JPH02279650A

JPH02279650A - 神経細胞変性修復剤

Info

Publication number: JPH02279650A
Application number: JP1101438A
Authority: JP
Inventors: Takashi Hasegawa; 隆長谷川; Koji Okazaki; 岡崎　宏司; Yoshiyasu Fukuyama; 愛保福山
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1989-04-19
Filing date: 1989-04-19
Publication date: 1990-11-15

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は、神経細胞変性修復剤に関する。

発明の開示本発明者らは、従来よりアルツハイマー型痴呆を代表と
する老人性痴呆、ダウン症候群、ハンチントン舞踏病等
の神経変性疾患の予防及び治療剤の開発を目的として天
然物より神経細胞変性修復剤の有効成分となるべき化合
物を探索してきたが、その研究過程においてアメリカヤ
マゴボウ［Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａ　ａｍｅｒ！ｃａｎａ
　Ｌ、　　（ｐｈｙｔｏｌａｃｃａｃｅａｅ）　）の果
実から抽出単離される下記一般式（１）で表わされる化
合物、及び／又はモクレン科（Ｍａｇｎｏｌｌａｃｅａ
ｅ　）のホオノキ（Ｍａｇｎｏｌｉａｏｂｏｖａｔａ　
Ｔｈｕｎｂ）の乾燥樹皮（生薬者、厚朴）から抽出単離
される下記式（２）で表わされる化合物が神経細胞変性
修復作用を有していることを見い出した。本発明は、斯
かる知見に基づき完成されたものである。

即ち、本発明は、下記一般式〔式中Ｒ１及びＲ２の一方は水素原子を示し、他方はＨ
＞ｃ＝ｃ＜　　（ＲはヒドロキシメチＲＨル基又はホルミル基）を示す。〕で表わされる化合物及び式で表わされる化合物からなる群から選ばれた少なくとも
一種の化合物を有効成分として含有する神経細胞変性修
復剤に係る。

上記一般式（１）で表わされる化合物及び式（２）で表
わされる化合物は、神経細胞の生存及び神経突起の伸展
を著しく促進させ、更に神経細胞のコリンアセチルトラ
ンスフェラーゼ（ＣｈＡＴ）の酵素活性をも上昇させる
作用を有している。

上記一般式（１）で表わされる化合物及び式（２）で表
わされる化合物は、特に中枢神経系のコリン作動性神経
細胞の生存及び成長を促進させる作用を有している。

従来、前記のような神経細胞変性修復能を有する化合物
としては、唯一高分子の生体成分であるＮＧＦ　（神経
成長因子）、ＧＭＴ（ガングリオシド）等が知られてい
る。ＮＧＦについては、例えばユーロサイエンス（Ｈｅ
ｆｔｉ、Ｆ、ら、１４．５５−６８　（１９８５）　、
ジャーナル　オブ　ユーロサイエンス（Ｆｒａｎｚ　Ｈ
ｅｆｌｉ　ら、６．２１５５−２１６２　（１９８６）
　、ブロク　ナトウル　アカド　サイエンスＵＳＡ　（
Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ。

ＵＳＡ、Ｌ、Ｒ，Ｗｉｌｌｉａｍｓら、８３．９２３１
−９２３５（１９８６）　、サイエンス（Ｌ、Ｆ、Ｋｒ
ｏｍｅｒ、　　２３５　。

２１４−２１６　（１９８６）等に記載されている。

また、ＧＭ、については、例えばサイエンス（Ｐｒｅｄ
　Ｊ、Ｒｏｉｓｅｎ　ら、２１４，５７７−５７８（１
９８１）、プレイン　レス（Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、、Ｍ
。

Ｖ、Ｓｏｆｒｏｎｉｅｗら、　　　３９８．　　３９３
−３９６（１９８６）、プレイン　レス（）ＬＧｒａｄ
ｋｏｗｓｋａら。

３７５．４１７−４２２　（１９８６）等に記載されて
いる。

°現在アルツハイマー症を代表とする老年痴呆症におい
ては脳コリン作動神経系に重大な変化が生じ、その機能
が低下していることが示唆されている（Ｐｅｒｒｙ、Ｅ
、に、ａｎｄ　Ｐｅｒｒｙ、Ｒ，Ｈ，”Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｓｔｒｙｏｔ’　Ｄｉｍｅｎｔｉａ”、第１３５頁（
１９８０）　、　ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、
、）。

従って、神経細胞の修復能（生存効果、神経突起伸展効
果）を有する一般式（１）の化合物及び式（２）の化合
物は、アルツハイマー型痴呆を代表とする老人性痴呆、
ダウン症候群、ハンチントン無給病、健忘症、記憶障害
、頭部外傷、脳手術、薬物中毒、循環障害、脳代謝異常
、脳炎等によるアセチルコリン作動神経系機能の低下に
基づく後遺症、精神障害等の治療薬として有効に使用さ
れ得る（Ｊ、Ｗ、Ｇｅｄｄｅｓら、サイエンス、２３０
゜１１７９−１１８１　（１９８５））。

本発明の上記一般式（１）の化合物は、例えば下記に示
す方法により製造される。

即ち、一般式（１）の化合物は、アメリカヤマゴボウの
実から抽出単離される。

上記抽出単離は、例えば次のようにして実施される。ま
ずアメリカヤマゴボウ乾燥実粉末を酢酸エチル、メタノ
ール等の通常の極性溶媒を用いて抽出し、抽出液を濾過
後、滑液を減圧下に濃縮して第一次抽出物を得、次いで
該抽出物から目的化合物の理化学的性状を利用した各種
の方法により目的物を採取する。該目的物の採取は、通
常の方法、例えば不純物との溶解度の差を利用する方法
、活性炭、アンバーライト、シリカゲル、イオン交換樹
脂、セファデックス、トヨバール等の吸着剤に対する吸
着親和力の差を利用する方法、二液相間の分配率の差を
利用する方法、これら各方法の組合せ等により実施でき
る。より好ましい採取方法としては、例えば上記第一次
抽出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ、
例えばクロロホルム及びメタノールの混合溶媒等の適当
な溶媒で抽出し、この抽出液を減圧濃縮し、濃縮液をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した後、セフ
ァデックスに供し、例えばメタノール等の適当な溶媒で
溶出後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製す
る方法を例示できる。

上記式（２）で表わされる化合物は、本発明者らが始め
て見い出した文献未記載の新規化合物であり、例えば下
記に示す方法で製造される。

即ち式（２）の化合物は、厚朴から抽出単離される。こ
の抽出単離は、例えば次のようにして実施される。まず
厚朴を酢酸エチル、メタノール等の通常の極性溶媒を用
いて抽出し、抽出液を濾過後、滑液を減圧下に濃縮して
第一次抽出物を得、次いで該抽出物から目的化合物の理
化学的性状を利用した各種の方法により目的物を採取す
る。該目的物の採取は、通常の方法、例えば不純物との
溶解度の差を利用する方法、活性炭、アンバーライト、
シリカゲル、イオン交換樹脂、セファデックス等の吸着
剤に対する吸着親和力の差を利用する方法、二液相間の
分配率の差を利用する方法、これら各方法の組合わせ等
により実施できる。より好ましい採取方法としては、例
えば上記第一次抽出物をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーにかけ、例えばｎ−ヘキサン及び酢酸エチルの混
合溶媒等の適当な溶媒で抽出し、この抽出液を減圧濃縮
し、濃縮液をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精
製した後、セファデックスに供し、例えばメタノール等
の適当な溶媒で溶出する方法を例示できる。

上記方法により得られる一般式（１）の化合物及び／又
は式（２）の化合物は、そのままで又はこれを有効成分
として慣用の製剤担体と共に、ヒト又は動物に投与する
ことができる。本発明の化合物を医薬として用いるに当
り、医薬製剤の形態（投与単位形態）、その調製、その
投与経路等は、通常の医薬製剤のそれらと同様のものと
することができる。即ち、本発明化合物は、その有効二
を含有する錠剤、顆粒剤、カプセル剤、経口用溶液等の
経口剤や注射剤等の非経口剤等の形態に製剤され、経口
的に又は非経口的に投与できる。上記各種形態の製剤は
、常法に従い調製され、その際に用いられる担体も慣用
される各種のものでよい。

例えば錠剤は、本発明化合物を有効成分として、これを
ゼラチン、デンプン２、乳糖、ステアリン酸マグネシウ
ム、滑石、アラビアゴム等の賦形剤と混合して賦形され
る。カプセル剤は、上記有効成分を、不活性な製剤充填
剤もしくは希釈剤と混合し、硬質ゼラチンカプセル、軟
質カプセル等に充填して調製される。また注射剤等の非
経口投与剤は、有効成分としての本発明化合物を滅菌し
た液体担体に溶解乃至懸濁させて製造される。好ましい
担体としては、水及び生理食塩水等を例示できる。

本発明の医薬製剤中に含有されるべき本発明化合物の量
としては、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、
通常全組成物中１〜７０重量％程度、好ましくは１〜３
０重量％程度とするのがよい。

本発明の医薬製剤の投与方法は特に制限はなく、各種製
剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等
に応じた方法で投与される。例えば錠剤、顆粒剤、カプ
セル剤及び経口剤の場合には、経口投与される。また注
射剤等の非経口剤の場合には、単独で又はブドウ糖、ア
ミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更に
は必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔
的投与される。

本発明の医薬製剤の投与量は、用法、患者の年齢、性別
その他の条件、疾患の程度等により適宜選択されるが、
通常有効成分である本発明化合物の量は、１日当り体重
１ｋｇ当り１０〜８００ｍｇとするのがよく、これを１
日１回〜数回に分けて投与するのがよい。また、投与単
位形態中に有効成分を１〜２００ｍｇ程度含有せしめる
のがよい。

実施例以下、本発明を更に詳しく説明するため本発明化合物の
製造例を実施例として掲げる。

実施例１アメリカヤマゴボウ乾燥実の粉末２．６ｋｇをメタノー
ル１０Ｑを用いて室温下（１週間）４回抽出した。抽出
液を濾過後、滑液を減圧濃縮すると、第一次抽出物３１
２ｇが得られた。

第一次抽出物２７８．５ｇをシリカゲルクロマトグラフ
ィー〔カタヤマ　Ｋ０７０．２．　５ｋｇ）に供し、２
％メタノール／クロロホルム（Ｖ／Ｖ）（３１２）　、
４％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）（２＋２）、
５％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）（２ｉ２）、
７％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）（２Ｑ）、１
１％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）（２Ｒ）、１
３％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　（２Ｑ）、
１５％メタノール／りｏｏホルム（ｖ／ｖ）（２Ｑ）　
、１６％メタノール／りｏｏホルム（ｖ／ｖ）（２Ｒ）
　、２０％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）（６Ｑ
）　、３０％メタノール／クロａホ／ｌｚム（ｖ／ｖ）
　（４Ｑ　）で順次溶出し、フラクション１〜１０を得
た。

フラクション４〜７の溶媒を減圧下留去して得られた残
渣４５ｇをセファデックスＬＨ−２０〔ファルマシアフ
ァインケミカルズ社、２ｇ〕に供し、メタノール（８Ｑ
）で溶出し、フラクション１〜１３を得た。フラクショ
ン４〜７の溶媒を減圧下留去して得られた残渣３４．７
５ｇを再度セファデックスＬＨ−２０（ファルマシアフ
ァインケミカルズ社、’ｌ）に供し、メタノール（６Ｑ
）で溶出し、フラクション１〜３を得た。フラクション
２の溶媒を減圧下留去して得られた残渣２７．８０ｇを
シリカゲルクロマトグラフィー〔ワコーゲルＣ−３００
，１５００ｇ、和光純薬工業社製〕に付し、２％メタノ
ール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　（３Ｑ　）　、４％メ
タノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　（３１２）　、６
％メタノール／クロｏホルム（ｖ／ｖ）　（３Ｑ　）　
、８％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　（Ｉｎ）
　、１０％メタノール／りｏｏホルム（ｖ／ｖ）　（３
Ｑ）、１２％メタノール／りｏ。

ホルム（ｖ／ｖ）（：ｌ）　、１４％メタノール／クロ
ロホルム（ｖ／ｖ）（３Ｑ）　、１６％メタノール／り
Ｄロホルム（ｖ／ｖ）（３Ｑ）　、１８％メタノール／
クロロホルム（ｖ／ｖ）（３１２）　、２０％メタノー
ル／りｏｏホルム（ｖ／ｖ）　（：Ｅｌ）　、２２％メ
タノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　（３Ｑ　）　、２
４％メタノール／りＤロホルム（ｖ／ｖ）　（３Ｌ）　
、２６％メタノール／りｏロホルム（ｖ／ｖ）（３Ｑ）
　、２８％メタノール／りｏｏホルム（ｖ／ｖ）（３Ｑ
）　、３０％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　（
３Ｑ　）を用いて順次溶出して、フラクション１〜２０
を得た。

フラクション５〜１２を減圧下溶媒を留去して分画Ａ　
（７，８ｇ）を、フラクション１４を減圧下溶媒を留去
して分画Ｂ　（５，７ｇ）を、フラクション１５〜１７
を減圧下溶媒を留去して分画Ｃ（１５，２ｇ）を得た。

分画Ａ　（７，８ｇ）をシリカゲルクロマトグラフィー
〔ワコーゲルＣ−Ｂｏｏ、７００ｇ、和光純薬工業社製
〕に付し、５％メタノール／クロロホルム（ｖ／ｖ）　
（５Ｑ　）で溶出して、フラクション１〜４００を得た
。フラクション１３３〜１３９を減圧下溶媒を留去する
と、黄色結晶が得られた。

これをメタノール／クロロホルムを用いて再結晶するこ
とにより、３−　［２，３−）ランス−３−（３，４−
ジヒドロキシフェニル）−２，３−ジヒドロ−２−（ヒ
ドロキシメチル）−１，４−ベンゾジオキシン−６−イ
ル〕−２−プロペナール（以下この化合物を「化合物（
１）」という）を０．９８５ｇ得た。

次に上記シリカゲルクロマトグラフィーのフラクション
１４０．１４１を減圧下溶媒を留去すると、黄色結晶が
得られた。これをメタ人、−ル／クロロホルムを用いて
再結晶することにより、３−（２，３−トランス−３−
（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２，３−ジヒドロ
−２−（ヒドロキシメチル’）　−１，４−ベンゾジオ
キシン−７−イル〕−２−プロペナール（以下この化合
物を「化合物（２）」という）を０．１６０ｇ得た。

化合物（１）の物性融点１７７〜１７８℃（黄色プリズム）〔α〕暫　＝０
．００°　（Ｃ＝１．０１、エタノール）Ｅ　　ＩＭＳ　　（７０ｅ　　Ｖ）　　　：　　ｍ／ｚ
（ｔｅｌ、ｉｎｔ、）　　。

３２８　ＣＭ＋３　　（９８）　、３１０　（６４）、
１６６　　（９７）、１６４　　（９５）、１４８　　
（１００）　、１４７　　（１００）、高分解能ＭＳ：実測値　３２８．０９３．０計算値　３２８．０９４７　（Ｃ＋　ｓ　Ｈ＋　ｓ　Ｏ
ｓとして）Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ）　　：　ａｍ’　：３３５０．１６
５０．１６１０．１５８０．１５２０．１４５０．１２
９５．１２５０．１１５０．１１２０．１０９０．１０
４０．１０００．９７０．８６５．８１５ＵＶ　　λ　　　（エタノール）ｎｍ：　２１８　（ε
＝ａｘ２６８３０）　、２２４　　（ε＝２４３９０）、２３
４　（ε＝２１１４０）　、２５０　（、ε＝１６６７
０）　、２９０　　（ε−１４６３０）　、３１０　（
ε＝１７４８０）　、３３０　　（、ε＝Ｈ−ＮＭＲ（
４００ＭＨｚＳ　ＤＭＳ　Ｏｄａ　）δｐｐｍ：９．６０　　（ＩＨＳ　ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、９．０
６　　（２Ｈ％　ｂｓ、Ａｒ０Ｈ）　、７．６３　　（
ＩＨＳ　ｄＳ　Ｊ＝１５．４Ｈｚ）　、７．３６　　（
ＩＨＳ　ｄＳ　Ｊ＝１．８Ｈｚ）　　、７．２８　　（
ＩＨＳ　ｄｄＳ　Ｊ＝８．２Ｈｚ。

１、　８Ｈｚ）　　、７．０２　　（ＩＨ，ｄＳ　Ｊ−８，２Ｈｚ）　　、６
．８２　　（ＩＨ，ｄ、Ｊ−１，８Ｈｚ）　　、６．７
７　　（ＩＨ，ｄ、Ｊ−８，２Ｈｚ）　、６゜７３　　
（ＩＨＳ　ｄｄＳ　Ｊ−１５，９Ｈｚ、７、６Ｈｚ）　
　、６．７１　　（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．　２Ｈｚ。

１、　８Ｈｚ）　　、４．９５　　（ＩＨＳ　ｂｓ、ＯＨ）　　、４．８７　
　（ＩＨ，ｄＳ　Ｊ＝７．９Ｈｚ）　、４、　１４　　
（ＩＨＳ　ｄｄｄ、、Ｊ＝７．９Ｈｚ。

４．６Ｈｚ、２．４Ｈｚ）　　、３．５５　　（ＩＨＳ　ｄｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ。

２．４Ｈｚ）　　、３．３４　　（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ−１２，２Ｈｚ。

４、　６Ｈｚ）化合物（２）の物性融点２６０〜２６２°Ｃ（黄色プリズム）〔α〕茗　＝
０．００°　（Ｃ−１，０１、エタノール）Ｅ　Ｉ　ＭＳ　（７０ｅ　Ｖ）　　：　ｍ／ｚ（ｔｅｌ
、ｉｎｔ、）　。

３２８　ＣＭ＋〕　（１００）　、３１０　（１００）
、１６６　（６５）　、１６４　（７１）、１４８　（
１００）　、１４７　（１００）、１２３　（９１）　
、１１０　（１００）高分解能ＭＳ：実測値　３２８．０９３０計算値　３２８．０９４７　（Ｃ＋　ｓ　Ｈ＋　ｓ　Ｏ
ｓとして）Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ）　　：　ｃ「１：３５００．２９００．２８４０．１６３０．１６００．
１５８０．１５４０．１５１０．１４６０．１３８０．
１３６０．１３００．１２８０．１２５０．１１８０．
１１５０．１１２０．１０８０．１０３０．９７０、・
′９５０．９００．８６０．８２０ＵＶ　　λ　　　（エタノール）ｎｍ：２１８　（ε＝
ａｘ２６８３０）　、２２４　　（ε＝２４３９０）　　、
２３４　（ε＝２１１４０）　　、２５０　　（ε＝１
６６７０）　　、２９０　　（ε＝１４６３０）　　、
３１０　（ε＝１７４８０）　、３３０　　（、ε−Ｈ
−Ｎ　Ｍ　Ｒ（４００Ｍ　Ｈｚ　ＳＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏｄ　
ｓ　）δｐｐｍ：９、　６１　　（ＩＨ，ｄＳ　Ｊ＝７．　９Ｈｚ）　　
、９、　１０　　（ＩＨＳ　ｓＳ　Ａｒ０）Ｉ）　　、
９．０２　　（ＩＨ，ｓ、Ａｒ０Ｈ）、７．６４　　（
ＩＨ，ｄＳ　Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、７．３７　　（ＩＨ
，ｄＳ　Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．２７　　（ＩＨ，ｄｄ
、Ｊ＝８．３Ｈｚ。

２、　０Ｈｚ）　　、６．９９　　（ＩＨＳ　ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、６．８
１　（１’Ｈ，ｄＳ　Ｊ＝２．０Ｈｚ）　、６．７６　
　（ＩＨ，ｄＳ　Ｊ＝８．３Ｈｚ）　、６．７５　　（
ＩＨＳ　ｄｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ。

７．９Ｈｚ）　　、６．７１　　（ＩＨ，ｄｄＳ　Ｊ＝８．３Ｈｚ。

２、　０Ｈｚ）　、４．９７　　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、ＯＨ）、４
．９２　　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）　、４、　１
０　　（ＩＨ，ｄｄｄ、Ｊ＝７．　５Ｈｚ。

５．６Ｈｚ、２．８Ｈｚ）　　、３、　５６　　（ＩＨ，ｄｄｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ。

５、　６Ｈｚ、２．　８’Ｈｚ）　　、３．３６　　（
ＩＨ，ｄｄｄ、Ｊ＝１２．　３Ｈｚ。

５、　６Ｈｚ、５．　６Ｈｚ）実施例２実施例１で得られた分画Ｃ（１５，２ｇ）をトヨパール
ＨＷ−４０Ｆ　［１０００脱、東洋曹達工業社製〕に供
し、メタノール（２Ｑ）で溶出して、フラクション１〜
５を得た。フラクション４を減圧下溶媒を留去すると残
渣７．３３ｇが得られた。

上記で得られた残渣のうち、１．４ｇを中圧逆相カラム
クロマトグラフィー（ＬｏｂａｒＦｅｒｔｉｇｓａｕｌ
ｅ　　Ｇｒａｐｅ　　（４４０−３７）ＬｉＣｈｒｏｐ
ｒｅｐ　　ＲＰ−８、メルク社製〕に付し、５０％メタ
ノール／水（Ｖ／ｖ）（ＩＲ）で溶出してフラクション
１〜５０を得た。更にこのフラクションを上記中圧逆相
カラムクロマトグラフィーに付し、５０％メタノール／
水（ｖ／ｖ）　（Ｉ　Ｑ　）で溶出してフラクション５
１〜１００を得た。各フラクションを高速液体クロマト
グラフィー〔カラム：　Ｃ０３Ｍ０３ＩＬ　　５　Ｃ＋
　ｓ１０ｍｍＸ　２５０ｆｆＩｎｓ溶媒：メタノール−
アセトニトリル−水（２０：　２５　：　５５　ｖ／ｖ
）　、流速＝２ｍＬ／ｍｌ　ｎｓ検出器：ＵＶＵＶ−２
５４ｎを用いて分析して、リテンションタイム１３分を
示すフラクションのみを集めて減圧下濃縮した後、得ら
れた結晶をクロロホルム／メタノールより再結晶するこ
とにより、３−（２，３−）ランス−３−（３゜４−ジ
ヒドロキシフェニル）−２，３−ジヒドロ−２−（ヒド
ロキシメチル）−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル
〕−２−プロペノール（以下この化合物を「化合物（３
）」という）を無色プリズムとして１．６０ｇ得た。

次に上記高速液体クロマトグラフィーを用いた分析で、
リテンションタイム１５分を示すフラクションのみを集
めて減圧下濃縮した後、得られた結晶をクロロホルム／
メタノールより再結晶することにより、３−　（２，３
−）ランス−３−（３゜４−ジヒドロキシフェニル）−
２，３−ジヒドロ−２−（ヒドロキシメチル）−１，４
−ベンゾジオキシン−７−イル〕−２−プロペノール（
以下この化合物を「化合物（４）」という）を無色針状
晶として０．３３ｇ得た。

化合物（３）の物性融点１５７〜１５９°Ｃ（無色プリズム）【α〕茗　＝
０．００°　（Ｃ＝１．０５、エタノール）Ｅ　Ｉ　ＭＳ　（７０ｅ　Ｖ）　　：　ｍ／ｚ（ｔｅｌ
、ｉｎｔ、）　。

３３０　（Ｍ”　）（１００）　、３１２　（８６）、
１６６　（４６）　、１２３　（１００）、高分解能Ｍ
Ｓ：実測値　３３０．１１００計算値　３３０．１１０４　（Ｃ＋　ｓ　Ｈ＋　ｓ　０
６として）Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ）　　：　ｃｍ”　：３５００．２９
２０．１６１０．１５８０．１５３０．１５１０．１４
３０．１３７０．１２９０．１２６０．１２００．１１
２０．１０８０．１０４０．９６０．８２０ＵＶ　　λ　　　（エタノール）ｎｍ：２１８　（ｇ＝
ａｘ３６７７０）　、°　２６２　　（ε−１６１３０）、
２６７　（ε−１６４５０）　、３００　　（、ε−５
８１０）　、３１２　　（ε＝３８７０）Ｈ−ＮＭＲ（
４００ＭＨｚＳＤＭＳＯｄｓ　）δｐｐｍ：９．０５　　（ＩＨ，ｂｓ、Ａｒ０Ｈ）、９．００　　
（ＬＨ，ｂｓＳ　Ａｒ０Ｈ）、６．９６　　（ＩＨＳ　
ｄ、Ｊ−２，０Ｈｚ）、６．９２　　（ＩＨ，ｄｄＳ　
Ｊ＝８．　１Ｈｚ。

２、　０Ｈｚ）　　、６．８７　　（ＩＨＳ　ｄＳ　Ｊ＝８．１Ｈｚ）　、６
．８０　　（ＩＨ，ｄＳ　Ｊ＝２．０Ｈｚ）、６．７５
　　（ＩＨＳ　ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）　、６、　７０　
　（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ。

２、　０Ｈｚ）　　、６．４２　　（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ）　、６．
２０　　（ＩＨＳ　ｄｔ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ。

５．４Ｈｚ）　　、４．９１　　（ＩＨ，−ｔＳ　Ｊ＝５．　１Ｈｚ、ＯＨ
）、４．８４　　（ＩＨＳ　ｄＳ　Ｊ＝７．５Ｈｚ）　
　、４．７８　　（ＩＨＳ　ｔ、Ｊ＝５．４Ｈｚ、ＯＨ
’）　、４．０８　　（２Ｈ，、ｔＳ　Ｊ−５，４Ｈｚ
）、４．０３　　（ＩＨＳ　ｄｄｄ、Ｊ−７，５Ｈｚ。

５、　１Ｈｚ、３．　　ＩＨｚ）　、３．５１　　（ＩＨＳ　ｄｄｄＳ　Ｊ＝１２．２Ｈｚ。

５、　１Ｈｚ、３．　１Ｈｚ）　、３．３２　　（ＩＨ，ｄｄｄＳ　Ｊ＝１２．２Ｈｚ。

５、　１Ｈｚ、５．　１Ｈｚ）化合物（４）の物性融点１２５〜１２８℃（無色針状晶）〔α〕茗　＝０．００°　（Ｃ−１，１１、エタノール
）Ｅ　Ｉ　ＭＳ　　（７０ｅ　Ｖ）　　：　ｍ／ｚ（ｒｅ
ｌ、ｉｎｔ、）　。

３３０　（Ｍ”　）　　（１００）　、３１２　（２０
）、１６６　　（３１）　、１６５　　（４５）、１６
４　　（５９）　、１２３　　（１００）、高分解能Ｍ
Ｓ：実測値　３３０．１１００計算値　３３０．１１０４　（Ｃ＋　ａ　Ｈ＋　ｓ　Ｏ
ｓとして）Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ）　　：　ｃｍ’　：３５００．２９
２０．１６１０．１５８０．１５０５．１４４０．１４
００．１３５０゜１２８０．１２６０．１２４０．１１
８０゜１１６０．１１０５．１０９０．１０２０．９６
０．９００．８６０．７６０．６００ＵＶ　　λ　　　
（エタノール）ｎｍ：　２１６　（ε−ａｘ４０７６０）　、２６０　　Ｃε＝１８７９０）、２６
８　（ε＝１８７９０）　、３００　（、ε＝６３７０
）　、３１２　（ε＝４１４０）Ｈ−ＮＭＲ（４００Ｍ
Ｈｚ、ＤＭＳＯｄｓ　）δｐｐｍ：９．０３　（ＩＨＳ　ｂｓＳＡｒＯＨ）、８．９８　（
ＬＨ，ｂｓＳＡｒＯＨ）、６．９７　（ＩＨＳｄ、Ｊ＝
２．０Ｈｚ）、６．９０　（ＩＨ，ｄｄＳ　Ｊ＝８．２
Ｈｚ。

２．０Ｈｚ）、６．８３　（ＩＨＳ　ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、６．８０
　（ＩＨＳ　ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ）、６．７５　（ＩＨ
，ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、６．７０　（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ
＝７．７Ｈｚ。

２．０Ｈｚ）、６．４４　（ＬＨ，ｄＳ　Ｊ＝１５．５Ｈｚ）、６．２
１　　（ＩＨＳ　ｄｔＳ　Ｊ＝１５．５Ｈｚ。

５、　２Ｈｚ）　　、４．９０　　（ＩＨ，ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、ＯＨ）、４
．８２　（ＩＨＳ　ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ）、４．７９　
　（ＩＨＳ　ｔ、Ｊ＝５．２ＨｚＳ　ＯＨ）、４．０８
　　（２Ｈ，ｔ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）　、４．０３　　（
ＩＨＳ　ｄｄｄＳ　Ｊ＝７．７Ｈｚ。

４．３Ｈｚ、２．６Ｈｚ）　、３、　５２　　（ＩＨＳ　ｄｄｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ。

５．０Ｈｚ、２．６Ｈｚ）　、３．３２　　（ＩＨ，ｄｄｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ。

５．２Ｈｚ、４．３Ｈｚ）実施例３厚朴（ホウツキ樹皮）８ｋｇを細切し、メタノール２０
Ｑを添加し、室温下、１週間かけて抽出した。抽出液を
減圧下濃縮し、粗抽出物を得た。粗抽出物を水８Ｑに懸
濁し、酢酸エチルエステル５２ずつで合計３回抽出し、
抽出液を減圧濃縮して、１次抽出物を得た。この１次抽
出物を、水−メタノール（４：６、ｖ／ｖ、１０１２）
に懸濁し、ｎ−ヘキサン５Ｑずつで合計３回抽出し、抽
出液を減圧下１農縮して、ｎ−ヘキサン抽出物（１４０
ｇ）を得た。次に、水−メタノール層を減圧下、約５ｇ
まで濃縮し、これを酢酸エチル５Ｑずつで合計３回抽出
し、抽出液を減圧下濃縮して、酢酸エチル抽出物（２７
４ｇ）を得た。

ｎ−ヘキサン抽出物（１４０ｇ）をセファデックスＬＨ
−２０を６０００ｍ１２充填したカラムクロマトグラフ
ィーに付し、メタノール−塩化メチレン（７：３、ｖ／
ｖ１２１２）で溶出し、フラクション１　（２８，５ｇ
）　、２　（６２，９ｇ）　、３（４６，０ｇ）を得た
。フラクション２（６２，９ｇ）を再度、上記条件と同
じセファデックスＬＨ−２０カラムクロマトグラフィー
に付し、フラクション４　（１１，３ｇ）　、５（２４
，９ｇ）　、６　（２２，５ｇ）　、７　（１，９ｇ）
を得た。

フラクション５　（２４，９ｇ）を、ワコーゲルＣ−３
００を５００ｇ充填したシリカゲルクロマトグラフィー
に付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（９：１、ｖ／ｖ　
、ＩＲ）　　（８，５：　１．５、ｖ／ｖ　。

ＩＱ）　　（８：２、ｖ／ｖ　、　　ＩＱ）　　（７：
　３、ｖ／ｖ　。

１１２）を用いて順次溶出して、フラクション８（１４
，４ｇ）　、９　（４，５ｇ）　、１０　（３，６ｇ）
　、１１　（２，２ｇ）を得た。

フラクション１０　（３，６ｇ）にメタノール（約１０
或）を加え、生じた沈殿物を泗過して、メタノール可溶
物（２，６ｇ）を得た。これをＹＭｅ−Ｇｅｌ（山村化
学製、０ＤＳ−Ａ、６０−０３．２３０／７０メツシユ
）を５０ｍＱ充填したカラムクロマトグラフィーに付し
、メタノール（１００ｍＱ）で溶出した後、溶出部（２
，２ｇ）を逆相中圧ローバーカラムクロマトグラフィー
（メルク社製、Ｌ　１ｃｈｒｏｐｒａｐ　ＲＰ　−８、
ＧｒｏβｅＣ）に付し、メタノール−水（９：１．１２
）及びメタノール（ＩＱ）で２分画溶出して、フラクシ
ョン１１　（０，１９ｇ）　、１２　（０，２２ｇ）　
、１Ｂ（１，５８ｇ）　、１４　（０，３０３ｇ）を得
た。

フラクション１Ｂ　（１，５８ｇ）を、ワコーゲルＣ−
３００を５０ｇ充填したクロマトグラフィーに付し、ｎ
−ヘキサン−酢酸エチル（８５：１５、ｖ／ｖ　）で分
画溶出して、フラクション１５（０，６１４９ｇ）　、
１６　（０，８８５１ｇ）を得た。

フラクション１６　（０，８８５１ｇ）をアルミナカラ
ムクロマトグラフィー（メルク社製、Ａｌｕｍｉｎｉｕ
ｍｏｘｉｄ、　　９０　　ａｋｔｉｖ、　ｎｅｕｔｒａ
ｌｍ、４０ｇ）に付し、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル（８
：２、ｖ／ｖ　）で溶出して得た分画（０，５６６５ｇ
）を高速液体クロマトグラフィー（カラム：　Ｃ０８Ｍ
Ｏ８Ｉ　Ｌ　　ｌ０ＣＩ　Ｂ　　２０Ｘ２５０ｍｍ、溶
出溶媒メタノール−アセトニトリル−水、６５：３５：
１、ｖ／ｖ　、溶出速度９．　９ｍＱ／ｍｉｎ　、　Ｕ
Ｖ２５４ｎｍ）に付し保持時間２８分のピークを示す化
合物を分取して化合物（５）を得た。

化合物（５）の物性無色油状物［αコ　皆　　−−４５，２°　　（Ｃ＝１．　１５、
ＣＨＣＱ３中）Ｅ　Ｉ　ＭＳ　　（７０ｅｖ）　ｍＩｚ（ｒｅｌ、ｉｎ
ｔ、）　　：２８２　　（５８）　、２５３　　（４）
、２３９　　（４）　、２１３　　（４）、２０４　　
（４０）　、１６５　　（９）１４９　　（７３）　、
１４９　　（７３）ＦＤＭＳ　　ｍＩｚ　５０４　　［
Ｍ＋１　　（１００）、２８２　　（９０）　、２２２
　　（４７）ＵＶλｍａｘ　　（Ｅ　ｔ　ＯＨ）　　ｎ
ｍ　（ｇ）　　：２０４　　（５１６００）、　　２２
０　　（２８９００）２７５　　（４９００）、　　２
８２　　（４５００）ＩＲ，第１図に示す。主なピーク
は次の通りである。

νｍａｘ　　（ｎｅａｔ）ｃｌ　　：　３５５０，３４
００゜１６４０．１６００．１５．．２０ＩＨ−ＮＭＲ：第２図に示す。主なピークは次の通りで
ある。

（２００Ｍ　Ｈｚ　ＳＣＤ　ＣＱ　３中）δｐｐｍ０．
９３　（３Ｈ，ｓ、ＣＨ３）１．２３　（６Ｈ，ｓ、ＣＨ３Ｘ２）１．２８　（３Ｈ，ｓ、ＣＨ３）１、ＯＯ〜１．６０　（１１Ｈ，ｍ）１．６５　（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝１２．０２、ＩＨｚ）１．９０　（ＩＨ，ｄ、Ｊ−７，１Ｈｚ）２．２１　　
（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ）３．２３　（２Ｈ，ｄ
、Ｊ＝６．６Ｈｚ）３．３５　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．６
Ｈｚ）４．９５〜５．１５　　（４Ｈ，ｍ）５．５０　　（ＩＨ，ｓ、０Ｈ）５．８０〜６．１０　　（２Ｈ，ｍ）６．５５　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ）６．６１　　
（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ）６．８８　（２Ｈ，ｄ、
Ｊ＝８．６Ｈｚ）７．１１　　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝８．６
Ｈｚ）”　ＣＮＭＲ（６２，９ＭＨｚ、ＣＤＣＱ３中）
δｐｐｍ１９．０５　　（ｑ）　、１９．９３　　（ｔ）、２０
．１２　　（ｑ）　、２２．０６　　（ｔ）、２２．３
３　　（ｔ）　、２７．１４　　（ｑ）、２７．３０　
　（ｑ）　、３４．９０　　（ｓ）、３９．００　　（
ｔ）　、３９．３８　　（ｔ）　、３９．５３　　（ｔ
）　、４０．５１　　（ｔ）、４４．８２　　（ｔ）　
　、４９．６９　　（ｄ）　、５２．４０　　（ｄ）　
、７２．７５　　（ｓ）　、８５．５０　　（Ｓ）、１
１５．６３　　（ｔ）　、１１５．７７　　（ｔ）　、
１１６．０３　　（ｄ）、１１６．９４　　（ｄ、Ｃｘ
２）　、１１９．９９　　（ｄ）　、１２９．５６　　（ｄ、Ｃｘ２）　、１３０．５４　　（ｓ）　、１３４．０９　　（ｓ）　
　、１３７．３４　　（ｄ）　、１３７．５４　　（ｄ
）　、１４０．９６　　（ｓ）　、１４２．６０　　（
ｓ）　　、１４３．２２　　（ｓ）　、１５６．０２　
　（ｓ）薬理試験ラット給仕（１７日令）の大脳皮質の神経細胞を無菌的
に取り出し、アソウらの方法（Ａｓｏｕ、Ｈ。

プレイン　レス、３３２．ｐ３５５−３５７（１９８５
））に従って培養を行なった。即ち、取り出した大脳半
球、髄膜、血管等を除去後、ステンレスメツシュ（ポア
サイズ１４０μｍ）に通し、単離された細胞を培地（１
５％子牛血清、１ｇ／Ｑブドウ糖を含むイーグル培地）
に浮遊し、ポリーＬ−リジンでコーティングした径３５
ｍｍデイツシュに１．５Ｘ１０６個づつまいて、培養を
開始した（３７℃、３％Ｃ０２）。２４時間後に培地を
供試化合物の入った培地と交換し、更に９日間培養した
。

培養開始４．７及び１０日口取位相差顕微鏡下で神経突
起の伸張（ＮＳ）及び神経細胞間のネットワーク形成（
ＮＮ）の程度を対照群と比較し、評価した。結果を下記
第１表に示す。

第　　１表（＋）　：コントロールと同等。

（−）：コントロールに比し劣る。

製剤例１化合物（１）　　　　　　　　　　　　　　５ｍｇデン
プン　　　　　　　　　　　　　　１３２ｍｇマグネシ
ウムステアレート　　　　　　１８ｍｇ乳　　糖　　　
　　　　　　　　　　　　　　　４５ｍｇ計　　　　　
　　　　　　　　　　　　２００ｍｇ常法により１錠中
、上記組成物の錠剤を製造した。

製剤例２化合物（１）　　　　　　　　　　　　２００ｍｇブド
ウ糖　　　　　　　　　　　　　　２５０ｍｇ注射用蒸
留水　　　　　　　　　　　適　合金量　　　　　　　
５１１Ｑ注射用蒸留水に化合物（１）及びブドウ糖を溶解させた
後５ｍｌのアンプルに注入し、窒素置換後１２１℃で１
５分間加圧滅菌を行なって上記組成の注射剤を得た。

製剤例３化合物（５）　　　　　　　　　　　　　２００ｍｇブ
ドウ糖　　　　　　　　　　　　　　　２５０ｍｇ注射
用蒸留水　　　　　　　　　　　適　合金ｆｌ　　　　
　　　　５或注射用蒸留水に化合物（５）及びブドウ糖を溶解させた
後５１ＴＩＱのアンプルに注入し、窒素置換後１２１℃
で１５分間加圧滅菌を行なって上記組成の注射剤を得た
。

【図面の簡単な説明】

第１図は、実施例３で得られる本発明化合物のＩＲスペ
クトル図、第２図は、該化合物のＩ　Ｈ−ＮＭＲスペク
トル図である。（以　上）

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｒ＾１及びＲ＾２の一方は水素原子を示し、他方
は▲数式、化学式、表等があります▼（Ｒはヒドロキシ
メチル基又はホルミル基）を示す。〕で表わされる化合物及び式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる化合物からなる群から選ばれた少なくとも
一種の化合物を有効成分として含有する神経細胞変性修
復剤。
（２）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表わされる化合物。