JPH02270895A - Ｔ―リンパ球の成熟及びマクロファージの活性を阻害する新規ペプチド、それらを含む医薬組成物及びそれらの調製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、下記式（１）〜（２０）　　：％式％（１） で表わされる新規ペプチド、それらの酸付加塩及びこれ
らのペプチドを含む医薬組成物に関する。

本発明の他の観点によれば、式（１）〜（２０）の新規
ペプチド及びそれらを含む医薬組成物の調製方法が提供
される。

上記式（１）〜（２０）のペプチドは、Ｔ−リンパ球の
成熟及びマクロファージの活性を阻害することができる
。

本発明はさらに、■又は複数の式（１）〜（２０）の化
合物自体又は医薬組成物の形で有効量投与することによ
って、ヒト又は動物の免疫システムの機能に影響を及ぼ
す、（生存）動物（ヒトも含む）の治療方法にも関する
。

健康な生物においては、免疫システムの均性のとれた機
能が、微生物を殺し、外来性物質及び腫瘍細胞を破壊し
、そしてその生物の健康な細胞は損傷を与えないで生物
からそれらを除去することができる強い保護機構を維持
する。

免疫システムの機能が低下（半最適）する場合、感染性
外来物又は腫瘍細胞が増殖し、そして最終的に宿主生物
の機能の完全な破壊を導びき；ところが、免疫応答が過
剰に上昇される場合、健康な組織はまた損傷を受ける（
自己免疫及びアレルギー疾患）。たとえば、器官移植の
場合、移植された器官又は組織は、生物の天然の防御反
応（応答）により拒絶される。

胸腺起源のリンパ球、いわゆるＴ−細胞は、免疫応答を
開始し、維持し、そして停止することにおいて重要な役
割を演じる。情報−伝達により、生物における免疫シス
テムの機能は、多くのペプチド及びタンパク質により影
響されることが知られている。免疫細胞により生成され
る胸腺ホルモン及び情報−伝達因子（サイトキン）は、
腫瘍及び免疫疾患の治療において広く研究されて来た（
Ｄｒｕｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｆｕｔｕｒｅ旦、　７８４
（１９８６）　　；　ＤｒｕｇｓＥｘｐ、Ｃｌ１ｎ、Ｒ
ｅｓ、１３．３２７（１９８７））　、そのような因子
は、たとえば既知の胸腺ホルモンを含むウシ胸腺から一
部精製された抽出物であるサイモシン画分５である（Ｃ
ａｎｃｅｒ　Ｉｍｍｕｎｏｌ、Ｉｍｍｕｎｔｈｅｒ、１
１Ｌ　１８５（１９８４）　）。好都合の結果は、癌疾
患の治療のために遺伝子工学技法により調製されたシト
キンを用いることによって得られた（ＮＪｎｇｌ、Ｊ、
Ｍｅｄ、担。

１４８５（１９８５）　）。

医薬組成物に対して、ますます厳しい質の要求が生じる
。器官抽出物及び生合成高分子が十分に均質（純粋）で
ない場合、汚染（不純物）が、所望しない副作用を引き
起こす。この理由のために、正確に定義された構造及び
高い純度を有する組成物を治療に使用することに努力が
払われている。

高分子に関する前記免疫刺激作用は、より小さなペプチ
ドを使用することによりまた達成され得た（アメリカ特
許第４，１９０，６４６号、第４，２１５，１１２号、
第４，２３２，００８号、第４，２６Ｌ８Ｂ６号、第４
，３９５，４０４号及び第４，４４２，０３１号明細書
；ドイツ特許第２，９３８，４２０号、第３，００１，
７７５号及び第３，１００，９７４号明細書；ハンガリ
ー特許第１８５，２６３号明細書；及びバンバリー特許
出願第４８２７／８６号）。

上記引例に記載される短いペプチドは、Ｔ−及びβ−細
胞の増殖を開始せしめ、そして−船釣な免疫刺激効果を
有する。生来の免疫調節剤の広範囲の作用を再生するた
めには、既知の免疫刺激剤とは異なる態様で一般的な免
疫応答の種々の期間、それらの効果に影響を及ぼす物質
が必要とされる。

本発明のペプチドは、免疫システムの機能に対して一般
的な抑制効果を有し、特にそれらはＴ−細胞の成熟及び
マクロファージの活性を阻害する。

この作用は、免疫システムの高められた機能に関連する
症候を治療するためにこれらのペプチドの使用を可能に
する。治療に現在使用される免疫抑制剤、たとえばシク
ロホスファミド、すなわち２−〔ビス（２−クロロエチ
ル）アミノコ−テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキ
サザホスホリン−２−オキシド；アザチオプリン、すな
わち６−（１−メチル−４−ニトロ−５−イミダゾリル
チオ）プリン；コルチコステリオド又はシクロスポリン
は、１０以下の治療指数を有し、すなわちその治療投与
量は、毒性投与量と実質的に異ならず、従って、それら
は厳しい医学的制御下でのみ使用される。

免疫抑制ペプチドの特別な利点は、それらが生物中で、
ひじょうに早く分解し、組織及び細胞中に蓄積しないが
、しかしながらそれらの短い寿命にもかかわらず、それ
らは有意な作用を誘導する複合過程を開始することがで
きることである。それらは、低い毒性によっても特徴づ
けられる（　Ｌ　Ｄ　ｓｏ＞１０００ｍｇ／ｋｇ、静脈
内投与（ｉ、Ｖ、））。

式（１）〜（２０）の新規のペプチドは、Ｔ−細胞依存
性抗体産生細胞の成熟を阻害し、新生マウスにおける抗
体産生細胞の活性を低め、食作用を抑制し、そして後期
の過敏性応答を減じることが見出された。これらのペプ
チドの阻害効果は、それらが免疫過程におけるマクロフ
ァージの抗原−表示及び／又はＴ−細胞の抗原認識を抑
制する現象にたぶん基づかれる。実際、免疫応答の複合
機構は、これらの過程及び相互作用により開始され；従
って、これらのペプチドの免疫抑制作用は、免疫応答の
初めの期間において効果的であると思われる。

本発明の式（１）〜（２０）の新規ペプチドは、ペプチ
ド化学において既知であるように、活性エステル、混合
された無水物及び／又はアジド法のカップリング段階を
連続的に使用することにより溶液中で段階的に鎖を長く
し、続いてα−及び／又はε−アミノ基を保護解除し、
それによって、水素添加又はアシドリシスにより除去で
きる保護基によりエステル化されたカルボキシ基及び場
合によっては、保護された側鎖ヒドロキシル及び／又は
アミノ基及び／又は水素添加により除去できる保護基に
よりアミノ化又はエステル化されたＣ−末端カルボキシ
基を含むアミノ酸誘導体により開始し、又は１−２−ジ
アミノエタン、そのモノーＬ−バリン誘導体又はＬ−シ
スチンジアミドにより開始し、水素添加又はアシドリシ
スにより除去できる保護基によりそれらのＣ−末端力ル
ボキシ基上でアミノ化又はエステル化され、水素添加又
はアシドリシスにより除去できる保護基によりそれら以
外のカルボキシ上でエステル化され、ペプチド連鎖に含
まれないそれらのアミノ基上に保護基Ｂｏｃ又はＺを含
み、そして／又はそれらのヒドロキシル基上で保護され
ている。式（１）〜（２０）のペプチドの誘導体が形成
され；次に触媒水素添加及び／又は酸性処理により存在
する保護基を除去し；そして 所望により、適切な酸による処理により式（１）〜（２
０）の遊離ペプチドをそれらの酸付加塩に転換し；そし
て／又は、 所望により、それらの塩の形で得られる式（１）〜（２
０）の遊離ペプチドを脱遊離し、そして／又は他の酸に
より形成される塩に転換することによって８周製される
。

多くの場合、保護基の組合せが、たとえばアミノ−保護
基の選択的除去及び次に、合成の最後で、■又は２段階
ですべての保護基の分離を可能にする合成に使用される
。ペプチド連鎖を形成するためには、Ｎ−ヒドロキシス
クシンイミドエステルを用いる方法（Ｗｉｉｎｓｃ）＋
　：　５ｙｎｔｈｅｓｅ　ｖｏｎ　Ｐｅｐｔｔｄｅｎ。

Ｖｏｌ、２．　Ｇｅｏｒｇ　Ｔｈｉｅｍｅ　Ｖｅｒｌａ
ｇ、　Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ＋　１９７４＋１４ページ）
、ペンタフルオロフェニルエステル法（ハンガリー特許
第１６８．４３１号明細書）又は混合された無水物法（
ハンガリー特許第１８３，５７９号明細書）が使用され
得る。

式（９）〜（１２）の二量体タイプ化合物の合成のため
には、１，２−ジアミノエタン又はそのモノ−ムーバリ
ン誘導体又はＬ−シスチンジアミドが、出発物質として
使用される。段階的な鎖延長においては、上記出発物質
１モルに対して計算して、約２モルのアシル化アミノ酸
誘導体が使用される（実際のモル比は、反応体に依存し
、これは適切に過剰量で使用されるべきである）。明ら
かに、式（９）、　（１１）及び（１２）の化合物の合
成においては、個々の中間体は、対称構造を有し、そし
て式（１０）の中間体は、非対称構造を有する。

アミノ基は、基Ｂｏｃ又はＺにより保護され；ところが
カルボキシル基は、ｔｅｒ　ｔ−ブチル、ベンジル又は
４−ニトロベンジルエステル保護基により供給される。

合成の完結後、任意に存在する保護基は、上記態様で得
られたその保護されたペプチドから除去され、そして次
に、所望により遊離ペプチドは酸による処理によりその
酸付加塩に転換される。触媒水素添加又はアシドリシス
が、保護基を除去するために使用される。このようにし
て得られたペプチドは、治療に使用のために十分に純粋
であり、そして追加の精製を必要としない。しかしなが
ら、所望により、それらはシリカゲル上でのカラムクロ
マトグラフィーにより精製され得る。溶液の形で得られ
たペプチドは、その溶液の蒸発又は凍結乾燥により単離
され得る。遊離ペプチドは、任意の塩に転化され得る。

最終生成物の純度は、高性能液体クロマトグラフィー（
肝ＬＣ）分析を用いることによって調べられる。

標的化合物の免疫システムの効果は、この後記載される
試験で調べされた。

１、／二一ットにおける　　−生　　に・するｔ来 この研究は、Ｃａｎｎｉｎｇｈａｍ　（Ｈａｎｄｂｏｏ
ｋ　ｏｆ　Ｅｘｐｅｒｉ−ｍｅｎＬａｌ　Ｉｍｍｕｎｏ
ｌｏｇｙ、　Ｅｄ、Ｄ、Ｍ、Ｗｅｉｒ、　Ｖｏｌ、２．
、　Ｂｌａｃｋ−ｗｅｌｌ、　０ｘｆｏｒｄ−Ｌｏｎｄ
ｏｎ＋　２８５ページ、■到）の方法に従って、新生ラ
ットから得られる肺臓細胞により実施された。−腹から
生まれた１２匹のＷｉｓｔａｒ（ＬＡＴｒ）ラットを、
１ｍｇ／ｋｇの投与量で７．５　ｐｇの試験物質により
町生から１２時間以内で腹腔内（ｉ、ｐ、）処理した。

誕生後、１４日目で、その動物を、羊の赤血球の１％懸
濁液０．５　ｍｌｌによりｉ、ｐ、免疫化し、次に７日
後、首を切ることにより放血した。その動物から得られ
た肺臓細胞から、均質懸濁液を、羊赤血球懸濁液を用い
て調製し、そして次にこの補体を、単細胞層を得るため
に適切なチャンバー中に置いた。パラフィンにより密封
されたチャンバーを、３７°Ｃで４５分間インキュベー
トした。抗体産生肺臓細胞の回りに、溶解領域、すなわ
ちプラークが形成された。抑制物質による処理の効果下
で、プラーク形成細胞（ＰＦＣ）の数は低められた。

第１表に要約されたデータは、未処理の対照動物から得
られた細胞に基づいて計算されたこの％は低下すること
を示す。同じ条件下で、プラーク形成細胞の数は、免疫
刺激ペプチドにより有意に高められる。

第一」ニー表 抗生生成の抑制 （１）　八ｒｇ−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ−Ｖａｌ　
　　　　　　　　　　　　　１４．４（２）　　Ａｒｇ
−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−八Ｓｐ　　　　　　　　　　　　
　　−２７，１（３）　Ａｒｇ−３ａｒ−Ａｓｐ−Ｖａ
ｌ　　　　　　　−２５，５（４）　　Ａｒｇ−３ａｒ
−八ｓｐ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　２１．５（５）　０ｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　
　　　　　−１９，５（８）　　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−八ａ
ｄ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０
．６（１０）　へｒｇ−Ｌｙｓ−へ５ｐ−Ｖａｌ−ＮＨ
−ＣＩ！、　　　　　　　　　　　２２．４＾ｒｇ−Ｌ
ｙｓ−＾５ｐ−ＮＨ−ＣＩｌｚ（１１）（へｒｇ−Ｌｙ
ｓ−へ５ｐ−Ｖａｌ−Ｎｉｌ−ＣＩｌｚ）ｚ　　　　　
　　　　２１．２（１６）　Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ　
　　　　　　　−３６，８（１７）　Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−
Ｇｌｕ−Ｔｈｒ　　　　　　−２３，２（１８）　Ｐｒ
ｏ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ　　　　　　　　　　　−
１９，４（１９）　Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ　
　　　　　　　　　　　２２．９（２０）　Ｌｙｓ−Ｈ
ｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌｈ　　　　　　　　　　２５．３Ａ
、　＾ｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　＋６８．６Ｂ　、　　Ａｒｇ−Ｌｙｓ
−Ａｓｐ−Ｖａｌ　　　　　　　　　　　＋５８．０来 この研究は、凝集の現象に基づかれる。特定の抗血清が
、急速に沈殿する抗原形成の大きな顆粒（凝集体）の表
面に付着する。

新生Ｗｊｓｔａｒ　（ＬＡＴＩ）ラットを、誕生から１
２時間以内で１■／ｋｇの投与量で試験物質を腹腔自処
理した。１４４日目、その動物を、羊の赤血球の１％懸
濁液０．５艷によりｉ、ｐ、免疫化した。免疫化の後、
７日目、血液を後眼瞼部から採取し、３０分後、血清を
遠心分離により分離し、そして赤血球凝集素の力価を、
ＴａＫ６Ｌｓｙ　（Ａｃｔａ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、Ａ
ｃａｄ、Ｓｃｉ。

）ｌｕｎｇ、　　３　、１９１　（１９５５）　：ｌに
従って決定した。２匹のラットの混合された血清（５０
ｍ）から、半分の希釈溶液を、１２段階で調製した。個
々のサンプルは、羊の赤血球の２％懸濁液２５μ！を与
えられた。

その混合物を、３７°Ｃで１時間インキユヘートし、凝
集を評価した。データは、未処理動物に対する％として
、−次抗体生成に対する化合物の抑制（阻害）効果を示
す第２表に要約される。免疫刺激物質は、この試験にお
いて反対の効果を示す。

策−１−表 一次抗体生成に対する効果 ベ　プ　チ　ド　　　　未処理の対照に対する変化率、
％ （３）　Ａｒｇ−５ａｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　　　　　　
　　　１７．９（４）　　Ａｒｇ−３ａｒ−八ｓｐ　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．７（
１１）　（Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−ＮＨ−Ｃ
Ｈｚ）　ｚ　　　　−１４，９（１２）（Ａｒｇ−Ｌｙ
ｓ−八５ｐ−Ｃ’ｙｓ−ＮＪ）ｚ　　　　　　　　　　
　１０．７（１９）　Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ
　　　　　　　　−１０，８Ａ、　　Ａｒｇ−ＬｙＳ−
八ｓｐ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　＋１
３．７Ｂ、　八ｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　　　　
　　　　　　　　　　　　＋２８．１３、　　　マクロ
ファージの　　　　　の且静止マクロファージ細胞の食
作用能力を、マウスに対して研究した（Ｊ、Ｉｍｍｕｏ
ｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ、　　４＋２６５（１９８２〜
１９８３）　）。２２〜２８ｇの重さの雄のＣＦ　Ｌ　
Ｐ（ＬＡＴｒ）　マウスを、ｌ　ｍｇ　／　ｋｇの投与
量で試験物質を毎日、７日間皮下（Ｓ、Ｃ，）処理した
。動物の放血後、それらの腹膜を、ＰＢＳ緩衝溶液（リ
ン酸緩衝溶液、ｐＨ＝７．２）８ｄにより洗浄し、そし
て個々はｌ０ＩＵのヘパリンを含んだ。腹膜から洗浄さ
れた細胞懸濁液を、蒸留水によるショックにより赤血球
を解放し、次にＰＢＳ緩衝溶液により３度、洗浄した。

２回の洗浄の間の沈降を、１１０００ｒｐで５分間、遠
心分離することにより達成した。個々の細胞懸濁液の濃
度を１．１０６個の細胞／ｄに調整し、そしてその懸濁
液を、二酸化炭素を５％含む雰囲気下で３７°Ｃで３０
分間、Ｂｕｙｄｅｎ〜チャンバー中において静置した。

ガラス壁に付着されたマクロファージ上に、オブソニン
作用された酵母が積層された。食作用されなかった粒子
を除去した後、マクロファージにより統合された粒子を
、個々の細胞において計数した。第３表においては、食
作用された酵母細胞の計数の低下率（％）は、対照とし
ての未処理動物から単離されたマクロファージに対して
与えられる。

メー」し−表 静止マクロファージの食作用能力の変化（１）　Ａｒｇ
−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ−Ｖａｌ　　　　　　−１
１，２（２）　八ｒｇ−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ　　
　　　　　　　　　　　　　−４７，３（３）　八ｒｇ
−５ａｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　　　　　　　　　　　　　
　　　−１０，５（４）　　Ａｒｇ−Ｓａｒ−八ｓｐ　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　−２２，７（
７）　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ−Ｖａｌ　　　　　　　
　　−２８，７（８）　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ　　　
　　　　　　　　−２９，１（９）　（Ａｒｇ−Ｌｙｓ
−Ａｓｐ−ＮＨ−ＣＨｚ）　ｚ　　　　　　　１１．６
（１１）（Ａｒｇ−Ｌｙｓ−八ｓｐ−νａｌ−ＮＨ−Ｃ
ｔｌｚ）ｚ　　　　　　　　　１６．５（１２）（Ａｒ
ｇ−Ｌｙｓ−八５ｐ−Ｃ’ｙｓ−ＮＨｚ）ｚ　　　　　
　　　　　４０．１（１４）　５ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ
　　　　　　　　　　　−１４，０（１７）　Ｌｙｓ−
Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ　　　　　　　　　−１７，５
（１８）　Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ　　　　　
　　　　１１．７（１９）　Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−
Ｇｌｕ　　　　　　　　　１８．６（２０）　Ｌｙｓ−
Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌｌｚ　　　　　　　　　　３９．
にの試験は、２５〜３０ｇの重さの雄のＣＦＬＰ　（Ｌ
ＡＴＩ）マウスに対して行なわれた。実験の始めで、マ
ウスを、無水エタノール中、オキサシロンの３％溶液２
０μノを、耳及び前足の両者上に適用することによって
処理した。その処理の後７日目、それらの動物を、生理
食塩水中に溶解された化合物１■／ｋｇ　ｉ　、　ｐ　
、投投量で処理した。対照は、生理食塩水のみで処理さ
れた。実験の１００日目オキサシロンの２．５％オリー
ブ油溶液２０μｌを、動物の個々の耳上に塗った。耳の
厚さを２度、すなわち抗原の投与の２４時間前及び２４
時間後、測定した。その厚さは、両耳の耳たぶの中央で
、０．０１ｍｍの正確度で測定された。変化が対照グル
ープと比較された。ＤＴＨ応答の進行の抑制に関するデ
ータは、第４表に％として与えられる。

芽−」し−表 ＤＴＨ応答の抑制 （５）　０ｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ　　　　　　
　　２８．３（６）　０ｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ　　　　
　　　　　　３９．６（８）　Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ
　　　　　　　　　　３６．８（１１）　（Ａｒｇ−Ｌ
ｙｓ−＾５ｐ−Ｖａｌ−ＮＨ−ＣＨｚ）　ｚ　　　　２
７．０（１２）（へｒｇ−Ｌｙｓ−へ５ｐ−Ｃ’ｙｓ−
ＮＨｚ）ｚ　　　　　　　　　３５．３（１３）　Ｌｙ
ｓ−５ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ　　　　　　　　２８．２
（１４）　５ｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ　　　　　　　　　
　２２．７（１５）　５ｅｒ−３ｅｒ−３ｅｒ−Ｔｈｒ
　　　　　　　　１Ｂ、０（１６）　Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−
Ｔｈｒ　　　　　　　　　　２７．５（１７）　Ｌｙｓ
−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ　　　　　　　　３５．５比
較のため上記表に与えられるペプチド゛Ａ°°　。

”Ｂ”°及び°“Ｃ“は既知である： °“Ａ′及び“Ｂ”は、ハンガリー特許第１８５．２６
３号明細書に記載され； Ｃ′”は、アメリカ特許第４，１９０，６４６号明細書
に記載されている。

本発明の化合物及びそれらの酸付加塩は、免疫システム
の活性の低下が所望される治療部分に通常医薬組成物の
形で使用され得る。式（１）〜（２０）のペプチドは、
それ自体で又はそれらの塩の形で、適切には、通常治療
に使用される医薬製剤の形で使用される。これらの製剤
（薬剤）は、固形又は液体状態で存在することができ、
そしてそのような製剤に通常使用される充填剤、希釈剤
、安定剤、ｐＨ−及び浸透圧−影響物質及び製剤を促進
する添加物を用いることによって調製され得る。

本発明は、次の非制限的な例により詳しく例示される。

本明細書に使用される略語は、文献で一般的に知られて
いる略語に相当する（Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｊ、２１９゜３
４５（１９８４）　）　、　”Ｃｈｃ”　は、シクロへ
キシルカルバモイルを意味し、そして”Ａａｄ”はα−
Ｌ−アミノアジポイル基である。融点は、Ｄｒ、Ｔｏｔ
ｔｏｌｉ装置（Ｂｉｉｃｈｊ、　５ｗ１ｔｚｅｒｌａｎ
ｄにより製造される）で測定された。薄層クロマトグラ
フィー試験を、容易に使用できる吸着剤（ＤＣ−Ｐｅｒ
ｔｉｇｐｌａｔｔｅｎ、　Ｍｅｒｃｋ＋ＦＲＧにより製
造される）及び次の溶媒混合物（ここで、°“貯蔵溶液
′°とは、ピリジン／酢酸／水の２０：６：１１混合物
である）を用いることにより実施した： １、酢酸エチル／貯蔵溶液　　　　　１．９：１；２、
酢酸エチル／貯蔵溶液　　　　　９：１；３、酢酸エチ
ル／貯蔵溶液　　　　　４：１；４、酢酸エチル／貯蔵
溶液　　　　　７：３；５、　　ｎ−ブタノール／貯蔵
溶液　　　３；７１６、　　ｎ−ブタノール／貯蔵溶液
　１：４；及び（比は、体積割合値で与えられる。） クロマトグラムを、ニンヒドリンにより、又は塩素化の
後、ヨウ化カリウム／トリジン試薬を用いることにより
検出した。

＋１　Ｐ　Ｌ　Ｃ分析を、種々の波長を有するＬａｂｏ
ｒ−ＭＩＭ　０Ｅ９７５タイプＵＶ検出器、八ｌ　ｔｅ
ｘポンプ及びＫＵＴＥＳＺ１７５タイプ記録計を備えら
れた装置を用いることによって実施した。分離のために
、長さ２５０ｍｍ、内径４．６　ｍｍのカラム〔Ｃ３６
のアルギル基によりアルキル化されたシリカゲル（１、
ａｂｏｒ　ＭＩＭ）の静止相を有する〕を用いた。次の
混合物が、溶離のために使用された； Ａ、メタノール２５ｍ１及びトリフルオロ酢酸０．５体
積％含む０．０１Ｍの水性硫酸ナトリウム溶液７５ｍか
ら成る混合物； Ｂ、アセトニトリル／トリフルオロ酢酸／蒸留水の１．
５　：　１．０　Ｆ９７．５混合物。

測定は、１ｍ１７分の流速で行なわれ、そして溶液の吸
光度は２１２ｎｍで検出された。クロマトグラムは、部
分−標準化により評価された。

標的化合物の純度は、ＨＰＬＣ及び薄層クロマトグラフ
ィー（Ｔ［、Ｃ）分析の両者に基づけば、９５％以上で
あった。

特定の旋光性が、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ　２４１タ
イプ旋光計で測定された。すべての溶媒は、除去され又
は４０°Ｃでの水浴中で、Ｂｌｌｃｈｉ回転蒸発器によ
り蒸発せしめられた。

標的化合物のアミノ酸分析を、ＢｉｏＬｒｏｎｉｋ　Ｌ
Ｃ５００１タイプの装置で行なった。サンプルは、１１
０″Ｃで２４時間、６モル濃度の塩酸溶液中で加水分解
された。分析の結果は、すべての場合、±５％の誤差内
で存在した。

合成の出発物質は、文献において通常知られている。

炎上 Ａｒ　−５ａｒ−Ａｓ−Ｖａｌの調′　　法”Ａ”）ト
リエチルアミン１．６８ｄ　（１２，０ミリモル）を、
ジメチルホルムアミド（［１ＭＦ）２５ｄ中にＦｌ−Ｖ
ａｌ−ＯｔＢｕ　・ＨＣｊ！　２．５８ｇ　（１２，０
ミリモル）及び２−＾５ｆｌ−（ＯｔＢｕ）　−０３ｕ
　４．６２ｇ　（１１，０ミリモル）を含む懸濁液に添
加する。その反応混合物を一晩放置し、次に減圧下で蒸
発する。残渣を、酢酸エチル５０ｍ１と共に混合し、そ
してその得られた懸濁液を、連続的に、１モル／ｊ２の
塩酸２５ｄにより３度、５％水性炭酸水素ナトリウム２
５−により３度及び最後に、水２５ｍ１により洗浄し、
無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして減圧下で蒸
発し、油状物のＺ−＾ｓｐ−（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−０
’Ｂｕ保護ジペプチド（Ｒｒ’　＝０．８５）　４．３
　ｇ（８１，７％）を得る。

上記保護されたジペプチド４．０７　ｇ　（８，５ミリ
モル）を、メタノール４０ｍ１中に溶解し、そして撹拌
しながら、炭素上パラジウム１．０ｇの存在下で、その
溶液に水素をあわ立たせることにより水素添加する。そ
の水素添加は、２時間以内で完結される。次に、触媒を
濾去し、濾液を減圧下で蒸発し、残渣をエーテル５０ｄ
中に溶解し、そしてそのｐＨを、６モル／２の濃度のジ
オキサン性塩化水素溶液を添加することにより、ｐＨを
４に調整する。沈殿物を濾過し、Ｈ−Ａｓｐ（ＯＬＢｕ
）−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ　・１ｌｃｊ！遊離ジペプチド塩
酸塩（ｍ、ｐ、＝１８７〜１８９°Ｃ、Ｒｆ”＝０．４
０）３、２　ｇ　（９１，５％）を得る。

ＤＭＦ３０ｄ中、Ｚ−５ａｒ−Ｏ５ｒ−Ｏ３ｕ　３．　
Ｏｇ　　（１０，０モミリル）及びＨ−八５ｐ（ＯｔＢ
ｕ）−Ｖａｔ−ＯＬＢｕ−）ＩＣＩ！３．０５　ｇ（８
，０ミリモル）を、トリエチルアミン１．４０ｄ（１０
，０ミリモル）の存在下で反応せしめる。次の日、その
反応混合物を減圧下で蒸発せしめ、残渣を酢酸エチル５
０成中に溶解し、そして得られた懸濁液を、連続的に、
水２０ｄにより、１モル／Ｉ！、の塩酸２０ｄにより２
度、５％炭酸水素ナトリウム溶液２０ｄにより２度及び
最終的に、水２０ｍ１により洗浄し、無水硫酸ナトリウ
ム上で乾燥せしめ、そして減圧下で蒸発する。

４．２ｇ（７，６ミリモル）の収量で得られた、油状の
Ｚ−３ａｒ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ保
護トリペプチド（Ｒｒ’＝０．７５）を、メタノール４
Ｍ中に溶解し、そして、炭素上パラジウム触媒０．８ｇ
の添加の後、その混合物を通常の方法で水素添加する。

触媒の濾去の後、修酸二水和物１．０ｇ（８，０ミリモ
ル）を、その濾液に添加し、その溶液を蒸発し、そして
残渣をエーテルの添加により固形化し、Ｈ−３ａｒ−Ａ
ｓｐ（ＯＬＢｕ）−Ｖａｌ−０’Ｂｕ　・オキサレート
（遊離トリペプチドオキサレート）　（ｎ＋、ｐ、−１
９０〜１９２°ｃ、Ｒｆ３−０．３０）　２．２４ｇを
得る。

Ｄ　Ｍ　Ｆ　１０ｄ中、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（ＨＣｊ！　）
−Ｏｆｆ−ｔ１２０１．１４　ｇ（３，５ミリモル）の
溶液を一１０°Ｃに冷却し、イソブチルクロロホルメー
）０．５５ｍＭ　（４ミリモル）及びＤＭＦ５ｄ中に溶
解されたＮ−メチルモルポリン溶液０．４４７　（４ミ
リモル）を同じ温度で添加する。得られた混合無水物を
、−１０°Ｃで１０分間撹拌し、次に上記で得られた遊
離トリベプチドオキサレ−１−１，５ｇ（３ミリモル）
及びＤ　Ｍ　Ｆ　５　ｍＲ中、トリエチルアミン０８４
ｄ（６ミリモル）を同じ温度で添加する。その反応混合
物を室温に暖ため、そして−晩装置する。溶媒を減圧下
で蒸発し、残渣をクロロホルム５０ｄ中に溶解し、そし
てこの？容液を、１モル／ｉ！、の塩酸２０ｍ１により
３度、次に水２０−により洗浄し、そして無水硫酸ナト
リウム上で乾燥せしめる。油状残渣をエーテルの添加に
より固形化し、そしてその懸濁液を濾過し、非品性Ｂｏ
ｃ−へｒｇ（ＨＣｊ！　　）−３ａｒ−Ａｓｐ（ＯＬＢ
ｕ）−Ｖａｌ−ＯｔＢｕ　　［Ｒｆ’−〇、１８．Ｒｔ
’−０．２４；（α）　ｏｏ−−３７，０”　　（ｃ　
＝　ｌ、メタノール）　］　１１．３０ｇ（６６％）を
得る。

上記で得られた保護テトラペプチド１．２０ｇ（］、８
ミ８ミリ）を、４０°Ｃで２時間、トリフルオロ酢酸に
より処理し、次にその混合物を、エーテル６０−の添加
により希釈し、その懸濁液を濾過し、そして沈殿物をエ
ーテルにより洗浄する。水１０ｄ中にトリフルオロ酢酸
塩を溶解した後、トリフルオロアセテートイオンを、ア
セテート循環のアニオン−交換樹脂（ＤＯＷＥＸ　２　
Ｘ　８　）　５ｄによりアセテートイオンと交換する。

減圧下でその溶液を蒸発した後、残渣を９０％水性エタ
ノール５−の添加により固形化し、非晶性Ａｒｇ−３ａ
ｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ［〔α〕６°＝−３２．３°　（Ｃ
＝１．１０％酢酸）１０．６ｇを得る。アミノ酸分析二
へｓｐ　１．０３（１）、　ＶａｔＯ，９７（１）、　
　八ｒｇ　　１．００（１）。

囲Ｉ Ｌｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒの量、１　　法”Ｂ”）エーテル
６０ｄ中にＨ−Ｔｈｒ（’Ｂｕ）−０ｔＢｕ　・オキサ
レー）　３．３　ｇ　（１１，０ミリモル）を懸濁した
後、その懸濁液を、溶解するまで、５％水性炭酸水素カ
リウム３０ｄと共に振盪する。有機相を分離し、５％水
性炭酸水素カリウム溶液２〇−及び水２Ｍにより洗浄し
、無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして減圧下で
蒸発する。Ｄ　Ｍ　Ｆ　２０ｄ中、前記油状残渣の溶液
に、Ｚ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−０Ｓｕ　４．１２ｇ　（
９，５ミリモル）を添加する。その混合物を室温で２時
間撹拌し、次に減圧下で蒸発する。残渣を酢酸エチル５
０ｄ中に溶解し、そして連続的に、１０％クエン酸水溶
液１５戚により３度、５％炭酸水素ナトリウム水溶液１
５ｄにより２度、及び最終的に水１５ｍ１により洗浄し
、無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして減圧下で
蒸発する。油状の７．−Ｇｌｕ（ＯＬＢｕ）−Ｔｈｒ（
’Ｂｕ）−０’Ｂｕ保護ジペプチド（Ｒｆ’　＝０．８
５）４．４ｇ（８，０ミリモル）を得、これをメタノー
ル５０Ｉｎ！！、中に溶解し、そして例１に記載のよう
にして水素添加する。触触の濾去の後、濾液を蒸発し、
遊離Ｈ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−０’
Ｂｕジペプチド（Ｒｒ”＝０．２２）を得、次にこれを
Ｄ　Ｍ　Ｆ　２０ｄ中に溶解し、Ｚ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）
−０Ｓｕ　４．７７ｇ　（１０ミリモル）を添加した後
、その反応混合物を室温で２時間撹拌し、そして減圧下
で蒸発する。酢酸エチル５０ｒｄ中に前記油状残渣を溶
解した後、その溶液を通常の方法で数回洗浄することに
より精製し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そし
て減圧下で蒸発する。油状の蒸気残渣をエーテル中で再
結晶化し、Ｚ−Ｌｙｓ　（Ｂｏｃ）−Ｇｌｕ　（ＯＬＢ
ｕ）　−Ｔｈｒ　（ｔＢｕ）−０ｔＢｕ保護トリペプチ
ド［ｍ、ｐ、　＝１１４〜１１５°ｃ　：　Ｒｒ”＝０
．８０　；〔α）ｏＯ−２２，８°　（ｃ−１、メタノ
ール）］４．７５ｇ　（７４％）を得る。

上記保護されたトリペプチド４．４ｇ（５，６ミリモル
）を、メタノール４０ｄ中に溶解し、そして例１に記載
のようにして、触媒的に水素添加する。

触媒の濾去の後、濾液を減圧下で蒸発し、そしてその油
状残渣を６モル／Ｉ！、の濃度のジオキサン性塩化水素
溶液４０ｄ中に溶解する。１５分後、沈殿物が現われる
。１時間後、その懸濁液をエーテル１０（ｌｄにより希
釈し、濾過し、そしてその沈殿物をエーテルにより洗浄
し、非晶性Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ・２０（Ｊ）リペプ
チドニ塩酸塩［ｍ、ｐ、　＝２１３〜２１５°Ｃ（分解
を伴う）；〔α）　；ｆｆ’　−十２．７°　（ｃ＝１
　。

１．１％酢酸）　］　２．３　ｇ　（９１％）を得る。

水２０ｄ中に前記Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ４　ＨＣｊ！
　トリベプチドニ塩酸塩を溶解した後、クロリドイオン
を、アセテート循環の樹脂（ＤＯＮＥＸ　２　Ｘ　８　
）上でアセテートイオンと交換し、次にその溶液を減圧
下で蒸発し、そして残渣をエタノールの添加により固形
化する。この方法においては、非晶性Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−
Ｔｈｒ−アセテート［〔α〕６°−十３．５°　（ｃ＝
１．１０％酢酸）］２．２７ｇを得る。アミノ酸分析：
　１．０１（１）。

Ｔｈｒ　１．００（１）、　Ｌｙｓ　１．００（１）。

■盈 Ｌ　５−１１ｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌ１２アセーートの８１
　　法”ｃ″）Ｄ　Ｍ　Ｆ　３０ｍ１中、旧ｓ　・ＯＭ
ｅ　・２ｔｌＣ４２，４２ｇ　（１０ミリモル）の溶液
に、トリエチルアミン２．８　ｍｌ　（２０ミリモル）
及び次にＺ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｓｕ　５．６　ｇを添加
する。次の日、その反応混合物を蒸発し、油状残渣をク
ロロホルム４５１ｄ中に溶解し、その溶液を水２０ｄに
より２度洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、
そして減圧下で蒸発する。酢酸エチルの添加により油状
残渣を固形化した後、Ｚ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−旧ｓ−Ｏ
Ｍｅ（ｍ、ｐ、　−１３５〜１３６°Ｃｉ　Ｒｆ″＝０
．４５）　４．５４ｇ（８０％）を得る。

上記で得られた保護ジペプチドエステル４．０ｇ（７ミ
リモル）を、暖かなメタノール４０戚中に溶解し、そし
てヒドラジン水和物４ｒｄを添加する。

その混合物を室温で３日間保持し、そして減圧下でその
半分の体積に蒸発し、そしてエーテル５０滅により希釈
する。非品性沈殿物を濾過し、そしてエーテルにより洗
浄し、Ｚ−Ｌｙｓ　（ｔＤ−Ｈｉｓ−Ｎｄｌ＋保護ジペ
プチドヒドラジド（ｍ、ｐ、　＝１５０〜１５３°Ｃｉ
Ｒ％＝０．２０）　３．７０ｇを得る。

Ｄ　Ｍ　Ｆ　１５ｄ中に上記Ｚ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−Ｈｉ
ｓ−Ｎｚｌ１３３．６５　ｇ（６，０ミリモル）を含む
溶液を一１０°Ｃに冷却し、そして７モル／ｌの濃度の
ジオキサン性塩化水素２、５　ｍ及び次に、ＤＭＦ４ｍ
ｆ中、第三亜硝酸ブチル０．フ５ｄ　（６，６ミリモル
）を同じ温度で滴下する。

その反応混合物を一１０°Ｃで２０分間、撹拌した後、
トリエチルアミン２．０　ｄを添加し、そして次に、Ｄ
　Ｍ　Ｆ　１０ｍ１！中、Ｌｅｕ−ＮＨ２アセテート１
．３３ｇ（７ミリモル）及びトリエチルアミン１ｄの溶
液を滴下する。次に、その混合物を、３０分間Ｏ″Ｃで
撹拌し、次に室温で一晩放置する。その反応混合物を、
減圧下で蒸発し、そしてその残渣を水に懸濁する。

粗生成物３．７ｇを得、これをイブプロパノール３０成
から再結晶化し、Ｚ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−
Ｎｌ２　［ｍ、ｐ。

−１１０〜１１３°Ｃ；　Ｒｆ’＝０．３０　；　　（
α〕デーー２０．１゜（ｃ−１、メタノール）］２ｇ（
６５％）を得る。

上記で得られた保護トリペプチド１．２ｇ（１，８ミリ
モル）を、メタノール／水／酢酸の５＝１；２混合物２
０ｄ中に熔解し、そして例１に記載のようにして触媒的
に水素添加する。触媒の濾去の後、濾液を減圧下で蒸発
する。その残渣にエタノールを添加し、そして蒸発した
後、その残渣をエーテルと共に粉末にし、非品性吸湿性
Ｌｙｓ−１１ｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌ＋２−アセテート［〔
α〕３°−−５，７°　（ｃ−１，１モル／Ｉ！、の酢
酸）　］　］０．５７を得る。アミノ酸分析：Ｌｅｕ　
Ｏ，９５（１）、　ｌ１ｉｓ　１．０３（１）、　Ｌｙ
ｓ　１．０４（１）。

第５表に示される保護されたペプチド誘導体及び第６表
に示される標的化合物は、例に詳しく記載される方法に
従って、調製された。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、Ｔ−リンパ球の成熟及びマクロファージの活性を阻
   害する、下記式（１）〜（２０）： Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ−Ｖａｌ（１） Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ（２） Ａｒｇ−Ｓａｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（３） Ａｒｇ−Ｓａｒ−Ａｓｐ（４） Ｏｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（５） Ｏｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（６） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ−Ｖａｌ（７） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ（８） 〔Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−ＮＨ−ＣＨ＿２−〕＿２（
   ９） ▲数式、化学式、表等があります▼（１０） 〔Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−ＮＨ−ＣＨ＿２−
   〕＿２（１１） 〔Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃ＾１ｙｓ−ＮＨ＿２〕＿
   ２（１２） Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ（１３） Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ（１４） Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ（１５） Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ（１６） Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ（１７） Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ（１８） Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ（１９） Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−ＮＨ＿２（２０） で表わされるペプチド及びそれらの酸付加塩。 ２、Ｔ−リンパ球の成熟及びマクロファージの活性を阻
   害する医薬組成物であって、活性成分として、１又は複
   数の請求項１に記載されたような遊離形又は酸付加塩で
   の式（１）〜（２０）のペプチドを、治療的に有効な量
   及び医薬産業に通常使用される、１又は複数の医薬的に
   許容できる希釈剤、充填剤、安定剤、ｐＨ−及び浸透圧
   影響物質を含んで成る組成物。 ３、下記式（１）〜（２０）： Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ−Ｖａｌ（１） Ａｒｇ−Ｌｙｓ（Ｃｈｃ）−Ａｓｐ（２） Ａｒｇ−Ｓａｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（３） Ａｒｇ−Ｓａｒ−Ａｓｐ（４） Ｏｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ（５） Ｏｒｎ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ（６） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ−Ｖａｌ（７） Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａａｄ（８） 〔Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−ＮＨ−ＣＨ＿２〕＿２（９
   ） ▲数式、化学式、表等があります▼（１０） 〔Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−ＮＨ−ＣＨ＿２−
   〕＿２（１１） 〔Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ａｓｐ−Ｃ＾１ｙｓ−ＮＨ＿２〕＿
   ２（１２） Ｌｙｓ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ（１３） Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ（１４） Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｈｒ（１５） Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ（１６） Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ｔｈｒ（１７） Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ（１８） Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ（１９） Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−ＮＨ＿２（２０） で表わされるペプチド及びそれらの酸付加塩の調製方法
   であって、ペプチド化学において既知であるように、活
   性エステル、混合された無水物及び／又はアジド法のカ
   ップリング段階を連続的に使用することにより溶液中で
   段階的に鎖を長くし、続いてα−及び／又はε−アミノ
   基を保護解除し、それによって、 水素添加又はアシドリシスにより除去できる保護基によ
   りエステル化されたカルボキシ基及び場合によっては、
   保護された側鎖ヒドロキシル及び／又はアミノ基及び／
   又は水素添加により除去できる保護基によりアミノ化又
   はエステル化されたＣ−末端カルボキシ基を含むアミノ
   酸誘導体により開始し、又は１−２−ジアミノエタン、
   そのモノ−Ｌ−バリン誘導体又はＬ−シスチンジアミド
   により開始し、水素添加又はアシドリシスにより除去で
   きる保護基によりそれらのＣ−末端カルボキシ基上でア
   ミノ化又はエステル化され、水素添加又はアシドリシス
   により除去できる保護基によりそれら以外のカルボキシ
   上でエステル化され、ペプチド連鎖に含まれないそれら
   のアミノ基上に保護基Ｂｏｃ又はＺを含み、そして／又
   はそれらのヒドロキシル基上で保護されている、式（１
   ）〜（２０）のペプチドの誘導体が形成され； 次に触媒水素添加及び／又は酸性処理により存在する保
   護基を除去し；そして 所望により、適切な酸による処理により式（１）〜（２
   ０）の遊離ペプチドをそれらの酸付加塩に転換し；そし
   て／又は、 所望により、それらの塩の形で得られる式（１）〜（２
   ０）の遊離ペプチドを脱遊離し、そして／又は他の酸に
   より形成される塩に転換することを含んで成る方法。 ４、第三ブチル基によりエステル化されたカルボキシル
   基を含む保護されたアミノ酸誘導体を用いることを含ん
   で成る請求項３記載の方法。 ５、前記アミノ基上でＢｏｃ基によりアシル化された保
   護アミノ酸誘導体を用いることを含んで成る請求項３又
   は４記載の方法。 ６、前記アミノ基上でＺ基によりアシル化された保護ア
   ミノ酸誘導体を用いることを含んで成る請求項３又は４
   記載の方法。 ７、前記ヒドロキシル基上で第三ブチル基により保護さ
   れているアミノ酸誘導体を用いることを含んで成る請求
   項３〜６のいづれか１項記載の方法。 ８、式（１）〜（４）及び（７）〜（１２）のペプチド
   を調製するために、そのグリニジノ基上で塩化水素によ
   り保護されているアルギニン誘導体を用いることを含ん
   で成る請求項３〜７のいづれか１項記載の方法。 ９、Ｔ−リンパ球の成熟及びマクロファージの活性を阻
   害する医薬組成物を調製するため方法であって、活性成
   分として、治療的に有効な量、１又は複数の請求項３に
   記載されたような式（１）〜（２０）のペプチド又は医
   薬的に許容できるその塩及び医薬産業に通常使用される
   、１又は複数の希釈剤、充填剤、安定剤、ｐＨ−及び浸
   透圧影響物質を混合することを含んで成る方法。 １０、Ｔ−リンパ球の成熟及びマクロファージの活性を
   阻害するための方法であって、１又は複数の請求項１記
   載の式（１）〜（２０）のペプチド及び／又はそれらの
   酸付加塩を治療的に有効な量動物又はヒトに投与するこ
   とを含んで成る方法。