JPH02215351A - オキアミリン脂質の分取方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 「産業上の利用分野」 本発明は、オキアミからリン脂質を分離抽出する方法、
特に、生体内において重要な生理活性を示すホスファチ
ジルコリン及びホスファチジルエタノールアミンを単離
する方法であり、こうして分取されたホスファチジルコ
リン及びホスファチジルエタノールアミン等が、食品と
してまたは薬品として利用可能なものである点に特徴を
有する技術に関する。

「従来技術」 最近、高齢化社会を迎えて、老人性痴呆症が大きな社会
問題になっている。老人性痴呆症は、神経系の障害を原
因として起こるアルツハイマー型痴呆症と、脳血管障害
を原因として起こる脳血管性痴呆症との二つの型に大別
できる。前者のアルツハイマー型痴呆症の場合には、脳
内の神経化学的な変化として、神経伝達物質であるアセ
チルコリンの生産が著しく低下していることが知られて
おり、この病気の予防や治療法として、低下したコリン
系の代謝を補給することにより生理機能を回復せんとす
ることが行なわれている。例えば、ＰＣＴ特許出願公表
昭５６−５００３７４号「レシチンを投与することによ
り病気を治療するための方法および組成物」、特開昭５
９−１６７５１４号「脳機能亢進剤組成物」、特開昭６
０−２１４７３４号「神経障害及び走化の治療組成物お
よび治療方法」等がそれである。

即ち、コリン含有リン脂質であるホスファチジルコリン
を摂取することにより、脳内にアセチルコリンを供給し
、これによりアルツハイマー型痴呆症やその他の神経障
害の予防と治療が期待されている。

また、リン脂質の一種であるホスファチジルエタノール
アミンはＳ−アデノシルメチオンニンからのメチル基移
転反応によりホスファチジルコリンに変換される。従っ
て、当該ホスファチジルエタノールアミンもアルツハイ
マー型痴呆症やその他の神経障害の予防と治療剤として
の利用が期待されている。

本発明者は、特に、グリセロリン脂質である、これらホ
スファチジルコリン及びホスファチジルエタノールアミ
ンといったリン脂質に注目し、これを食品や薬品の原料
として利用が可能な状態で工業的に分取する方法を研究
開発せんとしたものである。

従来、天然物からリン脂質を工業的に精製する場合の原
料といえば大豆が一般的であり、大豆リン脂質は主に健
康食品等として、商品化されている。従来の大豆リン脂
質精製法は、まず原料大豆をクロロホルム・メタノール
系の溶媒で総脂質を抽出し、次に当該総脂質をアセトン
で分画し、可溶性区分と不溶性区分に分ける。当該アセ
トン可溶性区分には中性脂質、コレステロール、遊離脂
肪酸等が分画されており、またアセトン不溶性区分には
リン脂質が分画されている。そこで、次に、アセトン不
溶性区分を９０％エタノールで処理して、アルコールに
溶けるホスファチジルコリンと不溶性のホスファチジル
エタノールアミンとを得る。

「発明が解決しようする問題点」 しかし、上記のような、大豆を原料としたリン脂質の精
製法の場合には、得られるホスファチジルコリン及びホ
スファチジルエタノールアミンとも純度が７０％〜８０
％程度であり、９０％以上の高純度の精製物を得ること
はなかなか困難であった。また、上記のように、クロロ
ホルムメタノールを使用する方法は、いかに精製分画し
ても有害成分が残留している恐れがあるため、食品には
使用しにくいという問題があった。

本発明者は、オキアミが豊富な蛋白質資源として注目さ
れているが、腐敗し易く、水分が多過ぎろことから保存
と運送にコストがかかり過ぎるとして、その有効な利用
法が確立していないこと、また、オキアミにはリン脂質
が多く含んでいるが、この有効成分であるリン脂質に着
目して付加価値が高く経済性のある高額な機能性食品ま
たは医薬品等に利用しようとする技術開発が、いまだな
されていないことに気が付いた。

そこで本発明者°は、未利用の水産資源であるオキアミ
を原料として、これから有用なリン脂質を高純度で得る
ことができれば、オキアミの有効利用法として非常に有
益であると考え、その精製法の研究開発を進め、完成し
たのが本発明である。

即ち、本発明は、オキアミを原料として、総脂質を分画
し、得られた総脂質から高純度のホスファデジルコリン
及びホスファチジルエタノールアミン等を精製単離する
ことを特徴とする分取方法と、そうして得られた生理活
性物質を用いて脳機能改善効果を有する機能性食品及び
脳機能改善剤として利用する技術である。

ｒ問題点を解決する手段」 本発明は、上記問題点を解決するため、次のような手段
を採用したものである。

本発明は、生オキアミを真空凍結乾燥法により脱水した
うえ、エタノールで総脂質を抽出し、得られた総脂質を
、エタノール系溶媒、アセトン系溶媒、またはヘキサン
系溶媒のいずれかを溶離液となし、シリカゲルを充填剤
として、吸着カラムクロマトグラフィーを用いてリン脂
質を分画し、これをフラクションコレクターにより単離
するようにしたことを特徴とするオキアミリン脂質の分
取方法である。

第一工程：船内急速凍結生オキアミのブロック中には、
９０％以上が水分であるため、脱水方法が問題になる。

そこで本発明では、吸着カラムクロマトグラフィーを用
いた分取の前処理として、真空凍結乾燥装置を用いて脱
水し乾燥オキアミとする。このとき水分含量が６％以下
になるように脱水乾燥するのが望ましい、すると、水溶
性蛋白質のエタノール抽出物への混入が抑制できるので
、分別成分の純度を高めることができる。

第二工程：第一工程により得られた乾燥オキアミをエタ
ノールでホモジナイズして総脂質を抽出する。

第三工程二次に総脂質からエタノールを出来るだけ除去
したうえ、アセトン系溶媒、またはヘキサン系溶媒のい
ずれかを溶離液となし、可溶区分と不溶区分とに分画す
る。例えば、アセトン系溶媒の場合には、リン脂質の大
部分は不溶区分にあるので、これから溶媒を洗浄すれば
、粗リン脂質が得られる。

第四工程：この粗リン脂質をエタノール系溶媒、アセト
ン系溶媒、またはヘキサン系溶媒のいずれかを溶離液と
なし、吸着カラムクロマトグラフィーを用いてホスファ
チジルコリンやホスファチジルエタノールアミンに分画
し、これからフラクションコレクターにより各リン脂質
成分を９０％以上９５％前後の高純度にて単離する。

本発明は、以上のようにして高純度のホスファチジルコ
リンもしくはホスファチジルエタノールアミンなどのオ
キアミリン脂質を分取する方法である。

次は、上記の方法でオキアミより単離した高純度のホス
ファチジルコリンもしくはホスファチジルエタノールア
ミンがいずれも脳機能を改善する生理機能活性物質であ
るころに着目し、当該オキアミより単離した高純度のホ
スファチジルコリンもしくはホスファチジルエタノール
アミンまたはこれらの誘導体のうち少なくとも一種以上
を有効成分として食品基材に混入させるようにして脳機
能改善効果を有する機能性食品とする。

また、オキアミより単離したホスファチジルコリンもし
くはホスファチジルエタノールアミンまたはこれらの誘
導体のうち少なくても一種以上を有効成分として含有さ
せるようにして脳機能改善剤となす。ここで、脳機能改
善剤は、錠剤、カプセル、顆粒、液状などの形態として
、薬品化することができるものである。

アルツハイマー型痴呆症の場合には、脳内の神経化学的
な変化として、神経伝達物質であるアセチルコリンの生
産が著しく低下していることが知られており、この病気
の予防や治療法として、低下したコリン系の代謝を補給
することにより生理機能を回復せんとすることが行なわ
れている。

特に、人の場合、コリンまたはコリンに解離する天然産
出化合物レシチンを経口投与した場合、脳アセチルコリ
ンの合成および放出を増進するのに十分な容量の血液コ
リン量の増加をもたらすとともに、脳を髄液のコリン量
も増加する生理機能のあることが解っている。

従って、オキアミからリン脂質であるホスファチジルコ
リンをいかに効率良く、しかも安全性を保って抽出する
か、それを食品または薬剤として摂取することにより、
脳内にアセチルコリンを供給し、これによりアルツハイ
マー型痴呆症やその他の神経障害の予防と治療を期待し
ようとゆうのが本発明である。

「作　用」 「実施例」 以下、本発明を実施例に基すき詳細に説明する。

〈実施例１．〉 船内急速凍結生オキアミ２０Ｋｇを真空乾燥装置を用い
て水分含量４％前後になるまで乾燥させて乾燥オキアミ
２．２Ｋｇを得た。この原料である乾燥オキアミの脂質
組成をイアトロスキャン法で分析した結果は、表１．の
通りであった。

次に、こうして得た乾燥オキアミ２ｋｇをエタノール４
０ｋｇでホモジナイズして総脂質の抽出を行なった。そ
の後、再抽出はエタノール２０ｋｇで同様に行なった。

抽出物である総脂質を濃縮して、できるだけエタノール
を除去した後、当該総脂質をアセトンに溶解し、可溶区
分と不溶区分に分画する。すると大部分のリン脂質は不
溶区分に区画されろ、そこで、当該不溶区分に分画され
た物質にアセトン洗浄を数回繰り返して、粗リン脂質４
０８ｇを得た。

表１．乾燥オキアミの脂質組成 次に、前記粗リン脂質４００ｇをエタノールに２０００
ｍβに溶解し、全自動分取型高速液体クロマトグラフィ
ーに装着した分取カラム（カラム長さｘカラム径：　５
０ｃｍＸ５０ｍｍ、断面積１９．６ｃｍ’）に粒径１０
μｍの球状シリカゲル（吸着剤）を充填したものに、１
バツチ当たり２０ｍ℃を自動注入した。溶離液はエタノ
ール１００％を流速３０ｍβ／　ｍ　ｔ　ｎで流し、カ
ラム恒温槽は４０℃で、ピーク検出は紫外部吸収検出器
（２０５μｍ）を用いてモニターしたところ、第１図に
示したクロマトグラムが得られたので、最初のピークの
分画区分をＡとなし、２番目の大きなピークの分画区分
をＢとしてフラクションコレクターを用、いて分取した
０分画区分Ｂのホスファチジルコリンの純度はイヤトロ
スキャン法で分析したところ９８％以上であった。１バ
ツチのサイクルタイムは３０分で、原料溶液を３０分毎
に自動充填して１００サイクルで約５０時間装して、乾
燥オキアミ２ｋｇから高純度ホスファチジルコリンを約
２３９ｇ分取した。

また、分画区分Ａから同様に純度９５％以上の高純度の
ホスファチジルエタノールアミンを約４５ｇ分取した。

〈実施例２．〉 ウエクスラ一方式の記憶ないし知能指数試験なしたとこ
ろ記憶指数１２３であった記憶喪失にかかっている患者
に、オキアミのから第１実施例にて分取した高純度ホス
ファチジルコリン（純度９８％）を６週間に渡って１日
３回食事毎に１０ｇづつ食品に混入して経口投与した。

試験治療前と高純度ホスファチジルコリン摂取終了の６
週間後に、患者からコリン測定用血液資料を採取してお
き、血漿資料を分離し、凍結し、そしてそのコリン含量
について慣用の放射性酵素法により分析した。その結果
は、試験治療前採取した血液中の血漿コリン量が１３．
４±１．２ナノモル／ｍでであったのに対し、高純度ホ
スファチジルコリン投与から４時間後に得られた血液中
の血漿コリン量が３１．３±２．５ナノモル／ｍＡに増
加していた（Ｐ＜０．０１）。

しかも、高純度ホスファチジルコ、リン摂取の６週間後
には、患者の記憶指数は、１４２に向上していた。

「効　果」 第１請求項に係る保護を受けようとする発明は、未利用
の水産資源であるオキアミを原料として、これから有用
なホスファチジルコリン及びホスファチジルエタノール
アミンを９０％以上という高純度で精製単離することが
できる分取方法である。この分取方法は、精製単離成分
が高純度であるというだけでなく、その精製過程におい
て、毒性を持った溶剤などが一切使用されていないので
、安全性が高く、食品や薬品などにも安心して利用でき
る点に特徴がある。

また、第２請求項、第３請求項に係る特許を受けようと
する発明は、そうして得られたオキアミリン脂質である
ホスファチジルコリン及びホスファチジルエタノールア
ミンには、アルツハイマー病の予防と治療が期待できる
脳機能を改善するという生理機能を有しているので、こ
れを利用して脳機能改善効果を有する機能性食品及び脳
機能改善剤となすことができる。

第１図は本発明に係るクロマトグラムが得られた組成成
分の分画衣である。

【図面の簡単な説明】

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）生オキアミを真空凍結乾燥法により脱水したうえ
   、エタノールで総脂質を抽出し、得られた総脂質を、エ
   タノール系溶媒、アセトン系溶媒、またはヘキサン系溶
   媒のいずれかを溶離液となし、シリカゲルを充填剤とし
   て、吸着カラムクロマトグラフィーを用いてホスファチ
   ジルコリンとホスファチジルエタノールアミンを分画し
   、これをフラクションコレクターにより単離するように
   したことを特徴とするオキアミリン脂質の分取方法。
2. （２）オキアミより単離したホスファチジルコリンもし
   くはホスファチジルエタノールアミンまたはこれらの誘
   導体のうち少なくても一種以上を有効成分として食品基
   材に混入させるようにしたことを特徴とする脳機能改善
   効果を有する機能性食品。
3. （３）オキアミより単離したホスファチジルコリンもし
   くはホスファチジルエタノールアミンまたはこれらの誘
   導体のうち少なくても一種以上を有効成分として含有し
   構成させるようにしたことを特徴とする脳機能改善剤。