JP2018068245A - 藻類から脂溶性成分を抽出する方法 - Google Patents

Abstract

【課題】藻類に含まれるフコキサンチン、ＥＰＡ及びβ−カロテンなどの脂溶性成分を高濃度で簡便に抽出する方法、およびその抽出物を配合した食品および化粧品組成物を提供すること。【解決手段】藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法であって、（１）藻類を粉砕する工程、（２）粉砕した藻類に低極性溶媒を添加してなる溶液を作製する工程、及び（３）該溶液を湿式微粒化処理して抽出物を得る工程、を含むことを特徴とする、藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法とする。【選択図】なし

Description

本発明は、藻類に含まれるフコキサンチンやエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、β−カロテンなどの脂溶性成分を高濃度で簡便に抽出する方法、およびその抽出物を配合した食品および化粧品組成物に関する。

藻類はミネラル、ビタミン、食物繊維（フコイダン等）などの有用な栄養成分を含有しており、健康食品として近年注目されている。

藻類にはβ−カロテンやＥＰＡ等の脂溶性成分が含まれており、これらの脂溶性成分は栄養成分として、あるいは化粧品の素材として有用である。
具体的には、β−カロテンは強力な抗酸化作用を有するため、化粧品に加えると美肌効果、アンチエイジング効果が期待でき、食品として摂取すれば動脈硬化や生活習慣病の予防につながる。
β−カロテンを体内に取り込めば必要量に応じてビタミンＡに変換されて使用される。

ＥＰＡは血中の中性脂肪やコレステロールを低下させる働きを有するため、食品として摂取すると脳血栓や脳梗塞などのリスクを軽減できる。β−カロテンと同様に強力な抗酸化作用を有するため、化粧品に加えると美肌効果、アンチエイジング効果が期待できる。

藻類由来の脂溶性成分の中でも、近年注目を集めているのはフコキサンチンである。フコキサンチンは褐藻類に含まれるカロテノイド（キサントフィル）の一種であり、ワカメ、モズク、コンブ、ヒジキなど日常的に食される海藻類に含まれている成分である。近年、フコキサンチンには抗酸化作用、抗腫瘍作用、神経細胞保護作用、血糖値上昇抑制などの保健機能的作用効果が報告されており、健康食品や化粧品等において利用することが期待されている。

一方、藻類の脂溶性成分を抽出する方法としては、その抽出溶媒としてエタノールなど水に相溶性を有する有機溶媒を用いて抽出する方法が行われている。
しかし、一般に、カロテノイドやＥＰＡ等の脂溶性成分を産生する細胞であっても、細胞中に含まれる脂溶性成分の含量は低く、例えば、一般に食用に供される海藻中に含まれるフコキサンチンは、湿重量あたり０．２ｍｇ／ｇ以下と極めて微量である。
よって、有効な機能性を発揮する量の脂溶性成分を得るためには、エタノールなど水に相溶性を有する有機溶媒を用いた後、様々な方法を用いて濃縮し、油脂に可溶化する必要があり、大量の原料を必要とするうえ手間がかかるという問題点があった。
このため、藻類から脂溶性成分を効率よく、簡便に抽出できる方法の開発が求められている。
さらに、フコキサンチンは時間の経過とともに分解しやすい物質である。このため、フコキサンチンを長期間安定して保存できる抽出方法が求められている。

藻類から効率的に脂溶性成分を抽出するために、様々な方法が開発されている。
その中には、物理的に細胞を破砕して細胞に含まれる脂溶性成分を取り出す方法がある。
例えば、特許文献１には微細藻類を含む分散液に二酸化炭素を溶解させ、高圧分散装置により剪断力を加えることで微細藻類を破砕して脂質を抽出する方法が記載されている。しかし、特許文献１記載の方法では分散液に含まれる溶媒として水を用いており、脂質を分離するためにはその後溶媒抽出、遠心分離、静置処理、及び／又はカラムクロマトグラフィー等を行う必要があり、時間と手間を要するという問題点を有する。

特許文献２には、脂溶性成分からなる生理活性物質を含む海藻由来製品素材の製造方法であって、海藻を微細化し、微細化した海藻を、海藻細胞壁分解酵素を含む酵素水溶液中でインキュベートした後、液体成分を固体成分から分離し、固体成分を乾燥させて海藻由来製品素材を得る、製造方法が記載されている。
特許文献２記載の方法では酵素水溶液中で脂溶性成分を抽出しているため、その後水溶液から脂溶性成分を分離する必要があり、分離に手間と時間がかかるという問題点を有する。

特許文献３には、海藻類の細片または粉末にオリーブ油などの油脂、ロウ類または炭化水素を加えて撹拌し、その後常温で摩砕することで脂溶性成分を油脂等に抽出する方法が記載されている。
特許文献３では、抽出した油脂等をそのまま化粧品に用いた実施例が記載されているものの、食品として用いるにはその後滅菌操作等を行う必要があるため、抽出後の処理に時間と手間を要するという問題点を有する。さらに、特許文献３記載の方法では油脂中に抽出された脂溶性成分は均一に分散していないため、その後食品や化粧品に加える際に正確な濃度で加えることが難しいという問題点を有する。

特開２０１５−１２４２３９号公報 特許第５３９１５３６号公報 特開２００４−０８９１５８号公報

本発明は、藻類に含まれるフコキサンチンやＥＰＡ、β−カロテンなどの脂溶性成分を高濃度で簡便に抽出する方法、およびその抽出物を配合した食品および化粧品組成物を提供するものである。

請求項１に係る発明は、藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法であって、（１）藻類を粉砕する工程、（２）粉砕した藻類に低極性溶媒を添加してなる溶液を作製する工程、及び（３）該溶液を湿式微粒化処理して抽出物を得る工程を含むことを特徴とする、藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法に関する。

請求項２に係る発明は、湿式微粒化処理が、（ａ）該溶液を高圧ノズルから高圧噴射し微粒化処理する工程、（ｂ）微粒化処理した溶液にエアを供給する工程、（ｃ）エアを供給することによって形成された気泡中で放電させ、液中プラズマ処理し、脂溶性成分を含む抽出物を得る工程、を含むことを特徴とする、請求項１記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法に関する。

請求項３に係る発明は、脂溶性成分がフコキサンチン、ＥＰＡ及びβ−カロテンからなる群から選択される１種以上を含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法に関する。

請求項４に係る発明は、抽出物中のフコキサンチンの濃度が１．５ｍｇ／ｇ以上であることを特徴とする、請求項３に記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法に関する。

請求項５に係る発明は、中鎖脂肪酸、大豆油、菜種油、紅花油、コーン油、綿実油、ごま油、オリーブオイル、ヤシ油、パーム油、チアシードオイル、ひまわり油、米油及びグレープシードオイルからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１乃至４のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法に関する。

請求項６に係る発明は、湿式微粒化処理によって形成された粒子の５％以上が粒径１μｍ−１００μｍの範囲内であることを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法に関する。

請求項７に係る発明は、請求項１乃至６のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法によって得られた抽出物を含む食品又は化粧品組成物に関する。

請求項８に係る発明は、藻類由来のフコキサンチンの濃度が１．５ｍｇ／ｇ以上であることを特徴とする、脂溶性成分高濃度含有抽出物に関する。

請求項９に係る発明は、請求項８記載の脂溶性成分高濃度含有抽出物を含む食品又は化粧品組成物に関する。

請求項１に係る発明によれば、藻類の脂溶性成分を低極性溶媒中で抽出することで、溶媒を蒸発させて脂溶性成分を濃縮、精製することなく、直接食品や化粧品組成物に添加することができる。
微粒化処理することで藻類の細胞壁を破壊し、効率よく脂溶性成分を抽出することができる。

請求項２に係る発明によれば、粉砕した藻類に低極性溶媒を添加した溶液を高圧ノズルから高圧噴射することで藻類の細胞壁を破壊し、マイクロサイズにまで微粒化することで細胞中のほとんどの脂溶性成分を低極性溶媒中に放出することができ、結果として藻類から最大量の脂溶性成分を抽出することができる。
微粒化処理した溶液を液中プラズマ処理することで、静電反発の作用によって再凝集が防止されるとともに脂溶性成分の低極性溶媒中での分散安定性が向上する。また、プラズマ中の荷電粒子の衝突による細菌の破壊や滅菌の効果もある。
さらに、液中プラズマ処理をする前に微粒化処理した溶液にエアを供給することで放電しやすい環境を作り、静電反発の作用を溶液中の微粒子に行き渡らせることが容易になる。

請求項３に係る発明によれば、フコキサンチン、ＥＰＡ及びβ−カロテンからなる群から選択される１種以上を含む脂溶性成分の抽出物が藻類から得られる。

請求項４に係る発明によれば、従来の抽出方法で得られた抽出物と比較して高濃度の脂溶性成分を含む抽出物が藻類から得られる。

請求項５に係る発明によれば、低極性溶媒が中鎖脂肪酸、大豆油、菜種油、紅花油、コーン油、綿実油、ごま油、オリーブオイル、ヤシ油、パーム油、チアシードオイル、ひまわり油、米油及びグレープシードオイルからなる群から選択されるもの、つまり食用油を使用することで、最終的に得られた抽出物をそのまま食品や化粧品組成物に添加することができる。

請求項６に係る発明によれば、微粒化処理によって形成された粒子の５％以上が粒径１μｍ−１００μｍの範囲内にある、つまりマイクロサイズに微細化することで藻類の細胞に含まれる脂溶性成分をより効率よく抽出することができるという効果を奏する。

請求項７に係る発明によれば、請求項１乃至６のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法によって得られた抽出物を含む食品又は化粧品組成物とすることで、食品として摂取すれば動脈硬化や生活習慣病の予防につながり、脳血栓や脳梗塞などのリスクを軽減し、抗酸化作用、抗腫瘍作用、神経細胞保護作用、血糖値上昇抑制効果を奏する。化粧品組成物として使用すれば美肌効果、アンチエイジング効果を奏する。

請求項８に係る発明によれば、藻類由来のフコキサンチンの濃度が１．５ｍｇ／ｇ以上であることを特徴とする、脂溶性成分高濃度含有抽出物を提供することができる。

請求項９に係る発明によれば、請求項８記載の脂溶性成分高濃度含有抽出物を含む食品又は化粧品組成物とすることで、食品として摂取すれば動脈硬化や生活習慣病の予防につながり、脳血栓や脳梗塞などのリスクを軽減し、抗酸化作用、抗腫瘍作用、神経細胞保護作用、血糖値上昇抑制効果を奏する。化粧品組成物として使用すれば美肌効果、アンチエイジング効果を奏する。

＜脂溶性成分＞
以下、本発明に係る脂溶性成分について説明する。

本発明の抽出方法によって得られる脂溶性成分は、フコキサンチンやβ−カロテン等のカロテノイド、及びＥＰＡのような脂肪酸を含む。

フコキサンチンは、ＣＡＳ番号３３５１−８６−８であって、下式（化１）に示す構造を有している。

β−カロテンは、ＣＡＳ番号７２３５−４０−７であって、下式（化２）に示す構造を有している。

ＥＰＡは、ＣＡＳ番号１０４１７−９４−４であって、下式（化３）に示す構造を有している。

本発明において、フコキサンチン、ＥＰＡ、β−カロテンを含む抽出物は藻類等からの抽出物を用いることができる。

＜藻類＞
本発明で用いる藻類は、フコキサンチンを含有するものであれば特に制限されないが、フコキサンチンは褐藻やその他の不等毛藻に存在して茶色−オリーブ色を呈するとともに、葉緑体において光合成の補助色素として機能している。特に、褐藻類や珪藻類中のカロテノイドの大部分がフコキサンチンである。そこで、フコキサンチンを比較的多く含む褐藻綱に属する海藻および珪藻綱に属する珪藻類が好ましい。

その中でも、資源量及び市場流通性の観点から、ホンダワラ（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ ｆｕｌｖｅｌｌｕｍ）やアカモク（Ｓａｒｇａｓｓｕｍ ｈｏｒｎｅｒｉ）などのホンダワラ類、ヒジキ類、ワカメ類、コンブ類、モズク類がより好ましい。フコキサンチンの含有量が豊富であれば、微細藻類等であってもよい。
ホンダワラは褐藻綱ホンダワラ科ホンダワラ属の海藻の１種であり、本州、四国、九州、朝鮮半島等に分布している。１年生で、１−２ｍの長さになる。柔軟質で、葉は披針形をしており切れ込みがある。楕円や倒卵形の気泡を有することで浮力を得て流れ藻となる。古くから食用や肥料、飾り物として用いられていた。
アカモクは褐藻綱ホンダワラ科ホンダワラ属に属する海藻である。北海道（東部を除く）から日本全土の漸深帯（浅海）に分布し、朝鮮半島、中国及びベトナム北部にまで分布する。１年生で、秋から冬に生長し、４−７ｍの長さに達する。雌雄異株である（まれに雌雄同株の個体がある）。

これら藻類は、天然または養殖の何れであっても良く、一種で用いても二種以上の混合で用いても良い。また、前記海藻類は、海より採取したままの海藻類、冷凍された海藻類、塩蔵された海藻類、乾燥された海藻類、水洗処理、熱水処理、酸性水洗浄、アルカリ水洗浄、細断処理などの加工処理された状態の何れでも使用できる。

＜低極性溶媒＞
本発明において、低極性溶媒は特に限定されないが、中鎖脂肪酸、大豆油、菜種油、紅花油、コーン油、綿実油、ごま油、オリーブオイル、ヤシ油、パーム油、チアシードオイル、ひまわり油、米油及びグレープシードオイルが含まれる。使用目的に応じて上記より選択し用いることができる。
脂肪酸とは、長鎖炭化水素の１価のカルボン酸であり、一般的に、炭素数５−１２個のものを中鎖脂肪酸と呼ぶ。中鎖脂肪酸は、乳製品やパーム油、ココナッツ油などに多く含まれている。不飽和脂肪酸に比べて飽和脂肪酸は酸化臭が少なく、濁りも少ないことから、本発明において好適に利用できる。中鎖脂肪酸は、長鎖脂肪酸と比較して水溶性が高いため体内に吸収されやすく、酸化臭が少ないことから、本発明において好適に利用できる。

＜藻類からの脂溶性成分の抽出＞
本発明において、藻類から脂溶性成分を抽出する方法は、（１）藻類を粉砕する工程、（２）粉砕した藻類に低極性溶媒を添加してなる溶液を作製する工程、（３）該溶液を湿式微粒化処理して抽出物を得る工程、を含む。

本発明の藻類から脂溶性成分を抽出する方法は、粉砕した藻類に低極性溶媒を添加し、その後湿式微粒化処理している。藻類を粉砕した後、さらに微粒化処理することで藻類の細胞壁を破壊し、藻類の細胞中に含まれる成分のほとんどを低極性溶媒中に放出する。これにより、従来のように微粒化せずに単に溶媒中に藻類を加えるよりも多くの脂溶性成分を抽出することができる。特に、フコキサンチンやＥＰＡ、β−カロテンのような細胞中の含量が小さい（細胞中の含量が湿重量あたり０．２ｍｇ／ｇ以下）成分を抽出する方法として適している。
低極性溶媒中で微粒化処理する「湿式微粒化処理」を行うことで、溶媒を水等の極性溶媒を使用した場合のように極性溶媒から脂溶性成分を分離する必要がなく、脂溶性成分が低極性溶媒に溶解するため、抽出処理後の抽出物をそのまま食品や化粧品組成物に使用することができる。微粒化処理したことで抽出物中の脂溶性成分の濃度が高い（１．５ｍｇ／ｇ程度）ため、濃縮工程を経ることなく、そのまま食品や化粧品組成物に使用することができる。
また、さらに高濃度（例えば５−１０ｍｇ／ｇ）でフコキサンチン等の脂溶性成分を抽出したい場合、一度湿式微粒化処理をした結果得られた抽出物に、さらに藻類を加えて再び湿式微粒化処理をする、という工程を繰り返すことで、さらに高濃度（例えば５−１０ｍｇ／ｇ）で脂溶性成分を含む抽出物を得ることができる。

（藻類を粉砕する工程）
湿式微粒化処理の前処理として、藻類を粗く粉砕することが望ましい。予め粗く粉砕することで湿式微粒化処理にかける時間を短縮でき、湿式微粒化処理を行う装置にかける負担を軽減できる。
粉砕するための装置は特に限定されず、ミルを使用して粉砕しても、圧力を利用して粉砕しても良く、粉砕刃による衝撃粉砕であっても良い。粉砕機構としてボールミル、ロッドミル、ＳＡＧミル、自生粉砕ミル、高圧粉砕ロール、縦軸インパクタミル、ジェットミル等が挙げられる。
粉砕した後の藻類の粒径は１ｍｍ以下が望ましい。

（湿式微粒化処理）
低極性溶媒を入れた状態で微粒化処理することで、藻類の細胞中の脂溶性成分が低極性溶媒中に放出される。
湿式微粒化処理として湿式ジェットミル、超音波振動による分散、ビーズミル等の粉砕用媒体を使用した湿式の機械的接触式粉砕等が挙げられる。この発明においては湿式ジェットミルがより好ましく採用できる。

湿式ジェットミルはウォータージェット技術を用いた方法であり、原料溶液を高圧ノズルから高圧噴射することで粒子自体を壊さずコンタミの混入がない微粒化工法として開発されたものである。本発明においては低極性溶媒を添加した、前処理で予め粗く粉砕した藻類を高圧ノズルから高圧噴射する。
高圧ノズルからの圧力は特に限定されないが、１５から５００ＭＰａの間で調整し、必要に応じて高圧ノズルから溶液を所定の圧力で高圧噴射する作業を複数回繰り返しても良い。このように使用することで、藻類を所望のメジアン径の粒子とすることが容易にできる。

湿式微粒化処理は、上記の工程に加えて、微粒化処理した溶液にエアを供給する工程、及びエアを供給することによって形成された気泡中で放電させ、液中プラズマ処理し、脂溶性成分を含む抽出物を得る工程を含み得る。
つまり、高圧噴射処理装置の物理的作用による分散と液中プラズマ処理による改質作用が連続的に行われる構成となり、これらの相乗効果によって再凝集が防止されるとともに分散安定性が向上する。また、プラズマ中の荷電粒子の衝突による細菌の破壊や滅菌の効果もある。
液中プラズマ処理の前にエアを供給することが好ましい。エアを供給することにより、気泡中で放電されるため、プラズマ処理の効果が溶液中に均一に行き渡る。

湿式微粒化処理のための装置は、プラズマ処理した抽出物を還流させるポンプを備えていても良い。ポンプを備えていることにより、高圧噴射し、液中プラズマ処理する作業が複数回繰り返される。
繰り返す回数は１−３０回であることが好ましい。３０回を超えても、それ以上脂溶性成分の抽出効率は向上しないためである。

上記の微粒化処理によって形成された粒子の５％以上が粒径１μｍ−１００μｍの範囲内である。微粒化処理によってマイクロサイズの粒子を形成することで、藻類の細胞に含まれる脂溶性成分をより効率よく抽出することができる。
さらに、抽出物中には高濃度の脂溶性成分が含まれている。例えば、上記方法であればフコキサンチンの濃度が１．５ｍｇ／ｇ以上となる。

上記方法によって得られた脂溶性成分を有効成分として含有する本発明の脂溶性成分高濃度含有抽出物は、各種用途に使用することができる。

本発明の脂溶性成分高濃度含有抽出物は、食品添加剤として、例えば清涼飲料水、乳製品（加工乳、ヨーグルト）、菓子類（ゼリー、チョコレート、ビスケット、ガム、錠菓）又はサプリメント等の各種飲食品に配合することもできる。

食品添加剤として使用する場合、その添加量については、特に限定されず、食品の種類に応じて適宜決定すればよい。一例としては、上記した抽出物の乾燥重量として、含有量が１〜５０ｍｇ／ｇ程度の範囲となるように添加すればよい。

上記食品用途としては、例えば、パン類、菓子類、麺類、米飯類、餅類、パスタ類、ドレッシング類、ムース、ゼリーおよびスープなどを挙げることができる。

食品の形態としては、特に限定はないが、例えばバータイプ食品、ブロックタイプ食品あるいはチアーバックタイプ食品などの場合、経口摂取が容易となる。また、飲料用途としては、例えばジュース類、乳飲料、アルコール飲料、茶飲料などを挙げることができる。また、特定保健用食品や栄養補助剤、栄養剤、いわゆる健康食品としての利用も挙げられる。

化粧品用途としては、肌のくすみ防止、肌荒れ防止、しみ防止、しわの改善、皮膚の若返りを目的として、乳液、クリーム、化粧水、美容液、パック、洗浄料、ファンデーション、頬紅、口紅等のメーキャップ化粧料、養毛料、ヘアトニック、シャンプー、リンス等の頭皮化粧料、分散液、軟膏、液剤、エアゾール、貼付剤での用途が挙げられる。

以下、本発明の実施例を説明することにより、本発明の効果をより明確なものとする。但し、本発明は以下の実施例には限定されない。

脂溶性成分高濃度含有抽出物の製造
（実施例１）
原料に用いる珪藻類（Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ）はｆ／２培地を用いて培養した。培養は、２２℃の恒温室内で５００Ｌの水槽（ポリカーボネート製）を用い１００μｍｏｌ ｍ^−２ Ｓ^−１（明期２４時間）にて１０日間培養した。
得られた培養液は遠心分離（３，０００ｒｐｍ、１０分間）に供し、上清を除去し沈殿物として珪藻を回収した。回収した珪藻は中鎖脂肪酸（パナセート８１０、日油株式会社製）と重量比１：１となるように混ぜ合わせた。
その後この混合物を、高圧ノズルの圧力を２５０ＭＰａとした湿式ジェットミルに４回供し、抽出物を得た。
得られた抽出物を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間等）して、脂溶性成分を含む上清を脂肪酸が溶解する抽出液として回収した。
抽出液約１ｇをメタノールに溶解後、超音波装置にて５分間処理し、その後１００ｍＬに定容した。これを実施例１とした。

（比較例１）
原料に用いる珪藻類（Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ）はｆ／２培地を用いて培養した。培養は、２２℃の恒温室内で５００Ｌの水槽（ポリカーボネート製）を用い１００μｍｏｌ ｍ^−２ Ｓ^−１（明期２４時間）にて１０日間培養した。
得られた培養液は遠心分離（３，０００ｒｐｍ、１０分間）に供し、上清を除去し沈殿物として珪藻を回収した。
回収したサンプル１３．８０ｇを同重量のエタノールで１０分間超音波処理した。得られた混合物を遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間）して、脂溶性成分を含む上清を脂肪酸が溶解する抽出液として回収した。抽出液約１ｇをメタノールに溶解後、超音波装置にて５分間処理し、その後１００ｍＬに定容した。これを比較例１とした。

２．抽出効率の比較
実施例１及び比較例１のフコキサンチンの抽出効率を測定するために、ＨＰＬＣカラムを用いた液体クロマトグラフィー分析を行った。分析の条件は以下の通りである。

・装置 ＬＣ−２０ＡＴ、及び紫外可視吸光光度計 ＳＰＤ−２０Ａ
（株式会社島津製作所製）
・カラム Ｔｏｓｏｈ ＴＳＫ−Ｇｅｌ ＯＤＳ−８０ＴＭ
Φ４．６ｍｍ×２５０ｍｍ（東ソー株式会社製）
・移動相 メタノール：水＝９０：１０
・流量 １．０ｍｌ／分
・カラム温度 ４０℃
・ＳＰＤ−２０Ａ解析波長 ４５０ｎｍ

その後、同じ条件及び装置にてフコキサンチンの標準品、実施例１及び比較例１を分析し、フコキサンチンの濃度を測定した。結果を以下の表１に示す。

上記の表１記載の結果は、本発明の抽出方法で得られた実施例１におけるフコキサンチン濃度、従来の方法（エタノール中における超音波処理による抽出、比較例１）と比較して高いことを示した。
つまり、本発明の抽出方法は、従来のエタノールによる抽出よりもフコキサンチンの抽出効率が高いことがわかった。

３．湿式微粒化処理回数と抽出効率の関係
（比較例２、及び実施例２−４）
原料に用いる珪藻類（Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ）はｆ／２培地を用いて培養した。培養は、２２℃の恒温室内で５００Ｌの水槽（ポリカーボネート製）を用い１００μｍｏｌ ｍ^−２ Ｓ^−１（明期２４時間）にて１０日間培養した。
得られた培養液は遠心分離（３，０００ｒｐｍ、１０分間等）に供し、上清を除去し沈殿物として珪藻を回収した。
回収した珪藻２，４００ｇを４００ｇの中鎖脂肪酸（パナセート８１０、日油株式会社製）と混ぜ合わせ、その後０回、１回、３回、４回湿式微粒化処理した。これらをそれぞれ比較例２、実施例２、３、４とした。この時のフコキサンチンの濃度を以下の表２に示す。

上記抽出方法における湿式微粒化処理を珪藻類追加で複数回繰り返すことで、脂溶性成分の抽出効率が上がることを示した。

簡易加速試験（フコキサンチンの保存安定性試験）
本発明を冷凍（−２０℃）、冷蔵（４℃）、常温（２５℃）暗所下で保管し、１か月後のフコキサンチン濃度を測定した。

（実施例５）
原料に用いる珪藻類（Ｐｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍ ｔｒｉｃｏｒｎｕｔｕｍ）はｆ／２培地を用いて培養した。培養は、２２℃の恒温室内で５００Ｌの水槽（ポリカーボネート製）を用い１００μｍｏｌ ｍ^−２ Ｓ^−１（明期２４時間）にて１０日間培養した。
得られた培養液は遠心分離（３，０００ｒｐｍ、１０分間等）に供し、上清を除去し沈殿物として珪藻を回収した。
回収した珪藻約１ｋｇに同重量の中鎖脂肪酸を添加し、高圧ノズルの圧力を２５０ＭＰａとした湿式ジェットミルによる処理を４回繰り返した。これを実施例５とした。

実施例５の加速試験開始時のフコキサンチン濃度は２．８６ｍｇ／ｇであった。これをそれぞれ冷凍（−２０℃）、冷蔵（４℃）、常温（２５℃）暗所下で保管した。
１か月保管後、実施例５のフコキサンチン濃度は冷凍保管で２．３５ｍｇ／ｇ、冷蔵保管で２．２５ｍｇ／ｇ、常温保管で２．３０ｍｇ／ｇであった。同じく２か月保管後の実施例５のフコキサンチン濃度は冷凍保管で２．４２ｍｇ／ｇ、冷蔵保管で２．３４ｍｇ／ｇ、常温保管で２．３０ｍｇ／ｇであった。
つまり保存率は２か月間経過しても冷凍で８２％以上、冷蔵で７８％以上、常温で８０％であった。
いずれの保存方法でも、８割程度のフコキサンチンが保存されることがわかった。

この保存率の高さは、湿式微粒化処理による物理的作用に起因すると考えられる。
つまり、本発明の抽出方法でフコキサンチンを抽出すると、フコキサンチンの保存率が高い脂溶性成分高濃度含有抽出物を得ることができる。

本発明は、化粧品として使用すれば美肌効果やアンチエイジング効果が期待でき、食品として摂取すれば動脈硬化や生活習慣病の予防、抗腫瘍作用、神経細胞保護作用が期待でき、乳液や化粧水などの化粧品、清涼飲料水、乳製品、菓子類又はサプリメント等の各種飲食品の添加剤に好適に使用することができる。

Claims (9)

1. 藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法であって、
   （１）藻類を粉砕する工程、
   （２）粉砕した藻類に低極性溶媒を添加してなる溶液を作製する工程、及び
   （３）該溶液を湿式微粒化処理して抽出物を得る工程
   を含むことを特徴とする、藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法。
2. 湿式微粒化処理が、
   （ａ）該溶液を高圧ノズルから高圧噴射し微粒化処理する工程、
   （ｂ）微粒化処理した溶液にエアを供給する工程、
   （ｃ）エアを供給することによって形成された気泡中で放電させ、液中プラズマ処理し、脂溶性成分を含む抽出物を得る工程、
   を含むことを特徴とする、請求項１記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法。
3. 脂溶性成分がフコキサンチン、ＥＰＡ及びβ−カロテンからなる群から選択される１種以上を含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法。
4. 抽出物中のフコキサンチンの濃度が１．５ｍｇ／ｇ以上であることを特徴とする、請求項３に記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法。
5. 低極性溶媒が中鎖脂肪酸、大豆油、菜種油、紅花油、コーン油、綿実油、ごま油、オリーブオイル、ヤシ油、パーム油、チアシードオイル、ひまわり油、米油及びグレープシードオイルからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１乃至４のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法。
6. 湿式微粒化処理によって形成された粒子の５％以上が粒径１μｍ−１００μｍの範囲内であることを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法。
7. 請求項１乃至６のいずれか１つに記載の藻類から脂溶性成分を高濃度で抽出する方法によって得られた抽出物を含む食品又は化粧品組成物。
8. 藻類由来のフコキサンチンの濃度が１．５ｍｇ／ｇ以上であることを特徴とする、脂溶性成分高濃度含有抽出物。
9. 請求項８記載の脂溶性成分高濃度含有抽出物を含む食品又は化粧品組成物。