JPH01224663A - メタンフェタミンの測定法および測定キット - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、メタンフェタミン（以下、ＭＡと略すことも
ある）の測定法および測定キットに関するものである。

〔従来の技術〕

覚醒剤事犯の増加に伴い、ＭＡなどの覚醒剤の乱用者を
簡単で迅速に、かつ正確に把握する必要性が高まってき
ている。

現在ＭＡを検出する方法としては、多くの方法が提案さ
れている。

ガスクロマトグラフィーまたはガスクロマトグラフィー
・マススペクトル法を用いた方法は、極微量のＭＡを正
確に定量できる優れた方法である　′と考えられている
。しかし、これらの方法は、測定に用いる試料を溶媒抽
出または吸着クロマトグラフィーなどで前処理しておく
必要があるので、測定までの操作が煩雑であり、また、
そのための時間も必要となるという問題がある。

シモン反応を利用した方法は、第２級アミンに特異的な
反応であるが、ＭＡだけを測定するためには、ＭＡに対
する特異性が低いという問題がある。

ＭＡに対する抗血清を利用した方法は、これまでにも多
数報告されている〔例えば、Ｋ、Ａｏｋｉら；Ｊ、Ｐｈ
ａｒｍ、Ｄｙｎ、、６．３３　（１９８３）、Ｓ、Ｔｏ
ｋｕｒａ　；Ａｎａ　Ｉ、Ｂｉ。

ｃｈｅｍ、、」旦、１１７　（１９８７））が、これら
はいずれもＭＡに対して特異性が十分でなく、特に、風
邪薬の中に含まれたエフェドリンやメチルエフェドリン
との交叉性が高いという問題がある。

このような問題点を解決する方法としては、ＭＡに対し
て非常に高い特異的な反応性を示すモノクローナル抗体
を用いた免疫学的測定方法が優れた方法であると考えら
れているが、これまでに、メタンフェタミンに対して非
常に高い特異的な免疫反応性を有するモノクローナル抗
体を用いたＭＡの測定法および測定キットに関する報告
は認められない。

〔発明が解決すべき問題点］ 本発明の目的は、覚醒剤であるＭＡに対して非常に高い
特異的な免疫反応性を有するモノクローナル抗体を用い
たＭＡの測定法および測定キットを提供することである
。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは、前記の問題点を解決するために鋭意研究
した結果、ＭＡ測定キットを用いてＭＡを測定すること
によって、ＭＡを容易に、かつ高感度に測定できること
を見出し、本発明を完成するβ至った。

即ち、本発明は、 （１）ＭＡに対して非常に高い特異的な免疫反応性を有
するモノクローナル抗体を固相支持体に固定化し、酵素
標２ＭＡと測定試料中のＭＡとをこの固相支持体に固定
化されたモノクローナル抗体と、競争的に反応させるこ
とを特徴とするＭＡの測定法 並びに、 （２）ＭＡの測定法で用いるものであって、（ａ）ＭＡ
に対して非常に高い特異的な免疫反応性を有するモノク
ローナル抗体 および （ｂ）酵素標識ＭＡ を必須とすることを特徴とするＭＡ測定キットに関する
ものである。

以下、本発明の詳細な説明する。

本発明のＭＡの測定法に用いるＭＡ測定キットは、ＭＡ
に対して非常に高い特異的な免疫反応性を有するモノク
ローナル抗体（以下、ｒＭＡのモノクローナル抗体」と
略す）および酵素標識ＭＡを必須とするものである。Ｍ
Ａの測定のためには、。

これらの試薬の他に、固相支持体、洗浄液、プロ゛　ツ
キング液、ＭＡの検量線を作成するためのＭＡ温溶液酵
素の基質溶液なども必要とするので、これらを前もって
ＭＡの測定キットに組み込んでおいてもよいし、測定前
に準備してもよい。

本発明のＭＡ測定キットのｒＭＡのモノクローナル抗体
ｊとしては、特願昭６２−２５３７８１号に示されたハ
イブリドーマ株であるＭＡ−７株（微工研条寄第１４９
４号）、ＭＡ−１３株（微工研条寄第１４９５号）、Ｍ
Ａ−１５株（微工研条寄第１４９６号）が産生じたモノ
クローナル抗体を用いて作製することができる。このよ
うなモノクローナル抗体の少なくとも一種以上からなる
粉末または水溶液をＭｌｌ定キットの’　Ｍ　Ａのモノ
クローナル抗体」として用いることができる。

ＭＡ測測定時に用いるｒＭＡのモノクローナル抗体１が
粉末の場合にはそれを水に溶解して適当な濃度のモノク
ローナル抗体水溶液として用い、水溶液の場合にはそれ
を水溶液で適当な濃度に希釈して用いる。

本発明のＭＡ測定キットの酵素標識ＭＡの調製において
、ＭＡを標識する酵素としては、ペルオキシダーゼ、カ
タラーゼ、グルコースオキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ
、アルコールオキシダーゼ、モノアミンオキシダーゼ、
β−ガラクトシダーゼなどの酸化還元系の酵素、および
アルカリフォスファターゼなどのリン酸加水分解酵素な
どの酵素を挙げることができる。

ＭＡを前記の酵素で標識するためのＭＡと酵素との結合
方法は、ＭＡと前記のいずれかの酵素とを１−エチル−
３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩
酸塩（以下、ＥＤＰＣと略す）、■−シクロへキシル−
３−（２−モルホリノエチル）カルボジイミドメト−Ｐ
−トルエンスルホン酸塩（以下、ＣＭＥＣと略す）など
を用い、て結合することによって行うことができる。

これをそのままＭＡ測定キットの酵素標識ＭＡとしてＭ
Ａの測定に用いることもできるが、ＭＡの測定感度をさ
らに高めるためには５ｅｐｈａｄａｘ、５ｅｐｈａｃｒ
ｙｌなどを用いたゲル濾過。

でこれを精製して用いた方が好ましい。

そのようなゲル濾過で得られた酵素標識ＭＡ画分は、Ｍ
Ａ測定キットの酵素標識Ｍ’Ａとしてそのまま使用（蛋
白質濃度が低ければ透析膜などによって所定の濃度まで
濃縮し、蛋白質濃度が高ければ所定の濃度まで希釈する
）することもできるが、酵素安定性が高いｐＨに調整し
た緩衝液（例えば、リン酸緩衝液またはトリス−塩酸緩
衝液など）などで透析し、凍結乾燥または除菌フィルタ
ーで濾過してＭｌｌ定キットとすることもできる。凍結
乾燥したＭＡ測定キットの酵素標２ＭＡを用いる場合に
はそれを水に溶解して適当な濃度の酵素標識ＭＡ温溶液
して用い、水溶液の場合にはそれを水溶液で適当な濃度
に希釈して用いる。この時の酵素標識ＭＡ温溶液２μｇ
　／　ｍ　ｌの蛋白質濃度で、好ましくは０．３μｇ　
／　ｍ　ｌで使用するのがよい。

また、必要に応じて、ＭＡ測定キットの酵素標識ＭＡに
は、酵素活性を阻害しない範囲でアジ化ナトリウム、エ
チル水銀チオサルチル酸ナトリウムなどのような蛋白質
の防腐剤、ウシ血清アルブミンなどのような蛋白質の安
定化物質を必要量添加することもできる。

本発明のＭＡ測・定法で用いる固相支持体は、ＭＡ測定
キットのｆＭＡのモノクローナル抗体ｊを固定化するた
めの支持体として必要なものである。

そのような固相支持体の形状としては、例えば、イムノ
アッセイ用のプレート、チューブ、ビーズ、膜などを挙
げることができ、その材質としては、例えば、ポリエチ
レン、ポリスチレン、ポリプロピレン、ニトロセルロー
ス、ガラスなどを挙げることができる。本発明のＭＡ測
定法では、固相支持体にＭＡに対して非常に特異性が高
いモノクーロ−ナル抗体を固定化したものをアジ化ナト
リウム、エチル水銀チオサルチル酸ナトリウムなどのよ
うな蛋白質の防腐剤を必要量含有した溶液で湿った状態
に保持しておく。以下、ｒ抗体固定化支持体」と略す。

）をｒＭＡのモノクローナル抗体１のかわりにＭＡ測定
キットとして用いると、ＭＡの測定に要する時間を短縮
することができる。

本発明のＭＡ測定法で用いる洗浄液は、固相支持体に一
定量のｒＭＡのモノクローナル抗体１を固定化した後に
その固相支持体に固定化されなかったものを洗浄して除
去したり、固相支持体に固定化したｒＭＡのモノクロー
ナル抗体１に対して測定試料中のＭＡと酵素標識ＭＡと
を競争的に反応させた後にその未反応物質を洗浄して除
去するために必要である。また、洗浄液は、測定試料の
希釈液として、あるいはブロッキング液を調製する時の
ｔ容媒としても用いる。

このような目的に用いる洗浄液としては、例えば、水、
反応時のｐＨに調整した緩衝液（リン酸緩衝液、トリス
−塩酸緩衝液などの緩衝液）、前記の緩衝液にＴｗｅｅ
ｎ２０．Ｔｗｅｅｎ６０などの界面活性剤をＯ〜３容量
％含むものなどを挙げることができるが、好ましくは前
記の界面活性剤を０．０２〜０．８容量％含む反応時の
ｐＨに調整した緩衝液を用いるのがよい。

本発明のＭＡ測定法で用いるブロッキング液は、酵素標
識ＭＡがｆＭＡのモノクローナル抗体Ｊを固定化してい
ない固相支持体表面に非特異的に結合するのを防ぐのに
必要である。

このような目的に用いるブロッキング液は、ＢＳＡ（ウ
シ血清アルブミン）、０ＶＡ（卵白アルブミン）、ＫＬ
Ｈ（陣笠貝ヘモシアニン）、γ−グロブリンなどの高分
子蛋白質を前記の洗浄液に溶解することによってｍ！す
ることができるが、これらの高分子蛍白質の濃度は、０
．１〜５ｗｔ／ｖ。

１％、好ましくは、０．５〜２譬ｔ／ｖｏ１％とするの
がよく、各種動物の血清を用いて調製する場合には、前
記の洗浄液を用いて、１〜５０容量％、好ましくは、１
０〜２０容量％とするのがよい。

また、必要に応じて、ブロッキング液には、〜アジ化ナ
トリウム、エチル水銀チオサルチル酸ナトリウムなどの
ような蛋白質の防腐剤を必要量添加することもできる。

本発明のＭＡ測定法で用いる測定試料としては、ヒトの
尿、血液、血清などのヒト体液を用いることができる。

ＭＡの測定では、ＭＡを測定できる範囲内に前記の洗浄
液でこれらの測定試料を希釈したものを用いてＭＡを測
定する。

本発明のＭＡ測定法で用いる酵素の基質溶液（以下、「
基質溶液」と略す）としては、酵素標３ＭＡにおけるＭ
Ａの漂識に用いた酵素が反応するＨ２０□の基質、およ
びその酵素反応によって生じた物質によって呈色する０
−フェニレンジアミンまたは２，２゛−アミノビス（３
エチルベンゾチアプリン−６−スルホン酸（ＡＢＴＳ）
を含む緩衝液を用いることができる。

以上のようにして固相支持体、洗浄液、ブロッキング液
、ＭＡの検量線作成のためのＭＡ溶液、？基質溶液」を
準備し、ＭＡの測定キットであるｒＭＡのモノクローナ
ル抗体Ａ１酵素標識ＭＡを用いて、以下のような各段階
を経ることによって測定試料中のＭＡを測定することが
できる。

■固相支持体に一定量のｆＭＡのモノクローナル抗体１
を固定化する段階 固相支持体に一定容量のｒＭＡのモノクローナル抗体ｊ
溶液を一定時間接触させる。接触時の温度は、ｆＭＡの
モノクローナル抗体ｊ溶液が凍結または沸騰しない限り
は特に限定されないが、好ましくは２〜４０°Ｃがよい
。

■固相支持体に固定化されていないｆＭＡのモノクロー
ナル抗体」を除去する段階 固相支持体にｒＭＡのモノクローナル抗体」溶液を一定
時間接触した後、ｒＭＡのモノクローナル抗体」溶液を
除去し、固相支持体に固定化されずに残留した’ｒＭＡ
のモノクローナル抗体」を洗浄液で数回洗浄することに
よって固相支持体に固定化されていないｆＭＡのモノク
ローナル抗体」を除去する。

■酵素標識ＭＡがｒＭＡのモノクローナル抗体ｊを固定
化していない固相支持体表面に非特異的に結合するのを
防ぐ段階 ’　Ｍ　Ａのモノクローナル抗体ｊを結合した面相支持
体に一定容量のブロッキング液を一定時間接触させる。

接触時の温度は、ブロッキング液が凍結または沸騰しな
い限りは特に限定されないが、好ましくは２〜４０°Ｃ
がよい。

■固相支持体に固定化したｒＭＡのモノクローナル抗体
」に対して、測定試料中のＭＡと酵素標識ＭＡのＭＡと
を競争的に反応させる段階測定試料と酵素標識ＭＡ温溶
液を等容量づつとり、前記固相支持体に結合したｒＭＡ
のモノクローナル抗体１と接触反応させる。測定試料と
酵素標識ＭＡ温溶液は、混合した後に直ちに固相支持体
に固定化したｒＭＡのモノクローナル抗体Ｊと接触反応
させてもよいし、あるいは固相支持体に固定化されたｆ
ＭＡのモノクローナル抗体」にそれぞれを順次接触後、
直ちに攪拌して反応させてもよい。

■ｒＭＡのモノクローナル抗体」を介して面相支持体と
結合していない酵素標識ＭＡを除去する段階 前記の測定試料と酵素標識ＭＡ？Ｓ液との混合液を除去
し、ｒＭＡのモノクローナル抗体」を介して固相支持体
に結合せずに残留した測定試料と酵素標識ＭＡ温溶液の
混合液を洗浄液で数回洗浄する°ことによって除去する
。

■ｒＭＡのモノクローナル抗体１を介して面相支持体に
結合した酵素標識ＭＡとｌｒ基質溶液ｊとを反応させる
段階 ここで用いるｒ基質溶液」としては、酵素標識ＭＡの成
分であるＭＡの標識に用いた酵素と対応するもの（酵素
反応が起きると呈色する物質を含む）を加える。

「基質溶液Ｊの一定容量を前記のｌｒＭＡのモノクロー
ナル抗体ｊを介して固相支持体に結合した酵素標識ＭＡ
と一定時間反応させ、好ましくはＨ２ＳＯ４などの酸、
ＮａＯＨなどのアルカリまたは酵素阻害剤を用いて酵素
反応を停止した方がよい。反応温度は、そのときに用い
る酵素の至適温度範囲内であれば特に問題はないが、好
ましくは１５〜３５°Ｃがよい。

■前記の酵素反応後の反応液の吸光度を測定する段階 前記の酵素反応後の反応液の呈色が最大吸光度を示すと
きの波長でその反応液の吸光度を測定する。

以上のようにして、測定試料のかわりに既知量のＭＡを
用いた結果から、検量線を作成し、測定試料中のＭＡＲ
を知ることができる。

このＭＡ測定操作の手順のうちの■の酵素標識ＭＡと測
定試料を添加する段階で、固相支持体に固定化されたＦ
ＭＡのモノクローナル抗体ｊに対して、酵素標識ＭＡと
測定試料中のＭＡとで競争的反応が起こることによって
、その試料中のＭＡ量を迅速かつ高怒度に測定すること
ができる。

以下に酵素標識ＭＡの作製、抗体の生産および精製を参
考例として示す。

参考例１ｍ皇呈人■立盃 ベンゼン１２ｍ２に、０．５　ｍ　ｇのＭＡを溶解し、
これに１．１６　ｍ　ｇのＮ−（４−ブロモブチル）フ
タルイミドおよび０．５４ｇの炭酸ナトリウムを加えて
８０°Ｃ０°Ｃ下３還流し、無機物を除去後、１２ｍＩ
！、のＩＮ塩酸を入れ、水層をベンゼンで洗浄した。こ
の水層を水酸化ナトリウムを用いてｐＨｌ０に調整し、
クロロホルムを入れて得られたクロロホルム層を飽和食
塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、クロロホ
ルムを減圧留去した。この残留物を１２ｍｌのエタノー
ルに溶解し、これに６０μｆ（７）９０％抱水ヒドラジ
ンを加えて７８、５　’Ｃ下２時間還流した後にエタノ
ールを留去した。この残留物を１２ｍｊ！のＩＮ塩酸で
溶解し、クロロホルムで洗浄した。これを水酸化ナトリ
ウムを用いてｐＨ１０に調整し、クロロホルムを入れて
得られたクロロホルム層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫
酸ナトリウムで脱水し、クロロボルムを減圧留去した。

このようにして、０．２ｇのＮ−（４−アミノブチル）
メタンフェタミン（以下、ＡＢＭＡと略す）を得た。

酵素標識ＭＡは、前記のＡＢＭＡを用いて以下のように
して調製した。

１０ｍｇのＡＢＭＡ　（Ｎ−（４−アミノブチル）メタ
ンフェタミン〕を溶解した０、　２　ｍ　Ｉ！のジメチ
ルホルムアミド溶液と１．５　ｍ　ｆのリン酸緩衝液（
ｐＨ７，４）とを混合し、この溶液を１０　ｍ　Ｍ炭酸
緩衝液（ｐＨ９，５）に対して４°Ｃ下−晩透析シタ。

一方、２０ｍｇの西洋ワサビペルオキシダーゼを１ｍ２
の純水に溶解し、これに６００ｕｊ！の０．　Ｉ　Ｍ過
沃素酸ナトリウムを加えて室温下３０分間静置した。こ
の酵素溶液を１ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４，５）に対して
４°Ｃ下−晩透析し、１００μ２の０．２Ｍ炭酸緩衝液
（ｐＨ９，５）を添加してｐ　Ｈ９，５に調整した。こ
のようにして得られたＡＢＭＡ溶液と西洋ワサビペルオ
キシダーゼ溶液とを混合し、室温下３０分間静置し、こ
れにテトラヒドリドホウ酸ナトリウムを加えて４°Ｃ下
２時間反応した。得られた酵素で標識されたＭＡは、０
．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐ　Ｈ７，４）に対して４℃下
−晩透析し、そのまままたは凍結乾燥して酵素標識ＭＡ
として保存し、その後、酵素標識ＭＡ溶液にしてＭＡの
測定に用いた。

参考例２　坑盗久ま童上葺裂 ｒＭＡのモノクローナル抗体Ｊである特願昭６２−２５
３７８１号に記載の方法で作製した本発明者らが所有す
るＭＡに対して特異性が高いモノクローナル抗体の生産
は、次のように行った。

０．１Ｍのリン酸緩衝液（、ｐ　Ｈ７，４）で浮遊させ
た１０７個の株細胞をＢ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃマウス（
♂、８週齢、２週間前にブリスタンを０．５　ｍ　ｌ　
腹腔内投与）の腹腔内に投与して行った。マウス体重の
顕著な増加は１週目頃がら認められ、１〜３週目に適宜
腹水をとりだした。こうして得られたモノクローナル抗
体の抗体価は、１ｏｂ〜１０”であった。

得られた腹水からのモノクローナル抗体の精製は、次の
ようにして行った。

前記の腹水をトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，４）で透析
し、同緩衝液で平衡化したＤＥＡＥ−セルロースカラム
に流した。素通り画分を５０お飽和硫安で塩析し、得ら
れた沈澱を０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７，４）に溶
解し、同緩衝液に対して透析した。このようにして得ら
れたｆＭＡのモノクローナル抗体」の純度は、ＳＤＳポ
リアクリルアミドゲルを用いたスラブゲル電気泳動で、
いずれの抗体も高純度であることがわかった。

以上のようにして得た’　Ｍ　Ａのモノクローナル抗体
」を用いたＭＡの測定法（ＥＬＩＳＡ法）によって、高
感度でかつ迅速なＭＡの測定が可能となった。

〔実施例〕

以下、本発明の実施例を具体的に説明する。

なお、これらの実施例は、本発明を例示するためのもの
であって、本発明の範囲を限定するものではない。

実施例Ｉ ＭＡ測定キットの酵素標識ＭＡおよび［’ＭＡのモノク
ローナル抗体」は、以下のようにして作製した。

酵素標識ＭＡは、参考例１に示したようにして得られた
ものを、０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７゜４）に対し
て４°Ｃ下−晩透析し、０．１％アジ化ナトリウムを含
有する０、　１　Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７，４）で１
００倍に希釈し、瓶に０．２　ｍ　４２づつ分注して凍
結乾燥して保存し、ＭＡの測定キットである酵素標識Ｍ
Ａ（１０μｇ／瓶）とした。ＭＡの測定時には、この瓶
の中に蒸留水を０．２　ｍ　ｌ加えて凍結乾燥粉末をよ
く溶解し、所定の濃度まで０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，４）で希釈して用いた。

ｒＭＡのモノクローナル抗体」は、参考例２に示したよ
うにＭＡ−１５株（微工研条寄第１４９６号）を用いて
Ｂ　Ａ　Ｌ　Ｂ　／　ｃマウスから取り出した腹水をト
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，４）で透析し、同緩衝液で
平衡化したＤＥＡＥ−セルロースカラムに流した。この
素通り画分を５０％飽和硫安で塩析し、得られた沈澱を
０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７，４）に溶解し、同緩
衝液に対して透析した。このようにして得られたモノク
ローナル抗体（蛋白質濃度は、２５０μｇ／ｍｆ）に終
濃度０．１％（ｈｔ／ｖｏｌ　）のアジ化ナトリウムを
添加し、瓶に０．２　ｍ　ｌづつ分注し、４°Ｃに保存
し、ＭＡの測定キットであるｒＭＡのモノクローナル抗
体１とした。ＭＡの測定時には、これをトリス−塩酸緩
衝液（ＰＨ７，４）でトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７，４
）で適当に希釈して用いた。

実施例２ 実施例１で作成したＭＡの測定キットである！ｒＭＡの
モノクローナル抗体１　（蛋白質濃度をトリス−塩酸緩
衝液（ｐＨ７，４）で５ｕｇ／ｍｌとした）をイムノア
ッセイ用９６ウエル平底プレート（Ｎｕｎｃ社、ポリス
チレン製マイクロプレート）に１００μ２づつ分注し、
４　’Ｃ下−晩静置してｆＭＡのモノクローナル抗体」
を各ウェルに固定化した。次に、このプレートへの酵素
標識ＭＡの非特異的な吸着を防ぐために１０容量％の牛
血清を含む洗浄液（０，０５容量％のＴｗｅｅｎ２０を
含む０．１Ｍのｐ　Ｈ７，４のリン酸緩衝液）で室温下
３０分間静置した。次に、同洗浄液で洗浄後、健常人の
尿を０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７，４）で５倍に希
釈調製した５０μ２の標準ＭＡ溶液〔（０〜５０ｐｇ）
１５０μ２〕と５０μ２の実施例１で作製したＭＡの測
定キットである酵素標識ＭＡを０．２　ｍ　ｌの蒸留水
で溶解したものとを各ウェルに同時に加え攪拌し、室温
下３０分間静置した。次に、同洗浄液で洗浄後、「基質
溶液」（呈色物質である２０ｍｇのＯ−フェニレンジア
ミンと基質である１０μｌの３５％Ｈ，Ｏ□とをｐ　Ｈ
５，０の０．１Ｍクエン酸緩衝液に溶解）を１００μβ
づつ分注し、遮光して室温下５０分間静置した。最後に
、さらに２Ｎ硫酸を５０μ２づつ分注して酵素反応を停
止し、マイクロプレート光度計を用いてその反応停止後
の溶液の４９２　ｎｍにおける吸光度を測定した。その
結果、酵素標識ＭＡを用いたこのＭＡの測定法は、ｆＭ
Ａのモノクローナル抗体」を固定化したイムノアッセイ
用９６ウエル平底プレート（Ｎｕｎｃ社、ポリスチレン
製マイクロプレート）を用いると、約１時間でＭＡを高
感度に測定できた。その結果を第１図に示す。

〔発明の効果〕

本発明によれば、ｒＭＡのモノクローナル抗体ｊ、酵素
標識ＭＡを必須とするＭＡの測定キットを用いることに
よって、ＭＡを競争的反応条件下で、迅速、かつ高感度
で測定することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、酵素標識ＭＡを用いて作成したＭＡの標準曲
線を示す。 特許出願人　　宇部興産株式会社 第１　図 メタンフェタミン濃度（ｎｇ／ｍｊり

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）メタンフェタミンに対して非常に高い特異的な免
   疫反応性を有するモノクローナル抗体を固相支持体に固
   定化し、酵素標識メタンフェタミンと測定試料中のメタ
   ンフェタミンとをこの固相支持体に固定化されたモノク
   ローナル抗体と、競争的に反応させることを特徴とする
   メタンフェタミンの測定法。
2. （２）メタンフェタミンの測定法で用いるものであって
   、 （ａ）メタンフェタミンに対して非常に高い特異的な免
   疫反応性を有するモノクローナル抗体および （ｂ）酵素標識メタンフェタミン を必須とすることを特徴とするメタンフェタミン測定キ
   ット。