JPH04173099A - 総コレステロール測定用試薬 - Google Patents
総コレステロール測定用試薬Info
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- JPH04173099A JPH04173099A JP30329990A JP30329990A JPH04173099A JP H04173099 A JPH04173099 A JP H04173099A JP 30329990 A JP30329990 A JP 30329990A JP 30329990 A JP30329990 A JP 30329990A JP H04173099 A JPH04173099 A JP H04173099A
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- cholesterol
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本発明は、生化学自動分析装置において使用される総コ
レステロール測定用試薬に関する。
レステロール測定用試薬に関する。
現在、臨床検査用に各メーカーの生化学自動分析装置が
数多く使用されている。これら自動分析装置は各検体を
収納する多くのセルが備わっている。 各セルは一つの検体が検査された後は、別の検体と置換
され２次の検査がなされる。この場合セル内の検体が置
換されても検査項目が同じのこともあれば、別の検査項
目のこともありうる。
数多く使用されている。これら自動分析装置は各検体を
収納する多くのセルが備わっている。 各セルは一つの検体が検査された後は、別の検体と置換
され２次の検査がなされる。この場合セル内の検体が置
換されても検査項目が同じのこともあれば、別の検査項
目のこともありうる。
このようにセル内の検体は常に置換され、その目的とす
る検査がなされるが、正確な検査結果を得るためには検
体を受は入れるセル内は常に清浄でなければならない。 しかしながら、最も頻繁に測定されている検査項目であ
る血液中の総コレステロール量を酵素比色法で測定した
場合、検査法の検体を除去して後それに使用されたセル
を洗浄しても、そのセルに次の検体が入り、その検体の
ための検査をしても正確な結果が得られないということ
があった。 本発明者は、この点を検討した結果、上記酵素比色法で
使用されるコレステロールエステラーゼがセル壁に付着
・残存していることが次に予定される検査を狂わせてい
る原因であることを発見した。 本発明は２以上のことに鑑み、生化学自動分析装置のセ
ル内にコレステロールエステラーゼを付着・残存させな
いように、改良された総コレステロール測定用試薬を提
供するものである。
る検査がなされるが、正確な検査結果を得るためには検
体を受は入れるセル内は常に清浄でなければならない。 しかしながら、最も頻繁に測定されている検査項目であ
る血液中の総コレステロール量を酵素比色法で測定した
場合、検査法の検体を除去して後それに使用されたセル
を洗浄しても、そのセルに次の検体が入り、その検体の
ための検査をしても正確な結果が得られないということ
があった。 本発明者は、この点を検討した結果、上記酵素比色法で
使用されるコレステロールエステラーゼがセル壁に付着
・残存していることが次に予定される検査を狂わせてい
る原因であることを発見した。 本発明は２以上のことに鑑み、生化学自動分析装置のセ
ル内にコレステロールエステラーゼを付着・残存させな
いように、改良された総コレステロール測定用試薬を提
供するものである。
本発明は、試薬の組成が、アスコルビン酸オキシダーゼ
・コレステロールオキシダーゼ・コレステロールエステ
ラーゼ・ペルオキシダーゼ・４−アミノアンチピリンか
らなる酵素試薬とリン酸緩衝液・Ｎ−エチル−Ｎ−（２
−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン
からなる熔解液であり、非イオン界面活性剤を１〜５ｇ
／！含有することを特徴とする総コレステロール測定用
試薬を要旨とする。 本発明の総コレステロール測定用試薬は酵素比色法で使
用されるためのものである。 本発明において非イオン界面活性剤とは分子中に水酸基
、エーテル結合、エステル基、酸アミド基などの親水性
原子団とアルキル基やアルキルアリル基なとの長鎖の親
油性原子団とを有するもので２例えば、ポリオキシエチ
レンオクチルフェニルエーテルやポリオキシエチレンノ
ニルフェニルエーテルのようなポリオキシエチレンアル
キルフェニルエーテルとポリオキシエチレンアシルエス
テルが最も好ましく、他にもポリオキシエチレンアルキ
ルエーテル類やポリオキシソルビタンアルキルエステル
類を挙げることができる。
・コレステロールオキシダーゼ・コレステロールエステ
ラーゼ・ペルオキシダーゼ・４−アミノアンチピリンか
らなる酵素試薬とリン酸緩衝液・Ｎ−エチル−Ｎ−（２
−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン
からなる熔解液であり、非イオン界面活性剤を１〜５ｇ
／！含有することを特徴とする総コレステロール測定用
試薬を要旨とする。 本発明の総コレステロール測定用試薬は酵素比色法で使
用されるためのものである。 本発明において非イオン界面活性剤とは分子中に水酸基
、エーテル結合、エステル基、酸アミド基などの親水性
原子団とアルキル基やアルキルアリル基なとの長鎖の親
油性原子団とを有するもので２例えば、ポリオキシエチ
レンオクチルフェニルエーテルやポリオキシエチレンノ
ニルフェニルエーテルのようなポリオキシエチレンアル
キルフェニルエーテルとポリオキシエチレンアシルエス
テルが最も好ましく、他にもポリオキシエチレンアルキ
ルエーテル類やポリオキシソルビタンアルキルエステル
類を挙げることができる。
本発明は、総コレステロール測定用試薬に非イオン界面
活性剤を１〜５ｇ／ｌ含有させることになっている。こ
れが１ｇ／！未満であれば、生化学自動分析装置により
酵素比色法で総コレステロールを測定した場合、検体を
入れたセル壁にコレステロールオキシダーゼが残存し、
そのセルを洗浄して次に控える検査（例えば、中性脂肪
や遊離コレステロールの臨床検査）を行っても不正確な
結果を得ることになる。またこれが５ｇ／ｊ！を超える
場合はそのセル内で発泡し、検査の妨げとなる。 生化学自動分析装置のセルの洗浄は２通常、セル内に水
を数回通すだけであるが、酵素比色法で総コレステロー
ルを測定した場合１本発明の試薬を用いれば、この程度
の水洗だけで、非イオン界面活性剤の働きにより、洗浄
の目的を達することができる。
活性剤を１〜５ｇ／ｌ含有させることになっている。こ
れが１ｇ／！未満であれば、生化学自動分析装置により
酵素比色法で総コレステロールを測定した場合、検体を
入れたセル壁にコレステロールオキシダーゼが残存し、
そのセルを洗浄して次に控える検査（例えば、中性脂肪
や遊離コレステロールの臨床検査）を行っても不正確な
結果を得ることになる。またこれが５ｇ／ｊ！を超える
場合はそのセル内で発泡し、検査の妨げとなる。 生化学自動分析装置のセルの洗浄は２通常、セル内に水
を数回通すだけであるが、酵素比色法で総コレステロー
ルを測定した場合１本発明の試薬を用いれば、この程度
の水洗だけで、非イオン界面活性剤の働きにより、洗浄
の目的を達することができる。
以下１本発明を実施例により具体的に説明する。
容量約１■ｌのセルにエステル型コレステロールを入れ
、コレステロールエステラーゼで遊離コレステロールに
変換後、このセルを洗浄し、そのセルを用いて、遊離コ
レステロールの測定を行い。 コレステロールエステラーゼの吸着がどれだけ防止でき
たかその効果を調査した。この場合、遊離コレステロー
ルの測定値がブランク値とどれだけ季離するかによって
１本発明の効果を調査した。 個々の測定条件は次のとおりである。 （１）セルは■日立製作所製７０５０の装置にあるもの
を使用した。 （２）セルに■水（ブランク）又は■本発明による総コ
レステロール測定用試薬（非イオン界面活性剤添加）、
■比較用の総コレステロール測定用試薬（非イオン界面
活性剤添加）を各３００μ！注入した。 総コレステロール測定用試薬の組成は次のとおりである
。 実施例 比較例 （酵素試薬） アスコルビン酸オキシダーゼ
２６６にロ ２６６ＫＵコシズテＵ−ルオキ
シダーゼ なし
なしプレスケロールエステラーゼ
１２８ＫＵ １２８Ｋｔｌベル
オキシダーｆ
５４９ＫＵ ５４９ＫＵ４−７ミノアンチ
ビリン なし
なしく溶解液） リン酸緩衝液 ９．７６０ｇ／ｌ ９
．７６０ｇ／ＩＮ−エチル−Ｎ〜（２−しトロキシ−３
０，３１４ｇ／Ｉ Ｏ，３１４ｇ／］−スル本プロ
白０−Ｆトルイジン （非イオン界面活性剤、ｇ／ｌ） ずりオキシエチレンオクチルフェニルエーテル
１． ３． ５ 無添加ポリオキシエチレンノ
ニルフェニルエーテル １． ３． ５
無添加ポリオキシエチレンアシルエステル
ｉ、 ３． ５ ｍ添ｍ（３）
上記ブランクを含め１１種のセルを水浴で３７°Ｃ８１
０分間加温した。次いで１．０ｍｌの水で５回洗浄した
。 （４）洗浄された上記１１種の各セルに、血清を３０μ
２注入し、遊離コレステロール用測定試薬を８００μ１
分注し、遊離コレステロールを酵素比色法で測定した。 この場合の試薬組成は、アスコルビン酸オキシダーゼ・
コレステロールオキシダーゼ・コレステロールエステラ
ーゼ・ペルオキシダーゼ・４−アミノアンチピリンから
なる酵素試薬とリン酸緩衝液・Ｎ−エチル−Ｎ−（２−
ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジンか
らなる溶解液であり、定量は■日立製作所製分光光度計
Ｕ−３２１０型を使用し、吸光度を測定し、算出した。 測定回数は各種セルは各々５本とし、−本のセルからの
吸光度は２回測定し３平均値を算出した。 （５）遊離コレステロールの測定結果は次のとおりであ
る。 ブランクの場合 ３５鞘ｇ／ｄ
１（実施例） ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル Ｉｇ／
ｌの場合 ５０ｍｇ／ｄｉ同上 ３ｇ／
ｌの場合 ４５顯ｇ／ｄ ］同上 ５ｇ／ｌ
の場合 ４５ｍｇ／ｄｌポリオキシエチレンノニルフ
エニ路エーテル １ｇ／ｌの場合 ５５ｔａｇ
／ｄＩ同上 ３ｇ／ｌの場合 ４４ｍｇ／ｄ
ｉ同上 ５ｇ／ｌの場合 ４０ｍｇ／ｄ］ｆ
りオキシエチレンアシルエステル １ｇ／ｌ
の場合 ５７ｍｇ／ｄｌ同上 ３ｇ／Ｉ
の場合 ５４ｍｇ／ｄ ］同上 ５ｇ／ｌの
場合 ４５ｍｇ／ｄ １（比較例） 非イオン界面活性剤無添加の場合 ９３ｍｇ／ｄ
］（６）以上のように本発明によれば、測定値はブラン
クの場合に近すき、かなり正確に遊離コレステロールの
測定ができていることがわかるが、比較例のように非イ
オン界面活性剤無添加の場合はブランク値よりも約３倍
高く測定されている。
、コレステロールエステラーゼで遊離コレステロールに
変換後、このセルを洗浄し、そのセルを用いて、遊離コ
レステロールの測定を行い。 コレステロールエステラーゼの吸着がどれだけ防止でき
たかその効果を調査した。この場合、遊離コレステロー
ルの測定値がブランク値とどれだけ季離するかによって
１本発明の効果を調査した。 個々の測定条件は次のとおりである。 （１）セルは■日立製作所製７０５０の装置にあるもの
を使用した。 （２）セルに■水（ブランク）又は■本発明による総コ
レステロール測定用試薬（非イオン界面活性剤添加）、
■比較用の総コレステロール測定用試薬（非イオン界面
活性剤添加）を各３００μ！注入した。 総コレステロール測定用試薬の組成は次のとおりである
。 実施例 比較例 （酵素試薬） アスコルビン酸オキシダーゼ
２６６にロ ２６６ＫＵコシズテＵ−ルオキ
シダーゼ なし
なしプレスケロールエステラーゼ
１２８ＫＵ １２８Ｋｔｌベル
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５４９ＫＵ ５４９ＫＵ４−７ミノアンチ
ビリン なし
なしく溶解液） リン酸緩衝液 ９．７６０ｇ／ｌ ９
．７６０ｇ／ＩＮ−エチル−Ｎ〜（２−しトロキシ−３
０，３１４ｇ／Ｉ Ｏ，３１４ｇ／］−スル本プロ
白０−Ｆトルイジン （非イオン界面活性剤、ｇ／ｌ） ずりオキシエチレンオクチルフェニルエーテル
１． ３． ５ 無添加ポリオキシエチレンノ
ニルフェニルエーテル １． ３． ５
無添加ポリオキシエチレンアシルエステル
ｉ、 ３． ５ ｍ添ｍ（３）
上記ブランクを含め１１種のセルを水浴で３７°Ｃ８１
０分間加温した。次いで１．０ｍｌの水で５回洗浄した
。 （４）洗浄された上記１１種の各セルに、血清を３０μ
２注入し、遊離コレステロール用測定試薬を８００μ１
分注し、遊離コレステロールを酵素比色法で測定した。 この場合の試薬組成は、アスコルビン酸オキシダーゼ・
コレステロールオキシダーゼ・コレステロールエステラ
ーゼ・ペルオキシダーゼ・４−アミノアンチピリンから
なる酵素試薬とリン酸緩衝液・Ｎ−エチル−Ｎ−（２−
ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジンか
らなる溶解液であり、定量は■日立製作所製分光光度計
Ｕ−３２１０型を使用し、吸光度を測定し、算出した。 測定回数は各種セルは各々５本とし、−本のセルからの
吸光度は２回測定し３平均値を算出した。 （５）遊離コレステロールの測定結果は次のとおりであ
る。 ブランクの場合 ３５鞘ｇ／ｄ
１（実施例） ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル Ｉｇ／
ｌの場合 ５０ｍｇ／ｄｉ同上 ３ｇ／
ｌの場合 ４５顯ｇ／ｄ ］同上 ５ｇ／ｌ
の場合 ４５ｍｇ／ｄｌポリオキシエチレンノニルフ
エニ路エーテル １ｇ／ｌの場合 ５５ｔａｇ
／ｄＩ同上 ３ｇ／ｌの場合 ４４ｍｇ／ｄ
ｉ同上 ５ｇ／ｌの場合 ４０ｍｇ／ｄ］ｆ
りオキシエチレンアシルエステル １ｇ／ｌ
の場合 ５７ｍｇ／ｄｌ同上 ３ｇ／Ｉ
の場合 ５４ｍｇ／ｄ ］同上 ５ｇ／ｌの
場合 ４５ｍｇ／ｄ １（比較例） 非イオン界面活性剤無添加の場合 ９３ｍｇ／ｄ
］（６）以上のように本発明によれば、測定値はブラン
クの場合に近すき、かなり正確に遊離コレステロールの
測定ができていることがわかるが、比較例のように非イ
オン界面活性剤無添加の場合はブランク値よりも約３倍
高く測定されている。
本発明によれば、コレステロールエステラーゼのセル壁
への付着が防止でき、生化学自動分析装置で連続的に測
定する場合のセルの洗浄が十分に行える。従って、総コ
レステロールの測定後、続けて中性脂肪や遊離コレステ
ロールの測定がなされても、その際、支障をきたさない
ことになる。 特許出願人 株式会社ニッショー 手続補正書（自発） 平成３年ｇ月 ２６日 総コレステロール測定用試薬 ３、補正をする者 住 所 大阪重化区本庄西３丁目９番３号明細書の「
発明の詳細な説明」の欄 ５、補正の内容 （１）明細書第６頁第４行目の「非イオン界面活性剤添
加」を「非イオン界面活性剤無添加」と訂正する。
への付着が防止でき、生化学自動分析装置で連続的に測
定する場合のセルの洗浄が十分に行える。従って、総コ
レステロールの測定後、続けて中性脂肪や遊離コレステ
ロールの測定がなされても、その際、支障をきたさない
ことになる。 特許出願人 株式会社ニッショー 手続補正書（自発） 平成３年ｇ月 ２６日 総コレステロール測定用試薬 ３、補正をする者 住 所 大阪重化区本庄西３丁目９番３号明細書の「
発明の詳細な説明」の欄 ５、補正の内容 （１）明細書第６頁第４行目の「非イオン界面活性剤添
加」を「非イオン界面活性剤無添加」と訂正する。
Claims (1)
- （１）試薬の組成が、アスコルビン酸オキシダーゼ・コ
レステロールオキシダーゼ・コレステロールエステラー
ゼ・ペルオキシダーゼ・４−アミノアンチピリンからな
る酵素試薬とリン酸緩衝液・Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒ
ドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジンから
なる溶解液であり、非イオン界面活性剤を１〜５ｇ／ｌ
含有することを特徴とする総コレステロール測定用試薬
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30329990A JPH04173099A (ja) | 1990-11-08 | 1990-11-08 | 総コレステロール測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30329990A JPH04173099A (ja) | 1990-11-08 | 1990-11-08 | 総コレステロール測定用試薬 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04173099A true JPH04173099A (ja) | 1992-06-19 |
Family
ID=17919287
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP30329990A Pending JPH04173099A (ja) | 1990-11-08 | 1990-11-08 | 総コレステロール測定用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04173099A (ja) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58201999A (ja) * | 1982-04-02 | 1983-11-25 | イバン・エンドレ・モドロビツチ | 経時安定性液状のコレステロ−ル検定用組成物 |
-
1990
- 1990-11-08 JP JP30329990A patent/JPH04173099A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58201999A (ja) * | 1982-04-02 | 1983-11-25 | イバン・エンドレ・モドロビツチ | 経時安定性液状のコレステロ−ル検定用組成物 |
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