JPH05211888A - マウスインターロイキン−６レセプターに対する抗体及びその使用 - Google Patents
マウスインターロイキン−６レセプターに対する抗体及びその使用Info
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- JPH05211888A JPH05211888A JP3008454A JP845491A JPH05211888A JP H05211888 A JPH05211888 A JP H05211888A JP 3008454 A JP3008454 A JP 3008454A JP 845491 A JP845491 A JP 845491A JP H05211888 A JPH05211888 A JP H05211888A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】本発明は、マウスインターロイキン−６に対す
るモノクローナル抗体及びポリクローナル抗体に関す
る。このモノクローナル抗体には、マウスインターロイ
キンとインターロイキンレセプターとの結合を阻害する
ものと阻害しないものとがある。 【効果】上記抗体は、マウスインターロイキン−６レセ
プターの諸性質の解明のために有用であり、さらに、イ
ンターロイキン−６の異常産生が病因因子であると考え
られる種々の自己免疫疾患の治療等の開発のために有用
である。さらには、マウスインターロイキン−６レセプ
ターの免疫測定のために有用である。
るモノクローナル抗体及びポリクローナル抗体に関す
る。このモノクローナル抗体には、マウスインターロイ
キンとインターロイキンレセプターとの結合を阻害する
ものと阻害しないものとがある。 【効果】上記抗体は、マウスインターロイキン−６レセ
プターの諸性質の解明のために有用であり、さらに、イ
ンターロイキン−６の異常産生が病因因子であると考え
られる種々の自己免疫疾患の治療等の開発のために有用
である。さらには、マウスインターロイキン−６レセプ
ターの免疫測定のために有用である。
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はマウスIL−６レセプター
と特異的に結合する抗体、並びにその製造方法及びその
使用に関するものである。
と特異的に結合する抗体、並びにその製造方法及びその
使用に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】インターロイキン−６(BSF２／以下IL−
６と略す）は、標的細胞上のIL−６レセプターと結合す
ることにより、種々の重要な生理活性を誘導し、広く細
胞の増殖分化に関与しているタンパク質である。さら
に、IL−６の異常産生が種々の自己免疫疾患の病因因子
である可能性が報告されている（岸本、平野、Ann.Rev.
Immunol., 6, p485,1988年参照）。IL−６の阻害剤とし
て、IL−６作用を阻害するヒトIL−６レセプターに対す
る抗体が期待される。抗ヒトIL−６レセプター抗体を開
発する過程で、IL−６作用を阻害する抗マウスIL−６レ
セプター抗体を、マウスIL−６過剰産生により自己免疫
疾患の症状を呈するモデルマウスに投与して、その効果
を調べることが必須となる。
６と略す）は、標的細胞上のIL−６レセプターと結合す
ることにより、種々の重要な生理活性を誘導し、広く細
胞の増殖分化に関与しているタンパク質である。さら
に、IL−６の異常産生が種々の自己免疫疾患の病因因子
である可能性が報告されている（岸本、平野、Ann.Rev.
Immunol., 6, p485,1988年参照）。IL−６の阻害剤とし
て、IL−６作用を阻害するヒトIL−６レセプターに対す
る抗体が期待される。抗ヒトIL−６レセプター抗体を開
発する過程で、IL−６作用を阻害する抗マウスIL−６レ
セプター抗体を、マウスIL−６過剰産生により自己免疫
疾患の症状を呈するモデルマウスに投与して、その効果
を調べることが必須となる。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従って、本発明はマウ
スIL−６レセプターに対する種々のタイプの抗体を提供
しようとするものである。
スIL−６レセプターに対する種々のタイプの抗体を提供
しようとするものである。
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
め、本発明者は、マウスIL−６レセプターと特異的に結
合し得る抗マウスIL−６レセプター抗体；前記の性質を
有するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ；
マウスIL−６レセプター抗原により哺乳類を感作し、該
哺乳類から免疫細胞をミエローマ細胞株と融合せしめ、
そして該融合株からマウスIL−６レセプターを認識する
株をクローニングすることを特徴とするハイブリドーマ
の製造方法；前記のハイブリドーマを培養し、該培養物
からマウスIL−６レセプターを認識するモノクローナル
抗体を採取することを特徴とする抗−マウスIL−６レセ
プター抗体の製造方法；マウスIL−６レセプター抗原に
より哺乳類動物を免疫感作し、該動物からマウスIL−６
レセプターを認識するポリクローナル抗体を採取するこ
とを特徴とする抗−マウスIL−６レセプターポリクロー
ナル抗体の製造方法；並びに抗−マウスIL−６レセプタ
ーモノクローナル抗体２種から成るマウスIL−６レセプ
ター測定方法並びに測定キットを提供する。
め、本発明者は、マウスIL−６レセプターと特異的に結
合し得る抗マウスIL−６レセプター抗体；前記の性質を
有するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ；
マウスIL−６レセプター抗原により哺乳類を感作し、該
哺乳類から免疫細胞をミエローマ細胞株と融合せしめ、
そして該融合株からマウスIL−６レセプターを認識する
株をクローニングすることを特徴とするハイブリドーマ
の製造方法；前記のハイブリドーマを培養し、該培養物
からマウスIL−６レセプターを認識するモノクローナル
抗体を採取することを特徴とする抗−マウスIL−６レセ
プター抗体の製造方法；マウスIL−６レセプター抗原に
より哺乳類動物を免疫感作し、該動物からマウスIL−６
レセプターを認識するポリクローナル抗体を採取するこ
とを特徴とする抗−マウスIL−６レセプターポリクロー
ナル抗体の製造方法；並びに抗−マウスIL−６レセプタ
ーモノクローナル抗体２種から成るマウスIL−６レセプ
ター測定方法並びに測定キットを提供する。
【０００４】
1. マウスIL−６レセプターに対する抗体 本発明の抗体は、マウスIL−６レセプターを特異的に認
識するものであり、これにはモノクローナル抗体及びポ
リクローナル抗体が含まれる。本発明の抗体が認識する
マウスIL−６レセプターとは、遺伝子工学的に生産され
たマウス可溶性IL−６レセプター又は細胞膜上の天然型
マウスIL−６レセプターのいずれかあるいは両方を意味
する。モノクローナル抗体には、マウスIL−６あるいは
ヒトIL−６とマウスIL−６レセプターとの結合を競合的
に阻害するものと、これを競合的に阻害しないものとが
含まれる。前者の例としては、本発明のハイブリドーマ
RS13により産生されるRS13モノクローナル抗体が挙げら
れ、後者の例としてはハイブリドーマRS15により産生さ
れるRS15モノクローナル抗体が挙げられる。
識するものであり、これにはモノクローナル抗体及びポ
リクローナル抗体が含まれる。本発明の抗体が認識する
マウスIL−６レセプターとは、遺伝子工学的に生産され
たマウス可溶性IL−６レセプター又は細胞膜上の天然型
マウスIL−６レセプターのいずれかあるいは両方を意味
する。モノクローナル抗体には、マウスIL−６あるいは
ヒトIL−６とマウスIL−６レセプターとの結合を競合的
に阻害するものと、これを競合的に阻害しないものとが
含まれる。前者の例としては、本発明のハイブリドーマ
RS13により産生されるRS13モノクローナル抗体が挙げら
れ、後者の例としてはハイブリドーマRS15により産生さ
れるRS15モノクローナル抗体が挙げられる。
【０００５】本発明の抗体の製造のために用いられる免
疫原としては、遺伝子工学的に生産されたマウス可溶性
IL−６レセプターを例示できるが、マウス細胞から精製
された天然型のマウスIL−６レセプターやマウスIL−６
レセプターを発現している細胞でもよい。ただし天然型
のマウスIL−６レセプターやマウスIL−６レセプターを
発現している細胞では、通常マウスIL−６レセプターの
発現量が少ないために効率的な免疫原とは言えない。し
かしながら、一旦マウスIL−６レセプターに対する抗体
を手にすれば、これを用いて効率的に天然型のマウスIL
−６レセプターを調製し、これを用いてさらに多様な抗
体を製造することができる。
疫原としては、遺伝子工学的に生産されたマウス可溶性
IL−６レセプターを例示できるが、マウス細胞から精製
された天然型のマウスIL−６レセプターやマウスIL−６
レセプターを発現している細胞でもよい。ただし天然型
のマウスIL−６レセプターやマウスIL−６レセプターを
発現している細胞では、通常マウスIL−６レセプターの
発現量が少ないために効率的な免疫原とは言えない。し
かしながら、一旦マウスIL−６レセプターに対する抗体
を手にすれば、これを用いて効率的に天然型のマウスIL
−６レセプターを調製し、これを用いてさらに多様な抗
体を製造することができる。
【０００６】ハイブリドーマの作製も常法（免疫実験操
作法、p447、日本免疫学会編、1975年参照）等に従って
行うことができる。例えば、ラット等の哺乳類を免疫
し、この動物から脾臓細胞を得、これを樹立されたミエ
ローマ細胞と融合せしめる。ミエローマ細胞としては、
ラットミエローマ細胞株YB２／０（大日本製薬）等が例
示できる。モノクローナル抗体を製造するには、前記の
ようにしてクローニングされたハイブリドーマを培養
し、培養上清からモノクローナル抗体を採取する。ある
いは、前記ハイブリドーマを動物の腹くう内に移植し、
腹水を得、これからモノクローナル抗体を単離すること
もできる。
作法、p447、日本免疫学会編、1975年参照）等に従って
行うことができる。例えば、ラット等の哺乳類を免疫
し、この動物から脾臓細胞を得、これを樹立されたミエ
ローマ細胞と融合せしめる。ミエローマ細胞としては、
ラットミエローマ細胞株YB２／０（大日本製薬）等が例
示できる。モノクローナル抗体を製造するには、前記の
ようにしてクローニングされたハイブリドーマを培養
し、培養上清からモノクローナル抗体を採取する。ある
いは、前記ハイブリドーマを動物の腹くう内に移植し、
腹水を得、これからモノクローナル抗体を単離すること
もできる。
【０００７】ハイブリドーマ細胞上清中の抗体又は腹水
中の抗体は、常法に従って、例えば硫酸アンモニウム塩
析により濃縮することができ、さらにはアフィニティー
クロマトグラフィー、例えば可溶性マウスIL−６レセプ
ターを固定化した担体を用いるアフィニティークロマト
グラフィーにより精製することができる。ポリクローナ
ル抗体の製造もまた常法に従って、例えば免疫原として
上記のマウス可溶性IL−６レセプターをラット、ウサ
ギ、モルモット、ヤギ等に免疫感作することによって行
うことができる。
中の抗体は、常法に従って、例えば硫酸アンモニウム塩
析により濃縮することができ、さらにはアフィニティー
クロマトグラフィー、例えば可溶性マウスIL−６レセプ
ターを固定化した担体を用いるアフィニティークロマト
グラフィーにより精製することができる。ポリクローナ
ル抗体の製造もまた常法に従って、例えば免疫原として
上記のマウス可溶性IL−６レセプターをラット、ウサ
ギ、モルモット、ヤギ等に免疫感作することによって行
うことができる。
【０００８】2. マウスIL−６レセプターの化学的測定
法 マウスIL−６レセプターの化学的測定法とは、マウス血
清、尿等に含まれるマウスIL−６レセプターの生理的濃
度、マウス細胞を培養したときの培養上清中のマウスIL
−６レセプター濃度を正確かつ迅速に測定することを目
的としている。本発明の測定方法は、固体支持体に結合
されたマウスIL−６レセプターに対する抗体に分析検体
中のマウスIL−６レセプターを結合せしめ、この結合し
たマウスIL−６レセプターを常法により測定する。
法 マウスIL−６レセプターの化学的測定法とは、マウス血
清、尿等に含まれるマウスIL−６レセプターの生理的濃
度、マウス細胞を培養したときの培養上清中のマウスIL
−６レセプター濃度を正確かつ迅速に測定することを目
的としている。本発明の測定方法は、固体支持体に結合
されたマウスIL−６レセプターに対する抗体に分析検体
中のマウスIL−６レセプターを結合せしめ、この結合し
たマウスIL−６レセプターを常法により測定する。
【０００９】固体支持体としては、マイクロタイタープ
レート、各種のビーズ状の例えばホリスチレン、ポリプ
ロピレン等のプラスチック製、金属セラミック等の無機
物質製等の常用されている支持体を用いることができ
る。抗体の固定も常法に従って行う。例えば、ＰＢＳ溶
液に抗体を例えば、２μｇ／mlの濃度で溶解し、プレー
トのウエルに 100μｌずつ加え、一晩静置させておけば
よい。
レート、各種のビーズ状の例えばホリスチレン、ポリプ
ロピレン等のプラスチック製、金属セラミック等の無機
物質製等の常用されている支持体を用いることができ
る。抗体の固定も常法に従って行う。例えば、ＰＢＳ溶
液に抗体を例えば、２μｇ／mlの濃度で溶解し、プレー
トのウエルに 100μｌずつ加え、一晩静置させておけば
よい。
【００１０】固体支持体にマウスIL−６レセプターに対
する抗体を介して結合したマウスIL−６レセプターは、
常法により測定することができる。例えば、固体支持体
へ結合させたマウスIL−６レセプターに対する抗体とは
異なるマウスIL−６レセプターに対する抗体や、マウス
IL−６レセプターに対するウサギ由来ポリクローナル抗
体を結合せしめ、これらの抗体を認識する抗体で標識さ
れているものを用いる。標識物質としては、アルカリフ
ォスファターゼや西洋ワサビ・パーオキシダーゼ等の酵
素、ビオチン等が例示できる。
する抗体を介して結合したマウスIL−６レセプターは、
常法により測定することができる。例えば、固体支持体
へ結合させたマウスIL−６レセプターに対する抗体とは
異なるマウスIL−６レセプターに対する抗体や、マウス
IL−６レセプターに対するウサギ由来ポリクローナル抗
体を結合せしめ、これらの抗体を認識する抗体で標識さ
れているものを用いる。標識物質としては、アルカリフ
ォスファターゼや西洋ワサビ・パーオキシダーゼ等の酵
素、ビオチン等が例示できる。
【００１１】
【実施例】以下本発明をさらに詳細に説明するために実
施例を示すが、本発明はこれら実施例に限定されるもの
ではない。 実施例１．マウスIL−６レセプターに対するラットモノ
クローナル抗体の作製 マウスIL−６レセプターに対するラットモノクローナル
抗体を作製する目的で、免疫原として、特願平２−2158
86明細書に記載されているリコンビナント可溶性マウス
IL−６レセプターを用いた。免疫は以下のように行っ
た。ＰＢＳに溶解した可溶性マウスIL−６レセプター
を、ウイスターラット１匹あたり 100μｇ、１週間に１
回で計３回皮下に免疫した。
施例を示すが、本発明はこれら実施例に限定されるもの
ではない。 実施例１．マウスIL−６レセプターに対するラットモノ
クローナル抗体の作製 マウスIL−６レセプターに対するラットモノクローナル
抗体を作製する目的で、免疫原として、特願平２−2158
86明細書に記載されているリコンビナント可溶性マウス
IL−６レセプターを用いた。免疫は以下のように行っ
た。ＰＢＳに溶解した可溶性マウスIL−６レセプター
を、ウイスターラット１匹あたり 100μｇ、１週間に１
回で計３回皮下に免疫した。
【００１２】前記免疫されたラットからの脾細胞を、親
株としてのラットミエローマ細胞株YB２／０と、ポリエ
チレングリコールを用いる通常の方法に従って融合せし
めた。スクリーニングは以下のように行った。５μｇ／
mlのマウスIL−６レセプターを含むＰＢＳ溶液を96穴の
マイクロタイタープレートに１ウエル当り 100μｌ加
え、１晩４℃で放置した。洗浄後、１％ BSA-PBS溶液を
加え、２時間室温で放置した。
株としてのラットミエローマ細胞株YB２／０と、ポリエ
チレングリコールを用いる通常の方法に従って融合せし
めた。スクリーニングは以下のように行った。５μｇ／
mlのマウスIL−６レセプターを含むＰＢＳ溶液を96穴の
マイクロタイタープレートに１ウエル当り 100μｌ加
え、１晩４℃で放置した。洗浄後、１％ BSA-PBS溶液を
加え、２時間室温で放置した。
【００１３】洗浄後、ハイブリドーマの培養上清(100μ
ｌ）を加え、２時間室温で放置した。コントロールには
ハイブリドーマの培養上清の代わりにミエローマ細胞株
YB２／０通常の培養上清を加えた。洗浄後、標識酵素と
してアルカリフォスファターゼを結合した抗ラット免疫
グロブリン抗体（２μｇ／ml）を 100μｌ加え、２時間
室温で放置した。洗浄後、アルカリフォスファターゼ基
質（１mg／ml）を 100μｌ加え、37℃で約30分放置し、
イムノリーダーで測定した。図１は、RS13及びRS15の培
養上清を加えたときに発色が著しく増加していることを
示す。これはRS13及びRS15が、抗マウスIL−６レセプタ
ー抗体を産生していることを示す。
ｌ）を加え、２時間室温で放置した。コントロールには
ハイブリドーマの培養上清の代わりにミエローマ細胞株
YB２／０通常の培養上清を加えた。洗浄後、標識酵素と
してアルカリフォスファターゼを結合した抗ラット免疫
グロブリン抗体（２μｇ／ml）を 100μｌ加え、２時間
室温で放置した。洗浄後、アルカリフォスファターゼ基
質（１mg／ml）を 100μｌ加え、37℃で約30分放置し、
イムノリーダーで測定した。図１は、RS13及びRS15の培
養上清を加えたときに発色が著しく増加していることを
示す。これはRS13及びRS15が、抗マウスIL−６レセプタ
ー抗体を産生していることを示す。
【００１４】実施例２．マウスIL−６レセプターに対す
るモルモットポリクローナル抗体の作製 ＰＢＳに溶解した可溶性マウスIL−６レセプターを、モ
ルモット１匹あたり 100μｇ、１週間に１回で計３回皮
下に免疫した。１週間後全採血をし、通常の方法で抗体
を精製した。
るモルモットポリクローナル抗体の作製 ＰＢＳに溶解した可溶性マウスIL−６レセプターを、モ
ルモット１匹あたり 100μｇ、１週間に１回で計３回皮
下に免疫した。１週間後全採血をし、通常の方法で抗体
を精製した。
【００１５】実施例３．抗マウスIL−６レセプターモノ
クローナル抗体、及び抗マウスIL−６レセプターのポリ
クローナル抗体のIL−６中和活性の測定 Ｍ１細胞を１×105 個／ml，0.２ml／ウエルで、40ng／
mlのヒトIL−６、及び種々の濃度のハイブリドーマの培
養上清あるいは抗マウスIL−６レセプターポリクローナ
ル抗体を加えた条件で培養した。60時間後、１ウエルあ
たり0.75μCiのトリチウム標識されたチミヂンを加え、
６時間後細胞を集め、そして取り込まれた放射能を測定
した。
クローナル抗体、及び抗マウスIL−６レセプターのポリ
クローナル抗体のIL−６中和活性の測定 Ｍ１細胞を１×105 個／ml，0.２ml／ウエルで、40ng／
mlのヒトIL−６、及び種々の濃度のハイブリドーマの培
養上清あるいは抗マウスIL−６レセプターポリクローナ
ル抗体を加えた条件で培養した。60時間後、１ウエルあ
たり0.75μCiのトリチウム標識されたチミヂンを加え、
６時間後細胞を集め、そして取り込まれた放射能を測定
した。
【００１６】第２図のデータは、RS15抗体がIL−６の作
用を阻害しないのに対し、RS13抗体及び抗マウスIL−６
レセプターポリクローナル抗体がIL−６の作用を阻害す
ることを示している。これは、RS13抗体がＭ１細胞上の
マウスIL−６レセプターに結合して、ヒトIL−６とマウ
スIL−６レセプターの結合を阻害したことによる。した
がってRS13抗体が遺伝子工学的に作製されたマウスIL−
６レセプターのみならず、マウス細胞上の天然型マウス
IL−６レセプターとも結合することが示された。
用を阻害しないのに対し、RS13抗体及び抗マウスIL−６
レセプターポリクローナル抗体がIL−６の作用を阻害す
ることを示している。これは、RS13抗体がＭ１細胞上の
マウスIL−６レセプターに結合して、ヒトIL−６とマウ
スIL−６レセプターの結合を阻害したことによる。した
がってRS13抗体が遺伝子工学的に作製されたマウスIL−
６レセプターのみならず、マウス細胞上の天然型マウス
IL−６レセプターとも結合することが示された。
【００１７】実施例４．マウスIL−６レセプターの化学
的測定法 ２μｇ／mlのRS13抗体を含むＰＢＳを96穴のマイクロタ
イタープレートに１ウエルあたり 100μｌ加え、１晩４
℃で放置した。 PBS／0.05％Tween20 により洗浄後、 1
00μｌの１％ＢＳＡを加え、２時間室温で放置した。 P
BS／0.05％Tween20 により洗浄後、濃度既知の可溶性マ
ウスIL−６レセプター（特願平２−215886）を１ウエル
あたり 100μｌ加え、２時間室温で放置した。
的測定法 ２μｇ／mlのRS13抗体を含むＰＢＳを96穴のマイクロタ
イタープレートに１ウエルあたり 100μｌ加え、１晩４
℃で放置した。 PBS／0.05％Tween20 により洗浄後、 1
00μｌの１％ＢＳＡを加え、２時間室温で放置した。 P
BS／0.05％Tween20 により洗浄後、濃度既知の可溶性マ
ウスIL−６レセプター（特願平２−215886）を１ウエル
あたり 100μｌ加え、２時間室温で放置した。
【００１８】PBS／0.05％Tween20 により洗浄後、２μ
ｇ／mlのビオチン化RS15抗体を含むＰＢＳを１ウエルあ
たり 100μｌ加え、２時間室温で放置した。 PBS／0.05
％Tween20 により洗浄後、2500倍希釈したアビジンペル
オキシダーゼを含む PBS／0.05％Tween20 を加え37℃で
１時間放置した。 PBS／0.05％Tween20 により洗浄後、
ペルオキシダーゼ基質を加え、37℃で約30分放置後、 4
15nmの発色を測定した。
ｇ／mlのビオチン化RS15抗体を含むＰＢＳを１ウエルあ
たり 100μｌ加え、２時間室温で放置した。 PBS／0.05
％Tween20 により洗浄後、2500倍希釈したアビジンペル
オキシダーゼを含む PBS／0.05％Tween20 を加え37℃で
１時間放置した。 PBS／0.05％Tween20 により洗浄後、
ペルオキシダーゼ基質を加え、37℃で約30分放置後、 4
15nmの発色を測定した。
【００１９】第３図は、検体中のマウスIL−６レセプタ
ー濃度の増加に伴い強く発色すること、すなわち、本方
法により検体中のマウスIL−６レセプター濃度が測定で
きることを示す。
ー濃度の増加に伴い強く発色すること、すなわち、本方
法により検体中のマウスIL−６レセプター濃度が測定で
きることを示す。
【００２０】
【発明の効果】本発明で提供されるマウスIL−６レセプ
ターを特異的に認識するポリクローナル抗体及びモノク
ローナル抗体及びマウスIL−６レセプターを化学的に測
定する方法を用いることにより、自然状態では極めて微
量にしか産生されないマウスIL−６レセプターの諸性質
を解析することが可能になる。このことは、固体発生及
び免疫機構の研究、さらにはそれらの成果に基づく治療
薬診断薬等の開発等に大きな意義を持つ。さらに、本発
明で提供されるIL−６の生物作用を阻害する抗体は、IL
−６の異常産生が病因因子であると考えられている種々
の自己免疫疾患の治療薬開発に有用である。
ターを特異的に認識するポリクローナル抗体及びモノク
ローナル抗体及びマウスIL−６レセプターを化学的に測
定する方法を用いることにより、自然状態では極めて微
量にしか産生されないマウスIL−６レセプターの諸性質
を解析することが可能になる。このことは、固体発生及
び免疫機構の研究、さらにはそれらの成果に基づく治療
薬診断薬等の開発等に大きな意義を持つ。さらに、本発
明で提供されるIL−６の生物作用を阻害する抗体は、IL
−６の異常産生が病因因子であると考えられている種々
の自己免疫疾患の治療薬開発に有用である。
【００２１】さらに、本発明の抗体は、マウスIL−６レ
セプターの免疫測定のためにも有用である。
セプターの免疫測定のためにも有用である。
【図１】実施例１に示す方法で測定したときの、RS1
3, RS15, YB２／０の培養上清中の抗マウスIL−６
レセプター抗体の相対量を示す。
3, RS15, YB２／０の培養上清中の抗マウスIL−６
レセプター抗体の相対量を示す。
【図２】実施例３に示す方法で測定したときのRS13,
RS15の培養上清中の抗マウスIL−６レセプター抗体及
び抗マウスIL−６レセプターポリクローナル抗体の、
IL−６のＭ１細胞への分化誘導に対する阻害効果を示
す。
RS15の培養上清中の抗マウスIL−６レセプター抗体及
び抗マウスIL−６レセプターポリクローナル抗体の、
IL−６のＭ１細胞への分化誘導に対する阻害効果を示
す。
【図３】実施例４に示す方法で測定したときの、プレー
トの発色を示す。
トの発色を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/577 Ｂ 9015−2Ｊ // Ａ６１Ｋ 39/395 ＡＢＡ Ｄ 8413−4Ｃ ＡＢＣ Ｕ 8413−4Ｃ Ｃ０７Ｋ 15/06 8619−4Ｈ Ｃ１２Ｎ 15/06 (Ｃ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｒ 1:91） (72)発明者 岸本 忠三 大阪府富田林市中野町３−５−31 (72)発明者 鈴木 浩 神奈川県海老名市柏ヶ谷967−１ (72)発明者 保川 清 神奈川県相模原市相模大野７−37−17
Claims (14)
- 【請求項１】 マウスIL−６レセプターと特異的に結合
し得る抗−マウスIL−６レセプター抗体。 - 【請求項２】 モノクローナル抗体である請求項１に記
載の抗体。 - 【請求項３】 マウスIL−６レセプターとの結合につい
てマウスIL−６あるいはヒトIL−６と競合する請求項２
に記載の抗体。 - 【請求項４】 RS13である請求項３に記載の抗体。
- 【請求項５】 マウスIL−６レセプターとの結合につい
てマウスIL−６及びヒトIL−６のいずれとも競合しな
い、請求項２に記載の抗体。 - 【請求項６】 RS15である請求項５に記載の抗体。
- 【請求項７】 ポリクローナル抗体である請求項１に記
載の抗体。 - 【請求項８】 請求項２に記載のモノクローナル抗体を
生産するハイブリドーマ。 - 【請求項９】 マウスIL−６レセプター抗原により哺乳
類を感作し、該免疫細胞をミエローマ細胞株と融合せし
め、そして該融合株からマウスIL−６レセプターを認識
する株をクローニングすることを特徴とするハイブリド
ーマの製造方法。 - 【請求項10】 請求項８に記載のハイブリドーマ、又は
請求項９に記載の方法により製造されたハイブリドーマ
を培養し、該培養物からマウスIL−６レセプターを認識
するモノクローナル抗体を採取することを特徴とする抗
−マウスIL−６レセプター抗体の製造方法。 - 【請求項11】 マウスIL−６レセプター抗原により哺乳
類動物を免疫感作し、該動物からマウスIL−６レセプタ
ーを認識するポリクローナル抗体を採取することを特徴
とする抗−マウスIL−６レセプターポリクローナル抗体
の製造方法。 - 【請求項12】 マウスIL−６レセプターに対するモノク
ローナル抗体を固定した固体支持体を分析検体と接触せ
しめることにより該分析検体中のマウスIL−６レセプタ
ーを該マウスIL−６レセプターに対するモノクローナル
抗体を介して固体支持体に結合せしめ、そして固体支持
体に結合したマウスIL−６レセプターを、固体支持体に
固定したマウスIL−６レセプターに対するモノクローナ
ル抗体と異なるマウスIL−６レセプターに対するモノク
ローナル抗体あるいはポリクローナル抗体を用いて測定
することを特徴とするマウスIL−６レセプターの検出又
は測定法。 - 【請求項13】 請求項12に記載の方法を実施するための
キットであって、マウスIL−６レセプターに対する抗体
を含むことを特徴とするキット。 - 【請求項14】 請求項13に記載のマウスIL−６レセプタ
ーに対する抗体２種がRS13又はRS15あるいはこの両者で
あるキット。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3008454A JP3047926B2 (ja) | 1991-01-28 | 1991-01-28 | マウスインターロイキン−６レセプターに対する抗体及びその使用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3008454A JP3047926B2 (ja) | 1991-01-28 | 1991-01-28 | マウスインターロイキン−６レセプターに対する抗体及びその使用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05211888A true JPH05211888A (ja) | 1993-08-24 |
| JP3047926B2 JP3047926B2 (ja) | 2000-06-05 |
Family
ID=11693577
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3008454A Expired - Lifetime JP3047926B2 (ja) | 1991-01-28 | 1991-01-28 | マウスインターロイキン−６レセプターに対する抗体及びその使用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3047926B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9017677B2 (en) | 1997-03-21 | 2015-04-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of treating a disease mediated by sensitized T cells |
-
1991
- 1991-01-28 JP JP3008454A patent/JP3047926B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9017677B2 (en) | 1997-03-21 | 2015-04-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of treating a disease mediated by sensitized T cells |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3047926B2 (ja) | 2000-06-05 |
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