JPS59108786A - ブリオスタチン類 - Google Patents
ブリオスタチン類Info
- Publication number
- JPS59108786A JPS59108786A JP58215148A JP21514883A JPS59108786A JP S59108786 A JPS59108786 A JP S59108786A JP 58215148 A JP58215148 A JP 58215148A JP 21514883 A JP21514883 A JP 21514883A JP S59108786 A JPS59108786 A JP S59108786A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- bryostatin
- acid
- methanol
- spectrum
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/22—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Heterocyclic Compounds That Contain Two Or More Ring Oxygen Atoms (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
こけむし類（ｂｒｙｏｚｏａ ）の先行の化学的研究は
以下のものだけである。（１）我々の初期の研究で、ブ
グラネリチナ（Ｂｕｇｕｌａ ｎｅｒｉｔｉｎａ ）の
ようなあるこけむし類が抗がん成分を含有することを報
告している〔ペテイート・ジー・アール（Ｐｅｔｔｉｔ
。 Ｇ、 Ｒ，）、ジエイ・エフ・ディ（、Ｔ、 Ｆ、 Ｄ
ａｙ ）、ジエイ・エル＋ ハートウェル（Ｊ、 Ｌ、
Ｈａｒｔｗｅｌｌ ）、エッチ・ビー・ウッド（Ｈ，
Ｂ、 Ｗｏｏｄ ）、ＮａｔＬｌｒｅ１９７０年、２２
７巻９６２〜９６３頁）。（２）同じ種におけるアドレ
ノクローム様の色素に関する予備的研究（ヴイレラ ジ
ー ジー、Ｐｒｏｃ、 Ｓｏｃ、 Ｅｘｐｔｌ、 Ｅｉ
ｏｌ。 Ｍｅｄ、 １９４８，６８： ５３］ −５３３） 。 （３！フルストラ フォリアセア（Ｆｌｕｓｔｒａ ｆ
ｏｌｉａｃｅａ ）からインドールフルストラミン類Ａ
及びＢの単離しカール・ジェイ・ニス（Ｃａｒｌｅ＋
Ｊ、 Ｓ、 ）、クリストファースン・シー （Ｃｈｒ
ｉｓｔｏｐｈｅｒｓｏｎ、 Ｃ，）、Ｊ、 Ｏｒｇ、Ｃ
ｈｅｍ、１９８０年、４５巻１５８６〜】５８９頁；カ
ール・ジエイ・ニス、クリストファーノン・シー、Ｊ、
Ｏｒｇ、 Ｃｈｅｍ、１９８１年、４６巻３４４０−
３４８８頁〕。現在知られている環式イオノフオア類の
うち、ストレプトミセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ ）成分のアブラスモマイ
シンがブリオスタチン１に遠縁ではあるが関係している
ようである〔オカミ・ワイ（Ｏｋａｍｌ ＋Ｙ、 ）、
才力ツキ・ティー（０ｋａｚａｋｉ、 Ｔ、 ）、キタ
ハラ・ティー（Ｋｉｊａｌｌａｒａ、＋ Ｔ−）、ウメ
デヮ・エッチ（ＵｍｅＺａＷａｌ Ｈ，）、Ｊ、 Ａｎ
ｔｉｂｉｏｔ、 １９７６年、２９巻１０１９頁、及び
ナヵムラ・エッチ（Ｎａｋａｍｕｒａ＋Ｈ，）、イイタ
カ・ワイ（ｌ１ｔａｋａ＋ Ｙ、 ）、キタハラ・ティ
ー、オカザキ・ティー、オヵミ・ワイ、Ｊ。 Ａｎｔｉｂｉｏｔ、 １９７７年、３．０巻７１４頁〕
。 財政援助は、保健厚生省国立保健ωｆ究所のがん研究所
（ＮＣＩ ）かん治療部との契約ＮＯＩ−ＣＭ−９７２
６２、同がん研究所から与えられた補助金弟ＣＡ １６
０４９−０１〜０７、メリー・デル・プリズラフ（Ｍａ
ｒｙ Ｄｅｌｌ Ｐｒ１ｔｚｌａｆｆ ）夫人、オリン
財団（スペンサー・ティー（５ｐｅｎｃｅｒ、 Ｔ、
）及びアン、ダブリュー（Ａｎｎ、Ｗ、 ）、ノアニー
・Ｅ・リッペル財団、エリノア・ダブリュー・リビー（
Ｅｌｅａｎｏｒｗ、 Ｌｉｂｂｙ）夫人、デビット・ウ
ェア・ワブル財団、パール・スピア（Ｐｅａｒｌ ５ｐ
ｅａｒ ）夫人、及びロバ−１・・ビー・ダルトン（Ｒ
ｏｂｅｒｔ Ｂ、Ｄａｌｔｏｎ ）氏から提供を受けた
。非常な助けとなった他の援助については、ジエイ・デ
ィー・ドウロス（Ｊ、 Ｄ。 Ｄｏｕｒｏｓ ）、ジエイ奉ジエイ・エインク（Ｊ、Ｊ
、 Ｅｊ−ｎｃｋ ）、ディー・ガスト（Ｄ、 Ｇｕｓ
ｔ ）、アール・アール・インナース（Ｒ，Ｒ，Ｉｎｎ
ｅｒｓ ）、エル・ダブリュー・ナツプ（Ｌ、 ｗ、Ｋ
ｎａｐｐ ）、ビー・ロハバニジャヤ（Ｐ、 Ｌｏｈａ
ｖａｎｉｊａｙａ ）、エム・アイ・サフネス（Ｍ、
Ｉ、 ５ｕｆｆｎｅｓｓ ） 、ジェイ・エム・シュ
ミット（Ｊ’、 ｔ□、１． Ｓｃｈｍｉｄｔ ）、ジ
ェイ・ウィッチエル・ジュニア（Ｊ 、Ｗ１ｔ＋；ｃｈ
ｅｌ ＋ Ｊ ｒ −）の諸博士、エム・エイ・カール
ソン（Ｍ、 Ａ、Ｃａ’ｒｌｓｏｎ ）氏、ビー・エル
・ノーフリート（Ｂ、 Ｌ、 Ｎｏｒｆｌｅｅｔ ）
嬢、ケイ・エム・ウエルテ（Ｋ、 Ｍ、 Ｗｅｌｃｈ
） 嬢、スミソニアン博物館海洋学分類センター、及び
サウスヵロライナ大学に置かれた全米科学財団地域施設
（（Ｊ］７８−１８７２３ ）に感謝したい。また、Ｎ
工ＨＣＡ’２４４８７（ＪＣ）及び全米科学財団から与
えられた支援に感謝したい。 新規な高活性の大環式うクトン抗肺瘍抗生剤ブリオスタ
チン１、ブリオスタチン２及びブリオスタチン３は、海
洋こけむし類のブグラネリチナ（Ｂｕｇｕｌａ ｎｅｒ
ｉｔｉｎａ ）から単離された。ブリオスタチンＪはわ
ずか１０〜７０μり／にりの注射量で、腫瘍をもつハツ
カネズミの寿命を５２〜９険チ増す。ブリオスタチン２
と３は、加μり／に９の注射量で、腫瘍をもったハッカ
ネズミの埒命を約６０係増す。ブリオスタチン１の構造
式を式１に、ブリオスタチン２を式２に、またブリオス
タチン３を式３に示す。 生物の記述 外肛動物門（ＥＣ１ＯｐｒＯＣｔ＆ ） （普通はＢｒ
ｙｏｚｏａ又はＰｏ１ｙｚｏａ （苔虫類）と呼ばれる
〕の海洋動物ハ群体のフィルターフィーダー（食物をフ
ィルターでこして得る動物）であり、各々の細束（ポリ
バイト１１）ＯＩＹｐｊ、ｄｅ ）はそれぞれの単位（
東学ｚｏｏｅ−Ｃｉｕｍ）に包まれている。氷面上の外
観から、こけむし類は普通には海の敷物（ｓｅａ−ｍａ
ｔｓ ）とが偽さんごなどの名で知られている。 ブグラネリチナ（リンネウス）〔Ｅｕｇｕｌａ ｎｅｒ
ｉｔ、ｉｎａ（Ｌｉｎｒ＋ａｅｕｓ ）１は広く分布し
たコケ状のこけむし類であり、船腹に取りつく能力のた
めによく知られている。ブグラネリチナ細束（ポリバイ
ト）の−形（鳥頭体ａ−ｖｉｃｕｌａｒｉｕｍ ）は鳥
のくちばしに似ており、一方のあご全他方のあごと閉じ
ると、解体を招かれざる浸入から守ることができる。こ
のような馬頭体はＢ、ネリチナの普通の構成体である。 Ｂ、ネリテナその他の海洋こけむし類はジェイ・エッチ
・ディ（Ｊ、 Ｈ，Ｄａｙ ）の「南アフリカ沿岸海洋
生物案内Ｊ ｚ−ルヶマ・エイ・エイ（Ｂａｌｋｅｍａ
＋Ａ、 Ａ、 ）、ケープタウン、１９７４年、１２３
頁、及びピー・エッチφペンノン（ｐ、 Ｈ，Ｂｅｎ５
ｏｎ ）とアール・ダブリュー・モンクレーフ（Ｒ，Ｗ
、 Ｍｏｎｃｒｅｉｆｆ ）の［ありふれた船底付着生
物ブグラネリチナの幼虫付着に対する亜鉛及びｐＩ日の
影響Ｊ Ｃｏｍｐｔ、 Ｒｅｎｄ。 ｄｕ Ｃｏｎｔｒｅｓ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
ｄｅ ｌａ ＣｏｒｒｏｓｉｏｎＭａｒｉｎｅ
ｅｔ ｄｅ ５ａｌｉｓｓｕｒｅｓ、４ｔｈ Ａ
ｎｔｉｂｅｓ ａｎｄ Ｊｕ−ａｎ−１ｅ−Ｐｉｎｓ
、 Ｆｒ、、 １９７６年７月１４日〜１８日に記述が
ある。 生物の所在 構造決定にζ［・：・要な多気のブリオスタチン類１及
び２は、カリフォルニア州モンデレーｍ（−＄４Ｊ１６
゜西経１２２°）から収集したブグラネリチナ標本５０
０Ｋｇから単離された。これらばＯ〜５フィートの低い
潮位で採集式れた。これらの化物全採集した他の場所と
しては、東京湾（３５°Ｎ、１４０’Ｅ）、メキシコの
シナロアやフロリダ州アリヶ゛−ター、ハーバ−の近く
の場所が含まれる。別々の三つの採集物からのＢ、ネリ
チナの抽出物はいずれも抗新生物活性を含有していた。 ブリオスタチン類の単離札製 Ｂ、ネリチナ試料からブリオスタチン類を単離精Ｓする
には、溶剤抽出、分配クロマトグラフィ、シリカケゝル
クロマトグラフィ、フレイブ装置による液−液分布、樹
脂への吸着、及び溶媒からの結晶化を含めて種々の方法
を使用できる。 選ばれる単離Ｎ製法は、アール・アイ・ケ゛ラン（Ｒ，
Ｉ、 Ｇｅｒａｎ ）、エヌ・エッチ・グリーンパーグ
（Ｎ、Ｈ，Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ ）、エム・エム−７ク
ドツールド（Ｍ、 Ｍ、 ＭａｃＤｏｎａｌｄ ）、エ
イ・エム−シューマーカー（Ｍ、 Ｍ、 Ｓｃｂｕｍａ
ｃｈｅｒ ）及びビー・ニス・アボット（Ｂ、 Ｅ、Ａ
ｂｂｏｔ ）、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、
Ｒｅｐ、第３部第３巻（２）１〜１０３頁（１９７２年
）及びシュミット・ジエイ・エム（Ｓｃｈｍｉｄｔ、
Ｊ、 Ｍ、 ）、ベテイート・ノー・アール（Ｐｅｔｔ
ｉｔ、 Ｇ、 Ｒ，）、Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ 。 １９７８年、３４巻６５９〜６６０頁、に記載されてい
るように、生体外及び／又は生体内抗腫瘍試験を行なっ
て、各段階毎に監視できる。このような試験は、培養基
中の紳瘍細胞の生育を抑制するのに必要な活性材料の濃
度（例えば生育全５０％抑制するのに必要な濃度又はＥ
、 Ｄ、５０ ）の決定や、移植された腫瘍をもつハツ
カネズミの寿命を伸ばすのに必要な活性材料の投与量決
定を含む、 以下の実施例は好ましい方法を例示するか、限定的に考
えられてはならない。 実施例１ 抽出及び溶媒分配 海洋動物の湿重量で５００Ｋｆを採集後直ちに２〜プロ
パツールに浸し、この状態で処理の場所まで運搬した。 運搬液（１５０ガロン）を動物から抜き取シ、５０℃で
プツチＲ〜１５０ Ｆ蒸発器を使用して水性スラリーへ
濃縮した。この濃厚液を分けて塩化メチレンによる抽出
をくシ返した（５〜６回）。 −緒にして乾燥した運搬液からの塩化メチレン抽出液は
重さ５１１．Ｏｆ ｆあシ、３．７５ ｍｙ／Ｋｙの注
射量でハツカネズミに有毒であった。 運搬液を抜き出した後、海洋動物全切り刻み、塩化メチ
レンとメタノールとの（］；］）混合物で２週間、周囲
温度で更に抽出した。／ＡＥ、する液を動物から抜き取
り、液４部に対し水１部を加えて相分離を行なった。下
層（主に塩化メチレン）を除き、４０〜４５℃で減圧を
用いて乾固まで蒸発させた。残シの上層に単−相をつく
るのに十分な塩化メチレンとメタノールを加え（上相：
塩化メチレン：メタノール４：２：１の比）、この液を
動物材料に戻し、第二の抽出を周囲温度で１２日間行な
った。第二の抽出から生ずる液を動物から抜き出し、水
を再び加えて相分離を行なった。下相を分離し、乾固ま
で蒸発させた。塩化メチレン−メタノールによる動物の
２度の抽出から、乾燥塩化メチレノ抽出物計３６６．１
ｆが得られた。 乾燥塩化メチレン抽出液（運搬液と刻んだ動物体の抽出
から得られるもの）を更に分離するには、少量゛ずつを
取り、メタノール： 水（９： １ ） ／ ヘキサン
（４回）から始めてそれぞれの量を溶媒分配にかける。 乾燥ヘキサン抽出液はＰ３８８ハツカネズミ腫瘍試験で
不活性であった。水性メタノール層を更に水で８：２の
比に希釈し、四塩化炭素でくり返しく９（ロ））抽出し
た。四塩化炭素抽出液を乾燥し、抗腫瘍活性の検定を行
なった。運搬液カラ（ｌ ラレｆｃ １４９．６ ｔ
部分ハ１．５１７％Ｉ ７Ｋｇの投与針ではつかねずみ
に布置である一方、刻んだ動物体の塩化メチレン−メタ
ノール抽出液から得られた６Ｌ３ｒの量はＰＳハツカネ
ズミ腫瘍試験系に活性があり、１０ ｍｙ ／ Ｋｇの
投与量で４６係の寿命延長を生じた。 上で説明された全抽出液及び溶媒の分配法は、式■に略
図で示しである。 実施例２ クロマトグラフィによる精製乾燥四塩化炭素
抽出液を更に精製するには、溶離溶媒混合物で平衡化さ
れたセファデックスＬＨ−２０（ファーマシア・、ファ
イン・ケミカルス）全含有する大きなガラス製カラム（
グレンコ、９．５×１］２ｃｙｘ）で２回の分離用クロ
マトグラフィ手順によって行なう。ギルノンＦＣ−２２
０を用いて溶離液のフラクションを集め、薄層クロマト
グラフィ（ＴＬＣ）系を用いて溶離フラクションの溶質
を監視する。′■“ＬＣ系は、塩化メチレン：メタノー
ル（９５： ５ ）溶媒系で展開されるｊ′カナルック
シリカケ゛ルＧＨＬ１４’ユニプレートｇからなる。 分離された成分は、アニスアルデヒド酢酸−硫酸溶液（
イー・スタール（Ｅ、 ５ｔａｈｌ ）、「薄層クロマ
トグラフィ」アカデミツクブレス社、ニューヨーク、１
９７１年、４８５頁）を噴霧することによって視覚化さ
れた。溶離された液の「ビーク」に対応するフラクショ
ンを貯え、乾燥し、移植されたハッカネズミ肺錫系（ｐ
ｓ）で抗腫瘍活性の恢足全行なった。 最初のクロマトグラフィ分１ｌｉ１！：＋順を塩化メチ
レン：メタノール（１：１）の溶媒系で行なった。 少なくとも３５チの寿命延長（ｐｓ系）を生じたフラク
ションを一緒にし１、第二のクロマトグラフィ分離に用
いた。生物活性材料の全量は１２２．８ ？であった。 第二のクロマトグラフィ分離手順をヘキサン：トルエン
：メタノール（３：１：］）の溶媒系によって行なった
。最初のクロマトグラフィ分離手順からの生物活性材料
を処理するのに計５本のカラムを必要とした。このうち
１本は、生物活性材料３３．９ｆを各１ｇｍＡ！のフラ
クション７８０本へ処理するのに用いたつ室温で蒸発後
、フラクション３５３〜３７５は計１２０■の無色結晶
を生じた。塩化メチレン−メタノールからこの材料を再
結晶させると、ＴＬＣでＲｆｏ、７に単一スポットを与
え、２３０〜２３５℃の未補正融点（ケフラー融点測定
装置）をもつ結晶９１ｍ７を生じた。この材料をブリオ
スタチン１と命名した。 別のカラムを使用して、生物活性材料１４ 、８９を各
Ｌ９ｍｌのフラクション４５９本に処理した。フラクシ
ョン３８５〜４００は計８３．４ｍ’ｉの結晶性残留物
を生じた。この材料を塩化メチレン−メタノール−水か
ら再結晶させると、ＴＬＣでＲｆ Ｏ，５４に単一スポ
ットを与え（このＴＬＣを塩化メチレン：メタノール（
９０： １０ ）溶媒系で展開した）、２０１〜２０３
℃の未補正融点をもつ無色結晶７．５〜を生じた。この
材料をブリオスタチン２と命名した。 ブリオスタチン２の追加４２■が、直列使用のメルク（
ダルムシュタット）製サイズＡ （４０〜６３μｍ）事
前充填カラム３本によるシリカゲルクロマトグラフィに
よって、上の母液残留物７５■から回収された。カラム
をメタノール中の塩化メチレンにより、混ぜもののない
塩化メチレンから出発し、塩化メチレン：メタノール（
９０：１）混合物に終る勾配で溶離した。 ブリオスタチン２に富んだ別のフラクション（１６８，
５■）をシリカケ゛ル事前充填カラム（メルク製すイズ
６３本直列）で更にクロマトグラフィ処理した。塩化メ
チレンから出発し、塩化メチレン；メタノールの最終比
８５ ： １５４でメタノールを増量する溶媒の勾配を
使用した。各５ｗＬｌのフラクション計２８７本を収集
した。ブリオスタチン３はフラクション１３０〜５に含
まれていた（７２．２７ｑ）。 ブリオスタチン３は、［川じ勾配であるがもつと小さい
カラム（メルク製サイズＡ３本直列）を使用してなおも
精製を必要とした。純粋なブリオスタチン３は、塩化メ
チレノ：メタノール９９：１から９７：３の勾配でフラ
クション９２〜８ （４２，３〜）に溶離され、フラク
ション計１４４本を収集した。 この材料は無矩形固体であり、結晶化を試みたが分解す
る結果となった。 実施例３ ブリオスタチン誘導体類 ７’ ＩＪオスタチン類は、遊離ヒドロキシル及び置換
可能なアシル基をもっている（猷、１．２．３を参照の
こと）。このため当業者に周知の方法でコレラ化合物類
の種々のアシルエステル類ヲツくることができる１、ブ
リオスタチン類のアシル誘導体類を親化合物と同じ生物
学的目的に使用できる。 ブリオスタチン類のアシル化に使用できる酸類は以下を
包含する。 （ａ）飽和又は不飽和、直鎖又は分枝鎖の脂肪族カルボ
ン酸類、例えば酢酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、
第三ブチル酢酸、吉草酸、イソ吉草酸、カプロン酸、カ
プリル酸、デカン酸、ドデカン酸、ラウリン酸、トリデ
カン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、パルミチン酸
、マルガリン酸、ステアリン酸、アクリル酸、クロトン
酸、ウンデシレン酸、オレイン酸、ヘキシン酸、ヘゾチ
ン酸、オクチン酸等。（ｂ）飽和又は不飽和脂環式カル
ボン酸ａ、例、ｔばシクロブタンカルボン酸、シクロペ
ンタンカルボン酸、シクロペンテンカルボン酸、メチル
シクロペンテンカルボン曜、シクロヘキサンカルボン酸
、ジメチルシクロヘキサンカルボン酸、ジプロピルシク
ロヘキサンカルボン酸等。（ｃ） 飽和又は不飽和脂環
式脂肪族カルボン酸類、例えばシクロペンタンカルボン
酸、シクロペンタンプロピオン酸、シクロヘキサン酢酸
、シクロヘキサン酪酸、メチルシクロヘキサン酢酸等。 （ｄ）芳香族カルボン酸類、例えば安息香酸、トルイル
酸、ナフトエ酸、エチル安息香酸、イソブチル安息香酸
、メチルブチル安息香酸等。（、）芳香脂肪族カルボン
酸類、例えばフェニル酢酸、フェニルプロピオン酸、フ
ェニル吉草酸、桂皮酸、フェニルプロピオン酸及びナフ
チル酢酸等。適当なハロ、ニトロ、ヒドロキン、ケト、
アミノ、シアノ、チオシアノ、及び低級アルコキシ炭化
水素カルボン酸類は、上に与えられた炭化水素カルボン
酸類がハロダン、ニトロ、ヒドロキシ、ケト、アミノ、
シアノ又はチオシアノ、又は低級アルコキシ、有利には
６個を越えない炭素原子の低級アルコキシ、例えばメト
キシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、アミロキシ、
ヘキシロキシ、及びそれらの異性体型の一つ又はそれ以
上でＩｎ換されたものである。このような置換炭化水素
カルボン酸類の例は以下のものである。 モノ、ジ及びトリクロロ酢酸 α−及びβ−クロロプロピオン酸 α−及びγ−ブロモ酪酸 α−及びδ−ヨード吉草酸 メバロン酸 ２−及び４−クロロシクロヘキサンカルボン酸シキミ酸 ２−二１・ロー１−メチル−シクロブタンカルボン酸 １．２，３．４，５．６−へキサクロロシクロヘキサン
カルボン酸 ３−ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン酸 ４−及び５−ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボ
ン酸 ５−及び６−ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボ
ン酸 ２．３−ジブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ２．５−ジブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ４．５−ジブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ５．６−ジプロモー２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ３−ブロモ−３−メチルシクロヘキサンカルボン酸 ６−ブロモ−３−メチルシクロヘキザン力ルボン酸 １．６−ジプロモー３−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ２−ブロモ−４−メチルシクロヘキサンカルボン酸 １．２−ジブロモ−４−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ３−ブロモ−２，２，３−）リメテルシクロベンタンカ
ルボン酸 １−ブロモ−３，５−ジメチルシクロヘキサンカルボゝ
ン酸 ホモゲンチシン酸、ｏ−ｌｍ−及びｐ−クロロ安息香酸 アニス酸 サリチル酸 ｐ−ヒドロキシ安息香酸 β−レゾルシル酸 没食子酸 ペラトルム酸 トリメトキシ安息香酸 ４．４′−ンクロロベンジル酸 ０−ｌｍ−及びｐ−二トロ安息香酸 シアノ酢酸 ３．４−及び３，５−ジニトロ安息香酸２．４．６−
トリニトロ安息香酸 チオシアノ酢酸 シアノプロピオン酸 乳酸 エトキシ蟻酸（炭酸水素工ナル） りんご酸 くえん酸 イソくえん酸 ６−メチルサリチル酸 マンゾリン酸 レブリン酸 ピルビン酸 グリシン アラニン パリど イソロイシン ロイシン フェニルアラニン プロリン セリン スレオニン テロシン ヒドロキシプロリン オルニチン リジン アルギニン ヒスチジン ヒドロキシリジン フェニルグリシン ｐ−アミノ安息香酸 ｍ−アミノ安息香酸 アントラニル酸 アス／ぞラギン酸 グルタミン酸 アミノアジピン酸 グルタミン アスパラギン等 ブリオスタチン類の物理的データ クロマトグラフィに使われた全溶媒を再蒸留した。シリ
カゲルＧＨＬＦと指定された事前被覆アナルした（イー
・スタール（イー・スタール）、ｒ薄層クロマトグラフ
ィ」アカデミツクブレス社、ニューヨーク、１９７１年
、４８５頁）。融点はすべて未補正であり、ケフラー融
点測定装置を使用して得られた。”’ＣＮＭＲスペクト
ルはブルーカーＷ）（−９ＯＮＭＲスペクトロメーター
（ＴＭＳからダウンフィールドのｐｐｍで２２．６ Ｍ
Ｂ２）によって得られた。’ＨＮＭＲスペクトル（４０
０１ａｚ ）はＷＨ−４００ＮＭＲスペクトロメーター
によって得られた。質量スペクトルをパリアンＭＡＴ−
３１２質量スペクトロメーターによって測定した。比旋
光度は／ξ−キン＝エルマー・モデル２４１旋光計を用
いて測定された。紫外線スペクトルはヒユーレット＝パ
ツカード８４５０Ａ ＵＶ／ＶＩＳスペクトロメーター
を使用して記録された。 ブリオスタチン １ サー塩化メチレンーメタノールから無色結晶性固体。 見皇−２３０〜２３５°Ｃ１未補正 薄層クロマトグラフィ 溶 媒 系
ＲｆＣＨ２Ｃ＃２＝ＭｅＯＨ（９： ］ ）
０．７据外線スペクトル λ最大（ＭｅＯＨ）−２３
３ｎｍ（ε２５，２３０）及び２６３ｎｍ（ε２８ 、
Ｉ ７０） 比旋光度 ４．４係メタノール溶液で〔α）
ｐ＋３ａ、１゜電子衝撃質量スペクトル（ＥＩＭＳ） ｍ／ ｚ ８８６（Ｍ ８２０．０４７Ｈ６６０１６）
正確な質量８８６．４３７６ ａｍｕ （計算値は０４
７Ｈ６６０１６について８８６．４３５１ ）高速原子
ボンバードメント質量スペクトル（ＦＡＥＭＳ ）ｍ／
ｚ９０４（Ｍ） 赤外線スペクトル（ＫＢｒ） 次の場所にピークが見
られる。 ３７４０．３４００，２９７０，２９５０，１７３５．
１７１６（最強バンドＬ １７００，１６００，１６
４０，１４３５，１３８５゜１３６５、 １２４５．
１１６０． １１００． １０８０．及び１０００ｃｒ
ｎ−１；１３ＣＮＭＲ（２２，６Ｍｌｌｚ広域バンドは
デカップルされている。 ＣＤＣム） δ１７２．２（８）、 １７１．１（ｓ）、 １６
７．０ＦＥｌ＋、 １６６．８（Ｓ）、１６５．６（
１３）、 ＩＦ＋７．１ｆＳ）、 １５２．１ｆＳ
ｌ、 １４６．４． １４５．４． １３９．２゜１
２９．６，１２８．５，１１９．６，１１８．７，１１
４．１，１．０１．９（Ｓ）、９９．］ｌＳ）、７９．
１，７４．２，７３．７，７３．１，７１．６゜７０．
２．６８．５，６５．７．６４．８．５１．０ （カル
チット。 ２炭素）、 ４４．９（Ｓ）、 ４４．３． ４２
．３． ４２．帆 ４１．１（川。 ４０、帆３６．５．３６．帆３５．１．３３．４．３１
．４．２４．６゜２１．９．２１．１． １９．８．
１．６．９及び１３．７ ；プロトンＮＭＲ（４００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣＡａ ）δ７．２９ ７．２２ （ｍ、
Ｉ Ｈ）、 ６．１５ （ａ、 Ｊ＝５．６Ｈｚ。 ２Ｈ）、５．９８ （日、Ｉ Ｈ）、５．７９ （ｄ−
、Ｊ ＝３．４１１ｚ、ＩＨ）。 ５．７６（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、ＩＨ）、５．６５（８
，ＩＨ）。 ５．２９ （１１１，ＩＨ）、５．１９ （ｍ、４Ｈ）
、４．１９ （ｍ、１−２Ｈ）。 ４．０９ （ｍ、２Ｈ）、３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．
７３ （ｍ、１．Ｈ）。 ３．６８ （Ｅｌ、３Ｈ）、３．６５（Ｅｌ、３Ｈ）、
３．６３ （ｎｌ、ＩＨ）。 ２．５１ （ｔ、Ｊ＝１２Ｈｚ、ＩＨ）、２．３８（ａ
’、Ｊ＝１．０．５１＋ｚ。 Ｉ Ｈ）、 ２．１７−１．４９ （ＣＯｍｐｌｅＸ、
１ｌ−１２Ｈ）、 ２．０５（ｓ、３Ｈ）、１．４４（
ｍ、３Ｈ）、１．２２ （ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ。 ３Ｈ）、１．１．３（Ｓ、３Ｈ）、０．９８（Ｅｌ、６
Ｈ）、０．９１（Ｓ、３Ｈ）及び０．８９ （ｄ、 Ｊ
＝７．３Ｈ２、３Ｈ）。 ’Ａ−Ｊｆｒｒ−ｐ 測定値 Ｃ，６１，５５Ｂ、
７．３３ ’Ｊ素ヤｆＡｆ黄ｕ存在しない ６１．８４ ７．２２ 可能な実験式 Ｃ４’／Ｈ６８０よヮ 計算値 Ｃ，６２，３７Ｈ，７，５７ ブリオスタチン ２ 」−塩化メチレン−メタノールから無色結晶性固体 鮮−２０１〜２０３°ｃ１未補正 ｃｍ２ｃｔ２： Ｍｅｏｎ （９： １ ） ０．５
４紫外線スペクトル ２最犬（ＭｅｏＨ） −２３０ｎｍ （ｅ ３６．２５
０ ）及び２６１ｎｍ（６３５，６００） 比旋光度 ５係メタノール溶液 〔α〕甘せ５０ 、ｃｆ電子衝撃
質量スペクトル（ＥＩＭＳ ）ｍ ／ ｅ ８２６ （
Ｍ −２Ｈ２Ｏ）、正確な質１８２６．４１３８ａｍＬ
ｌ（Ｃ４５Ｈ６２０１４の計算値 ８２６．４１３６
）赤外線スペクトル（ＫＢｒ ） ピークは３４６５． ２９７５〜２９５０． １７１５
（最強帯）。 １７００、 １６４０〜１６５０． １４３５． １３
６０． １２ＦｌＯ，１２３０゜１１６５、 １１００
． １０８０． １０５０及び１０００ｍ−１に見られ
る。 ”’ＣＮＭＲ δ１７２．７４． １６７．１２． １６６．８９．
１６５．６６、 １５６．９５゜１５２．０１． １４
６．４９． ］、４５．５８． １３９．１８． １
２９．６５゜１２８．４５． １１９．６８． １１８
．６４． １１４．３２． １０１．９０゜９９．１１
． ７９．１６． ７４．１２． ７３．８３． ７１
．６５． ７０．１２゜６８．５０． ６６．０６．
６４．７６、 ５１．１１． ４４．９４． ４４．２
２゜４２．２１． ４２．２１．４２．２１． ４０．
０７． ３６．５６． ３５．９４゜３５．０６． ３
１．３６． ２４．６６、 ２１．９０． ２１．０９
． １９．７６゜１５．６０． １３．６８゜ プロトンＮＭＲ（４ＱＱ ＭＨ３，ＣＤＣ７５）δ７．
２（ｍ、ＩＨ）、６．１６（ｄ、Ｊ＝５．６＋（ｚ、２
Ｈ）。 ６．０１ （Ｆ３． ＩＨ）、 ５．８１ （ｄ、 Ｊ
＝６．４Ｈｚ、 ＩＨ）、５．７７（（１，Ｊ＝７．１
Ｈｚ、ＩＨ）、５．６８（Ｅ’、ＩＨ）、５．３１（Ｉ
ｎ。 Ｊ＝５Ｈｚ、ＬＨ）、５．１９ （８，２Ｈ）、４．２
８ （ｍ、ＩＨ）。 ４．１６ （ｍ、２Ｈ）、３．９９ （ｍ、３又け４Ｈ
）、３３−８０（。 １又は２Ｈ）、３．７０（Ｓ、３Ｈ）、３．６６ （８
，３Ｈ）。 ３．６３ （ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ２．４６ （ｍ、 ２
Ｈ）、 ２．２１−１．５７（ｃｏｍｐｌｅｘ、 ｌ５
−１９Ｈ）、 １．４５ （ｍ、 ３ Ｈ）、 １．２
３ （ｃｌ。 Ｊ＝６．３１１ｚ、 ３）（）、 １．１５ （８，３
Ｈ）、 １．０４ （ｓ。 ３Ｈ）、 １．００ （Ｅｌ、 ３Ｈ）、 ０．９２
（ａ、 Ｊ＝７．３１１ｚ。 ３Ｈ）、 （１，９１（Ｂ、 ３Ｈ）。 分析データ 測定値 Ｃ，５９，０６Ｈ，７，１６０，３２，１９窒
素や硫黄は存在しない 暫定式 〇４５Ｈ６６０□６ ブリオスタチン ３ 」 塩化メチレン−メタノールから白色無定形固体 薄層クロマトグラフィ溶媒系−ｃｍ２ｃｚ２： ＭｅＯ
Ｈ（９３： ７ ）、Ｒｆ＝０．５６ 紫外線スＡｅクトルーλ最犬（ＭｅＯＨ）−２２９（６
３１，７００）及び２６４（ε３０，６００） 比旋光度 〔α〕２６＋６１’ （Ｃ，０，２６メタ
ノール中）ＦＡＢ負景スペクトルｍ ／ｅ ９１，１
（Ｍ＋Ｎａ ）、Ｍ−Ｃ４６Ｈ６４ｏ１７赤外糾ス啄ク
トル（ＫＢｒ） ３４５０．２９３０−２９７０．１７８５．１７４０，
１７１８．１６４０＝１６５０、 １３６５． １３０
５． １２５０． １１６５． １１５０，１１３５゜
１１００．１０４５−１０７５．１０００ ｃｍ−’
；３ＣＮＭＲ １７２，４８，１７１，９６，１７１，１８，１６７、
］、２． １６６．８９゜１６５．９８． １５７．１
１，１４７．７２． １４６．６５． ］、３６．３
８゜１３２．７７、 １２８．３８． １１．７．３７
． １１４．３８． １１４．１２゜１０１．９０．
１０１．７１，８１．２４． ７３．０５． ７３．０
５゜７１．４６，６９．７７．６９．１２，６８．６０
，６８．３０．６５．５８゜５１．１８． ４５．２３
，４４．１９，４１．８２． ４１．８２． ４１．．
１４゜３９．４８．３６．４３．３５．１３．３５．１
３． ３３．２４． ３３．２４゜３３．２４，２４．
５０． ２１．８７．２１．１５． ２］、ｉ５． １
９．３０゜１６．９９． １３．６８ ｉ δ７．３７−（１１１，ＬＨ）、 ６．２０ （ｍ、
２Ｈ）、 ５．８７ （ｃｌ。 ＩＨ）、５．８３（ｅ、ＩＨ）、５．７４（Ｅｌ、１）
［）、５．７０（ｄ、ＩＨ）、５．６７（Ｂ、ＩＨ）、
５．４１ （ｍ、ＩＨ）、５．２８（Ｓ、ＩＨ）、５．
１６（Ｉｎ、ＩＩ（）、５．０２（ｍ、１）Ｉ）、４．
４７（Ｉｌｌ、ＩＩ（）、４．３４（ｍ、ＩＨ）、４．
１７（ｍ、２Ｈ）、４．０３−３．９８（Ｉ［１，２Ｈ
）、３．７８ （ｍ、ＩＨ）、３．７１ （ｍ。 １ Ｈ）、 ２．５５ （ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ２．４３
（ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ２．１７ （ｍ。 １３Ｈ）、２．０６（８，３Ｈ）、’２．０（ｍ、２Ｈ
）、１．８６（ｍ、ＬＨ）、 １．７２（ｍ、２Ｈ）、
１．６３ （ｍ、２Ｈ）、１．５５（ｍ、１ ２Ｈ）、
１．４７（ｍ、２Ｈ）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ。 ３Ｈ）、１．１２（ｓ、３Ｈ）、１．００（８，６１（
）、０．９２（ｅ、 ｔ、 Ｊ ＝７Ｈｚ 、 ６ Ｈ
）。 ブリオスタチンｌの構造決定 結晶学的計算はすべて、コーネル化学計算施設で操作さ
れるＰＲ工ＭＥ ８５０ コンピューターで行なわれた
。使用されたおもなプログラムはデータ整理プログラム
のＲＦ、ＤｔｌＣＢとＩＪＩｉＸＱ７３Ｂであった。 スタウトの平行六面体結晶は、メタノール下に塩化メチ
レン中のブリオスタチン１の層状溶液をゆっくりと混合
することから得られた。母液中に保持されると、これら
の結晶はａ ＝ ２１．７８２（５）、ｂ ＝ ２０．
４２８＋４１及び９ ＝ ２３．６６４（６）Ａ及びＺ
＝８の場合の空間基Ｐ ２１２１２１に践することがわ
かった。 乾燥後、Ｃ軸が半減したように見え、比較的劣った回折
パターンはＰ ２１２１２１に一致した〔同様な形の疑
似対称性はグラミシジンＳの塩酸塩に対して観察された
。ホジキン・ディー・ノー（Ｈｏｄｇｋｉｎ。 Ｄ、 Ｃ１）、オウト７−ビー−エム（Ｏｕｇｈｔｏｎ
、 Ｂ、Ｍ、 ）、Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｊ、 １９５７
年、６５巻７２５〜７５６ Ｊ ］。］１°ω−スキャ
ンびグラファイト−モノクロム化ＭｏＫα：（０，７１
０６９Ａ ）放射線を使用して、−１００°Ｃで計５４
６４のりフレクションを集めた。これらのデータのうち
、３５５３ （６５％ ）はＣＩ ’ｏ ｌ ＞３ （
１（１”Ｏ））が観察されたと判断され、その後の計Ｗ
に使用された。 プロゲラムクステムＭＵＬＴＡＮ７８により、最大３５
０の正規化された構造因子について約２０００のフェー
ズセットを発生させ、同じ加重をＡＢＳＦＯＭ 、 Ｐ
ＳＩＺｌｉｊＲＯ。 ＲＥＳＩＤ及びＮＱ、ＫＳＴへ置き、セットの格付けを
行なった。最も有望なセットの一つを使用する８合或は
、２個の化学的に知覚されうる同一の冴原子断片を提供
し、これらは約ｃ ／ ２のトランスレーションによっ
て関連づけられた。正接式再循環（ｔａｎｇｅｎｔ ｆ
ｏｒｍｕｌａ ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ ） ［カール・ジ
エイ（Ｋａｒｌｅ、 Ｊ、）、Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａ
ｌ工Ｏｇｒ ５ｅｃｔ、 Ｂ １９６８、Ｂ２４巻１８
２〜１８６頁〕によってこのモデルを拡大する試みや、
最小２乗法でこのモデルを珀密化する試みは成功しなか
った。このため、我々はウィルソンプロットと最小２乗
法の目盛係数との平均値であるような目盛係数を使用す
る正接式再循環に戻った。この方法によるＥ合或は驚異
的に改善され、本質的に同一の２断片に１００個の化学
的に知覚できる原子を示した。更に正接式再循環により
、ブリオスタチン１０両分子牛に事実上全部の非水素原
子が示された。 （２Ｆｏｂｓ Ｆ’ｃａｌｃ ）を係数として使用す
るフーリエ合成〔メイン−ピー（Ｍａｉｎ、 Ｐ、）、
Ａｃｔａ Ｃｒｙ−ｓｔａｌｌｏｇｒ、肪ら△■９７９
、人亜巻７７９〜７８５頁〕と交互にブロソクーダイヤ
ゴナル最小２乗法を使用して最終モデルを精密化すると
、２個の独立分子内における１２８個の非水素原子の配
置と、式Ｉに示されたブリオスタチン１の構造決定に導
ひかれた。現行のＸ線モデルは分子当たり５９個の異方
性非水素原子、エステル側鎖に等方性であるような末端
原子（Ｂは５ないし２０Ｘの範囲、Ｂ平均は約２．５
Ａ ）、幾つかの溶媒メタノール分子及び計算された位
置に１１４個の水素を包含している。このモデルでの標
準的な結晶学的残有（Ｒ因子）は観。 察データに対して０．０７に収束した。 結晶の疑似対称性から予想されるとおり、ブリオスタチ
ン１の双方の独立分子は同−立体構造と、本質的に同一
形態とをもっている〔詳細はアーノルド・イー（Ａｒｎ
ｏｌｄ、 Ｂ、 ）、ＰｂＤ博士論文、コーネル大学、
１９８２年５月を参照のこと〕。ブリオスタチン１の１
１個のキラル中心の相対的立体化学的指定は次のとおり
である。３（Ｒ”）、５（ビ）、？ （Ｓ ”Ｉ＝ ＞
、９（Ｓ”）、１１（Ｓ”）、１５（Ｒ”）、１９（ｆ
９”）、２ｔ）（８勺、２３（８勺、２５（Ｒ”）及び
２６（Ｒ”冗フリオスタチン１の結晶配座は長１３ Ａ
、幅８Ｘ、茜さ約６Ｘの大まかに言ってひしやく形の分
子を明らかにしている。分子モデルの検討は、他にも可
能な配座がありうることを示唆している。 式Ｉに示すブリオスタチン１のエナンチオマーを、次の
ように選択した。エンゲルの方法〔エンゲル ディー・
ダブリュー （Ｅｉｎｇｆ３１ 、 Ｅ、 Ｗ、 ）、
ＡｃｔａＣｒｙＩ：Ｉｔａｌｌｏｇｒ、５ｅｃｔ、Ｂ
１１９７２年、Ｂ２８巻１４９８〜１５０９頁〕を使用
して、酸素と炭素による変則的散乱効果（ＣｕＫαデー
タ収集に対してそれぞれへｆ“０．０３２及び△ｆ″−
０，００９電子）を測定した。最大のビジュホー（Ｂｉ
ｊｖｏｅｔ ）比をもっことが予想されるビジュボ一対
の７グループを、ＣｕＫα放射線を使って非常に緩慢に
測定した（３Ｘ）。各」−合とも中心対称性リフレクシ
ョンである近１１ｉ！ｉ′の対を同様な方法で測定する
と、吸収及びその他の異方性効果に対する実験的補正が
得られた。７グループの各々に対１−て得られた吸収補
正ずみビジュボー比は、エナンチオマーを指し示してい
た。 ブリオスタチン１を２６員のマクロライド環と考えるこ
とができる。この訪員環の中に、炭素鎖に沿うよりもビ
ラン酸素を経由した短路を取ることで決まる２０員サイ
クルが埋め込まれている。最も長い炭素原子鎖は２７で
あり、提案の番号づけ方式に用いられた。炭素８及び１
８の隣接（ｇｅｍ ）−ジメチル置換基から始寸った酸
素置換パターンは、ブリオスタチン１に対してボリヶタ
イＰ生合成を示唆している。ピラン環はすべて、大体に
おいて連鎖の配座にあり、各ノτは外側へ突き出る４位
置の置換基をもっている。マクロサイクルｆＥＦ換基の
全部が、ピラン環に対して赤道位置にある。分子内水素
結合１”ｉ’ ０１９Ｈト０３ （２，７］、２．７１
Ｘ ）ノ間に現われ、０３Ｈと０５ （２，８４，２
，８７Ｘ ）の間、及び０３Ｈと０１１ （３，００，
３，０２Ｘ）の間に二つの可能な水素結合が見られた。 結晶配座において、酸素０１．０３．０５．０１１．０
１９ Ａ及び０１９ Ｂはいずれもブリオスタチン１の
酸素に富む大きな空洞の内部にある。この空洞の大きさ
と形、及び酸素原子の配置は、分子がポリエーテル抗生
物質に似た陽イオン結合能力をもちうろことを示唆して
いるＣ ２０にある軸上の（Ｅ、ＦＧ ）−オクタ−２
，４−ジェノン酸置換基は、脂質溶解度を高めるものと
予想される。 一つの興味ある可能性は、この置換基がＣ２０−０加納
合の周りを内部空洞上へ回転によって振れ、一方の側を
０閉じる″ことである。ブリオスタチン１のＣ１３とＣ
２１にある２個のアセチリデン巣位の立体化学により、
カルボニルの酸素はマクロサイクルに沿って炭素番号が
増加する方向に向く。これらの単位はβ−炭素で２置換
されるが、これらがバイオｈｏ ＩＪママ−ミン及び／
又はチオール基に対してマイケル受容体として機能する
ことも考えられる。 ブリオスタチン２の構造決定 ブリオスタチン２はＸ線結晶構造決定に適した結晶型で
得られなかったため、式２に示す明白な構造決定はブリ
オスタチン１及び２の篩解像プロトン磁気共鳴スペクト
ル分析や、それを支援するものとして”’ＣＮｋＡＲ（
ＣＤＣｌ３ ） 、質量その他スペクトル分析結果を必
要とした。ＣＤＣ４５中におけるブリオスタチン１及び
２の４００ Ｍｔｌｚ ＨＮＭＲスペクトルは広範囲
の二重共鳴実験（図表５）によって暫定的に決定された
。ブリオスタチン２のプロトンスペクトルは、２．０５
１）ｐＩＱにアセデートメチルの共鳴がないこと、及び
Ｃ７のプロトンが５．１５から３．１５ｐｐｍへアップ
フィールドに移動する以外は、ブリオスタチン１のそれ
とほぼ同一であった。これらの観察は、ブリオスタチン
２がブリオスタチン１のデスアセチル類似体であること
を示唆している。この結論は、ブリオスタチン２の Ｃ
ＮＭＲスペクトルがアセチルカルボニル（１７１，１５
ｐｌ）ｍ ）及びメチル（３３，４４）共鳴の消失、酸
素をもった炭素（おそらくＣ７）の７３．１１から７０
．１２へのアップフィールド移動、第四級炭素（おそら
くＣ３）（７） ４１．１１から４２．２１へのダウン
フィールド移動、及びｇｅｍ−ジメチル基共鳴の一つ（
おそら＜Ｃ２８又はＣ２９）のわずかな位置移動以外は
、ブリオスタチン１のそれと著しい差はなかったことに
よって強められた。 ブリオスタチン２の構造確認は、一連の選択的なミクロ
規模下のアセチル化−説アセチル化実験によって得られ
た。ブリオスタチン１及び２の部分的アセチル化（無水
酢酸−ビリジン、２時間、室温）によって（ＴＬＣによ
って）同一のアセテ−） （ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨか
らの無色針晶、融点２４９〜２５゜’Ｃ）が得られた。 メタノール中の塩酸（１係）で（２４時間、室温）又は
メタノール中の炭酸カリウム（１係）で（２４時間、室
ＩＭ）注意深くアセチ−トラ脱アセチル化すると、ブリ
オスタチン１と２の混合物を生じた。ブリオスタチン１
のわ１迄はＸ線結晶構造決定によって明らかにされたた
め、高 （解像ＮＭＲ分析及びアセテートへの転化
からの証拠 １を一緒にして、ブリオスタチン２の構
造が確立さ １れだ。
■ブリオスタチン３のｔｌＭ 造決定１ ブリオスタチン３は無定形固体として単離され また
。その構造決定は４００ ＭＨｚ １ＨＮＭＲ及び Ｃ
ＮＭＲ１スペクトル並びに赤外線及び質量スペクトルの
測 １定に基づくものであった。測定値は以下のとお
り １である。
１１ １７２．４８ −一−２ ２４４，１９２，４３，２，５５ｍ ２３
６ｃ＋、７７４．０３ ｍ
２４ ３３．２４ １．５５，１．９
ｍ ２５ ７１．４６
４．１７ ｍ６ ３３
．２４． １．４． １．７２ ｍ
２７ ７３．０５ ５．１６ ｍ
２＋ １０１．９０ −
−−０ ３５．１３ ２．１７
ｍｌ ６８．６０
３．９８ ｍ２ ３
６．４３ ２．１７ ｍ３
１５７．１１ −−−４ ３
９．４−８ ２．０６
Ｉｎ５ ６９．１２ ４．１７
ｍ６ １３６．３８ ５．
４１ （ｌａ（８，１，４）７
１３２．７７ ５．７０ ａ
（１４）８ ４５．２３ −−−９
１０１．７１． −−−０ ８１
．２４ ５．８２ Ｂ１
４１．８２ １．８５
ｍ２ １１４．１２ ５．７４
Ｅ１３ １６６．８
９ −−−４ ４１．８２ １．８６
．２．３５ ｍ１５ ７３．０５
５．０２ ｍ′ｂ
６５．５８ ３．７８
ｍ１７ ２１．８７ １．２１
ａ（６）２９ １６．９９”
１．００”３０ １１４．３８ ５
．６７ ｓ３１ １６７
．１２ −−−３２ ２１．１５ １．
００” ８３３ １９．３０
０．９２” ８３４ ６８
．３０ ３．７１ （１（９）３５
１７１．９６ −−−３６ １
７１．１８ −−−３７ ３３．２４
２．０５ ８聞
５１．１８ ３．６９ 日
３９ １６５ 、９８ −−−４０
１１７．３７ ５．８７ ｄ（ｉ
５）４１ １４７．７２ ７．３７
Ｉｎ４２ １２８．３８
６．２０ ｍ４３
１４６．６５ ６．２０ ｍ
４４ ３５．１３ ２．１７
ｍ４５ ２４．５０ １．
４７ ｍ４６ １３．６
８ ０．９２ ｔ（７）３４、−
ＯＨ４，４７（Ｌ（９） ３−ＯＨ４，３４ｄ（］３） ＊）これらの４群の分析値は交換可能である。 ブリオスタチン１及び３のＦＡＢ 質量スペクトル分析
は、ブリオスタチン３に対して１６賃を単位の正味損失
を示した。更に、ブリオスタチン１のアセテート及びオ
クタ−２，４−ジェノエート側鎖の消失を含めたＦＡＢ
断片パターンは、ブリオスタチン３のスペクトルでくり
返された。ブリオスタチン１−３の比旋光度と紫外線ス
ペクトルの類似性も、この新しいマクロ環式ラクトンが
その仲間と似ていることを示唆した。”ＣＮＭＲスペク
トルから全体的に同じ結論に到達し、ブリオスタチン１
〜３が同じプリオビラン環系全含有することを示しだ。 しかし、幾分の信号の移動（１〜３ ｐｐｍ ）とその
他の相違が認められた。ブリオスタチン１と２の炭素Ｃ
−２１及びＣ−４７に割り当てられていた信号が消えて
おり、Ｃ−３５による信号は１６６．８から１７１．９
Ｐｐｍへダウンフィールド移動を行なったように見え
る。ラクトン２の ＣＮＭＲスペクトルも、４１．８２
．６８．３０ 、１１４．１２及び１６６．７３ ｐｌ
）川に新しい信号を含ゼし、これらはそれぞれＣ−２１
、Ｃ−３４、Ｃ−２２及びｃ 、−２３に対応するもの
と信ぜられる。 赤外線及び高解像（４００ＭＨｚ ） １ＨＮＭＲスペ
クトル（デカップリング実験）を注意深く解釈すると、
ブリオスタチン３に対する明確な構造決定ができた。プ
リオビラン２で示きれる１、７８５ｏｒ＋−１での新し
い赤外勝吸収帯は、アルファ電気陰性置換基をもつ可能
な５−又け６員のラクトンカルボニル基ヲ示した。 ）
（ＮＭＲスペクトルの比較から、ブリオスタチンエ及び
２のＣ−２２及びＣ−ｎプロトンの消失が示された。ま
た、Ｃ−１５−１７、Ｃ−加、Ｃ−列及びＣ−４０−４
３に帰因するプロトンは、ブリオスタチン１のものから
０．０１〜０．０５１）１）ｍだけダウンフィールド移
動された。Ｃ−１７及びｃ−２５プロトン類については
、はぼ同じ程度のアップフィールド移動が見られた。Ｃ
−２４プロトンは、２．０から２゜３５δへ強くダウン
フィールド変位されていた。 特に１要な点として、ブリオスタチン３のスペクトルに
は５．８２δ（Ｃ−２２）と３．７１δ（Ｃ−３４）に
新しい１Ｈ号が現われだ。後者は１．８５δ（Ｃ−２１
）と４．４７δ（Ｃ−３４の−ＯＨ）でプロトンに結合
されていた。これらのＮＭＨの解釈から、基本的なブリ
オビラン環システムがなおもブリオスタチン３に表わさ
れているのが明らかであった。事実、プリオビランＣ環
の著しい変化と上記の移動以外は、ブリオスタチン３の
残りはブリオスタチン１と本質的に同一であることがわ
かった。ブリオスタチン１のエキソサイクリック環Ｃオ
レフィンにおけるジヒドロピラン系への移動（Ｃ−２１
，３４→Ｃ−２２、ｚう）、Ｃ３４（７） ヒトｏ キ
シ／Ｌ＝化、及びＣ−１９へミケタルヒドロキシル基に
よるラクテート側鎖のＣ−３５カルボニルのラクトン化
は、ブリオスタチン３とブリオスタチン１との関係につ
いて最も満足な説明を与えるものであった。ブリオスタ
チン１の決定的なＸ線結晶構造決定に以上の観＠を組み
合わせると、ブリオスタチン３の構造を明確化すること
ができた。 ブリオスタチン３がブリオスタチン１の非常に効力のあ
る抗新生物活性を保持しているため、一つのビランアセ
チリデン基を失うことは′ｊ１
以下のものだけである。（１）我々の初期の研究で、ブ
グラネリチナ（Ｂｕｇｕｌａ ｎｅｒｉｔｉｎａ ）の
ようなあるこけむし類が抗がん成分を含有することを報
告している〔ペテイート・ジー・アール（Ｐｅｔｔｉｔ
。 Ｇ、 Ｒ，）、ジエイ・エフ・ディ（、Ｔ、 Ｆ、 Ｄ
ａｙ ）、ジエイ・エル＋ ハートウェル（Ｊ、 Ｌ、
Ｈａｒｔｗｅｌｌ ）、エッチ・ビー・ウッド（Ｈ，
Ｂ、 Ｗｏｏｄ ）、ＮａｔＬｌｒｅ１９７０年、２２
７巻９６２〜９６３頁）。（２）同じ種におけるアドレ
ノクローム様の色素に関する予備的研究（ヴイレラ ジ
ー ジー、Ｐｒｏｃ、 Ｓｏｃ、 Ｅｘｐｔｌ、 Ｅｉ
ｏｌ。 Ｍｅｄ、 １９４８，６８： ５３］ −５３３） 。 （３！フルストラ フォリアセア（Ｆｌｕｓｔｒａ ｆ
ｏｌｉａｃｅａ ）からインドールフルストラミン類Ａ
及びＢの単離しカール・ジェイ・ニス（Ｃａｒｌｅ＋
Ｊ、 Ｓ、 ）、クリストファースン・シー （Ｃｈｒ
ｉｓｔｏｐｈｅｒｓｏｎ、 Ｃ，）、Ｊ、 Ｏｒｇ、Ｃ
ｈｅｍ、１９８０年、４５巻１５８６〜】５８９頁；カ
ール・ジエイ・ニス、クリストファーノン・シー、Ｊ、
Ｏｒｇ、 Ｃｈｅｍ、１９８１年、４６巻３４４０−
３４８８頁〕。現在知られている環式イオノフオア類の
うち、ストレプトミセス グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ ｇｒｉｓｅｕｓ ）成分のアブラスモマイ
シンがブリオスタチン１に遠縁ではあるが関係している
ようである〔オカミ・ワイ（Ｏｋａｍｌ ＋Ｙ、 ）、
才力ツキ・ティー（０ｋａｚａｋｉ、 Ｔ、 ）、キタ
ハラ・ティー（Ｋｉｊａｌｌａｒａ、＋ Ｔ−）、ウメ
デヮ・エッチ（ＵｍｅＺａＷａｌ Ｈ，）、Ｊ、 Ａｎ
ｔｉｂｉｏｔ、 １９７６年、２９巻１０１９頁、及び
ナヵムラ・エッチ（Ｎａｋａｍｕｒａ＋Ｈ，）、イイタ
カ・ワイ（ｌ１ｔａｋａ＋ Ｙ、 ）、キタハラ・ティ
ー、オカザキ・ティー、オヵミ・ワイ、Ｊ。 Ａｎｔｉｂｉｏｔ、 １９７７年、３．０巻７１４頁〕
。 財政援助は、保健厚生省国立保健ωｆ究所のがん研究所
（ＮＣＩ ）かん治療部との契約ＮＯＩ−ＣＭ−９７２
６２、同がん研究所から与えられた補助金弟ＣＡ １６
０４９−０１〜０７、メリー・デル・プリズラフ（Ｍａ
ｒｙ Ｄｅｌｌ Ｐｒ１ｔｚｌａｆｆ ）夫人、オリン
財団（スペンサー・ティー（５ｐｅｎｃｅｒ、 Ｔ、
）及びアン、ダブリュー（Ａｎｎ、Ｗ、 ）、ノアニー
・Ｅ・リッペル財団、エリノア・ダブリュー・リビー（
Ｅｌｅａｎｏｒｗ、 Ｌｉｂｂｙ）夫人、デビット・ウ
ェア・ワブル財団、パール・スピア（Ｐｅａｒｌ ５ｐ
ｅａｒ ）夫人、及びロバ−１・・ビー・ダルトン（Ｒ
ｏｂｅｒｔ Ｂ、Ｄａｌｔｏｎ ）氏から提供を受けた
。非常な助けとなった他の援助については、ジエイ・デ
ィー・ドウロス（Ｊ、 Ｄ。 Ｄｏｕｒｏｓ ）、ジエイ奉ジエイ・エインク（Ｊ、Ｊ
、 Ｅｊ−ｎｃｋ ）、ディー・ガスト（Ｄ、 Ｇｕｓ
ｔ ）、アール・アール・インナース（Ｒ，Ｒ，Ｉｎｎ
ｅｒｓ ）、エル・ダブリュー・ナツプ（Ｌ、 ｗ、Ｋ
ｎａｐｐ ）、ビー・ロハバニジャヤ（Ｐ、 Ｌｏｈａ
ｖａｎｉｊａｙａ ）、エム・アイ・サフネス（Ｍ、
Ｉ、 ５ｕｆｆｎｅｓｓ ） 、ジェイ・エム・シュ
ミット（Ｊ’、 ｔ□、１． Ｓｃｈｍｉｄｔ ）、ジ
ェイ・ウィッチエル・ジュニア（Ｊ 、Ｗ１ｔ＋；ｃｈ
ｅｌ ＋ Ｊ ｒ −）の諸博士、エム・エイ・カール
ソン（Ｍ、 Ａ、Ｃａ’ｒｌｓｏｎ ）氏、ビー・エル
・ノーフリート（Ｂ、 Ｌ、 Ｎｏｒｆｌｅｅｔ ）
嬢、ケイ・エム・ウエルテ（Ｋ、 Ｍ、 Ｗｅｌｃｈ
） 嬢、スミソニアン博物館海洋学分類センター、及び
サウスヵロライナ大学に置かれた全米科学財団地域施設
（（Ｊ］７８−１８７２３ ）に感謝したい。また、Ｎ
工ＨＣＡ’２４４８７（ＪＣ）及び全米科学財団から与
えられた支援に感謝したい。 新規な高活性の大環式うクトン抗肺瘍抗生剤ブリオスタ
チン１、ブリオスタチン２及びブリオスタチン３は、海
洋こけむし類のブグラネリチナ（Ｂｕｇｕｌａ ｎｅｒ
ｉｔｉｎａ ）から単離された。ブリオスタチンＪはわ
ずか１０〜７０μり／にりの注射量で、腫瘍をもつハツ
カネズミの寿命を５２〜９険チ増す。ブリオスタチン２
と３は、加μり／に９の注射量で、腫瘍をもったハッカ
ネズミの埒命を約６０係増す。ブリオスタチン１の構造
式を式１に、ブリオスタチン２を式２に、またブリオス
タチン３を式３に示す。 生物の記述 外肛動物門（ＥＣ１ＯｐｒＯＣｔ＆ ） （普通はＢｒ
ｙｏｚｏａ又はＰｏ１ｙｚｏａ （苔虫類）と呼ばれる
〕の海洋動物ハ群体のフィルターフィーダー（食物をフ
ィルターでこして得る動物）であり、各々の細束（ポリ
バイト１１）ＯＩＹｐｊ、ｄｅ ）はそれぞれの単位（
東学ｚｏｏｅ−Ｃｉｕｍ）に包まれている。氷面上の外
観から、こけむし類は普通には海の敷物（ｓｅａ−ｍａ
ｔｓ ）とが偽さんごなどの名で知られている。 ブグラネリチナ（リンネウス）〔Ｅｕｇｕｌａ ｎｅｒ
ｉｔ、ｉｎａ（Ｌｉｎｒ＋ａｅｕｓ ）１は広く分布し
たコケ状のこけむし類であり、船腹に取りつく能力のた
めによく知られている。ブグラネリチナ細束（ポリバイ
ト）の−形（鳥頭体ａ−ｖｉｃｕｌａｒｉｕｍ ）は鳥
のくちばしに似ており、一方のあご全他方のあごと閉じ
ると、解体を招かれざる浸入から守ることができる。こ
のような馬頭体はＢ、ネリチナの普通の構成体である。 Ｂ、ネリテナその他の海洋こけむし類はジェイ・エッチ
・ディ（Ｊ、 Ｈ，Ｄａｙ ）の「南アフリカ沿岸海洋
生物案内Ｊ ｚ−ルヶマ・エイ・エイ（Ｂａｌｋｅｍａ
＋Ａ、 Ａ、 ）、ケープタウン、１９７４年、１２３
頁、及びピー・エッチφペンノン（ｐ、 Ｈ，Ｂｅｎ５
ｏｎ ）とアール・ダブリュー・モンクレーフ（Ｒ，Ｗ
、 Ｍｏｎｃｒｅｉｆｆ ）の［ありふれた船底付着生
物ブグラネリチナの幼虫付着に対する亜鉛及びｐＩ日の
影響Ｊ Ｃｏｍｐｔ、 Ｒｅｎｄ。 ｄｕ Ｃｏｎｔｒｅｓ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
ｄｅ ｌａ ＣｏｒｒｏｓｉｏｎＭａｒｉｎｅ
ｅｔ ｄｅ ５ａｌｉｓｓｕｒｅｓ、４ｔｈ Ａ
ｎｔｉｂｅｓ ａｎｄ Ｊｕ−ａｎ−１ｅ−Ｐｉｎｓ
、 Ｆｒ、、 １９７６年７月１４日〜１８日に記述が
ある。 生物の所在 構造決定にζ［・：・要な多気のブリオスタチン類１及
び２は、カリフォルニア州モンデレーｍ（−＄４Ｊ１６
゜西経１２２°）から収集したブグラネリチナ標本５０
０Ｋｇから単離された。これらばＯ〜５フィートの低い
潮位で採集式れた。これらの化物全採集した他の場所と
しては、東京湾（３５°Ｎ、１４０’Ｅ）、メキシコの
シナロアやフロリダ州アリヶ゛−ター、ハーバ−の近く
の場所が含まれる。別々の三つの採集物からのＢ、ネリ
チナの抽出物はいずれも抗新生物活性を含有していた。 ブリオスタチン類の単離札製 Ｂ、ネリチナ試料からブリオスタチン類を単離精Ｓする
には、溶剤抽出、分配クロマトグラフィ、シリカケゝル
クロマトグラフィ、フレイブ装置による液−液分布、樹
脂への吸着、及び溶媒からの結晶化を含めて種々の方法
を使用できる。 選ばれる単離Ｎ製法は、アール・アイ・ケ゛ラン（Ｒ，
Ｉ、 Ｇｅｒａｎ ）、エヌ・エッチ・グリーンパーグ
（Ｎ、Ｈ，Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ ）、エム・エム−７ク
ドツールド（Ｍ、 Ｍ、 ＭａｃＤｏｎａｌｄ ）、エ
イ・エム−シューマーカー（Ｍ、 Ｍ、 Ｓｃｂｕｍａ
ｃｈｅｒ ）及びビー・ニス・アボット（Ｂ、 Ｅ、Ａ
ｂｂｏｔ ）、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、
Ｒｅｐ、第３部第３巻（２）１〜１０３頁（１９７２年
）及びシュミット・ジエイ・エム（Ｓｃｈｍｉｄｔ、
Ｊ、 Ｍ、 ）、ベテイート・ノー・アール（Ｐｅｔｔ
ｉｔ、 Ｇ、 Ｒ，）、Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ 。 １９７８年、３４巻６５９〜６６０頁、に記載されてい
るように、生体外及び／又は生体内抗腫瘍試験を行なっ
て、各段階毎に監視できる。このような試験は、培養基
中の紳瘍細胞の生育を抑制するのに必要な活性材料の濃
度（例えば生育全５０％抑制するのに必要な濃度又はＥ
、 Ｄ、５０ ）の決定や、移植された腫瘍をもつハツ
カネズミの寿命を伸ばすのに必要な活性材料の投与量決
定を含む、 以下の実施例は好ましい方法を例示するか、限定的に考
えられてはならない。 実施例１ 抽出及び溶媒分配 海洋動物の湿重量で５００Ｋｆを採集後直ちに２〜プロ
パツールに浸し、この状態で処理の場所まで運搬した。 運搬液（１５０ガロン）を動物から抜き取シ、５０℃で
プツチＲ〜１５０ Ｆ蒸発器を使用して水性スラリーへ
濃縮した。この濃厚液を分けて塩化メチレンによる抽出
をくシ返した（５〜６回）。 −緒にして乾燥した運搬液からの塩化メチレン抽出液は
重さ５１１．Ｏｆ ｆあシ、３．７５ ｍｙ／Ｋｙの注
射量でハツカネズミに有毒であった。 運搬液を抜き出した後、海洋動物全切り刻み、塩化メチ
レンとメタノールとの（］；］）混合物で２週間、周囲
温度で更に抽出した。／ＡＥ、する液を動物から抜き取
り、液４部に対し水１部を加えて相分離を行なった。下
層（主に塩化メチレン）を除き、４０〜４５℃で減圧を
用いて乾固まで蒸発させた。残シの上層に単−相をつく
るのに十分な塩化メチレンとメタノールを加え（上相：
塩化メチレン：メタノール４：２：１の比）、この液を
動物材料に戻し、第二の抽出を周囲温度で１２日間行な
った。第二の抽出から生ずる液を動物から抜き出し、水
を再び加えて相分離を行なった。下相を分離し、乾固ま
で蒸発させた。塩化メチレン−メタノールによる動物の
２度の抽出から、乾燥塩化メチレノ抽出物計３６６．１
ｆが得られた。 乾燥塩化メチレン抽出液（運搬液と刻んだ動物体の抽出
から得られるもの）を更に分離するには、少量゛ずつを
取り、メタノール： 水（９： １ ） ／ ヘキサン
（４回）から始めてそれぞれの量を溶媒分配にかける。 乾燥ヘキサン抽出液はＰ３８８ハツカネズミ腫瘍試験で
不活性であった。水性メタノール層を更に水で８：２の
比に希釈し、四塩化炭素でくり返しく９（ロ））抽出し
た。四塩化炭素抽出液を乾燥し、抗腫瘍活性の検定を行
なった。運搬液カラ（ｌ ラレｆｃ １４９．６ ｔ
部分ハ１．５１７％Ｉ ７Ｋｇの投与針ではつかねずみ
に布置である一方、刻んだ動物体の塩化メチレン−メタ
ノール抽出液から得られた６Ｌ３ｒの量はＰＳハツカネ
ズミ腫瘍試験系に活性があり、１０ ｍｙ ／ Ｋｇの
投与量で４６係の寿命延長を生じた。 上で説明された全抽出液及び溶媒の分配法は、式■に略
図で示しである。 実施例２ クロマトグラフィによる精製乾燥四塩化炭素
抽出液を更に精製するには、溶離溶媒混合物で平衡化さ
れたセファデックスＬＨ−２０（ファーマシア・、ファ
イン・ケミカルス）全含有する大きなガラス製カラム（
グレンコ、９．５×１］２ｃｙｘ）で２回の分離用クロ
マトグラフィ手順によって行なう。ギルノンＦＣ−２２
０を用いて溶離液のフラクションを集め、薄層クロマト
グラフィ（ＴＬＣ）系を用いて溶離フラクションの溶質
を監視する。′■“ＬＣ系は、塩化メチレン：メタノー
ル（９５： ５ ）溶媒系で展開されるｊ′カナルック
シリカケ゛ルＧＨＬ１４’ユニプレートｇからなる。 分離された成分は、アニスアルデヒド酢酸−硫酸溶液（
イー・スタール（Ｅ、 ５ｔａｈｌ ）、「薄層クロマ
トグラフィ」アカデミツクブレス社、ニューヨーク、１
９７１年、４８５頁）を噴霧することによって視覚化さ
れた。溶離された液の「ビーク」に対応するフラクショ
ンを貯え、乾燥し、移植されたハッカネズミ肺錫系（ｐ
ｓ）で抗腫瘍活性の恢足全行なった。 最初のクロマトグラフィ分１ｌｉ１！：＋順を塩化メチ
レン：メタノール（１：１）の溶媒系で行なった。 少なくとも３５チの寿命延長（ｐｓ系）を生じたフラク
ションを一緒にし１、第二のクロマトグラフィ分離に用
いた。生物活性材料の全量は１２２．８ ？であった。 第二のクロマトグラフィ分離手順をヘキサン：トルエン
：メタノール（３：１：］）の溶媒系によって行なった
。最初のクロマトグラフィ分離手順からの生物活性材料
を処理するのに計５本のカラムを必要とした。このうち
１本は、生物活性材料３３．９ｆを各１ｇｍＡ！のフラ
クション７８０本へ処理するのに用いたつ室温で蒸発後
、フラクション３５３〜３７５は計１２０■の無色結晶
を生じた。塩化メチレン−メタノールからこの材料を再
結晶させると、ＴＬＣでＲｆｏ、７に単一スポットを与
え、２３０〜２３５℃の未補正融点（ケフラー融点測定
装置）をもつ結晶９１ｍ７を生じた。この材料をブリオ
スタチン１と命名した。 別のカラムを使用して、生物活性材料１４ 、８９を各
Ｌ９ｍｌのフラクション４５９本に処理した。フラクシ
ョン３８５〜４００は計８３．４ｍ’ｉの結晶性残留物
を生じた。この材料を塩化メチレン−メタノール−水か
ら再結晶させると、ＴＬＣでＲｆ Ｏ，５４に単一スポ
ットを与え（このＴＬＣを塩化メチレン：メタノール（
９０： １０ ）溶媒系で展開した）、２０１〜２０３
℃の未補正融点をもつ無色結晶７．５〜を生じた。この
材料をブリオスタチン２と命名した。 ブリオスタチン２の追加４２■が、直列使用のメルク（
ダルムシュタット）製サイズＡ （４０〜６３μｍ）事
前充填カラム３本によるシリカゲルクロマトグラフィに
よって、上の母液残留物７５■から回収された。カラム
をメタノール中の塩化メチレンにより、混ぜもののない
塩化メチレンから出発し、塩化メチレン：メタノール（
９０：１）混合物に終る勾配で溶離した。 ブリオスタチン２に富んだ別のフラクション（１６８，
５■）をシリカケ゛ル事前充填カラム（メルク製すイズ
６３本直列）で更にクロマトグラフィ処理した。塩化メ
チレンから出発し、塩化メチレン；メタノールの最終比
８５ ： １５４でメタノールを増量する溶媒の勾配を
使用した。各５ｗＬｌのフラクション計２８７本を収集
した。ブリオスタチン３はフラクション１３０〜５に含
まれていた（７２．２７ｑ）。 ブリオスタチン３は、［川じ勾配であるがもつと小さい
カラム（メルク製サイズＡ３本直列）を使用してなおも
精製を必要とした。純粋なブリオスタチン３は、塩化メ
チレノ：メタノール９９：１から９７：３の勾配でフラ
クション９２〜８ （４２，３〜）に溶離され、フラク
ション計１４４本を収集した。 この材料は無矩形固体であり、結晶化を試みたが分解す
る結果となった。 実施例３ ブリオスタチン誘導体類 ７’ ＩＪオスタチン類は、遊離ヒドロキシル及び置換
可能なアシル基をもっている（猷、１．２．３を参照の
こと）。このため当業者に周知の方法でコレラ化合物類
の種々のアシルエステル類ヲツくることができる１、ブ
リオスタチン類のアシル誘導体類を親化合物と同じ生物
学的目的に使用できる。 ブリオスタチン類のアシル化に使用できる酸類は以下を
包含する。 （ａ）飽和又は不飽和、直鎖又は分枝鎖の脂肪族カルボ
ン酸類、例えば酢酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、
第三ブチル酢酸、吉草酸、イソ吉草酸、カプロン酸、カ
プリル酸、デカン酸、ドデカン酸、ラウリン酸、トリデ
カン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、パルミチン酸
、マルガリン酸、ステアリン酸、アクリル酸、クロトン
酸、ウンデシレン酸、オレイン酸、ヘキシン酸、ヘゾチ
ン酸、オクチン酸等。（ｂ）飽和又は不飽和脂環式カル
ボン酸ａ、例、ｔばシクロブタンカルボン酸、シクロペ
ンタンカルボン酸、シクロペンテンカルボン酸、メチル
シクロペンテンカルボン曜、シクロヘキサンカルボン酸
、ジメチルシクロヘキサンカルボン酸、ジプロピルシク
ロヘキサンカルボン酸等。（ｃ） 飽和又は不飽和脂環
式脂肪族カルボン酸類、例えばシクロペンタンカルボン
酸、シクロペンタンプロピオン酸、シクロヘキサン酢酸
、シクロヘキサン酪酸、メチルシクロヘキサン酢酸等。 （ｄ）芳香族カルボン酸類、例えば安息香酸、トルイル
酸、ナフトエ酸、エチル安息香酸、イソブチル安息香酸
、メチルブチル安息香酸等。（、）芳香脂肪族カルボン
酸類、例えばフェニル酢酸、フェニルプロピオン酸、フ
ェニル吉草酸、桂皮酸、フェニルプロピオン酸及びナフ
チル酢酸等。適当なハロ、ニトロ、ヒドロキン、ケト、
アミノ、シアノ、チオシアノ、及び低級アルコキシ炭化
水素カルボン酸類は、上に与えられた炭化水素カルボン
酸類がハロダン、ニトロ、ヒドロキシ、ケト、アミノ、
シアノ又はチオシアノ、又は低級アルコキシ、有利には
６個を越えない炭素原子の低級アルコキシ、例えばメト
キシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、アミロキシ、
ヘキシロキシ、及びそれらの異性体型の一つ又はそれ以
上でＩｎ換されたものである。このような置換炭化水素
カルボン酸類の例は以下のものである。 モノ、ジ及びトリクロロ酢酸 α−及びβ−クロロプロピオン酸 α−及びγ−ブロモ酪酸 α−及びδ−ヨード吉草酸 メバロン酸 ２−及び４−クロロシクロヘキサンカルボン酸シキミ酸 ２−二１・ロー１−メチル−シクロブタンカルボン酸 １．２，３．４，５．６−へキサクロロシクロヘキサン
カルボン酸 ３−ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン酸 ４−及び５−ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボ
ン酸 ５−及び６−ブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボ
ン酸 ２．３−ジブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ２．５−ジブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ４．５−ジブロモ−２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ５．６−ジプロモー２−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ３−ブロモ−３−メチルシクロヘキサンカルボン酸 ６−ブロモ−３−メチルシクロヘキザン力ルボン酸 １．６−ジプロモー３−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ２−ブロモ−４−メチルシクロヘキサンカルボン酸 １．２−ジブロモ−４−メチルシクロヘキサンカルボン
酸 ３−ブロモ−２，２，３−）リメテルシクロベンタンカ
ルボン酸 １−ブロモ−３，５−ジメチルシクロヘキサンカルボゝ
ン酸 ホモゲンチシン酸、ｏ−ｌｍ−及びｐ−クロロ安息香酸 アニス酸 サリチル酸 ｐ−ヒドロキシ安息香酸 β−レゾルシル酸 没食子酸 ペラトルム酸 トリメトキシ安息香酸 ４．４′−ンクロロベンジル酸 ０−ｌｍ−及びｐ−二トロ安息香酸 シアノ酢酸 ３．４−及び３，５−ジニトロ安息香酸２．４．６−
トリニトロ安息香酸 チオシアノ酢酸 シアノプロピオン酸 乳酸 エトキシ蟻酸（炭酸水素工ナル） りんご酸 くえん酸 イソくえん酸 ６−メチルサリチル酸 マンゾリン酸 レブリン酸 ピルビン酸 グリシン アラニン パリど イソロイシン ロイシン フェニルアラニン プロリン セリン スレオニン テロシン ヒドロキシプロリン オルニチン リジン アルギニン ヒスチジン ヒドロキシリジン フェニルグリシン ｐ−アミノ安息香酸 ｍ−アミノ安息香酸 アントラニル酸 アス／ぞラギン酸 グルタミン酸 アミノアジピン酸 グルタミン アスパラギン等 ブリオスタチン類の物理的データ クロマトグラフィに使われた全溶媒を再蒸留した。シリ
カゲルＧＨＬＦと指定された事前被覆アナルした（イー
・スタール（イー・スタール）、ｒ薄層クロマトグラフ
ィ」アカデミツクブレス社、ニューヨーク、１９７１年
、４８５頁）。融点はすべて未補正であり、ケフラー融
点測定装置を使用して得られた。”’ＣＮＭＲスペクト
ルはブルーカーＷ）（−９ＯＮＭＲスペクトロメーター
（ＴＭＳからダウンフィールドのｐｐｍで２２．６ Ｍ
Ｂ２）によって得られた。’ＨＮＭＲスペクトル（４０
０１ａｚ ）はＷＨ−４００ＮＭＲスペクトロメーター
によって得られた。質量スペクトルをパリアンＭＡＴ−
３１２質量スペクトロメーターによって測定した。比旋
光度は／ξ−キン＝エルマー・モデル２４１旋光計を用
いて測定された。紫外線スペクトルはヒユーレット＝パ
ツカード８４５０Ａ ＵＶ／ＶＩＳスペクトロメーター
を使用して記録された。 ブリオスタチン １ サー塩化メチレンーメタノールから無色結晶性固体。 見皇−２３０〜２３５°Ｃ１未補正 薄層クロマトグラフィ 溶 媒 系
ＲｆＣＨ２Ｃ＃２＝ＭｅＯＨ（９： ］ ）
０．７据外線スペクトル λ最大（ＭｅＯＨ）−２３
３ｎｍ（ε２５，２３０）及び２６３ｎｍ（ε２８ 、
Ｉ ７０） 比旋光度 ４．４係メタノール溶液で〔α）
ｐ＋３ａ、１゜電子衝撃質量スペクトル（ＥＩＭＳ） ｍ／ ｚ ８８６（Ｍ ８２０．０４７Ｈ６６０１６）
正確な質量８８６．４３７６ ａｍｕ （計算値は０４
７Ｈ６６０１６について８８６．４３５１ ）高速原子
ボンバードメント質量スペクトル（ＦＡＥＭＳ ）ｍ／
ｚ９０４（Ｍ） 赤外線スペクトル（ＫＢｒ） 次の場所にピークが見
られる。 ３７４０．３４００，２９７０，２９５０，１７３５．
１７１６（最強バンドＬ １７００，１６００，１６
４０，１４３５，１３８５゜１３６５、 １２４５．
１１６０． １１００． １０８０．及び１０００ｃｒ
ｎ−１；１３ＣＮＭＲ（２２，６Ｍｌｌｚ広域バンドは
デカップルされている。 ＣＤＣム） δ１７２．２（８）、 １７１．１（ｓ）、 １６
７．０ＦＥｌ＋、 １６６．８（Ｓ）、１６５．６（
１３）、 ＩＦ＋７．１ｆＳ）、 １５２．１ｆＳ
ｌ、 １４６．４． １４５．４． １３９．２゜１
２９．６，１２８．５，１１９．６，１１８．７，１１
４．１，１．０１．９（Ｓ）、９９．］ｌＳ）、７９．
１，７４．２，７３．７，７３．１，７１．６゜７０．
２．６８．５，６５．７．６４．８．５１．０ （カル
チット。 ２炭素）、 ４４．９（Ｓ）、 ４４．３． ４２
．３． ４２．帆 ４１．１（川。 ４０、帆３６．５．３６．帆３５．１．３３．４．３１
．４．２４．６゜２１．９．２１．１． １９．８．
１．６．９及び１３．７ ；プロトンＮＭＲ（４００Ｍ
Ｈｚ、ＣＤＣＡａ ）δ７．２９ ７．２２ （ｍ、
Ｉ Ｈ）、 ６．１５ （ａ、 Ｊ＝５．６Ｈｚ。 ２Ｈ）、５．９８ （日、Ｉ Ｈ）、５．７９ （ｄ−
、Ｊ ＝３．４１１ｚ、ＩＨ）。 ５．７６（ｄ、Ｊ＝３．６Ｈｚ、ＩＨ）、５．６５（８
，ＩＨ）。 ５．２９ （１１１，ＩＨ）、５．１９ （ｍ、４Ｈ）
、４．１９ （ｍ、１−２Ｈ）。 ４．０９ （ｍ、２Ｈ）、３．９９（ｍ、２Ｈ）、３．
７３ （ｍ、１．Ｈ）。 ３．６８ （Ｅｌ、３Ｈ）、３．６５（Ｅｌ、３Ｈ）、
３．６３ （ｎｌ、ＩＨ）。 ２．５１ （ｔ、Ｊ＝１２Ｈｚ、ＩＨ）、２．３８（ａ
’、Ｊ＝１．０．５１＋ｚ。 Ｉ Ｈ）、 ２．１７−１．４９ （ＣＯｍｐｌｅＸ、
１ｌ−１２Ｈ）、 ２．０５（ｓ、３Ｈ）、１．４４（
ｍ、３Ｈ）、１．２２ （ｄ、Ｊ＝６．３Ｈｚ。 ３Ｈ）、１．１．３（Ｓ、３Ｈ）、０．９８（Ｅｌ、６
Ｈ）、０．９１（Ｓ、３Ｈ）及び０．８９ （ｄ、 Ｊ
＝７．３Ｈ２、３Ｈ）。 ’Ａ−Ｊｆｒｒ−ｐ 測定値 Ｃ，６１，５５Ｂ、
７．３３ ’Ｊ素ヤｆＡｆ黄ｕ存在しない ６１．８４ ７．２２ 可能な実験式 Ｃ４’／Ｈ６８０よヮ 計算値 Ｃ，６２，３７Ｈ，７，５７ ブリオスタチン ２ 」−塩化メチレン−メタノールから無色結晶性固体 鮮−２０１〜２０３°ｃ１未補正 ｃｍ２ｃｔ２： Ｍｅｏｎ （９： １ ） ０．５
４紫外線スペクトル ２最犬（ＭｅｏＨ） −２３０ｎｍ （ｅ ３６．２５
０ ）及び２６１ｎｍ（６３５，６００） 比旋光度 ５係メタノール溶液 〔α〕甘せ５０ 、ｃｆ電子衝撃
質量スペクトル（ＥＩＭＳ ）ｍ ／ ｅ ８２６ （
Ｍ −２Ｈ２Ｏ）、正確な質１８２６．４１３８ａｍＬ
ｌ（Ｃ４５Ｈ６２０１４の計算値 ８２６．４１３６
）赤外線スペクトル（ＫＢｒ ） ピークは３４６５． ２９７５〜２９５０． １７１５
（最強帯）。 １７００、 １６４０〜１６５０． １４３５． １３
６０． １２ＦｌＯ，１２３０゜１１６５、 １１００
． １０８０． １０５０及び１０００ｍ−１に見られ
る。 ”’ＣＮＭＲ δ１７２．７４． １６７．１２． １６６．８９．
１６５．６６、 １５６．９５゜１５２．０１． １４
６．４９． ］、４５．５８． １３９．１８． １
２９．６５゜１２８．４５． １１９．６８． １１８
．６４． １１４．３２． １０１．９０゜９９．１１
． ７９．１６． ７４．１２． ７３．８３． ７１
．６５． ７０．１２゜６８．５０． ６６．０６．
６４．７６、 ５１．１１． ４４．９４． ４４．２
２゜４２．２１． ４２．２１．４２．２１． ４０．
０７． ３６．５６． ３５．９４゜３５．０６． ３
１．３６． ２４．６６、 ２１．９０． ２１．０９
． １９．７６゜１５．６０． １３．６８゜ プロトンＮＭＲ（４ＱＱ ＭＨ３，ＣＤＣ７５）δ７．
２（ｍ、ＩＨ）、６．１６（ｄ、Ｊ＝５．６＋（ｚ、２
Ｈ）。 ６．０１ （Ｆ３． ＩＨ）、 ５．８１ （ｄ、 Ｊ
＝６．４Ｈｚ、 ＩＨ）、５．７７（（１，Ｊ＝７．１
Ｈｚ、ＩＨ）、５．６８（Ｅ’、ＩＨ）、５．３１（Ｉ
ｎ。 Ｊ＝５Ｈｚ、ＬＨ）、５．１９ （８，２Ｈ）、４．２
８ （ｍ、ＩＨ）。 ４．１６ （ｍ、２Ｈ）、３．９９ （ｍ、３又け４Ｈ
）、３３−８０（。 １又は２Ｈ）、３．７０（Ｓ、３Ｈ）、３．６６ （８
，３Ｈ）。 ３．６３ （ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ２．４６ （ｍ、 ２
Ｈ）、 ２．２１−１．５７（ｃｏｍｐｌｅｘ、 ｌ５
−１９Ｈ）、 １．４５ （ｍ、 ３ Ｈ）、 １．２
３ （ｃｌ。 Ｊ＝６．３１１ｚ、 ３）（）、 １．１５ （８，３
Ｈ）、 １．０４ （ｓ。 ３Ｈ）、 １．００ （Ｅｌ、 ３Ｈ）、 ０．９２
（ａ、 Ｊ＝７．３１１ｚ。 ３Ｈ）、 （１，９１（Ｂ、 ３Ｈ）。 分析データ 測定値 Ｃ，５９，０６Ｈ，７，１６０，３２，１９窒
素や硫黄は存在しない 暫定式 〇４５Ｈ６６０□６ ブリオスタチン ３ 」 塩化メチレン−メタノールから白色無定形固体 薄層クロマトグラフィ溶媒系−ｃｍ２ｃｚ２： ＭｅＯ
Ｈ（９３： ７ ）、Ｒｆ＝０．５６ 紫外線スＡｅクトルーλ最犬（ＭｅＯＨ）−２２９（６
３１，７００）及び２６４（ε３０，６００） 比旋光度 〔α〕２６＋６１’ （Ｃ，０，２６メタ
ノール中）ＦＡＢ負景スペクトルｍ ／ｅ ９１，１
（Ｍ＋Ｎａ ）、Ｍ−Ｃ４６Ｈ６４ｏ１７赤外糾ス啄ク
トル（ＫＢｒ） ３４５０．２９３０−２９７０．１７８５．１７４０，
１７１８．１６４０＝１６５０、 １３６５． １３０
５． １２５０． １１６５． １１５０，１１３５゜
１１００．１０４５−１０７５．１０００ ｃｍ−’
；３ＣＮＭＲ １７２，４８，１７１，９６，１７１，１８，１６７、
］、２． １６６．８９゜１６５．９８． １５７．１
１，１４７．７２． １４６．６５． ］、３６．３
８゜１３２．７７、 １２８．３８． １１．７．３７
． １１４．３８． １１４．１２゜１０１．９０．
１０１．７１，８１．２４． ７３．０５． ７３．０
５゜７１．４６，６９．７７．６９．１２，６８．６０
，６８．３０．６５．５８゜５１．１８． ４５．２３
，４４．１９，４１．８２． ４１．８２． ４１．．
１４゜３９．４８．３６．４３．３５．１３．３５．１
３． ３３．２４． ３３．２４゜３３．２４，２４．
５０． ２１．８７．２１．１５． ２］、ｉ５． １
９．３０゜１６．９９． １３．６８ ｉ δ７．３７−（１１１，ＬＨ）、 ６．２０ （ｍ、
２Ｈ）、 ５．８７ （ｃｌ。 ＩＨ）、５．８３（ｅ、ＩＨ）、５．７４（Ｅｌ、１）
［）、５．７０（ｄ、ＩＨ）、５．６７（Ｂ、ＩＨ）、
５．４１ （ｍ、ＩＨ）、５．２８（Ｓ、ＩＨ）、５．
１６（Ｉｎ、ＩＩ（）、５．０２（ｍ、１）Ｉ）、４．
４７（Ｉｌｌ、ＩＩ（）、４．３４（ｍ、ＩＨ）、４．
１７（ｍ、２Ｈ）、４．０３−３．９８（Ｉ［１，２Ｈ
）、３．７８ （ｍ、ＩＨ）、３．７１ （ｍ。 １ Ｈ）、 ２．５５ （ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ２．４３
（ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ２．１７ （ｍ。 １３Ｈ）、２．０６（８，３Ｈ）、’２．０（ｍ、２Ｈ
）、１．８６（ｍ、ＬＨ）、 １．７２（ｍ、２Ｈ）、
１．６３ （ｍ、２Ｈ）、１．５５（ｍ、１ ２Ｈ）、
１．４７（ｍ、２Ｈ）、１．２１（ｄ、Ｊ＝６Ｈｚ。 ３Ｈ）、１．１２（ｓ、３Ｈ）、１．００（８，６１（
）、０．９２（ｅ、 ｔ、 Ｊ ＝７Ｈｚ 、 ６ Ｈ
）。 ブリオスタチンｌの構造決定 結晶学的計算はすべて、コーネル化学計算施設で操作さ
れるＰＲ工ＭＥ ８５０ コンピューターで行なわれた
。使用されたおもなプログラムはデータ整理プログラム
のＲＦ、ＤｔｌＣＢとＩＪＩｉＸＱ７３Ｂであった。 スタウトの平行六面体結晶は、メタノール下に塩化メチ
レン中のブリオスタチン１の層状溶液をゆっくりと混合
することから得られた。母液中に保持されると、これら
の結晶はａ ＝ ２１．７８２（５）、ｂ ＝ ２０．
４２８＋４１及び９ ＝ ２３．６６４（６）Ａ及びＺ
＝８の場合の空間基Ｐ ２１２１２１に践することがわ
かった。 乾燥後、Ｃ軸が半減したように見え、比較的劣った回折
パターンはＰ ２１２１２１に一致した〔同様な形の疑
似対称性はグラミシジンＳの塩酸塩に対して観察された
。ホジキン・ディー・ノー（Ｈｏｄｇｋｉｎ。 Ｄ、 Ｃ１）、オウト７−ビー−エム（Ｏｕｇｈｔｏｎ
、 Ｂ、Ｍ、 ）、Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｊ、 １９５７
年、６５巻７２５〜７５６ Ｊ ］。］１°ω−スキャ
ンびグラファイト−モノクロム化ＭｏＫα：（０，７１
０６９Ａ ）放射線を使用して、−１００°Ｃで計５４
６４のりフレクションを集めた。これらのデータのうち
、３５５３ （６５％ ）はＣＩ ’ｏ ｌ ＞３ （
１（１”Ｏ））が観察されたと判断され、その後の計Ｗ
に使用された。 プロゲラムクステムＭＵＬＴＡＮ７８により、最大３５
０の正規化された構造因子について約２０００のフェー
ズセットを発生させ、同じ加重をＡＢＳＦＯＭ 、 Ｐ
ＳＩＺｌｉｊＲＯ。 ＲＥＳＩＤ及びＮＱ、ＫＳＴへ置き、セットの格付けを
行なった。最も有望なセットの一つを使用する８合或は
、２個の化学的に知覚されうる同一の冴原子断片を提供
し、これらは約ｃ ／ ２のトランスレーションによっ
て関連づけられた。正接式再循環（ｔａｎｇｅｎｔ ｆ
ｏｒｍｕｌａ ｒｅｃｙｃｌｉｎｇ ） ［カール・ジ
エイ（Ｋａｒｌｅ、 Ｊ、）、Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａ
ｌ工Ｏｇｒ ５ｅｃｔ、 Ｂ １９６８、Ｂ２４巻１８
２〜１８６頁〕によってこのモデルを拡大する試みや、
最小２乗法でこのモデルを珀密化する試みは成功しなか
った。このため、我々はウィルソンプロットと最小２乗
法の目盛係数との平均値であるような目盛係数を使用す
る正接式再循環に戻った。この方法によるＥ合或は驚異
的に改善され、本質的に同一の２断片に１００個の化学
的に知覚できる原子を示した。更に正接式再循環により
、ブリオスタチン１０両分子牛に事実上全部の非水素原
子が示された。 （２Ｆｏｂｓ Ｆ’ｃａｌｃ ）を係数として使用す
るフーリエ合成〔メイン−ピー（Ｍａｉｎ、 Ｐ、）、
Ａｃｔａ Ｃｒｙ−ｓｔａｌｌｏｇｒ、肪ら△■９７９
、人亜巻７７９〜７８５頁〕と交互にブロソクーダイヤ
ゴナル最小２乗法を使用して最終モデルを精密化すると
、２個の独立分子内における１２８個の非水素原子の配
置と、式Ｉに示されたブリオスタチン１の構造決定に導
ひかれた。現行のＸ線モデルは分子当たり５９個の異方
性非水素原子、エステル側鎖に等方性であるような末端
原子（Ｂは５ないし２０Ｘの範囲、Ｂ平均は約２．５
Ａ ）、幾つかの溶媒メタノール分子及び計算された位
置に１１４個の水素を包含している。このモデルでの標
準的な結晶学的残有（Ｒ因子）は観。 察データに対して０．０７に収束した。 結晶の疑似対称性から予想されるとおり、ブリオスタチ
ン１の双方の独立分子は同−立体構造と、本質的に同一
形態とをもっている〔詳細はアーノルド・イー（Ａｒｎ
ｏｌｄ、 Ｂ、 ）、ＰｂＤ博士論文、コーネル大学、
１９８２年５月を参照のこと〕。ブリオスタチン１の１
１個のキラル中心の相対的立体化学的指定は次のとおり
である。３（Ｒ”）、５（ビ）、？ （Ｓ ”Ｉ＝ ＞
、９（Ｓ”）、１１（Ｓ”）、１５（Ｒ”）、１９（ｆ
９”）、２ｔ）（８勺、２３（８勺、２５（Ｒ”）及び
２６（Ｒ”冗フリオスタチン１の結晶配座は長１３ Ａ
、幅８Ｘ、茜さ約６Ｘの大まかに言ってひしやく形の分
子を明らかにしている。分子モデルの検討は、他にも可
能な配座がありうることを示唆している。 式Ｉに示すブリオスタチン１のエナンチオマーを、次の
ように選択した。エンゲルの方法〔エンゲル ディー・
ダブリュー （Ｅｉｎｇｆ３１ 、 Ｅ、 Ｗ、 ）、
ＡｃｔａＣｒｙＩ：Ｉｔａｌｌｏｇｒ、５ｅｃｔ、Ｂ
１１９７２年、Ｂ２８巻１４９８〜１５０９頁〕を使用
して、酸素と炭素による変則的散乱効果（ＣｕＫαデー
タ収集に対してそれぞれへｆ“０．０３２及び△ｆ″−
０，００９電子）を測定した。最大のビジュホー（Ｂｉ
ｊｖｏｅｔ ）比をもっことが予想されるビジュボ一対
の７グループを、ＣｕＫα放射線を使って非常に緩慢に
測定した（３Ｘ）。各」−合とも中心対称性リフレクシ
ョンである近１１ｉ！ｉ′の対を同様な方法で測定する
と、吸収及びその他の異方性効果に対する実験的補正が
得られた。７グループの各々に対１−て得られた吸収補
正ずみビジュボー比は、エナンチオマーを指し示してい
た。 ブリオスタチン１を２６員のマクロライド環と考えるこ
とができる。この訪員環の中に、炭素鎖に沿うよりもビ
ラン酸素を経由した短路を取ることで決まる２０員サイ
クルが埋め込まれている。最も長い炭素原子鎖は２７で
あり、提案の番号づけ方式に用いられた。炭素８及び１
８の隣接（ｇｅｍ ）−ジメチル置換基から始寸った酸
素置換パターンは、ブリオスタチン１に対してボリヶタ
イＰ生合成を示唆している。ピラン環はすべて、大体に
おいて連鎖の配座にあり、各ノτは外側へ突き出る４位
置の置換基をもっている。マクロサイクルｆＥＦ換基の
全部が、ピラン環に対して赤道位置にある。分子内水素
結合１”ｉ’ ０１９Ｈト０３ （２，７］、２．７１
Ｘ ）ノ間に現われ、０３Ｈと０５ （２，８４，２
，８７Ｘ ）の間、及び０３Ｈと０１１ （３，００，
３，０２Ｘ）の間に二つの可能な水素結合が見られた。 結晶配座において、酸素０１．０３．０５．０１１．０
１９ Ａ及び０１９ Ｂはいずれもブリオスタチン１の
酸素に富む大きな空洞の内部にある。この空洞の大きさ
と形、及び酸素原子の配置は、分子がポリエーテル抗生
物質に似た陽イオン結合能力をもちうろことを示唆して
いるＣ ２０にある軸上の（Ｅ、ＦＧ ）−オクタ−２
，４−ジェノン酸置換基は、脂質溶解度を高めるものと
予想される。 一つの興味ある可能性は、この置換基がＣ２０−０加納
合の周りを内部空洞上へ回転によって振れ、一方の側を
０閉じる″ことである。ブリオスタチン１のＣ１３とＣ
２１にある２個のアセチリデン巣位の立体化学により、
カルボニルの酸素はマクロサイクルに沿って炭素番号が
増加する方向に向く。これらの単位はβ−炭素で２置換
されるが、これらがバイオｈｏ ＩＪママ−ミン及び／
又はチオール基に対してマイケル受容体として機能する
ことも考えられる。 ブリオスタチン２の構造決定 ブリオスタチン２はＸ線結晶構造決定に適した結晶型で
得られなかったため、式２に示す明白な構造決定はブリ
オスタチン１及び２の篩解像プロトン磁気共鳴スペクト
ル分析や、それを支援するものとして”’ＣＮｋＡＲ（
ＣＤＣｌ３ ） 、質量その他スペクトル分析結果を必
要とした。ＣＤＣ４５中におけるブリオスタチン１及び
２の４００ Ｍｔｌｚ ＨＮＭＲスペクトルは広範囲
の二重共鳴実験（図表５）によって暫定的に決定された
。ブリオスタチン２のプロトンスペクトルは、２．０５
１）ｐＩＱにアセデートメチルの共鳴がないこと、及び
Ｃ７のプロトンが５．１５から３．１５ｐｐｍへアップ
フィールドに移動する以外は、ブリオスタチン１のそれ
とほぼ同一であった。これらの観察は、ブリオスタチン
２がブリオスタチン１のデスアセチル類似体であること
を示唆している。この結論は、ブリオスタチン２の Ｃ
ＮＭＲスペクトルがアセチルカルボニル（１７１，１５
ｐｌ）ｍ ）及びメチル（３３，４４）共鳴の消失、酸
素をもった炭素（おそらくＣ７）の７３．１１から７０
．１２へのアップフィールド移動、第四級炭素（おそら
くＣ３）（７） ４１．１１から４２．２１へのダウン
フィールド移動、及びｇｅｍ−ジメチル基共鳴の一つ（
おそら＜Ｃ２８又はＣ２９）のわずかな位置移動以外は
、ブリオスタチン１のそれと著しい差はなかったことに
よって強められた。 ブリオスタチン２の構造確認は、一連の選択的なミクロ
規模下のアセチル化−説アセチル化実験によって得られ
た。ブリオスタチン１及び２の部分的アセチル化（無水
酢酸−ビリジン、２時間、室温）によって（ＴＬＣによ
って）同一のアセテ−） （ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨか
らの無色針晶、融点２４９〜２５゜’Ｃ）が得られた。 メタノール中の塩酸（１係）で（２４時間、室温）又は
メタノール中の炭酸カリウム（１係）で（２４時間、室
ＩＭ）注意深くアセチ−トラ脱アセチル化すると、ブリ
オスタチン１と２の混合物を生じた。ブリオスタチン１
のわ１迄はＸ線結晶構造決定によって明らかにされたた
め、高 （解像ＮＭＲ分析及びアセテートへの転化
からの証拠 １を一緒にして、ブリオスタチン２の構
造が確立さ １れだ。
■ブリオスタチン３のｔｌＭ 造決定１ ブリオスタチン３は無定形固体として単離され また
。その構造決定は４００ ＭＨｚ １ＨＮＭＲ及び Ｃ
ＮＭＲ１スペクトル並びに赤外線及び質量スペクトルの
測 １定に基づくものであった。測定値は以下のとお
り １である。
１１ １７２．４８ −一−２ ２４４，１９２，４３，２，５５ｍ ２３
６ｃ＋、７７４．０３ ｍ
２４ ３３．２４ １．５５，１．９
ｍ ２５ ７１．４６
４．１７ ｍ６ ３３
．２４． １．４． １．７２ ｍ
２７ ７３．０５ ５．１６ ｍ
２＋ １０１．９０ −
−−０ ３５．１３ ２．１７
ｍｌ ６８．６０
３．９８ ｍ２ ３
６．４３ ２．１７ ｍ３
１５７．１１ −−−４ ３
９．４−８ ２．０６
Ｉｎ５ ６９．１２ ４．１７
ｍ６ １３６．３８ ５．
４１ （ｌａ（８，１，４）７
１３２．７７ ５．７０ ａ
（１４）８ ４５．２３ −−−９
１０１．７１． −−−０ ８１
．２４ ５．８２ Ｂ１
４１．８２ １．８５
ｍ２ １１４．１２ ５．７４
Ｅ１３ １６６．８
９ −−−４ ４１．８２ １．８６
．２．３５ ｍ１５ ７３．０５
５．０２ ｍ′ｂ
６５．５８ ３．７８
ｍ１７ ２１．８７ １．２１
ａ（６）２９ １６．９９”
１．００”３０ １１４．３８ ５
．６７ ｓ３１ １６７
．１２ −−−３２ ２１．１５ １．
００” ８３３ １９．３０
０．９２” ８３４ ６８
．３０ ３．７１ （１（９）３５
１７１．９６ −−−３６ １
７１．１８ −−−３７ ３３．２４
２．０５ ８聞
５１．１８ ３．６９ 日
３９ １６５ 、９８ −−−４０
１１７．３７ ５．８７ ｄ（ｉ
５）４１ １４７．７２ ７．３７
Ｉｎ４２ １２８．３８
６．２０ ｍ４３
１４６．６５ ６．２０ ｍ
４４ ３５．１３ ２．１７
ｍ４５ ２４．５０ １．
４７ ｍ４６ １３．６
８ ０．９２ ｔ（７）３４、−
ＯＨ４，４７（Ｌ（９） ３−ＯＨ４，３４ｄ（］３） ＊）これらの４群の分析値は交換可能である。 ブリオスタチン１及び３のＦＡＢ 質量スペクトル分析
は、ブリオスタチン３に対して１６賃を単位の正味損失
を示した。更に、ブリオスタチン１のアセテート及びオ
クタ−２，４−ジェノエート側鎖の消失を含めたＦＡＢ
断片パターンは、ブリオスタチン３のスペクトルでくり
返された。ブリオスタチン１−３の比旋光度と紫外線ス
ペクトルの類似性も、この新しいマクロ環式ラクトンが
その仲間と似ていることを示唆した。”ＣＮＭＲスペク
トルから全体的に同じ結論に到達し、ブリオスタチン１
〜３が同じプリオビラン環系全含有することを示しだ。 しかし、幾分の信号の移動（１〜３ ｐｐｍ ）とその
他の相違が認められた。ブリオスタチン１と２の炭素Ｃ
−２１及びＣ−４７に割り当てられていた信号が消えて
おり、Ｃ−３５による信号は１６６．８から１７１．９
Ｐｐｍへダウンフィールド移動を行なったように見え
る。ラクトン２の ＣＮＭＲスペクトルも、４１．８２
．６８．３０ 、１１４．１２及び１６６．７３ ｐｌ
）川に新しい信号を含ゼし、これらはそれぞれＣ−２１
、Ｃ−３４、Ｃ−２２及びｃ 、−２３に対応するもの
と信ぜられる。 赤外線及び高解像（４００ＭＨｚ ） １ＨＮＭＲスペ
クトル（デカップリング実験）を注意深く解釈すると、
ブリオスタチン３に対する明確な構造決定ができた。プ
リオビラン２で示きれる１、７８５ｏｒ＋−１での新し
い赤外勝吸収帯は、アルファ電気陰性置換基をもつ可能
な５−又け６員のラクトンカルボニル基ヲ示した。 ）
（ＮＭＲスペクトルの比較から、ブリオスタチンエ及び
２のＣ−２２及びＣ−ｎプロトンの消失が示された。ま
た、Ｃ−１５−１７、Ｃ−加、Ｃ−列及びＣ−４０−４
３に帰因するプロトンは、ブリオスタチン１のものから
０．０１〜０．０５１）１）ｍだけダウンフィールド移
動された。Ｃ−１７及びｃ−２５プロトン類については
、はぼ同じ程度のアップフィールド移動が見られた。Ｃ
−２４プロトンは、２．０から２゜３５δへ強くダウン
フィールド変位されていた。 特に１要な点として、ブリオスタチン３のスペクトルに
は５．８２δ（Ｃ−２２）と３．７１δ（Ｃ−３４）に
新しい１Ｈ号が現われだ。後者は１．８５δ（Ｃ−２１
）と４．４７δ（Ｃ−３４の−ＯＨ）でプロトンに結合
されていた。これらのＮＭＨの解釈から、基本的なブリ
オビラン環システムがなおもブリオスタチン３に表わさ
れているのが明らかであった。事実、プリオビランＣ環
の著しい変化と上記の移動以外は、ブリオスタチン３の
残りはブリオスタチン１と本質的に同一であることがわ
かった。ブリオスタチン１のエキソサイクリック環Ｃオ
レフィンにおけるジヒドロピラン系への移動（Ｃ−２１
，３４→Ｃ−２２、ｚう）、Ｃ３４（７） ヒトｏ キ
シ／Ｌ＝化、及びＣ−１９へミケタルヒドロキシル基に
よるラクテート側鎖のＣ−３５カルボニルのラクトン化
は、ブリオスタチン３とブリオスタチン１との関係につ
いて最も満足な説明を与えるものであった。ブリオスタ
チン１の決定的なＸ線結晶構造決定に以上の観＠を組み
合わせると、ブリオスタチン３の構造を明確化すること
ができた。 ブリオスタチン３がブリオスタチン１の非常に効力のあ
る抗新生物活性を保持しているため、一つのビランアセ
チリデン基を失うことは′ｊ１
【大とｄ思われない。
抗新生物活性ｄ）
ハッカネズミ腫瘍系
Ｐ３８８白血病ａ）
ブリオスタチン２ ６０ ３０
１６０ａ）腫瘍はｊ腹腔内（ｉ、ｐ、）Ｖ
Ｃ接種された。 ０）腫瘍接種後第−日から始めて９日間に毎日、化合物
を腹腔内に投与した。 Ｃ）平均生存時間から計算された。 ｄ）抗腫瘍試験の説明は、アール・アイ・ゲラン（Ｒ，
工、Ｇｅｒａｎ ）、エヌ・エッチ・グリーンバーブ（
Ｎ、Ｈ，Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ ）、１ Ｊ、 −エム−
７クドナルド（Ｉｖｌ、 Ｍ、 ＭａｃＤｏｎａｌｄ
）、エイ・、：Ｃムーシューマーカー（Ａ、Ｍ、ｓｃｈ
ｕｍａｃｈｅｒ ）及びビー・ジェイ、アホット（Ｂ、
Ｊ、ＡｂｂＯｔｔ ）、Ｃａ Ｉｆ Ｑ ｅ ｒＣｈ
ｅ＋ｎ ｏｔｈｅｒ、 Ｒｅｐ、第３部、３（２）巻１
−１０３頁（１９７２年）による参考文献に出ている。 新生物病、例えば急性骨髄細胞白血病、急性リンパ球白
血病、悪性黒色腫、肺腺がん、神経芽細胞腫、肺小細胞
がん、乳がん、大腸がん、卵巣がん、ぼうこうがん等に
かかっだ動物又は人間の処置用にブリオスタチン類の投
与が有用である。 投与される適量は、新生物病の内容、関係宿主のタイプ
、その年令、健康、体重、もしあＪｌば現在の治療の柚
類、処置回数、及び治療比によって変わるだろう。 例えば投与活性成分の適量水準を次のようにできる。静
脈内０．１〜約２００１η／１（９、腹腔内１〜約５ｏ
ｏｍｐ／ｋｙ、皮下１〜約５００ｍ？／ｍ、筋肉内１〜
約５００ ｍｇ／ ｋｇ、経口５〜約１０００ ｙｈｙ
／ ｋｇ、鼻ｊ控内適注５〜約１．ｏｏｏ＋〃ｙ／時
、及びアエロゾル５〜約ｉｏｏ。 ｍ’ｉ／に９（体重）。 濃度で表わすと、活性成分は皮膚周辺の局所用、鼻腔内
、咽頭、気管支、細気管支、膣内、直腸又は眼に、組成
物の約０．０１ないし約５０係（Ｗ／Ｗ ）、好ましく
は組成物の駒１ないし約２０％（Ｗ／Ｗ ）の濃度で、
また非経口用には約０．０５ないし約５０係（Ｗ／Ｖ
）の濃度好寸しくに約５ないし約２０％（Ｗ／Ｖ）の濃
度で、本発明組成物中に存在しうる。 本発明組成物類は活性成分の適当量を含有する錠剤、カ
プセル剤、丸薬、散剤、顆粒、生薬、無菌非経口溶液又
は懸濁液、無菌の非経口でない溶液又は懸濁液、及び経
口溶液又は懸濁液等のような単位適量形式でヒト及び動
物への投与に提示されるのが女子ましい。 経口投与には、固体又は流体の単位適量形式をつくるこ
とができる。 散剤は、活性成分全適当な微細粒度に粉砕し、同様に粉
砕された増量剤と混合することによって、極めて簡単に
つくられる。増量剤は乳糖又は殿粉のような食用炭水化
物材料でありうる。甘味料又は砂糖、並びに番油が存在
すると有利である。 カプセル剤は、上記のように粉末混合物をつくり、成形
されたゼラチンのさやに充填することによってつくら才
′シる。充填操作の助剤として、滑石、ステアリン酸マ
グネシウム、ステアリン酸カルシウム等のよう力潤滑剤
を充填操作の前に粉末混合物へ加えるのが有利である。 軟いゼラチンカプセル剤は、受は入れられる植物油、軽
質液体ペトロラタム又は他の不活性オイル又はトリグリ
セライドと活性成分とのスラリーの機械カプセル化によ
ってつくられる。 錠剤は、粉末混合物をつくり、粒状化又はスラグ化し、
潤滑剤を加え、錠剤に加圧してつくられる。粉末混合物
は、適当に粉砕された活性成分を殿粉、乳糖、カオリン
、燐酸シカルシウム等のような増量剤又は基剤と混合す
ることによってつくられる。粉末混合物を粒状化するに
は、コーンシロラフ、セラチン溶液、メチルセルロース
浴液、又はアラビアゴム液のような結合剤で湿潤化し、
ふるいにかける。粒状化する代わりに、粉末混合物をス
ラグ化、つまり錠剤製造機にかけて、生ずる不完全に成
形された錠剤を断片（スラグ）に破砕できる。錠剤成形
ダイスへの付着を防ぐだめ、ステアリン酸、ステアリン
Ａｌｌ’ｉ、滑石又は鉱油の添加によってスラグを潤滑
できる。次に潤滑された混合物を錠剤に圧縮する。 錠剤に密封被恍又はシェラツクの被包、メチルセルロー
スや砂糖の被覆、及びカルナバワックスの光沢被覆から
なる保め被覆を行なうのが有利である。 シロップ剤、エリキシル剤及び懸濁液のような経口投与
用の流体単位：ｉＭ 素形式としては、茶書し１杯の組
成物が投与活性成分の所定量を含有するものをつくるこ
とができる。水溶性の形式を砂糖、風味料、防腐剤と一
緒に水性賦形剤中に溶解すると、シロップ剤ができる。 エリキシル剤は、風味料と一緒に１ｆＷｈ当な甘味料を
加えたアルコール水溶液賦形剤を使用することによって
つくられる。懸濁液は、アラビアゴム、トラガヵント、
メチルセルロース等のような懸濁剤の助力にょシ、適当
な賦形剤での不溶性形式のものをつくることができる。 非経口投与には、流体単位適量形式は、活性成分と無菌
賦形剤（水が好適）を利用してつくられる。使用形式及
び濃度により、活性成分を賦形剤に懸濁又は溶解できる
。溶液をつくるには、水溶性活性成分を注射用水に溶解
し、フィルター滅菌してから、適当なバイアル又はアン
プルに充填し、密封する。局所麻酔剤、防腐剤、及び緩
衝剤のような助剤を賦形剤に溶解するのが有利である。 非経口懸濁剤は実質的に同じ方法でつくられるが、但し
活性成分を溶解する代わりに賦形剤に懸濁協せ、捷た滅
菌はＶ過によっては達成できない。活性成分は無菌賦形
剤に懸濁する前に酸化エチレンへ当てることによって滅
菌できる。活性成分の均一分布を容易にするだめに表面
活性剤又は湿潤剤を組成物に含めるのが有利である。 経口及び非経口投与のほか、置部及び膣径路を利用でき
る。活性成分を坐薬によって投与できる。 はぼ体温に融点をもつ賦形剤又は容易に溶ける賦形剤が
利用できる。例えば、ココアバターと種々のポリエチレ
ングリコール類（カーボワツクネ、）が賦形剤として役
立つ。 鼻腔内適注には、流体単位適量形式は活性成分と適当な
薬学賦形剤（水が好適）を利用するか、又は通気用乾燥
粉末によってつくられる。 アエロゾル用には、活性成分を気体又は液体推進剤、例
えばジクロロジフルオロメタン、炭酸ガス、窒素、プロ
パン等と一緒に、又必要ないし所望により、共溶媒と湿
潤剤のような通常の助剤を加えて加圧アエロゾル容器に
包装できる。 水切Ｍ＋Ｈ−を及び特許請求の範囲で使用されている用
語「単位適量形式」は各単位か必要な薬学増量剤、担体
又は賦形剤と組み合わせて望んでいる効果をつくりだす
ように計算された所定量の活性成分を含有しており、ヒ
ト及び動物患者へのまとまった適量として適した物理的
に分割できない単位のことである。本発明の新規単位適
量形式に対する仕様は、（ａ）活性成分の独特の性質と
達成すべき特定的治療効果、及び（Ｔ））本明細書で明
らかにされているようにヒトの治療用にこのような活性
材料をコンパウンドする技術における固有の制限、の二
つに支配され、かつ直接に依存しており、これらが本発
明の特徴である。本発明による適当な単位適量形式の例
は、錠剤、カプセル剤、トローチ、坐薬、粉末パケット
、ウェハー、カシェ、茶さじ、大さじ、点滴、アンプル
、バイアル、以上の任意のものの複数組合せ、及び本明
細書に記載のその他の形式である。 抗ウィルス剤又は抗新生物剤として使用きれる活性成分
は、この技術で入手でき、また確立きれた手順によって
つくることができる薬学材料を使用して、単位適量形式
に容易につくることができる。以下の調製例は本発明の
単位適量形式の、ｉｌ：Ｊ製を例示しているが、これに
限定きれる意図のものではない。 組成物実施例１ 硬いセラチンカプセル１カプセル当
たりブリオスタチン２００ｍｇを含有する経口用ツーピ
ース型硬いセラチンカプセル１．０００個は次の種類と
甫の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン ２００ Ｌ？とうもろ
こし殿粉 ２０グ 滑 石 ２０ ｆス
テアリン酸マグネシウム ２７空気ミクロ
ナイザーによって微粉砕されたブリオスタチンを他の微
粉砕成分に加え、完全に混合してから通常の方法でカプ
セル化する。 上のカプセルは１日１〜４回１又け２カプセルの経口投
与によって新生物病の処置に有用である。 上の中１１１を使用して、上に使用された２００ｙの代
わりに５０４ｉ’、２５０７及び５００ ｉｉ’のブリ
オスタチンを使用することによって、閣、２５０及び５
ｏｏｍｇのブリオスタチンを含有するカプセルが同様に
つくられる。 組成物実施例２ 軟いゼラチンカプセル１個当だりブ
リオスタチン（空気ミクロナイザーで微粉砕したもの）
２００■を含有する経口用ワンピース型の軟いセラチン
カプセルは、初めに化合物全コーンオイル０．５罰に懸
濁させて材料をカプセル封入できるようにし、次いで上
のようにカプセル充填することによってつくられる。 上のカプセルは１日１〜４回１又は２カプセルの経口投
与によって、新生物病を処置するのに有用である。 組成物実施例３ 錠 剤 １錠当だりブリオスタチン２００７７Ｆを含有する錠剤
１．０００個は、次の種類と量の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン ２０ＯＳ’乳
オノ占 ３００７
とうもろこし殿粉 ５０タ ステアリン酸マグネシウム ４ タ軽質液
体ペトロラタム ５７空気ミクロナイザーで
微粉砕烙れたブリオン、クチンを他の成分に加え、完全
に混合してスラグ化する。スラグを１６番ふるいに〃・
けて細かくする。 生ずる粒子を、１錠当たりブリオスタチン２００／’Ｉ
ｆ／を含有する錠剤に圧縮する。 土の錠剤は１日１〜４回１又は２錠の経口投与によって
新生物病の処置に有用である。 上の手順を使用して、上で使われたブリオスタチン２０
０７の代わりに２５０り及び１００りを使用することに
よって、２５０ｍｌ１＋及び１００〜量のブリオスタチ
ンを含有する錠剤が同様につくられる。 組成物実施例４ 経口懸濁 茶サシ１ 杯（５ｗｅ ）の投与量でブリオスタチン５
０ｍ１ｉ＋を含有する経口投与用の水性懸濁液１０００
ｄは、次の種類と喰の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン １０７くえ
ん酸 ２１ 安息香酸 １２ 蔗 糖 ７９０１トラガカントゴ
ム ５グレモンオイル
２グ脱イオン水 全敗で１
１００（ｂ懸濁ｇ、 ８５０ ｖｔｅをつくるのに十分
な欧の水にくえん酸、安息香酸、蔗糖、トラガヵント、
及びレモンオイルを分散させる。空気ミクロナイザーで
微粉砕されたブリオスタチンを均−分亜するまでシロッ
プ中にかぎまぜる。十分な水を加えて全咄を１０１００
Ｏとする。 こうしてつくられる組成物は１日３回大濾し１杯（１５
ｍ／ｌ’）の投与値で新生物病を処置するのに有用であ
る。 組成物実施例５ １祷中に新生物病処置用ブリオスタチン３００ｍＱを含
有する非経口注射用無菌水性）Ｖ濁液は、次の種類と量
の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン ３０７ポリソルベー
ト８０５９ メチルパラベン ２．５７プロビルパラ
ベン ０，１７グ注射用水
全着で１ｏｏｏｙブリオスタチン以外の全成分を
水に溶解し、溶液をろ過によって数回する。空気ミクロ
ナイザーで微粉砕された無菌ブリオスタチンを無菌溶液
に加え、最終懸濁液を無菌バイアルに充填し、バイアル
を密封する。 こうしてつくられる組成物は、１日３回１ ｍｌ！の投
与量で新生物病を処置するのに有用である。 組成物実施例６ 直腸及び膣剤生薬 １１固２．５１の重さでブリオスタチン２００ｍ９を含
有する生薬１０００個は、次の種類と量の成分からつく
られる。 微粉砕ブリオスタチン １５２プロピレン
グリコール １５０２ポリエチレングリコ
ール＃４０ｅＯ全量で２，５００ ｆブリオスタチンを
空気ミクロナイザーで微粉砕し、プロピレングリコール
に加え、混合物を均一分布するまでコロイドミルにかけ
る。ポリエチレングリコールを溶融し、プロピレングリ
コール分散液をかきまぜながら徐々に加える。懸濁液を
４０゛Ｃの冷却していない金型に注ぐ。組成物を放冷し
、固化させ、次いで金型から取り出して、各坐薬を箔に
包装する。 上の坐薬は新生物病の処置用に直腸又は膣内へ挿入され
る。 組成物実施例７ 鼻腔内用懸濁液 １−当たりブリオスタチン２００■を含有する鼻点滴用
の無菌水性懸濁液１０００ｍ／！ ｉｄ 、次の１１ｉ
ｉ類と量の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン １５クポリンルベー
ト８０５２ メチルパラベン ２．５２ブヨピルパラ
ベン ０．１７ ｒ脱イオン水
全量で１ｏｏＯｙ＋７ブリオスタチンを除く全成
分を水に溶解し、溶液をろ過によって′Ｏｉ２菌する。 無菌溶液に、空気ミクロナイザーで微粉砕された無菌ブ
リオスタチンを加え、最終懸濁液を無菌容器へ無菌的に
充填する。 こうしてつくられる組成物は１日１〜・１回投与される
０、２ないし０．５ｍｇの鼻腔（ハ）点滴によって、〃
ｆ生物病の処置に有用である。 活性成分は実施例１２〜１４に示すように、皮膚周辺の
局所用、鼻腔内、咽頭、気管支、細気管支（ｂｒｏｎｃ
ｈｏｌｉａｌｌｙ ）又は経口用に未希釈の純粋な形で
存在しうる。 組成物実施例８ 散 剤 バルク型ブリオスタチン５ｙを空気ミクロナイザーによ
って微粉砕する。微粉砕粉末をシェーカー型の容器に入
れる。 上の組成物は１日１〜４回散剤ｋｍ布することによって
、局所部位の新生物病の処置に有用である。 組成物実施例９ 経口散剤 バルク型ブリオスタチン１００７を窒気ミクｄナイザー
によって微粉砕する。微粉砕粉末を個々に２００７ｎｆ
ｌずつの投与赦に分けて包装する。 土の散剤は１日１〜４回コツプ１杯に１包又け２包を懸
濁させた１１時ミロ投与によって、新生物病の処置に有
用である。 組成物実施例】０ 通 気 バルク型ブリオスタチン１００ Ｓ’を空気ミクロナイ
ザーで微粉砕する。 上の組成物は１日１〜４回３００７ｎｆｌの吸入により
、新生物病の処置に有用である。 組成物実施例１１ 硬いセラチンカプセル剤１カプ
セル当だりブリオスタチン２００ηｒｙを含有する経口
用ツーピース型の硬いセラチンカプセル１００個。 ブリオスタチンを空気ミクロナイザーで微粉砕し、通常
の方法でカプセルへ充填する。 上のカプセルは１日１〜４回１又は２カプセルの経口投
与によって、新生物病の処置に有用である。 上の手順を使用して、上で使われたブリオスタチン２０
０７０代わりに５０ｒ、２５０７及び５（＋Ｏｆを使用
することにより、開、２５０及び５ｏｏｍｇの−１−の
ブリオスタチンを含有するカプセル剤が同様につくられ
る。 式 Ｉ ＣＨ３ＣＨ２Ｃ馬 ブリオスタチン１ 式 ■ グリオスタチン２ 式 ■ ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ ブリオスタチン３ 図 表 ４ 海洋動物成分の抽出と溶媒分配 ２−プロパツール水溶液中の全標本 へ片 （イ （６４，３ｆ’活性） （不活性） 表 ５ ブリオスタチン１及び２のｌ ＨＮＭＲデータ位置
δ（ｐｐｍ ） 多重度
（ＪＩＩＺ）１ ２ １
２２ ２．４５ ２．４５
ｍ ｍ３ ４．１９
４．１３ ｍ
Ｂ４ １．５５，１．９５ １．５５，１．９５
ｍ ｍ、１１５ ４ 、
１ ４ 、 ＋ ３ ｍ
ｍ６ １．４．１．５ ］、３
９．１．６５ ｍ、 ｍ ｍ、
ｍ７ ５．１５ ３．９５
ｍ ｍ１０ ２．１−２．２
２．１−２．２ ｍ ｍｌ
、１ −３．９５ ３．７９
ｍ ｍｌ２ ２．１−２．２
２．１−２．２ ｍ ｍ１
４１．９．−２．０１．！ｌ、２．０ｍｍ１５ ４
．０８ ４．０２ ｍ
ｍ＋６ ５．３００ ５．２８７
ａａ、（ｓ、３．１ｓ、９） 己（８，
３，１５，８）１７ ５．７５８ ５．７
５３ ａ （１５，９） ｄ（
１５，８）２０ ５．１６２ ５．１６２
２２ −１．９０ −１．９０
ｍ ｍ２３ 〜３．６５
〜３．６５ ｍ ｍ２
４１．９５１．９５ｒコｍ ２５ ５．１９ ５．１２
ｍ ｍ２６ ３．７３
３．７８ ｍ２７ １．２２６
１．２０７ ａ （６，３）
ａ （６，＋）２８ネ １．１３２
１．１２３２９＊ ０．９８２
１．００９３０ ５．６５７ ５
．６５４３２傘 ０．９８２
０．９７８３３＊ ０．９］９ ０．
８７７３４ ５．９８３ ５．９８２３７
２．０５１ −−−
−−−４０ ５．７９６ ５
．７７６ ａ （１５，３）
ｄ （１５，３）４１ ７．２６１ ７．
２４２ ｍ ｍ４２
６．１５７ ６．１４２ ｍ
ｍ４３ ６．１５７ ６
．１４２ ｍ ｍ４４
〜２．１５ 〜２．１５
ｍ ｍ４
５ １、．４２ １．４２
ｍ ｍ４６ ０．９０４
０．８９４ ｔ （７，３）
ｔ （７，３）傘これら４群の値は交換可能でちる
。
１６０ａ）腫瘍はｊ腹腔内（ｉ、ｐ、）Ｖ
Ｃ接種された。 ０）腫瘍接種後第−日から始めて９日間に毎日、化合物
を腹腔内に投与した。 Ｃ）平均生存時間から計算された。 ｄ）抗腫瘍試験の説明は、アール・アイ・ゲラン（Ｒ，
工、Ｇｅｒａｎ ）、エヌ・エッチ・グリーンバーブ（
Ｎ、Ｈ，Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ ）、１ Ｊ、 −エム−
７クドナルド（Ｉｖｌ、 Ｍ、 ＭａｃＤｏｎａｌｄ
）、エイ・、：Ｃムーシューマーカー（Ａ、Ｍ、ｓｃｈ
ｕｍａｃｈｅｒ ）及びビー・ジェイ、アホット（Ｂ、
Ｊ、ＡｂｂＯｔｔ ）、Ｃａ Ｉｆ Ｑ ｅ ｒＣｈ
ｅ＋ｎ ｏｔｈｅｒ、 Ｒｅｐ、第３部、３（２）巻１
−１０３頁（１９７２年）による参考文献に出ている。 新生物病、例えば急性骨髄細胞白血病、急性リンパ球白
血病、悪性黒色腫、肺腺がん、神経芽細胞腫、肺小細胞
がん、乳がん、大腸がん、卵巣がん、ぼうこうがん等に
かかっだ動物又は人間の処置用にブリオスタチン類の投
与が有用である。 投与される適量は、新生物病の内容、関係宿主のタイプ
、その年令、健康、体重、もしあＪｌば現在の治療の柚
類、処置回数、及び治療比によって変わるだろう。 例えば投与活性成分の適量水準を次のようにできる。静
脈内０．１〜約２００１η／１（９、腹腔内１〜約５ｏ
ｏｍｐ／ｋｙ、皮下１〜約５００ｍ？／ｍ、筋肉内１〜
約５００ ｍｇ／ ｋｇ、経口５〜約１０００ ｙｈｙ
／ ｋｇ、鼻ｊ控内適注５〜約１．ｏｏｏ＋〃ｙ／時
、及びアエロゾル５〜約ｉｏｏ。 ｍ’ｉ／に９（体重）。 濃度で表わすと、活性成分は皮膚周辺の局所用、鼻腔内
、咽頭、気管支、細気管支、膣内、直腸又は眼に、組成
物の約０．０１ないし約５０係（Ｗ／Ｗ ）、好ましく
は組成物の駒１ないし約２０％（Ｗ／Ｗ ）の濃度で、
また非経口用には約０．０５ないし約５０係（Ｗ／Ｖ
）の濃度好寸しくに約５ないし約２０％（Ｗ／Ｖ）の濃
度で、本発明組成物中に存在しうる。 本発明組成物類は活性成分の適当量を含有する錠剤、カ
プセル剤、丸薬、散剤、顆粒、生薬、無菌非経口溶液又
は懸濁液、無菌の非経口でない溶液又は懸濁液、及び経
口溶液又は懸濁液等のような単位適量形式でヒト及び動
物への投与に提示されるのが女子ましい。 経口投与には、固体又は流体の単位適量形式をつくるこ
とができる。 散剤は、活性成分全適当な微細粒度に粉砕し、同様に粉
砕された増量剤と混合することによって、極めて簡単に
つくられる。増量剤は乳糖又は殿粉のような食用炭水化
物材料でありうる。甘味料又は砂糖、並びに番油が存在
すると有利である。 カプセル剤は、上記のように粉末混合物をつくり、成形
されたゼラチンのさやに充填することによってつくら才
′シる。充填操作の助剤として、滑石、ステアリン酸マ
グネシウム、ステアリン酸カルシウム等のよう力潤滑剤
を充填操作の前に粉末混合物へ加えるのが有利である。 軟いゼラチンカプセル剤は、受は入れられる植物油、軽
質液体ペトロラタム又は他の不活性オイル又はトリグリ
セライドと活性成分とのスラリーの機械カプセル化によ
ってつくられる。 錠剤は、粉末混合物をつくり、粒状化又はスラグ化し、
潤滑剤を加え、錠剤に加圧してつくられる。粉末混合物
は、適当に粉砕された活性成分を殿粉、乳糖、カオリン
、燐酸シカルシウム等のような増量剤又は基剤と混合す
ることによってつくられる。粉末混合物を粒状化するに
は、コーンシロラフ、セラチン溶液、メチルセルロース
浴液、又はアラビアゴム液のような結合剤で湿潤化し、
ふるいにかける。粒状化する代わりに、粉末混合物をス
ラグ化、つまり錠剤製造機にかけて、生ずる不完全に成
形された錠剤を断片（スラグ）に破砕できる。錠剤成形
ダイスへの付着を防ぐだめ、ステアリン酸、ステアリン
Ａｌｌ’ｉ、滑石又は鉱油の添加によってスラグを潤滑
できる。次に潤滑された混合物を錠剤に圧縮する。 錠剤に密封被恍又はシェラツクの被包、メチルセルロー
スや砂糖の被覆、及びカルナバワックスの光沢被覆から
なる保め被覆を行なうのが有利である。 シロップ剤、エリキシル剤及び懸濁液のような経口投与
用の流体単位：ｉＭ 素形式としては、茶書し１杯の組
成物が投与活性成分の所定量を含有するものをつくるこ
とができる。水溶性の形式を砂糖、風味料、防腐剤と一
緒に水性賦形剤中に溶解すると、シロップ剤ができる。 エリキシル剤は、風味料と一緒に１ｆＷｈ当な甘味料を
加えたアルコール水溶液賦形剤を使用することによって
つくられる。懸濁液は、アラビアゴム、トラガヵント、
メチルセルロース等のような懸濁剤の助力にょシ、適当
な賦形剤での不溶性形式のものをつくることができる。 非経口投与には、流体単位適量形式は、活性成分と無菌
賦形剤（水が好適）を利用してつくられる。使用形式及
び濃度により、活性成分を賦形剤に懸濁又は溶解できる
。溶液をつくるには、水溶性活性成分を注射用水に溶解
し、フィルター滅菌してから、適当なバイアル又はアン
プルに充填し、密封する。局所麻酔剤、防腐剤、及び緩
衝剤のような助剤を賦形剤に溶解するのが有利である。 非経口懸濁剤は実質的に同じ方法でつくられるが、但し
活性成分を溶解する代わりに賦形剤に懸濁協せ、捷た滅
菌はＶ過によっては達成できない。活性成分は無菌賦形
剤に懸濁する前に酸化エチレンへ当てることによって滅
菌できる。活性成分の均一分布を容易にするだめに表面
活性剤又は湿潤剤を組成物に含めるのが有利である。 経口及び非経口投与のほか、置部及び膣径路を利用でき
る。活性成分を坐薬によって投与できる。 はぼ体温に融点をもつ賦形剤又は容易に溶ける賦形剤が
利用できる。例えば、ココアバターと種々のポリエチレ
ングリコール類（カーボワツクネ、）が賦形剤として役
立つ。 鼻腔内適注には、流体単位適量形式は活性成分と適当な
薬学賦形剤（水が好適）を利用するか、又は通気用乾燥
粉末によってつくられる。 アエロゾル用には、活性成分を気体又は液体推進剤、例
えばジクロロジフルオロメタン、炭酸ガス、窒素、プロ
パン等と一緒に、又必要ないし所望により、共溶媒と湿
潤剤のような通常の助剤を加えて加圧アエロゾル容器に
包装できる。 水切Ｍ＋Ｈ−を及び特許請求の範囲で使用されている用
語「単位適量形式」は各単位か必要な薬学増量剤、担体
又は賦形剤と組み合わせて望んでいる効果をつくりだす
ように計算された所定量の活性成分を含有しており、ヒ
ト及び動物患者へのまとまった適量として適した物理的
に分割できない単位のことである。本発明の新規単位適
量形式に対する仕様は、（ａ）活性成分の独特の性質と
達成すべき特定的治療効果、及び（Ｔ））本明細書で明
らかにされているようにヒトの治療用にこのような活性
材料をコンパウンドする技術における固有の制限、の二
つに支配され、かつ直接に依存しており、これらが本発
明の特徴である。本発明による適当な単位適量形式の例
は、錠剤、カプセル剤、トローチ、坐薬、粉末パケット
、ウェハー、カシェ、茶さじ、大さじ、点滴、アンプル
、バイアル、以上の任意のものの複数組合せ、及び本明
細書に記載のその他の形式である。 抗ウィルス剤又は抗新生物剤として使用きれる活性成分
は、この技術で入手でき、また確立きれた手順によって
つくることができる薬学材料を使用して、単位適量形式
に容易につくることができる。以下の調製例は本発明の
単位適量形式の、ｉｌ：Ｊ製を例示しているが、これに
限定きれる意図のものではない。 組成物実施例１ 硬いセラチンカプセル１カプセル当
たりブリオスタチン２００ｍｇを含有する経口用ツーピ
ース型硬いセラチンカプセル１．０００個は次の種類と
甫の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン ２００ Ｌ？とうもろ
こし殿粉 ２０グ 滑 石 ２０ ｆス
テアリン酸マグネシウム ２７空気ミクロ
ナイザーによって微粉砕されたブリオスタチンを他の微
粉砕成分に加え、完全に混合してから通常の方法でカプ
セル化する。 上のカプセルは１日１〜４回１又け２カプセルの経口投
与によって新生物病の処置に有用である。 上の中１１１を使用して、上に使用された２００ｙの代
わりに５０４ｉ’、２５０７及び５００ ｉｉ’のブリ
オスタチンを使用することによって、閣、２５０及び５
ｏｏｍｇのブリオスタチンを含有するカプセルが同様に
つくられる。 組成物実施例２ 軟いゼラチンカプセル１個当だりブ
リオスタチン（空気ミクロナイザーで微粉砕したもの）
２００■を含有する経口用ワンピース型の軟いセラチン
カプセルは、初めに化合物全コーンオイル０．５罰に懸
濁させて材料をカプセル封入できるようにし、次いで上
のようにカプセル充填することによってつくられる。 上のカプセルは１日１〜４回１又は２カプセルの経口投
与によって、新生物病を処置するのに有用である。 組成物実施例３ 錠 剤 １錠当だりブリオスタチン２００７７Ｆを含有する錠剤
１．０００個は、次の種類と量の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン ２０ＯＳ’乳
オノ占 ３００７
とうもろこし殿粉 ５０タ ステアリン酸マグネシウム ４ タ軽質液
体ペトロラタム ５７空気ミクロナイザーで
微粉砕烙れたブリオン、クチンを他の成分に加え、完全
に混合してスラグ化する。スラグを１６番ふるいに〃・
けて細かくする。 生ずる粒子を、１錠当たりブリオスタチン２００／’Ｉ
ｆ／を含有する錠剤に圧縮する。 土の錠剤は１日１〜４回１又は２錠の経口投与によって
新生物病の処置に有用である。 上の手順を使用して、上で使われたブリオスタチン２０
０７の代わりに２５０り及び１００りを使用することに
よって、２５０ｍｌ１＋及び１００〜量のブリオスタチ
ンを含有する錠剤が同様につくられる。 組成物実施例４ 経口懸濁 茶サシ１ 杯（５ｗｅ ）の投与量でブリオスタチン５
０ｍ１ｉ＋を含有する経口投与用の水性懸濁液１０００
ｄは、次の種類と喰の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン １０７くえ
ん酸 ２１ 安息香酸 １２ 蔗 糖 ７９０１トラガカントゴ
ム ５グレモンオイル
２グ脱イオン水 全敗で１
１００（ｂ懸濁ｇ、 ８５０ ｖｔｅをつくるのに十分
な欧の水にくえん酸、安息香酸、蔗糖、トラガヵント、
及びレモンオイルを分散させる。空気ミクロナイザーで
微粉砕されたブリオスタチンを均−分亜するまでシロッ
プ中にかぎまぜる。十分な水を加えて全咄を１０１００
Ｏとする。 こうしてつくられる組成物は１日３回大濾し１杯（１５
ｍ／ｌ’）の投与値で新生物病を処置するのに有用であ
る。 組成物実施例５ １祷中に新生物病処置用ブリオスタチン３００ｍＱを含
有する非経口注射用無菌水性）Ｖ濁液は、次の種類と量
の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン ３０７ポリソルベー
ト８０５９ メチルパラベン ２．５７プロビルパラ
ベン ０，１７グ注射用水
全着で１ｏｏｏｙブリオスタチン以外の全成分を
水に溶解し、溶液をろ過によって数回する。空気ミクロ
ナイザーで微粉砕された無菌ブリオスタチンを無菌溶液
に加え、最終懸濁液を無菌バイアルに充填し、バイアル
を密封する。 こうしてつくられる組成物は、１日３回１ ｍｌ！の投
与量で新生物病を処置するのに有用である。 組成物実施例６ 直腸及び膣剤生薬 １１固２．５１の重さでブリオスタチン２００ｍ９を含
有する生薬１０００個は、次の種類と量の成分からつく
られる。 微粉砕ブリオスタチン １５２プロピレン
グリコール １５０２ポリエチレングリコ
ール＃４０ｅＯ全量で２，５００ ｆブリオスタチンを
空気ミクロナイザーで微粉砕し、プロピレングリコール
に加え、混合物を均一分布するまでコロイドミルにかけ
る。ポリエチレングリコールを溶融し、プロピレングリ
コール分散液をかきまぜながら徐々に加える。懸濁液を
４０゛Ｃの冷却していない金型に注ぐ。組成物を放冷し
、固化させ、次いで金型から取り出して、各坐薬を箔に
包装する。 上の坐薬は新生物病の処置用に直腸又は膣内へ挿入され
る。 組成物実施例７ 鼻腔内用懸濁液 １−当たりブリオスタチン２００■を含有する鼻点滴用
の無菌水性懸濁液１０００ｍ／！ ｉｄ 、次の１１ｉ
ｉ類と量の成分からつくられる。 微粉砕ブリオスタチン １５クポリンルベー
ト８０５２ メチルパラベン ２．５２ブヨピルパラ
ベン ０．１７ ｒ脱イオン水
全量で１ｏｏＯｙ＋７ブリオスタチンを除く全成
分を水に溶解し、溶液をろ過によって′Ｏｉ２菌する。 無菌溶液に、空気ミクロナイザーで微粉砕された無菌ブ
リオスタチンを加え、最終懸濁液を無菌容器へ無菌的に
充填する。 こうしてつくられる組成物は１日１〜・１回投与される
０、２ないし０．５ｍｇの鼻腔（ハ）点滴によって、〃
ｆ生物病の処置に有用である。 活性成分は実施例１２〜１４に示すように、皮膚周辺の
局所用、鼻腔内、咽頭、気管支、細気管支（ｂｒｏｎｃ
ｈｏｌｉａｌｌｙ ）又は経口用に未希釈の純粋な形で
存在しうる。 組成物実施例８ 散 剤 バルク型ブリオスタチン５ｙを空気ミクロナイザーによ
って微粉砕する。微粉砕粉末をシェーカー型の容器に入
れる。 上の組成物は１日１〜４回散剤ｋｍ布することによって
、局所部位の新生物病の処置に有用である。 組成物実施例９ 経口散剤 バルク型ブリオスタチン１００７を窒気ミクｄナイザー
によって微粉砕する。微粉砕粉末を個々に２００７ｎｆ
ｌずつの投与赦に分けて包装する。 土の散剤は１日１〜４回コツプ１杯に１包又け２包を懸
濁させた１１時ミロ投与によって、新生物病の処置に有
用である。 組成物実施例】０ 通 気 バルク型ブリオスタチン１００ Ｓ’を空気ミクロナイ
ザーで微粉砕する。 上の組成物は１日１〜４回３００７ｎｆｌの吸入により
、新生物病の処置に有用である。 組成物実施例１１ 硬いセラチンカプセル剤１カプ
セル当だりブリオスタチン２００ηｒｙを含有する経口
用ツーピース型の硬いセラチンカプセル１００個。 ブリオスタチンを空気ミクロナイザーで微粉砕し、通常
の方法でカプセルへ充填する。 上のカプセルは１日１〜４回１又は２カプセルの経口投
与によって、新生物病の処置に有用である。 上の手順を使用して、上で使われたブリオスタチン２０
０７０代わりに５０ｒ、２５０７及び５（＋Ｏｆを使用
することにより、開、２５０及び５ｏｏｍｇの−１−の
ブリオスタチンを含有するカプセル剤が同様につくられ
る。 式 Ｉ ＣＨ３ＣＨ２Ｃ馬 ブリオスタチン１ 式 ■ グリオスタチン２ 式 ■ ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ ブリオスタチン３ 図 表 ４ 海洋動物成分の抽出と溶媒分配 ２−プロパツール水溶液中の全標本 へ片 （イ （６４，３ｆ’活性） （不活性） 表 ５ ブリオスタチン１及び２のｌ ＨＮＭＲデータ位置
δ（ｐｐｍ ） 多重度
（ＪＩＩＺ）１ ２ １
２２ ２．４５ ２．４５
ｍ ｍ３ ４．１９
４．１３ ｍ
Ｂ４ １．５５，１．９５ １．５５，１．９５
ｍ ｍ、１１５ ４ 、
１ ４ 、 ＋ ３ ｍ
ｍ６ １．４．１．５ ］、３
９．１．６５ ｍ、 ｍ ｍ、
ｍ７ ５．１５ ３．９５
ｍ ｍ１０ ２．１−２．２
２．１−２．２ ｍ ｍｌ
、１ −３．９５ ３．７９
ｍ ｍｌ２ ２．１−２．２
２．１−２．２ ｍ ｍ１
４１．９．−２．０１．！ｌ、２．０ｍｍ１５ ４
．０８ ４．０２ ｍ
ｍ＋６ ５．３００ ５．２８７
ａａ、（ｓ、３．１ｓ、９） 己（８，
３，１５，８）１７ ５．７５８ ５．７
５３ ａ （１５，９） ｄ（
１５，８）２０ ５．１６２ ５．１６２
２２ −１．９０ −１．９０
ｍ ｍ２３ 〜３．６５
〜３．６５ ｍ ｍ２
４１．９５１．９５ｒコｍ ２５ ５．１９ ５．１２
ｍ ｍ２６ ３．７３
３．７８ ｍ２７ １．２２６
１．２０７ ａ （６，３）
ａ （６，＋）２８ネ １．１３２
１．１２３２９＊ ０．９８２
１．００９３０ ５．６５７ ５
．６５４３２傘 ０．９８２
０．９７８３３＊ ０．９］９ ０．
８７７３４ ５．９８３ ５．９８２３７
２．０５１ −−−
−−−４０ ５．７９６ ５
．７７６ ａ （１５，３）
ｄ （１５，３）４１ ７．２６１ ７．
２４２ ｍ ｍ４２
６．１５７ ６．１４２ ｍ
ｍ４３ ６．１５７ ６
．１４２ ｍ ｍ４４
〜２．１５ 〜２．１５
ｍ ｍ４
５ １、．４２ １．４２
ｍ ｍ４６ ０．９０４
０．８９４ ｔ （７，３）
ｔ （７，３）傘これら４群の値は交換可能でちる
。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、次の特性をもつブリオスタチン１と指定される化合
物。 融点 ２３０〜２３５°Ｃ 比旋光度 〔α’Ｊ”５＋ ３４．１°（６，０，０４
４，ＣＨ３０Ｈ）紫外線吸収スペクトル （ｃａｓｏ” ）λ最大２３３（ε２５，７００）及び
２６３ｎｍ（ε２８，７００） 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ） ３４７０、 ３４００． ２９７０． ２９５０．．１
７３５． １７１６． ’１７ｆ１０． １６４０．
１６００． １４３３． １３８５． １２４５゜１
１６０、１１００．１０８０．及び１ＱＱＱｃｒｎ。 この化合物を次の構造式によって示すことができる。 ：：Ｈ３ＣＨ２ＣＨ２ ２、次の特性をもつブリオスタチン２と指定される化合
物。 融点 ２０１〜２０３゜ 比旋光度 〔α〕贋５＋ ５（ｒ （（！＝０．０５０
． ＣＨ３０Ｈ’）；紫外線吸収スペクトル （ＣＨ
３０Ｈ）λ最大２３０（ε３６．２５０ ）及び２６１
（６３５，６００） ｎｍ赤外線吸収スペクトル（にＢ
ｙ）３４６５．２９７５−２９５０゜１７］、５． １
７００． １６４０−１６５０． １４３５． １３６
０゜１２５０． １２３０． １１６５． １１００．
１０８０． １０５０及び１０００ ｃｒｎ−１； この化合物を次の構造式によって示すことができる。 ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ９ ３、次の特性をもつブリオスタチン３と指定される化合
物。 外観−塩化メチレン／メタノールから生ずる白色無定形
固体。 薄層クロマトグラフィ溶媒系−ＣＨ２ＣＡ２： ＭｅＯ
Ｈ（’−）３ニア ）、Ｆｌｆ＝０．５６ 紫外線スペクトル−λ最大（ＭｅｏＨ） ＝ ２２９
（ε３］、７（１０）及び２６４（ε３０，６００ ） 比旋光度 〔α〕２５＋６１°（ｃｒメタノール中０
．２６）ＦＡＢ質量スペクトル ｍ／ｅ ９ ］、 １
（Ｍ ＋ Ｎａ ）、Ｍ＝Ｃ４６Ｈ６４０１ツ 赤外線スペクトル（ＫＢｒ ） ３４５０． ２９３
０−２９７（１゜１．７８５． １７４．（）、 １
７１８． １６４０−１．６５０． １３６５゜１３０
５、 １２５０． １１６５． Ｊ１５（１，１１３
５，１１００゜１０４５−１０７５． １０００□−１
；１３ＣＭ）ＡＲ−１７２，４８，１７１，９６，１７
１，１８，１６７，１２゜］、６６．８９． １６５．
９８． １５７．］、１． １４７．７２，１４６．６
５゜１３６．３８． １３２゜７７、 １２８．３８．
１１７．３７． ］１４．３８゜１１４．１２．
１０１．．９０． １０１．７１，８１．２４． ７３
．（１５゜７３、＋１５． ７１．４６． ６９．７７
．６９．１２． ６８．６０゜６８．３０． ６５．５
８． ５１．１８． ４５．２３． ４４．１９゜４］
、、８２．４１．８２，４１．１４，３９．４８，３６
．４３゜３５．１３，３５．１３，３３．２４，３３．
２４，３３．２４゜２４．５（１，２１，８７，２１，
１５，２１，１５，１９，３０゜１６．９９． １３．
６８ ｉ プロトンＮＭＦｔ （４００ＭＨ２，ＣＤＣｔ３）、δ
７．３７−（ｍ。 ］ ＩＨ，６，２０（ｍ、２Ｈ）、５．８７ （ｄ、Ｉ
Ｈ）。 ５．８３（Ｓ、 ＩＨ）、 ５．７４（８，ＩＨ）、
５．７０ （ｄ。 １１、ｓ、６７（ｓ、１１．ｓ、ｎ（ｍ、１．ｌ。 ５．２８（ｓ、］、ＩＨ，５，１６（ｍ、ＩＨ）、５．
０２（ｍ。 ＩＨ）、 ４．４７ （ｍ、 Ｉ Ｈ）、 ４．３４
（ｍ、 ］ ＩＨ。 ４．１．７ （ｍ、 ２Ｈ）、 ４．０３−３．９８
（ｍ、 ２Ｈ）。 ３．７８ （ｍ、 ＬＨ）、 ３．７１ （ｍ、 ＩＨ
）、 ２．５５（ｍ。 １１．２．４３ （ｍ、ＩＨ）、２．１７ （ｍ、２−
３Ｈ）＋２．０６ （Ｅ＋、 ３Ｈ）、 ２．０ （ｍ
、 ２Ｈ）、 １．８６ （ｍ。 Ｉ Ｈ）、 １．．７２ （ｍ、 ２Ｈ）、 １．６３
（ｍ、 ２Ｈ）。 １．５５ （ｍ、 １−２Ｈ）、 １．４７ （ｍ、
２Ｈ）、 １．２１（４，Ｊ−６Ｈｚ ３Ｈ）、 １．
１２ （ｓ、 ３ Ｈ）、 １．００（ｓ１６Ｈ）１０
．９２（ａｌｔ、Ｊ＝７Ｈ７６Ｈ）ｉこの化合物を次の
構造式によって示すことができる。 ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ ＋ 新生物病友宿ず型刃物ヌ１よス１ニイ丈円す穐グツ
オ７タヂン１ｍ、新生Ｉ拘病箸・１ ぢ Ｉｌｖ住Ｉ拶■葛２請酋す１カー物又ｌ（人１こイ
吏１弔Ｔ３）゛９イスタチンＬ ＊＊ 庄ノｒａＰ＊・
） ６、 Ｈ生」勿病ン怜ブす力Ｐアスｌよ又１ｚイ火／
ｆｌＦる ノ゛９オヌタチシ３杭新’ｆ ノラｉシ（１
）シ；１）ン；）＊・１
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US44248782A | 1982-11-17 | 1982-11-17 | |
| US442487 | 1982-11-17 | ||
| US06/513,148 US4560774A (en) | 1982-11-17 | 1983-07-12 | Macrocyclic lactones |
| US513148 | 1990-04-23 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59108786A true JPS59108786A (ja) | 1984-06-23 |
| JPH0556357B2 JPH0556357B2 (ja) | 1993-08-19 |
Family
ID=27033183
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58215148A Granted JPS59108786A (ja) | 1982-11-17 | 1983-11-17 | ブリオスタチン類 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4560774A (ja) |
| EP (1) | EP0109811B1 (ja) |
| JP (1) | JPS59108786A (ja) |
| DE (1) | DE3363960D1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63183585A (ja) * | 1986-07-28 | 1988-07-28 | アリゾナ ボ−ド オブ リ−ゼンツ | ブリオスタチン類 |
| JPH01308228A (ja) * | 1988-01-13 | 1989-12-12 | Univ Arizona Found | 免疫調整剤 |
Families Citing this family (46)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4611066A (en) * | 1984-08-10 | 1986-09-09 | Arizona State University | Bryostatins 4 to 8 |
| CA1291036C (en) * | 1986-04-23 | 1991-10-22 | Edwin I. Stoltz | Nasal administration of drugs |
| US5891906A (en) * | 1986-06-11 | 1999-04-06 | Procyon Pharmaceuticals, Inc. | Polyacetate-derived phorboids having anti-inflammatory and other uses |
| US6043270A (en) * | 1986-06-11 | 2000-03-28 | Procyon Pharmaceuticals, Inc. | Protein kinase C modulators V |
| IL82811A0 (en) * | 1986-06-11 | 1987-12-20 | Alder Res Center Corp | Anti-inflammatory compositions containing methanol derivatives and novel compounds contained therein |
| US5891870A (en) * | 1986-06-11 | 1999-04-06 | Procyon Pharmaceuticals, Inc. | Protein kinase C modulators Q |
| US5955501A (en) * | 1986-06-11 | 1999-09-21 | Procyon Pharmaceuticals, Inc. | Protein kinase C modulators O |
| US5716968A (en) * | 1986-06-11 | 1998-02-10 | Procyon Pharmaceuticals, Inc. | Protein kinase C modulators. H. |
| US5358711A (en) * | 1987-11-23 | 1994-10-25 | Johns Hopkins University | Stimulation of stem cell growth by the bryostatins |
| IT1229569B (it) * | 1989-04-17 | 1991-09-04 | Giuliani Spa | Derivati di acidi biliari, loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono. |
| US5072004A (en) * | 1990-12-31 | 1991-12-10 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Synthetic conversion of bryostatin 2 into bryostatin 1 |
| US5196447A (en) * | 1991-08-08 | 1993-03-23 | Arizona Board Of Regents, A Body Corporate Of The State Of Arizona, Acting On Behalf Of Arizona State University | Neristatin 1 |
| US5393897A (en) * | 1993-07-02 | 1995-02-28 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Isolation and structure of spongistatins 5,7,8 and 9 |
| US5478861A (en) * | 1994-02-18 | 1995-12-26 | Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. | Cytotoxic macrolides and methods of use |
| US5684036A (en) * | 1994-02-18 | 1997-11-04 | Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. | Cytotoxic macrolides and methods of use |
| AU2337997A (en) * | 1996-03-20 | 1997-10-10 | Arizona Board Of Regents, The | Method of treating cancer using c-26 modified bryostatin |
| AU741439B2 (en) | 1996-12-30 | 2001-11-29 | Battelle Memorial Institute | Formulation and method for treating neoplasms by inhalation |
| AUPO864097A0 (en) * | 1997-08-19 | 1997-09-11 | Peplin Pty Ltd | Anti-cancer compounds |
| US6221153B1 (en) * | 1998-06-09 | 2001-04-24 | Trevor Percival Castor | Method for producing large crystals of complex molecules |
| EP1233956A4 (en) * | 1999-11-30 | 2006-07-05 | Univ Leland Stanford Junior | BRYOSTATIN ANALOGUE, SYNTHETIC METHODS AND USES |
| US7256286B2 (en) * | 1999-11-30 | 2007-08-14 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Bryostatin analogues, synthetic methods and uses |
| AUPQ801700A0 (en) * | 2000-06-07 | 2000-06-29 | Peplin Research Pty Ltd | Enzyme and viral activation |
| AUPQ923100A0 (en) | 2000-08-07 | 2000-08-31 | Peplin Research Pty Ltd | Treatment of prostate cancer |
| DE60229371D1 (de) * | 2001-05-02 | 2008-11-27 | Brni Neurosciences Inst | Kohlensäureanhydrase-aktivatoren zur verbesserung der lern- und gedächtnisleistung |
| US6825229B2 (en) | 2002-03-07 | 2004-11-30 | Blanchette Rockefeller Neurosciences Institute | Methods for Alzheimer's Disease treatment and cognitive enhancement |
| US20080004332A1 (en) * | 2002-03-07 | 2008-01-03 | Alkon Daniel L | Methods for alzheimer's disease treatment and cognitive enhancement |
| US20050065205A1 (en) * | 2002-03-07 | 2005-03-24 | Daniel Alkon | Methods for Alzheimer's disease treatment and cognitive enhance |
| TW201207390A (en) | 2004-05-18 | 2012-02-16 | Brni Neurosciences Inst | Method for screening agent for antidepressant activity |
| NZ583157A (en) * | 2004-12-13 | 2011-12-22 | Leo Lab Ltd | Treatment of solid cancers with angeloyl substituted ingenanes |
| KR101347100B1 (ko) * | 2005-07-29 | 2014-01-03 | 블랜체트 록펠러 뉴로사이언시즈 인스티튜트 | 단독의 또는 ｐｋｃ 억제제와 배합된 ｐｋｃ 활성화제의 장기 기억 향상을 위한 용도 |
| EP1965818A4 (en) * | 2005-11-25 | 2010-02-17 | Peplin Research Pty Ltd | WOUND HEALING PROCESS |
| CA2659242C (en) | 2006-07-28 | 2015-08-11 | Blanchette Rockefeller Neurosciences Institute | Methods of stimulating cellular growth, synaptic remodeling and consolidation of long-term memory |
| JP5872138B2 (ja) | 2007-02-09 | 2016-03-01 | ブランシェット・ロックフェラー・ニューロサイエンスィズ・インスティテュート | 虚血／卒中誘導性の記憶障害および脳障害におけるブリオスタチン、ブリオログ、および他の関連物質の治療効果 |
| EP3332797A3 (en) | 2007-02-09 | 2018-08-01 | Blanchette Rockefeller Neurosciences Institute | Therapeutic effects of bryostatins, bryologs and other related substances on head trauma-induced memory impairment and brain injury |
| US9994585B2 (en) | 2007-12-31 | 2018-06-12 | Aphios Corporation | Transplantation therapies |
| JP6446624B2 (ja) | 2010-07-08 | 2019-01-09 | アルコン、ダニエル・エル． | 脳卒中の治療法におけるｐｋｃ活性化因子および抗凝血剤 |
| EP2605773A1 (en) | 2010-08-19 | 2013-06-26 | Blanchette Rockefeller Neurosciences, Institute | Treatment of cognitive disorders associated with abnormal dendritic spines using pkc activators |
| CA2855932A1 (en) | 2011-11-13 | 2013-05-16 | Blanchette Rockefeller Neurosciences Institute | Pkc activators and combinations thereof |
| US9034347B2 (en) | 2011-12-19 | 2015-05-19 | Arphios Corporation | Drug delivery system and method for the treatment of neuro-degenerative disease |
| US10828276B2 (en) | 2012-11-28 | 2020-11-10 | Aphios Corporation | Combination therapeutics and methods for the treatment of neurodegenerative and other diseases |
| WO2016130969A1 (en) | 2015-02-13 | 2016-08-18 | George Robert Pettit | Silstatin compounds |
| JP2018521113A (ja) | 2015-05-11 | 2018-08-02 | アルコン、ダニエル・エル． | ＡｐｏＥ４対立遺伝子の存在を決定した後のＰＫＣ活性化因子を使用した神経変性状態の治療 |
| CN109982695A (zh) | 2016-08-18 | 2019-07-05 | 国立大学法人奈良先端科学技术大学院大学 | 免疫调节剂 |
| WO2018187647A1 (en) | 2017-04-06 | 2018-10-11 | Neurotrope Bioscience, Inc. | Methods and compositions for treatment of neurological diseases, disorders, or conditions |
| US11629167B2 (en) | 2017-11-09 | 2023-04-18 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Betulastatin compounds |
| CA3100792A1 (en) | 2018-05-18 | 2019-11-21 | Neurotrope Bioscience, Inc. | Methods and compositions for treatment of alzheimer's disease |
-
1983
- 1983-07-12 US US06/513,148 patent/US4560774A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-11-11 EP EP83306896A patent/EP0109811B1/en not_active Expired
- 1983-11-11 DE DE8383306896T patent/DE3363960D1/de not_active Expired
- 1983-11-17 JP JP58215148A patent/JPS59108786A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63183585A (ja) * | 1986-07-28 | 1988-07-28 | アリゾナ ボ−ド オブ リ−ゼンツ | ブリオスタチン類 |
| JP2626889B2 (ja) * | 1986-07-28 | 1997-07-02 | アリゾナ ボ−ド オブ リ−ゼンツ | ブリオスタチン類 |
| JPH01308228A (ja) * | 1988-01-13 | 1989-12-12 | Univ Arizona Found | 免疫調整剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0109811A3 (en) | 1984-07-11 |
| DE3363960D1 (en) | 1986-07-10 |
| US4560774A (en) | 1985-12-24 |
| JPH0556357B2 (ja) | 1993-08-19 |
| EP0109811B1 (en) | 1986-06-04 |
| EP0109811A2 (en) | 1984-05-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS59108786A (ja) | ブリオスタチン類 | |
| JP2626889B2 (ja) | ブリオスタチン類 | |
| JPH0665675B2 (ja) | 新規なブリオスタチン４〜８ | |
| JPH02167278A (ja) | 細胞生長抑制物質 | |
| JP3430322B2 (ja) | スポンギスタチン５、７、８及び９ | |
| EP0175709B1 (en) | Substance, composition of matter and method of using same | |
| US8796279B2 (en) | 4′-demethylepipodophyllotoxin derivative, preparation method and use thereof | |
| JP3639973B2 (ja) | スポンギスタチン６ | |
| US20240067672A1 (en) | Flavone derivative for treating tumors and use thereof | |
| JPH0457678B2 (ja) | ||
| US7439265B2 (en) | Irciniastatins a and b | |
| CN110845559B (zh) | 新型喜树碱衍生物及其制备方法和应用 | |
| KR20150034068A (ko) | 백선피 추출물과 이로부터 분리된 신규 글래브레탈-타입 트리테르페노이드 및 이의 용도 | |
| EP1389619A1 (en) | Pkb-3564 substance with neovascularization inhibitory activity | |
| WO1996032388A1 (en) | Antheliatin, zahavin a and zahavin b: new cytotoxic xenicane diterpenes | |
| CN116283535A (zh) | 岷江瑞香中的倍半萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| JPS6293298A (ja) | アンスラサイクリン化合物およびその用途 | |
| JPH069418A (ja) | パナキンケコール化合物、及び制癌剤 | |
| WO1997001334A1 (en) | Cytotoxic triterpenes from a marine sponge | |
| JPH0466582A (ja) | マクロライド物質 | |
| JPH06287191A (ja) | マイカラマイド様物質 | |
| DK166085B (da) | Antineoplastiske phenanthridoner, farmaceutiske praeparater indeholdende disse samt deres anvendelse til fremstilling af et farmaceutisk praeparat til behandling af en vaert, som er angrebet af en neoplastisk sygdom |