JPH0439997B2 - - Google Patents

Info

Publication number
JPH0439997B2
JPH0439997B2 JP61269734A JP26973486A JPH0439997B2 JP H0439997 B2 JPH0439997 B2 JP H0439997B2 JP 61269734 A JP61269734 A JP 61269734A JP 26973486 A JP26973486 A JP 26973486A JP H0439997 B2 JPH0439997 B2 JP H0439997B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
hyaluronic acid
present
streptococcus
streptococcus equi
producing
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
JP61269734A
Other languages
English (en)
Other versions
JPS63123392A (ja
Inventor
Masamichi Hashimoto
Haruhisa Saegusa
Susumu Chiba
Hiroyuki Kitagawa
Teruzo Myoshi
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Denka Co Ltd
Original Assignee
Denki Kagaku Kogyo KK
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Denki Kagaku Kogyo KK filed Critical Denki Kagaku Kogyo KK
Priority to JP26973486A priority Critical patent/JPS63123392A/ja
Publication of JPS63123392A publication Critical patent/JPS63123392A/ja
Publication of JPH0439997B2 publication Critical patent/JPH0439997B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕 本発明は、醗酵法によるヒアルロン酸の製造法
に関する。さらに詳しくは、栄養要求性が部分的
に解除されたストレプトコツカス・エキを培養
し、ヒアルロン酸を生成蓄積せしめることを特徴
とするヒアルロン酸の製造法に関する。 〔従来の技術〕 従来ヒアルロン酸はニワトリのトサカ、牛の眼
の硝子体又は臍帯等より抽出によつて得られてい
た。しかしながら抽出法によるヒアルロン酸製造
は、分離精製が非常に困難等の欠点等を有してい
た。 その欠点を改良するために、ヒアルロン酸を生
産する能力を有する微生物を培養し、その培養液
から直接ヒアルロン酸を採取する方法が開示され
ている(特開昭58−56692号公報、特開昭61−
63294号公報)。 さらに、微生物を培養し、ヒアルロン酸を採取
する方法について、培養のロツトごと生成量を安
定化させるため、突然変異株を用いる方法が開示
されている(特開昭61−219394号公報)。 本発明者らは、ヒアルロン酸産生能を有するス
トレプトコツカス属の微生物を、培養液のPH7.5
〜9.0にコントロールすることにより、高分子量
のヒアルロン酸を生成蓄積せしめる方法について
すでに提案した(特願昭61−170943号明細書)。 〔発明が解決しようとする問題点〕 微生物を培養して、ヒアルロン酸の生産を行な
うと、ロツトごとの生産量が不安定であり、工業
的に実施する際に、大きな問題となる。 〔問題点を解決するための手段〕 本発明者らは、かかる問題を解決すべく、種々
研究を行なつた結果、栄養要求性が部分的に解除
されたストレプトコツカス・エキが意外にも親株
よりも、高収量で、しかも収量のバラツキが少な
く安定にヒアルロン酸を生成することを見い出し
本発明を完成するに至つた。 すなわち本発明は、ストレプトコツカス・エキ
(Streptococcus equi)の変異株FM−100(微工
研菌寄第9027号)を培養し、ヒアルロン酸を生成
蓄積せしめることを特徴とする醗酵法によるヒア
ルロン酸の製造法である。 以下、本発明について具体的に説明する。 本発明の栄養要求性が部分的に解除されたスト
レプトコツカス・エキは、ヒアルロン酸生成能を
有するストレプトコツカス・エキの突然変異株の
中から取得することが出来る。 例えば、ストレプトコツカス・エキ
ATCC9527を用い、ポリペプトン1.5%、酵母エ
キス0.5%、グルコース2%の培地にて、33℃で
培養し、対数増殖期の菌を、低温で遠心分離によ
り集菌し、生理食塩水を用いて、無菌的に3回洗
浄する。N−メチル−N′−ニトロ−N−ニトロ
ソグアニジン50μg/mlを含むPH5.0、0.05Mリン
酸緩衝液中、30℃で1時間振盪したのち、氷冷す
る。ついで、生理食塩水を用いて、低温で菌体を
3回洗浄した後、ポリペプトン1.5%、酵母エキ
ス0.5%、グリコース2%の培地で、33℃、3時
間培養し、また生理食塩水を用いて、低温で菌体
を3回洗浄する。表2に示す人工合成培地で、33
℃、7日間液体培養し、増殖してきた培養液をさ
らに、新しい同じ人工合成培地にうえつぎ、この
操作を3回くりかえす。 次に寒天を含む同じ組成の培地上に塗布し、コ
ロニーを分離し、ストレプトコツカス・エキ
FM100を得る。 本菌株は、工業技術院微生物工業技術研究所
に、微工研菌寄第9027号として受託されている。
ストレプトコツカスFM・100は、部分的に栄養
要求性が解除され、親株であるATCC9527が生育
できない表2に示す培地成分だけからなる人工合
成培地によく生育することができる。
【表】
【表】 ストレプトコツカス・エキFM・100の栄養要
求性は表3に示すとおりである。
〔実施例〕
次に実施例により、本発明を詳しく説明する
が、本発明はこれに限定されるものではない。 実施例 1 グルコース2%、リン酸第1カリウム0.2%、
硫酸マグネシウム7水塩0.05%、チオ硫酸ソーダ
0.1%、ポリペプトン1.0%酵母エキス0.5%からな
るPH8.5の培養液1lに同一培地からなるストレプ
トコツカス・エキFM−100の前培養液10mlを接
触し、通気量1.5vvm、攪拌200回転/分、温度33
℃でカ性ソーダでpHを8.5にコントロールしなが
ら培養し、15時間後に、グルコース2%を分添
し、グルコースが全部消費された時点で培養を停
止した。 培養液を塩酸でPH4に調整後、蒸留水で2倍希
釈し、遠心分離により除菌した。得られた除菌液
をエチルアルコールを加え、ヒアルロン酸ソーダ
を析出せしめる。これをろ別した後、水に溶解
し、セチルピリジニウムクロライドを加え、生じ
た沈殿をろ取し、2%食塩水に再溶解後、再びエ
チルアルコールによる析出をくり返す。得られた
ヒアルロン酸ソーダを室温で減圧乾燥して、培養
液1lあたり7.2gの白色ヒアルロン酸ソーダを得
た。 得られたヒアルロン酸ソーダは、赤外線吸収ス
ペクトル、C−13核磁気共鳴スペクトル、ストレ
プトミセスのヒアルロニダーゼによる分解実験で
ヒアルロン酸ソーダであることが確認された。 上記と同様の培養を4回くりかえし、全部で5
バツチ行なつた結果を表3に示す。
〔発明の効果〕
本発明によれば、ヒアルロン酸を高収率で、し
かも収量にばらつきなく、安定に生産することが
できる。また菌株管理も容易である。 本発明によつて製造されたヒアルロン酸は、化
粧品、医療品に配合して使用できる。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. 1 ストレプトコツカス・エキ
    (Streptococcusequi)の変異株FM−100(微工研
    菌寄第9027号)を培養し、ヒアルロン酸を生成蓄
    積せしめることを特徴とする醗酵法によるヒアル
    ロン酸の製造法。
JP26973486A 1986-11-14 1986-11-14 ヒアルロン酸の製造方法 Granted JPS63123392A (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP26973486A JPS63123392A (ja) 1986-11-14 1986-11-14 ヒアルロン酸の製造方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP26973486A JPS63123392A (ja) 1986-11-14 1986-11-14 ヒアルロン酸の製造方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS63123392A JPS63123392A (ja) 1988-05-27
JPH0439997B2 true JPH0439997B2 (ja) 1992-07-01

Family

ID=17476421

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP26973486A Granted JPS63123392A (ja) 1986-11-14 1986-11-14 ヒアルロン酸の製造方法

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JPS63123392A (ja)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4946780A (en) * 1988-10-12 1990-08-07 Denkl Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Method for producing sodium hyaluronate by fermentation method
CA2496121C (en) 2002-08-16 2010-03-30 Yoshiaki Miyata Stable formulations of hyaluronic acid for use in the therapeutic treatment of arthropathy
EP1681306B1 (en) 2003-10-29 2013-02-20 Teijin Limited Hyaluronic acid compound, hydrogel thereof and material for treating joint
US10219997B2 (en) 2006-09-22 2019-03-05 Kochi University Radiation sensitizer or anti-cancer chemotherapy sensitizer
CN102812051B (zh) * 2010-03-17 2015-08-26 电气化学工业株式会社 透明质酸和/或其盐的溶解方法
JP5824455B2 (ja) 2010-08-23 2015-11-25 デンカ株式会社 架橋ヒアルロン酸組成物及び自己架橋ヒアルロン酸粒子
KR20160029818A (ko) 2013-07-08 2016-03-15 덴카 주식회사 코어 쉘형 가교 히알루론산 겔 입자, 그의 제조 방법 및 의료용 재료
CN115803035A (zh) 2020-06-15 2023-03-14 株式会社Kortuc 抗癌疗法的增敏剂

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5856692A (ja) * 1981-09-26 1983-04-04 Shiseido Co Ltd ヒアルロン酸の製造方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5856692A (ja) * 1981-09-26 1983-04-04 Shiseido Co Ltd ヒアルロン酸の製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
JPS63123392A (ja) 1988-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4801539A (en) Fermentation method for producing hyaluronic acid
EP0266578B1 (en) Method of producing hyaluronic acid
EP0575908B1 (de) Pseudomonas aeruginosa und seine Verwendung zur Herstellung von L-Rhamnose
JPH0439998B2 (ja)
US5496726A (en) Streptococcus zooepidemicus medium and process for preparing hyaluronic acid
JPH0439997B2 (ja)
DE3301997A1 (de) Verfahren zur herstellung von disaccharid-tripeptiden und disaccharid-tetrapeptiden
JPH11500609A (ja) Klebsiella pneumoniae,subsp. pneumoniaeの新規な菌株及びL−フコースを含有する多糖類の製造方法
JP3632197B2 (ja) 高分子量ヒアルロン酸もしくはその塩の製造法
JP2003102492A (ja) シロ−イノソースの製造法及びシロ−イノシトールの製造法
JP2620795B2 (ja) コロミン酸の製造法
KR20040016641A (ko) 히아루론산 생산 균주 및 상기 균주를 이용한 히아루론산생산방법
JPH0838188A (ja) イノシトールの製造方法およびグルコース代謝拮抗物質耐性株の取得法
JPS62208277A (ja) イヌリナ−ゼの製造法
JPS61219394A (ja) 醗酵法によるヒアルロン酸の製造方法
JPH1042883A (ja) イノシトールの製造方法および6−ハロゲノ−6−デオキシグルコース耐性株の取得法
JPH0443637B2 (ja)
JP2698226B2 (ja) 高粘性bs−1物質の製造法
JPH046356B2 (ja)
JPS6328398A (ja) ヒアルロン酸の製造法
JPH044868B2 (ja)
JP2005000072A (ja) (−)−2−デオキシ−シロ−イノソースの製造方法
JP2000041689A (ja) イノシト―ルの製造方法
JPH1042860A (ja) イノシトールの製造方法およびヘキサクロロシクロヘキサン耐性株の取得法
JP3064061B2 (ja) 多糖類の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
EXPY Cancellation because of completion of term
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120701

Year of fee payment: 20