JPH06181788A - Ｌ−セリンの製造方法 - Google Patents
Ｌ−セリンの製造方法Info
- Publication number
- JPH06181788A JPH06181788A JP34254992A JP34254992A JPH06181788A JP H06181788 A JPH06181788 A JP H06181788A JP 34254992 A JP34254992 A JP 34254992A JP 34254992 A JP34254992 A JP 34254992A JP H06181788 A JPH06181788 A JP H06181788A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reaction
- serine
- glycine
- added
- formalin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 酵素セリンヒドロキシメチルトランスフェラ
ーゼ活性を有する微生物の細胞もしくは細胞処理物の存
在下、グリシンとホルムアルデヒドよりＬ−セリンを製
造する方法において、酵素反応の第一段階を３０〜６０
℃で実施し、第二段階を３０℃未満の低温で実施するＬ
−セリンの製造方法 【効果】 高収率でＬ−セリンを製造する事が出来る。
ーゼ活性を有する微生物の細胞もしくは細胞処理物の存
在下、グリシンとホルムアルデヒドよりＬ−セリンを製
造する方法において、酵素反応の第一段階を３０〜６０
℃で実施し、第二段階を３０℃未満の低温で実施するＬ
−セリンの製造方法 【効果】 高収率でＬ−セリンを製造する事が出来る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、Ｌ−セリンの製造方法
に関する。さらに詳しくは、酵素セリンヒドロキシメチ
ルトランスフェラーゼの反応を利用してグリシンとホル
ムアルデヒドからＬ−セリンを製造するに際し、反応収
率を増加させる方法に関する。
に関する。さらに詳しくは、酵素セリンヒドロキシメチ
ルトランスフェラーゼの反応を利用してグリシンとホル
ムアルデヒドからＬ−セリンを製造するに際し、反応収
率を増加させる方法に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】Ｌ−
セリンの製造法として、グリシンとホルムアルデヒドを
原料とし、酵素セリンヒドロキシメチルトランスフェラ
ーゼ（Ｅ．Ｃ．２．１．２．１ 以下「ＳＨＭＴ」と称
する）の反応を利用する方法が開示されている（例え
ば、特開平０３−２０６８９２号公報）。
セリンの製造法として、グリシンとホルムアルデヒドを
原料とし、酵素セリンヒドロキシメチルトランスフェラ
ーゼ（Ｅ．Ｃ．２．１．２．１ 以下「ＳＨＭＴ」と称
する）の反応を利用する方法が開示されている（例え
ば、特開平０３−２０６８９２号公報）。
【０００３】ところで、ＳＨＭＴの触媒する反応は平衡
反応であることが知られており（Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉ
ｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ． ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ Ａｒ
ｅａｓ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ．，５
３，ｐ８３−１１２，（１９８２））、上記の文献によ
る製法においては、原料であるグリシンを全て反応させ
ることはできない。
反応であることが知られており（Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉ
ｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ． ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ Ａｒ
ｅａｓ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ．，５
３，ｐ８３−１１２，（１９８２））、上記の文献によ
る製法においては、原料であるグリシンを全て反応させ
ることはできない。
【０００４】一般に、平衡反応における平衡状態は、温
度によって異なり、平衡状態は各温度における平衡定数
によって示される。平衡反応においては、生成物の生成
に有利な温度で反応を行うことが望ましい。しかしなが
ら、低温において平衡状態が生成物側に有利である場
合、平衡状態に達するまでの時間が長くなるという問題
がある。したがって、平衡反応においては、反応速度と
平衡状態の観点から、反応温度を設定する必要がある。
度によって異なり、平衡状態は各温度における平衡定数
によって示される。平衡反応においては、生成物の生成
に有利な温度で反応を行うことが望ましい。しかしなが
ら、低温において平衡状態が生成物側に有利である場
合、平衡状態に達するまでの時間が長くなるという問題
がある。したがって、平衡反応においては、反応速度と
平衡状態の観点から、反応温度を設定する必要がある。
【０００５】例えば、特開昭６１−１２２９７号公報に
おいて、フェニルアラニンアンモニアリア−ゼの存在
下、トランス−ケイ皮酸とアンモニウムイオンを反応さ
せ、Ｌ−フェニルアラニンを合成する際、約３０℃以下
の温度で反応を進めると Ｌ−フェニルアラニンの収率
が増すことが開示されている。この酵素反応は平衡反応
であり、低温において、平衡はＬ−フェニルアラニンの
生成に有利であると述べられている。しかしながら、低
温での反応速度は遅いため、反応の初期段階を比較的高
い温度で実施し、反応の最終段階で温度を低下させるこ
とにより収率を増加させる方法が開示されている。
おいて、フェニルアラニンアンモニアリア−ゼの存在
下、トランス−ケイ皮酸とアンモニウムイオンを反応さ
せ、Ｌ−フェニルアラニンを合成する際、約３０℃以下
の温度で反応を進めると Ｌ−フェニルアラニンの収率
が増すことが開示されている。この酵素反応は平衡反応
であり、低温において、平衡はＬ−フェニルアラニンの
生成に有利であると述べられている。しかしながら、低
温での反応速度は遅いため、反応の初期段階を比較的高
い温度で実施し、反応の最終段階で温度を低下させるこ
とにより収率を増加させる方法が開示されている。
【０００６】ところが、このように低温で生成物の生成
に有利であるような酵素反応は一般的ではない。ＳＨＭ
Ｔによる、グリシンとホルムアルデヒドからの Ｌ−セ
リン生成反応は転移反応であり、フェニルアラニンアン
モニアリア−ゼの脱離反応とは全く異なる反応である。
したがって、温度による平衡状態の違いは、ＳＨＭＴと
フェニルアラニンアンモニアリア−ゼの反応では全く傾
向が異なるはずであり、同一レベルでは論じられないの
である。ＳＨＭＴによる、グリシンとホルムアルデヒド
からＬ−セリンを合成する反応においては、その平衡定
数はいくつかの文献において報告されているが（例え
ば、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２２０，ｐ７７５
（１９５６）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．６５，ｐ３４２
（１９５７））、温度の違いによる平衡定数の差につい
ては、これまで報告がない。
に有利であるような酵素反応は一般的ではない。ＳＨＭ
Ｔによる、グリシンとホルムアルデヒドからの Ｌ−セ
リン生成反応は転移反応であり、フェニルアラニンアン
モニアリア−ゼの脱離反応とは全く異なる反応である。
したがって、温度による平衡状態の違いは、ＳＨＭＴと
フェニルアラニンアンモニアリア−ゼの反応では全く傾
向が異なるはずであり、同一レベルでは論じられないの
である。ＳＨＭＴによる、グリシンとホルムアルデヒド
からＬ−セリンを合成する反応においては、その平衡定
数はいくつかの文献において報告されているが（例え
ば、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２２０，ｐ７７５
（１９５６）、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．６５，ｐ３４２
（１９５７））、温度の違いによる平衡定数の差につい
ては、これまで報告がない。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の問
題点を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、ＳＨＭＴ活性
を有する微生物の細胞もしくは細胞処理物の存在下、グ
リシンとホルムアルデヒドからＬ−セリンを製造する方
法において、Ｌ−セリン生成反応の平衡は、３０℃未満
の低温では、Ｌ−セリン生成に有利であり、酵素反応の
第一段階を ３０〜６０℃で実施し、第二段階を第一段
階より低温で実施することにより、Ｌ−セリンの収率が
増加することを見い出し、本発明を完成するに至った。
題点を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、ＳＨＭＴ活性
を有する微生物の細胞もしくは細胞処理物の存在下、グ
リシンとホルムアルデヒドからＬ−セリンを製造する方
法において、Ｌ−セリン生成反応の平衡は、３０℃未満
の低温では、Ｌ−セリン生成に有利であり、酵素反応の
第一段階を ３０〜６０℃で実施し、第二段階を第一段
階より低温で実施することにより、Ｌ−セリンの収率が
増加することを見い出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】即ち本発明は、ＳＨＭＴ活性を有する微生
物の細胞もしくは細胞処理物の存在下、グリシンとホル
ムアルデヒドより、Ｌ−セリンを製造する方法におい
て、酵素反応の第一段階を３０〜６０℃で実施し、第二
段階を３０℃未満の低温で実施することにより、効率よ
くＬ−セリンを製造する方法を提供する。
物の細胞もしくは細胞処理物の存在下、グリシンとホル
ムアルデヒドより、Ｌ−セリンを製造する方法におい
て、酵素反応の第一段階を３０〜６０℃で実施し、第二
段階を３０℃未満の低温で実施することにより、効率よ
くＬ−セリンを製造する方法を提供する。
【０００９】本発明者らは、ＳＨＭＴによる、グリシン
とホルムアルデヒドからのＬ−セリン生成反応の平衡
は、３０℃未満の低温では、よりＬ−セリン生成に有利
であることを発見した。例えば、本反応の平衡定数は、
３０℃および５０℃では、１９０Ｍ-1であるのに対し、
１０℃では約３００Ｍ-1である。ただし、平衡定数は、
［Ｓｅｒ］／［Ｇｌｙ］×［ＨＣＨＯ］として計算し
た。
とホルムアルデヒドからのＬ−セリン生成反応の平衡
は、３０℃未満の低温では、よりＬ−セリン生成に有利
であることを発見した。例えば、本反応の平衡定数は、
３０℃および５０℃では、１９０Ｍ-1であるのに対し、
１０℃では約３００Ｍ-1である。ただし、平衡定数は、
［Ｓｅｒ］／［Ｇｌｙ］×［ＨＣＨＯ］として計算し
た。
【００１０】しかしながら、低温での反応速度は遅いた
め、高収率を得るためには、長時間の反応が必要であ
る。
め、高収率を得るためには、長時間の反応が必要であ
る。
【００１１】そこで、反応速度を高めるために、反応の
初期段階は比較的高い温度で行い、反応の最終段階にお
いて、温度を３０℃未満に低下させたところ、効率よく
Ｌ−セリンを合成することができた。
初期段階は比較的高い温度で行い、反応の最終段階にお
いて、温度を３０℃未満に低下させたところ、効率よく
Ｌ−セリンを合成することができた。
【００１２】本発明において用いられる微生物は、ＳＨ
ＭＴ活性を有するものであればよく、このような微生物
の例としては、エシェリヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ
ｈｉａ ｃｏｌｉ） ＭＴ−１０３５０ （ＦＥＲＭ
Ｐ−７４３７、ＦＥＲＭ ＢＰ−７９３）、エシェリヒ
ア・コリ ＭＴ−１０３５１ （ＦＥＲＭ Ｐ−７４３
８、ＦＥＲＭ ＢＰ−７９４）をあげることができる。
ＭＴ活性を有するものであればよく、このような微生物
の例としては、エシェリヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ
ｈｉａ ｃｏｌｉ） ＭＴ−１０３５０ （ＦＥＲＭ
Ｐ−７４３７、ＦＥＲＭ ＢＰ−７９３）、エシェリヒ
ア・コリ ＭＴ−１０３５１ （ＦＥＲＭ Ｐ−７４３
８、ＦＥＲＭ ＢＰ−７９４）をあげることができる。
【００１３】本発明においては、ＳＨＭＴ活性を有する
微生物の培養液から、遠心分離、濾過等により集菌した
細胞あるいは細胞処理物を、酵素源として用いる。細胞
処理物としては、細胞を機械的処理、超音波処理、凍結
融解処理、乾燥処理、溶媒処理、化学的処理、浸透圧処
理、自己消化、界面活性剤処理、酵素処理等により細胞
壁の一部もしくは全部を破砕したもの、およびこれらよ
り得られる酵素画分、細胞および細胞抽出物の固定化物
などがある。
微生物の培養液から、遠心分離、濾過等により集菌した
細胞あるいは細胞処理物を、酵素源として用いる。細胞
処理物としては、細胞を機械的処理、超音波処理、凍結
融解処理、乾燥処理、溶媒処理、化学的処理、浸透圧処
理、自己消化、界面活性剤処理、酵素処理等により細胞
壁の一部もしくは全部を破砕したもの、およびこれらよ
り得られる酵素画分、細胞および細胞抽出物の固定化物
などがある。
【００１４】本発明のＬ−セリン合成反応では、反応速
度を高めるために、反応の第一段階は比較的高い温度、
即ち３０〜６０℃で実施される。３０℃より低温では充
分な反応速度が得られず、６０℃より高温では酵素の安
定性が悪くなるためである。通常ｐＨ６〜９において、
５〜４０時間反応を行う。好ましくは、ｐＨ６．５〜
７．０、５０℃で２０〜３０時間である。転化の大部分
はこの第一段階において完了する。次に反応の第二段階
は、３０℃未満の低温、好ましくは１５〜２０℃で実施
される。第二段階に要する時間は５〜２０時間である。
度を高めるために、反応の第一段階は比較的高い温度、
即ち３０〜６０℃で実施される。３０℃より低温では充
分な反応速度が得られず、６０℃より高温では酵素の安
定性が悪くなるためである。通常ｐＨ６〜９において、
５〜４０時間反応を行う。好ましくは、ｐＨ６．５〜
７．０、５０℃で２０〜３０時間である。転化の大部分
はこの第一段階において完了する。次に反応の第二段階
は、３０℃未満の低温、好ましくは１５〜２０℃で実施
される。第二段階に要する時間は５〜２０時間である。
【００１５】なお、反応基質であるホルムアルデヒド
は、ＳＨＭＴ活性を阻害しない程度の濃度で用いなけれ
ばならず、反応の進行に伴い、反応液に分割または連続
的に添加する。
は、ＳＨＭＴ活性を阻害しない程度の濃度で用いなけれ
ばならず、反応の進行に伴い、反応液に分割または連続
的に添加する。
【００１６】ｐＨの調整は反応液にアルカリを添加して
行われる。反応液に添加するアルカリとしては、水酸化
リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなど、ア
ルカリ金属水酸化物の他、ピロリン酸カリウム、アンモ
ニアなど水に溶解して液性を塩基性とするものであれば
よい。
行われる。反応液に添加するアルカリとしては、水酸化
リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなど、ア
ルカリ金属水酸化物の他、ピロリン酸カリウム、アンモ
ニアなど水に溶解して液性を塩基性とするものであれば
よい。
【００１７】反応終了後、反応液に鉱酸、例えば硫酸、
塩酸等を加えて液性を酸性側、好ましくはｐＨ５以下と
し、この溶液に濾過助剤、例えば活性炭等を加え、熱濾
過して菌体破砕物等の不純物を除去する。
塩酸等を加えて液性を酸性側、好ましくはｐＨ５以下と
し、この溶液に濾過助剤、例えば活性炭等を加え、熱濾
過して菌体破砕物等の不純物を除去する。
【００１８】濾液は常法により濃縮し、Ｌ−セリンの結
晶を析出させ、分離、乾燥しＬ−セリンを得る。
晶を析出させ、分離、乾燥しＬ−セリンを得る。
【００１９】
【実施例】以下、実施例により、本発明を詳細に説明す
る。 実施例１ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、第一段階として５０℃、ｐＨ６．７
において、ホルマリンを３５時間断続的に添加した。ホ
ルマリンの添加は、反応液中のホルマリン濃度を分析し
ながら、反応液中のホルマリン濃度を次式を満たす許容
範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝２０ｍＭ ＋ １０
ｍＭ ×（反応経過時間）］以下になるように制御して
行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−ＮａＯＨの添加にてｐ
Ｈ６．７に保った。次に温度を２０℃に低下させ、８時
間反応を継続し、Ｌ−セリンを合成した。反応の対グリ
シン収率は９０．２％であった［対グリシン収率＝生成
Ｌ−セリン（ｍｏｌ）／仕込グリシン（ｍｏｌ）］。
る。 実施例１ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、第一段階として５０℃、ｐＨ６．７
において、ホルマリンを３５時間断続的に添加した。ホ
ルマリンの添加は、反応液中のホルマリン濃度を分析し
ながら、反応液中のホルマリン濃度を次式を満たす許容
範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝２０ｍＭ ＋ １０
ｍＭ ×（反応経過時間）］以下になるように制御して
行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−ＮａＯＨの添加にてｐ
Ｈ６．７に保った。次に温度を２０℃に低下させ、８時
間反応を継続し、Ｌ−セリンを合成した。反応の対グリ
シン収率は９０．２％であった［対グリシン収率＝生成
Ｌ−セリン（ｍｏｌ）／仕込グリシン（ｍｏｌ）］。
【００２０】実施例２ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、第一段階として３０℃、ｐＨ６．７
において、ホルマリンを４０時間断続的に添加した。ホ
ルマリンの添加は、反応液中のホルマリン濃度を分析し
ながら、反応液中のホルマリン濃度を次式を満たす許容
範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝２０ｍＭ ＋ １０
ｍＭ ×（反応経過時間）］以下になるように制御して
行った。反応液のｐＨ は、１Ｎ−ＮａＯＨの添加にて
ｐＨ６．７に保った。次に温度を１５℃に低下させ、８
時間反応を継続し、Ｌ−セリンを合成した。反応の対グ
リシン収率は８８．３％であった。
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、第一段階として３０℃、ｐＨ６．７
において、ホルマリンを４０時間断続的に添加した。ホ
ルマリンの添加は、反応液中のホルマリン濃度を分析し
ながら、反応液中のホルマリン濃度を次式を満たす許容
範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝２０ｍＭ ＋ １０
ｍＭ ×（反応経過時間）］以下になるように制御して
行った。反応液のｐＨ は、１Ｎ−ＮａＯＨの添加にて
ｐＨ６．７に保った。次に温度を１５℃に低下させ、８
時間反応を継続し、Ｌ−セリンを合成した。反応の対グ
リシン収率は８８．３％であった。
【００２１】実施例３ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、第一段階として６０℃、ｐＨ６．７
において、ホルマリンを３０時間断続的に添加した。ホ
ルマリンの添加は、反応液中のホルマリン濃度を分析し
ながら、反応液中のホルマリン濃度を次式を満たす許容
範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝２０ｍＭ ＋ １０
ｍＭ ×（反応経過時間）］以下になるように制御して
行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−ＮａＯＨの添加にてｐ
Ｈ６．７に保った。次に温度を２５℃に低下させ、６時
間反応を継続し、Ｌ−セリンを合成した。反応の対グリ
シン収率は９０．５％であった。
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、第一段階として６０℃、ｐＨ６．７
において、ホルマリンを３０時間断続的に添加した。ホ
ルマリンの添加は、反応液中のホルマリン濃度を分析し
ながら、反応液中のホルマリン濃度を次式を満たす許容
範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝２０ｍＭ ＋ １０
ｍＭ ×（反応経過時間）］以下になるように制御して
行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−ＮａＯＨの添加にてｐ
Ｈ６．７に保った。次に温度を２５℃に低下させ、６時
間反応を継続し、Ｌ−セリンを合成した。反応の対グリ
シン収率は９０．５％であった。
【００２２】比較例１ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、５０℃、ｐＨ６．７において、ホル
マリンを４３時間断続的に添加することにより、Ｌ−セ
リンを合成した。ホルマリンの添加は、反応液中のホル
マリン濃度を分析しながら、反応液中のホルマリン濃度
を次式を満たす許容範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝
２０ｍＭ ＋ １０ｍＭ ×（反応経過時間）］以下
になるように制御して行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−
ＮａＯＨの添加にてｐＨ６．７に保った。反応の対グリ
シン収率は７９．１％であった。
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、５０℃、ｐＨ６．７において、ホル
マリンを４３時間断続的に添加することにより、Ｌ−セ
リンを合成した。ホルマリンの添加は、反応液中のホル
マリン濃度を分析しながら、反応液中のホルマリン濃度
を次式を満たす許容範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝
２０ｍＭ ＋ １０ｍＭ ×（反応経過時間）］以下
になるように制御して行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−
ＮａＯＨの添加にてｐＨ６．７に保った。反応の対グリ
シン収率は７９．１％であった。
【００２３】比較例２ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気処
理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７００
ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラヒ
ドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合し
た反応液に加え、３０℃、ｐＨ６．７において、ホルマ
リンを４８時間断続的に添加することにより、Ｌ−セリ
ンを合成した。ホルマリンの添加は、反応液中のホルマ
リン濃度を分析しながら、反応液中のホルマリン濃度を
次式を満たす許容範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝
２０ｍＭ ＋ １０ｍＭ ×（反応経過時間）］以下に
なるように制御して行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−Ｎ
ａＯＨの添加にて ｐＨ６．７に保った。反応の対グリ
シン収率は８０．４％であった。
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気処
理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７００
ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラヒ
ドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合し
た反応液に加え、３０℃、ｐＨ６．７において、ホルマ
リンを４８時間断続的に添加することにより、Ｌ−セリ
ンを合成した。ホルマリンの添加は、反応液中のホルマ
リン濃度を分析しながら、反応液中のホルマリン濃度を
次式を満たす許容範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝
２０ｍＭ ＋ １０ｍＭ ×（反応経過時間）］以下に
なるように制御して行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−Ｎ
ａＯＨの添加にて ｐＨ６．７に保った。反応の対グリ
シン収率は８０．４％であった。
【００２４】比較例３ 特開平０３−２０６８９２号公報に準じてＳＨＭＴ酵素
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、２５℃、ｐＨ６．７において、ホル
マリンを４０時間断続的に添加することにより、Ｌ−セ
リンを合成した。ホルマリンの添加は、反応液中のホル
マリン濃度を分析しながら、反応液中のホルマリン濃度
を次式を満たす許容範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝
２０ｍＭ ＋ １０ｍＭ ×（反応経過時間）］以下
になるように制御して行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−
ＮａＯＨの添加にてｐＨ６．７に保った。反応の対グリ
シン収率は５０．４％であった。
液を調製した。即ち、３６ｇのグリシンを蒸留水１２５
ｇに溶解してｐＨ７．５に調整した溶液に、Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＭＴ−１０３５０（微工研菌
寄第 ７４３７号）の培養湿菌体４０ｇを接触後、通気
処理を施し、酵素液とした。該処理液２００ｇを、７０
０ｇの蒸留水に３４０ｇのグリシン、１．０ｇのテトラ
ヒドロ葉酸および２０ｍｇのピリドキサルリン酸を混合
した反応液に加え、２５℃、ｐＨ６．７において、ホル
マリンを４０時間断続的に添加することにより、Ｌ−セ
リンを合成した。ホルマリンの添加は、反応液中のホル
マリン濃度を分析しながら、反応液中のホルマリン濃度
を次式を満たす許容範囲；［ホルマリン濃度（ｍＭ）＝
２０ｍＭ ＋ １０ｍＭ ×（反応経過時間）］以下
になるように制御して行った。反応液のｐＨは、１Ｎ−
ＮａＯＨの添加にてｐＨ６．７に保った。反応の対グリ
シン収率は５０．４％であった。
【００２５】
【発明の効果】本発明によって、ＳＨＭＴ活性を有する
微生物の細胞もしくは細胞処理物の存在下、グリシンと
ホルムアルデヒドからＬ−セリンを製造する方法におい
て、高収率でＬ−セリンを製造する方法が確立された。
微生物の細胞もしくは細胞処理物の存在下、グリシンと
ホルムアルデヒドからＬ−セリンを製造する方法におい
て、高収率でＬ−セリンを製造する方法が確立された。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 福原 信裕 福岡県大牟田市浅牟田町30 三井東圧化学 株式会社内
Claims (1)
- 【請求項１】 酵素セリンヒドロキシメチルトランスフ
ェラーゼ活性を有する微生物の細胞もしくは細胞処理物
の存在下、グリシンとホルムアルデヒドよりＬ−セリン
を製造する方法において、酵素反応の第一段階を３０〜
６０℃で実施し、第二段階を３０℃未満の低温で実施す
ることを特徴とするＬ−セリンの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34254992A JPH06181788A (ja) | 1992-12-22 | 1992-12-22 | Ｌ−セリンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34254992A JPH06181788A (ja) | 1992-12-22 | 1992-12-22 | Ｌ−セリンの製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06181788A true JPH06181788A (ja) | 1994-07-05 |
Family
ID=18354613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34254992A Pending JPH06181788A (ja) | 1992-12-22 | 1992-12-22 | Ｌ−セリンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06181788A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100647890B1 (ko) * | 2004-09-15 | 2006-11-23 | 동양제철화학 주식회사 | 세린 알킬에스터 유도체의 제조방법 |
| WO2006123745A1 (ja) * | 2005-05-20 | 2006-11-23 | Ajinomoto Co., Inc. | Ｌ－セリン誘導体の製造方法およびこれに用いる酵素 |
-
1992
- 1992-12-22 JP JP34254992A patent/JPH06181788A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100647890B1 (ko) * | 2004-09-15 | 2006-11-23 | 동양제철화학 주식회사 | 세린 알킬에스터 유도체의 제조방법 |
| WO2006123745A1 (ja) * | 2005-05-20 | 2006-11-23 | Ajinomoto Co., Inc. | Ｌ－セリン誘導体の製造方法およびこれに用いる酵素 |
| US7851187B2 (en) | 2005-05-20 | 2010-12-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Method of producing L-serine derivative and enzyme used therefore |
| JP4877227B2 (ja) * | 2005-05-20 | 2012-02-15 | 味の素株式会社 | Ｌ−セリン誘導体の製造方法およびこれに用いる酵素 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2664648B2 (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製造方法 | |
| EP0748791B1 (en) | Valine p-isopropylbenzene sulfonate and a process for purifying valine | |
| JPH06181788A (ja) | Ｌ−セリンの製造方法 | |
| JP2832723B2 (ja) | Ｌ―アラニンの製造法 | |
| US5707837A (en) | Method of producing (R)-tertiary leucine | |
| JP4420719B2 (ja) | Ｌ−チロシンの製造法 | |
| JP2721536B2 (ja) | Ｄ―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 | |
| JP3638425B2 (ja) | 光学活性α−アミノアジピン酸−γ−セミアルデヒドエチレンアセタールの製造方法 | |
| JP3006615B2 (ja) | Ｄ―β―ヒドロキシアミノ酸の製造法 | |
| JP2804005B2 (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製造方法 | |
| JP3016647B2 (ja) | Ｌ−セリン溶液の調製法 | |
| JPS6144474B2 (ja) | ||
| JPS6225353B2 (ja) | ||
| JP3345551B2 (ja) | Ｓ−フェニル−ｌ−システインの製造方法 | |
| JP3240011B2 (ja) | Ｌ−スレオ−β−ヒドロキシアミノ酸の製造法 | |
| JPH0471906B2 (ja) | ||
| JP3012990B2 (ja) | Ｄ―アスパラギン酸の製造法 | |
| JPS6224076B2 (ja) | ||
| JP2872178B2 (ja) | Ｌ−アスパラギン酸の製造方法 | |
| JPS6125359B2 (ja) | ||
| JP2674076B2 (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造方法 | |
| JP2001120295A (ja) | Ｄ−（３’−ピリジル）−アラニンの製法 | |
| CZ20032077A3 (cs) | Způsob přípravy enantiomerně obohacených aminokyselin | |
| JPH06261787A (ja) | 光学活性β−アミノ酸の製造法 | |
| JPS61247395A (ja) | Ｌ−フェニルアラニンの製造法 |