JPH0449998B2 - - Google Patents
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- JPH0449998B2 JPH0449998B2 JP59033979A JP3397984A JPH0449998B2 JP H0449998 B2 JPH0449998 B2 JP H0449998B2 JP 59033979 A JP59033979 A JP 59033979A JP 3397984 A JP3397984 A JP 3397984A JP H0449998 B2 JPH0449998 B2 JP H0449998B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- adenosine
- producing
- magnesium
- fermentation
- resistance
- Prior art date
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は発酵法によるアデノシンの製造法に関
する。従来よりアデノシン発酵で用いられている
液体培地中のマグネシユーム塩はマグネシユーム
イオン換算で0.001％から0.01％の範囲であり、
通常は0.002％から0.004％が用いられている。 本発明者らはより効率的に発酵法によるアデノ
シンの製造を行なう方法について種々研究した結
果、アデノシン生産能を有する微生物をマグネシ
ユームイオン濃度が従来のアデノシン発酵で使用
されている最大マグネシユームイオン濃度の２倍
から20倍すなわち0.02％から0.2％というきわめ
て高濃度のマグネシユームイオンを含有するアデ
ノシン生産液体培地で培養するとアデノシンの生
産量が著しく増大することを初めて明らかにし
た。本発明はこの知見に基いて完成されたもので
ある。 すなわち、本発明はアデノシン生産能を有する
微生物をマグネシユーム塩をマグネシユームイオ
ン換算で0.02％から0.2％含有するアデノシン生
産液体培地で培養して培養液中にアデノシンを生
成・蓄積せしめ、該アデノシンを採取することを
特徴とする発酵法によるアデノシンの製造法に関
する。 本発明で使用する微生物はブレビバクテリウム
属、コリネバクテリウム属又はバチルス属に属
し、アデノシン生産能を有する微生物である。ア
デノシンの生産能は、該属に属する微生物に８−
アザアデニンあるいは６−メチルアミノプリン耐
性等の該酸アナログ耐性を附与することによつて
生じさせることができる。 さらに上記該酸アナログ耐性に加えて、例え
ば、サルフアグアニジン、トヨカマイシン、デコ
イニンなどに対する耐性、さらにはアデノシン生
産に有用な性質であるＬ−イソロイシン、Ｌ−ア
ルギニン、Ｌ−メチオニン要求性などが付与され
ている微生物などもアデノシン生産菌として使用
可能である。 具体的には、次の様な微生物が使用される。 ブレビバクテリア アンモニアゲネス
AJ12131、FERMP−7455 （８−アザアデニン耐性） コリネバクテリウム グルタミクム AJ12130、
FERMP−7454 （８−アザアデニン耐性） バチルス ズブチルス AJ12050、FERMP−
7149 （グアニン要求、８−アザアデニン耐性、６−ア
ミノプリン耐性） 本発明で使用するアデノシン生産液体培地はマ
グネシユーム塩をマグネシユームイオンとして
0.02％から0.2％含有する。マグネシユーム塩と
しては硫酸マグネシユーム、塩化マグネシユー
ム、あるいは硫酸マグネシユームなどが使用でき
る。マグネシユーム塩以外の培地の組成は炭素
源、窒素源、無機塩および必要ならば有機微量栄
養素を含有する通常の培地である。炭素源として
含水炭素（グルコース、フラクトースあるいはデ
ンプン、セルロース等の加水分解物、糖密等）、
有機酸（酢酸、クエン酸等）、アルコール（グリ
セロール、エタノール等）、あるいは炭化水素
（ノルマルパラフイン等）が使用できる。窒素源
としては硫酸アンモニユーム、尿素、硝酸アンモ
ニユーム、アンモニアガス、その他を、無機塩と
してはリン酸塩、カルシユーム塩、鉄塩、マンガ
ン塩、その他微量金属塩等を必要に応じて使用す
る。有機微量栄養素としては、栄養要求性のある
場合には該当するアミノ酸、核酸、ビタミン、脂
肪酸類、有機塩基物質等を適量添加し、必要に応
じて、さらに生育促進物質としてアミノ酸、ビタ
ミン、脱脂大豆加水分解物、酵母エキス、ペプト
ン、カザミノ酸等を使用する。 培養条件は通常の方法でPH５ないし９、温度は
20℃ないし40℃で好気条件下に培養すれば良い。
培養中に応PHが下がる場合には炭酸カルシユーム
を別殺菌して加えるかまたはアンモニア水、アン
モニアガス等のアルカリで中和する。又、有機酸
を炭素源とする場合はPHの上昇を鉱酸又は有機酸
で中和する。 アデノシンの単離採取は常法によつて行ないう
る。例えば菌体を分離除去し、アニオン交換樹
脂、カチオン交換樹脂等の樹脂処理あるいは濃縮
冷却晶析法の併用等によりアデノシンを単離す
る。不純物を除くためには常法の活性炭吸着法お
よび再結法を用いて精製しても良い。 実施例 第１表のシード培地50mlを張り込んだ500ml容
フラスコにバチルスズブチリスAJ12050FERMP
−7149ブレビバクテリウム アンモニアゲネス
AJ12131、FERMP−7455及びコリネバクテリウ
ム グルタミクムAJ12130、FERMP−7454を１
白金耳接種し、34℃にて24時間培養した。 この培養液15mlを、MgSO4・7H2O濃度を０〜
２％まで変化させた第１表に示す主発酵培地に加
え全容量300mlとして小型ジヤーフアーメンター
を用いて34℃にて96時間培養した。なお培養はア
ンモニアガスを連続的に添加して行なつた。この
培養液中のアデノシンを液体クロマトグラフにて
定量したところ第２表に示す量のアデノシンが生
成蓄積した。
する。従来よりアデノシン発酵で用いられている
液体培地中のマグネシユーム塩はマグネシユーム
イオン換算で0.001％から0.01％の範囲であり、
通常は0.002％から0.004％が用いられている。 本発明者らはより効率的に発酵法によるアデノ
シンの製造を行なう方法について種々研究した結
果、アデノシン生産能を有する微生物をマグネシ
ユームイオン濃度が従来のアデノシン発酵で使用
されている最大マグネシユームイオン濃度の２倍
から20倍すなわち0.02％から0.2％というきわめ
て高濃度のマグネシユームイオンを含有するアデ
ノシン生産液体培地で培養するとアデノシンの生
産量が著しく増大することを初めて明らかにし
た。本発明はこの知見に基いて完成されたもので
ある。 すなわち、本発明はアデノシン生産能を有する
微生物をマグネシユーム塩をマグネシユームイオ
ン換算で0.02％から0.2％含有するアデノシン生
産液体培地で培養して培養液中にアデノシンを生
成・蓄積せしめ、該アデノシンを採取することを
特徴とする発酵法によるアデノシンの製造法に関
する。 本発明で使用する微生物はブレビバクテリウム
属、コリネバクテリウム属又はバチルス属に属
し、アデノシン生産能を有する微生物である。ア
デノシンの生産能は、該属に属する微生物に８−
アザアデニンあるいは６−メチルアミノプリン耐
性等の該酸アナログ耐性を附与することによつて
生じさせることができる。 さらに上記該酸アナログ耐性に加えて、例え
ば、サルフアグアニジン、トヨカマイシン、デコ
イニンなどに対する耐性、さらにはアデノシン生
産に有用な性質であるＬ−イソロイシン、Ｌ−ア
ルギニン、Ｌ−メチオニン要求性などが付与され
ている微生物などもアデノシン生産菌として使用
可能である。 具体的には、次の様な微生物が使用される。 ブレビバクテリア アンモニアゲネス
AJ12131、FERMP−7455 （８−アザアデニン耐性） コリネバクテリウム グルタミクム AJ12130、
FERMP−7454 （８−アザアデニン耐性） バチルス ズブチルス AJ12050、FERMP−
7149 （グアニン要求、８−アザアデニン耐性、６−ア
ミノプリン耐性） 本発明で使用するアデノシン生産液体培地はマ
グネシユーム塩をマグネシユームイオンとして
0.02％から0.2％含有する。マグネシユーム塩と
しては硫酸マグネシユーム、塩化マグネシユー
ム、あるいは硫酸マグネシユームなどが使用でき
る。マグネシユーム塩以外の培地の組成は炭素
源、窒素源、無機塩および必要ならば有機微量栄
養素を含有する通常の培地である。炭素源として
含水炭素（グルコース、フラクトースあるいはデ
ンプン、セルロース等の加水分解物、糖密等）、
有機酸（酢酸、クエン酸等）、アルコール（グリ
セロール、エタノール等）、あるいは炭化水素
（ノルマルパラフイン等）が使用できる。窒素源
としては硫酸アンモニユーム、尿素、硝酸アンモ
ニユーム、アンモニアガス、その他を、無機塩と
してはリン酸塩、カルシユーム塩、鉄塩、マンガ
ン塩、その他微量金属塩等を必要に応じて使用す
る。有機微量栄養素としては、栄養要求性のある
場合には該当するアミノ酸、核酸、ビタミン、脂
肪酸類、有機塩基物質等を適量添加し、必要に応
じて、さらに生育促進物質としてアミノ酸、ビタ
ミン、脱脂大豆加水分解物、酵母エキス、ペプト
ン、カザミノ酸等を使用する。 培養条件は通常の方法でPH５ないし９、温度は
20℃ないし40℃で好気条件下に培養すれば良い。
培養中に応PHが下がる場合には炭酸カルシユーム
を別殺菌して加えるかまたはアンモニア水、アン
モニアガス等のアルカリで中和する。又、有機酸
を炭素源とする場合はPHの上昇を鉱酸又は有機酸
で中和する。 アデノシンの単離採取は常法によつて行ないう
る。例えば菌体を分離除去し、アニオン交換樹
脂、カチオン交換樹脂等の樹脂処理あるいは濃縮
冷却晶析法の併用等によりアデノシンを単離す
る。不純物を除くためには常法の活性炭吸着法お
よび再結法を用いて精製しても良い。 実施例 第１表のシード培地50mlを張り込んだ500ml容
フラスコにバチルスズブチリスAJ12050FERMP
−7149ブレビバクテリウム アンモニアゲネス
AJ12131、FERMP−7455及びコリネバクテリウ
ム グルタミクムAJ12130、FERMP−7454を１
白金耳接種し、34℃にて24時間培養した。 この培養液15mlを、MgSO4・7H2O濃度を０〜
２％まで変化させた第１表に示す主発酵培地に加
え全容量300mlとして小型ジヤーフアーメンター
を用いて34℃にて96時間培養した。なお培養はア
ンモニアガスを連続的に添加して行なつた。この
培養液中のアデノシンを液体クロマトグラフにて
定量したところ第２表に示す量のアデノシンが生
成蓄積した。
【表】
Claims (1)
- １ ブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム
属又はバチルス属に属しアデノシン生産能を有す
る微生物をマグネシユーム塩をマグネシユームイ
オン換算で0.02％から0.2％含有するアデノシン
生産液体倍地で培養して培養液中にアデノシンを
生成・蓄積せしめ、該アデノシンを採取すること
を特徴とする発酵法によるアデノシン製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3397984A JPS60176596A (ja) | 1984-02-24 | 1984-02-24 | 発酵法によるアデノシンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3397984A JPS60176596A (ja) | 1984-02-24 | 1984-02-24 | 発酵法によるアデノシンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60176596A JPS60176596A (ja) | 1985-09-10 |
| JPH0449998B2 true JPH0449998B2 (ja) | 1992-08-13 |
Family
ID=12401601
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3397984A Granted JPS60176596A (ja) | 1984-02-24 | 1984-02-24 | 発酵法によるアデノシンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60176596A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2759091B1 (fr) * | 1997-02-06 | 1999-03-19 | Expertises Ind Et | Procede biologique d'obtention de nouveaux derives de l'adenosine et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
-
1984
- 1984-02-24 JP JP3397984A patent/JPS60176596A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60176596A (ja) | 1985-09-10 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |