JPH04234990A

JPH04234990A - 光学活性（ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造法

Info

Publication number: JPH04234990A
Application number: JP41831790A
Authority: JP
Inventors: Michio Ito; 美智夫伊藤; Yoshinori Kobayashi; 良則小林
Original assignee: Daicel Chemical Industries Ltd
Current assignee: Daicel Corp
Priority date: 1990-12-27
Filing date: 1990-12-27
Publication date: 1992-08-24
Anticipated expiration: 2015-04-04
Also published as: JP3027614B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は３−クロロプロピオフェ
ノンを、光学活性（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−
１−プロパノールに不斉還元する能力を有するキャンデ
ィダ属、ゲオトリカム属、シリンゴスポラ属、クラビス
ポラ属、スポリジオボラス属、サッカロミセス属、トル
ラスポラ属、サッカロミコプシス属、ロドスポリジウム
属に属する微生物群から選ばれた微生物に接触させ、生
成する光学活性（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１
−プロパノールを採取することを特徴とする光学活性（
Ｒ）３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製
造法に関するものである。光学活性（Ｒ）−３−クロロ
−１−フェニル−１−プロパノールは２種の官能基を有
することから、光学活性を必要とする医薬、農薬等の合
成原料として極めて有用な物質である。例えば、｛ジャ
ーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊｏｕｒ
ｎａｌｏｆ　　Ｏｒｇａｎｉｃ　　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
）５３巻、２９１６頁、１９８８年｝，｛テトラヘドロ
ン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　　Ｌｅｔｔｅ
ｒｓ）３０巻、５２０７頁、１９８９年｝においてはト
モキセチン、フルオキセチン、ノルフルオキセチン等の
セロトニン摂取阻害剤の光学活性体の合成に用いられて
いる。

【０００２】

【従来の技術と問題点】従来、光学活性（Ｒ）−３−ク
ロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造法として
は、■３−クロロプロピオフェノンを化学的に不斉還元
する方法〔｛米国特許４８６８３４４号｝、｛テトラヘ
ドロン・レターズ（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　　Ｌｅｔ
ｔｅｒｓ）３０巻、５２０７頁、１９８９年｝、特開昭
６０−１６１９２７号〕や■ラセミ体３−クロロ−１−
フェニル−１−プロパノールを酵素により光学分割する
方法等が知られている。しかし、■は触媒の合成が困難
であること、■は得られる３−クロロ−１−フェニル−
１−プロパノールの光学純度が低い等の問題があるため
、経済的に優れ、且つ、簡便な手段で光学純度の高い光
学活性（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパ
ノールを得る方法の確立が望まれている。

【０００３】

【問題を解決するための手段】本発明者らは経済的に優
れ、且つ、簡便な手段で光学純度の高い光学活性（Ｒ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを得る
方法として、微生物による３−クロロプロピオフェノン
の不斉還元法に着目し、この目的に適した微生物を検索
した結果、キャンディダ属、ゲオトリカム属、シリンゴ
スポラ属、クラビスポラ属、スポリジオボラス属、ハン
セヌラ属、サッカロミセス属、トルラスポラ属、サッカ
ロミコプシス属、ロドスポリジウム属に属する微生物が
３−クロロプロピオフェノンを不斉還元し、光学活性（
Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを
生成することを見出だし本発明を完成したものである。

【０００４】本発明に使用する微生物としては、キャン
ディダ属、ゲオトリカム属、シリンゴスポラ属、クラビ
スポラ属、スポリジオボラス属、ハンセヌラ属、サッカ
ロミセス属、トルラスポラ属、サッカロミコプシス属又
はロドスポリジウム属に属する微生物で３−クロロプロ
ピオフェノンを不斉還元し、（Ｒ）−３−クロロ−１−
フェニル−１−プロパノールを生成する能力を有する微
生物であればいずれも使用可能である。

【０００５】具体的には３−クロロプロピオフェノンか
ら光学活性（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プ
ロパノールを生成しうる微生物としては、キャンディダ
・アルボレア（Ｃａｎｄｉｄａ　　ａｒｂｏｒｅａ）Ｉ
ＡＭ　　４１４７キャンディダ，パラプシロシス（Ｃａｎｄｉｄａ　　ｐ
ａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ）ＩＦＯ　　１３９６ＩＦＯ　
　０６４０、ＩＦＯ　　０７０８、ＩＦＯ　　１０２２
、ＪＣＭ　　２９８１、ＪＣＭ　　２９８２キャンディ
ダ・フミコラ（Ｃａｎｄｉｄａｈｕｍｉｃｏｌａ）ＩＦ
Ｏ　　０７６０、キャンディダ・シルバノラム（Ｃａｎ
ｄｉｄａ　　ｓｉｌｖａｎｏｒｕｍ）ＩＦＯ　　１０４
１９、ゲオトリカム・キャンディダム（Ｇｅｏｔｒｉｃ
ｈｕｍ　　ｃａｎｄｉｄｕｍ）ＩＦＯ　　４６０１、シ
リンゴスポラ・アルビカンス（Ｓｙｒｉｎｇｏｓｐｏｒ
ａ　　ａｌｂｉｃａｎｓ）ＩＦＯ１８５６、クラビスポ
ラ・ラシタニエ（Ｃｌａｖｉｓｐｏｒａ　　ｌｕｓｉｔ
ａｎｉａｅ）ＩＦＯ　　１０１９、スポリジオボラス・
ジョンソニ（Ｓｐｏｒｉｄｉｏｂｏｌｕｓ　　ｊｏｈｎ
ｓｏｎｉｉ）ＩＦＯ　　６９０３、サッカロミセス・セ
レビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　　ｃｅｒｅｖ
ｉｓｉａｅ）ＩＦＯ　　１００７４、トルラスポラ・デ
ルブレッキ（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ　　ｄｅｌｂｒｕ
ｅｃｋｉｉ）ＩＦＯ　　０４２２、サッカロミコプシス
・フィバリゲラ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　
　ｆｉｂｕｌｉｇｅｒａ）ＩＦＯ　　０１０６、ロドス
ポリジウム・マルビネラム（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉ
ｕｍ　　ｍａｌｖｉｎｅｌｌｕｍ）ＩＦＯ　　１９３６
等を挙げることができる。

【０００６】これらの微生物は、野生株、変異株、又は
細胞融合もしくは遺伝子操作法等の遺伝子手法により誘
導される組み替え株等、いずれの株でも好適に用いるこ
とができる。

【０００７】尚、ＩＦＯ番号の付された微生物は、（財
）醗酵研究所（ＩＦＯ）発行のＬｉｓｔ　　ｏｆ　　Ｃ
ｕｌｔｕｒｅｓ、第８版、第１巻（１９８８）に記載さ
れており、該ＩＦＯから入手することができる。ＪＣＭ
番号の付された微生物は、理化学研究所微生物系保存施
設発行の微生物カタログ第４版（１９８６）に記載され
ており、該施設から入手することができる。ＩＡＭ番号
の付された微生物は、東京大学応用微生物研究所から入
手することができる。

【０００８】本発明に用いる微生物を培養するための培
地は、その微生物が増殖し得るものであれば特に制限は
ない。例えば、炭素源としては、上記微生物が利用可能
なものであればいずれも使用でき、具体的には、グルコ
ース、フルクトース、シュクロース、デキストリン等の
糖類、ソルビトール、エタノール、グリセロール等のア
ルコール類、フマル酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸
等の有機酸類及びその塩類、パラフィン等の炭化水素類
等或いはこれらの混合物を使用することができる。窒素
源としては例えば、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウ
ム、リン酸アンモニウム等の無機酸のアンモニウム塩、
フマル酸アンモニウム、クエン酸アンモニウム等の有機
酸のアンモニウム塩、肉エキス、酵母エキス、コーンス
ティープリカー、カゼイン加水分解物、尿素等の無機有
機含窒素化合物、或いはこれらの混合物を使用すること
ができる。他に無機塩、微量金属塩、ビタミン類等、通
常の培養に用いられる栄養源を適宜、混合して用いるこ
とができる。また必要に応じて微生物の増殖を促進する
因子、本発明の目的化合物の生成能力を高める因子、或
いは培地のｐＨ保持に有効な物質も添加できる。

【０００９】培養方法としては培地ｐＨは２．０〜９．
５、好ましくは、３〜８、培養温度は２０〜４５℃、好
ましくは２５〜３７℃で、嫌気的或いは好気的に、その
微生物の成育に適した条件下５〜１２０時間、好ましく
は１２〜７２時間程度培養する。

【００１０】還元方法の方法としては、培養液をそのま
ま用いる方法、遠心分離等により菌体を分離し、これを
そのまま、或いは、洗浄した後、緩衝液、水等に再懸濁
したものに、３−クロロプロピオフェノンを添加し反応
させる方法等がある。この反応の際、グルコース、シュ
クロース等の炭素源をエネルギー源として添加したほう
が良い場合もある。また、菌体は生菌体のままでもよい
し、菌体破砕物、アセトン処理、凍結乾燥等の処理をほ
どこしたものでもよい。また、これらの菌体或いは、菌
体処理物を、例えば、ポリアクリルアミドゲル法、含硫
多糖ゲル法（カラギーナンゲル法等）、アルギン酸ゲル
法、寒天ゲル法等の公知の方法で固定化して用いること
もできる。更に、菌体処理物から、公知の方法を組み合
わせて精製取得した酵素も使用できる。

【００１１】３−クロロプロピオフェノンはそのまま、
或いは、水に懸濁・溶解し、又は反応に影響を与えない
ような有機溶媒に溶解したり、界面活性剤等に分散させ
たりして、反応始めから一括に或いは分割して添加して
もよい。

【００１２】反応はｐＨ３〜９、好ましくは、ｐＨ５〜
８の範囲で温度は１０〜６０℃、好ましくは２０〜４０
℃の範囲で、１〜１２０時間程度、攪拌下あるいは静置
下で行う。基質の使用濃度は特に制限されないが、０．
１〜１０％程度が好ましい。

【００１３】反応によって生成した光学活性（Ｒ）−３
−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの採取は反
応液から直接或いは菌体分離後、有機溶媒による抽出、
蒸留、カラムクロマトグラフィー等の通常の精製方法を
用いれば容易に得られる。

【００１４】

【実施例】以下、本発明を具体的に実施例にて説明する
が、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものでは
ない。なお、実施例に於ける反応液中の３−クロロ−１
−フェニル−１−プロパノールの定量はガスクロマトグ
ラフィー（カラム：ＦＡＬ−Ｍ，１０％，２ｍ　　温度
１８０℃）により行い、光学純度の測定は光学分割カラ
ムを用いた高速液体クロマトグラフィー（カラム：ダイ
セル化学工業製キラルセルＯＤ、溶媒：ｎ−ヘキサン／
２−プロパノール＝９５／５、温度：４０℃、波長：２
５４ｎｍ、流速：０．５ｍｌ／分）により行った。（保
持時間：Ｓ体１９．０分、Ｒ体２１．５分）

【００１５
】

【実施例１】ＹＭ培地（酵母エキス１％、麦芽エキス１
％、ペプトン１％、グルコース５％、ｐＨ６．０）５ｍ
ｌを直径２１ｍｍの試験管に入れ、減菌後、表１に記載
した微生物を植菌し、３０℃で２４時間往復振盪培養を
行った。続いて、３−クロロプロピオフェノンを２５μ
ｇ加え、３０℃で７２時間往復振盪反応させた。反応後
、反応液を２ｍｌの酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層
を分析して生成した（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル
−１−プロパノールの光学純度と反応率を測定した。その結果を表１に示す。

【００１６】

【表１】

【００１７】

【発明の効果】本発明の微生物を用いた光学活性（Ｒ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造
法は、簡便に光学純度の高い光学活性（Ｒ）−３−クロ
ロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造を可能にす
るものであり、工業的に極めて有利である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　３−クロロプロピオフェノンを、光学
活性（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノ
ールに不斉還元する能力を有するキャンディダ属、ゲオ
トリカム属、シリンゴスポラ属、クラビスポラ属、スポ
リジオボラス属、サッカロミセス属、トルラスポラ属、
サッカロミコプシス属、ロドスポリジウム属に属する微
生物群から選ばれた微生物に接触させ、生成する光学活
性（Ｒ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノー
ルを採取することを特徴とする光学活性（Ｒ）−３−ク
ロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造法。
【請求項２】　　微生物が、キャンディダ・アルボレア
、キャンディダ・パラプシロシス、キャンディダ・フミ
コラ、キャンディダ・シルバノラム、ゲオトリカム・キ
ャンディダム、シリンゴスポラ・アルビカンス、クラビ
スポラ・ラシタニエ、スポリジオボラス・ジョンソニ、
サッカロミセス・セレビシエ、トルラスポラ・デルブレ
ッキ、サッカロミコプシス・フィバリゲラ、ロドスポリ
ジウム・マルビネラムである特許請求の範囲第１項記載
の製造法