JPH04148693A

JPH04148693A - グルコース転移物の製造方法

Info

Publication number: JPH04148693A
Application number: JP27074990A
Authority: JP
Inventors: Yoshio Narita; 成田　好雄; Atsuki Okamoto; 篤樹岡本
Original assignee: Nihon Cornstarch Corp
Current assignee: Nihon Cornstarch Corp
Priority date: 1990-10-09
Filing date: 1990-10-09
Publication date: 1992-05-21

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〈産業上の利用分野〉本発明は、ａ−グルコシダーゼによるグルコース転移物
の製造方法に関する。

さらに詳しくは、澱粉の加水分解物またはこれにａ−グ
ルコシダーゼの受容体を添加した混合物にマルトトリオ
ースよりマルトースを生成するα−アミラーゼおよびα
−グルコシダーゼを作用させることを特徴とするグルコ
ース転移物の製造方法に関する。

なお、以下の説明で「セアンデロース」とは、系統的命
名法による三糖類化合物ｒＯ−ａ−Ｄ−グルコピラノシ
ル−（１−６）−０−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１
−２）β−Ｄ−フラクトフラノシド」のことである。

〈従来の技術〉最近、ａ−グルコシダーゼによるグルコース転移生成物
の製造がよく行なわれており、特にイソマルトース、パ
ノース、イソマルトトリオース、セアンデロースなどは
、ビフィズス菌増殖活性やう蝕防止の効果のあることが
知られており注目されている。

従来、ａ−グルコシダーゼを用いてグルコース転移物を
製造する方法としては、マルトース含有シラツブにトラ
ンスグルコシダーゼを作用させイソマルトース、パノー
ス、イソマルトトリオースなどの分岐オリゴ糖を製造す
る方法や、澱粉の液化液にα−アミラーゼ、β−アミラ
ーゼおよび枝切り酵素とα−グルコシダーゼを作用させ
る方法（特開昭６ｌ−２１９３４５）　、マルトースま
たは澱粉よりマルトースを製造する途中の糖化液に砂糖
を混合しα−グルコシダーゼを作用させてセアンデロー
スを製造する方法（特願平１−３２３５１１：出願時未
公開）が知られている。

〈発明が解決しようとする課題〉しかしながら、従来技術においてα−グルコシダーゼに
より特定のグルコース転移物の収率な高めるのは困難で
あった。

マルトース含有シラツブを原料とする方法の場合、原料
中に３ｗｉ類以上のオリゴ糖やデキストリンが含まれる
と、これらに対するａ−グルコシダーゼの作用が弱いた
め反応後もこれらが残存したり、マルトトリオースなど
にグルコースを転移した分岐４糖類などが生成されるた
め、イソマルトースまたはパノースの含有率は低くなる
。このため原料とするシラツブのマルトース含有率を高
くする必要があり、例えば９０％以上のマルトースを得
るには分離操作や結晶化などの特殊な処理方法が要求さ
れるという問題点があった。

また、澱粉の液化液にβ−アミラーゼ、枝切り酵素とと
もにα−グルコシダーゼを作用させる場合においては、
デキストリンの残存や４糖類以上の分岐糖の生成を抑え
るためには、低い分解度（ＤＥ１〜４）の澱粉液化液が
要求され、老化し易くなるため製造が難しく、また枝切
り酵素の添加量を多く必要とし、原料をかなり低濃度（
２０％以下）にする必要があるのでかなりのコストがか
かるという問題点があった。

本発明の目的は、イソマルトース、パノース、イソマル
トトリオース、セアンデロースなどのα−１，６結合を
有する分岐オリゴ糖をグルコース転移により効率よく、
即ち高収率で製造する方法を提供するものである。

〈課題を解決するための手段〉本発明は、澱粉の加水分解物またはこれにα−グルコシ
ダーゼの受容体を添加した混合物に、マルトトリオース
よりマルトースを生成するα−アミラーゼおよびａ−グ
ルコシダーゼを作用させることを特徴とするグルコース
転移物の製造方法である。

（１）本発明で原料として用いられる澱粉の加水分解物
としては、コーンスターチや馬鈴薯澱粉、タピオカ澱粉
などの市販の澱粉を常法により酸および／またはａ−ア
ミラーゼで液化した液化液や、さらにこれをβ−アミラ
ーゼ、ブルナラーゼやイソアミラーゼなどの枝切り酵素
、液化型α−アミラーゼなどを作用させた糖化液が用い
られる。

このとき液化液の分解度としては、ＤＥ１〜２０が好適
で、ＤＥＩ〜ｌＯがより好ましい、また、濃度としては
１０〜４５％が好適である。ＤＥ１未満では、老化しや
すくなり製造が困難となり、ＤＥ２０を超えると、目的
とするグルコース転移物の収率が低くなり、それぞれ望
ましくない、しかし、これらの範囲は、従来における分
岐オリゴ糖を製造する場合の原料液化液の場合に比して
、高いＤＥのものを使用可能である。

上記の澱粉の加水分解物にマルトトリオースよりマルト
ースを生成するα−アミラーゼおよびα−グルコシダー
ゼを作用させる。

このときの酵素添加は、同時に添加してもよいが、各々
の添加時期を適宜設定することもできる、たとえば、マ
ルトトリオースよりマルトースを生成するａ−アミラー
ゼを先に添加し、１〜４０ｈ後にａ−グルコシダーゼを
添加することはより好適である。

本発明に用いられる酵素を以下に説明する。

ａ−グルコシダーゼとしては、マルトオリゴ糖に作用し
てグルコシル転移活性の高いもの、たとえばアスペルギ
ルス・ニガー起源のトランスグルコシダーゼなどが用い
られる。

マルトトリオースよりマルトースを生成するα−アミラ
ーゼとしては、マルトトリオース分解活性が高くマルト
ースを生成するもの、たとえばストレブトマイセス・バ
イグロスコピカス（ＤｉｅＳｔａｒｋｅ　２６　、４１
３　、　１９７３　）　、ストレブストマイセス・プレ
コックス（特開昭５０−５２２７７号公報参照）、バシ
ラス菌株Ｃ５９９またはこのα−アミラーゼのコード遺
伝子を組み込んだバシラス・サブチリス（特開昭６０−
２１８５号公報参照）などを起源とするα−アミラーゼ
が用いられる。

本発明における酵素添加量、反応のｐＨおよび温度、反
応時間などの反応条件は酵素の種類に応じて適宜設定さ
れつるが、たとえば、酵素添加量は原料固形分に対して
ａ−グルコシダーゼ２０〜２０００Ｕ／ｇ、マルトトリ
オースよりマルトースを生成するａ−アミラーゼ０．０
１〜１％、ｐＨ４，０〜６．５、温度５０〜６５℃、反
応時間１０〜１００ｈが好適である。

転移の対象となるα−グルコシダーゼの受容体をグルコ
ース、マルトースとする場合は、上記の澱粉加水分解物
より反応中に生成され供給されるが、それ以外の場合、
たとえば砂糖などを受容体として用いる場合は、ａ−グ
ルコシダーゼを作用させる前に添加混合する。添加比率
は適宜であるが、たとえば上記原料に対して固形分比率
で０゜２〜４．０が好適である。

反応の終了した液は、常法に従って精製、濃縮してシラ
ツブとしたり、乾燥して粉末としたりすることができる
。

またさらに、イオン交換樹脂カラムを用いたクロマイト
分離装置などにより分画することにより、グルコース転
移物の純度をより高くすることもできる。

〈実施例〉以下、本発明を実施例に基づいて、より詳細に説明をす
る。

実施例１゜コーンスターチから常法により調製した液化液１０ｋｇ
（濃度３０％、ＤＥ７．５）をｐＨ５，０に調整し、こ
れに２．４ｇのβ−アミラーゼ（玉野製薬■製）および
８．４ｇのプルラナーゼ（ノボ社製、プロモザイム２０
ＯＬ）を加え６０℃で２０ｈ攪拌した。得られた糖化液
にマルトトリオースよりマルトースを生成するａ−アミ
ラーゼ（ノボ社製、マルトゲナーゼ）の１０ｇおよびア
スペルギルス・ニガーのα−グルコシダーゼ（大野製薬
味製。トランスグルコシダーゼ、３４０．０００　ｕ／
ｍｌ）の７ｍｌを加え６０℃で攪拌した。この反応液の
糖組成の経時変化を第１表および第１図に示す、イソマ
ルトースの最高含有率はα−グルコシダーゼ添加より２
０ｈ後で２４．９％であった。

実施例２゜馬鈴薯澱粉から常法により調製した液化液１０ｋｇ（濃
度３０％、ＤＥ４．５）をｐＨ５，０に調整し、これに
２．５ｇのβ−アミラーゼ（玉野製薬味製）および８．
４ｇのプルラナゼ（ノボ社製、プロモザイム２００Ｌ）
を加え６０℃でｌＯｈ攪拌した後、１．０ｇの液化型の
ａ−アミラーゼ（大和化成■製、クライスターゼ）を添
加してさらに６０℃で１０ｈ攪拌した。得られた糖化液
にマルトトリオースよりマルトースを生成するａ−アミ
ラーゼ（ノボ社製、マルトゲナーゼ）のｌｏｇを添加し
６０℃で１０ｈ攪拌し、さらにアスペルギルス・ニガー
のａ−グルコシダーゼ（大野製薬味製。トランスグルコ
シダーゼ）の１．５ｍｌを加え６０℃で攪拌した。この
反応液の糖組成の経時変化を第２表および第２図に示す
、パノースの最高含有率はａ−グルコシダーゼ添加より
１５ｈ後で３４．２％であった。

実施例３゜コーンスターチから常法により調製した液化液１０ｋｇ
（濃度３０％、ＤＥ５．５）をｐＨ５，０に調整し、こ
れに２．４ｇのβ−アミラーゼ（玉野製薬側製）および
８．４ｇのブルナラーゼ（ノボ社製、プロモザイム２０
ＯＬ）を加え６０℃で１０ｈ攪拌した後、１．０ｇの液
化型のα−アミラーゼ（大和化成側製、クライスターゼ
）を添加してさらに６０℃で１０ｈ攪拌した。これに砂
糖の一３０％水溶液１０ｋｇを加えて混合した。これに
マルトトリオースよりマルトースを生成するａ−アミラ
ーゼ（ノボ社製、マルトゲナーゼ）の１０ｇおよびアス
ペルギルス・ニガーのａ−グルコシダーゼ（玉野製薬側
製、トランスグルコシダーゼ）の２ｍｌを加え６０℃で
攪拌した。この反応液の糖組成の経時変化を第３表およ
び第３図に示す。

セアンデロースの最高含有率はα−グルコシダーゼ添加
１５ｈ後で２１．４％であった。

比較例１゜マルトトリオースよりマルトースを生成するα−アミラ
ーゼＣノボ社製、マルトゲナーゼ）を添加しない他は、
実施例１と同様の反応を行なったこの反応液の糖組成の
経時変化を第４表および第１図に示す、イソマルトース
の最高含有率はα−グルコシダーゼ添加３０ｈ後で２３
．６％であった。

比較例２゜マルトトリオースよりマルトースを生成するα−アミラ
ーゼ（ノボ社製、マルトゲナーゼ）を添加しない他は、
実施例２と同様の反応を行なったこの反応液の糖組成の
経時変化を第５表および第２図に示す、パノースの最高
含有率はα−グルコシダーゼ添加２Ｏｈ後で３０．４％
であった。

比較例３゜マルトトリオースよりマルトースを生成するα−アミラ
ーゼ（ノボ社製、マルトゲナーゼ）を添加しない他は、
実施例３と同様の反応を行なった、この反応液のＩＮ組
成の経時変化を第６表および第３図に示す、セアンデロ
ースの最高含有率はα−グルコシダーゼ添加２Ｏｈ後で
１９．７％であった。

〈発明の効果〉実施例および比較例より明らかなように、マルトトリオ
ースよりマルトースを生成するａ−アミラーゼの添加は
、グルコース転移物の最高含量を増加させ、また最高含
量に達する時間も短縮させる効果があることがわかる。

このことから、本発明のａ−グルコシダーゼによるグル
コース転移物の製造方法は収率が高く、反応時間も短縮
できるので効率がよく工業的に有用である。

第表〈実施例１〉第表〈実施例２〉第表〈実施例３〉第表〈比較例！〉

Claims

【特許請求の範囲】１、澱粉の加水分解物またはこれにα−グルコシダーゼ
の受容体を添加した混合物に、マルトトリオースよりマ
ルトースを生成するα−アミラーゼ、およびα−グルコ
シダーゼを作用させることを特徴とするグルコース転移
物の製造方法。２、澱粉の加水分解物に、マルトトリオースよりマルト
ースを生成するα−アミラーゼ、およびα−グルコシダ
ーゼを作用させることを特徴とするイソマルトースおよ
びパノースの製造方法。３、澱粉の加水分解物に砂糖を添加し、これにマルトト
リオースよりマルトースを生成するα−アミラーゼ、お
よびα−グルコシダーゼを作用させることを特徴とする
セアンデロースの製造方法。