JPH02265441A - 牛乳乳清蛋白質中のβ―ラクトログロブリンの選択的酵素分解方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は牛乳乳清蛋白質中のβ−ラクトグロブリンを選
択的に酵素分解する方法に関するものである。

更に詳細には、本発明はβ−ラクトグロブリンを選択的
に分解できる酵素を用いて牛乳乳清蛋白質中のβ−ラク
トグロブリンを選択的に分解する゛方法に関するもので
ある。

母乳にはほとんど存在しないβ−ラクトグロブリン（以
下β−Ｌｇと記す）は、時として乳児にとっては強いア
レルゲンとして作用するものである。

本発明によってβ−Ｌｇを分解消去した牛乳乳清蛋白質
を育児用食品調製蛋白源とすれば、アレルゲン性の弱い
育児用食品を提供することができることになる。

（従来技術） 一般に、育児用調製粉乳の製造に際しては、牛乳の蛋白
質成分組成を母乳の蛋白質成分組成に近づける努力がな
されている。

牛乳と母乳の間で最も相違するところは、牛乳に多量に
含まれるβ−１ｇが母乳にはほとんど含まれていないこ
とである。

従来、調製粉乳の蛋白質組成を母乳の蛋白質組成に近付
けるために、カゼインの一部を乳清蛋白質で置換するこ
とは行なわれている。しかし、この方法では母乳に存在
しない他の成分も混合し、しかもβ−１ｇの絶対量を少
くすることはできないので、本質的な改善にはならなか
った。

また、乳清または乳清蛋白質濃縮物に特定範囲量の塩化
第二鉄を添加して特定のＰＨ範囲、温度範囲でβ−Ｌｇ
低減乳清蛋白質を沈澱として分取する方法（特開昭５９
−１１３８４８）　、この方法と異なる範囲の塩化第二
鉄量、ｐｌ（、温度で乳清または乳清蛋白質濃縮物を処
理し、β−Ｌｇ低減蛋白質を上清として分取する方法（
特開昭６ｌ−２６８１３１）、および乳清または乳清蛋
白質濃縮物を脱塩後、特定ｐＨ範囲に調整し１次いでこ
れを所定の温度範囲内で加熱してβ−Ｌｇ低減蛋白質を
沈澱として分取する方法（特開昭６ｌ−２６８１３８）
などが提案されている。

しかしながら、乳清蛋白質にはβ−１ｇが約５０％と多
量に含まれているところから、塩化第二鉄法による沈澱
処理では、β−Ｌｇ以外の蛋白質も除去される部分が多
く、実用性に乏しいという欠点がある。

また、乳清または乳清蛋白質濃縮物の脱塩後にβ−１ｇ
を可溶性画分に除去する方法では重要な窒素栄養である
非蛋白態窒素成分、例えば尿素、グリコマクロペプチド
などの同伴損失が起る欠点がある。

また、蛋白分解酵素処理によって減アレルゲン性を図っ
たものとして乳酸菌菌体破壊物とバンクレアチンおよび
アスペルギルス属糸状菌より得られた蛋白分解酵素の三
種からなる混合物を特定の温度範囲で乳蛋白質に作用さ
せ、アミノ基含有化合物が所定量遊離した時点で反応を
停止し、無抗原性蛋白質分解物を得る方法（特開昭５４
−３６２３５）ならびに乳蛋白質にパンクレアチンとバ
チルス属細菌由来の蛋白分解酵素を作用させて無抗原か
つ易溶性の乳蛋白質分解物を得る方法（特開昭６２−１
７１６４４）が提案されている。

しかしながら、乳蛋白質の酵素処理による減アレルゲン
法では構成蛋白質すべてがアミノ酸または小ペプチドに
分解されるので分解産物の特異的な味もしくは苦味が生
成し、食品としての価値が低下し、しかも蛋白質として
の重要な機能が失われるという欠点を有していたのであ
る。

（発明が解決しようとする問題点） 乳清蛋白質巾約５０％も含まれるβ−１ｇだけを分解消
去し、アレルゲンのない育児用食品素材を調製しなけれ
ばならない。

（問題点を解決するための手段） 本発明者らは、牛乳乳清蛋白質中のβ−１ｇのみを酵素
的に分解して消去する方法を求めて鋭意研究したところ
、微生物由来の蛋白分解酵素、たとえばアスペルギルス
属糸状菌由来の蛋白分解酵素。

枯草菌由来の蛋白分解酵素、放線菌由来の蛋白分解酵素
、動物由来の蛋白分解酵素、たとえばトリプシン、α−
キモトリプシンを使用して選択的にβ−１ｇを酵素分解
できる条件を設定すれば牛乳乳清蛋白質水溶液中のβ−
１ｇのみが分解されることを知ったのである。

従来、アスペルギルス属糸状菌に由来する蛋白分解酵素
を用いて乳清蛋白質全体を分解する方法は知られている
（特公昭５４−３６２３５）が乳清蛋白質混合系で個々
の蛋白質の被分解性を詳細に追跡した例はほとんどなく
、ましてや各種蛋白分解酵素によってβ−１ｇのみを分
解したことは全く知られていない。

本発明においては、牛乳乳清蛋白質水溶液にアスペルギ
ルス属糸状菌由来の蛋白分解酵素、枯草菌由来の蛋白分
解酵素又は放線菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇｒｉｓ
ｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素、トリプシン、又はα−キ
モトリプシンを加え、ｐＨ７〜９、温度３０〜４０℃、
３０分〜２０時間の範囲において処理する。アスペルギ
ルス属糸状菌、枯草菌または放線菌由来の蛋白分解酵素
使用の場合は基質蛋白質１ｇ当り２２０ｍｇ、　　トリ
プシン、α−キモトリプシン使用の場合は１２０ｍｇの
グリシン相当の１０％トリクロロ酢酸（以下１０％ＴＣ
Ａと記す）可溶性アミノ基含有化合物が遊離するまで蛋
白質を分解処理するのがよい。

本発明において、アスペルギルス属糸状菌由来の蛋白分
解酵素、枯草菌由来の蛋白分解酵素、放線菌由来の蛋白
分解酵素、トリプシン又はキモトリプシンによる乳清蛋
白質中のβ−Ｌｇの選択的酵素分解はきわめて特徴的で
あって、酸性域に最高活性を有する他の蛋白分解酵素で
はβ−Ｌｇの選択的酵素分解は確認できない。

本発明におけるＳＤＳ電気泳動法 （ＳＤＳ−ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ　ｇｅｌ　ｅ
ｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）はＬａａｍｍｌｉの変
法（Ｌａｅｍｍｌｉ、　Ｕ、　Ｋ、　１９７０．Ｃｌｅ
ａｖａｇｅｏｆ　５ｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｐｒｏｔｅｉ
ｎｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ａｓｓｅｍｂｌｙｏｆ　
ｔｈｅ　ｈｅａｄ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈａｇｅ
　Ｔ４．　Ｎａｔｕｒｅ　２２７　：、６８０）におい
て行った・ その条件は次の通りである。

１、ゲル組成　ゲル厚１ｍｍ １−１濃縮ゲル アクリルアミド濃度；４％　　　　　　　　　Ｘビスア
クリルアミド：アクリルアミド＝１：１０＄ ゲルバッファー；ラウリル硫酸ナトリウム１％、尿素６
Ｍを含有する０、１２５Ｍ　トリス−塩酸、ｐＨ６，８ ＴＥＭＥＤ濃度；　０．１２５％ 過硫酸アンモニウム濃度；　０，３ｍｇ／ｍｆｆ１傘Ｓ
ｏｄｉｕｍ　Ｄｏｄｅｃｙｌ　５ｕｌｆａｔｅ１−２分
離ゲル アクリルアミド濃度；１５％ ビスアクリルアミド：アクリルアミド＝１：３７ゲルパ
ツフアー；ラウリル硫酸ナトリウム１％、尿素６Ｍを含
有する０、３７５Ｍ　）−リス−塩酸、ｐＨ８，９ＴＥ
ＭＥＤ濃度；　０．１２５％ 過硫酸アンモニウム濃度”、　０．３＋＋ｇ／ｍＱ２、
泳動バッファー ラウリル硫酸ナトリウム　Ｉｇ／Ｒ トリス　　　　　　　　　３ｇＩＱ グリシン　　　　　　　１４．４ｇ／Ｑｐ）１８．３３
、染色液組成 りマシーブリリアントブルー　　　２ｇ／　Ｑ酢１ｉ１
　　　　　　　　　　　　９２ｔＱ／Ｑメタノール　　
　　　　　　　　４５４履Ｑ／１２４、脱色液組成 酢酸　　　　　　　　　　　　　７５ｍＱ／　Ｑメタノ
ール　　　　　　　　　　２５０■Ｑ／Ｑ５、電気泳動
試料の調製 試料液（例えば酵素分解した１％単離乳清蛋白質）１ｍ
ａを２０％トリクロル酢酸１ｍＡと混合し、室温で３０
分放置後、遠心分離（１，５００ｇ、３０分）シ、得ら
れた沈澱を１０％トリクロル酢酸１ｍＲに懸濁し、遠心
分離（１，５００ｇ、３０分）し、得られた沈澱を２％
ＳＤＳを含み、６Ｍ尿素を含む０．５Ｍ　トリス−塩酸
バッフｙ　　（ｐＨ８，０）　１　ｔｘ、Ｑに溶解し、
加熱して、２分間沸騰させ１次いで０．０５％ブロムフ
ェノールブルー１■ｇを添加し、得られた処理液のｌＯ
μΩを電気泳動試料とした。

第１図には市販の蛋白分解酵素による乳清蛋白質の分解
処理後のＳＤＳ電気泳動図が示される。

第１図のＳＯ５電気泳動図にはペプシン、トリプシン、
α−キモトリプシン、バンクレアチンおよびアマノＡ（
天野製薬製；アスペルギルス属糸状菌由来の蛋白分解酵
素）の各酵素及びペプシンとそれらの組合せの至適Ｐ）
ｌ下、３７℃における乳清蛋白質への４時間の反応の結
果が示されるが、ここではアマノＡ以外にトリプシン、
α−キモトリプシンの処理によってβ−Ｌｇの選択的酵
素分解が確認された。しかし、ペプシンにより前処理を
した場合は、これら酵素のβ−Ｌｇ選択的酵素分解能は
失なわれることも明らかとなった。

また、第２図はニュートラーゼ（ノボ社製；枯草菌由来
の蛋白分解酵素）によるｐＨ７，０，３５℃。

４時間の乳清蛋白質の酵素処理後のＳＯ３電気泳動図で
あるが、これによってニュートラーゼにβ−ｔ、ｇの選
択的酵素分解能のあることが明らかとなった・ また、第３図は第１図の酵素反応を２４時間行った後の
ＳＯ３＠気泳動図であるが、反応時間が２４時間にもな
ると、β−Ｌｇの選択的酵素分解能がなくなることも明
らかとなった。

また、第４図は放線菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇ
ｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素で処理した乳清蛋白
質のｓＤｓ電気泳動図であるが、反応時間が３時間にな
るとβ−Ｌｇが１選択的に分解されることが明らがとな
った・ これらの実験から、β−Ｌｇの選択的分解には有効酵素
による短時間処理が必要条件であることがわかる。

また、適切な選択分解能を得るには、７〜９の反応ｐＨ
１３０〜４０℃の反応温度が好ましい。ｐ）１７未満に
なるとβ−Ｌｇの分解がほとんど起らず、ｐＨ５以下で
は逆にβ−ｔ、ｇ以外の乳清蛋白質成分が分解される。

またｐＨが９を超えるとβ−ｔｇ選択分解能がなくなる
ことがあるので好ましくない、また。

反応温度が３０℃未満であるとβ−ｔ、ｇの分解は大巾
に遅れるので産業上適当でなく、４０℃を超えるとβ−
Ｌｇ選択分解能が失われるので好ましくない。

一般的に、所定の分解産物を得るための反応時間は使用
酵素の力価によって変り力価が高い場合は短く、低い場
合は長くなり、しかもこの力価とその単位は酵素メーカ
ーによって異なり、同一メーカーの同種の酵素でも常時
一定の力価であるとは限らない、従って同一メーカー、
異なるメーカーいずれの酵素を使うにしても、酵素反応
を時間で限定する場合は力価を揃える必要が生じる。し
かしながらメーカーが異なる場合は前記のように力価の
単位が異なるのでこれが困難となる。

本発明においては、酵素力価の変動に対応するため、分
解生成物の生成量によって処理時間をきめるのがよい。

ＳＯＳ電気泳動操作に対応して乳清蛋白質の分解によっ
て遊離してくる１０％ＴＣＡ可溶アミノ基含有化合物の
量を、標準物質としてグリシンを使用して測定するとβ
−Ｌｇの分解消失する反応時間４時間では使用酵素がア
マノＡの場合は基質蛋白質１ｇ当り２２０ｍｇであり、
またトリプシンとα−キモトリプシンの場合は１２０ｍ
ｇであって、この程度の分解が６時間まで続く。

モしてβ−Ｌｇの選択分解能が失われる時間の２４時間
ではアマノＡが４００＠ｇ、　　トリプシンとα−キモ
トリプシンが１７０Ｂのアミノ基含有化合物を遊離する
ことになる。

また、シグマ社のウシトリプシン（Ｓｉｇ■ａ社、Ｔ−
８００３）を使用する場合は、　ｐＨ８，０テ、３７℃
テ、３０分間の酵素反応でβ−Ｌｇはほとんど消滅して
しまう。

本発明において、乳清蛋白質中のβ−ｔ、ｇを酵素によ
り選択的に分解するにはこれに適した酵素としてアマノ
Ａで代表されるアスペルギルス属糸状菌由来の中性蛋白
分解酵素、あるいは枯草菌由来の中性蛋白分解酵素ある
いは放線菌 （Ｓｔｒａｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇｒｉｓｅｕｓ）由来の
蛋白分解酵素、あるいはトリプシンあるいはキモトリプ
シンのいずれも使用できる。

また、一般的に１反応系のｐＨは７〜９．温度は３０〜
４０℃の範囲で、３０分〜２０時間を維持するのがよい
。

また、酵素反応すなわち、β〜Ｌｇの分解反応の追跡に
は反応によって遊離して来る１０％ＴＣＡ可溶アミノ基
含有化合物の量を、標準物質としてグリシンを使用して
測定し所定の量が遊離した時点を反応の終点とする必要
がある。その量は使用酵素によっても異なるがアマノＡ
や枯草菌由来の中性酵素の場合は基質蛋白質１ｇ当り約
２２０ｍｇ、トリプシンとキモトリプシンの場合のそれ
は約１２０＋ａｇとなる。

次に本発明の実施例を示す。

実施例１ 単離乳清蛋白質の１重量％水溶液５Ωを調製し。

これにＩＮ水酸化ナトリウムを加えてｐＨ７，５となし
、大型除菌フィルターを通して蒸気殺菌済みの実容量５
Ｑのジャーファメンターに注入した。一方、アスペルギ
ルス属糸状菌由来の中性蛋白分解酵素「アマノＡＪ（天
野製薬製）を上記基質蛋白質に対して１重量％になるよ
うに計りとりこれを少量の水に溶解して小型除菌フィル
ターを通して殺菌済みの三角フラスコに採取した。これ
を前記ジャーノアメンタ−中の乳清蛋白質液に無菌的に
全量加えて攪拌しつつＰＨ７，５，３７℃にて酵素反応
を行った。

反応の追跡は前記のように遊離したアミノ基含有化合物
の量の経時的な測定を行い、この方法としてグリシンを
標準物質においたニンヒドリン比色法を採用、基質蛋白
質１ｇ当リアミノ基含有化合物が２２０Ｉ１ｇ遊離した
時点で反応を中止した（反応開始後５時間）、これがβ
−ｔ、ｇ分解の最適点であることをＳＯ５電気泳動法に
よって確認した。

得られた反応液を噴震乾燥してβ−Ｌｇ画分の８３％が
低分子化されたβ−Ｌｇ低減乳清蛋白質４９ｇを得た。

実施例２ 実施例１と同様に調製殺菌したジャーノアメンタ−中の
１％乳清蛋白質液５Ｑに基質に対して１重量％の量に相
当する枯草菌由来の中性蛋白分解酵素「ニュートラーゼ
」（ノボ社製）の除菌水溶液全量を加え、攪拌しつつｐ
Ｈ７，０，４０℃で酵素反応を行った。そして反応追跡
操作を実施例１と同様に行いアミノ基含有化合物が基質
１ｇ当り２２０■ｇ遊離した時点で反応を止め（反応開
始後４時間）、噴霧乾燥を行い、β−１４の８０％が分
解されたβ−Ｌｇ低減乳清蛋白質４７ｇを得た。

実施例３ 実施例１，２と同様に潤製殺菌したジャーノアメンタ−
中の１％乳清蛋白質液５２に基質に対して１重量％に相
当する量のトリプシンの除菌水溶液全量を加え、攪拌し
つつｐＨ７，５，３７℃で酵素反応を行いアミノ基含有
化合物が基質１ｇ当り１２０−ｇ遊離した時点で反応を
止めた（反応開始後４時間）、この反応物を噴霧乾燥し
てβ−Ｌｇの８７％が分解されたβ−ｔｇ低減乳清蛋白
質４８ｇを得た。

実施例４ 乳清蛋白質濃縮物７６１．８４ｋｇ（蛋白質；　１．３
９８ｋｇ）と乳清蛋白質濃縮物３５６．６３ｋｇ（蛋白
質；　２−２２−２３ｌを混合し、加水して蛋白質５％
溶液７４．３８ｋｇを得た。

これを１０％水酸化ナトリウムにてｐＨ８，０に調整し
、これにウシトリプシン（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ−８００３
）１．２ＸＩＯ”　ＢＡＥＥ　ｕｎｉｔを添加し、ＰＨ
８，０，３７℃で攪拌しつつ９０分間酵素反応を行った
。

酵素反応０〜９０分の間の水酸化ナトリウム消費量（＋
ｗｏｌ／ｋｇ蛋白質）を測定し、その結果を第５図に示
した。

第５図から酵素反応は９０分でほとんど終了するのが分
る。

また、酵素反応０〜９０分間のＳＯ５電気泳動分析を行
い、その結果を第６図に示した。

第６図から酵素反応６０分後にβ−Ｌｇは選択的に分解
されているのが分る。

実施例５ 単離乳清蛋白質の０．５重量％水溶液ＩＱを調製し、こ
れをＩＮ水酸化ナトリウムにてＰ）ｌ　８．０とし、こ
れにウシトリプシン（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ−８００３）２
．５　Ｘ１０’　ＢＡＥＥ　ｕｎｉｔ／ｇ単離乳清蛋白
質を添加し、　ＰＨ８，０，３７℃で攪拌しつつ２時間
酵素反応を行った。

酵素未反応液２０μＱ及び酵素反応液２０μＱをＨＰＬ
Ｃにかけた。

）ＩＰＬｃ（Ｈｉｇｈ　Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｌｉ
ｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）の条件は次の
通りである。

カラム：　ＴＳＫ　Ｇ２０００５ｖＸＬ（東ソー）移動
相；　０．１Ｍ硫酸ナトリウムを含む５０■阿リン酸ナ
トリウムバツフアー、ｐＨ６，８ 流速　；　１履Ｑ／園ｉｎ 検出方法；紫外吸収（λ＝　２８０ｎ腫）試料濃度；単
離乳清蛋白質の場合０．５％、乳清蛋白質として０．４
５％ 試料液量；２０μ党 カラム温度；２５℃ ）ＩＰＬＣ分離のクロマトグラムは第７図に示される。

（ａ）は酵素未反応液のものを示し、（ｂ）は酵素反応
液のものを示す。

第７図からウシトリプシン（Ｓｉｇｍａ社、Ｔ−８００
３）による２時“間反応によって完全にβ−Ｌｇが選択
的に分解されているのが分る。

実施例６ 本実施例においては、ＰＣＡ反応（１，Ｍｏｔａ　ａｎ
ｄ　Ｄ。

Ｖｏｎｇ、１９６９．Ｌｉｆｅ　５ｃｉｅｎｃｅ　８８
１３）の抗原抗体反応による １、　β−り、の選択的分解 ２．　α−ラクトアルブミン（以下α−Ｌａと記す）の
残存 の確認を行った。

１、　　＠白質を含む試料の調製 単離乳清蛋白質の１重量％水溶液ＩＱを調製し、これを
ＩＮ水酸化ナトリウムにてＰＨ８，０とし、これにウシ
トリプシン（Ｓｉｇｊｍａ社、　Ｔ−８００３）１０’
　ＢＡＢＥｕｎｉｔ／１００ｍｇ単離乳清蛋白質を添加
し、ＰＨ８，０，３７℃で攪拌しつつ２時間酵素反応を
行った。

酵素未反応液及び酵素反応液を蛋白質を含む試料とした
。

２、受身皮膚アナフィラキシ−（ＰａｓｓｉｖｅＣｕｔ
ａｎａｏｕｓ　Ａｒａｐｈｙｌａｘｉｓ　：　ＰＣＡ）
育毛を刈ったラット（雄、７週齢）を用意する。

一方、０．１５Ｎ塩化ナトリウムを含む１０ｍＭリン酸
ナトリウムバッファー（以下ＰＢＳと記す；　Ｐｈｏｓ
ｐｈａｔｅＢｕｆｆｅｒｅｄ　５ａｌｉｎｅ）を用いて
、マウス抗β−Ｌｇ血清ノ１７２希釈系列（１／１０．
１／２０．１／４０．１／８０．　）及びマウス抗ａ−
Ｌ、ａ血清の１／２希釈系列（１／１０．１／２０．１
／４０．１／８０、）を作り、各希釈血清５０ｊｔＱを
上記のラットの背部に皮肉注射し、２４±２時間感作し
。

１で得た蛋白質を含む試料（蛋白質１ｍｇを含有）を含
む１％エバンスブルー液０．５ｒａ（１を尾静脈より注
射し、３０分後層殺し、背部皮膚をはいで紫斑を観察し
た。

結果は第８図及び第９図に示される。

第８図は酵素未反応液の反応を示し、第９図は酵素反応
液の反応を示している。

第８図から酵素未反応液にはα−Ｌａ及びβ−Ｌｇのい
ずれも多量含まれているのが分る。

また、第９図からは酵素反応液には多量のα−Ｌ８が残
っているが、β−Ｌｇはほとんど分解され、ごく少量残
存するのが分る。

実施例７ 本実施例においては、中和ＰＣＡ法によって、抗原抗体
反応による １、　β−ｔ、ｇの選択的分解 ２、　α−Ｌａの残存 の確認を行った。

１、蛋白質を含む試料の調製 実施例６と同様にして、酵素未反応液及び酵素反応液を
蛋白質を含む試料とした。

２、　中和ＰＣＡ法 育毛を刈ったラット（′ｍ、７週齢）を用意する。

２００　ｕ　ｇ乳清蛋白質を含む各試料又はＰＢＳの各
ＩＶＯＩとマウス抗β−ｔ、ｇ血清又は抗α−Ｌａ血清
の各１ｖｏｌを混合し、２５℃、２時間中和反応を行い
、混合液の１／２系列希釈（１／１０．１／２０．１／
４０．１／８０）液５０μａを育毛をかったラット（雄
、７適齢〕の背部に皮肉注射し、２４±２時間感作し、
ｌａｇ　β−Ｌｇ又はα−Ｌａを含む１％エバンスブル
ー液０．５ｍｍを尾静脈より静注し、３０分後に層殺し
、背部皮膚をはいで、内側の紫斑を観察した。

結果は第１０図及び第１１図に示される。

第１０図はマウス抗α−Ｌａ血清による中和反応後α−
Ｌａによる抗原抗体反応をＩｉｌ！察した図で、第１１
図はマウス抗β−ｔ、ｇ血清による中和反応後β−Ｌｇ
による抗原抗体反応を観察した図である。

第１０図から、酵素未反応液及び酵素反応液のいずれに
もα−Ｌａは多量の含まれているのが分り、第１１図か
らβ−ｔ、ｇは酵素反応液にはほとんど含まれていない
のが分る。

（発明の効果） 本発明においてはβ−ｔ、ｇ以外の乳清蛋白質１例えば
α−Ｌａや免疫グロブリン、ウシ血清アルブミンなどは
殆ど分解されることがなくβ−ｔ、ｇのみが選択的に分
解されて非アレルゲン性の低分子ペプチドに変換される
。そしてこのペプチドには苦味等の風味は存在していな
い、また、β−Ｌｇ以外の乳清蛋白質は未分解であるの
で乳化力が保持されておりさらに、部分分解物が経口摂
取された場合、通常難消化性であるβ−Ｌｇがすでに分
解されているので、生体内での消化吸収率が向上するな
ど種々の利点を有しており、本発明の処理物は育児用食
品素材としてきｂめて有望である。

【図面の簡単な説明】

第１図は市販蛋白分解酵素による乳清蛋白質の分解後の
ＳＤＳ電気泳動図で、第２図はニュートラーゼによる乳
清蛋白質の酵素処理後のＳＯ５電気泳動因で、第３図は
第１図の酵素反応を２４時間行った後のＳＤＳ電気泳動
図動因第４図は放線菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇ
ｒｉｓｅｕｓ）由来の蛋白分解酵素で処理した乳清蛋白
質のＳＤＳ電気泳動図動因る。 第５図は実施例４においてウシトリプシンで乳清を０〜
９０分間酵素処理した分解曲線を示し、第６図は分解時
の乳清蛋白質のＳＤＳ電気泳動図動因る。 第７図は実施例５においてＨＰＬＣにかけた図で、（ａ
）は酵素未反応液のもの、（ｂ）は酵素反応液のものを
示す。 第８図は実施例６で酵素未反応液をＰＣＡ法で背部皮膚
の紫斑をａ察した図で、第９図は同様に酵素反応液でａ
察した図である。 第１０図は実施例７で、酵素未反応液、酵素反応液及び
ＰＢＳにマウス抗α−Ｌａ血清を添加、中和反応させた
後α−Ｌａを静注し、背部皮膚の紫斑を観察した図で、
第１１図は酵素未反応液、酵素反応液及びＰＢＳにマウ
ス抗β−ｔ、ｇ血清を添加、中和反応させた後β−Ｌｇ
を静注し、背部皮膚の紫斑をａ察した図である。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）牛乳乳清蛋白質水溶液に動物由来又は微生物由来
   の蛋白分解酵素を添加し、β−ラクトグロブリンを選択
   的に酵素分解することを特徴とする牛乳乳清蛋白質中の
   β−ラクトグロブリンの選択的酵素分解方法。
2. （２）牛乳乳清蛋白質水溶液に動物由来又は微生物由来
   の蛋白分解酵素を添加し、ｐＨ７〜９、３０〜４０℃、
   ３０分〜２０時間処理し、β−ラクトグロブリンを選択
   的に酵素分解することを特徴とする牛乳乳清蛋白質中の
   β−ラクトグロブリンの選択的酵素分解方法。
3. （３）動物由来の蛋白分解酵素がトリプシン、α−キモ
   トリプシンからなる群から選択された１種以上である請
   求項１又は２の牛乳乳清蛋白質中のβ−ラクトグロブリ
   ンの選択的酵素分解方法。
4. （４）微生物由来の蛋白分解酵素がアスペルギルス属糸
   状菌由来の蛋白分解酵素、枯草菌由来の蛋白分解酵素、
   放線菌由来の蛋白分解酵素からなる群から選択された１
   種以上である請求項１又は２の牛乳乳清蛋白質中のβ−
   ラクトグロブリンの選択的酵素分解方法。