JP3430322B2 - スポンギスタチン５、７、８及び９ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、海産海綿ＳＰＩＲＡＳ
ＴＲＥＬＬＡ ＳＰＩＮＩＳＰＩＲＵＬＩＦＥＲＡ（Ｃ
ｌａｓｓ ＤＥＭＯＳＰＯＮＧＥ ＨＡＤＲＥＲＩＤ
Ａ，Ｆａｍｉｌｙ ＳＰＩＲＡＳＴＲＥＬＬＩＤＡＥ）
から抽出した化合物の発見と単離に関する。こらの新し
い大環式ラクトンは、スポンギスタチン５、スポンギス
タチン７、スポンギスタチン８及びスポンギスタチン９
と命名されている。スポンギスタチン５とポンギスタチ
ン７は、米国国立がん研究所（ＮＣＩ）のパネルにおい
て、ヒトのん細胞ラインに対して著しく可能性及び特殊
性のあることが発見された。ここに載された研究のある
ものは、ＮＣＩ ＧＲＡＮＴ ０１Ｇ ＣＡ−４４３４
４−０１−０４によって支持さた。米国政府は、この発
明にある権利を有する。本発明は、スポンギスタチン
５、７、８及び９と命名されるヒトのがん細胞の成長を
阻止する物質に関する。

【０００２】コケムシ綱、軟体動物門及び海綿動物の門
に属する昔の水産の無脊椎動物の多くは何十億年もの昔
から地球上の海中にいた。それらは今日のレベルの細胞
機能、組織及び防御に達するまでには、その進化の科学
のなかで莫な生合性反応を行ってきたであろう。海産の
スポンジ類は約５億年のあいだその外観は殆ど変ってい
ないが、これは少くともその間は外的条件の変化に応じ
ての極めて有効な化学的進化のあったことを示唆する。
生物学的に活性な水産動物成分の利用についての潜在力
の認識は、紀元前、２７００年にエジプトで記録されて
いる。そして紀元年２００年までに、ウミアラシの抽出
物が医療用にギリシャで使用されていた。海産物（とく
に無脊椎動物やサメ）が殆どがんを発達させないという
一般的観察と共に上記の考えは海産動物や植物の抗がん
成分の最初の系統的研究へと導くものであった。

【０００３】１９６８年までに、アメリカの国立がん研
究所（ＮＣＩ）の実験的がん系に基いて、ある種の水産
生物は新しく構造的に新規の抗新生物及び／又は細胞毒
的物質をもつという十分な証明を得た。同様な検討は、
水産生物はまた、たとえばウイルス性疾患のよう重篤な
医学的チャレンジのための効果的な新しい医薬をも提供
することを示唆した。さらに、水産生物は当時の医化学
技術の発見を逃れるような、前例のない構造タイプの有
用な医薬の候補（及び生化学的プローブ）を含有してい
ると期待された。幸にもこれらの期待はそのうちに現実
のものとなった。その成功例はアリゾナ州のテンプのが
ん研究所によるブリオスタチン、ドラスケン及びセファ
ロスタチンの発見であり、これらの系統の数種のすぐれ
た抗がん剤の候補品が、今やヒトによる臨床試験又は前
臨床段階にある、アメリカ特許４８１６４４４，４８３
３２５７，４８７３２４５及び４８７９２７８参照。

【０００４】医学の研究に現在従事している人に公知の
ように、新しい化合物の親からその市販までは最短で少
くとも数年を要し、幾つもの関門を必要とする。したが
って政府と関連して、産業界は２つの目的のための多く
の試験を考案した。一つの目的は、化合物の特性が、更
なる投資として経済的に逆効果になるような化合物をな
くすることである。第２の、そしてもっと重要な目的
は、法規制をクリアし上市可能となるような化合物を見
出すことである。

【０００５】現在、そのデータを得るには一化合物につ
いて１千万ドルもの費用を必要とする。経済性の面から
は、それが回収可能である時にのみ投資すべきである。
このようなチャンスは特許の保護によって成さるべき
で、それがよい時は投資に行われず、生命保険の薬剤の
進歩は停止するであろう。

【０００６】僅か２００年以前に、多くの病気が人類を
破滅した。その病気の多くは制御され一掃された。開発
過程では適切な実験動物が極めて重要であった。いろん
なタイプのがんやＨＩＶウイルスでは現在そのような研
究が進行中である。いろんながんの治療研究に、政府機
関たるＮＣＩが主催し抗がん研究を助けている。ある化
合物が抗がん活性をもつかどうかについて、ＮＣＩが開
発した多くのプロトコールがある。そのひとつは６０種
のヒト腫瘍細胞系を含む細胞系パネルに対するテストか
ら成る。このプロトコールは実証され学界で受け入れら
れている。このプロトコールと、そこから得た統計的評
価法は文献に記載がある。すなわちテストプロトコール
の詳細はＭｉｃｈａｅｌ Ｒ．Ｂｏｙｄ：Ｐｒｉｎｃｉ
ｐｉｅｓ＆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇ
ｙ，（ＰＰＯ最新版），Ｖｏｌ３，Ｎｏ．１０（１９８
９年１０月）を参照。また統計的分析は次の文献に説明
がある。“ヒト腫瘍細胞系に対する医薬の特異活性のパ
ターンの分析と展示：平均グラフとＣＯＭＰＡＲＥアル
ゴリズムの光度”Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅＮａｔ
ｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｒｅ
ｐｏｒｔｓ，Ｖｏｌ．８１，Ｎｏ．１４，ｐ．１０８８
（１９８９年７月１４日）（著者はＫ．Ｄ．Ｐａｕｌｌ
ほか）これら両文献はこの参照により本明細書の一部を
成すものである。

【０００７】

【従来の技術】大環式ラクトン型の水産動物の成分は、
新しい抗がん剤候補の極めて重要なソースであることが
明らかになりつつある。ブリオスタチン１の現在行われ
つつあるヒトの治療の試み及びサリコンドリンＢ、ハリ
スタチン１及びエクテイナスシジン７２９の前進しつつ
ある前治療開発が実例である。水産海綿のテオネラ種か
らのオナマイドシリーズの７つの興味あるパーヒドロピ
ラン及びマイケルアドハエレンス（ポリフェラ）からの
サイトトキシック大環式ラクトンが関連して記載されて
いる。

【０００８】本願出願人が先に出願した特願平６−３０
７６２号明細書に記載のスポンギスタチン１は、インド
洋ＳＰＯＮＧＩＡ ＳＰにおいて発見され、６０のヒト
のがん細胞ラインのＮＩＣ（米国国立がん研究所）パネ
ルにおいて、高度に化学抵抗性の腫瘍型に対して現在知
られた最も著しい可能性物質の一つである。同じ海綿種
からの他の活性フラクションの集中的調査は、スポンギ
スタチン２及び３と命名された二つの新しい極めて可能
性のある大環式ラクトン類を明らかにした。

【０００９】更に、種ＳＰＩＲＡＳＴＲＥＬＬＡの典型
的に明るく（赤、紫に）着色した水産海綿は、従来、
Ｓ．ＩＮＳＩＧＮＳ．の砒素分に対する外は、生物的活
性成分について調査されたことはなかった。１９７３
年、アフリカ南東海岸で集められたＳＰＩＲＡＳＴＲＥ
ＬＬＡ ＳＰＩＮＩＳＰＩＲＵＬＩＦＥＲＡについてア
ンチネオプラスチック成分の２０年の調査が開始され
た。スポンギスタチン５、スポンギスタチン７、スポン
ギスタチン８及びスポンギスタチン９と命名されるこの
海綿からの極めて可能性のあるアンチネオプラスチック
物質の単離と構造を開示する。これらのスポンギスタチ
ンは、トレースの成分であるため、その単離と構造の解
明は特に困難であった。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ここ
にスポンギスタチン５及びスポンギスタチン７と命名さ
れ、種々のヒトのがん細胞ラインに対して約１０のマイ
ナスのログ分子ＴＧＩ_５０を有する構造的に未知の大環
式ラクトンの単離及び極めて密接よ関連するスポンギス
タチン_８及びスポンギスタチン_９の単離である。

【００１１】本発明の他の目的は、スポンギスタチン
５、スポンギスタチン７、スポンギスタチン_８及びスポ
ンギスタチン_９と命名された物質の構造の解明を得るこ
とである。さらに他の目的は、ＮＣＩラインのヒトのが
んで侵されたヒトの細胞をスポンギスタチン５、スポン
ギスタチン７、スポンギスタチン８及びスポンギスタチ
ン９で処理する方法を決定することである。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明は、ヒトのがん細
胞ラインのＮＣＩパネルに対して試験した時、顕著な可
能性と特殊の性質を有することが発見されたスポンギス
タチン５及びスポンギスタチン７と命名された新しい大
環式ラクトン、及び関連化合物スポンギスタチン８及び
スポンギスタチン９に関する。これらの化合物の構造式
は次の通りである。

【００１３】

【化１】 但し、２ａ，Ｒ＝Ｃｌ、Ｒ_１＝Ｈ スポンギスタチン５ ｂ，Ｒ＝Ｈ、 Ｒ_１＝Ｈ スポンギスタチン７ ｃ，Ｒ＝Ｈ、 Ｒ_１＝ＣＯＣＨ_３ スポンギスタチン８ ｄ，Ｒ＝Ｃｌ、Ｒ_１＝ＣＯＣＨ_３ スポンギスタチン９

【００１４】スポンギスタチン５、７、８及び９の単離 １９８０年７月、エタノール中に保存されたＳＰＩＲＡ
ＳＴＲＥＬＬＡ ＳＰＩＮＩＳＰＩＲＵＬＩＦＥＲＡの
大規模なレコレクション（２４０９ｋｇ）が完了した。
初期抽出、溶剤分配及びプレパレーチプＨＰＬＣがパイ
ロットプラントの規模でで行われた。分離図パート１は
このプロセスの概要を示す。

【００１５】

【表２】 海綿物質をプロパノールで抽出し、得られた抽出物を濃
縮し、水で希釈し、メチレンクロリドで抽出した。乾燥
したメチレンクロリド抽出物（１３．８６Ｋｇ）はヘキ
サンと水性メタノールで分配し、乾燥した（２Ｋｇ）。

【００１６】最終のパイロットプラントの規模の高度の
液クロマドグラフィー（ＨＰＣＬ）分離（シリカゲル、
０．１５×３ｍカラム、１５０ｐｓｉ）を、次の段階成
分システムを用いて行った。

【００１７】メチレンクロリド−メタノール、１００−
０（１６０ １）、９６−４（２０５ １）９４−６
（１０２ １）、９０−１０（１０２ １）、８５−１
５（１０２ １）及び８０−２０（１１０ １）。流出
液は１９１のの容器に集めＴＬＣフラクションによって
試験した。活性フラクションＡ−Ｆ（Ｐ３８８ ＥＤ
_５０ ０．２から＜０．０１μｇ／ｍｌ）の得られたシ
リーズは、メタノール中ＳＥＰＨＡＤＥＸ ＬＨ−２０
（１０×１３０ｃｍカラム）でクロマトグラフィーにか
け、新しい活性フラクションＧ−Ｊ（Ｐ３８８ＥＤ_５０
０．０２から＜１０^−２μｇ／ｍｌ）が得られた。

【００１８】フラクションＧを、シリーズで結合した３
個のメルクローバーのサイズＢのシリカゲルカラム（２
５×３１０ｍｍ）の第１のカラムに入れた。アセトン−
ヘキサン（３：４７）のアセトン−ヘキサン（２：３）
への勾配はメチレンクロリド−メタノール（９３：７）
のメタノールへの勾配とつづき、分離図パート２に示す
ごとく、活性フラクションＫ−Ｏ（Ｐ３８８ ＥＤ_５０
１．８×１０^−５μｇ／ｍｌ）が得られた。

【００１９】

【表３】 次に、フラクションＫ（３８．９ｍｇ）を２個のアナル
テク分析ＴＬＣ板（１０×２０ｃｍ）においた。アセト
ン−ヘキサン（１：１）での溶出は、単一成分、Ｋ８６
０（３．６ｍｇ）を多く含むフラクションを与えた。第
２のＴＬＣ分離を、アセトン−ヘキサン（３：２）でも
ってアナルテク分析ＴＬＣ板（７．５×１０ｃｍ）上で
３．６ｍｇを用いて行った。０．３ｍｇのＫ３６０が得
られた。活性成分Ｈから、さらに純粋に近いＫ８６０
（６．３ｍｇ）が単離され、０．３ｍｇと一緒にしてト
ータル６．６ｍｇが得られた。

【００２０】さらに、パーチシルＭ９シリカゲルカラム
でメチレンクロリドの９３：７メチレンクロリド−メタ
ノールの溶剤勾配を有するＨＰＬＣ（アルテックスプロ
グラムモデル４２０システム、２モデル１１０Ａポン
プ）を用いて、精製を行い、ほぼ純粋に近いＫ８６０
（６．３ｍｇ）が得られた。次に、このサンプルをメタ
ノール−水（１：１）のメタノールへの勾配を有するＨ
ＰＬＣ（パーチシルＭ９１０／５０ ＯＤＳ−２ カラ
ム）を用いてクロマトグラフィーにかけて純Ｋ８６０ス
ポンギスタチン４（１．４ｍｇ）が得られた。混合した
フラクションＭ、Ｎ及びＯ（４２ｍｇ）で平行して分離
を行い、不純Ｋ８５９（８．４ｍｇ）を得、ＨＰＬＣに
よって精製して純Ｋ８５９、スポンギスタチン７（０．
５ｍｇ）が得られた。

【００２１】活性フラクションＩ（分離図パート３）は
水−メタノール、メタノール−メチレンクロリドの勾配
を用いて、しりかげるＲＰ−２（３．７×４４ｃｍ）で
分離し、活性フラクションＰ（１．７５ｇ）を得た。

【００２２】

【表４】

【００２３】ＳＥＰＨＡＤＥＸ ＬＨ−２０（５．５×
９６ｃｍカラム）に溶剤系ヘキサン−トルエン−メタノ
ール（３：１：１）を用いて、活性フラクションＱ〜Ｕ
を得た。フラクションＵ（０．１７３ｇ）を、イソクラ
チン溶剤、水中３６％アセトニトリル及び１．２−１．
８ｍｇ／インゼクションを有するギルソンプレパラチブ
システム（モデル３０３及び３０５ポンプ及びプレペッ
クスＣ８、１０×２５０ｍｍカラム）で繰り返し分離に
かけ、スポンギスタチン４及び５を含むフラクションＶ
（４２．１ｍｇ）及びスポンギスタチン６及び７を含む
フラクションＷ（２９．２ｍｇ）が得られた。最終分離
は、リクロスファー１００ＲＰ１８（４．６×２５０ｍ
ｍ）、水中４５％アセトニトリル及び０．２−０．３ｍ
ｇ／インゼクションで、分析（ギルソン）ＨＰＬＣ分離
を繰り返し行って達成した。ＨＰＬＣのピークはＵＶ、
λ＝２３０ｍｍによって検出した。

【００２４】活性フラクションＳ及びＴは、混合し（１
１１．０ｍｇ）、ヘキサン−トルエン−メタノール
（２：２：１）を用い、ＳＥＰＨＡＤＥＸ ＬＨ−２０
（２．５×７２ｃｍカラム）でクロマトグラフィーにか
けた。得られた活性フラクションＸ（３５．５ｍｇ）
は、水中３６％アセトニトリル及び１．２−１．８ｍｇ
／インゼクションを用いＨＰＬＣ（ギルソンプレパラチ
ブ、プレペックスＣ８、１０×２５０ｍｍ）で分離し
た。活性フラクションＹは、不純スポンギスタチン８
（３．９５ｍｇ）を含み、活性フラクションＺは、不純
スポンギスタチン９（８．１５ｍｇ）を生じた。最終の
ＨＰＬＣ分離は、純スポンギスタチン８（１．８ｍｇ）
及びスポンギスタチン９（５．４ｍｇ）を生じた（分離
図パート４）。

【００２５】

【表５】

【００２６】上記の分離図はスポンギスタチン５ １
２．９ｍｇ（５．４×１０^−７％、ＰＳ ＥＤ_５０６．
６×１０^−５μｇ／ｍｌ）；ｍｐ１８６−１８７℃；
〔α〕^２２ _Ｄ＝−１１．１°（ｃ＝０．２３、ＣＨ_３Ｏ
Ｈ）；ＵＶ（ＣＨ_３ＯＨ）λ_ｍａｘ２２８ｎｍ、ε１４
８４０；ＩＲ（フイルム）３４３０、２９３６、１７３
４、１６４３、１５９１、１３８７、１２７３、１１７
３、１０９０、９８２ｃｍ^−１；高分離ＦＡＢＭＳ、ｍ
／ｚ１１７５．５２３９〔Ｍ＋Ｋ〕Ｃ_５９Ｈ_８９ＣｌＯ
_１９Ｋ（計算値１１７５．５２３９）に対応；スポンギ
スタチン７ ５．３ｍｇ（２．２×１０^−７％収率）；
Ｐ３８８ ＥＤ_５０６．６×１０^−３；ｍｐ１６６−１
６７℃；〔α〕^２２ _Ｄ＝−１５．７°（ｃ＝０．１５、
ＣＨ_３ＯＨ）；ＵＶ（ＣＨ_３ＯＨ）λ_ｍａｘ２２３ｎｍ
（ｌｏｇε ４．２５）；ＩＲ（フイルム）３４２８、
２９３６、１７３６、１６０３、１３８９、１２７３、
１１７３、１０９０、９８４ｃｍ^−１；ＨＲＦＡＢ Ｍ
Ｓ、ｍ／ｚ１１４１．５６５８〔Ｍ＋Ｋ〕^＋Ｃ_５９Ｈ
_９０ＣｌＯ_１９Ｋ（計算値１１４１．５６５３）に対
応；スポンギスタチン８ １．８ｍｇ（７．５×１０
^−８％、ＰＳ ＥＤ_５０８×１０^−４μｇ／ｍｌ；ｍｐ
１５８−１５９℃；〔α〕^２２ _Ｄ＝−３２°（ｃ＝０．
１８、ＣＨ_３ＯＨ）；ＩＲ（フイルム）３４３９、２９
３６、１７３６、１６５３、１６０２、１３８３、１２
５２、１１７８、１０９０ｃｍ^−１；スポンギスタチン
９ ５．４ｍｇ（２．２×１０^−７％収率、ＰＳ ＥＤ
_５０＜１０^−４μｇ／ｍｌ）；ｍｐ１６４−１６５℃；
〔α〕^２２ _Ｄ＝−３３．３°（ｃ＝０．１４、ＣＨ_３Ｏ
Ｈ）；ＩＲ（フイルム）３４３５、２９４０、１７３
６、１６４７、１５９１、１３８５、１２５４、１１７
８、１０９０ｃｍ^−１；を与えた。

【００２７】スポンギスタチン１の構造が設定され、そ
のスポンギスタチン５、７、８及び９との関係が一端決
定するや、ＳＰＩＲＡＳＴＲＥＬＬＡ ＳＰＩＮＩＳＰ
ＩＲＵＬＩＦＥＲＡのアンチネオプラスチック成分に対
する構造が後に述べるように解決されるであろう。

【００２８】表面上、スポンギスタチン５の^１３Ｃ−及
び^１Ｈ−ＮＭＲは類似の骨格を示唆するスポンギスタチ
ン類と類似であった。δ１．１（Ｊ＝６．７Ｈｚ）、
１．１４（Ｊ＝７．０Ｈｚ）、０．９０（Ｊ＝７．１Ｈ
ｚ）及び０．８５（Ｊ＝６．７Ｈｚ）における４個のメ
チル二重項のシグナル、δ１．１４における１個のメチ
ル一重項、δ３．３１における１個のメトキシルのシグ
ナル及びδ５．３８（二重項の二重項、Ｊ＝１０．１１
Ｈｚ）、５．４７（三重項の二重項、Ｊ＝７．１１Ｈ
ｚ）、４．９７（巾広い一重項）、４．９５（巾広い一
重項）、６．１３（二重項の巾広い二重項、Ｊ＝６．１
５Ｈｚ）、６．１４（巾広い二重項、Ｊ＝１５Ｈｚ）、
５．４２（巾広い一重項）及び５．３３（巾広い一重
項）におけるＳＰ^２プロトンのシグナルはこの仮定と一
致した。

【００２９】さらに、δ５．４２、５．３３及び６．４
１におけるシグナルのカップリングのパターン及びＨ−
５０シグナルの無いことは、Ｃ−５０における塩素原子
を示唆した。しかし、１Ｄ及び２ＤのＮＭＲスペクトル
の分析は、次の２点におけるスポンギスタチン５とスポ
ンギスタチン１−４及び６との間の重要な相違を明らか
にした。第１は、アセチル シグナルが存在しないこ
と。第２は、スポンギスタチン１−４に共通のＨ−１３
ａに対するＳＰ^２メチレンのシグナルのペアが存在しな
いこと。

【００３０】^１Ｈ−^１３Ｃ相互関係したスペクトルにお
いて、δ７０．７２における^１３Ｃシグナルは、δ４．
４７（巾広い二重項、Ｊ＝１３Ｈｚ）及び４．０９
（（巾広い二重項、Ｊ＝１３Ｈｚ）における２個の^１Ｈ
シグナル相互関係にあることが分かった。スポンギスタ
チン５の^１Ｈ−^１Ｈ ＣＯＳＹスペクトルは、δ５．２
４（巾広い二重項、Ｊ＝１１Ｈｚ）におけるシグナルへ
の長い範囲のカップリングをもってδ４．４７及び４．
０９にといて２個のシグナルを示した。順に、δ５．２
４におけるシグナルは、δ５．２８（二重項の巾広い二
重項、Ｊ＝９．１１Ｈｚ）におけるシグナルとカップリ
ングしていることが分かった。

【００３１】スポンギスタチン５の^１３Ｃ ＮＭＲにお
いて、Ｃ−１３、Ｃ−２８、Ｃ−２９、Ｃ−４５、Ｃ−
４５ａ、Ｃ−４８、Ｃ−４９、Ｃ−５０、Ｃ−５１にと
けるＳＰ^２炭素原子に対するシグナルは、スポンギスタ
チン１、３及び４に対して発見されたと実質的に同じ化
学シフトで観察された。δ１２０．１３における残る一
つのＳＰ^２炭素のシグナルは、^１Ｈ−^１３Ｃスペクトル
において、δ５．５４にとける１個のプロトンのシグナ
ルとのみ相互関係を示した。

【００３２】このような証拠は、^１Ｈ ＮＭＲスペクト
ルにおいて、δ４．４７及び４．０９けるＡＢパターン
を生じた酸素に結合したＣ−１３ａ原子へのＣ−１２、
１３二重結合アリル基がスポンギスタチン５に存在する
ことを示した。δ８４．４６（スポンギスタチン４にと
いてはδ７３．７５）におけるＣ−１５シグナルのこの
ようなシフトはＣ−１５、Ｃ−１４、Ｃ−１３及びＣ−
１３ａから成るテトラヒドロフランリングの存在を示唆
した。ＦＡＢＭＳによって示唆された分子式は、この結
論を有利にした。テトラヒドロフランリングの存在は、
さらに、δ４．４６ｐｐｍ（Ｃ−１５）における^１３Ｃ
シグナルがδ４．４７における２個のＨ−１３ａシグナ
ルの一つと強く相互に関係しているＨＭＢＣスペクトル
によって、確かめられた。^１Ｈ−及び^１３Ｃ−ＮＭＲ並
びにＨＭＢＣ相互関係の全てのデーターは、スポンギス
タチン５に与えられた構造を強く支持した。

【００３３】構造の設定されたスポンギスタチン１−５
は、全く困難であったが、広範な高いフイールド（４０
０及び５００ＭＨＺ）の２−Ｄ ＮＭＲ及び高度の分析
質量スペクトル観測を要求した。しかし、これらの分析
の結果は、スポンギスタチン６及び７の構造解明を完了
するのに極めて重要であることを明らかにした。スポン
ギスタチン６の^１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、スポンギス
タチン型リング系を示した。例えば、スポンギスタチン
１−５に存在する４個のメチルシグナルは、δ０．９７
（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、１．１２（ｄ、Ｊ＝７．１Ｈ
ｚ）、０．９１（ｄ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）及び０．８３
（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ）に見い出された。δ２．９０
（巾広い、ｄ、Ｊ＝１８Ｈｚ）、２．８３における^１Ｈ
シグナル及びδ２１５．２９における^１３Ｃシグナル
は、スポンギピランＣ−１７カルボニル系の特徴であっ
た。

【００３４】δ５．０４（巾広い、ｄ、Ｊ＝１１Ｈ
ｚ）、５．１７（巾広い、ｄ、Ｊ＝１７Ｈｚ）、６．６
３（ｄ、ｄ、ｄ、Ｊ＝１１、１１、１７Ｈｚ）における
ＡＢＸスピンシステムの存在は、スポンギスタチン２の
それと類似のＣ−１５における塩素原子よりもプロトン
を示唆した。１個のアセチル基の存在は、δ２．０３
（ｓ、３Ｈ）、１７２．８０及び２１．６５における^１
Ｈ及び^１３Ｃシグナルによって明らかであった。^１Ｈ−
^１Ｈ ＣＯＳＹ及び^１Ｈ−^１３Ｃ ＣＯＳＹ実験は、^１
Ｈ及び^１３３Ｃ設定を確立した。δ５．０４（１Ｈ、巾
ひろい、ｓ）及び３．８３（１Ｈ、巾広い、ｄ、Ｊ＝９
Ｈｚ）におけるＨ−５及びＨ−１５シグナルの化学的シ
フトは、Ｃ−５におけるアセチル基のアタッチメントを
指摘した。

【００３５】同じような構造決定のアプローチがスポン
ギスタチン７に適用された。ＨＲＦＡＢ ＭＳ データ
ーは、ｍ／ｚ １１４１．６〔Ｍ＋Ｋ〕^＋においてマッ
チしているピークを用いて、分子式Ｃ_５９Ｈ_９０Ｏ_１９
を設定した。スポンギスタチン７、但し、スポンギスタ
チン５に見い出された追加のテトラヒドロフランリング
での２Ｄ ^１Ｈ−及び^１３Ｃ− ＮＭＲ実験の結果は、
スポンギピランリング系を示唆した。後者の特徴は、δ
５．２９（巾広い、ｄ、ｄ、Ｊ＝１０．１１Ｈｚ）／６
７．２６、５．２４（巾広い、ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ）／１
２０．１６、４．４８（巾広い、ｄ、Ｊ＝１３Ｈｚ）、
４．１０（巾広い、ｄ、Ｊ＝１３Ｈｚ）／７０．７５に
おける^１Ｈ−^１３Ｃシグナル及びδ３．９２（ｄ、ｄ、
Ｊ＝３．７、１０Ｈｚ）／８４．５０におけるシグナル
によって明らかにされた。

【００３６】δ５．０４（巾広い、ｄ、Ｊ＝１０Ｈ
ｚ）、５．１７（巾広い、ｄ、Ｊ＝１７Ｈｚ）及び６．
３２、４．４８（ｄ、ｄ、ｄ、Ｊ＝１０、１０、１７Ｈ
ｚ）におけるＡＢＸシグナル Ｋ存在は、塩素原子より
もＣ−５０における水素原子のためであった。テトラヒ
ドロフランリングは、δ４．４８における２個のＨ−１
３ａシグナルの一つがδ８４．５０におけるＣ−１５シ
グナルとクロスピーク示す時、ＨＭＢＣ実験によって確
認された。ＨＲＦＡＢＭＳスペクトルのデーターもまた
追加のテトラヒドロフランリングをもつスポンギピラン
リング系を強く支持した。かくして、スポンギスタチン
７の構造は、明確に設定された。

【００３７】スポンギスタチン８の不足のた、構造的解
明は、スポンギスタチン９の構造を推論することによっ
て簡単化された。高度の分析ＦＡＢＭＳ及び高フイール
ド２ＤＮＭＲ観測はスポンギスタチン９に対して考究中
であるが、スポンギスタチン８の構造は次のように完成
した。スポンギスタチン８のテトラヒドロフランリング
は、δ４．４５（巾広い、ｄ、Ｊ＝１３Ｈｚ）、４．１
０（巾広い、ｄ、Ｊ＝１３Ｈｚ）／７０．７０及び１．
９５（アセチル、ｓ、３Ｈ）／２１．３１及び１７２．
５６（アセチル、ｓ、３Ｈ）において化学シフトによっ
て認められる。

【００３８】δ６．３３（ｄ、ｄ、ｄ、Ｊ＝１０、１
０、１７Ｈｚ）におけるシグナルは、Ｃ−５０はその位
置において通常のスポンギスタチン塩素原子がないこと
を示した。一連の^１Ｈ−^１Ｈ ＮＭＲ実験は残る^１Ｈシ
グナルの設定を与え、^１３ＣＮＭＲシグナルはスポンギ
スタチン９からの類似のＮＭＲとの比較によって説明さ
れた。

【００３９】スポンギスタチン９の構造は、^１Ｈ−^１Ｈ
ＣＯＳＹ、^１Ｈ−^１３Ｃ ＣＯＳＹ、ＡＰＴ及びＨＭ
ＢＣ ＮＭＲ実験の結果を利用して、高フイールドＮＭ
Ｒスペクトロスコープによって決定された。スポンギス
タチン９の^１Ｈ−及び^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトは、それ
はδ１．１３（３Ｈ、Ｓ）／３０．１７、１．０４（３
Ｈ、ｄ）／１４．５９、１．１４（３Ｈ、ｄ）／１５．
１０、０．８９（３Ｈ、ｄ）／１１．５２、０．８４
（３Ｈ、ｄ）／１３．００におけるシグナル、δ１７
３．６６におけるエステルカーボニル及びδ２１３．４
２におけるケトンカーボニルによるスポンギスタチンの
一員であることを示した。スポンギスタチン９は、二つ
のＨ−１３ａに対応するδ４．４５（巾広い二重項、Ｊ
＝１３Ｈｚ）及び４．１０（巾広い二重項、Ｊ＝１３Ｈ
ｚ）におけるシグナルによるテトラヒドロフランリング
を有することが発見された。アセチル基は、δ１．９５
（３Ｈ）／２１．３５及び１７２．６１におけるシグナ
ルによって明らかである。アセチル基がＣ−５酸素原子
に結合していることは、δ４．９６におけるＨ−５の化
学シフトによることは明らかである。δ５．４２及びδ
５．３３における二つの巾広い一重項とＣ−５０に対す
る^１Ｈシグナルの無いことは、その位置における塩素原
子を示すものであった。^１Ｈ−及び^１３Ｃ−ＮＭＲシグ
ナルに対する完全な設定は、ＡＰＴ及びＨＭＢＣの結果
と共にコンピレーション１に見られる。

【００４０】

【表１】

【００４１】スポンギスタチン５とスポンギスタチン７
を米国立がん研究所（ＮＩＣ）で６０例のヒトのがん細
胞系統パネルに試したところ、劇的な結果が現れた。こ
のＮＩＣの６０例の細胞系統試験管内スクリーニングパ
ネルでのスポンギスタチン５及びスポンギスタチン７の
比較試験で両者ともスポンギスタチン１と同程度の総体
的効果が確認された（例えば、パネル平均ＧＩ_５０１０
^−１０Ｍ；表６）。

【００４２】

【表６】

【００４３】これらの化合物の効能はこれまでＮＩＣが
スクリーニングした物質中で最強のものである。なかで
も興味を引くのと、最近ＮＩＣスクリーニングパネルに
組み入れたヒトのがん細胞系統の幾種かが最も敏感な反
応を見せた（例えばＧＩ_５０１０^−１１〜１０
^−１２Ｍ）。さらにパターン認識解析の結果、スポンギ
スタチン１、５、７のいずれにおいても、作成された非
常に特徴的な平均グラフ「フインガープリント」（相対
的細胞感度のパターン）表６が、微少管相互作用型抗有
系分裂薬の重要な一般クラスのものと良い合致を見てい
ることがわかった（データー記載せず）。

【００４４】抗腫瘍性物質の新種として興味を引いてい
るこの物質はいくつかの構造変種をもっているが、いず
れも試験管内の活性で基本的な欠乏をみせてはいない。
動物実験ではスポンギスタチン１の場合、投与量１０μ
ｇ／Ｋｇ で延命スパン（ＩＬＳ）７８％、スポンギス
タチン５の場合、５μｇ／Ｋｇ で、ＩＬＳ６５％、ス
ポンギスタチン７の場合、４０μｇ／Ｋｇ で、ＩＬＳ
６０％となった。こうした構造変種が生体内の活性能力
に与える正／負の効果は未知であるが、さらに生物学的
評価を重ねてゆけば、試験管内でこれらが顕著な活性を
もつことが確認されよう。

【００４５】スポンギスタチンが（分類学的ならびに全
体配置的に）はるかに離れた海綿動物種の中から発見さ
れた事実は、この優れた抗腫瘍剤として非常に重要な新
種がこれら海生無脊椎動物及び／又はこれらに関連する
海生微生物の中に広く分布していることの証左ではない
かと見られる。面白いことに、最も遠隔地である南太平
洋の島イースターしま付近で見つけた海綿動物の研空第
１段階で同じ一般区域からＳＰＩＲＡＳＴＲＥＬＬＡ
ＣＵＮＣＴＡＴＲＩＸとＳＰＯＮＧＥ ＶＩＲＧＵＬＴ
ＯＳＡの両種が見つかっている。この両スポンジをさら
にスポンギスタチンとして研究してゆけば有用と判明す
るであろう。

【００４６】現在、スポンギスタチン４及び５について
ヒトのがん異種移植評価が拡張生体内試験で続行中であ
る。あわせてＸ線結晶構造解析を用いたスポンギスタチ
ン類の絶対構造配列の解明が進んでいる。スポンギスタ
チン５、スポンギスタチン７、スポンギスタチン８、ス
ポンギスタチン９のＮＭＲデーターをそれぞれ表７、
８、９、１０に掲げる。

【００４７】

【表７】

【００４８】

【表８】

【００４９】

【表９】

【００５０】

【表１０】

【００５１】表１１には現在入手できる範囲のスポンギ
スタチン１、４、５、６、７に関する生体内試験データ
ーを示す。

【表１１】

【００５２】表１２及び１３にはスポンギスタチン５、
７のＮＣＩ系統データーをそれぞれ掲げる。

【表１２】

【００５３】

【表１３】

【００５４】この化合物は下に並べた酸類のいくつか或
いはすべてを用いて有効に改質できよう。 （ａ）飽和または不飽和、直鎖または分岐鎖型志望族カ
ルボン酸類、例えば、酢酸、プロピオン酸、ブチル酸、
イソブチル酸、３級酢酸ぶちる酸、吉草酸、イソ吉草
酸、カフロン酸、カプリル酸、デカン酸、ドデカン酸、
ラウリル酸、トリデカン酸、ミリスチン酸、ペンタデカ
ン酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、ア
クリル酸、オロトン酸、ウンデシル酸、オレイン酸、ヘ
キシン酸、ヘプチン酸、オクチン酸、その他。

【００５５】（ｂ）飽和または不飽和脂環式カルボン酸
類、例えば、シクロブタンカルボン酸、シクロペンタン
カルボン酸、シクロペンテンカルボン酸、メチルシクロ
ペンテンシクロヘキサンカルボン酸、ジメチルシクロヘ
キサンカルボン酸、ジプロピルシクロヘキサンカルボン
酸、その他。 （ｃ）飽和または不飽和脂環式脂肪族カルボン酸、例え
ば、シクロペンタン酢酸、シクロペンタンプロピオン
酸、シクロヘキサン酢酸、シクロヘキサンブチル酸、メ
チルシクロヘキサン酢酸、その他。

【００５６】（ｄ）芳香族カルボン酸類、例えば、安息
香酸、トルイル酸、ナフトエ酸、エチル安息香酸、イソ
ブチル安息香酸、メチルブチル安息香酸、その他。 （ｅ）芳香族−脂肪族カルボン酸、例えば、フェニル酢
酸、フェニルプロピオン酸、フェニル吉草酸、ケイ皮
酸、フェニルプロピオン酸、ナフチル酢酸、その他。

【００５７】適当なハロ−、ニトロ−、ヒドロキシ−、
ケト−、アミノ−、シアノ−、チオシアノ−及び低級ア
ルコキシ−炭化水素カルボン酸類としては、上に掲げた
炭化水素カルボン酸でハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、
ケト、アミノ、シアノ、チオシアノの一つ以上で置換し
たもの、または低級アルコキシ、特に好適には炭素数６
以下の低級アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、
プロポキシ、ブトキシ、アミロキシ、ヘキシロキシ及び
これらの異性体が挙げられる。

【００５８】こうした炭化水素カルボン酸置換体の例
は、モノ−、ジ−、トリ−クロロ酢酸、モノ−、ジ−、
トリ−クロロプロピオン酸、モノ−、ジ−、トリ−ブロ
モブチル酸、モノ−、ジ−、トリ−ヨード吉草酸、メバ
ロン酸、２−及び４−クロロシクロヘキサンカルボン
酸、シキミ酸、２−ニトロ−１−メチル−シクロブタン
カルボン酸、１，２，３，４，５，６−ヘキサクロロ−
シクロヘキサンカルボン酸、３−プロモ−２−メチルシ
クロヘキサンカルボン酸、４−及び５−ブロモ−２−メ
チルシクロヘキサンカルボン酸、５−及び６−ブロモ−
２−メチルシクロヘキサンカルボン酸、２，３−ジブロ
モ−２−メチルシクロヘキサンカルボン酸、２，５ジブ
ロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン酸、４，５−
ジブロモメチルシクロヘキサンカルボン酸、５，６−ジ
ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン酸、３−ブ
ロモ−メチルシクロヘキサンカルボン酸、６−ブロモ−
３−メチルシクロヘキサンカルボン酸、１，６ェジブロ
モ−３−メチルシクロヘキサンカルボン酸、２−ブロモ
−４−メチルシクロヘキサンカルボン酸、１，２−ジブ
ロモ−４−メチルシクロヘキサンカルボン酸、３−ブロ
モ−２，２，３−トリメチルシクロヘキサンカルボン
酸、１−ブロモ−３，５−ジメチルシクロペンタンカル
ボン酸、１−ブロモ−３，５−ジメチルシクロヘキサン
カルボン酸、ホモゲンディン酸、ｏ−，ｍ−及びｐ−ク
ロロ安息香酸、アニス酸、サリチル酸、ｐ−ヒドロキシ
安息香酸、ｂ−レゾルシン酸、没食子酸、ベラトルム
酸、トリメトキシ安息香酸、トリメトキシケイ皮酸、
４，４−ジクロロベンジル酸、ｏ−，ｍ−及びｐ−ニト
ロ安息香酸、シアノ酢酸、３，４−及び３，５−ジニト
ロ安息香酸、２，４，６−トリニトロ安息香酸、チオシ
アノ酢酸、シアノプロピオン酸、乳酸、エトキシギ酸
（エチル炭化水素）、リンゴ酸、クエン酸、イソクエン
酸、６−メチルサリチル酸、マンデル酸、レブリン酸、
ピルビン酸、グリシン、アラニン、バリン、イソロイシ
ン、ロイシン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、
スレオニン、チロシン、ヒドロキシプロリン、オルニチ
ン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、ヒドロキシリシ
ン、フェニルグリシン、ｐ−アミノ安息香酸、ｍ−アミ
ノ安息香酸、アントラニル酸、アスパラギン酸、グルタ
ミン酸、アミノアジピン酸、グルタミン、アスパラギン
その他。

【００５９】スポンギスタチン５、スポンギスタチン
７、スポンギスタチン８、スポンギスタチン９並びにこ
れらの薬用効能性かつ生理的共存性ある誘導体を服用す
れば、腫瘍性疾患にかかっている動物又は人間の治療に
有用である。腫瘍性疾患の例としては急性骨髄性白血
病、急性リンパ性白血病、悪性黒色腫、肺の線がん、神
経芽腫、肺の小細胞がん、乳がん、結腸がん、胃がん、
卵巣がん、膀胱がん、血液悪性疾患その他が挙げられ
る。

【００６０】投与量は個々の腫瘍疾患、年齢、健康状
態、体重などと言った当人の状態、採用していれば併用
している治療、治療の頻度とその療法の比率によって決
められる。例えば、有効成分の投与量としては、静脈注
射では０．１ないしおよそ４０μｇ／Ｋｇ、筋肉注射で
は１ないしおよそ５０μｇ／Ｋｇ、経口投与では５ない
しおよそ１００μｇ／Ｋｇ、鼻孔内点滴では５ないしお
よそ１００μｇ／Ｋｇ、そしてエアロゾル吸入の場合は
５ないしおよそ１００μｇ／Ｋｇである。ここではμｇ
／Ｋｇとは有効成分マイクログラムを患者の体重キログ
ラムで除した値である。

【００６１】濃度で表せば、本願発明の組成物内に有効
成分として存在する量は、経皮、経鼻孔、経咽喉、経気
管支、経膣、経直腸或いは経眼などの局所用法の場合、
およそ０．０１ないしおよそ５０重量％の濃度範囲であ
り、腸管外用法では、およそ０．０５ないしおよそ５０
重量％、好ましくはおよそ５ないしおよそ２０重量％の
濃度範囲である。本発明の組成物は、好ましくは単位投
与形態として人間及び動物に提供するのが良く、例え
ば、錠剤、カプセル、ピル、粉末、粒、座薬、滅菌した
腸管外投与溶液またはけん濁液、滅菌した非腸管外投与
溶液またはけん濁液、経口投与溶液またはけん濁液、そ
の他であり、これらに有効成分を適当量含有させる。経
口投与には固形でも液状でも単位投与形態として用意で
きる。

【００６２】粉末の調整はごく簡単で、有効成分をしか
るべき微粉経まで粉砕し、これを同程度に粉砕した増量
剤に混ぜればよい。増量剤には乳糖とか澱粉といった食
用炭水化物が使われる。好ましくは香料油と合わせて砂
糖などの甘味料を加える。カプセルの調整には、上述の
ようにして作った粉体混合物を用意したゼラチンの鞘内
に充填する。充填作業を助ける目的で潤滑剤、例えばタ
ルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシ
ウムなどを予め混合物に添加しておいてもよい。錠剤の
調整には先ず粉末の混合物をつくり、造粒またはスラギ
ングし、次いで潤滑剤を加えて圧縮造錠する。粉末混合
物の調製は有効成分を増量剤またはベース、例えば澱
粉、乳糖、カオリン、リン酸ジカルシウムその他と混ぜ
て、適当な粒度まで粉砕する。粉末混合物はコーンシロ
ップ、ゼラチン溶液、メチルセルロース溶液またはアカ
シア粘稠剤などのバインダーで湿らせておいて篩目から
押し出して粒状にしてもよい。また別法として、この粉
末混合物をスラギングにかけてもよい。つまりダブルマ
シンにかけて、未だ完全に錠剤とならないうちに破砕し
てスラグとする。このスラグはステアリン酸、ステアリ
ン酸塩、タルク、鉱油などの潤滑剤で錠剤成型ダイスに
粘着しないようにする。こうして潤滑された混合物は圧
縮成型で錠剤となる。

【００６３】必要に応じて錠剤に保護コーチングをかけ
てもよい。保護コーチングはセラックのシールコートま
たは溶腸性コート、砂糖及びメチルセルロースのコー
ト、カルナバルワックスのポリッシュコートから成って
いる。経口服用形態として液体も用意でき、シロップ、
エリキシル剤、けん濁液などがあるが、いずれもスプー
ン１杯分に予め定めた１回の服用量の有効成分が含まれ
る。水に可溶な形態は水性ビヒクルと砂糖、香料、防腐
剤を加えてシロップにできる。エリキシル剤の調製はヒ
ドロアルコール性ビヒクル、しかるべき甘味料と香料を
用いて行う。適当なビヒクルにけん濁剤、例えばアカシ
ア、トラガカントゴム、メチルセルロースなどを併用し
て不溶性のものをつくる。

【００６４】腸管外投与については液状の単位投与形態
のものを調製するが、これには有効成分と滅菌済のビヒ
クル水が好ましい。使用形態と濃度により、有効成分は
ビヒクル中にけん濁させる場合と溶解させる場合があ
る。溶液をつくる際は、適当なガラスビンかアンプルに
入れる前に、水に可溶性の有効成分を注射用水に溶かし
てろ過し、滅菌後、封じる。より好ましくは、補助剤、
例えば局所麻酔剤、防腐剤、緩衝剤をビヒクルに入れる
ことができる。腸管外投与けん濁液の調製も基本的には
同じであるが、異なる点は有効成分がビヒクル内で溶解
することなくけん濁していることと、滅菌をろ過で行え
ないことである。この場合、有効成分の滅菌は、滅菌済
のビヒクル内へけん濁させる前に有効成分をエチレンオ
キサイドに曝すことでできる。より好ましくは、組成分
に海面活性剤か湿潤剤を含めておき、有効成分の均一分
布を果たすことである。

【００６５】経口ならびに腸管外投与に加えて、直腸お
よび膣経由の投与も使える。有効成分は座薬で投与する
こともできる。ビヒクルとして体温付近に融点のあるも
の、また容易に溶けるものが使える。例えば、ココアバ
ターなど各種のポリエチレングリコール類（カーボワッ
クス）がビヒクルとして使える。鼻孔点滴の投与では、
有効成分と適当な薬用ビヒクル、好ましくはパイロジェ
ンフリー（Ｐ．Ｅ）の水を使って液状の単位投与形態の
ものが調製される。吹き込み方式を採る時は乾いた粉末
で調合することもできる。エアロゾルとして使う際は、
有効成分をガス状か液化噴射剤と一緒に加圧容器に充填
すればよく、この噴射剤は、例えばジクロロジフロロメ
タン、炭酸ガス、窒素、プロパン、その他必要に応じ、
或いは所望の場合は、共溶剤と湿潤剤を加えて使う。

【００６６】本願明細書で使用する用語「単位投与形
態」とは、人間および動物被験者が１回に服用する適当
量の物理的な分離単位を指し、各単位には必要量の薬用
増量剤、キャリアまたはビヒクルと共に所望の効能を生
み出すために算出された量の有効成分が含まれている。
本発明の新規な単位投与形態に関する明細は（ａ）及び
（ｂ）に依存している。（ａ）有効物質の独特な特性と
達成すべき特定の治療効果、（ｂ）こうした有効物質を
人間の治療に用いる際の構成技術に本来的に存在する限
界。これらは本願明細書で開示し、本発明の特徴をなす
ものである。本発明による適切な単位投与形態の例とし
ては、錠剤、カプセル、トローチ、座薬、粉末入り小
袋、ウエハー、カシュー、スプーン分取、テーブルスプ
ーン、分取、スポイト分取、アンプル、ガラス小びん、
これらの複数単位分包、および本明細書に記載する他の
形態が挙げられる。

【００６７】抗腫瘍剤として用いる有効成分をこうした
単位投与形態にするのは簡単であり、従来技術で用意で
きる薬用物質を併用して公知の手段により調製すればよ
い。以下に示す調合は本発明の単位投与形態を調製する
説明するための例であり、本発明を限定するものではな
い。

【実施例】本発明の実施例として数種類の投与形態を調
製した。以下の実施例にこれらを示すが、「有効成分」
とはスポンギスタチン５、スポンギスタチン７、スポン
ギスタチン８、スポンギスタチン９及びこれらの合成等
品およびこれらの非毒性医薬的有効誘導体である。

【００６８】組成物Ａ ハードゼラチンカプセル 下記成分および量から経口用のツーピースゼラチンカプ
セル１０００個を調製する。各カプセルには有効成分２
０μｇが含まれている。 有効成分、微粉化 ２０ｍｇ コーンスターチ ２０ｍｇ タルク ２０ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ エアミクロナイザーで微粉化して、有効成分を微粉化し
た他の成分群に加え、十分混合した後常法に従ってカプ
セル化した。このカプセルは１日１ないし４回、１ない
し２カプセル経口服用することにより、腫瘍性疾患の治
療に有用である。上記手法で同様なカプセルを調製し、
上記で用いた２０μｍの代わりに有効成分をを５μｍ、
２５μｍ、５０μｍとし、有効成分含量５μｇ、５μ
ｇ、５０μｇのものをそれぞれ用意する。

【００６９】組成物Ｂ ソフトゼラチンカプセル 経口用のワンピースソフトゼラチンカプセルを調製し、
各カプセルごとに有効成分（エアミクロナイザーで微粉
化）２０μｇを含むものをつくる。先ず有効成分をコー
ン油０．５ｍｌに混ぜてけん濁状態とし、上記手法でカ
プセル化する。このカプセルは１日１ないし４回経口服
用することにより腫瘍性疾患の治療に有用である。

【００７０】組成物Ｃ 錠剤 下記成分および量から経口用の錠剤１０００個を調製す
る。各錠剤には有効成分２０μｇが含まれている。 有効成分、微粉化 ２０ｍｇ 乳糖 ３００ｇｍ コーンスターチ ５０ｇｍ ステアリン酸マグネシウム ４ｇｍ 軽質液状ペトロラクタム ５ｇｍ エアミクロナイザーで微粉化した有効成分を他の成分群
に加え、十分混合してスラキングにかける。スラグは＃
１６篩を強制的に通して破砕する。得られた塊を圧縮成
型して錠剤とする。錠剤には有効成分２０μｇが入って
いる。この錠剤は１日１ないし４錠の経口服用で腫瘍性
疾患の治療に有用である。上記の手法で同様な錠剤を調
製し、上記で用いた２０μｇの代わりに有効成分を２５
ｍｇと１０ｍｇとし、有効成分量２５μｇと１０μｇの
ものをそれぞれ用意する。

【００７１】組成物Ｄ 経口服用けん濁液 下記成分および量から経口用の水性けん濁液１０００ｍ
ｌを調製する。各スプーン一杯（５ｍｌ）の服用量に有
効成分５μｇが含まれる。 有効成分、微粉化 ５ｍｇ クエン酸 ２ｇｍ 安息香酸 １ｇｍ ショ糖 ７９２ｇｍ トラガカント ５ｇｍ レモン油 ２ｇｍ イオン交換水，ｇ．ｓ．１０００ｍｌ クエン酸、安息香酸、ショ糖、トラガカント、レモン油
は十分な量の水に分散して全量８５０ｍｌのけん濁液と
する。有効成分はミクロナイザーで微粉化し、シロップ
に拡販しながら加え、十分分散させる。十分な水を加え
て全量を１０００ｍｌとする。調製した組成物は１日３
回テーブルスプーン１杯（１５ｍｌ）の服用で腫瘍性疾
患の治療に有用であった。

【００７２】組成物Ｅ 腸管外投与品 下記成分および量から腸管外注射用の滅菌水性けん濁液
を調製する。液１ｍｇには腫瘍性疾患治療用の有効成分
３０μｇが含まれる。 有効成分、微粉化 ３０ｍｇ ポリソルベート８０ ５ｇｍ メチルパラバン ２．５ｇｍ プロピルパラバン ０．１７ｇｍ 注射用水，ｇ．ｓ．１０００ｍｌ 有効成分以外の全成分を水に溶かし、その溶液をろ過に
より滅菌する。滅菌溶液にミクロナイザーで微粉化した
滅菌済の有効成分を加える。得られたけん濁液を滅菌済
のガラスビンに入れ、封じる。けん濁した組成物は１日
３回１ｍｌ（１Ｍ）ずつの投与で腫瘍性疾患の治療に有
用であった。

【００７３】組成物Ｆ 座薬、直腸、膣経由投与品 下記成分および量から座薬１０００個を調製する。各座
薬は重量２．５ｇｍあり、有効成分２０μｇが含まれて
いる。 有効成分、微粉化 ２０ｍｇ プロピレングリコール ５０ｇｍ ポリエチレングリコール＃４００ １５００ｇｍ 有効成分Ｈエアミクロナイザーで微粉化し、プロピレン
グリコールを加える。この混合物をコロイドミルにかけ
て均一に分散させる。ポリエチレングリコールを溶か
し、これを攪拌下でプロピレングリコールの分散液をゆ
っくり加える。得られたけん濁液を４０℃で冷却して型
に吹き込む。組成物は放冷して固化させ、型から取り出
した座薬はフオイルで包む。

【００７４】組成物Ｇ 鼻孔用けん濁液 下記成分および量から鼻孔点滴用滅菌水性けん濁液１０
００ｍｌを調製する。けん濁液１ｍｌに有効成分２０μ
ｇが含まれる。 有効成分、微粉化 ３０ｍｇ ポリソルベート ５ｇｍ メチルパラバン ２．５ｇｍ プロピルパラバン ０．１７ｇｍ 有効成分以外の成分はすべて水に溶かし、溶液をろ過に
より滅菌する。エアミクロナイザーで微粉化し、けん濁
した有効成分をこの滅菌済溶液に加える。得られたけん
濁液を無菌状態下で滅菌容器に充填する。調製した組成
物は１日１ないし４回、０．２％ないし０．５ｍｌづつ
鼻孔内点滴で腫瘍疾患の治療に有用である。有効成分は
また、表皮、鼻孔、咽喉、気管支、口頭経由の投与向け
として無希釈の純粋な形態をとることもできる。

【００７５】組成物Ｈ 粉末 有効成分５ｍｇを粉末のままエアミクロナイザーで微粉
化する。この粉末をシェーカー型容器に入れる。調製し
た組成物は１日１回ないし４回局所に塗布すると腫瘍性
疾患の治療に有用である。

【００７６】組成物Ｉ 経口粉末 有効成分１０ｍｇを粉末のままエアミクロナイザーで微
粉化する。この粉末を２０μｇづつの服用単位に分けて
小包に入れる。調製した粉末は１ないし２包をコップ１
杯の水にけん濁させ、これを１日１ないし４回飲めば、
腫瘍性疾患の治療に有用である。

【００７７】組成物Ｊ 吸入剤 有効成分１０ｍｇを粉末のままエアミクロナイザーで微
粉化する。調製した組成物は１日１ないし４回、３０μ
ｇづつの吸入すると腫瘍性疾患に有用である。

【００７８】組成物Ｋ ハードゼラチンカプセル 経口用としてツーピースハードゼラチンカプセル１４０
個を調製する。各カプセルには有効成分２０μｇが含ま
れる。有効成分はエアミクロナイザーで微粉化され、常
法によりカプセル化される。調製したカプセルは１日１
ないし４回、１ないし２カプセルづつ服用すれば腫瘍性
疾患の治療に有用である。上記手法で同様なカプセルを
調製し、上記で用いた２０ｍｇの代わりに５ｍｇ、２５
ｍｇ、５０ｍｇとし、有効成分含量５、２５、５０μｇ
のものをそれぞれ用意する。上記説明により、新しくか
つ有用な発明がここに記載され、前記目的すべてがこれ
まで考えられなかった形態で満足されることが明確とな
った。

フロントページの続き (72)発明者 チェリー エル ヘラルド アメリカ合衆国アリゾナ州85281 テン ペ ウエスト７ストリート 1324番地 (56)参考文献 特開 平７−2866（ＪＰ，Ａ) 特開 平６−184160（ＪＰ，Ａ) Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，1993 年 ５月，115（10），3977−3981 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 31/35 A61P 35/00 A61K 35/56 C07D 493/22 ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記の構造式を有する抗腫瘍剤。 【化１】
2. 【請求項２】 ヒトのがん細胞の成長を阻止するに有効
   な量の下記構造式の化合物と結合した薬学的に受容でき
   る担体とから成る抗腫瘍剤。 【化１】
3. 【請求項３】 Ｐ３８８システム以下でＥＤ_５０を達成
   するに必要な該組成物の濃度は１．０ｘ１０^−１μｇ／
   ｍｌ以下である請求項１の抗腫瘍剤。
4. 【請求項４】 該化合物はＰ３８８システム以下でＥＤ
   _５０を達成するに必要な該化合物の濃度が１．０ｘ１０
   ^−１μｇ／ｍｌ以下であるように精製された請求項２の
   抗腫瘍剤。