JPH04148691A

JPH04148691A - 改質リン脂質の製造方法

Info

Publication number: JPH04148691A
Application number: JP26936590A
Authority: JP
Inventors: Yoichiro Totani; 戸谷　洋一郎; Takeshi Watabe; 健渡部; Setsuko Hara; 節子原
Original assignee: Nisshin Oil Mills Ltd
Current assignee: Nisshin Oillio Group Ltd
Priority date: 1990-10-09
Filing date: 1990-10-09
Publication date: 1992-05-21

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明はリン脂質と魚油、海産動物油脂又は淡水産動物
油脂等の高度不飽和脂肪酸（以下、［ＰＵＦＡＪと称す
る）成分含有トリグリセリド類とからなる基質にエステ
ル交換能を有する酵素な作用させて、リン脂質と高度不
飽和脂肪酸トリグリセリド類との間でエステル交換を行
わせることを特徴とする改質リン脂質の製造方法に関す
る。

［従来の技術］高度不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）　、特にＥＰＡ及びＤＨ
Ａは血小板の凝集を抑制すると共に、血栓の生成を防ぐ
働きを備えていることから、心筋梗塞及び脳血栓等の予
防上有効な物質として知られている。近年では、ＰＵＦ
Ａを主構成脂肪酸とするリン脂質（以下、ｒＰＵＦＡ−
ＰＬＪと称する）の生体内作用が新たに注目を集めてい
る。　本発明は通常の動植物レシチンにＰＵＦＡを導入
することにより、多方面でその応用が期待されるＰＵＦ
Ａ−ＰＬを安価で大量に製造する方法を確立することを
目的とする。

従来、ＰＵＦＡ−ＰＬを得る方法としては、魚類の内臓
脂質中に含まれるＰＵＦＡ−ＰＬを溶剤で抽出した後に
カラムクロマトグラフィーによって濃縮する方法が提案
されている（特開昭６４−５０８９０号公報）、シかし
、魚油中のＰＵＦＡ−ＰＬの存在量が少ないことから、
価格的面、量的面等から、実用化には困難が多い。溶剤
抽出以外の方法として酵素の利用によるリン脂質の改質
が提案されている１例えば、特開昭６１−１２９１９１
号公報では、ホスファチジルコリンをホスホリパーゼに
よって加水分解してアシル基部分を遊離させ、他方の加
水分解物に雑魚油から濃縮したドコサヘキサエン駿を結
合させる方法が提案されている。

しかし、操作が多段階にわたり手間がかかることから、
実用的に問題が多いと考えられる。また、特開平２−３
５０９３号公報では、リン脂質と脂肪酸又は脂肪酸のｍ
個飽和低級アルコールエステルとからなる基質に酵素を
作用させることによってリン脂質の改質を行なっている
。

［発明が解決しようとする課題］本発明者らはこれらに対して、リン脂質と入手が容易か
つ安価である魚油等の高度不飽和脂肪酸成分含有トリグ
リセリド類とからなる基質に特定の酵素を作用させる際
に、原料の前処理を要せず、しかも−層簡便で、得られ
るＰＵＦＡ−ＰＬの品質及びコスト的にも実用的である
調製方法の探索を試みた。

従来知られている方法では、魚油を原料とした場合には
、通常の酵素反応条件で魚油の加水分解が進行して改質
物の収率が低下するという問題が生じる。本発明者らは
かかる問題を解決すべく、酵素による魚油の加水分解を
制御する方法を鋭意検討した結果、本発明を完成した。

［課題を解決するための手段］本発明は次の構成からなる改質リン脂質の製造方法に関
するニリン脂質と高度不飽和脂肪酸成分含量の高いトリグリセ
リド類とを基質とし、ヘキサン類と９０％以下の水分を
含むグリセリンとの混合系において、エステル交換作用
を有する酵素の存在下に、該リン脂質と高度不飽和脂肪
酸含有トリグリセリド類との間でエステル交換を行わせ
る。

本発明の酵素によるエステル交換の対象となるリン脂質
としては、下記のものを例示できる：・ホスファチジル
コリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチ
ジルイノシトール等のリン脂質単体の他、・大豆レシチン、卵黄レシチン等の動植物起源の市販レ
シチン又はその抽出油滓及び・これらリン脂質から結合脂肪酸の一部がはずれたリゾ
型リン脂質成分を含む原料等がある。

ＰＵＦＡ成分を含有する油脂は下記の動物の油脂又は肉
から得られる：・イワシ、サバ、サンマ、マグロ、バタバタ、タラ、シ
シャモ、ニシン、サケ、カベリン、アンチョビ、ウナギ
、マス等の魚類、・アシ力、アザラシ、トド、オットセイ、セイウチ、ミ
ンククジラ等の海産動物、・オキアミ等の動物性プランクトン類。

これら油脂の濃縮物又は２種類以上の混合物も使用可能
である。

本発明のエステル交換反応はヘキサンと０．１〜９０％
の水分を含むグリセリンとの混合系中で行なうことを特
色とする。両者の使用比率は通常、前者／後者＝２／１
〜１／２である。反応系にグリセリンを使用することに
より、エステル交換反応と競争的に起こる加水分解反応
を抑制してリン脂質の回収率を向上させることが可能と
なった。

反応は温度２０〜６０℃、好ましくは３５〜４０℃にお
いて、通常１〜７２時間の振とう又は撹拌等の条件下で
行われる。

反応系のリン脂質の構成脂肪酸と高度不飽和脂肪酸含有
トリグリセリド類例えば、魚油、海産動物油脂又は淡水
産動物油脂中の脂肪酸とのモル比は特に限定されないが
、通常は前者／後者＝１／１〜１／１０の範囲、好まし
くはｌ／１〜１／３に選ぶ。

本発明の反応において用いられる酵素はトリグリセリド
に対する加水分解酵素である。例えば、Ｃａｎｄｉｄａ
　ｃｙｌｉｄｒａｃｅａ、　Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ　ｄｅｌ
ｅｍａｒ、　Ｍｕｃｏｒｍｉｅｈｅｉ等を起源とする酵
素が使用可能である。また、Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ　ｄｅｌ
ｅｍｅｒ起源等の特異性を示す酵素を利用することによ
り、特定部位にＰＬＩＦＡを導入したｐｕＦＡ−ｐＬを
調製することも可能である。

所定時間を経過した反応液は必要に応じて適宜の濃縮機
による濃縮、更には噴霧乾燥又は凍結乾燥等の乾燥手段
を施して、濃縮物又は乾燥品とする。また、前記の任意
の段階で、ヘキサン、クロロホルム、ベンゼン又はホル
ヒ溶媒（クロロホルム／メタノール＝２／１）等の適宜
の溶剤を用いて反応系から反応生成物を抽出分離するこ
とにより、目的物を得ることができる。得られたＰＵＦ
Ａ−ＰＬを食品用として使用する場合には、溶剤として
、ヘキサンを用いることが適当である。必要により、更
に溶剤分別、カラム処理等の精製を行なった後に溶剤を
留去すれば、更に高純度のＰＵＦＡ−ＰＬが得られる。

比較例１大豆リン脂質（日清製油■製）３ｇと魚油４ｇとをヘキ
サンｉｏ＋ｎｌに溶解後、水１０ｍ１、リパーゼＯＦ　
［Ｃａｎｄｉｄａ　ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ起源の酵素
（名糖産業■製）］　０．７ｇを加えた。

反応容器を密栓し、３７℃で４８時間振とう（３５０ｒ
ｐｍ）　シつつ反応させた。反応後、減圧ロータリーエ
バポレーターでヘキサンを除去し、次にホルヒ溶媒５０
ｍ１を加えて遠心分離（３５００ｒｐｍで２０分間）を
行い、クロロホルム層と水層とをパスツールピペットを
用いて分離した。クロロホルム層に無水硫酸ナトリウム
を加えて脱水し、酵素を取り除く為に濾過した後、クロ
ロホルムをエバポレーション（蒸発除去）して反応混合
物を得た。

この反応混合物に、その重量の約２０倍量のアセトンと
少量の１０％塩化マグネシウム−メタノール溶液とを加
え、１時間氷冷した後に濾過することにより、粗ＰＵＦ
Ａ−ＰＬを得た。得られた粗ＰＵＦＡ−ＰＬを真空乾燥
器中で１夜乾燥後に秤量した。

反応の結果は下記のとおりであった：・エステル交換率４４．４％、・リン脂質回収率１７．０％、・エステル交換リン脂質回収率７．５％。

得られた粗ＰＵＦＡ−ＰＬをメチルエステル化した後に
、そのＧＬＣ分析を行なって、脂肪酸組成を求めた。結
果を表１に示す。

ＧＬＣの分析結果から、エステル交換リン脂質の脂肪酸
組成を求め、エステル交換反応により新たに導入された
脂肪酸の割合をエステル交換率とした。エステル交換リ
ン脂質回収率は次式に示す様に、反応後に得られたリン
脂質の回収率とエステル交換率より算出した。

エステル交換リン脂質回収率（％）＝リン脂質回収率×エステル交換率×１００実施例１大豆リン脂質３ｇと魚油４ｇとをヘキサン１０ｍ１に溶
解した後、グリセリンｌｏｍｌ、リパーゼＯＦ０．７ｇ
を加えた。反応容器を密栓し、３７℃で４８時間振どう
（３５０ｒｐｍ）　Ｌ、つつ反応を行なった。以下、比
較例１と同様の操作を行なって粗ＰＵＦＡ−ＰＬを得た
。比較例１と同様にして粗ＰＵＦＡ−ＰＬの分析を行な
って脂肪酸組成を求めた（表１参照）。

その結果、次のことが判る：・エステル交換率　３１．８％で、水使用時に比較して
却って低下した、・リン脂質回収率　４６．８％、水使用時に比較して２
倍以上に上昇した。

・エステル交換リン脂質回収率　１４．９％、水のみの
系において反応を行なった場合よりも著しく上昇した。

実施例・２大豆リン脂質３ｇと魚油４ｇとをヘキサン１０ｆｆｉ１
に溶解した後に、水とグリセリンとの混合系（１：１）
　　１０ｍｌ及びリパーゼＯＦ０．７ｇを加えた。

反応容器を密栓し、３７℃で４８時間振とう（３５０ｒ
ｐｍ）　シつつ反応を行なった。以下、比較例１と同様
にして粗ＰＵＦＡ−ＰＬを得た。比較例１と同様にして
粗ＰＵＦＡ−ＰＬの分析を行なって脂肪酸組成を求めた
（表１参照）。

その結果、次のことが判る：・エステル交換率　３２．４％、・リン脂質回収率　４２．９％、・エステル交換リン脂質回収率　１３．９％。

水のみの系において反応を行なった場合よりも各数値共
に著しく上昇した。

表　　１＊１：炭素原子数１８個及び不飽和結合２個含有。

［発明の効果］本発明方法によれば、ＰＵＦＡを主構成脂肪酸成分とす
るＰＵＦＡ−ＰＬが歩留り良く、容易な操作及び低コス
トで製造できる。

本発明方法によって得られたＰＵＦＡ−ＰＬは本質的に
食品原料及び食品に許される条件で製造可能であるから
、生体への安全性に優れる。

なお、本発明方法は酵素を利用することから、高温を要
しない。従って、基質又は生成エステルの劣化も分解も
生じさせない。

Claims

【特許請求の範囲】

　リン脂質と高度不飽和脂肪酸成分含量の高いトリグリ
セリド類とを基質とし、ヘキサン類と９０％以下の水分
を含むグリセリンとの混合系において、エステル交換作
用を有する酵素の存在下に、該リン脂質と高度不飽和脂
肪酸含有トリグリセリド類との間でエステル交換を行わ
せることを特徴とする改質リン脂質の製造方法。