JPH047671B2 - - Google Patents
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- JPH047671B2 JPH047671B2 JP61144257A JP14425786A JPH047671B2 JP H047671 B2 JPH047671 B2 JP H047671B2 JP 61144257 A JP61144257 A JP 61144257A JP 14425786 A JP14425786 A JP 14425786A JP H047671 B2 JPH047671 B2 JP H047671B2
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Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Polyamides (AREA)
Description
〔技術分野〕
本発明は、細胞を培養し、増殖させる際に用い
られる細胞培養用床材に関するものである。 〔従来技術〕 一般に、動物細胞は浮遊状態では増殖せず、固
体表面に付着してのみ増殖する性質を有してい
る。従つて、そのような細胞を培養し、増殖させ
るためには細胞を多量に付着する固体表面、つま
り床材が必要となる。 従来の細胞培養用床材は、一般に、ポリスチレ
ン、ポリメタクリレート等の高分子材料から形成
されているが、これらの材料から形成された床材
は、細胞が付着しにくく、効率的な細胞培養を与
えない。 〔目的〕 本発明の目的は、細胞付着性の高い固体表面を
有する細胞培養用床材を提供することにある。 〔構成〕 本発明者は、細胞の付着しやすい性質を有する
材料の開発について種々研究を重ねた結果、グル
タミン酸メチル35〜25モル％とグルタミン酸ベン
ジル65〜75モル％とのランダム共重合体は細胞を
著しく多量に付着させる性質を有し、細胞培養用
床材といて好適であることを見出し、本発明を完
成するに到つた。 本発明は、グルタミン酸メチル35〜25モル％と
グルタミン酸ベンジル65〜75モル％とのランダム
共重合体を表面に有することを特徴とする細胞培
養用床材である。 本明細書における細胞培養用床材としては、細
胞を培養する際に細胞を付着させて増殖をはかる
ために用いられる固体表面を有する物質を意味
し、シート状、繊維状、ビーズ状、中空糸状、プ
レート状等の形状を有するものである。 本発明の細胞培養（組織培養）用床材は、グル
タミン酸メチルとグルタミン酸ベンジルとのラン
ダム共重合体からなるが、この場合、共重合体中
のグルタミン酸ベンジルの含量を65〜75モル％、
好ましくは約70モル％付近にする。この範囲を逸
脱すると、細胞付着性が悪化する。 本発明で用いる共重合体の分子量は、皮膜を形
成し得る程度であればよく、通常１万〜100万、
好ましくは２万〜10万の範囲である。共重合体を
構成するグルタミン酸成分は、Ｄ体、Ｌ体又はラ
セミ体であることができる。 本発明による細胞培養用床材は、前記共重合体
を所望の形状に成形するか、又は支持体高分子で
形成された成形体の表面に共重合体をコーテイン
グすることによつて製造することができる。アミ
ノ酸系重合体は比較的高価であることから、安価
な支持体高分子で形成した成形体の表面に、前記
共重合体をコーテイングするのが好ましい、支持
体ポリマーとしては、ポリエチレン、ポリプロピ
レン、ポリスチレン、ポリアクリロニトリル、ポ
リメタクリレート、エチレン／プロピレン共重合
体、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアミド
等がある。支持体ポリマーの成形体は、発泡体又
は非発泡体であることができる。また、共重合体
コーテイング用支持体としては、ガラスビーズ、
ガラスフレーク、マイカ等の無機物も使用され
る。 本発明の床材を用いて細胞培養を行う場合、固
体表面として前記共重合体表面を用いる以外は、
従来公知の方法に従つて実施される。培養対象と
なる細胞は、液体又はゼラチン状の培地に添加
し、温度30〜40℃で培養される。この培養におい
て、細胞は、固体表面によく付着し、効率的に増
殖される。 〔実施例〕 次に本発明を実施例により説明する。 実施例 １ Ｌ−グルタミン酸メチルとＬ−グルタミン酸ベ
ンジルとをそれぞれＮ−カルボキシアミノ酸無水
物に変換した後、それぞれの無水物を混合した。
この場合、グルタミン酸メチルとグルタミン酸ベ
ンジルとの混合モル比は29／71であつた。この混
合物をジオキサンと１，２−ジクロロエタンとの
混合溶媒に溶かし、開始剤としてトリエチルアミ
ンを加えて重合させた。重合完結後、その重合溶
液をガラス板上に流延し、風乾して皮膜（膜厚約
0.05mm）を得た。この皮膜をエタノールを用いた
ソツクスレー抽出を行つた後、乾燥した。 次に、この皮膜上に、人由来の上皮性細胞を含
む培養液（約10万個／ml）を接触させたまま、炭
酸ガス濃度５％、湿度100％、37℃の部屋に静置
した。17時間後、皮膜上に付着している細胞の量
を核染色法により定量した。 比較のため、グルタミン酸メチル50モル％とグ
ルタミン酸ベンジル50モル％とからなるランダム
共重合体の皮膜、グルタミン酸メチル単独重合体
の皮膜及びグルタミン酸ベンジル単独重合体の皮
膜を用いて、同様の細胞付着試験を行つた。 皮膜に付着した細胞の量を標準試料（和光純薬
工業株式会社製組織培養用プラスチツクシート）
に付着した細胞の量で割ることにより、細胞付着
率を求めた。その結果を第１表に示す。 なお、第１表に示した符号は次のことを意味す
る。 PGM……グルタミン酸メチルの単独重合体 Ｐ（GM／GB）（） ……グルタミン酸メチル50モル％とグル
タミン酸ベンジル50モル％とのランダ
ム共重合体 Ｐ（GM／GB）（） ……グルタミン酸メチル29モル％とグル
タミン酸ベンジル71モル％とのランダ
ム共重合体 PGB……グルタミン酸ベンジルの単独重合体 GB……グルタミン酸ベンジル
られる細胞培養用床材に関するものである。 〔従来技術〕 一般に、動物細胞は浮遊状態では増殖せず、固
体表面に付着してのみ増殖する性質を有してい
る。従つて、そのような細胞を培養し、増殖させ
るためには細胞を多量に付着する固体表面、つま
り床材が必要となる。 従来の細胞培養用床材は、一般に、ポリスチレ
ン、ポリメタクリレート等の高分子材料から形成
されているが、これらの材料から形成された床材
は、細胞が付着しにくく、効率的な細胞培養を与
えない。 〔目的〕 本発明の目的は、細胞付着性の高い固体表面を
有する細胞培養用床材を提供することにある。 〔構成〕 本発明者は、細胞の付着しやすい性質を有する
材料の開発について種々研究を重ねた結果、グル
タミン酸メチル35〜25モル％とグルタミン酸ベン
ジル65〜75モル％とのランダム共重合体は細胞を
著しく多量に付着させる性質を有し、細胞培養用
床材といて好適であることを見出し、本発明を完
成するに到つた。 本発明は、グルタミン酸メチル35〜25モル％と
グルタミン酸ベンジル65〜75モル％とのランダム
共重合体を表面に有することを特徴とする細胞培
養用床材である。 本明細書における細胞培養用床材としては、細
胞を培養する際に細胞を付着させて増殖をはかる
ために用いられる固体表面を有する物質を意味
し、シート状、繊維状、ビーズ状、中空糸状、プ
レート状等の形状を有するものである。 本発明の細胞培養（組織培養）用床材は、グル
タミン酸メチルとグルタミン酸ベンジルとのラン
ダム共重合体からなるが、この場合、共重合体中
のグルタミン酸ベンジルの含量を65〜75モル％、
好ましくは約70モル％付近にする。この範囲を逸
脱すると、細胞付着性が悪化する。 本発明で用いる共重合体の分子量は、皮膜を形
成し得る程度であればよく、通常１万〜100万、
好ましくは２万〜10万の範囲である。共重合体を
構成するグルタミン酸成分は、Ｄ体、Ｌ体又はラ
セミ体であることができる。 本発明による細胞培養用床材は、前記共重合体
を所望の形状に成形するか、又は支持体高分子で
形成された成形体の表面に共重合体をコーテイン
グすることによつて製造することができる。アミ
ノ酸系重合体は比較的高価であることから、安価
な支持体高分子で形成した成形体の表面に、前記
共重合体をコーテイングするのが好ましい、支持
体ポリマーとしては、ポリエチレン、ポリプロピ
レン、ポリスチレン、ポリアクリロニトリル、ポ
リメタクリレート、エチレン／プロピレン共重合
体、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアミド
等がある。支持体ポリマーの成形体は、発泡体又
は非発泡体であることができる。また、共重合体
コーテイング用支持体としては、ガラスビーズ、
ガラスフレーク、マイカ等の無機物も使用され
る。 本発明の床材を用いて細胞培養を行う場合、固
体表面として前記共重合体表面を用いる以外は、
従来公知の方法に従つて実施される。培養対象と
なる細胞は、液体又はゼラチン状の培地に添加
し、温度30〜40℃で培養される。この培養におい
て、細胞は、固体表面によく付着し、効率的に増
殖される。 〔実施例〕 次に本発明を実施例により説明する。 実施例 １ Ｌ−グルタミン酸メチルとＬ−グルタミン酸ベ
ンジルとをそれぞれＮ−カルボキシアミノ酸無水
物に変換した後、それぞれの無水物を混合した。
この場合、グルタミン酸メチルとグルタミン酸ベ
ンジルとの混合モル比は29／71であつた。この混
合物をジオキサンと１，２−ジクロロエタンとの
混合溶媒に溶かし、開始剤としてトリエチルアミ
ンを加えて重合させた。重合完結後、その重合溶
液をガラス板上に流延し、風乾して皮膜（膜厚約
0.05mm）を得た。この皮膜をエタノールを用いた
ソツクスレー抽出を行つた後、乾燥した。 次に、この皮膜上に、人由来の上皮性細胞を含
む培養液（約10万個／ml）を接触させたまま、炭
酸ガス濃度５％、湿度100％、37℃の部屋に静置
した。17時間後、皮膜上に付着している細胞の量
を核染色法により定量した。 比較のため、グルタミン酸メチル50モル％とグ
ルタミン酸ベンジル50モル％とからなるランダム
共重合体の皮膜、グルタミン酸メチル単独重合体
の皮膜及びグルタミン酸ベンジル単独重合体の皮
膜を用いて、同様の細胞付着試験を行つた。 皮膜に付着した細胞の量を標準試料（和光純薬
工業株式会社製組織培養用プラスチツクシート）
に付着した細胞の量で割ることにより、細胞付着
率を求めた。その結果を第１表に示す。 なお、第１表に示した符号は次のことを意味す
る。 PGM……グルタミン酸メチルの単独重合体 Ｐ（GM／GB）（） ……グルタミン酸メチル50モル％とグル
タミン酸ベンジル50モル％とのランダ
ム共重合体 Ｐ（GM／GB）（） ……グルタミン酸メチル29モル％とグル
タミン酸ベンジル71モル％とのランダ
ム共重合体 PGB……グルタミン酸ベンジルの単独重合体 GB……グルタミン酸ベンジル
【表】
実施例 ２
実施例１のＰ（GM／GB）（）溶液（濃度約
0.5％）中にガラスビーズ（直径約0.5mm）を浸漬
し、その後溶媒を除去、乾燥して、Ｐ（GM／
GB）（）を表面に有するビーズ状細胞培養用
床材を得た。 〔効果〕 以上説明したように、本発明の細胞培養用床材
は、極めて多量の細胞を付着させることができ、
その産業的意義は大きい。
0.5％）中にガラスビーズ（直径約0.5mm）を浸漬
し、その後溶媒を除去、乾燥して、Ｐ（GM／
GB）（）を表面に有するビーズ状細胞培養用
床材を得た。 〔効果〕 以上説明したように、本発明の細胞培養用床材
は、極めて多量の細胞を付着させることができ、
その産業的意義は大きい。
Claims (1)
- １ グルタミン酸メチル35〜25モル％とグルタミ
ン酸ベンジル65〜75モル％とのランダム共重合体
を表面に有することを特徴とする細胞培養用床
材。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61144257A JPS63283A (ja) | 1986-06-20 | 1986-06-20 | 細胞培養用床材 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61144257A JPS63283A (ja) | 1986-06-20 | 1986-06-20 | 細胞培養用床材 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63283A JPS63283A (ja) | 1988-01-05 |
| JPH047671B2 true JPH047671B2 (ja) | 1992-02-12 |
Family
ID=15357890
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61144257A Granted JPS63283A (ja) | 1986-06-20 | 1986-06-20 | 細胞培養用床材 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63283A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106665562A (zh) * | 2017-03-14 | 2017-05-17 | 南京九寿堂医药科技有限公司 | 一种脐血造血干细胞冻存管 |
-
1986
- 1986-06-20 JP JP61144257A patent/JPS63283A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS63283A (ja) | 1988-01-05 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |