JPH0585924A

JPH0585924A - 皮膚外用剤

Info

Publication number: JPH0585924A
Application number: JP24778791A
Authority: JP
Inventors: Yukihiro Yada; 幸博矢田; Kazuhiko Higuchi; 和彦樋口; Genji Imokawa; 玄爾芋川; Tsutomu Fujimura; 努藤村; Yukihiro Ohashi; 幸浩大橋; Akira Kawamata; 章川俣
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1991-09-26
Filing date: 1991-09-26
Publication date: 1993-04-06
Anticipated expiration: 2014-10-18
Also published as: JP2964183B2

Abstract

(57)【要約】【構成】スフィンゴシン類を含有する皮膚外用剤。【効果】紫外線や種々の成分に起因する不全角化、表
皮肥厚、表皮脂質代謝異常等を抑制し、表皮の角化を正
常化する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は皮膚外用剤に関し、さら
に詳しくは表皮の角化を正常化する皮膚外用剤に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】皮膚は、外観的容姿を整えるとともに、
生体と外界との境界壁としての重要な機能を有してい
る。皮膚は、内因的には組織からの水分や種々の生体成
分の損失を防ぎ、体表面の水分蒸散や体温の恒常的維持
を司どっており、他方、外界の物理的、化学的刺激（温
度、湿度、紫外線、さらには種々の化学物質）から身体
を保護するバリアー能も有している。このように、皮膚
は、その生理的機能により、生体の生命活動において非
常に重要な役割をになっている。

【０００３】しかしながら、外環境の変化や生理的機能
の変動（疾患や加歳に伴う）が起こると皮膚組織の機能
異常が生じ皮膚のターンオーバーの亢進による表皮肥厚
や不全角化がしばしば誘起される。そのような内外因子
の相互作用から結果的に乾性あるいは脂性肌、フケ症等
の様々な尋常性の皮膚のトラブルが生じる。

【０００４】このような皮膚のトラブルを改善し、健常
な皮膚を維持するためには、起因物質や事象を排除ある
いは減少させるか、ある種の成分を添加、塗布すること
によりこれらの皮膚のトラブルを正常化する方法が考え
られる。従来、これらの皮膚のトラブルを予防、改善す
る主たる方法としては、合成あるいは天然の保湿成分を
塗布することにより皮膚の乾燥を防ぎ皮膚の保湿能を高
める手法や血行促進剤の塗布による皮膚の血行促進効果
により改善する等の試みがなされてきた。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前記従
来の方法は、種々の皮膚トラブルの予防、改善等の有効
性の評価のみならず、効果の持続性、さらには薬剤の安
定性、安全性等の点で数々の問題点を有している。とく
に、前記従来の方法とは、一般的に角層表面の水分補給
又は保湿成分の一部補給を行なうものであることから、
その効能又は効果は一時的なものに留まり、永続的な改
良効果が期待できないものである。そのため、この問題
の速やかな解決が望まれていた。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、かかる実
情に鑑み鋭意検討した結果、表皮内に存在する生理活性
成分であるスフィンゴシン類が紫外線や種々の成分に起
因する表皮のターンオーバー亢進（表皮肥厚、不全角化
や表皮脂質代謝の異常等）を抑制し、表皮の角化を正常
化する効果を有することを見出し、本発明を完成するに
至った。

【０００７】すなわち、本発明は、スフィンゴシン類を
含有することを特徴とする皮膚外用剤を提供するもので
ある。

【０００８】本発明に用いられるスフィンゴシン類とし
ては、例えばスフィンゴシン（スフィンゲニン）
（１）、ジヒドロスフィンゴシン（スフィンガニン）
（２）、フィトスフィンゴシン（３）、デヒドロスフィ
ンゴシン（４）、デヒドロフィトスフィンゴシン
（５）、スフィンガジエニン（６）、及びこれらのＮ−
メチル体又はＮ，Ｎ−ジメチル体等が挙げられる。これ
ら化合物の炭素鎖の炭素数は１２〜２４であることが好
ましい。これらのスフィンゴシン類は、天然型（Ｄ
（＋）体）の光学活性体を用いても、非天然型（Ｌ
（＋）体）の光学活性体を用いても、さらに天然型と非
天然型の混合物を用いてもよい。上記化合物の相対立体
配置は、天然型の立体配置のものでも、それ以外の非天
然型の立体配置のものでもよく、また、これらの混合物
によるものでもよい。

【０００９】前記化合物（１）〜（６）の構造式を炭素
鎖の炭素数が１８のものを例にとり以下に表わす。

【００１０】

【化１】

【００１１】上記スフィンゴシン類のうち、天然に存在
するものは、それぞれの化合物が含まれるリン脂質・セ
ラミド等を適当な組織（たとえば、牛脳）から抽出し、
加水分解後有機溶媒で抽出することにより得られる。

【００１２】また、ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン
・ケミカル・ソサイアティ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．）９５巻，４０９８頁（１９７３年）、ジャーナル
・オブ・リピド・リサーチ（Ｊ．ＬｉｐｉｄＲｅ
ｓ．）１９巻，２５０頁（１９７８年）、テトラヘドロ
ン・レターズ（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．）
２９巻，２３９頁（１９８８年）、テトラヘドロン（Ｔ
ｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ）４２巻，５９６１頁（１９８６
年）等に記載の方法により合成できる。また、これらの
Ｎ−メチル体及びＮ，Ｎ−ジメチル体については、これ
らのスフィンゴシン類をバイオケミストリー（Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ）７巻，２１９２頁（１９６８年）等
に記載の方法を用いてＮ−メチル化することにより合成
できる。

【００１３】スフィンゴシン類の皮膚外用剤への配合量
は、特に制限されないが、通常乳化系の皮膚外用剤の場
合には全組成量の０．００１〜５重量％（以下％で示
す）であり、特に０．０１〜１％が好ましい。また、ス
クワラン等の液状炭化水素を基剤とする油性の皮膚外用
剤の場合では通常０．０１〜１０％であり、特に０．０
５〜２％が好ましい。

【００１４】本発明の皮膚外用剤は、薬用皮膚外用剤、
化粧薬用皮膚外用剤、化粧料等の種々の使用形態をとる
ことができる。

【００１５】薬用皮膚外用剤及び化粧薬用皮膚外用剤と
しては、例えば、薬効成分を含有する各種の軟膏剤が挙
げられる。軟膏剤としては、油性基剤をベースとするも
の、油／水、水／油型の乳化系基剤をベースとするもの
のいずれであってもよい。上記油性基剤としては、特に
制限はなく、例えば、植物油、動物油、合成油、脂肪
酸、及び天然又は合成のグリセライド等が挙げられる。
また、上記薬効成分としては、特に制限はなく、例え
ば、鎮痛消炎剤、鎮痒剤、殺菌消毒剤、収斂剤、皮膚軟
化剤、ホルモン剤等を必要に応じて適宜使用することが
できる。

【００１６】また、化粧料として使用する場合は、化粧
料成分として一般に使用されている油分、保湿剤、紫外
線吸収剤、アルコール類、キレート剤、pH調整剤、防腐
剤、増粘剤、色素、香料等を任意に組み合わせて配合す
ることができる。化粧料としては、種々の用途及び形
態、例えば、水／油、油／水型乳化化粧料、クリーム、
化粧乳液、化粧水、油性化粧料、口紅、ファンデーショ
ン、皮膚洗浄剤、ヘアートニック、整髪剤、養毛剤、育
毛剤等として用いることができる。本発明の皮膚外用剤
は、常用の方法により上記種々の形態のものに調製する
ことができる。

【００１７】

【発明の効果】本発明の皮膚外用剤は、紫外線その他種
々の因子の影響による不全角化、表皮肥厚、脂質代謝異
常等に対し顕著な抑制作用を有しており、ひいては、皮
膚の正常な機能を回復させ、かつ恒常性の維持に資する
ものである。

【００１８】

【実施例】以下に実施例により本発明を具体的に説明す
るが、本発明がこれらに限定されるものでないことはい
うまでもない。

【００１９】実施例１表皮角化細胞のＤＮＡ合成に対するスフィンゴシン類の
抑制効果（１）方法ａ）ヒト表皮角化細胞の培養表皮角化細胞は、クラボウ（株）より発売されているヒ
ト正常角化細胞（商品名：エピパック）を購入し使用し
た。なお、細胞の維持、継代には同社より発売されてい
るヒト正常角化細胞用培地（商品名：Ｋ−ＧＭ）を用い
た。ｂ）ＤＮＡ合成（チミジン取り込み測定）の測定２４穴プレート中で増殖状態に培養された角化細胞を使
用した。まず、各ウエルの培地を吸引除去し、脳下垂体
抽出液を添加していないＫ−ＧＭを４５０μｌ加え培地
交換を行った。そののち、スフィンゴシン類を添加し
た。さらに、経時的に０．２μＣｉ／ml〔³Ｈ〕チミジ
ンを加え、４時間インキュベーションした。そののち、
上澄を吸引除去し、ＰＢＳ（−）で３回洗浄後、５００
μｌの２ＮＮａＯＨを加えた。３７℃で１０分間インキ
ュベーションした後、同量の２ＮＨＣｌを加え中和し、
氷冷した１０％トリクロロ酢酸を４ml加え３０分間静置
した。ガラスフィルターで沈澱物を回収した後、氷冷１
０％トリクロロ酢酸３mlで３回洗浄した。さらに氷冷エ
タノール３mlで１回フィルターを洗浄したのち、ガラス
フィルターを風乾し液体シンチレーションカウンターで
その放射活性を測定することにより細胞へのチミジンの
取り込み量を算定した。

【００２０】（２）結果結果を図１に示す。

【００２１】図１は、Ｃ₁₂にジヒドロスフィンゴシン
（２−アミノ−１，３−ドデカンジオール）、Ｃ₁₂ジメ
チルジヒドロスフィンゴシン〔２−（ジメチルアミノ）
−１，３−ドデカンジオール〕、Ｃ₂₀ジヒドロスフィン
ゴシン（２−アミノ−１，３−エイコサンジオール）、
及びＣ₂₀ジメチルジヒドロスフィンゴシン〔２−（ジメ
チルアミノ）−１，３−エイコサンジオール〕（Ｃ₁₂等
は炭素鎖の炭素数を示す）をそれぞれ１０μＭ（上
段）、及び１００μＭ（下段）添加したときの〔³Ｈ〕
チミジンの取り込み率（コントロール％）を示す。とく
に、Ｃ₁₂ジヒドロスフィンゴシン及びＣ₁₂ジメチルジヒ
ドロスフィンゴシンをそれぞれ１００μＭ添加したと
き、〔³Ｈ〕チミジン取り込み率の著しい減少がみられ
た。

【００２２】上記によりチミジンの取り込み率がスフィ
ンゴシン類の添加により著しく減少すること、すなわ
ち、ヒト表皮角化細胞のＤＮＡ合成が著しく阻害される
ことが明らかとなった。

【００２３】実施例２表皮角化細胞のトランスグルタミナーゼ活性に対するス
フィンゴシン類の効果（１）トランスグルタミナーゼ活性の測定６穴プレート中で増殖状態に培養された角化細胞を使用
した。各ウエルの培地を吸引除去し、脳下垂体抽出液を
添加していないＫ−ＧＭを２ml加え培地交換を行った。
そののち、スフィンゴシン類を添加した。２４時間後、
各ウエルをＰＢＳ（−）で３回洗浄したのちラバーポリ
スマンにより細胞を剥離回収した。得られた細胞懸濁液
を２，５００rpm 、１０分間遠心分離し沈渣を回収し
た。沈渣に緩衡液（ａ）〔１０ｍＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ
緩衡液、１０ｍＭＤＴＴ、０．５ｍＭＥＤＴＡ；
pH７．４〕２００μｌを加え、１分間、２回超音波によ
りソニケーションした。得られた懸濁液を２５，０００
rpm、３０分間超遠心分離し、上澄を得た。この上澄を
一定量ずつ分配したのち、それぞれに反応液〔３００ｍ
ＭＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衡液、pH８．１、６０ｍＭＣ
ａＣｌ₂ １００μｌ、３０ｍＭＤＴＴ１００μ
ｌ、ジメチルカゼイン５４０μｇを含む蒸留水１００μ
ｌ、１２ｍＭプトレシン５０μｌ、２．５μＣｉ
〔¹⁴Ｃ〕プトレシン５０μｌ、蒸留水１００μｌを混合
した溶液〕を加え、３７℃で１時間インキュベーション
した。つぎに１０％トリクロロ酢酸６００μｌを加え、
３０分間静置したのち、０．４５μｍニトロセルロース
メンブランを用いて沈渣を回収した。このメンブランを
５％濃度の氷冷トリクロロ酢酸１５ml（１％プトレシン
含有）で洗浄後、メンブラン上の放射活性を液体シンチ
レーションカウンターにより算定した。

【００２４】（２）結果図２に、それぞれ１０μＭのスフィンゴシン、及びジメ
チルスフィンゴシンを添加したときのトランスグルタミ
ナーゼ活性（コントロール％）を示す。スフィンゴシン
類の添加により表皮角化細胞のトランスグルタミナーゼ
活性がコントロールに対し１．８〜２．２倍に増加し
た。したがって、スフィンゴシン類は角化細胞の分化誘
導活性を有することが明らかとなった。

【００２５】実施例３表皮肥厚に対するスフィンゴシン類の抑制効果（１）方法４〜６週齢白色系モルモット２５頭の耳介部を剃毛した
のち、紫外線（ＵＶＢ：２〜３ＭＥＤ）を照射した。照
射直後、０．０５％スフィンゴシン類を含有するスクワ
ラン溶液を１日１回５０μｌずつ１週間塗布した。１週
間後、モルモットの耳介部を切除し、皮膚組織の切片を
作製した。各組織サンプルを顕微鏡下で写真撮影し、表
皮の厚みを計測することにより紫外線による肥厚に対す
る各評価サンプルの抑制効果を検討した。（２）結果図３に、紫外線照射（コントロール）、及び紫外線照射
＋スフィンゴシン添加により得られる表皮厚を示した。
スフィンゴシン類は表皮の肥厚を抑制することが明らか
となった。

【００２６】実施例４Ｗ／Ｏクリームの製造（重量％）（１）スフィンゴシン０．１（２）コレステロール０．５（３）コレステリルイソステアレート１．０（４）ポリエーテル変性シリコーン１．５（５）環状シリコーン２０．０（６）メチルフェニルポリシロキサン２．０（７）メチルポリシロキサン２．０（８）硫酸マグネシウム０．５（９）５５％エタノール５．０（１０）カルボキシメチルキチン（一丸ファルコス社製，キチンリキッドHV）０．５（１１）精製水バランス（１）〜（７）を８０℃に加温して溶解し、これに
（８）〜（１１）を加えて均一に混合し、Ｗ／Ｏクリー
ムを調製した。

【００２７】実施例５Ｏ／Ｗクリームの製造（重量％）（１）ポリオキシエチレン（10）硬化ヒマシ油１．０（２）モノステアリン酸ソルビタン０．５（３）ステアロイルメチルタウリンナトリウム０．５（４）セトステアリルアルコール２．０（５）ステアリン酸１．８（６）ジメチルスフィンゴシン０．２（７）コレステロール１．５（８）コレステリルイソステアレート１．０（９）ジカプリン酸ネオペンチルグリコール８．０（１０）メチルポリシロキサン５．０（１１）グリセリン５．０（１２）精製水バランス（１）〜（１０）を８０℃に加温して溶解し、これに
（１１）〜（１２）を加えて均一に混合し、Ｏ／Ｗクリ
ームを調製した。

【００２８】実施例６保湿サンスクリーンクリームの製造（重量％）（１）Ｃ₁₂ジヒドロスフィンゴシン（Ｃ₁₂；炭素鎖の炭素数）０．２（２）シリコン被覆酸化亜鉛７．０（３）ｐ−メトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル３．０（４）コレステリルイソステアレート１．０（５）ポリエーテル変性シリコーン２．０（６）メチルポリシロキサン５．０（７）環状シリコーン１５．０（８）硫酸マグネシウム１．０（９）グリセリン５．０（１０）精製水バランス（１）〜（７）を８０℃に加温して溶解し、これに
（８）〜（１０）を加えて均一に混合し、保湿サンスク
リーンクリームを調製した。

【００２９】実施例７軟膏の製造（重量％）（１）スフィンゴシン０．５（２）白色ワセリンバランス（３）コレステリルイソステアレート３．０（４）流動パラフィン１０．０（５）グリセリルエーテル１．０（６）グリセリン１０．０（１）〜（６）を８０℃に加温して溶解した後冷却し、
軟膏を調製した。

【００３０】実施例４〜７で得られた皮膚外用剤は、そ
れぞれ不全角化、表皮肥厚、脂質代謝異常等に対して抑
制作用を有し、皮膚正常機能の回復、及び恒常性維持に
資するものであった。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１におけるスフィンゴシン類添加による
チミジン取り込み率変化を示す図である。

【図２】実施例２におけるスフィンゴシン類添加による
トランスグルタミナーゼ活性変化を示す図である。

【図３】実施例３における紫外線照射及びスフィンゴシ
ン類添加による表皮厚変化を示す図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者大橋幸浩栃木県宇都宮市越戸町30−19 (72)発明者川俣章栃木県宇都宮市花房３丁目１−17−707

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】スフィンゴシン類を含有することを特徴
とする皮膚外用剤。
【請求項２】スフィンゴシン類が、スフィンゴシン、
ジヒドロスフィンゴシン、フィトスフィンゴシン、デヒ
ドロスフィンゴシン、デヒドロフィトスフィンゴシン、
スフィンガジエニン、及びこれらのＮ−メチル体又は
Ｎ，Ｎ−ジメチル体から選ばれるものである請求項１記
載の皮膚外用剤。