JP5000035B2 - ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 - Google Patents
ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5000035B2 JP5000035B2 JP2000266569A JP2000266569A JP5000035B2 JP 5000035 B2 JP5000035 B2 JP 5000035B2 JP 2000266569 A JP2000266569 A JP 2000266569A JP 2000266569 A JP2000266569 A JP 2000266569A JP 5000035 B2 JP5000035 B2 JP 5000035B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dpa
- oil
- docosapentaenoic acid
- acid
- glyceride
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 title claims description 54
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 title claims description 26
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 title claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 18
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 43
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 41
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 17
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 17
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 17
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 14
- 239000003925 fat Substances 0.000 claims description 14
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 claims description 14
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 9
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 5
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims description 4
- 229940119224 salmon oil Drugs 0.000 claims description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 claims description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 10
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 8
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 7
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 6
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 6
- 238000000199 molecular distillation Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 239000011552 falling film Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- 235000014593 oils and fats Nutrition 0.000 description 3
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- SPSPIUSUWPLVKD-UHFFFAOYSA-N 2,3-dibutyl-6-methylphenol Chemical compound CCCCC1=CC=C(C)C(O)=C1CCCC SPSPIUSUWPLVKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001149724 Cololabis adocetus Species 0.000 description 2
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 2
- 241000277329 Oncorhynchus keta Species 0.000 description 2
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 2
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010354 butylated hydroxytoluene Nutrition 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 2
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 2
- 235000019512 sardine Nutrition 0.000 description 2
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 2
- -1 sockeye salmon Chemical compound 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 241000252203 Clupea harengus Species 0.000 description 1
- 241000555825 Clupeidae Species 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000277338 Oncorhynchus kisutch Species 0.000 description 1
- 241000277277 Oncorhynchus nerka Species 0.000 description 1
- 241000199919 Phaeophyceae Species 0.000 description 1
- 241000206572 Rhodophyta Species 0.000 description 1
- 241000269851 Sarda sarda Species 0.000 description 1
- 241001125046 Sardina pilchardus Species 0.000 description 1
- 241000269821 Scombridae Species 0.000 description 1
- 241001504592 Trachurus trachurus Species 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 150000001765 catechin Chemical class 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N d-alpha-tocopherol Natural products OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 1
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940013317 fish oils Drugs 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 235000020640 mackerel Nutrition 0.000 description 1
- 150000002759 monoacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 150000003595 thromboxanes Chemical class 0.000 description 1
- 235000010384 tocopherol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001295 tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は水産油脂からドコサペンタエン酸が濃縮されたドコサペンタエン酸含有グリセリドを製造するドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
イワシ、サバ、サンマ、アジ等の魚類の脂質（魚油）、あるいは紅藻、褐藻などの藻類の脂質、甲殻類並びに貝類や海産動物類の脂質などの構成脂肪酸中には、高度不飽和脂肪酸（以下、PUFAと略す）が多量に含まれている。このうち、エイコサペンタエン酸（以下、EPAと略す）やドコサヘキサエン酸（以下、DHAと略す）などはω-3系列の不飽和脂肪酸であり、特にEPAはプロスタグランジンやトロンボキサンとの関連性において、近年その生理活性が注目され、動脈硬化や高脂血症の医薬品として既に市販されている。また、医薬品分野だけでなく、食品全般、飼料などの素材として多岐にわたって利用されている。
【０００３】
一方、ドコサペンタエン酸（以下、DPAと略す）は、EPAやDHA同様ω-3系列の脂肪酸であるが、これを含有する油脂は特殊な魚油等に限られており、その濃度も1〜2％と低いものである。しかしながら、DPAはEPAと比較してはるかに高い生理活性が確認されており（例えば「Prostaglandins, Leucotriens and Essential Fatty Acids(1996),54,319-325」参照)、DPAを濃縮したグリセリドについて、医薬品及び食品への応用が期待されている。
【０００４】
なお、以下の説明では、グリセリドとは、モノアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、トリアシルグリセロールの混合物と定義する。
【０００５】
ここで、従来のグリセリドの形でEPA,DPA,DHA等のPUFAを濃縮する方法としては、
（１）リパーゼによる加水分解法
（２）ウインタリング法（低温分別法または低温溶媒分別法）
（３）分子蒸留法
等が知られている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、前述のようにDPAを含有する油脂は限られており、しかも脂肪酸純度も1〜2％と低い。従って、例えばDPA純度5％以上のグリセリドを得るためには、溶媒分別法と酵素反応、あるいはエステル交換反応、合成法（遊離脂肪酸とグリセリンとの脱水縮合反応）等の他の工程を組み合わせなければならず、煩雑であり、また得られる油脂の収率も低く、製造コストも非常に高くなるという問題点があった。
【０００７】
そこで、本発明は、煩雑な工程を経ることなくDPAをグリセリドの形で収率良く、且つ低コストで製造することのできるドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明は、ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法において、ドコサペンタエン酸を3％以上含有する水産油脂を原料とすることを特徴とする。
【０００９】
一般的な水産動物の脂質中に含まれるDPA含量は、例えばイワシ油約2.3％、サンマ油約1.2％、スルメイカ肝油1.1％、ニシン油0.6％で、（改訂3版油脂化学便覧、日本油化学協会編、p111、1990）3％を越えるものは少ない。しかしながら、サケから抽出された油脂中のDPA含量は3％を越え、アザラシから抽出された油脂中のDPA含量は4％を越えるものであり、DPAに富むことが知られている。
【００１０】
そこで、本発明は、DPAを含有する水産油脂、特にサケ油又はアザラシ油を原料とし、リパーゼによりDPA以外を選択的に加水分解することでDPAをさらに高純度に効率良く濃縮する。
【００１１】
ここで言う水産油脂とは水産動植物から得られる油脂のことであり、魚類、哺乳類、藻類（微細藻を含む）、その他水圏に生息する動植物由来の油脂を指す。
【００１２】
サケ油は、ベニザケ、シロザケ、ギンザケ等、DPAを含有する油脂であれば、全て使用が可能であるが、DPAを多く含むシロザケが特に好ましい。
【００１３】
アザラシ油は、ゴマフアザラシ、タテゴトアザラシ等、DPAを含有する油脂であれば、全て使用が可能である。
【００１４】
リパーゼによる加水分解法を用いる際使用するリパーゼとしては、アルカリゲネス（Alcaligenes)属、キャンディダ(Candida)属、リゾプス(Rhizopus)属、ムコール(Mucor)属、シュードモナス(Pseudomonas)属、ジオトリカム(Geotricum)属、およびブタ膵臓に由来したものが挙げられる。
【００１５】
本発明において使用するリパーゼは、DPAに対する反応性が低い酵素が必要条件である。また、アザラシ油はグリセロールの1,3位にDPAを多く結合しているので、アザラシ油を使用するときは1,3特異型リパーゼよりランダム型リパーゼの方がより効果的で好ましく、特にキャンディダ属及びシュードモナス属に由来するリパーゼが好ましい。
【００１６】
なお、1ユニット（U）とは、オリーブ油を基質として、1分間に1μmolの脂肪酸を遊離する酵素量とする。
【００１７】
本発明で用いるリパーゼの反応条件は、以下の通りである。
【００１８】
すなわち、リパーゼの使用量は、油脂1ｇあたり、10〜2000ユニット(U)の範囲であり、好ましくは50〜600ユニット(U)である。
【００１９】
水の添加量は油脂に対して5〜500重量％の範囲であり、好ましくは10〜200重量％である。
【００２０】
pHは6.0〜10.0の範囲が好ましく、このpHを調節するために緩衝液を用いるとさらに効果的で、pHとして7.0〜8.5が特に好ましい範囲である。
【００２１】
反応は、大気下で行っても良いが、PUFAを多量に含む場合は、不活性ガス下、例えば窒素ガス、炭酸ガスの雰囲気下にしておくと脂肪酸の劣化を防ぐことができる。また、酸化防止剤として、例えばトコフェロール、カテキン類、BHA（ブチルヒドロキシアニソール）、BHT（ジブチルヒドロキシトルエン）等を併用しても良い。
【００２２】
反応温度は20〜60℃の範囲が好ましく、特に25〜50℃の範囲が好ましい。
【００２３】
反応は撹拌した方が望ましいが、乳化状態にして静置反応もできる。また、反応はバッチ式でも良いが、連続式として固定化酵素カラムも使用できる。
【００２４】
加水分解の程度は、反応中の加水分解油をサンプリングし、酸価を測定することにより知ることができる。得られるDPAグリセリドの濃縮度及び収率は、加水分解油の分解の程度、すなわち加水分解油の酸価によって推定できる。本発明の目的からは、加水分解油の酸価が50〜150になった時点で反応を終了するのが望ましい。通常、1〜24時間の範囲内で行われる。
【００２５】
もし、酸価が目標の値に達しない場合は、反応時間や反応温度で調節できる。
【００２６】
上記加水分解油中には、目的物であるDPAグリセリドのほかに遊離脂肪酸を含んでいるため、DPAグリセリドを得る為には、遊離脂肪酸を除去する必要がある。脂肪酸を除去する方法としては、通常行われているアルカリ脱酸法、分子蒸留法のほかに、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、低温結晶法、及び減圧水蒸気蒸留法、又はこれらを組み合わせた方法を適用する事ができる。これらリパーゼ処理後の各工程については特に限定されるものではない。
【００２７】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を実施例について説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２８】
【実施例１】
キャンディダ(Candida)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（360,000U/g)を水100ｇに溶解し、さらにタテゴトアザラシ油（EPA：7.0％、DPA：4.5％、DHA：9.0％、酸価：1.0）100ｇを混合したものを、40℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品1)は45.9ｇであり、このグリセリドはDPA純度が7.5％、DPA回収率が71.4％、酸価が0.6であった。
【００２９】
【実施例２】
シュードモナス(psuedomonas)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（90,000/g)を水100ｇに溶解し、さらにタテゴトアザラシ油（EPA：7.2％、DPA：4.7％、DHA：8.9％、酸価：1.0）100ｇを混合したものを、38℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品1)は49.8ｇであり、このグリセリドはDPA純度が7.9％、DPA回収率が80.4％、酸価が0.6であった。
【００３０】
【実施例３】
キャンディダ(Candida)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（360,000U/g)を水100ｇに溶解し、さらにサケ油（EPA：7.8％、DPA：3.2％、DHA：13.0％、酸価：1.0）100ｇを混合したものを、40℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品2)は42.0ｇであり、このグリセリドはDPA純度が5.8％、DPA回収率が75.1％、酸価が0.3であった。
【００３１】
【比較例１】
キャンディダ(Candida)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（360,000U/g)を水100ｇに溶解し、タテゴトアザラシ油の代わりにカツオ油（EPA：4.8％、DPA：1.5％、DHA：27.0％、酸価：0.5）100ｇを混合したものを、40℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品1)は40.9ｇであり、このグリセリドはDPA純度が1.2％、DPA回収率が32.7％、酸価が0.6であった。
【００３２】
【比較例２】
1Lの3％含水アセトン中にアザラシ油100gを溶解し、-40℃まで冷却した。16時間後、直ちに吸引濾過により析出した固形脂を除去し、次いで濾液中のアセトンをエバポレーターにより完全に留去した。得られたグリセリド(製品2)は66.3gであり、このグリセリドはDPA純度が5.5％、DPA回収率が36％、酸価が0.9であった。
【００３３】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明では、ドコサペンタエン酸含有油脂からリパーゼを用いた加水分解法によりドコサペンタエン酸の濃縮されたドコサペンタエン酸含有グリセリドを製造するドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法において、ドコサペンタエン酸を3.0％以上含有する水産油脂を原料とするので、煩雑な工程を経ることなくDPAをグリセリドの形で収率良く、且つ低コストで製造することができる。
【発明の属する技術分野】
本発明は水産油脂からドコサペンタエン酸が濃縮されたドコサペンタエン酸含有グリセリドを製造するドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
イワシ、サバ、サンマ、アジ等の魚類の脂質（魚油）、あるいは紅藻、褐藻などの藻類の脂質、甲殻類並びに貝類や海産動物類の脂質などの構成脂肪酸中には、高度不飽和脂肪酸（以下、PUFAと略す）が多量に含まれている。このうち、エイコサペンタエン酸（以下、EPAと略す）やドコサヘキサエン酸（以下、DHAと略す）などはω-3系列の不飽和脂肪酸であり、特にEPAはプロスタグランジンやトロンボキサンとの関連性において、近年その生理活性が注目され、動脈硬化や高脂血症の医薬品として既に市販されている。また、医薬品分野だけでなく、食品全般、飼料などの素材として多岐にわたって利用されている。
【０００３】
一方、ドコサペンタエン酸（以下、DPAと略す）は、EPAやDHA同様ω-3系列の脂肪酸であるが、これを含有する油脂は特殊な魚油等に限られており、その濃度も1〜2％と低いものである。しかしながら、DPAはEPAと比較してはるかに高い生理活性が確認されており（例えば「Prostaglandins, Leucotriens and Essential Fatty Acids(1996),54,319-325」参照)、DPAを濃縮したグリセリドについて、医薬品及び食品への応用が期待されている。
【０００４】
なお、以下の説明では、グリセリドとは、モノアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、トリアシルグリセロールの混合物と定義する。
【０００５】
ここで、従来のグリセリドの形でEPA,DPA,DHA等のPUFAを濃縮する方法としては、
（１）リパーゼによる加水分解法
（２）ウインタリング法（低温分別法または低温溶媒分別法）
（３）分子蒸留法
等が知られている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、前述のようにDPAを含有する油脂は限られており、しかも脂肪酸純度も1〜2％と低い。従って、例えばDPA純度5％以上のグリセリドを得るためには、溶媒分別法と酵素反応、あるいはエステル交換反応、合成法（遊離脂肪酸とグリセリンとの脱水縮合反応）等の他の工程を組み合わせなければならず、煩雑であり、また得られる油脂の収率も低く、製造コストも非常に高くなるという問題点があった。
【０００７】
そこで、本発明は、煩雑な工程を経ることなくDPAをグリセリドの形で収率良く、且つ低コストで製造することのできるドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明は、ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法において、ドコサペンタエン酸を3％以上含有する水産油脂を原料とすることを特徴とする。
【０００９】
一般的な水産動物の脂質中に含まれるDPA含量は、例えばイワシ油約2.3％、サンマ油約1.2％、スルメイカ肝油1.1％、ニシン油0.6％で、（改訂3版油脂化学便覧、日本油化学協会編、p111、1990）3％を越えるものは少ない。しかしながら、サケから抽出された油脂中のDPA含量は3％を越え、アザラシから抽出された油脂中のDPA含量は4％を越えるものであり、DPAに富むことが知られている。
【００１０】
そこで、本発明は、DPAを含有する水産油脂、特にサケ油又はアザラシ油を原料とし、リパーゼによりDPA以外を選択的に加水分解することでDPAをさらに高純度に効率良く濃縮する。
【００１１】
ここで言う水産油脂とは水産動植物から得られる油脂のことであり、魚類、哺乳類、藻類（微細藻を含む）、その他水圏に生息する動植物由来の油脂を指す。
【００１２】
サケ油は、ベニザケ、シロザケ、ギンザケ等、DPAを含有する油脂であれば、全て使用が可能であるが、DPAを多く含むシロザケが特に好ましい。
【００１３】
アザラシ油は、ゴマフアザラシ、タテゴトアザラシ等、DPAを含有する油脂であれば、全て使用が可能である。
【００１４】
リパーゼによる加水分解法を用いる際使用するリパーゼとしては、アルカリゲネス（Alcaligenes)属、キャンディダ(Candida)属、リゾプス(Rhizopus)属、ムコール(Mucor)属、シュードモナス(Pseudomonas)属、ジオトリカム(Geotricum)属、およびブタ膵臓に由来したものが挙げられる。
【００１５】
本発明において使用するリパーゼは、DPAに対する反応性が低い酵素が必要条件である。また、アザラシ油はグリセロールの1,3位にDPAを多く結合しているので、アザラシ油を使用するときは1,3特異型リパーゼよりランダム型リパーゼの方がより効果的で好ましく、特にキャンディダ属及びシュードモナス属に由来するリパーゼが好ましい。
【００１６】
なお、1ユニット（U）とは、オリーブ油を基質として、1分間に1μmolの脂肪酸を遊離する酵素量とする。
【００１７】
本発明で用いるリパーゼの反応条件は、以下の通りである。
【００１８】
すなわち、リパーゼの使用量は、油脂1ｇあたり、10〜2000ユニット(U)の範囲であり、好ましくは50〜600ユニット(U)である。
【００１９】
水の添加量は油脂に対して5〜500重量％の範囲であり、好ましくは10〜200重量％である。
【００２０】
pHは6.0〜10.0の範囲が好ましく、このpHを調節するために緩衝液を用いるとさらに効果的で、pHとして7.0〜8.5が特に好ましい範囲である。
【００２１】
反応は、大気下で行っても良いが、PUFAを多量に含む場合は、不活性ガス下、例えば窒素ガス、炭酸ガスの雰囲気下にしておくと脂肪酸の劣化を防ぐことができる。また、酸化防止剤として、例えばトコフェロール、カテキン類、BHA（ブチルヒドロキシアニソール）、BHT（ジブチルヒドロキシトルエン）等を併用しても良い。
【００２２】
反応温度は20〜60℃の範囲が好ましく、特に25〜50℃の範囲が好ましい。
【００２３】
反応は撹拌した方が望ましいが、乳化状態にして静置反応もできる。また、反応はバッチ式でも良いが、連続式として固定化酵素カラムも使用できる。
【００２４】
加水分解の程度は、反応中の加水分解油をサンプリングし、酸価を測定することにより知ることができる。得られるDPAグリセリドの濃縮度及び収率は、加水分解油の分解の程度、すなわち加水分解油の酸価によって推定できる。本発明の目的からは、加水分解油の酸価が50〜150になった時点で反応を終了するのが望ましい。通常、1〜24時間の範囲内で行われる。
【００２５】
もし、酸価が目標の値に達しない場合は、反応時間や反応温度で調節できる。
【００２６】
上記加水分解油中には、目的物であるDPAグリセリドのほかに遊離脂肪酸を含んでいるため、DPAグリセリドを得る為には、遊離脂肪酸を除去する必要がある。脂肪酸を除去する方法としては、通常行われているアルカリ脱酸法、分子蒸留法のほかに、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、低温結晶法、及び減圧水蒸気蒸留法、又はこれらを組み合わせた方法を適用する事ができる。これらリパーゼ処理後の各工程については特に限定されるものではない。
【００２７】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を実施例について説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２８】
【実施例１】
キャンディダ(Candida)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（360,000U/g)を水100ｇに溶解し、さらにタテゴトアザラシ油（EPA：7.0％、DPA：4.5％、DHA：9.0％、酸価：1.0）100ｇを混合したものを、40℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品1)は45.9ｇであり、このグリセリドはDPA純度が7.5％、DPA回収率が71.4％、酸価が0.6であった。
【００２９】
【実施例２】
シュードモナス(psuedomonas)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（90,000/g)を水100ｇに溶解し、さらにタテゴトアザラシ油（EPA：7.2％、DPA：4.7％、DHA：8.9％、酸価：1.0）100ｇを混合したものを、38℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品1)は49.8ｇであり、このグリセリドはDPA純度が7.9％、DPA回収率が80.4％、酸価が0.6であった。
【００３０】
【実施例３】
キャンディダ(Candida)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（360,000U/g)を水100ｇに溶解し、さらにサケ油（EPA：7.8％、DPA：3.2％、DHA：13.0％、酸価：1.0）100ｇを混合したものを、40℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品2)は42.0ｇであり、このグリセリドはDPA純度が5.8％、DPA回収率が75.1％、酸価が0.3であった。
【００３１】
【比較例１】
キャンディダ(Candida)属由来のリパーゼ粉末0.05ｇ（360,000U/g)を水100ｇに溶解し、タテゴトアザラシ油の代わりにカツオ油（EPA：4.8％、DPA：1.5％、DHA：27.0％、酸価：0.5）100ｇを混合したものを、40℃、pH7.0の条件下で24時間撹拌しながら酵素反応を行い、加水分解油を得た。次いで、この加水分解油を遠心分離し、油層を回収した後、水洗によりグリセリンを除去、続けて流下薄膜式分子蒸留装置を用いて、真空度0.6Ps、蒸発面温度180℃、流速60g/hの条件下で処理することにより、遊離脂肪酸の除去を行った。得られたグリセリド(製品1)は40.9ｇであり、このグリセリドはDPA純度が1.2％、DPA回収率が32.7％、酸価が0.6であった。
【００３２】
【比較例２】
1Lの3％含水アセトン中にアザラシ油100gを溶解し、-40℃まで冷却した。16時間後、直ちに吸引濾過により析出した固形脂を除去し、次いで濾液中のアセトンをエバポレーターにより完全に留去した。得られたグリセリド(製品2)は66.3gであり、このグリセリドはDPA純度が5.5％、DPA回収率が36％、酸価が0.9であった。
【００３３】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明では、ドコサペンタエン酸含有油脂からリパーゼを用いた加水分解法によりドコサペンタエン酸の濃縮されたドコサペンタエン酸含有グリセリドを製造するドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法において、ドコサペンタエン酸を3.0％以上含有する水産油脂を原料とするので、煩雑な工程を経ることなくDPAをグリセリドの形で収率良く、且つ低コストで製造することができる。
Claims (2)
- ドコサペンタエン酸含有油脂からリパーゼを用いた加水分解法によりドコサペンタエン酸の濃縮されたドコサペンタエン酸含有グリセリドを製造するドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法において、
ドコサペンタエン酸を３．０％以上含有するアザラシ油あるいはサケ油を原料として、ＤＰＡに対する反応性が低いキャンディダ属又はシュードモナス属に由来するリパーゼを用いて加水分解することにより、ドコサペンタエン酸を５％以上含有すること
を特徴とするドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法。 - 上記加水分解は反応中の加水分解油の酸価が５０〜１５０に達するまで行われることを特徴とする請求項１記載のドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000266569A JP5000035B2 (ja) | 2000-09-04 | 2000-09-04 | ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000266569A JP5000035B2 (ja) | 2000-09-04 | 2000-09-04 | ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002080887A JP2002080887A (ja) | 2002-03-22 |
| JP5000035B2 true JP5000035B2 (ja) | 2012-08-15 |
Family
ID=18753627
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2000266569A Expired - Fee Related JP5000035B2 (ja) | 2000-09-04 | 2000-09-04 | ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5000035B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3840459B2 (ja) * | 2003-03-20 | 2006-11-01 | 裕司 島田 | グリセリドおよびその製造方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6020020A (en) * | 1995-11-24 | 2000-02-01 | Loders-Croklaan B.V. | Composition based on fish oil |
| JP4283351B2 (ja) * | 1998-08-27 | 2009-06-24 | サントリー酒類株式会社 | 新規な油脂組成物の製造方法および用途 |
| CA2260397A1 (en) * | 1999-01-29 | 2000-07-29 | Atlantis Marine Inc. | Method of converting rendered triglyceride oil from marine sources into bland, stable food oil |
-
2000
- 2000-09-04 JP JP2000266569A patent/JP5000035B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2002080887A (ja) | 2002-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4530311B2 (ja) | リパーゼを用いたグリセライドの製造方法 | |
| FR2731015A1 (fr) | Procede d'enrichissement enzymatique d'huiles d'origine marine et les triglycerides d'acides gras polyinsatures ainsi obtenus | |
| JP2002537442A (ja) | 海産油のリパーゼ触媒したエステル化 | |
| JP2003500082A (ja) | 蒸留−酵素的エステル交換の組合せによるポリ不飽和脂肪酸エステルの濃縮及び精製 | |
| JP2516860B2 (ja) | 濃縮された高度不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法 | |
| JPH08302384A (ja) | 高度不飽和脂肪酸の酵素分画方法 | |
| JP2007070486A (ja) | グリセリド及びその製造方法 | |
| JP5000035B2 (ja) | ドコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 | |
| JP3340182B2 (ja) | ドコサヘキサエン酸含有トリグリセリドの製造法 | |
| JP5237627B2 (ja) | 高度不飽和脂肪酸の濃縮方法 | |
| JP2017073980A (ja) | 高度不飽和脂肪酸の製造方法 | |
| JPH0860181A (ja) | 高度不飽和脂肪酸含有油脂 | |
| JPH0751075A (ja) | ドコサヘキサエン酸含有物質の製造方法 | |
| JPH08214892A (ja) | 高度不飽和脂肪酸含有部分グリセリドの製造方法 | |
| JPH11263750A (ja) | 長鎖不飽和脂肪酸メントールエステルおよび酵素法によるその製造方法 | |
| JPH11290094A (ja) | アスタキサンチン脂肪酸エステルの製造方法 | |
| JP5852972B2 (ja) | 高度不飽和脂肪酸の濃縮方法 | |
| EP0421867A1 (fr) | Procédé de production d'un mélange de glycérides enrichis en acides gamma linolénique et stéaridonique | |
| JP2004168985A (ja) | ω−３系高度不飽和脂肪酸含有部分グリセリド組成物及びその製造方法 | |
| JP3544247B2 (ja) | 血小板凝集能抑制用薬剤組成物 | |
| JP2000342291A (ja) | 高度不飽和脂肪酸含有グリセリドの酵素的製造方法 | |
| JP2000212587A (ja) | エイコサペンタエン酸含有グリセリドの製造方法 | |
| JP2002069475A (ja) | ドコサヘキサエン酸高含有油脂の製造方法 | |
| WO2016158605A1 (ja) | 低級アルコール脂肪酸エステル化物含有組成物の製造方法および低級アルコール脂肪酸エステル化物含有組成物 | |
| JP3734905B2 (ja) | ω−３系高度不飽和脂肪酸の精製方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20070827 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20110118 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110216 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110418 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111006 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111118 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120510 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120516 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150525 Year of fee payment: 3 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |