JPH01175939A - 細胞内ａｔｐ濃度及び生体活動レベルを増進し且つ創傷修復率を増進するための組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、アデノシン−５−三燐酸（以下ＡＴＰと略称
。）の細胞内合成を増進するために必要な成分を提供す
る組成物に関するものである。更に詳細には、本発明は
、経口投与されたときには、Ａ　Ｔ　Ｐ　＞７４度及び
生体活動レベルを増進する組成物、及び、局所投与され
たときには創傷修復率を増進する医薬製剤に関するもの
である。

アデニンヌクレオチドに関する化学及び生物学は、リー
ビッヒ（Ｌ　ｉ　ｅ　ｂ　１　ｇ）がそれらの化合物を
単離した１８４７年に始まった（Ｌｉｅｂｉｇ’　　ｓ
　　ａｎｎ、６２巻、３１７頁、１８４７年）、最初は
、これらの化合物は、単に核酸の分解成分と考えられて
いた。

しかしながら、ヌクレオチドに関する化学及び生物学は
、ヌクレオチドがプリン塩基のアデニンおよびヒドロキ
サンチンの誘導体であり、これらの塩基に五炭糖のｄ−
リポースが結合して生物学的に活性なヌクレオシド前駆
物質が生成することを、最近明らかにした。

ホスフェートをヌクレオシドに加えると（プリン塩基＋
ペントース＋ホスフェート）、ヌクレオチドが得られる
。１９４０年代の前半までには、エネルギー増強のため
カルシウムまたはマグネシウム塩の形でヌクレオチドＡ
ＴＰを利用する試みがなされていた。

ＡＴＰは、その高エネルギーの燐酸結合のために、細胞
の中間代謝において異なった役目を演じている。

これは、最初、解糖におけるＡＴＰの役目に関して、リ
ップマン（Ｌｉｐｍａｎｎ）によって明らかにされた（
Ａｄｖａｎｃｅｓ　　ｉｎ　　Ｅｎｚｙ、Ｍｏ１．第１
巻、９９頁、１９４７年）。次の４年間、ＡＴＰが呼吸
、炭水化物代謝、脂肪代謝ならびに尿素及びグルタミン
の合成で演じる中心的な役目が明らかにされた。

筋収縮及び従って運動のためのエネルギーは、ＡＴＰの
加水分解から生じる。骨格筋においては、ＡＴＰは、酵
素であるミオシンＡＴＰアーゼによってアデノシンニ燐
酸（以下ＡＤＰと略称、）に加水分解される。

ＡＴＰのＡＤＰへの加水分解は、エネルギーの放出を伴
い、そして、そのプロセスは次の反応で示される：る。

ＡＴＰの血中濃度は、短時間に減少することが報告され
ているに過ぎない０例えば、ＡＴＰ血中濃度は、非常に
激しい運動の間、ヒト及びウマで低下することが観察さ
れている。若し、その様な運動の間、収縮性活動が維持
されると、ＡＴＰの急速な合成が、細胞内で生じなけれ
ばならないことは明らかである（Ｈｏ　ｄｇＳｏｎ、Ｅ
ｑｕｉｎｅ、Ｐｒａｃｔｉｃｅ、ｖｅｔＣｌｉｎｉｃ、
１９８５年１２月）。

ＡＴＰの細胞内補給には２つのプロセスがある：（１）
循環している脂肪酸及びグルコースならびに筋肉内グリ
コーゲン及びトリグリセライドから基質の酸化的（好気
性）燐酸化及び（２）クレアチン燐酸、循環しているグ
ルコース及び蓄積グリコゲンからＡＴＰを生成する嫌気
的燐酸化。

酸化的燐酸化においては、筋細胞は、血液中を循環して
いるＡＴＰを直接に得ることはできない、その理由は、
ＡＴＰＯ三燐酸基の細胞膜との結合に関連していると思
われる。大抵の細胞では、ヌクレオチドについたホスフ
ェートが少なければ少ないほど、ヌクレオチドは、より
容易に細胞によって吸収される。かくして、細胞は、一
般にＡＤＰよりも速（ナデノシンー燐酸（以下ＡＭＰと
略称、）を吸収し、そして、ＡＴＰよりも速＜ＡＤＰを
吸収する。細胞によって吸収されたＡＭＰまたはＡＤＰ
は、細胞内で再び燐酸化されてＡＴＰになる。このプロ
セスは、多量の化学エネルギーの同時放出を伴う反応類
に沿って１つのステップから次のステップへの水素分子
の移動を必要とする。このエネルギーの約半分は、細胞
によるＡＭＰまたはＡＤＰの再燐酸化に利用され、そし
て、残りは熱エネルギーとして放出される。

運動開始時また酸素の輸送の不十分な条件下では、酸化
的燐酸化でつくられたＡＴＰ蓄積は、涸渇する。

しかしながら、ＡＴＰは、筋収縮のためのエネルギーを
供給するために利用されなければならない。嫌気的燐酸
化機構は、これらの環境下で必要とされるＡＴＰを供給
するために筋細胞によって利用される。嫌気的燐酸化は
、もっばら細胞の細胞質ゾル及びミトコンドリアの中で
起こり、そして、クレアチン燐酸（以下ＣＰと略称、）
　、ＡＤＰ及びＡＭＰにより代表される高エネルギーの
燐酸エステル（ホスフェート）を必要とする。

最も重要な嫌気的燐酸化機構は、ＣＰに関連があり、そ
して、次の通り示すことができる： タレアチンキナーゼ ＣＰ＋ＡＤＰ−ｍ−りレアチン＋ＡＴＰ筋細胞中のＡ　
Ｔ　Ｐ　Ｑ度を回復するための第２の機構は、ミオキナ
ーゼ反応である。この機構により、筋細胞は、２分子の
ＡＤＰを縮合して１分子のＡＴＰと１分子のＡＭＰを生
成する。この機構は、次の通り示すことができる： ミオキナーゼ ＡＤＰ＋ＡＤＰ　　　　　　　　　ＡＴＰ＋ＡＭＰ例え
ば運動しているヒトや競走馬のような競走動物における
酸化的燐酸化による基質利用は、運動の強度に依存する
。酸化的燐酸化によるＡＴＰの寄与は、筋収縮の距離と
速度に直接関係している。連動が続くと、ＡＴＰは個渇
し、そして、ＣＰからのエネルギーの供与により回復す
る。ＣＰが個渇すると、他のエネルギー源が必要になる
。ミオキナーゼ反応は、骨格筋の中で行われるが、それ
は、エネルギー代謝において限られた役目しかもってい
ない、解糖及び乳酸塩に転換されるその最終産物のピル
ビン酸塩は、継続したエネルギー供給を可能にする。ウ
マの場合は、解糖のプロセスは、運動の開始時から約３
０秒でピーク効率に到達する。ウマは、グリコーゲンの
多くの蓄積をもっているから、この基質は、運動中著し
いエネルギー源を提供することができる。

横絞筋細胞と平滑筋細胞との双方における収縮機構のＡ
ＴＰ依存度は、２価のカチオン、詳しくは、Ｃａ゛及び
Ｍｇ″０の存在によって表示される。摘出した筋線維芽
細胞中のカルシウム及びマグネシウムの含有量及び作用
は平滑筋細胞中のそれらの含有量及び作用と類似してい
る。かくして、筋線雑芥細胞の収縮機構は、矢張りＡＴ
Ｐに依存している（Ｓｃｉｅｎｃｅ、１６４４〜４８頁
、１９８７年３月）。

筋線雑芥細胞は、腺雑芥細胞の特殊な細胞群である。

線雑芥細胞は結合＆ｆｌ織形底形成細胞分化して股のご
とき結合及び支持機能を有する結合＆ｌｌ織（コラーゲ
ン）を形成する。筋線雑芥細胞は非定形の線雑芥細胞で
あり、超微細構造の線雑芥細胞及び平滑筋細胞と結合す
る。筋線雑芥細胞はアクチンフィラメントに多量に存在
する微小線維束の密な集合体である。これらの線維束は
、筋肉状の収縮性原線維である。

動物での創傷の修復率と創傷部位に存在する筋線雑芥細
胞の数との間に明らかな相関性が立証された。多くの例
において、創傷は、修復プロセスの栄養要求を維持する
のに十分な脈管の発育が欠如している。これは、追加の
栄養分が静脈内投与によって供給される時でも然りであ
る。何故ならば、これらの栄養素が修復個所に到達する
ための基本的な手段は創傷に隣接した脈管化部位からの
拡散によるからである。肉芽形成によ、て閉じられるべ
き創傷面が大きい場合には、患部の不十分な再生能は特
に深刻である。その様な場合には、創傷面での無傷の真
皮の移動によって特徴づけられる創傷面の収縮は、創傷
の間隙の大きさを少なくすることによる修復プロセスに
おいて重要な役目を演じる（Ｊ、Ｃｅｎａｔ、、８９巻
、１１４〜１２３頁、１９５５年）、その様な創傷の収
縮を生じさせるのは、筋肉状収縮繊維を有する筋線雑芥
細胞である。

上述した様に、これらの原綿雑の収縮機構は、ＡＴＰに
依存する。かくて、筋線雑芥細胞によって生じる局所的
な創傷の収縮速度は、細胞内エネルギー源として利用可
能なＡＴＰの量に依存している。更に、ＡＴＰは、腺雑
芥細胞による創傷の肉芽形成、塘新生及び蛋白合成なら
びに上皮形成を含む他の創傷修復プロセスのためのエネ
ルギー源として役立つ。

細胞代謝においてＡＴＰが演じる各種の役目及び総合的
な動物の生化学及び生理学にとってのＡＴＰの重要性に
鑑み、ＡＴＰの細胞内合成を増進するために必要な成分
を供給する組成物を提供することが本発明の目的である
。

本発明の組成物は、アミノ酸、代謝産物、電解質及び五
炭糖から成っている。更に詳細には、組成物は、ＡＴＰ
の代謝先駆物質であるアミノ酸群から選択されたアミノ
酸を有している。組成物は、更にイノシトール、ｄ−リ
ボース及び燐酸マグネシウムを有している。

組成物は、細胞表面の変性による毒性を示すことなく急
速な吸収が行われる様に製剤される。

本発明の組成物が経口投与されると、細胞内ＡＴＰ濃度
及び生体活動レベルの劇的増加が得られることが判明し
た。７頭のウマの事例研究から得られた支持データは、
投与後の細胞内ＡＴＰ濃度の物差しであるＡＴＰ血中濃
度が平均して２３．５％と著しく増加したことを示して
いる。更に、各事例において、測定可能な活動パラメー
タにおいて及び主観的評価において顕著な改善があった
。

更に、本発明の組成物が発熱物質を含まない賦形剤へ混
入され局所的に創傷個所へ投与されると、創傷の閉かり
率が上昇することが判明した。溶液として投与された本
発明組成物は１日１回投与のとき対照より１７．８％速
く、また、１日３回投与のときには３７゜２％速く創傷
の大きさが減少する０本発明の組成物が混入されたゲル
を１日１回投与すると、対照のゲルよりも１．２％速く
創傷の大きさを減少するが、一方、１日３回投与すると
対照ゲルよりも１５．７％速く創傷の大きさを減少する
。

代謝性における変化を含む深遠な順応応答が、各種の肉
体的な調教を受けているウマの骨格筋に生じることが報
告されている。ミトコンドリアの濃度の劇的な増加及び
ＡＴＰ生成に必要な酸化酵素の濃度に付随した増加が、
しばしば報告されている。対照的に、ウマの骨格筋の嫌
気的ポテンシャルは、本質的に高く、そして、身体活動
または栄養分のパターンの変化に大きく影響されない。

従って、既に訓練計画に入っているウマは、ＡＴＰの細
胞内合成の増進を企図した組成物の評価のため、特に適
切なモデルになる。

本発明の組成物の効果を立証するために、既に訓練計画
に入っている７頭のスタンダードブレッド種のウマが選
ばれた。各ウマは、ＡＴＰ基準線の測定の着手前または
着手時に、血液学的及び血液化学試験が行われた。各被
験動物から２５日の間各週２〜３回血液試料が収集され
た。この期間中間、各ウマには、継続して普通の訓線量
の飼料が与えられた。血液検体は、ＡＣＤ血液管（血液
８−　５　ｍ　ｌ　、抗凝血剤１．５ｍｍりに採血され
た。検体を、冷凍されるまで、４℃に氷冷し保存した。

全部の血液は、採血後２４時間以内に、ミズリー州ＭＯ
６３１７８、セントルイス、Ｐ、０．ボックス１４５０
８のシグマダイアグノスティックのシグマテストキット
法を用いて、ＡＴＰ濃度の分析が行われた。

血漿中には、ＡＴＰは、せいぜい痕跡量で存在する。

このため、ＡＴＰ定量法は、血球が破壊されることを必
要とする。かくして、その様な定量において見出される
ＡＴＰ濃度は、ＡＴＰの細胞内濃度に直接関係している
。ＡＴＰの測定方法は、ＡＴＰとグリセリン酸＝３−燐
酸からグリセリン酸−１，３−二燐酸を生成するホスホ
グリセリン酸ホスファターゼの酵素の作用に基づいてい
る。グリセルアルデヒド燐酸脱水素酵素は、グリセルア
ルデヒド−３−Ｐ及びＮＡＤ＋Ｐをつくる反応に触媒作
用を及ぼし、かくして、波長３４０ｎｍでの吸光度の減
少をおこす、この反応は、そのとき存在するＡＴＰの量
によって規制され、そして、吸光度の減少は存在するＡ
ＴＰに比例する。

最初の２５日の期間後、４頭の被検動物は、本発明の組
成物と一群の栄養成分とを含有する混合物を１日当たり
８オンス（午前４オンス、午後４オンス）の給飼を受け
た。栄養成分は、主として、よりよくウマの口に合う様
に且つ追加的なビタミンとミネラルとを供給するために
、本発明の組成物と混合された０本発明の組成物の最も
好適な組成が、個々の成分の許容し得る範囲の重量と共
に第１表に記載されている。第２表は、本発明の組成物
と好適な重量比で混合される栄養成分を記載している。

Ｌ−グリシン　　　　　　０．６　　　　０．５−０．
７Ｌ−アルギニン　　　　　２．４　　　　２．２−２
．６Ｄ／Ｌ−メチオニン　　　１２．０　　　　１０．
８−１３．２塩化コリン　　　　　　　１０．１　　　
　９．１−１１．１イノシトール　　　　　　８．９　
　　　８．０−９．８Ｌ〜アスパラギン酸　　　８．９
　　　　８．０−９．８Ｌ−トリプトファン　　　　２
．６　　　　　２．３−２．９Ｌ−フェニルアラニン　
　２．１　　　　１．９−２．３Ｌ−ヒスチジン　　　
　　２．０　　　　１．８−２．２Ｌ−プロリン　　　
　　　　エ、５　　　　　１．４−１．７Ｄ−リボース
　　　　　　８．９　　　　８．０−９．８燐酸マグネ
シウム　　　　　７．７　　　　６．９−８．５合計　
　　６７．７　　６０．９−７４．６員主表 ｒＪｉ　　　　　　　　　　　　　　　　１１」ｋ）ラ
クトアルブミン　　　　　　　　　　　　３００．００
ダイアモンドＶ−イーストカルチャー　　３４０．９０
（Ｄｉａｍｏｎｄ　Ｖ　ｍｌｌｌｓ社製）乾燥ビート糖
蜜　　　　　　　　　　　　　１８１．８０燐酸水素カ
ルシウム　　　　　　　　　　　９０．９０重炭酸ナト
リウム　　　　　　　　　　　　２２．７０ビタミンプ
レミツクス　　　　　　　　　　　４５．４５硫酸リグ
ナン　　　　　　　　　　　　　　１３．０７矯味剤　
　　　　　　　　　　　　　　　　１．３６合計　　　
　　　　　　　　　　　　　　　９９６．１８各ウマの
バックグラウンドの情報が訓練活動、スタミナ、競技時
間及び結果ならび一般的な経歴について収集された。研
究期間中、日誌が各ウマについて、トレーナ−によって
記録された。

本発明の組成物を添加した食餌補給は、被検動物の血液
中のＡＴＰ濃度に顕著な効果をもった。上述した様に、
ＡＴＰの血中濃度は、細胞内のＡＴＰの濃度に直接関係
している。第１図は、食餌補給前及び補給後の全７頭の
被検動物のＡＴＰ血中濃度を示している。

グループとして、被検動物は、補給後、２３．５４％の
ＡＴＰ血中濃度の平均上昇（上昇パーセント）を示した
。第２図〜第８図は、個々の被検動物で、高いものは３
８．４％（第２図）から、低いものは１１．８％（第８
図）の範囲で、ＡＴＰ血中濃度が著しく上昇したことを
示している。

第９図〜第１２図は、７頭の被検動物のうち４頭につい
てのＡＴＰ血中濃度上昇と活動レベルの改善との間の相
関関係を示している。第９図〜第１２図は、それぞれ被
検動物１，３．４及び７に対応している。これら４頭の
被検動物は、ｍＭして競走し及び訓練を受けるから、Ａ
ＴＰ血中濃度／活動レベルの相関関係の基礎となる十分
なデータを提供した。各図の実線は、第１図〜第８図の
棒グラフで表されたデータを別の形で示している。即ち
、本発明の組成物を添加した給餌は、給餌直前の期間に
みられた濃度よりもＡＴＰ血中濃度における著しい上昇
をもたらしている。第９図〜第１２図の各図の破線は、
給餌直前の期間と給餌期間との平均ＡＴＰ血中濃度を示
している。第９図〜第１２図の各図における２重実線は
、ＡＴＰの血中濃度上昇と活動レベルの上昇との間の相
関関係を示している。

上述した様に、各被検動物のバンクグラウンドの情報が
、訓練活動、スタミナ、レース時間及び結果ならびに一
般的経歴について収集された。バックグラウンドの情報
は、約１年間に亘り集積された。この期間は、本発明の
組成物を添加した食餌補給の開始前に終わった競技シー
ズンと一致する。バックグラウンドの情報は、レース時
間、スプリントタイム及びレース結果の様な量的データ
から成っている。更に、バックグラウンドの情報は、ト
レーナ−による各ウマについての主観的な評価を含んで
いる。各被検動物について収集されたバックグラウンド
の情報は、各ウマについての平均の期待行動またはゼロ
定格を決定するのに用いられた。ゼロ定格は、４つの基
準であるスピード、スタミナ、積橿性及びバイタリティ
ーを基礎にして各被検動物を評価することによって決定
された。各被検動物には、−５から＋５の目盛を基礎に
して４つの各基準について定格が与えられた。各被検動
物についてゼロの定格が決定されると、ウマは、再び給
餌直前の２５日間及び給餌期間中、４つの基準に従って
評価された。

第２及び第３の、セットの評価は、前に決定されたゼロ
定格に関して、いま挙げた各期間についての活動定格と
なった。

第９図〜第１２図が明らかに示す様に、各被検動物は、
投与開始前の２５日の期間中、それぞれのゼロ定格に非
常に近いかまたは低い活動レベルにあった。然しなから
、第９図〜第１２図は、食餌投与期間中、ＡＴＰ血中濃
度が上昇するにつれて、投与期間の終りまで各被検動物
がそのゼロ定格よりかなり上の活動定格を示す点へ活動
レベルが上昇することも明らかに示している。事実、２
頭の被検動物即ち４番目の４才馬と７番目の７オ馬とは
、新しい生ａ競技評価（ｒ　ａ　ｃ　ｅｍａ　ｒ　ｋ　
ｓ）を確立した。試験の間何時でもトレーナ−には血液
検査の結果を知らせなかったことに言及することは重要
なことである。

本発明の組成物が創傷修復率を上昇させることを示すた
めに、他の一連の実験が行われ、そこでは、組成物は、
実験用ラットの背中の切除傷口へ投与された。

この実験はｆ、次の様に行われた：雄のスプラグ−トウ
リー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラット（２５０
〜３００ｇ）、メイン州、ウィルミントン市、チャール
ス　リバー　プリーディングラボラトリーズ社）が、ケ
タミン／ロンプン（９０ｍｇ／ケタミン及び１０ｍｇ／
ロンブン）の腹腔的注射で麻酔をかけられた。

各ラットは、背部の正中線に直径２．５ｃｍの十分な厚
さの単一の切除傷口がつけられた。ラットが麻酔をかけ
られている間、１０日後に撮影される２回目の写真と比
較されるゼロタイム〔最初の大きさ（領域）〕を示すた
め、写真が撮影された０手術後４８時間、全部の動物は
飲料水に添加したアセプロマシン（０，０１５％）によ
って鎮痛レベルに維持され、それによって創傷からの不
快の症状が除去された。実験期間後、ラットは、安楽死
させられ、そして、皮層切片は、最終傷口領域のサブス
テージの照明および写真測定のために用意された。この
時、傷口部位は、周囲組織から切除され、計量され、そ
して、将来のＡＴＰ決定のためにドライアイス／アセト
ンで冷凍された。このプロセスは、皮膚部位の除去から
ＡＴＰ分析のための計量ボート中での冷凍まで４５秒を
要した。ＡＴＰ測定に用いられた手法は、シグマ社のダ
イアグノスチソクテストキットを用いる前記に機運した
ものと同じである。

実験計画は、各群６匹のラットからなる８つのグループ
に、次の様に要約される処理が行われることから成って
いる。

グループニー本発明の組成物（無菌の等滲透圧食塩水中
１％）。最も好適な組成は、第３表中に個々の成分の許
容できる重量範囲と共に記載されている。

グループｎ−ＡＴＰ溶液（無菌の等滲透圧食塩水中３３
ｍｇ／ｍ１）。

グループ■−上記と同じ濃度になる様に組み合わされた
、組成物とＡＴＰとの双方を含有する溶液。

グループ■−ゲル状の組成物（組成物１％を含有する１
０％アバロン（、ａ、ｖａｌｏｎ）ゲル、Ｓｕｍｍｉｔ
Ｌａｂｓ社製））。

グループソーゲル中のＡＴＰ　（無菌の食塩水に加えら
れた３３ｍｇ／ｍＪを含有する１０％アバロンゲル）。

グループ■−上記と同じ濃度になる様に１０％アバロン
ゲル中に組み合わされた組成物及びＡＴＰ。

グループ■−無菌の等滲透圧食塩水ゲル。

グループ■−無菌の等滲透圧食塩水溶液。

１１表 ＡＴＰ−Ｈの組成物 底立　　　　　　　用１ム）　　　北見ｎ）Ｌ−グリシ
ン　　　　　　８．９　　　　８．０−　９．８Ｌ−ア
ルギニン　　　　３５．４　　　３１．０−３８．９０
／Ｌ−メチオニン　　１７７．２　　　１５９．５−１
９４．９塩化コリン　　　　　　１４９．２　　　１３
４．３−１６４．１イノシトール　　　　　１３１．５
　　　１１８．３−１４４．７Ｌ−アスパラギン酸　　
１３１．５　　　１１８．３−１４４．７Ｌ−トリプト
ファン　　　３８．４　　　３４．６−４２．２Ｌ−フ
ェニルアラニン　３１．０　　　２７．９−３４．１Ｌ
−ヒスチジン　　　　２９，５　　　２６．５−３２．
４Ｌ−プロリン　　　　　　２２．２　　　２０．０−
２４．４Ｄ−リボース　　　　　１３１．５　　　　ｕ
８．４−１４４．７燐酸マグネシウム　　　１１３．７
　　　１０２．３−１２５．１合計　　１０００．０　
９００．０−１１００．０上記溶液及びゲルによる投与
は、ここで報告された最初の試みでは１日に１回とした
。第２回の試みでは、溶液及びゲルは、最初の３日間は
１日に３回投与され、次いで７日間は１日に１回投与さ
れた。各投与には、０．５ｍｌの？８液または０．５ｇ
のゲルのいずれかを用いた。２回の実験の１０日間の終
りに、ラットは、安楽死させられ、そして、創傷組織が
試験のため摘出された。

創傷サイズの測定の手法は次の通りである二創傷サイズ
の測定は標準化された写真によりなされ、そして、面積
が面積計で決定された。切片が標準化された倍率で撮影
され、そして、面積計による測定は創傷の外郭線につい
て行われた。創傷面の計量用のスケールによる測定は、
確実に再現性があった。

創傷の重量は、非化膿性リンパ節炎まで全体の創傷を切
除することによって測定された。第１３図は、創傷の表
面積と創傷の重量との間の相関関係を示し、かくして、
測定基準は重量または面積のいずれかで規定される。

各創傷が除去された後、それは、創傷の重量及びＡＴＰ
の決定のために直ちに一８０℃で凍結された。創傷組織
のＡＴＰ濃度は、肉芽組織を含む全切片を細断すること
によって測定された。Ａ　Ｔ　Ｐ　濃度は、（ＡＴＰ■
）／（組織１０ｇ）として表された。

次の第４表に記載されたデータは、組成物を溶液として
の１日１回の投与の結果、無菌の等滲透圧食塩水（対照
）で処理された創傷よりも１７．８％速い閉かり率にな
ったことを示している。組成物がゲルとして投与された
時には、その率は１．２％速かった０組成物を１日に３
回溶液として投与した時には、１日１回投与した処理に
比べて著しい改善を示した。第５表に示されたデータは
、これらの改善を示しており、そこでは、組成物で処理
された創傷は３７．１％、ＡＴＰでは３１．２％、そし
て組成物／ＡＴＰの混合物では３７．３％の平均減少率
を示した。減少％の値は、等滲透圧食塩水で処理された
対照の創傷の１．１５３という平均創傷重量に比較した
創傷の重量の減少に基づいている。

フし１表 対照と比較した収縮率の上昇％ （１０日間毎日１回投与） ■、　組成物溶液　　　　　５９．３（＋１２．３）　
　？？、３　　１７．８１３６．６（＋７．３０） Ｉｌ、　　ＡＴＰ溶液　　　　　６１．１（＋９４）　
　　６９．４　　５．８１３０．５（＋１２．８）　　
　　　’■、　組成物ゲル　　　　　６１．５（＋１３
．２）　　６６．４　　１．２１２７．９（＋６．７） Ｎ、　ＡＴＰゲル　　　　　７１．９（＋７．４）　　
６１．６　　　（６）１３３．５（＋５．８） ■、　食塩水ゲル対照　　　６４．３（＋１１．５）　
　７１．３　　−１３５．６（＋５．５） ■、　等滲透圧食塩水対照　７２．３（＋１４．４）　
　６５．６　　−１３７．９（＋８．８） ＊（処理されたものについての最初と最終との差の値−
対照■の差の値）十対照■の差の値×１００゜員】ス 創傷の減少％ ■ｌ１１　　菫少五　＊ グループＩ　組成物 ２　　　　　　　０．８３２　　　２７．９３　　　　
　　　　　　　　　、、．３７．１±７．３４　　　　
　　　０．６２７　　　４５．６５　　　　　　　０．
７０６　　　３８．７６　　　　　　　０．７３６　　
　３６．２グループｎ　　ＡＴＰ １　　　　　　　０．７６５　　　３３．７２　　　　
　　　０．８５５　　　２５．９３　　　　　　　１．
０５３　　　　　Ｂ、７　　３７．２±１３．９４　　
　　　　　０．６１４　　　４６．８５　　　　　　　
０．８３８　　　２７．４６　　　　　　　０．６４２
　　　４４．４グループ■　組成物／ＡＴＰ混合物 １　　　　　　　０．８８７　　　２３．１２　　　　
　　　０．７０８　　　３８．６３　　　　　　　０．
７００　　　３９．３　　３７．３±８．２４　　　　
　　　０．７３４　　　３６．４５　　　　　　　０．
５８９　　　４８．９６　　　　　　　　　　０．７２
１　　　　　３７．５グループ■　等滲透圧食塩水の対
照；上記計算のために用いられた値は１．１５３±０．
１３１であった。

１　　　　　　　１．２７０ ２　　　　　　　１．１３１ ３　　　　　　　０．９７６ ４　　　　　　　１．２３４ ５　　　　　　　１．０２６ ６　　　　　　　１．２８４ ＊（対照の値−処理されたものの値）÷対照ｘ１ｏｏ。

第１３図は、創傷表面積と創傷重量との間の関係を示し
ている０重量と表面積との間の直線関係は、重量測定が
創傷の収縮を測定するための有用な手段であり得ること
を示唆している。第１４図に示す棒グラフは、対照のゲ
ルと比較した組成物／ＡＴＰ混合物のゲルについての収
縮の上昇率を示している。ゲルで処理された創傷は対照
よりも速く収縮したが、溶液で処理された創傷と同じ速
さで収縮しなかった。然しなから、各グループにおいて
、組成物または組成物／ＡＴＰ混合物で処理された創傷
は、対照よりも高い収縮率を有していた。

溶液処理及びゲル処理は、創傷重量の著しい減少を来す
ほか、創傷で見出されるＡＴＰの量も減少する。

これは、第６表及び第７表ならびに第１５図及び第１６
図で明らかである。ゲル処理された創傷及び溶液処理さ
れた創傷において、Ａ　Ｔ　Ｐ　濃度が組成物により減
少されることは明らかであるが、創傷個所におけるＡＴ
Ｐの濃度の減少は、思いがけないことである。何故なら
ば、筋ｖＡ維雑芥胞によって生じる創傷の回復及び創傷
の収縮のための蛋白代謝には、ＡＴＰの形の有意量のエ
ネルギーを必要とするからである。即ち、本発明の組成
物に応答して細胞により合成される追加的な細胞内ＡＴ
Ｐは、収縮、グリコゲン形成及び蛋白合成に迅速に利用
される。

】己り良 溶液を切除創傷へ投与 ！１凱並　呈柊匹　皿　ＡＴＰ／虹　玉ニゲループ１ １−〇− ２０，８３２０，６４５０，６１６７，４８，８９ＡＴ
Ｐ３　　１．６６８　　０．６５４　　０．６３８　６
．２　３．７２　８．７８±２．５７４　　０．６２７
　　０．６５４　　０．６３１　８．０　１２．Ｂ　　
員員ｉｔ５　　０、’＋０６　　０．６７１　　０．６
３８　１２．９　１８．３　０．７２５±０．０８６　
　０．７３６　　０．６３９　　０．６１５　９．４　
１２．８グループ■ １　　０．７６５　　０．４５４　　０．４２０　１３
．３　１７．４２　　０．８５５　　０．４５４　　０
．４５１　１．２　１．４ＯＡＴＰ３　　１．０５３　
　０．４５４　　０．４６８　−−−　　　　８．９±
５．３７４　　　０．６１４　　０．４１８　　０．４
２７　−ｍ−員員ｌ１５　　０．８３８　　０．４１８
　　０．４５０　１１．７　１４．０　０．７９４±０
．１６０６　　０．６４２　　０．４６９　　０．４５
０　　？、４　１４．６グループ■ １　　０．８８７　　　α、６３１　　０．５９１　１
５．６　１７．６２　　０．７０８　　０．４４５　　
０．４８５　−−−　　　　　ＡＴＰ３　　　　０．７
００　　０．４２３　　０．４３６　　−−−　　　　
　６．９±６．１８４　　　０．７３４　　　Ｇ、４２
３　　０．４１？　　２．３　３．１　　皿ｍ５　　　
　０．５８９　　　０．４２３　　０．４０５　　　？
、０　１１．９　０．７２３±０．０９５６　　　　０
．７２１　　　０．６０９　　０．６０２　　２．７　
　３．７グループ電 １　　１．２７０　　０．５１５　　０．５００　５．
９　４．７２　　１．１３１　　０．４７４　　０．４
６Ｂ　　２．３　２．０　　ＡＴＰ３　　０．９７６　
　０．４９５　　　Ｑ、４７８　６．６　６．８　７．
６４±４．７５４　　　１．２３４　　０．４７７　　
０．４７８　−ｍ−１ｍ５　　１．０２６　　０．４７
７　　０．４５６　８．２　　Ｂ、０　１．１５３±０
．１３１６　　１．２８４　　０．６７０　　０．６３
１　１５．２　１１．８蚤１糞 ゲルを切除されたラットの創傷へ投与 （１日３回投与） ■１１１１皿並員鼓岨ＡＴＰ　　ＡＴＰ／Ｇ　　９グル
ープ■　組成物ゲル １　　１．２１８　　０．５５３　　０．５４９　１．
６　１．３２　　０．８０５　　０．５？９　　０．５
６５　５．５　６．８　　ＡＴＰ３　　０．８８２　　
０．５６５　　０．５４８　６．６　７．５　５．２±
２．５４　　１．１３９　　０．５６５　　０．５４８
　６．６　５．８！Ｌ！Ｌ！ＵＬ５　　　１．３７６　
　０．５８０　　０．５７０　　３．９　　２．８　１
．０８２±０．２１２６　　　　１．０７６　　０．９
５６　　０．９３８　　７．２　　６．７グループ■ １　　１．１００　　０．７７４　　０．７１？　　２
２．２　２０．２２　　　０．９５４　　０．８１５　
　０．７７７　１４．８　１５．５　−酊ヱ３　　１．
２３６　　　Ｑ、９０６　　０．５８８１２４．０１０
０．３　１７．７±３．０４　　　１．１５８　　０．
７４９　　０．７０４　１７．６　１５．２！１ｌｌｌ
ｆｉ５　　１．１５７　　０．９２９　　０．８８１　
１８．７　１６．２　１．１９６±０．２０７６　　１
．５７４　　０．６０８　　０．５６９　１５．２　９
．７グループ■　組成物／ＡＴＰ　　混合物１　　１．
３３６　　０．５８０　　０．４５８　４７．６　３５
．６２　　１．１１１　　０．５９８　　０．４９８　
３９．０　３５．Ｉ　　Ａ迂３　　１．４８０　　０．
５９２　　０．４７９　４４．１　２９．８　３２．６
±５，７４　　１．３３Ｂ　　　０．６７８　　０．５
６８　４２．９　３２．１　１１１ｊｊ１５　　１．３
９０　　０．５９５　　０．４５３　５５．４　３９．
９　１．４２５±０．２６０６　　１．８９６　　０．
５９５　　０．４８２　４４．１　２３．３グループ■
　等滲透圧ゲル、対照 １　　１．０？３　　０．６３５　　０．５２０　４４
．９　４１．８２　　１．５４０　　０．６２８　　０
．５２０　４２．１　２７．３　　＾ＴＰ３　　１．２
１９　　０．６０４　　０．４７６　４９．９　４０．
９　３６．９±６．５４　　　１．１２７　　０．６０
４　　０．４７６　４９．９　４４．３　　！Ｌ！ＬＬ
！５　　　　１．２５６　　　０．５７？　　　　０．
４６５　４３．７　３４．８　１．２８５±０．１９２
６　　　　１．４９６　　　０．６１７　　　０．４９
４　４Ｂ、０　３２．１要約すると、本発明の組成物を
含有する溶液及びゲルは、無菌の等滲透圧食塩水から成
る対照と比較して、創傷の閉かり率における改善をもた
らした。創傷修復率は、なされた投与回数に関して用量
従属的である様に思われた。即ち、１日１回の投与では
、創傷閉かり率は１７．８％速く、そして、１日３回の
投与では３７．２％速い率であった。他の生物学的定量
における樺に、用量関係反応は、データの妥当性の見地
からみて顕著である０組成物を含有する溶液及びゲルは
、グリコゲン形成及び蛋白合成のために利用できる成分
を増すことによって、対照に比べて改善された創傷閉か
り率をもたらした。更に、本発明の組成物に応答して細
胞により合成される細胞内の増進されたＡＴＰは、この
プロセスのための及び創傷収縮機構のためのエネルギー
源として速やかに利用された。最後に、化学量論的に、
創傷重量と創傷サイズとは同一の関係にあり、創傷重量
とＡＴＰｆｉ度とは逆の関係であった。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明の組成物で補給された食餌をとる７頭
の被検動物の血中Ａ　Ｔ　Ｐ　濃度及び群平均レベルを
示す。 第２図〜第８図は、本発明の組成物による食餌補給前及
び補給後の各被検動物の血中ＡＴＰ濃度の平均を示す。 第９図〜第１２図は、７頭の被検動物中４頭の血中ＡＴ
Ｐ濃度上昇と活動レベル上昇との相関関係を示す。 第１３図は、本発明の組成物を実験用ラットの背中の切
除創傷へ投与した一連の試験における、創傷の表面積と
創傷の重量との間の関係を示す。 第１４図は、本発明の組成物及びＡＴＰを含有するゲル
による創傷収縮率の上昇と対照ゲルによるそれとの比較
を示す。 第１５図及び第１６図は、創傷重量とゲルを投与された
創傷におけるＡＴＰの量との関係を示す。 特許出願人　　レイモンド　ニー、ロンカリ化　理　人
　　弁理士　鈴木守三部 薊珍釘　　　　　　　　麺締僕 Ｓ樫停止 日Ｇ、　　９ 恩欣俸３ 耶種ヰ４ 丞ま体７ 日Ｇ、１２ ＦＩＧ、　　１５　　　　””う ＦＩＧ、　＋６　千−ＡＴＰグ′；し　租或籾／　等々
オ三食硫水丁１し　　　　　　　　’ＴＰ　’ｒｌＶＢ
、ｙ；。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）アミノ酸類または薬理的に許容できるその塩、代謝
   産物、電解質及び五炭糖から成る細胞内ＡＴＰ濃度増進
   用の組成物。 ２）アミノ酸類または薬理的に許容できるその塩が、Ａ
   ＴＰの代謝先駆物質であるアミノ酸類から成る群から選
   ばれることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。 ３）アミノ酸類がＬ−グリシン、Ｌ−アルギニン、Ｄ／
   Ｌ−メチオニン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−トリプトフ
   ァン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−ヒスチジン、及びＬ
   −プロリンまたは薬理的に許容できるその塩からなるこ
   とを特徴とする、請求項１に記載の組成物。４）代謝産
   物が塩化コリン及びイノシトールから成ることを特徴と
   する、請求項１に記載の組成物。 ５）電解質が燐酸マグネシウムから成ることを特徴とす
   る、請求項１に記載の組成物。 ６）五炭糖がＤ−リボースから成ることを特徴とする、
   請求項１に記載の組成物。 ７）各重量％で、Ｌ−グリシン（０．８０〜０．９８％
   ）、Ｌ−アルギニン（３．１９〜３．８９％）、Ｄ／Ｌ
   −メチオニン（１５．９５−１９．４９％）、塩化コリ
   ン（１３．４３−１６．４１％）イノシトール（１１．
   ８３−１４．４７％）、Ｌ−アスパラギン酸（１１．８
   ３−１４．４７％）、Ｌ−トリプトファン（３．４６−
   ４．２２％）、Ｌ−フェニルアラニン（２．７９−３．
   ４１％）、Ｌ−ヒスチジン（２．６５−３．２４％）、
   Ｌ−プロリン（２．００−２．４４％）、Ｄ−リボース
   （１１．８４−１４．４７％）及び燐酸マグネシウム（
   １０．２３−１２．５１％）から成ることを特徴とする
   、細胞内ＡＴＰ濃度増進用の組成物。 ８）各重量％で、Ｌ−グリシン（０．８９％）、Ｌ−ア
   ルギニン（３．５４％）、Ｄ／Ｌ−メチオニン（１７．
   ７２％）、塩化コリン（１４．９２％）、イノシトール
   （１３．１５％）、Ｌ−アスパラギン酸（１３．１５％
   ）、Ｌ−トリプトファン（３．８４％）、Ｌ−フェニル
   アラニン（３．１０％）、Ｌ−ヒスチジン（２．９５％
   ）、Ｌ−プロリン（２．２２％）、Ｄ−リボース（１３
   ．１５％）及び燐酸マグネシウム（１１．３７％）から
   成ることを特徴とする、細胞内ＡＴＰ合成増進用組成物
   。 ９）アミノ酸類または薬理的に許容できるその塩、代謝
   産物、電解質、五炭糖、ビタミン、ミネラル及び矯味剤
   から成る、ウマの細胞内ＡＴＰ濃度及び生体活動レベル
   の増進用の混合物。 １０）アミノ酸類またはその薬理的に許容できる塩がＬ
   −グリシン、Ｌ−アルギニン、Ｄ／Ｌ−メチオニン、Ｌ
   −アスパラギン酸、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−フェニル
   アラニン、Ｌ−ヒスチジン及びＬ−プロリンから成るこ
   とを特徴とする、請求項９に記載の混合物。１１）代謝
   産物が塩化コリン及びイノシトールから成ることを特徴
   とする、請求項９に記載の混合物。 １２）電解質が燐酸マグネシウムから成ることを特徴と
   する、請求項９に記載の混合物。１３）五炭糖がＤ−リ
   ボースから成ることを特徴とする、請求項９に記載の混
   合物。 １４）各重量で、Ｌ−グリシン（０．６ｋｇ）、Ｌ−ア
   ルギニン（２．４ｋｇ）、Ｄ／Ｌ−メチオニン（１２．
   ０ｋｇ）、塩化コリン（１０．１ｋｇ）、イノシトール
   （８．９ｋｇ）、Ｌ−アスパラギン酸（８．９ｋｇ）、
   Ｌ−トリプトファン（２．６ｋｇ）、Ｌ−フェニルアラ
   ニン（２．１ｋｇ）、Ｌ−ヒスチジン（２．０ｋｇ）、
   Ｌ−プロリン（１．５ｋｇ）、Ｄ−リボース（８．９ｋ
   ｇ）、燐酸マグネシウム（７．７ｋｇ）、ラクトアルブ
   ミン（３００ｋｇ）、ダイアモンドＶ−イーストカルチ
   ャー（３４０．９ｋｇ）、乾燥ビート糖蜜（１８１．８
   ｋｇ）、燐酸水素カルシウム（９０．９ｋｇ）、重炭酸
   ナトリウム（２２．７ｋｇ）、ビタミンプレミックス（
   ４５．４５ｋｇ）、硫酸リグナン（１３．０７ｋｇ）及
   び矯味剤（１．３６ｋｇ）から成る、ウマの細胞内ＡＴ
   Ｐ濃度及び生体活動レベル増進用の混合物。 １５）各重量％で、Ｌ−グリシン（０．８０−０．９８
   ％）、Ｌ−アルギニン（３．１６−３．８９％）、Ｄ／
   Ｌ−メチオニン（１５．９５−１９．４９％）、塩化コ
   リン（１３．４３−１６．４１％）、イノシトール（１
   １．８３−１４．４７％）、Ｌ−アスパラギン酸（１１
   ．８３％−１４．４７％）、Ｌ−トリプトファン（３．
   ４６−４．２２％）、Ｌ−フェニルアラニン（２．７９
   −３．４１％）、Ｌ−ヒスチジン（２．６５−３．２４
   ％）、Ｌ−プロリン（２．０−２．４４％）、Ｄ−リボ
   ース（１１．８４−１４．４７％）及び燐酸マグネシウ
   ム（１０．２３−１２．５１％）から成る、創傷修復率
   増進用の医薬製剤。 １６）各重量％で、Ｌ−グリシン（０．８９％）、Ｌ−
   アルギニン（３．５４％）、Ｄ／Ｌ−メチオニン（１７
   ．７２％）、塩化コリン（１４．９２％）、イノシトー
   ル（１３．１５％）、Ｌ−アスパラギン酸（１３．１５
   ％）、Ｌ−トリプトファン（３．８４％）、Ｌ−フェニ
   ルアラニン（３．１％）、Ｌ−ヒスチジン（２．９５％
   ）、Ｌ−プロリン（２．２２％）、Ｄ−リボース（１３
   ．１５％）及び燐酸マグネシウム（１１．３７％）から
   成る、創傷修復率増進用の医薬製剤。 １７）製剤が通常の食塩水に溶解されていることを特徴
   とする、請求項１６に記載の医薬製剤。 １８）製剤が１％ｗ／ｖの濃度で通常の食塩水に溶解さ
   れていることを特徴とする、請求項１６に記載の医薬製
   剤。 １９）製剤がゲルに組み入れられることを特徴とする、
   請求項１６に記載の医薬製剤。 ２０）製剤が１％ｗ／ｖの濃度でゲルに組み入れられて
   いることを特徴とする、請求項１６に記載の医薬製剤。 ２１）製剤がアバロンゲルに組み入れられていることを
   特徴とする、請求項１６に記載の医薬製剤。