JPH05271147A - Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法 - Google Patents
Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法Info
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- JPH05271147A JPH05271147A JP6825792A JP6825792A JPH05271147A JP H05271147 A JPH05271147 A JP H05271147A JP 6825792 A JP6825792 A JP 6825792A JP 6825792 A JP6825792 A JP 6825792A JP H05271147 A JPH05271147 A JP H05271147A
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- Japan
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- malic acid
- acid
- exchange resin
- strongly acidic
- treated
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 Ｄ−リンゴ酸及びＬ−アスパラギン酸の混合
水溶液を、強酸性陽イオン交換樹脂で処理してＤ−リン
ゴ酸を採取する、Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法。 【効果】 簡単に、高純度・高収量でＤ−リンゴ酸を採
取することができる。
水溶液を、強酸性陽イオン交換樹脂で処理してＤ−リン
ゴ酸を採取する、Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法。 【効果】 簡単に、高純度・高収量でＤ−リンゴ酸を採
取することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、Ｄ−リンゴ酸の高効率
な分離・回収方法に関する。本発明によれば、水溶液中
のＤ−リンゴ酸を簡単に、高純度、高収量で採取するこ
とが可能である。
な分離・回収方法に関する。本発明によれば、水溶液中
のＤ−リンゴ酸を簡単に、高純度、高収量で採取するこ
とが可能である。
【０００２】Ｄ−リンゴ酸は、医薬、農薬等の中間体原
料として、産業上重要な化合物として期待されている。
料として、産業上重要な化合物として期待されている。
【０００３】
【従来の技術】Ｄ−リンゴ酸の工業的製造法は、これま
でほとんど知られていない。本発明者らは、先に酵素法
によるＤ−リンゴ酸の製造法を提案している（特願平３
−１３６３３１号）。
でほとんど知られていない。本発明者らは、先に酵素法
によるＤ−リンゴ酸の製造法を提案している（特願平３
−１３６３３１号）。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、さらに
高効率にＤ−リンゴ酸を採取するため、Ｄ−リンゴ酸の
分離・回収方法について鋭意検討を行い、Ｄ−リンゴ酸
の高効率な分離・回収方法を見い出し、本発明を完成す
るに至った。
高効率にＤ−リンゴ酸を採取するため、Ｄ−リンゴ酸の
分離・回収方法について鋭意検討を行い、Ｄ−リンゴ酸
の高効率な分離・回収方法を見い出し、本発明を完成す
るに至った。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明は、Ｄ−リンゴ酸
及びＬ−アスパラギン酸の混合水溶液を、強酸性陽イオ
ン交換樹脂で処理してＤ−リンゴ酸を採取することによ
り、高純度、高収量でＤ−リンゴ酸を分離・回収する方
法を提供するものである。
及びＬ−アスパラギン酸の混合水溶液を、強酸性陽イオ
ン交換樹脂で処理してＤ−リンゴ酸を採取することによ
り、高純度、高収量でＤ−リンゴ酸を分離・回収する方
法を提供するものである。
【０００６】本発明に用いるＤ−リンゴ酸及びＬ−アス
パラギン酸を含有する水溶液の調製方法は特に限定され
るものではないが、通常、安価なＤＬ−リンゴ酸を原料
とし、フマラーゼ活性及びアスパルターゼ活性を有する
微生物菌体又はその処理物を水溶液中で作用させる。フ
マラーゼの作用によりＬ−リンゴ酸はフマル酸に変換
し、さらにアスパルターゼによりＬ−アスパラギン酸へ
と変換する。このようにしてＬ−アスパラギン酸と未反
応のＤ−リンゴ酸の混合水溶液が調製される。
パラギン酸を含有する水溶液の調製方法は特に限定され
るものではないが、通常、安価なＤＬ−リンゴ酸を原料
とし、フマラーゼ活性及びアスパルターゼ活性を有する
微生物菌体又はその処理物を水溶液中で作用させる。フ
マラーゼの作用によりＬ−リンゴ酸はフマル酸に変換
し、さらにアスパルターゼによりＬ−アスパラギン酸へ
と変換する。このようにしてＬ−アスパラギン酸と未反
応のＤ−リンゴ酸の混合水溶液が調製される。
【０００７】Ｄ−リンゴ酸及びＬ−アスパラギン酸の混
合水溶液は、強酸性陽イオン交換樹脂に通液するが、強
酸性陽イオン交換樹脂としては、特に制限されるもので
はなく、例えば「ダイヤイオンＳＫ−１Ｂ」Ｈ型（三菱
化成社製）、「ダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）５０ＷＸ」
(Dow Chemical 製）、「アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌ
ｉｔｅ）ＩＲ１２０，ＩＲ１１２，ＩＲ１１８」(Rohm
and Hass製）、「ＡＧＭＰ−５０」(Bio-Rad製）、「ダ
ウオライト（Ｄｕｏｌｉｔｅ）ＥＳ−２６」(Diammond-
Shamrock Chemical 製）、「イオナック（Ｉｏｎａｃ）
ＣＦＺ」(Ionac Chemical 製）等が好適に用いられる。
通液条件としては、空間速度（ml／ml樹脂・hr）０．５
〜５、好ましくは１〜３である。処理液の温度は特に制
限されるものではないが、通常、室温〜５０℃が採用さ
れる。
合水溶液は、強酸性陽イオン交換樹脂に通液するが、強
酸性陽イオン交換樹脂としては、特に制限されるもので
はなく、例えば「ダイヤイオンＳＫ−１Ｂ」Ｈ型（三菱
化成社製）、「ダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）５０ＷＸ」
(Dow Chemical 製）、「アンバーライト（Ａｍｂｅｒｌ
ｉｔｅ）ＩＲ１２０，ＩＲ１１２，ＩＲ１１８」(Rohm
and Hass製）、「ＡＧＭＰ−５０」(Bio-Rad製）、「ダ
ウオライト（Ｄｕｏｌｉｔｅ）ＥＳ−２６」(Diammond-
Shamrock Chemical 製）、「イオナック（Ｉｏｎａｃ）
ＣＦＺ」(Ionac Chemical 製）等が好適に用いられる。
通液条件としては、空間速度（ml／ml樹脂・hr）０．５
〜５、好ましくは１〜３である。処理液の温度は特に制
限されるものではないが、通常、室温〜５０℃が採用さ
れる。
【０００８】本発明の方法によれば、Ｄ−リンゴ酸は理
論値の８０％以上の収率で回収できる。
論値の８０％以上の収率で回収できる。
【０００９】
【実施例】以下、参考例、実施例により本発明を詳細に
説明する。 参考例１ フマラーゼ及びアスパルターゼ含有菌体の調製 培地（尿素 ０．４％、硫酸アンモニウム １．４％、
ＫＨ2 ＰＯ4 ０．０５％、Ｋ2 ＨＰＯ4 ０．０５
％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．０５％、ＣａＣｌ2 ・
２Ｈ2 Ｏ ２ppm 、ＦｅＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ２ppm 、Ｍ
ｎＳＯ4 ・４〜６Ｈ2 Ｏ ２ppm 、ＺｎＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏ ２ppm 、ＮａＣｌ ２ppm 、ビオチン２００μｇ／
リットル、チアミン・ＨＣｌ １００μｇ／リットル、
カザミノ酸 ０．１％および酵母エキス ０．１％）１
００mlを５００ml容三角フラスコに分注し、滅菌（滅菌
後ｐＨ７．０）した後、ブレビバクテリウム・フラバム
（Brevibacterium flavum)ＭＪ−２３３−ＡＢ−４１
（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４９８号）を植菌し、無菌的に５
０（Ｗ／Ｖ）％グルコースを２ml加え、３０℃にて２日
間振盪培養した。
説明する。 参考例１ フマラーゼ及びアスパルターゼ含有菌体の調製 培地（尿素 ０．４％、硫酸アンモニウム １．４％、
ＫＨ2 ＰＯ4 ０．０５％、Ｋ2 ＨＰＯ4 ０．０５
％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．０５％、ＣａＣｌ2 ・
２Ｈ2 Ｏ ２ppm 、ＦｅＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ２ppm 、Ｍ
ｎＳＯ4 ・４〜６Ｈ2 Ｏ ２ppm 、ＺｎＳＯ4 ・７Ｈ2
Ｏ ２ppm 、ＮａＣｌ ２ppm 、ビオチン２００μｇ／
リットル、チアミン・ＨＣｌ １００μｇ／リットル、
カザミノ酸 ０．１％および酵母エキス ０．１％）１
００mlを５００ml容三角フラスコに分注し、滅菌（滅菌
後ｐＨ７．０）した後、ブレビバクテリウム・フラバム
（Brevibacterium flavum)ＭＪ−２３３−ＡＢ−４１
（ＦＥＲＭ ＢＰ−１４９８号）を植菌し、無菌的に５
０（Ｗ／Ｖ）％グルコースを２ml加え、３０℃にて２日
間振盪培養した。
【００１０】次に、培地（硫酸アンモニウム ２．３
％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．０５％、Ｋ2ＨＰＯ4 ０．０
５％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．０５％、ＦｅＳＯ4
・７Ｈ2 Ｏ ２０ppm 、ＭｎＳＯ4 ・４〜６Ｈ2 Ｏ ２
０ppm 、ビオチン ２００μｇ／リットル、チアミン・
ＨＣｌ １００μｇ／リットル、カザミノ酸 ０．３％
および酵母エキス ０．３％）１リットルを２リットル
容通気撹拌槽に仕込み、滅菌（１２０℃、２０分間）
後、無菌的に５０（Ｗ／Ｖ）％グルコース２０mlと前記
培養物の２０mlを添加して、回転数１０００rpm 、通気
量１vvm 、温度３３℃、ｐＨ７．６にて１５時間培養し
た。
％、ＫＨ2 ＰＯ4 ０．０５％、Ｋ2ＨＰＯ4 ０．０
５％、ＭｇＳＯ4 ・７Ｈ2 Ｏ ０．０５％、ＦｅＳＯ4
・７Ｈ2 Ｏ ２０ppm 、ＭｎＳＯ4 ・４〜６Ｈ2 Ｏ ２
０ppm 、ビオチン ２００μｇ／リットル、チアミン・
ＨＣｌ １００μｇ／リットル、カザミノ酸 ０．３％
および酵母エキス ０．３％）１リットルを２リットル
容通気撹拌槽に仕込み、滅菌（１２０℃、２０分間）
後、無菌的に５０（Ｗ／Ｖ）％グルコース２０mlと前記
培養物の２０mlを添加して、回転数１０００rpm 、通気
量１vvm 、温度３３℃、ｐＨ７．６にて１５時間培養し
た。
【００１１】なお、グルコースは、培養中の培地の濃度
が１（Ｗ／Ｖ）％をこえないように、５０（Ｗ／Ｖ）％
グルコースを約１〜２時間ごと断続的に添加した。
が１（Ｗ／Ｖ）％をこえないように、５０（Ｗ／Ｖ）％
グルコースを約１〜２時間ごと断続的に添加した。
【００１２】培養終了後、培養物１リットルから遠心分
離により集菌した。
離により集菌した。
【００１３】参考例２ Ｄ−リンゴ酸含有反応液の調整 上記参考例１で得た集菌体を反応液［ＤＬ−リンゴ酸
５０ｇ、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート
０．８ｇ／蒸留水１リットル（２５％アンモニア水で
ｐＨを８．０に調整）］１リットルに懸濁し、４５℃に
て２４時間振盪反応させた。反応終了後、遠心分離（８
０００rpm 、４０分間、２℃）にて上澄液と菌体を分離
した。
５０ｇ、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート
０．８ｇ／蒸留水１リットル（２５％アンモニア水で
ｐＨを８．０に調整）］１リットルに懸濁し、４５℃に
て２４時間振盪反応させた。反応終了後、遠心分離（８
０００rpm 、４０分間、２℃）にて上澄液と菌体を分離
した。
【００１４】実施例 Ｄ−リンゴ酸量の測定は、高速液体クロマトグラフィー
（島津ＬＣ−５Ａ）を用いて行った。また、Ｄ−リンゴ
酸の光学純度は比旋光度計により確認した。
（島津ＬＣ−５Ａ）を用いて行った。また、Ｄ−リンゴ
酸の光学純度は比旋光度計により確認した。
【００１５】参考例２により調製した反応液１００ml
（Ｄ−リンゴ酸２５mg／ｍｌ、Ｌ−アスパラギン酸５０
mg／ｍｌ含有）を強酸性陽イオン交換樹脂（「ダイヤイ
オンＳＫ−１Ｂ」Ｈ型）１００mlを充填したカラムに、
空間速度２．０で通液した後、該処理液を真空エバポレ
ーターにより濃縮・乾固した。回収したＤ−リンゴ酸の
結晶量は２３００mgであり、反応液からの収率は９０％
以上であった。さらに該結晶の比旋光度を測定したとこ
ろ、［α］D 20 ＝＋２．２０（ｃ＝８，Ｈ2 Ｏ）であっ
た。
（Ｄ−リンゴ酸２５mg／ｍｌ、Ｌ−アスパラギン酸５０
mg／ｍｌ含有）を強酸性陽イオン交換樹脂（「ダイヤイ
オンＳＫ−１Ｂ」Ｈ型）１００mlを充填したカラムに、
空間速度２．０で通液した後、該処理液を真空エバポレ
ーターにより濃縮・乾固した。回収したＤ−リンゴ酸の
結晶量は２３００mgであり、反応液からの収率は９０％
以上であった。さらに該結晶の比旋光度を測定したとこ
ろ、［α］D 20 ＝＋２．２０（ｃ＝８，Ｈ2 Ｏ）であっ
た。
【００１６】
【発明の効果】本発明によれば、Ｄ−リンゴ酸及びＬ−
アスパラギン酸の混合水溶液から、簡単に、高純度、高
収量でＤ−リンゴ酸を採取することができる。
アスパラギン酸の混合水溶液から、簡単に、高純度、高
収量でＤ−リンゴ酸を採取することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 湯川 英明 茨城県稲敷郡阿見町中央８丁目３番１号 三菱油化株式会社筑波総合研究所内
Claims (1)
- 【請求項１】 Ｄ−リンゴ酸及びＬ−アスパラギン酸の
混合水溶液を、強酸性陽イオン交換樹脂で処理してＤ−
リンゴ酸を採取することを特徴とするＤ−リンゴ酸の分
離・回収方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4068257A JP3043511B2 (ja) | 1992-03-26 | 1992-03-26 | Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4068257A JP3043511B2 (ja) | 1992-03-26 | 1992-03-26 | Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05271147A true JPH05271147A (ja) | 1993-10-19 |
| JP3043511B2 JP3043511B2 (ja) | 2000-05-22 |
Family
ID=13368529
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4068257A Expired - Lifetime JP3043511B2 (ja) | 1992-03-26 | 1992-03-26 | Ｄ−リンゴ酸の分離・回収方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3043511B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998003468A1 (en) * | 1996-07-18 | 1998-01-29 | Amylum N.V. | A process for the production of crystalline aspartic acid |
| CN104447273A (zh) * | 2014-10-27 | 2015-03-25 | 天津华津制药有限公司 | 一种佐匹克隆拆分剂d-(+)-苹果酸的回收方法 |
-
1992
- 1992-03-26 JP JP4068257A patent/JP3043511B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998003468A1 (en) * | 1996-07-18 | 1998-01-29 | Amylum N.V. | A process for the production of crystalline aspartic acid |
| CN104447273A (zh) * | 2014-10-27 | 2015-03-25 | 天津华津制药有限公司 | 一种佐匹克隆拆分剂d-(+)-苹果酸的回收方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3043511B2 (ja) | 2000-05-22 |
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