JPH0134560B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は酵素洗剤組成物に関する。特に本発明
は、脂肪分解酵素を含有する酵素洗剤組成物に関
する。 酵素洗剤組成物は当業界で公知である。洗剤組
成物の配合用に多種類の酵素が提案されている
が、主としてプロテアーゼ及びアミラーゼが注目
されている。リパーゼも洗剤組成物用酵素として
考えられているが、一般的洗剤組成物用リパーゼ
に直接係る従来技術は比較的少ない。BP1372034
には、シユードモナス・スタツツエリ
（Pseudomonas stutzeri）ATCC19.154のような
シユードモナス（Pseudomonas）属の微生物よ
り産生されたリパーゼを、特定のノニオン洗剤活
性物質と任意成分として特定のアニオン洗剤活性
化合物を含む衣類浸漬用（soaking fabrics）洗
剤組成物中に使用する旨が開示されている。しか
しながら、“任意のかつ何れの洗剤組成物に脂肪
分解酵素を添加しても、（記載した如く）酵素活
性及び洗浄効率の点で満足かつ許容され得る洗剤
組成物が得られる訳ではない”ことが明らかであ
つた。洗剤組成物の各種成分が脂肪分解酵素に対
してマイナスの影響を示すことが知見された。 BP1442418及び1442419には二段階洗濯方法が
記載されている。該方法は、リパーゼ含有液に浸
漬させる工程とその後の洗剤含有洗浄液で洗濯す
る工程とから成る。 BP1442419に記載の発明においては、“リパー
ゼ含有液”はクレームされた１種もしくはそれ以
上のリパーゼと水溶性ホウ酸ナトリウム塩
（borax salt）とから構成されている。所要によ
り慣用の洗浄性界面活性剤またはビルダーを含有
させても良い旨が記載されているが、界面活性剤
またはビルダーの存在下での有効性は立証されて
いない。BP1442418の“リパーゼ含有液”は、ク
レームされた１種もしくはそれ以上のリパーゼと
ホウ酸トナリウムとCa²⁺もしくはMg²⁺イオンと
から構成されている。界面活性剤も記載されてい
るが、界面活性剤溶液における有効性を示す証拠
は提示されていない。Ca²⁺及び／又はMg²⁺イオ
ンと結合するビルダーはこの洗剤液から明白に排
除されている。何れにしても、上記した両発明に
記載の洗濯方法では別個に調製された２種の材料
が必要であり、実用性に乏しい。 Journal of Applied Biochemistry ２
（1980）、p.218〜229のAndreeらの文献には、洗
剤成分としてのリパーゼに関する研究報告が記載
されている。試験した２種の市販のリパーゼ（膵
リパーゼとリゾプスリパーゼ）は典型的な洗浄性
アニオン及びノニオン界面活性剤の混合物を含む
活性系の溶液中で不安定であるとの結論が記載さ
れている。リパーゼはアニオン洗剤の存在下で不
活性化され、その程度は膵リパーゼがリゾプス
（Rhizopus）リパーゼよりやや小さいと推定され
ると記載されている。Andreeらは更に、試験し
たリパーゼよりノニオン洗剤調製物の洗浄作用が
改善されるが、前記改善は洗剤調製物中のノニオ
ン活性物質の濃度増加に伴う旨の結論を下してい
る。 最近公開されEP0130064には、洗剤添加剤とし
てフサリウム・オキシスポルム（Fusarium
oxysporum）由来のリパーゼを使用する旨が記
載されている。この明細書に例示されている洗剤
組成物はノニオン洗剤とアニオン洗剤の混合物、
或いはノニオン洗剤のみから成る。 上記したように、何れの従来技術も、洗剤組成
物に特定のリパーゼを使用すること或いはリパー
ゼを配合させるために特定の洗剤組成物及び／又
は洗濯系（wash regimes）を調製することを教
示しているに過ぎない。 本発明の目的は、リパーゼを配合させることに
より全体的な洗浄性能が改善されるとともに洗浄
力が大きく改善されるリパーゼ含有洗剤組成物を
提供することにある。 本発明者らは、洗剤活性物質としてアニオン合
成洗剤とビルダーとして水溶性有機及び／又は、
無機ビルダー塩を含むビルト洗剤組成物中に或る
種のリパーゼを配合（inclusion）させると洗浄
力が全体的に向上することを知見した。 従来技術とは対照的に、本発明により提供され
るリパーゼ含有洗浄組成物ではより低温でも通常
通りに洗濯を実施することができる。従つて、洗
浄組成物を特別に注意深く選択したり、特定の洗
濯或いは浸漬工程を行わずに、またはリパーゼ含
有組成物で衣類を長期間に処理しなくとも、リパ
ーゼの利点が得られる。 本発明で使用され得るリパーゼには、シユード
モナス・フルオレツセンス（Pseudomonas
fluorescens）IAM1057より産生されたリパーゼ
の抗体と正の免疫学的交差反応（positive
immunological cross−reaction）を示すリパー
ゼが包含される。このリパーゼ及びその精製方法
については、1978年２月24日付で公開された特開
昭53−20487号公報に記載されている。このリパ
ーゼは、商品名リパーゼＰ“Amano”として天野
製薬(株)より市販されている（以下、これを
“Amano−Ｐ”と略記する）。本発明のリパーゼ
は、オクテルロニー（Acta.Med.Scan.、133、
p.76−79（1950））による標準的な公知の免疫拡散
法に従つて、Amano−Ｐ抗体と正の免疫学的交
差反応を示すものでなければならない。 抗血清は次のようにして作成される。 等容量の0.1mg／ml抗原と（完全もしくは不完
全）フロイントアジユバントをエマルジヨンが得
られるまで混合する。下記の順序でエマルジヨン
サンプル２mlを２羽の雌家兎に注入した。 ０日目：完全フロイントアジユバント中抗原 ４日目：完全フロイントアジユバント中抗原 32日目：不完全フロイントアジユバント中抗原 60日目：不完全フロイントアジユバント中抗原ブ
ースター 所要の抗体を含む血清を、67日目の採血した凝
固血液を遠心して得た。 抗−Amano−Ｐ−リパーゼ抗血清の力価は、
オクテルロニー法に従つて抗原及び抗血清を系列
希釈しながら沈降反応を観察することにより決定
される。抗血清の2⁵希釈度は、0.1mg／mlの抗原
濃度で目に見える沈降物を生ずる希釈度である。 上記した如くAmano−Ｐ抗体と正の免疫学的
交差反応を示すリパーゼが全て、本発明のリパー
ゼである。リパーゼの典型的な例が、Amano−
Ｐリパーゼ、シユードモナス・フラギ
（Pseudomonas fragi）FERM P1339由来のリパ
ーゼ（商品名Amano−Ｂ）、シユードモナス・ニ
トロレダクエンス変種リポリテイカム
（Pseudomonas nitroreducens var.
lipolyticum）FERM P1338由来のリパーゼ（商
品名Amano−CES）、クロモバクター・ビスコス
ム（Chromobacter viscosum）例えばクロモバ
クター・ビスコスム変種リポリテイカム
（Chromobacter viscosum var.lipolyticum）
NRRLB3673由来のリパーゼ（東洋醸造(株)より市
販）、クロモバクター・ビスコスム
（Chromobacter viscosum）リパーゼ（米国の
US Biochemical Corp.及びオランダのDiosynth
Co.より市販）、並びにシユードモナス・グラジオ
リ（Pseudomonas gladioli）由来のリパーゼで
ある。 本発明の好ましいリパーゼは、東洋醸造(株)より
市販されているクロモバクター・ビスコスム変種
リポリテイカム（Chromobacter viscosum
var.lipolyticum）NRRLB3673由来のリパーゼ或
いはシユードモナス・グラジオリ
（Pseudomonas gladioli）由来のリパーゼの抗体
と正の免疫学的交差反応を示すものである。 上記した好ましいリパーゼとしては、Amano
−Ｐ、Amano−Ｂ、Amano−CES、東洋醸造(株)
より市販されているクロモバクター・ビスコスム
（Chromobacter viscosum）例えばクロモバクタ
ー・ビスコスム変種リポリテイカム
（Chromobacter viscosum var.lipolyticum）
NRRLB3673由来のリパーゼ、米国のUS
Biochemical Corp.及びオランダのDiosynth Co.
より市販されているクロモバクター・ビスコスム
（Chromobacter viscosum）リパーゼ並びにシユ
ードモナス・グラジオリ（Pseudomonas
gladioli）由来のリパーゼが例示される。 本発明のリパーゼは洗剤組成物中に配合され、
その配合量は最終洗剤組成物が100〜0.005LU／
mg、好ましくは25〜0.05LU／mgの脂肪分解酵素
活性を有する量である。 リパーゼ単位（LU）は、30℃、PH＝9.0の条件
下で１分間あたりに1μmolの滴定可能な脂肪酸を
生ずるリパーゼの量である。なお、基質は５ｍ
molのトリス緩衝剤中に13ｍmol−Ca²⁺及び20ｍ
mol−NaClの存在下でオリーブ油3.3wt％及びア
ラビアゴム3.3wt％を含むエマルジヨンである。 勿論、上記リパーゼの混合物も使用可能であ
る。リパーゼは未精製物のままでも、また例えば
フエニルセフアロース充填カラム法の如き公知の
吸着法により精製した精製物も使用されうる。 本発明のリパーゼを配合する洗剤組成物は、洗
剤活性物質として少なくとも１種のアニオン合成
洗剤活性物質のみを含む。この種の洗剤活性化合
物も当業者には公知であり、その適切な例が
Schwartz、Perry及びBerch著“Surface−
Active Agents and Detergents”、vol.
（1949）及びvol.（1958）に詳しく記載されて
いる。 洗剤組成物中に占めるアニオン洗剤活性物質の
量は１〜40重量％であり、通常２〜35重量％、好
ましくは５〜30重量％である。 洗剤組成物が更に、１〜55重量％、好ましくは
５〜30重量％の１種もしくはそれ以上の水溶性の
有機及び／又は無機ビルダー塩を含み得る。典型
的な前記ビルダー塩として、オルトー、ピローお
よび（トリ）ポリリン酸のアルカリ金属塩、アル
カリ金属炭酸塩、アルカリ金属クエン酸塩、アル
カリ金属ニトリロトリ酢酸塩等及び各種水溶性ビ
ルダー塩の混合物が例示される。好ましくはトリ
ポリリン酸ペンタナトリウム及び／又は炭酸ナト
リウムが使用される。更に組成物が１〜35重量％
の漂白剤または漂白剤とその活性剤から成る漂白
系を含んでいてもよい。この点に関して、本発明
のリパーゼは、本発明以外の他のリパーゼに比べ
て組成物中に存在する漂白剤もしくは漂白系によ
り受ける影響がかなり少ないという驚くべき知見
も得られた。 組成物が、発泡剤、消泡剤、腐食防止剤、汚れ
浮遊剤（soil−suspending agents）、金属イオン
封鎖剤、汚れ再付着防止剤、香料、着色剤、酵素
安定化剤、漂白剤等を含んでいてもよい。また組
成物がリパーゼ以外の酵素、例えばプロテアー
ゼ、アミラーゼ、オキシダーゼ及びセルラーゼを
含んでいてもよい。この点に関して、本発明のリ
パーゼの場合クリーンなモデルシステムにおいて
プロテアーゼの存在下ではその活性が急速に消失
するが、洗濯機内の実際の洗濯条件下ではプロテ
アーゼの存在下でもリパーゼによる実質的な作用
が得られるという驚くべき知見が得られた。 本発明の組成物は任意の所望の形態、例えば粉
末、棒、ペースト、液体等の形態で調製され得
る。 前記したように、本発明の組成物は全体的に優
れた洗浄作用、特により低温でその作用を示す。
従来リパーゼは特殊な条件下で特定の効果しか示
さないと考えられていたのに対して、本発明のリ
パーゼを配合した洗剤組成物では前記したように
全体的に優れた洗浄性能を示すことは驚くべきこ
とである。 以下、本発明を実施例に基いて更に説明する。 実施例 １ 次の洗剤組成物に任意に本発明のリパーゼを含
有させ、洗濯テストを実施した。使用したリパー
ゼはAmano−Ｐであり、その濃度は15LU／mlで
あつた。 【表】 次の条件下で洗濯テストを行つた。 無機顔料、タンパク、パーム油を含有する混合
物で汚したコツトンクロスを3.5ｇ／の洗剤組
成物を含有する20℃の洗濯液に浸漬させ、1.5分
間手洗い後、１回あたり２分を要して３回リンス
した。洗濯後のクロスを再び汚し、洗濯した。汚
す（soiling）／洗濯工程を４回繰り返した。水
硬度は8゜GHであつた。 浸漬、洗濯及びリンス中の液体／クロス比は
夫々9.3、20であつた。４回目の洗濯後、クロス
の反射率及びクロス上に残留する脂肪質物質のパ
ーセンテージを測定した。反射率は、光路にUV
フイルターを設置し反射計を用いて460nmで測定
した。乾燥させたクロスを石油エーテルで抽出
し、溶媒を留出させた後残存する脂肪質物質
（fatty matter）の量（％FM）を測定した。 次の結果が得られた。 【表】 実施例 ２ 次の条件下でターゴトメーター
（Tergotometer）を用い、マルチサイクル汚れ
洗濯システム（multicycle soiled wash
system）における各種洗剤組成物の性能を比較
した。 撹拌：50rpm 洗濯温度及び時間：室温で10分間 リンス：３×２分 水硬度：17゜GH プロテアーゼ濃度：20GU／ml リパーゼ濃度：1LU／ml テスト布：コツトンクロス 汚れ：パーム油＋粉ミルク 次の洗剤組成物を使用した。 Ａ 30％ ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウ
ム 30％ 硫酸ナトリウム 30％ トリポリリン酸ナトリウム 10％ ケイ酸ナトリウム Ｂ Ａと同じ。但しトリポリリン酸ナトリウムに
代えてゼオライトを使用した。 組成物の使用濃度は２ｇ／であつた。 ４回目の洗濯後に得られた結果は次の通りであ
る。 【表】 実施例 ３ 次の組成物について、ターゴトメーター（４マ
ルチサイクル汚れ洗濯）を用い硬度8゜GHの水に
おいて20℃で14分間テストした。濃度は1.3ｇ／
であつた。東洋醸造リパーゼを3LU／mlの濃度
で使用した。コツトン、ポリエステル／コツトン
及びポリエステルクロスをテストした。 テストした組成物は次の組成を有する。 15％ 直鎖C₁₂アルキルベンゼンスルホン酸塩 20％ ケイ酸ナトリウム 35％ 炭酸ナトリウム 25％ 硫酸ナトリウム ５％ 少量成分＋水分 ４回目の洗濯後得られた結果は次の通りであ
る。なお、−Ｌ＝リパーゼ非含有；＋Ｌ＝リパー
ゼ含有を表わす。 【表】 実施例 ４ 1LU／mlリパーゼ濃度の各種リパーゼを有する
実施例１の組成物について、ターゴトメーターを
用い硬度17゜GHの水で洗濯実験を行つた。組成物
濃度は２ｇ／であり、パーム油及び粉ミルクの
混合物で汚したコツトンクロスを用いてテストを
行つた。４回目の洗濯後反射率及び％FMを測定
した。 次のような結果が得られた。 【表】 【表】 【表】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 洗剤活性物質としてのアニオン合成洗剤とビ
   ルダーとリパーゼとから成る洗剤組成物であつ
   て、前記ビルダーが水溶性の無機もしくは有機ビ
   ルダー塩であり、前記リパーゼが微生物シユード
   モナス・フルオレツセンス（Pseudomonas
   fluorescens）IAM1057より産生されたリパーゼ
   の抗体と正の免疫学的交差反応を示すリパーゼで
   あることを特徴とする組成物。 ２ ビルダーがトリポリリン酸ペンタナトリウム
   である特許請求の範囲第１項に記載の組成物。 ３ ビルダーが炭酸ナトリウムである特許請求の
   範囲第１項に記載の組成物。 ４ ビルダーがトリポリリン酸ペンタナトリウム
   と炭酸ナトリウムの混合物である特許請求の範囲
   第１項に記載の組成物。 ５ リパーゼが、クロモバクター・ビスコスム・
   変種リポリテイカム（Chromobacter viscosum
   var.lipolyticum）NRRLB3673またはシユード
   モナス・グラジオリ（Pseudomonas gladioli）
   由来のリパーゼの抗体と正の免疫学的交差反応を
   示す特許請求の範囲第１項に記載の組成物。 ６ 正の免疫学的交差反応を示すリパーゼがシユ
   ードモナス（Pseudomonas）属又はクロモバク
   ター（Chromobacter）属由来のリパーゼである
   特許請求の範囲第１項に記載の組成物。 ７ リパーゼがシユードモナス・フルオレツセン
   ス（Pseudomonas fluorescens）、シユードモナ
   ス・フラギ（Pseudomonas fragi）、シユードモ
   ナス・ニトロレダクエンス変種リポリテイカム
   （Pseudomonas nitroreducens var.
   lipolyticum）、シユードモナス・グラジオリ
   （Pseudomonas gladioli）又はクロモバクター・
   ビスコスム（Chromobacrer viscosum）由来の
   リパーゼである特許請求の範囲第１項に記載の組
   成物。 ８ 更に漂白剤を含む特許請求の範囲第１項に記
   載の組成物。 ９ 更にタンパク分解酵素を含む特許請求の範囲
   第１項に記載の組成物。