JPH03146067A

JPH03146067A - 血漿濾過方法

Info

Publication number: JPH03146067A
Application number: JP1284762A
Authority: JP
Inventors: Masuo Satani; 佐谷　満州夫; Seiichi Manabe; 征一真鍋; Hajime Ishikawa; 元石川
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1989-11-02
Filing date: 1989-11-02
Publication date: 1991-06-21

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、血漿中あるいは血漿分画製剤中に存！Ｅする
ウィルスを除去する血漿濾過方法に関する。本発明は、
以下のような用途に適用され得る。（１）［ｆ［Ｌ液セ
ンターや病院等において、保証した血液を血球と血漿と
に分離した後の血漿中からのウィルスの除去。（２〉病
院等において血漿な輸注する際の血漿からのウィルス除
去。（３）血漿分画製剤の原料血漿からのウィルス除去
。

（４〉血漿分画製剤を輸注する際の血漿分画製剤溶液か
らのウィルス除去（５）細胞培養等で使用される培地用
の動物血請からのウィルス除去。

（従来の技術）血液、血漿中のウィルスを不活化する方法としては、加
熱法、紫外線照射法、ベータープロピオラクトン等の薬
剤処理法あるいは、有機溶剤と表面活性剤によるＳｏｌ
ｖｅｎｔＤｅｔｅｒｇｅｎｔ法等がある。しかし、いず
れの方法においても、ウィルスの不活化と同時に、血漿
中の有用蛋白？１の変性や収率低下を起こしたり、薬剤
や精製材料が微量残存したり、ウィルスの残骸が残った
り等問題も存在している。膜によるウィルス除去方法と
して特開昭６０−１４２８６０号公報、特開昭６０−１
４２８８１号公報に記載された方法がある。これらの方
法に用いられる膜は実効膜厚が５μｍ以上で均質な膜構
造を持つ膜特にポリオレフィンで構成され、孔の形はス
リット状（短間状）でしかも基孔は規則的に、かつ、平
行に配列している。この膜を用いた濾過方法では、ウィ
ルスの培養液の１：澄を塩類溶液で１０倍希釈したいわ
ばウィルスを含む、蛋白質濃度が１％以下の蛋白質の低
濃度水溶液の濾過が開示されているのみである。蛋白１
Ｒ濃度が１％以とでは、濾過速度の低下は避けられず、
上記の公知の方法では、濾過速度および濾過容量の点で
蛋白質濃度が１％以上ある血漿中の、ウィルス除去の工
業的手段として利用することは困難である。また得られ
た血漿濾液の生理活性は濾過前のそれに比べて著しく低
下する。また蛋白質を含む水溶液の透明度が低い場合に
おいて、具体的にこれらの膜を用いたウィルス除去の実
用化の例はない。

（本発明が解決しようとする問題点）本発明の目的は、ウィルスの除去率が高く、血漿中の、
あるいは血漿分画製剤中の打用徂白質の回収率が高い、
かつ短時間で濾過が出来るＩＩＩＬ漿減過ノ１゛法を堤
供しようとするものである。血漿中のウィルスを除去し
て、蛋白質を回収する場合、ウィルス除去の要求達成レ
ベルは、蛋白質回収のそれに比べて格段に高い。多孔１
１Ｑを用いてウィルス除去を行なう場合、蛋白質の透過
率［（濾液中の蛋白質濃度７元液中の蛋白質濃度）Ｘ１
００］は１〜９９％の範囲での議論が一般的であるのに
対して、期待されるウィルスの除去率（［１−（濾液中
のウィルス濃度７元液中の蛋白質濃度）］Ｘ１００）は
９９〜９９．９９９９９９％である。

ウィルスの除去のみを狙うならば、膜の孔径を小さくす
るか、孔径の代替としてポリスチレンラテックス粒子の
ような特定粒子の阻止係数を大きくすることによってウ
ィルスの除去率は向上−ｒるであろう、しかしウィルス
の除去率の向干にともなって蛋白質の透過率が低下する
とともに、透過速度が低下する、ウィルス除去前後Ｃお
ける正白質組成の変化が大きくなるといった問題が生じ
る。

さらに、血漿あるいは、血漿分画製剤溶液の濾過にあた
って考慮すべきことは、それらの液中に含まれる脂質、
あるいは混在する微粒子の濾過速度に及ぼす影響である
。血漿の脂質としては、コレステロール、トリグリセラ
イド、遊離脂肪酸及びリン脂質が主なものであるが、こ
れら脂質は血漿の中では蛋白質と結合したリボ蛋白の形
で存在する。血漿中でリボ蛋白はいろいろな大きさの粒
子の形をとり、カイロミクロンでは大きさ８０ｎｍ以上
であり、高比重リボ蛋白や低比重リボ蛋白では８０ｎｍ
未満の大きさである。実際の血漿の濾過にあたっては、
血漿が人血漿、家畜の血漿であるを問わず、この血漿中
の脂質が過剰に存在するときは、フィルターの目詰りを
惹起し濾過速度を著しく低下させ、時には蛋白質の透過
を限＋ｈし、蛋白質を変性させることがある。従って、
血漿中の脂質濃度が高い時も、血漿の濾過速度が大きく
、ウィルスの除去率が高く、蛋白質の回収率の大きい濾
過方法が要求される。同様の問題は微粒子−が分散する
血漿分画製剤溶液にも当てはまる。以下＋ｆｕ漿を不例
に本発明を説明する。

（問題点を解決するための手段）未発明名等は鋭意研究の結果、５型組％の人血清アルブ
ミン水溶液の濾過速度（Ｊｐ）と純水の濾過速度（Ｊｗ
）の比（Ｊ　ｐ／Ｊ　ｗ）が、１１５０以上であり、か
つ、粒子径３０ｎｍの金コロイド粒子の阻止係数（Ｒ）
が１以上である高分子多孔膜を用いたフィルターを複数
個、直列に連結することで、またその際前段のフィルタ
ーの高分子多孔ＩＩ！２の孔径が、その次に連結される
フィルターの高分子多孔膜の孔径よりも小さくないよう
に配置することで、上記問題点が解決されることを見出
した。

本発明で使用する高分子多孔膜は、５７Ｑ−ｊｉ１％の
人Ｉ’１１清アルブミン水溶液の濾過速度（ＪＰ）と純
水の濾過速度（Ｊｗ）の比（Ｊｐ／Ｊｗ）が、１１５０
以上であり、かつ、粒子径３０ｎｍの金コロイド粒子の
阻止係数（Ｒ）が１以上であることが必要である。

ウィルスを除去すると同時に蛋白質を効率良く回収する
ためにはＪｐとＪｗの比を考慮することが必要である。

本発明者らは、Ｊ　ｐ　／　Ｊ　ｗの異なる各袖の高分
子多孔膜を用いて検討を行った結果、ｊ　ｐ　／　Ｊ　
ｗが大きくなるに伴ってウィルスの除去と蛋白質の回収
が短時間で行われるとともに、ウィルス除去前後におい
て蛋白質の組成変化が少ないことを見いだした。かかる
観点から、Ｊ　ｐ　／　Ｊ　ｗは１１５０以上であるこ
とが必要であり、好ましくは１／２０以Ｅ、より好まし
くは１７１０以上である。Ｊ　ｐ　／　Ｊ　ｗが１１５
０未満では、ウィルス除去と蛋白質の回収の効率が低い
。

粒子径３０ｎｍの金コロイド粒子の阻止係数Ｒが１以上
の多孔膜であれば、ウィルス種とは無関係に人血漿中の
既知ウィルスの除去率は９９％以上となる。阻止係数は
次式で定義される。

阻止係数＝ｌｏｇ（濾過前の元液の被痙過物質の濃度／
濾液中の被濾過物質の濃度）ｒｈｔ漿の濾過速度としては、１バツチの濾過時間が血
漿Ｊｕｔの多少を問わず２時間以下、好ましくは１時間
以下、最も好ましくは３０分以下が望まれる。ＩＩＩＬ
漿の濾過速度は、血漿中の脂質の濃度と関係し、特に脂
質濃度が高いときには、フィルターの１−１詰まりを起
こしフィルター１個の場合には濾過速度が小さくなる。

また、この問題は単にフィルターの濾過面ｈ１を大きく
することのみでは解決することは出来ない。この問題は
、上記高分子多孔膜を用いたフィルターを複数個、直列
に連結することによって解決される、またその際前段の
フィルターの高分子多孔膜の孔径が、その次に連結され
るフィルターの高分子多孔膜の孔径よりも小さくないよ
うに配置することで、濾過速度が大きく、かつ有用蛋白
質の回収率が高く、かつ濾過容！ｕ　（１−当たりの濾
過祉）が大きくなる。血漿中の脂質の代表値としてトリ
グリセライド濃度をとるとき、トリグリセライド濃度が
１００ｍｇ／ｍ１以上の場合に本発明は特に著しい効果
を発揮する。直列に連結するフィルターの数は、濾過速
度の点では、多いほど良いが、蛋白質の回収率の点では
フィルターのデッドスペースに血漿が残り、蛋白質の回
収率が下がるので３個、好ましくは２個が望ましい。た
だし、濾過後に生理食塩水等で洗浄すれば回収率の点で
は、４個以Ｅの複数個でも好適な結果が得られる。この
場合、第３図（ｂ）に示すようにドリップチャンバーを
回路内に加えると良い。多孔膜の孔径は、水濾過法で測
定されるが、１段目のフィルターの多孔膜の孔径は５０
〜２００　ｎ　ｍが好ましく、５０〜１１００ｎがより
好ましい、２段目のフィルターの多孔膜の孔径は３０〜
１１００ｎが好ましく、３０〜５０ｎｍがより好ましい
。フィルターの多孔膜の孔径は、除去すべきウィルス種
とそのウィルス除去率のレベルを考慮して選択されるこ
とが好ましい。膜厚は１０〜２００μｍが奸ましい。さ
らに好ましくは２０〜８０μｍである。中空糸膜の場合
、内径は１００μｍ〜１ｍｍが好ましい。

高分子膜の素材としては、例えば、ポリビニルアルコー
ル、エチレン・ビニルアルコール共重合体、再生セルロ
ース、ポリウレタン、ムコ多糖類、低置換度酢酸セルロ
ース、低置換度酢酸セルロース、硫酸セルロース、ポリ
メチルメタアクリレート、ポリアクリル酸、ポリスチレ
ン等が挙げられる。一般には、アルブミン吸着揖の低い
親水性高分子や疎水性高分子に親水化を施したものが好
ましく、銅アンモニア法再生セルロース、ポリビニルア
ルコールを主成分とする高分子、部分ケン化セルロース
が好ましい。濾液の生体への影響が小さい点からは、銅
アンモニア法再生セルロースが最適である。

高分子多孔膜の形態は、平膜、チューブ状膜、中空糸１
漠専が挙げられる。

除去すべきウィルスは、特に限定されない。本発明はエ
イズウィルス、Ｂ型肝炎ウィルス、成人Ｔ細胞白血病ウ
ィルス、日本脳炎ウィルス等大を宿主とするウィルスあ
るいはＢｏｖｉｎｅ　　ｖｉｒａｌ　　ｄｉａｒｒｈｏ
ｅａ　　ｖｉｒｕｓ、アヒル肝炎ウィルス等家畜を宿主
とするウィルスの除去に適用出来る。

本発明での濾過の対象となる血漿としては、血液から遠
心分離された人血漿、血液から膜分離された人血漿、成
分採血された人血漿または新鮮凍結人血漿、あるいは遠
心分離または膜分離された牛血漿、胎児牛ＩＩＩＬ漿、
子牛鉦漿その他の家畜の血漿が好適である。

本発明のウィルス除去のための血漿濾過方法の実際の実
施について、添付図面を用いて説明するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。

第１図は、現在献血採血の際に広く行われている採血回
路に、本発明の血漿濾過方法を組み込んだものである。

即ち、採血バッグ（１）に採取された血液は、遠心分子
Ｉｉ器で血漿と血球に分離された後、血漿は血漿バッグ
（２）に採取される。血漿バッグ（２）に採取されたウ
ィルスを含有しているかもしれない血漿は、最初から血
漿バッグ（２）に連結されていた本発明の血漿濾過回路
で濾過されウィルス除去血漿バッグ（４）に収納される
。濾過は弁（３）を開くことにより開始されるが、血漿
バッグ（２）とＭＡ血漿バッグ（４）と１：’＋１さの
ｋをとることにより、ｌｒＣ力で自然落下で行うことも
出来るし、あるいは弁（３）の後にペリスタポンプＪ−
／Ｔを設置して行っても良い。

第２図は、現７Ｅ献血採血の際に広く行われている採血
回路に、本発明の血漿濾過方法を遠心分離後に結合する
方式を説明したものである。即ち、採１１１Ｌバッグ（
１）に採取された血液は、遠心分離樫で血漿と直球に分
離された後、血漿は血漿バッグ（２）に採取される。

本発明の回路を、血漿バッグ（２）に無菌的に援−合し
く１０）、第１図で説明したと同じ方法で濾過する。無
菌的に接合する装置としては、たとえばデュポン社の無
菌接合樫がある。

第３図は、輸血時における本発明の詳細な説明したもの
である。（１）は血漿あるいは、新鮮凍結１ｕ１１漿を
入れた血漿バッグであり、これに本発明の回路を結合し
て血漿を濾過して人体に輸注する。第３図（ａ）におい
て、濾過は弁（３）を開くことにより開始され血漿は前
段フィルター（５）後段フィルター（６）を経て、輸注
３１（７）から人体に輸注される。第３図（ｂ）は回路
にドリップチャンバー（８）を入れたものである。

蛋白質の回収率および透過率を低下させることなくウィ
ルスの附止率をさらに高めるためには、高分子多孔膜の
孔構造として下記のような特別な構造を与えることが好
ましい。即ち、多孔膜の表裏の孔構造がネットワーク構
造であり、かつ、膜厚方向にはネットワークが植層した
多層構造をとっている。ここでネットワーク構造とは高
分子が網ｌ」状の凝集体を構成し、網の目に対応するの
が孔である構造である。多層構造とは、（ａ）高分子多
孔膜の表面あるいは忠面に平行な面内では注目する面内
の場所に依存せず、はぼ、同一の孔径分布と孔形状を持
ち、この１枚の面では濾過性能の点で１枚のスクリーン
フィルターとして近似できる。（ｂ）該平面内での相互
の位置関係は実質的には無秩序かあるいは多孔膜が中空
糸の場合には、繊維軸方向へのみ妃列する規則性が認め
られ、（Ｃ）この面内ではある特定された孔径分布と平
均孔径、面内空孔率が測定でき、（ｄ）膜表面からの厚
さ方向での距離を異にする面の相互の間には、平均孔径
、孔径分布、面内空孔率のいずれが、膜表面からの距離
に依Ｈして変化し、各層間の孔には相互に゛！■実上実
間相関性い。層状構造をもつ多孔膜は、液体窒素中で破
断し、その断面を電子顕微鏡で観察すると、直径０．１
〜２μｍの粒子（粒子径を２５２とする）の堆梢物で近
似される。層状構造の層数はＦ丁Ｔ／４Ｓ、で与えられ
る。層数を１０以上にするとウィルスの除去率は極端に
大きくなる。高分子素材として親水性高分子を採用し、
さらに、該高分子多孔膜の形状として内径が１００μｍ
〜１ｍｍ、１ｌＱＪＩ％が１０〜１００μｍである中空
糸を採用すれ、液分ｇ液体に対して蛋白質の透過性、蛋
白質の回収率、ウィルスＩＱＩ止率のいずれも高性能で
安全な分離特性を！−ｊ・えることが出来る。

本発明で示された孔構造の特徴を持つ１漠は（ａ）くク
ロ相分離を発生させ（ｂ）該分離で発生した粒子く高分
子−ＣＪ’、：相が粒子となる場合が大部分であり、高
分子希薄相が粒子となる場合もある）の直径が５０ｎｍ
以上１１０００ｎ以下となるように成長させ（Ｃ）該分
離が膜の表裏面にそって同時に発生し、ＩＩ！２淳方向
に進行させるために、厳密に原液および凝固液の組成お
よび温度が制御されている条件下で製膜される。

銅アンモニア法ＩＴ￥生セルロース多孔膜を例にして本
発明で示したう孔膜の製法を説明する。セルロース濃度
を２〜１０％の範囲内で設定した溶液を調整する。紡糸
原液から未溶解成分、および気泡を除去する。紡糸原液
は１０〜４０℃の設定された温度に厳密に制御（通常±
０．１℃以内）されている。２瑣紡［１の中央紡出口よ
り厳密に温度と組成が制御された凝固剤（中空剤）を吐
出する。吐出された紡糸原液はただちに凝固浴を通過す
る。この際の凝固浴には、中空剤と類似の組成液を採用
すればよい。ただし、凝固浴の液組成と液温度とは厳密
に制御されていることが必要である。中空剤と凝固浴中
の液体とによりミクロ相分離が発生する。凝固浴の長さ
、紡速、中空剤の吐出速度、巻き取り速度を制御するこ
とにより原液中に粒子を発生させ、直径５０ｎｍ〜１０
００ｎｍの範囲で最終の中空糸内部の粒子径を定めるこ
とが出来る。かくして得られた中空糸を希硫酸で再生後
水洗し、緊張下で乾燥する。

以下に本発明で測定される神々の物性値の測定方法をま
とめて示す。

蛋白質濃度：アルブミンの場合は紫外線吸収スペクトル
の波長２８０ｎｍの透過率よりやめ定めた検足線を用い
て算出した。

アルブミン透過率：人１１１Ｌ　情アルブミンを５＋ｎ
、：ｉ１％の濃度で純水中に溶解する。得られた溶液を
用いて膜間差圧２００ｍｍＨｇで膜の右動濾過面積１ｒ
ｒ＋”あたり０．ＩＩｌの濾過をした際、濾過前、及び
濾液のアルブミン濃度（それぞれＣ８およびＣ，）より
次式で透過率を算出する。

透過率（％）＝　（Ｃ，／Ｃ０）Ｘ１００　（％）純水
および５ｆｎｆｌｔ％のアルブミン水溶液の濾過速度：
純水および５銀量％の人血清アルブミン水溶液を２０℃
で膜間差圧２００ｍｍＨｇで濾過する。濾液阻でＱ、０
５１／ｒｎ’における平均の濾過速度を算出しこれを濾
過速度とする。

金コロイド粒子の阻止率：３０ｎｍの金コロイド粒子は
、Ｎａｔｕｒｅ　（Ｖｏｌ、２４１．２０−２２．Ｊａ
ｎｕａｒｙ　　１　１９７３　）Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ
　　Ｎｕｃｌｅａｔｉｏｎｆｏｒ　　ｔｈｅ　　Ｒｅｇ
ｕｌａｔｉｏｎ　　ｏｆｔｈｅ　　Ｐａｒｔｉｃｌｅ　
　５ｉｚｅ　　ｉｎＭｏｎｏｄｉｓｐｅｒｓｅ　　Ｇｏ
ｌｄ　　５ｕｓｐｅｎｓｉｏｎｓ″の報文に基づいて、
ＨＡ、Ｃ１４のクエン酸ソーダによる還元反応で調製し
た。単分散粒子の粒径は、電子顕微鏡で測定する。金コ
ロイド粒子の元液濃度は、粒子数で約ＩＱ１１個／　ｍ
　ｌであり、濾液中の粒子数は吸光度法（波長５３０μ
ｍ）で定量する。

高分子多孔膜の構造：高分子多孔ｎｑを樹脂（例えば、
アクリル樹脂）で包埋後、ウルトラミクロトーム（スエ
ーデンＬＫＢ社５ＪＵｌｔｒａｔｏｍｅＩＩＩ８８００
型）に装着したガラスナイフを用いて表面（中空糸の場
合、外壁面）から膜淳方向にそってＰスさ０．５〜１μ
ｍの試料を順に切りだす。その試料切片を溶媒〈例えば
、クロロホルム）で脱包理後、それぞれの切片の電子顕
微鏡写真を撮る。注目する切片のＩｃｍ２あたり、孔判
径がｒ〜ｒ＋ｄｒにｎ在する孔の数をＮ（ｒ）ｄｒと表
示する。面内空孔率（Ｐｒｅ）は次式で）ｐえられる。

Ｐｒｅ　（％表示）＝（π１ｒ２Ｎ（ｒ）ｄｒ）ｘ１０
０水濾過速度法による平均孔１ｆ（２ｒｒ）：純水をあ
らかじめ平均孔径０．２μｍのフィルターを用いて濾過
し、微粒子を除去した純水を作る。この純水を２０℃で
膜間差圧（△Ｐ）２００ｍｍＨｇの一定圧力下で濾過速
度Ｊｖを測定する。ただし、Ｊｖの単位は（ｍ１７分）
である。測定に他相した高分子多孔膜のイｒ効面積をＡ
とし、見かけ密度法で得られた該多孔膜の空孔率をＰｒ
ρとすると、２下１　　（ｎｍ単位）は次式で与えられ
る。

２　ｒ（＝ＪＪｖ　・ｄ　・７７／△Ｐ・Ａ・Ｐｒρこ
こで、ｄはＩＩ！２厚（μｍ単位）、ηは純水の粘度（
センチボイズ中、イ立〉。

１１Ｆ炎ウィルス濃度：ＨＢｓ抗原、ＨＢｅ抗原はＲＰ
）ＩＡ法で、）ＩＢＶ：ＤＮＡはＢＥＲＮ　Ｉ　ＮＧＥ
Ｒ等の方性にｉｌ′じた。即ち、検体２５μＬをＰＲＯ
ＴＥ　Ｉ　ＮＡＳＥＫで処理し、ＤＮＡを抽出した。６
ｒ１酸セルｏ−ス１１Ｑに抽出ＤＮＡとＨＢＶ−ＤＮＡ
標準（国立を防衛イト研究断裂ＬｏｔＤ１）とを同［１
、隼にスポットした。ニックトランスレーションはＢＲ
Ｌ社製キットを用いて３２ＰでラベルしたＨＢＶ−ＤＮ
Ａをハイブリダイザ−シミ１ンに用いた。

（実施例）次に実施例により本発明をさらに詳細に説明する。

（実施例１）セルロースリンターを精製しこれを公知の方法で調製し
た銅アンモニア溶液（銅アンモニア／水の重量比が３．
１／６．８／９０．１）中に８．５電量％で溶解し、濾
過後脱泡し紡糸原液とした。この紡糸原液を２５．０±
０．１”Ｃに制御しつつ環状紡糸［１の外側紡出口（外
径２ｍｍφ、内径１．２ｍｍφ）よりｉ、９ｍｌ／分で
吐出させた。−力水／アセトン／アンモニア比１００　
、０　／　６　Ｂ　、　　Ｏ／　０　、９９　（Ｉｎ　
ｆｉ、［比）で厳密に組成が；ｔ、Ｉｎ御された溶液（
以ド中空剤と略称）を採用し、これを２５．０±０．１
℃に温度制御しつつ中央紡出口（外径０．６ｍｍφ）よ
り４．９ｍＩ／分で吐出させた。吐出された糸状物を水
／アセトン／アンモニア比１００．０／７０．０／１、
Ｏ（爪環比）で厳密に組成が制御された２５．０±０．
１℃の混合溶液中に直接導き該溶液中で６．９ｍｌ／分
の速度で巻き取った。吐出直後の透明ｎ色状の繊維状物
は次第に白色化し、ミクロ相分離を生起し、引きつづい
て凝固が起こり、繊維としての形状が維持されていた。

その後、２５．０±ｏ、ｉ’ｃで２重量％の硫酸水溶液
で定長で再生し、その後水洗し、水を徐々にメタノール
に置換した。メタノールに置換後の中空糸を２０．０℃
で真空乾燥した。かくして得られた中空糸の外径は３０
０μｍ、膜厚は３２μｍ、内径は２３６μｍであった。

該中空糸の内外壁面の走査型電子顕微鏡観察によれば、
両壁面はいずれもネットワーク構造をとり、また、該ネ
ットワークが堆積した構造を示す。粒子直径２Ｓ２は０
．３０μｍ、２ｒ（は３０ｎｍ、Ｐｒｅは４５％であっ
た。３０ｎｍ金コロイド粒子の阻止係数は１．７であり
、Ｊ　ｐ　／　Ｊ　ｗは１／１０あり、アルブミン透過
率は、９９．９％以上であった。

この中空系を５００本束ねて有効濾過面積０．０３ｍ″
の円筒状の濾過用モジュールを組み立てた。

また、セルロース濃度５．８％の紡糸原液を調整し、同
様にして紡糸・乾燥を行い、２ｒｆは８０ｎｍ、Ｐｒｅ
は４５％、３０ｎｍ金コロイド粒子のＩＱＩ止係数は１
．１であり、Ｊ　ｐ　／　Ｊ　ｗは１／１０あり、アル
ブミン透過率は、９９゜９％以にである中空糸を得た。

これらの中空糸５００本をたばね有効膜面積０．０３−
の円筒状の濾過用モジュールを組み立てた。

この孔径８０ｎｒｎのモジュールと孔径３０ｎｍのモジ
ュールとを直列に連結して、孔径８０ｎｍのモジュール
が濾過元液側にくるように配置して、第４図のような回
路をつくる。（１）の血漿バッグにＢ型肝炎ウィルスを
含む（ウィルス濃度１０６個／　ｍ　１　）血漿約９０
ｍ１を注入する。

（４）は濾過血漿の収納バッグであり、（１）の血漿バ
ッグとの高さの差を、第４図に示すように１．５ｍとっ
ている。血漿バッグを壁または、スタンドに吊して、コ
ック（３）を開いて濾過を開始する。濾過は１．５ｍの
ヘッド差で行われる。

濾過を開始してから、血漿バッグ内の血漿が空になるま
での時間を濾過時間とする。この場合の実験では、血漿
中のトリグリセライドが６１，４；９８．５；　１５１
．３ｍｇ／ｍｌの３水準で濾過を行った（実施例１〜実
施例３）。比較対照例として、それぞれの場合に、３０
ｎｍのモジュール１個の濾過も行った（比較例１〜比鮫
例３）。

実験結果を第１表に示す。得られた濾過血漿中のＢ型肝
炎ウィルス濃度は、いずれの場合についても検出限界以
下であった。

また総蛋白濃度も血漿中のそれの９４％であった。

（以下余白）（発明の効果〉本発明によれば、血漿中あるいは、血漿分画製剤中に混
入したウィルスを高い除去率で出来るとともに、血漿中
の脂質濃度に関係なく大きい濾過速度で濾過出来、かつ
血漿中の訂用蛋白質も高率で同収できるので、献血採血
、臨床の医学の現場で利用出東る。またバイオインダス
トリー分野での工業用、研究用の細胞培養培地用血清か
らのウィルス除去に利用できる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明を採血回路に適用した１例を示す説明
図。第２図は、採血回路に適用した他の例を示す説明図
。第３図（ａ）は、本発明を輸注回路に適用した１例を
示す説明図。第３図（ｂ）は、輸注回路に通用した例の
例を示す説明図。第４図は、実施例１の説明図。１、採血バッグ　　　　５．前段フィルター２、血漿バ
ッグ　　　　６．後段フィルター３、弁（コック〉　　
　７．輸注針４゜濾過血漿バッグ８　。ドリップチャンバー１０゜無菌的接合

Claims

【特許請求の範囲】

（１）５重量％の人血清アルブミン水溶液の濾過速度（
Ｊｐ）と純水の濾過速度（Ｊｗ）の比（Ｊｐ／Ｊｗ）が
、１／５０以上であり、かつ、粒子径３０ｎｍの金コロ
イド粒子の阻止係数（Ｒ）が１以上である高分子多孔膜
を用いたフィルターを複数個、直列に連結することを特
徴とする血漿からウィルスを除去する血漿濾過方法。
（２）高分子多孔膜を用いたフィルターを複数個直列に
連結するに際し、前段のフィルターの高分子多孔膜の孔
径が、その次に連結されるフィルターの高分子多孔膜の
孔径よりも小さくないように配置することを特徴とする
請求項１記載の血漿濾過方法。