JP7466721B2 - ストレスに起因する皮膚バリア機能改善剤 - Google Patents
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Description
〔1〕
エンケファリン存在下における、表皮細胞の細胞分化度及び/又は皮膚三次元モデルの皮膚バリア機能を指標とするストレスに起因する肌荒れ改善剤のスクリーニング方法。
〔2〕
(1)表皮細胞にエンケファリンおよび被験物質を添加し培養するステップ、
(2)表皮細胞分化度を測定するステップ、
(3)ステップ(2)で得られた表皮細胞分化度を被験物質の無添加群と比較し、表皮細胞分化度を向上させる物質を効果物質と判定するストレスに起因する肌荒れ改善剤のスクリーニング方法。
〔3〕
前記表皮細胞分化度が、表皮細胞の分化に伴い発現量が増加するタンパク質の発現量またはそれをコードする遺伝子の発現量である〔1〕又は〔2〕いずれかに記載の方法。
〔4〕
前記タンパク質が、ケラチン1、ケラチン10、インボルクリン、ロリクリン、フィラグリン、カスパーゼ14及びトランスグルタミナーゼから選択される少なくとも1種以上を含む〔1〕乃至〔3〕いずれかに記載の方法。
〔5〕
前記タンパク質またはその遺伝子の発現量が、被験物質を添加しない場合のこれら発現量と比較して10%以上増加する場合に、前記被験物質はストレスに起因する肌荒れ改善作用を有すると判断する〔1〕乃至〔4〕いずれかに記載の方法。
〔6〕
(1)皮膚三次元モデルにエンケファリンおよび被験物質を添加し培養するステップ、
(2)皮膚三次元モデルの皮膚バリア機能を測定するステップ、
(3)ステップ(2)で得られた皮膚バリア機能を被験物質の無添加群と比較し、皮膚バリア機能を向上させる物質を効果物質と判定するストレスに起因する肌荒れ改善剤のスクリーニング方法。
〔7〕
〔1〕乃至〔5〕のいずれかの方法により選択されるストレスに起因する肌荒れ改善剤。
〔8〕
カズノイバラ抽出物を含有するストレスに起因する肌荒れ改善剤。
〔9〕
カズノイバラ抽出物を含有するストレスに起因する皮膚バリア機能低下の改善剤。
〔10〕
ストレスに起因する肌荒れ改善のためのカズノイバラ抽出物の使用。
具体的には、表皮細胞にエンケファリンおよび被験物質を添加し培養するステップ、表皮細胞分化度を得る測定ステップ、表皮細胞分化度を比較しストレスに起因する肌荒れ改善剤を選択するステップ、を含む、スクリーニング方法である。
具体的には、皮膚三次元モデルにエンケファリンおよび被験物質を添加し培養するステップ、皮膚三次元モデルの皮膚バリア機能を測定するステップ、皮膚バリア機能を比較しストレスに起因する肌荒れ改善剤を選択するステップ、を含む、スクリーニング方法である。
角層は角質細胞が構成する角層を構成する角質細胞は、終末分化に伴い生成するSS結合を有するケラチン線維を主成分とし、保湿機能に重要な役割を演じているフィラグリンや天然保湿因子NMFを含み、さらにそれらを包むコーニファイドエンベロープからなる。また角質細胞どうしは、細胞間接着分子からなるコルネオデスモゾームにより結合しており、強靭なシート構造をとる。角層はこのシート構造が何層も重なることで、10~20μmの厚みを持つ生体内と生体外の境界膜として存在する。このような構成により皮膚内部の水分量が保持され水分の消失(経皮水分蒸散)が抑制されることで、皮膚バリア機能が正常に維持される。つまり、十分な厚さをもった角層が形成されること、これの構成分子が正常に産生・成熟し、角層が正常に形成され、機能することが重要である。
以下の手順で、精神的ストレスを負荷したヒトの生体内エンケファリン量の変化を検討した。
試験に同意を得た20~30代男女8名に、クレペリン検査試験を実施してもらい、検査前後の唾液を採取した。クレペリン検査とは、連続した単純計算試験であり、軽微な精神的ストレス負荷試験として広く用いられる。各被験者にはクレペリン検査試験前に口腔内を水でゆすいで洗浄してもらい、5分後にサリベット(ザルスタット社)のスポンジを90秒間口腔内に含ませ、クレペリン検査試験前の唾液を採取した。単純計算クレペリン検査試験を15分間実施後、再度サリベット(ザルスタット社)のスポンジを90秒間口腔内に含ませ、クレペリン検査試験後の唾液を採取した。唾液を採取したスポンジをサリベットチューブに戻し、チューブを4℃、3,000×gで5分間遠心することで唾液を回収した。唾液はリン酸緩衝生理食塩水(PBS(-))にて3倍に希釈し、唾液中エンケファリン量はELISA Kit for Enkephalin(USCNLIFE社)、唾液中コルチゾール量はSalivary Crotisol ELISA Kit(Salimetrics社)を用いて測定した。
図1に示すように、軽微な精神的ストレスの負荷により唾液中エンケファリン量は増加した。このとき、唾液中コルチゾール量についてはほぼ変動がなく、ストレスにより体内で増加することが従来より知られているコルチゾールよりも、エンケファリンははるかに鋭敏にストレスに反応する物質であることが示唆された。なお唾液は非侵襲的かつ簡便に採取でき、かつ唾液中に存在する物質(例えばコルチゾールやエストラジオール)の濃度は、血中濃度と強い相関があることが報告されており、唾液中物質濃度の変化は、生体内での濃度変化とほぼ同義ととらえることが出来る。
以下の手順で、ヒトの生体内エンケファリン量と皮膚の経皮水分蒸散量の関係を検討した。
試験に同意を得た20~30代女性9名を対象とし、顔面を洗顔料で洗浄後、22±1℃、湿度50±2%の環境下で20分間順化した後、TEWA meter TM-210(Courage+Khazaka社)にて顔面頬部の経皮水分蒸散量を測定した。また、口腔内を水でゆすいで洗浄してもらい、5分後にサリベット(ザルスタット社)のスポンジを90秒間口腔内に含ませ唾液を採取した。唾液を採取したスポンジをサリベットチューブに戻し、チューブを4℃、3,000×gで5分間遠心することで唾液を回収した。唾液はリン酸緩衝生理食塩水(PBS(-))で3倍に希釈し、ELISA Kit for Enkephalin(USCNLIFE社)にて唾液中エンケファリン量を測定し、経皮水分蒸散量と唾液中エンケファリン量の関係を解析した。
図2に示すように、ヒトの唾液中エンケファリン量と皮膚の経皮水分蒸散量には強い正の相関があり、生体内エンケファリン量が多いヒトほど経皮水分蒸散量が高い傾向にあることが分かる。
以下の手順で、ストレスに起因する乾燥の悪化と生体内エンケファリン量の関係を調査した。
試験に同意を得た20~40代女性27名を対象に、ストレスと肌状態に関するアンケートを実施した。また、<実験2>と同様の方法で唾液の採取、唾液中エンケファリン量の測定を実施し、ストレス時の肌状態と唾液中エンケファリン量の関係について解析した。
図3に示すように、ストレスに起因し乾燥が悪化すると認識しているヒトの群では、乾燥が悪化しないと認識しているヒトの群と比較して唾液中エンケファリン量が多く、ストレスに起因する肌状態の悪化と生体内エンケファリン量に関連があることが示唆される。
以下の手順で、エンケファリンによる表皮細胞の細胞分化関連遺伝子の発現量への影響を検討した。
正常ヒト表皮ケラチノサイト(BIOPREDIC社)を専用培地(終濃度0.03mM塩化カルシウムおよびHuman Keratinocyte Growth Supplement(Gibco)、を加えたMedium 154CF(Gibco)培地)に懸濁し、5×104cells /mLになるように細胞懸濁液を調製し、24穴培養プレートに500μLずつ播種した。37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で2日間培養後、メチオニン-エンケファリンを終濃度が10、100nMになるように培地に加えた。37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で24時間培養後、塩化カルシウム水溶液を終濃度が1.2mMになるよう培地に加え37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で培養し、ケラチノサイトの細胞分化を誘導した。24時間培養後、Total RNA Purification Kit(Jena Bioscience)を用いて、Total RNAを抽出した。その後、PrimeScript RT Reagent Kit(TaKaRa)を用いて逆転写を行い、cDNAを合成した。得られたcDNAを鋳型として、ケラチン1(KRT1)、ケラチン10(KRT10)およびGAPDH(グリセルアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ;ハウスキーピング遺伝子として使用)の発現量を以下のプライマー及び酵素を用いて、リアルタイムPCR(7500 Real Time PCR System、アプライドバイオシステムズ)にて測定した。プライマーには、KRT1用センスプライマー(5’-CTTCAGGCCAAACTTGACAACTT-3’)、アンチセンスプライマー(5’-TCTGAGACAACTCTGCTTGGTAGAG-3’)、KRT10用センスプライマー(5’- CAACTGGCCTTGAAACAATCC-3’)、アンチセンスプライマー(5’-CTGCACACAGTAGCGACCTTCT-3’)、GAPDH用センスプライマー(5’-CCACATCGC TCAGACACCAT-3’)、アンチセンスプライマー(5’-TGACCAGGC GCCCAATA-3’)を用いた。PCRの反応にはPower SYBR Green Master Mix(アプライドバイオシステムズ)を使用し、遺伝子発現の解析は比較Ct法にて行った。つまり、被験物質添加による遺伝子発現量の変化は、エンケファリン未添加のコントロール群のKRT1、KRT10のCt値をGAPDHのCt値で補正した値を1とし、それに対する相対量として求めた。
図4に示すように、エンケファリンの添加により表皮細胞の分化関連遺伝子KRT1、KRT10の発現量が減少することが示され、エンケファリンは表皮細胞の細胞分化を抑制することが示された。
以下の手順で、エンケファリンによる皮膚三次元モデルの表皮細胞の細胞分化関連遺伝子の発現量への影響を検討した。
1.エンケファリン添加皮膚三次元モデルの培養
皮膚三次元モデル作製キットLabcyte EPI-KIT(J-TEC)に内包の正常ヒト表皮ケラチノサイトを専用アッセイ培地に懸濁し、細胞培養用インサートに細胞懸濁液を500μLずつ播種した。12穴培養プレートにアッセイ培地を1.5mLずつ分注し、12穴培養プレートの各ウェルに細胞培養インサートを浸して37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で1日間培養した。細胞培養用インサート内部の培地を注意深く除去し、細胞を空気暴露することでケラチノサイトの細胞分化を誘導した。12穴培養プレートの培地を交換し、37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で2日間培養した。12穴培養プレートの培地を交換し、各ウェルの培地中にメチオニン-エンケファリンを終濃度が100nMとなるように添加し、2、3日ごとにメチオニン-エンケファリン含有培地を交換しながら、37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で12日間培養した。
2.分化関連遺伝子の発現量の測定
メスを用い、細胞培養用インサートから皮膚三次元モデルおよびその支持基盤を切り離した。Total RNA Purification Kit(Jena Bioscience)を用いて、皮膚三次元モデルよりTotal RNAを抽出した。その後、PrimeScript RT Reagent Kit(TaKaRa)を用いて逆転写を行い、cDNAを合成した。得られたcDNAを鋳型として、ケラチン1(KRT1)、ケラチン10(KRT10)、インボルクリン、プロフィラグリン(フィラグリンタンパク質をコードする遺伝子)およびGAPDH(グリセルアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ;ハウスキーピング遺伝子として使用)の発現量を以下のプライマー及び酵素を用いて、リアルタイムPCR(7500 Real Time PCR System、アプライドバイオシステムズ)にて測定した。プライマーには、KRT1用センスプライマー(5’-CTTCAGGCCAAACTTGACAACTT-3’)、アンチセンスプライマー(5’-TCTGAGACAACTCTGCTTGGTAGAG-3’)、KRT10用センスプライマー(5’- CAACTGGCCTTGAAACAATCC-3’)、アンチセンスプライマー(5’-CTGCACACAGTAGCGACCTTCT-3’)、インボルクリン用センスプライマー(5’-GGAGAAGCAGGAGGCACA-3’)、アンチセンスプライマー(5’-TCCAGGTGCTTTGGCTGT-3’)、プロフィラグリン用センスプライマー(5’-GGCACTGAAAGGCAAAAAGG-3’)、アンチセンスプライマー(5’-AAACCCGGATTCACCATAATCA-3’)、GAPDH用センスプライマー(5’-CCACATCGC TCAGACACCAT-3’)、アンチセンスプライマー(5’-TGACCAGGC GCCCAATA-3’)を用いた。PCRの反応にはPower SYBR Green Master Mix(アプライドバイオシステムズ)を使用し、遺伝子発現の解析は比較Ct法にて行った。つまり、被験物質添加による遺伝子発現量の変化は、エンケファリン未添加のコントロール群のKRT1、KRT10、インボルクリン、プロフィラグリンのCt値をGAPDHのCt値で補正した値を1とし、それに対する相対量として求めた。
図5に示すように、エンケファリンの添加により皮膚三次元モデルの表皮細胞の分化関連遺伝子KRT1、KRT10、インボルクリン、プロフィラグリンの発現量が減少することが示され、エンケファリンは表皮細胞の細胞分化を抑制することが再度示された。
以下の手順で、エンケファリン添加による皮膚三次元モデルの角層形態への影響を確認した。
1.エンケファリン添加皮膚三次元モデルの培養
<実験5>と同様に培養した。
2.角層形態の観察
メスを用い、細胞培養用インサートから皮膚三次元モデルおよびその支持基盤を切り離した。皮膚三次元モデルをOCTコンパウンド(サクラファインテック社)に包埋し-80℃にて凍結後、クリオスタット(LEICA)にて、凍結皮膚三次元モデル切片を作製した。切片をスライドガラスに貼付、固定後、マイヤーヘマトキシリン染色、エオシン染色にて皮膚三次元モデル切片の形態が観察しやすいよう染色し、光学顕微鏡(KEYENCE)にて皮膚三次元モデル切片の角層形態を観察した。
図6に示すように、エンケファリンの添加により皮膚三次元モデルの角層厚が大幅に減少することが示された。
以下の手順で、エンケファリン添加による皮膚三次元モデルの角質細胞内ケラチンSS結合への影響を確認した。
1.エンケファリン添加皮膚三次元モデルの培養
<実験5>と同様に培養した。
2.ケラチンSS結合の染色
メスを用い、細胞培養用インサートから皮膚三次元モデルおよびその支持基盤を切り離した。皮膚三次元モデルをOCTコンパウンド(サクラファインテック社)に包埋し-80℃にて凍結後、クリオスタット(LEICA)にて、凍結皮膚三次元モデル切片を作製した。切片をスライドガラスに貼付後、リン酸緩衝生理食塩水(PBS(-))で調製した0.15M N-エチルマレイミド(和光純薬)溶液に切片を浸漬し、37℃環境下で5分間インキュベートした。その後、PBS(-)で調製した0.15mM EDTA、10mM 2-メルカプトエタノール溶液に切片を浸漬し、37℃環境下で3分間インキュベートした。PBS(-)で調製した0.01mM N-(7-ジメチルアミノ-4-メチルクマリニル)マレイミド(和光純薬)溶液に1分間浸漬し、SS結合を染色した。励起波長400nm、蛍光波長460nmのフィルターを用い、蛍光顕微鏡(KEYENCE)にて蛍光像を観察した。
図7に示すように、エンケファリンの添加により皮膚三次元モデルの角質細胞内のケラチンSS結合が大きく減少し、エンケファリンにより角層の成熟が抑制されていることが示された。
以下の手順で、エンケファリン添加による皮膚三次元モデルの経皮水分蒸散量への影響を検討した。
1.エンケファリン添加皮膚三次元モデルの培養
<実験5>と同様に培養した。
2.経皮水分蒸散量の測定
細胞培養用インサートが入った12穴培養プレートの蓋を取り外し、室温で30分間静置して空気環境に順化させた。Vapometer(Delfin)を細胞培養用インサートに密着させ、皮膚三次元モデルの経皮水分蒸散量を測定した。
図8に示すように、エンケファリンの添加により皮膚三次元モデルの経皮水分蒸散量が増加することが確認された。
以下の手順で、エンケファリンを添加した表皮細胞の分化関連遺伝子KRT1の発現量の変化を指標とした、ストレスに起因する肌荒れ改善剤のスクリーニングを行った。
1.被験物質の調製
乾燥させた植物原体に40倍の質量の精製水を加えて60℃、4時間加熱抽出した。抽出物の乾燥残分に対して、精製水を質量比で1:100(10,000ppm)となるように加えて希釈したものを被験物質とした。なお用いた植物原体は、カズノイバラ、ネコアシ昆布、日高昆布の全草である。
2.エンケファリン添加表皮細胞の分化関連遺伝子KRT1発現量を指標としたスクリーニング
正常ヒト表皮ケラチノサイト(BIOPREDIC社)を専用培地(終濃度0.03mM塩化カルシウムおよびHuman Keratinocyte Growth Supplement(Gibco)を加えたMedium 154CF(Gibco)培地)に懸濁し、5×104cells /mLになるように細胞懸濁液を調製し、24穴培養プレートに500μLずつ播種した。37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で2日間培養後、メチオニン-エンケファリンおよび被験物質を終濃度がそれぞれ100nM、100ppmになるように培地に加えた。37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で24時間培養後、塩化カルシウム水溶液を終濃度が1.2mMになるよう培地に加え37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で24時間培養し、ケラチノサイトの細胞分化を誘導した。その後、Total RNAを抽出し、<実験4>と同様の方法でケラチン1の遺伝子発現量を測定した。
図9に示すように、エンケファリンの添加により減少した表皮細胞の分化関連遺伝子KRT1の発現量は、ネコアシ昆布抽出物、日高昆布抽出物を添加した群ではほとんど変化が無かった。一方、カズノイバラ抽出物を添加した群ではエンケファリン添加時のKRT1の発現量がエンケファリン未添加のControlと同程度にまで増加しており、カズノイバラ抽出物はエンケファリンによる表皮細胞の細胞分化抑制作用を改善することができることが示された。
以下の手順で、各種被験物質の表皮細胞の分化関連遺伝子KRT1の発現量への影響を確認した。
1.被験物質の調製
<実施例1>と同様に調製したものを用いた。
2.被験物質における分化関連遺伝子KRT1発現量への影響の検討
正常ヒト表皮ケラチノサイト(BIOPREDIC社)を専用培地(終濃度0.03mM塩化カルシウムおよびHuman Keratinocyte Growth Supplement(Gibco)を加えたMedium 154CF(Gibco)培地)に懸濁し、5×104cells /mLになるように細胞懸濁液を調製し、24穴培養プレートに500μLずつ播種した。37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で2日間培養後、被験物質を終濃度が100ppmになるように培地に加えた。37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で24時間培養後、塩化カルシウム水溶液を終濃度が1.2mMになるよう培地に加え37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で24時間培養し、ケラチノサイトの細胞分化を誘導した。その後、Total RNAを抽出し、<実験4>と同様の方法でケラチン1の遺伝子発現量を測定した。
図10に示すように、カズノイバラ抽出物はエンケファリン未添加の表皮細胞の細胞分化関連遺伝子KRT1の発現量を減少させることが確認された。つまり、カズノイバラ抽出物そのものは表皮細胞の細胞分化を促進する作用は保持しておらず、図9で確認された効果はエンケファリンによる細胞分化の抑制に特異的な作用であったことが確認された。
以下の手順で、エンケファリン添加による皮膚三次元モデルの角層厚を指標とした、ストレスに起因する肌荒れ改善剤のスクリーニングを行った。
1.被験物質の調製
<実施例1>と同様に調製したものを用いた。
2.エンケファリン添加皮膚三次元モデルの培養
皮膚三次元モデル作製キットLabcyte EPI-KIT(J-TEC)に内包の正常ヒト表皮ケラチノサイトを専用アッセイ培地に懸濁し、細胞培養用インサートに細胞懸濁液を500μLずつ播種した。12穴培養プレートにアッセイ培地を1.5mLずつ分注し、12穴培養プレートの各ウェルに細胞培養インサートを浸して37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で1日間培養した。細胞培養用インサート内部の培地を注意深く除去し、細胞を空気暴露することでケラチノサイトの細胞分化を誘導した。12穴培養プレートの培地を交換し、37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で2日間培養した。12穴培養プレートの培地を交換し各ウェルの培地中にメチオニン-エンケファリンを終濃度が100nM、被験物質を終濃度が100ppmとなるように添加し、37℃、 5%CO2/95%空気の加湿条件で培養した。メチオニン-エンケファリンおよび被験物質含有培地を2、3日ごとに交換しながら、12日間培養した。
3.角層形態の観察
<実験6>と同様に観察した。
図11に示すように、ネコアシ昆布抽出物、日高昆布抽出物と比較し、カズノイバラ抽出物とエンケファリンを添加した場合、エンケファリンのみを添加した皮膚三次元モデルと比較し、角層厚が大幅に増加することが示された。
以下の手順で、エンケファリン添加による皮膚三次元モデルの経皮水分蒸散量を指標とした、ストレスに起因する肌荒れ改善剤のスクリーニングを行った。
1.被験物質の調製
<実施例1>と同様に調製したイバラノリ抽出物を用いた。
2.エンケファリン添加皮膚三次元モデルの培養
<実施例3>と同様に培養した。
3.経皮水分蒸散量の測定
<実験8>と同様に測定した。
図12に示すように、エンケファリンの添加により増加した皮膚三次元モデルの経皮水分蒸散量は、カズノイバラ抽出物の添加によってControl(エンケファリン未添加)と同程度まで減少することが確認された。
カズノイバラ抽出物を用いて「表1」の処方により皮膚外用剤を調製し、試験に同意を得た20~30代女性8名を被験者とし効果試験を実施した。なお、被験者は事前にストレスチェックを実施し、高ストレス群と判断されたヒトの群から選出した。被験者に試験例1と比較例1のテストサンプルを1か月間毎日、朝と夜の2回、洗顔後に半顔に塗布してもらい、使用開始4週間後の顔面頬部の経皮水分蒸散量をTEWA meter TM-210(Courage+Khazaka社)にて測定した。測定は、顔面を洗顔料で洗浄後、22±1℃、湿度50±2%の環境下で20分間順化したのち実施した。
図13に示すように、本発明のスクリーニング法により選択されたストレスによる肌荒れの改善効果を有する成分を配合した試験例1では比較例1に比べ、テストサンプルの連用後に経皮水分蒸散量の低下が認められた。
カズノイバラ抽出物 0.02
ステアリルアルコール 6.00
ステアリン酸 2.00
ワセリン 4.00
スクワラン 9.00
オクチルドデカノール 10.00
1,3-ブチレングリコール 6.00
グリセリン 4.00
POE(20)セチルアルコールエーテル 3.00
モノステアリン酸グリセリン 2.00
酸化防止剤 適量
防腐剤 適量
精製水 残部
合計 100.0
カズノイバラ抽出物 0.01
タルク 5.00
セリサイト 8.00
酸化チタン 5.00
色顔料 適量
モノイソステアリン酸ポリグリセリル 3.00
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 1.50
イソノナン酸イソトリデシル 10.00
1,3-ブチレングリコール 5.00
酸化防止剤 適量
防腐剤 適量
精製水 残部
合計 100.00
カズノイバラ抽出物 0.01
酸化チタン 10.00
酸化亜鉛 10.00
PEG-9ポリジメチルシロキシエチルジメチコン 1.50
ラウリルPEG9-ポリジメチルシロキシエチルジメチコン 1.50
シクロペンタシロキサン 20.00
ジメチコン 10.00
(ジメチコン/ビニルジメチコン)クロスポリマー 0.50
セチルジメチコン 0.25
グリチルレチン酸エステル 0.05
メチルグルセス-20 1.00
1,3-ブチレングリコール 10.00
塩化ナトリウム 適量
酸化防止剤 適量
防腐剤 適量
精製水 残部
合計 100.00
Claims (3)
- カズノイバラ水抽出物を含有する精神的ストレスに起因する肌荒れ改善剤。
- カズノイバラ水抽出物を含有する精神的ストレスに起因する皮膚バリア機能低下の改善剤。
- 精神的ストレスに起因する肌荒れ改善のためのカズノイバラ水抽出物の使用。
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