニル
アセタミドメチル）樹脂にアミノ酸を順次伸長させ、フ
ッ化水素などにより樹脂及び各種保護基を切断し、目的
とするメリゴペプチドを得る。

本オリゴペプチドの酸（＝Ｊ加塩は常法により製造する
ことができる。例えば上記により製造したいずれかのオ
リゴペプチドとそれに対し１当量の前記したような適当
な酸とを水またはエタノール等の溶媒中で反応さ−Ｕて
）容媒を真空あるいは凍結乾燥により除去するごとによ
り製造することができる。

本オリゴペブチＩ及びその酸付加塩はＡＣＥ阻害作用な
らびに血圧降下作用を有し、ヒトをはじめとする哺乳動
物の高血圧症の治療、予防に有効であると期待される。

本オリゴペプチド及びその酸付加塩はそのまま、または
通常少なくとも１つの製薬補助剤と製薬組成物にして使
用する。

本オリゴペプチＩζ及びその酸付加塩は非経口的（ずな
わぢ、静脈注射、直腸投与等）または経口的に投ｊｊ、
　（、、各投与方法に適した形態に製剤するごとができ
る。

注射剤としての製剤形態は、通常滅菌水水溶液を包含す
る。上記形態の製剤はまた緩衝剤ｐＨ調節剤（リン酸水
素ナトリウム、クエン酸等）、等張化剤（塩化すｌ−Ｉ
Ｊウム、グルコース等）、保存剤（パラオキシ安息香酸
メチル、Ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル等）等の水以
外の他の製薬補助剤を含有することができる。該製剤は
細菌保持フィルターを通ず濾過、組成物・＼の殺菌剤の
混入、組成物の照射や加熱によって滅菌するごとができ
る。

該製剤はまた殺菌固体組成物として製造し、用時滅菌水
等に溶解して使用Ｊ“ることもできる。

直腸投与剤は坐剤の形態をとることができ、活性成分に
加え、種々の坐剤用賦形剤、例えはカカオ脂、ワックス
等を含有することができる。

経口投与剤は胃腸器官による吸収に適した形に製剤する
。錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、粉末剤は常用の
製薬補助剤、例えば結合剤（シロップ、アラビアゴム、
ゼラチン、ソルビット、ｌ・ラガカント、ポリビニルピ
ロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース等）、賦形剤
（ラクトース、シュガー、コーンスターヂ、リン酸カル
シウム、ソルビット、グリシン等）、滑沢剤（ステアリ
ン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリ：１−ル
、シリカ等）、崩壊剤（ポテトスターチ、カルボキシメ
チルセルロース等）、湿潤剤（ラウリル硫酸ナトリウム
等）を包含するごとができる。錠剤は常法によりコーテ
ィングすることができる。

経口液剤は水ン容液等にしたり、トライプロダクトにす
ることができる。そのような経口液剤は常用の添加剤例
えば保存剤（ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプ
ロピル、ソルビン酸等）を包含していてもよい。　本血
圧降下剤中の本オリゴペプチドまたはその酸付加塩のけ
ば種々かえることができるが、通常５〜１００χ（ｗ／
皆）、特に１０〜６０χ（ｗ／ｗ＞が適当である。本血
圧降下剤の投与量は有効成分として１０〜２００ｍｇ／
ｋｒ；／ｄａｙが適当である。なお、本オリゴペプチド
の象、性Ｂ？、性はＬＤｓｏ（ＩＣＲ系マウス、経口投
与）　＞　３ｇ／ｋｇである。

また、本オリゴペプチドは多量に摂取しても生体に悪影
響を与えない利点を有することから、そのまま、または
種々の栄養分等を加えて、もしくは飲食品中に含有せし
めて血圧降下作用、高血圧予防の機能をもたせた機能性
食品、健康食品として食してもよい。すなわち、例えば
各種ビタミン類、ミネラル類等の栄養分を加えて、例え
ば栄養ドリンク、豆乳、スープ等の液状の食品や各種形
状の固形食品、さらには粉末状としてそのままあるいは
各種食品へ添加して用いるごともできる。

かかる機能性食品、健康食品としての本血圧降下剤中の
有効成分の含有量、摂取量はそれぞれ上記製薬における
含有量、投Ｌ′３Ｎと同様でよい。

次に請求項３記載の発明について説明する。

いちじく樹液としてはいちしくの木に傷を付して得られ
る乳液を用いることができる。いししく樹液は含有され
るプロテアーゼを失活させるため分別に先立ち加熱処理
（例えば１００°Ｃ１１０分）するのが好ましい。一方
、いちじく果肉を操作上の観点から必要に応じ水を加え
、含有されるプロテアーゼを失活させるため好ましくは
加熱処理（例えば１００°Ｃｌ２Ｏ分）し、粉砕し、濾
過、遠心分８１（等により固液分離して液を回収する。

いちじく樹液またはいぢじく果肉からの上記固液分離液
を、限外濾過、ゲル濾過等の分別手段に伺して分子量１
００００以下の物質を含有する液をｆ′＋る。」−記い
らしく樹液、いぢじく果肉由来固液分離液、もしくはそ
れらの分号吋夜、またはそれらのいずれかの濃縮物（例
えば濃縮液、濃縮固体、噴霧乾燥物、凍結乾燥物等）（
以下、これらを包括して分別液等またはそのＰＡ縮物と
いう）を請求項３の血圧降下剤の有効成分として用いる
ことができる。なお、上記ｆａ縮は常法により行って差
し支えない。

この分別液等またはその濃縮物はそのまま製薬組成物と
して、または少なくとも１つの製剤補助剤と製薬組成物
にして使用する。この分別液等またはその濃縮物は経口
的または非経口的（例えば直腸投与）にヒトをはじめと
する哺乳類に投与し、各投与方法番こ適した形態に製剤
化することができる。

経口投与剤及び直腸投与側の製造、製剤補助側倒は請求
項２の発明と同様でよい。

請求項３の血圧降下剤中の分別液等またはその濃縮物の
量は種々かえることができるが、通常固形物基準で１〜
１００％が適当である。本血圧降下剤の投与ｆｆｌは活
性成分（固形物）として０．５〜５００ｍｇ／Ｊ／ｄａ
ｙが適当である。本活性成分は毒性をイ１さない。例え
ば実施例４で得られるいちじく樹液低分子画分凍結乾燥
品及び実施例５で得られるいちじく果肉液低分子画分凍
結乾燥品の急性毒性はいずれもＬＤ５゜（ラット、経り
投与）　＞５ｇ／ｋｇである。

また、請求項３の分別液等またはその濃縮物は多量に摂
取しても生体に悪影響をυ、えない利点を有することか
ら、請求項１のオリゴペプチドと同様、そのまま、また
は種々の栄養分等を加えて、もしくは飲食品中に含有せ
しめて血圧降下作用、高血圧予防の機能をもたせた機能
性食品、健康食品として食してもよい。かかる食品とし
ての請求項３の血圧降下剤中の活性成分（固形物）の含
有量及び摂取量は製薬におけると同様でよい。

［実施例〕 次に本発明を実施例により説明する。

災施讃す−［いちじく樹液からの新規オリゴペプチドの
精製 いぢじく樹液２００ｍＮを１００°Ｃ１５分間加熱処理
し、蒸留水６００ｍＲを加えた後不溶物を濾去した。つ
いで、濾液をアミコン社製限外濾過膜（置−１０）　（
分画分子量１．００００）に通して高分子物質を除去し
た。

得られた水ン容液ＩＯ雁をファルマシア社製イオン交換
樹ａ　ｓｐ−セファデックスＣ２５のカラム（２Ｘ　４
７ｃ−に添加し、３００ｍ１の蒸留水、ついで１３０雁
の０．１Ｍギ酸アンモニウム（１）１１７．０＞　で溶
出した。次に、溶出液を０．５門ギ酸アンモニウム（ｐ
Ｈ７，０）に切す換え、５２〜１０４ｍ１の溶出画分を
Ａ液、１３０　ｍｆｌ付近の溶出画分をＢ液とした。Ａ
液、Ｂ液をそれぞれ減圧濃ｉ宿後、セファデックスＬｌ
＋−２０カラム（２Ｘ　６２ｃｍ）に添加し、３０％メ
タノールで溶出して脱塩した。

脱塩後のＡ液をさらにアプライド′・ハイオシステムズ
社のセミ分取用高速液クロ装置で分画した。

溶出条件しよ下記による。

カラム；　アクアボアＴＭ　Ｐｒｅｐ−１０溶出液：　
　０．１％　ＴＦＡ　　存在下、３．５から６７％ノア
セトニトリルグラジェント（所用 時間４０分） 流速：　　６　ｍＲ／ｍｉｎ 検　出：　ＵＶ２１０ｎｍ この条件下で、５．４分付近に溶出されてくるＡＣＥ阻
害物質をｔ’ＬＰ−１，（Ｉ’ｉＨｔｒｅｅ　Ｌａｔｅ
ｘ　Ｐｅｐｔｉｄｅ）　　とした。また、６．５分付近
に溶出されてくるＡ　ＣｉＥ阻害物質をＦＬＩ’−２と
した。Ｉン目＋−１、ｌ化１１−２を減圧乾固し、高速
液クロで分析したところ、ｌ？ＬＰ−１は単一の物質で
あることが判明した。１ｉＬＰ−２は若干の夾雑物をふ
くみ再度アプライド・ノ＼イオシステＪ、ズ社のセミ分
取用高速液クロ装置で単一物質に精製した。

前記脱塩後のＢ液はメルク社の分析用カラム（リクロソ
ルブ１ｌＰ−セレク目１）を用いた高速液クロにより更
に分画した。溶出条件は下記による。

溶出液：０．１χＴＦＡ　　存在下、■４から５６χの
アセトニトリルグラジ：Ｉ−ント（所用時間２０分） 流速：　　１ｍｆ／ｍｉｎ 検　出：　　ＵＶ　２１Ｏｒ＋ｍ この条件下で４．５分に溶出されてくるＡＣＢ阻害物質
を１ｒＬＰ−３とした。上記溶出液を減圧乾固し、高速
液クロで分析したとごろＦＬＰ−３は単一の物質である
ことが判明した。

次に上記１’ＬＰ−１、２，３の構造解析を行った。表
１に６Ｎ塩酸による力■水分解後のアミノ酸分析値（日
立８３５型アミノ酸分析計による）、質量分析値（日本
電子Ｉ（χ−１１０による）、アミノ酸配列分析（アブ
ライドハイオシステムズ社４７７Ａプロテインシークエ
ンザーによる）を示す。

側妃址Ｉ　　いちしく樹液由来新規ペプチドの化学合成 ａ）　　Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−八５ｎ−Ｌ−Ｐ
ｒｏ−Ｌ−１１ｅ−Ｌ−八ｒｇ（ＰＬＰ−１）の合成 アプライド・ハイオシステムズ社製ペプチド合成装置（
４３０Ａ型）に０．５　ミリモルのＢｏｃ−Ｌ−Ａｒｇ
（Ｔｏｓ）０−ＣＨｚ−ＰＡＭ樹脂及び各２ミリモルの
Ｂｏｃ−Ｌ４１ｅ、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ　、Ｂｏｃ−Ｌ
−Ａｓｎ　、　Ｂｏｃ−Ｌ−Ｖａｌ　、Ｂｏｃ−ＬＡｌ
ａを装填し、ＯＣＣによる無水対称法により、ＬＡｌａ
−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｓｎ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−１１ｅ−
Ｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）ＯＣ１１□ＰＡＭを合成した。次
に、ペプチド研究所製フッ化水素処理装置に上記合成ペ
プチド樹脂を導入し、アニソール１．５ｍｌを添加後、
液体フン化水素１０　ｄを導入した。−２０″Ｃ３０分
、０°ｃ３０分の反応後、フン化水素を減圧下に除去し
、ペプチドを無水：１−一テル、クロロホルムで交互に
３回洗浄し、２　Ｎ　ｉｌ＝酸６０ｍ１にペプチドを溶
解させ、凍結乾燥した。この方法によりＬ−Ａｌａ−Ｌ
−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｓｎ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−１１ｅ−ＬＡ
ｒｇの白色粉末１８５ｍｇを得た。

本オリゴペプチドの分析値を表２に示す。

ｂ）　Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａ
ｌ−Ｌ−Ｌｙｓ（ＦＬＰ−２）の合成アプライド・ハイ
オシステムス社製ペプチド合成装置（４３０Ａ型）に０
．５　ミリモルのＢｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（ＣＩ−ｚ）−０
−ＣＨｚ−ＰＡＭ樹脂及び各２ミリモルのＢｏｃＬ−Ｖ
ａｌ　、　Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ　、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ
（Ｂｒ−ｚ）　、、　Ｂｏｃ−ＬＬｅｕを装填し、ＤＣ
Ｃによる無水対称法により、ＬＬｅｕ−Ｌ−Ｔｙｒ（Ｂ
ｒ−ｚ）−ＬＪｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｌｙｓ（ＣＩ−
ｚ）−〇０１１□ＰＡＭを合成した。次に、ペプチド研
究所製フッ化水素処理装置に上記合成ペプチド′樹脂を
導入し、アニソール１．５ｍｆｌを添加後、液体フ・ン
化水素１０ｍ１を導入した。−２０°Ｃ３０分、０°Ｃ
３０分の反応後、フッ化水素を減圧下に除去し、ペプチ
ドを無水上−チル、クロロボルムで交互に３回洗浄し、
２Ｎ酢酸６０雌にペプチドを溶解させ、凍結乾燥した。

この方法によりＬ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ｐｒｏ−
Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｌｙｓの白色粉末１６０ｎ＋ｇを得た
。

本オリゴペプチドの分析値を表２に示す。

ｃ）　　Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−八ｒｇ（ＦＬＰ
−３）の合成アプライド・ハイオシステトズ社製ペプチ
ド合成装置（４３０Ａ型）に０．５　ミリモルのＢｏｃ
−Ｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）０−Ｃｔｌｚ−ＰＡＭ樹脂及び
各２ミリモルのＢｏｃ−Ｌ−Ｖａｌ、Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｅ
ｕを装填し、ＤＣＣによる無水対称法により、Ｌ−Ｌｅ
ｕ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−０ＣＨｚＰＡ
Ｍを合成した。次に、ペプチド研究所製フッ化水素処理
装置に上記合成ペプチド樹脂を導入し、アニソール１．
５ｍβを添加後、液体フッ化水素１０ｍを導入した。

２０°Ｃ３０分、０°Ｃ３０分の反応後、フッ化水素を
減圧下に除去し、ペプチドを無水エーテル、クロロホル
１、で交互に３回洗浄し、２Ｎ酢酸６０戚にペプチドを
溶解させ、凍結乾燥した。この方法によりＬ−Ｌｅｕ−
Ｌ−シａｌ−Ｌ−Ａｒｇの白色粉末６０ｍｇを得た。

本ペプチドの分析値を表２に示す。

災施血主　　いちしく樹液由来オリゴペプチ１′及び合
成オリゴペプチドのＡ、　ＣＢ阻害効果の検討 いちじく樹液由来新規オリゴペプチド口、Ｐ−１，２，
３及びそれらの合成オリゴペプチドについてＡＣＥ阻害
活性を以下のごとく測定した。すなわちまず、５ｇのラ
ビットラングアセトンパウダーを５０ｍｆｌの０．１Ｍ
ホウ酸ナナトリウム緩衝液ｐＨ８，３）に溶かし、４０
，０ＯＯＧ　、４０分の条件下で遠心処理し、その上澄
液をさらにハイドロキシアパタイトで精製し、１　ｕｎ
ｉｔ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎのアンジオテンシン変換酵素
液を得た。

本オリゴペプチドの種々の濃度の水溶液をそれぞれ試験
管に０．０３ｍｆｆ１入れ、ごれに基質として、０．２
５ｍ１のヒブリルヒスチジルロイシン（最ｉ冬６　度５
ｎ＋Ｍ、Ｎａ（１３００ｍＭ含む）を添加し、ついで上
記アンジオテンシン変換酵素液０　、１．　ｍｌを加え
、３７°Ｃて３０分間反応させた。その後、ＩＮ塩酸０
．２５ｍｆｆ１を添加して反応を停止させた後、１．５
ｍＲの酢酸エチルを加え、酢酸エチル中に抽出されたヒ
プリル酸の■９ ２２８ｎｒｎでの吸収値を測定し、これを酵素活性とし
た。なお、この条件で本オリゴペプチドを含まない場合
の２２８ｎｍの吸収値は０．３５であった。

このような実験を複数行い、阻害率を次の弐より算出し
た。

Ａ；阻害剤を含まない場合の２２８ｎｍ吸収値Ｂ：阻害
剤添加の場合の２２８ｎｍ吸収値上記阻害率が５０％の
ときの本オリゴペプチドの濃度ＩＣｓ。値を求めた。結
果を表３に示す。

−尖細ｌユ　　ＦＬＰ−Ｌ、　ＦＬＰ−２の血圧降下作
用体重２００ｇのＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本ラッ
ト（株）、１群６〜８匹）をウレタン１．２５ｇ／ｋｇ
腹腔内投与により麻酔し、常法に従って組頭動脈圧を１
−ランスデューサー（ＳＫＩ−５９０，日本光電（株）
）を介して連続的に記録した。下腿静脈より、生理食塩
水に熔解したＦＬＰ−１またはＰＬＰ−２を投与し、そ
の５．１５．２５及び３５分後にアンジオテンシンＩ（
ヒ１〜配列、シグマ社）１００ｎｇノｋｇを繰り返し投
すして、前後の最高血圧の変化を４（す定した。対照と
しては生理食塩水を投ｊ、５．　したものを用いた。結
果を表４及び表５に示した。

実差乎Ｊ　５　　　ＰＬＰ−３の血圧降下作用体重１５
０ｇのＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本ラット（株）、
１群３匹）をウレタン１．２５ｇ／ｋｇ腹腔内投与によ
り麻酔し、常法に従って組頭動脈圧をトランスデユーサ
−（ＳＫＵ−５９０，日本光電（株））を介して連続的
に記録した。

下腿静脈より、ヘキサメトニウム５ｍｇ／ｋｇを投与し
、自律神経系の影響を抑えた後、同しく下ルＢ静脈より
生理食塩水に溶解したＰＬＰ−３（１００ｍｇ／ｋｇ）
を投与した結果、投与直後に約２０ｍｍ）１ｇ血圧降下
が見られた。

実］相影　　いちじく樹液低分子画分の血圧降下作用 いちじくの樹皮に傷をつけて流れ出る樹液（乳液）を収
集した。樹液２００ｍｆｆ１を１．００°Ｃで１０分煮
沸し、分画分子量１０，０００の限外ｉｌ＆、過膜（ア
ミコンＩ］■１０）を用いる限外濾過に付して、浸出し
てくる低分子画分を回収し、凍結乾燥して白色粉末２５
ｇを得た。

次にこの粉末の血圧降下作用を調べた。動物は１０週金
白然発症高血圧ラット（Ｓｔｉｌｌ）　（、日本ラット
（株）（♂、体重２４０〜２８０ｇ、　１群５匹）を用
いた。

試料は生理食塩水にン容解し、有効成分として２＆／ｋ
ｇ　Ｉ腹腔内りこ投与した。対照として生理食塩水を腹
腔内に投；ｊ−シた。投与直前及び投ｊ３．１．３．５
．７時間後に、ラッ１−　マウス用非観血血圧計ＴＫ〜
３５０（ユニコム社製）を用い、Ｔａ１ｌ−Ｃｕｆｆ法
で血圧を測定した。

結果を最高血圧±Ｓ、Ｅ、で表６に示した。表６より明
らかなごとく、いらじく樹液低分子画分が投与後１．３
時間の血圧を有意に低下させた。

実施料ユ　　いもしく果肉法低分子画分の血圧降下作用 いちしく　１２５０ｇ及び水２０００ｍＮの混合物を１
００°Ｃで２０分煮沸し、粉砕して、２５００ｒｐｍで
２０分速心分離した。上清を限外濾過（分画分子ｉ　１
０　、０００、アミコンロ−１０）シ、濾液を凍結乾燥
して凍結乾燥品２３ｇを得た。

凍結乾燥品の血圧降下作用を動物を１群６匹とした以外
実施例６と同様にして調べた。

結果を最高血圧±Ｓ、Ｅ、で表７に示した。表７より明
らかなごとく、いちしく果肉液低分子画分は投与後１〜
７時間の血圧を上意に低下させた。

表３ いちしく樹液由来オリゴペプチド及び合成オリゴペプチ
ドのＡＣＥ阻害効果（実施例３）１（、ｏ値 いちじく由来　　合成 Ｖａｌ−Ｌ−八５ｎ−Ｌ−Ｐｒ。

Ａｒｇ　　　（ＦＬＰ−１） Ｔｙｒ−Ｌ−Ｐｒｏ−］−Ｖａｌ （ＦＬＰ−２） Ｉ７−八ｒｇ （ＦＬＰ−３） ｉ、−八Ｉ　ａ　−Ｌ Ｌ−１１，ｅ−Ｌ Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ −Ｌｙｓ Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｖａｌ ４．５μＨ １４μｈ １４μｈ ５．０μＮ １４μｉ 表４ ＰＬＰ ■ の昇圧抑制作用 （実施例４） ｍｉｎ ５ｍ１ｎ ５ｍ１ｎ ５ｍ１ｎ コントロール ＮＬＰ−１（１００ｍｇ／ｋｇ） ＮＬＰ−１（５０ｍｇ／ｋｇ） ２８±３　　３２±３　　　２７±４　２７±４３±１
．”１４°±１　２２±１　　２５±１６±３１２４±
２　　　３１±４　３２±４表５ ＋１ＬＰ−２ の昇圧抑制作用 （実施例４） ５ｎ＋ｉ、ｎ ５ｍ１ｎ ５ｍ１ｎ ５ｍ１ｒｌ コントロール ＦＬＰ−２（１００１ｎｇ）ｋｇ） ２７±４　　３３±５　２８±５　２９±５５±２１２
５±５　２７±４　２８±５〔発明の効果〕 請求項１及び２記載の本発明によれば優れた血圧障下作
用を有するいちじくの樹木由来の新規オリゴペプチド及
びそれを有効成分とする血圧降下剤がそれぞれ提供され
る。

請求項３記載の本発明によればいちじく樹液もしくは果
肉由来の物質を有効成分とする血圧降下剤が提供される
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｓｎ−Ｌ−Ｐｒｏ
   −Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ａｒｇ、Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｔｙｒ−
   Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｌｙｓ及びＬ−Ｌｅｕ−
   Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｒｇ及びそれらの酸付加塩。 ２、Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｓｎ−Ｌ−Ｐｒｏ
   −Ｌ−Ｉｌｅ−Ｌ−Ａｒｇ、Ｌ−Ｌｅｕ−Ｌ−Ｔｙｒ−
   Ｌ−Ｐｒｏ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｌｙｓ及びＬ−Ｌｅｕ−
   Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ａｒｇ及びそれらの酸付加塩からなる
   群から選ばれる少なくとも１つを有効成分として含有す
   る血圧降下剤。 ３、いちじく樹液、いちじく果肉を粉砕し固液分離して
   得られる液、またはいちじく樹液もしくはいちじく果肉
   を粉砕し固液分離して得られる液を分別して得られる分
   子量１００００以下の物質を含有する液、またはそれら
   のいずれかの濃縮物を有効成分として含有する血圧降下
   剤。