JPH01143836A - プロリルエンドペプチダーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、一般式 令室素原子以外の異項原子を含むこともある５〜６′員
環の飽和異項環である）で表される化合物を有効成分と
して含有することを特徴とするプロリルエンドペプチダ
ーゼ阻害剤に関するものである。

〔従来の技術〕

人口の高齢化に伴って老人医療に関する問題が重要視さ
れてきている。なかでも老人性痴呆は社会的にも深刻な
問題であり、効果的な治療剤の早急な開発が望まれてい
る。

これまで、健忘症や痴呆の治療剤としては、脳血管拡張
などの作用による脳循環改善剤、酸素消費量亢進などの
作用による脳代謝賦活剤などが専ら用いられている。

また、近年、コリン作動系に作用する薬物、すイロトロ
ピン放出ホルモン（Ｔｈｙｒｏｔｒｏｐｉｎ−Ｒｅｌｅ
ａｓ−ｉｎｇ　Ｈｏｒｍｏｎｅ、以下ＴＲＩＩという）
様作用物質など新しい作用による抗痴呆剤も種々見出さ
れてきている。

プロリルエンドペプチダーゼ（Ｐｒｏｌｙｌ　Ｅｎｄｏ
−ｐｅｐｔｉｄａｓｅ、以下ＰＢＰという）はプロリン
を含む生理活性ペプチドや合成基質に作用し、プロリン
のカルボキシル側を特異的に切断する酵素として知られ
ている。この酵素は記憶と関係があるとされているバゾ
プレシン（Ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ）やＴＲＨなどを分
解することからこの酵素の阻害活性と抗健忘効果の関連
性について種々検討が行われ、その結果、ＰＥＰ阻害剤
は痴呆や健忘の治療剤となり得ることが示唆され（生化
学、５５巻、８号、８３１ページ、　１９８３年）、注
目を集めてきている。

これまで、ＰＥＰを阻害する化合物としては、Ｃ末端に
２−ホルミルピロリジン、２−クロロメチルカルボニル
ピロリジン、２−ジアゾメチルカルボニルピロリジンを
もつアミノ酸誘導体が知られているが、いずれも未だ実
用に供されるには至ってぃない。（日本特許公開公報昭
６０−１８８３１７号、同６０−１７２９２９号）。

一方、本発明のような化合物として、既に式（式中のＲ
は水酸基、アミノ基、アルコキシ基である）で表される
化合物、 （Ｒ”は水素原子またはアルキル基である）で表される
化合物および などの化合物が知られている。〔スイス特許６１４６９
９（ケミカルアブスト５７７９２巻、２１号、２１５７
８３ｔ）、米国特許３９７３００６　（ケミカルアブス
トラクッ８６巻、３号、１６９６０２）　　、ヨー　Ｃ
Ｉ−／パ特許出１ｆｉ１７３５１０　（ケミカルアブス
ト９７７１０５巻、５号、４３３４０ｑ）　　、日本特
許出願公開公報６１−１４５１９８　（ケミカルアブス
ト９７７１０５巻、２５号、２２７３４１ｘ）、インタ
ーナショナル　ジャーナル　オブ　ペプチド　アンドプ
ロティン　リサーチ（Ｉｎｔ、　Ｊ、Ｐｅｐｔ、Ｐｒｏ
ｔｅｉｎＲｅｓ）　、１８巻、２号、１８０ページ、１
９８１年（ケミカルアブストラフフタ５巻、１６９７７
ｆ　　１９ｇ１年）、同２０巻、３号、２７６ページ、
１９８２年（ケミカルアブストラクツ９８巻、５４４６
４ｗ　　１９８２年）〕。

しかしながら、これらはいずれもペプチド化合物の合成
中間体として製造されており、それ自体の薬理作用は何
ら報告されていない。

〔発明が解決しようとする問題点〕

従来ＰＢＰ阻害活性を有する化合物はほとんどＣ末端に
２−ホルミルピロリジン、２−クロロメチルカルボニル
ピロリジン、２−ジアゾメチルカルボニルピロリジンな
どを有するアミノ酸誘導体であり、これらは安全性の面
で実用に供され難いものであった。

このため、より安全なＰＰＰ阻害剤の開発が望まれてい
た。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らはより安全で阻害作用の強いＰＥ、Ｐ阻害剤
を見出すべく検討した結果、ある種のプロリンの環状ア
ミド誘導体がＰＥＰ阻害活性を有し、目的が達成できる
ことを見出した。本発明はこのような知見に基づくもの
である。

本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合物は牛脳由来
のＰＯＰに対する阻害活性を示し、毒性もピペリジン、
モルホリン、チオモルホリン等のよな５〜６員環の飽和
異項環をあげることができる。

これらの異項環の中で５員環異項環が好ましく、特にチ
アゾリジンが最も好ましい。

本発明の前記一般式（１）の化合物は一部新規化合物も
含まれるが、前記文献（Ｂｕｌｌ、Ｃｈｅｍ。

Ｓｏｃ、Ｊａｐ、　　５１巻、　１号、２０１ページ、
　　１９７８年；Ｐｏｌｙｍｅｒ　１８巻、　１２０８
ページ、　１９７７年；　日本特許公開公報昭４８−１
０７８号）記載の方法あるいはそれらの類似方法により
製造することができる。

例えば、式 （式中のＡは前記と同じ意味をもつ）で表されるＮ−置
換プロリンまたはその反応性官能的誘導体と、一般式 される環状アミンとを反応させることにより製造するこ
とができる。

本発明の製造方法において出発原料として用いられる式
（ｎ）および一般式（ＩＩＩ）の化合物はいずれも公知
化合物であり、市販品として入手できるか、あるいは文
献記載の方法により容易に製造することができる。

本発明の一般式（１）の化合物を式（ＩＩ）の化合物と
一般式（ＩＩＩ）の化合物を用い゛て製造する場合は、
概ね縮合剤の存在下に反応を行うが、このような縮合剤
としてはペプチド合成において一般に用いられる縮合剤
、例えば、Ｎ、Ｎ−ジシクロへキシルカルボジイミドな
どが用いられる。

また、本発明の一般式（Ｉ）の化合物を式（ｎ）の化合
物の反応性官能的誘導体を用いて製造する場合、そのよ
うな誘導体としては、酸ハロゲン化物、酸無水物、混合
酸無水物、活性エステルなどをあげることができる。

本発明の一般式（Ｉ）の化合物は常法に従い、種々の医
薬品製剤とすることができる。すなわち、必要に応じて
賦形剤、崩壊剤、縮合剤、滑沢剤等の医薬品添加物を加
え、常法に従って調剤することにより、種々の製剤、例
えば錠剤、散剤、′顆粒剤、カプセル剤等とすることが
できる。

本発明の前記一般式（１）の化合物を健忘症等の治療に
用いる場合、その投与量は患者の年令、体重、性別、症
状の度合等により適宜決定されるが、概ね成人１日当た
り経口投与の場合５０〜１０００ｍｇ、非経口投与の場
合１〜５００ｍｇの範囲内で使用される。

〔発明の効果〕

本発明の前記一般式（１）の化合物はＮ−カルボベンゾ
キシ−し−グリシル−し−プロリル−β−ナフチルアミ
ド（以下Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−β−Ｎ＾という）を基質
とした牛脳由来プロリルエンドペプチダーゼに対する阻
害活性測定試験において、概ね、１ｘ１０−３〜２Ｘ１
０−’モル濃度で５０％阻害活性を示す。

特に、１−（Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−し
−プロリル）ピロリジンのＩＣ，。値は１．９Ｘ１０−
’モルである。

このように、本発明の前記一般式（１）の化合物は強い
ＰＥＰ阻害活性を示し、しかも毒性も低いので、安全で
優れた健忘症治療剤として有用である。

〔実施例〕

本発明を以下の実施例を用いてさらに詳細に説明する。

なお、各実施例中の化合物の融点はすべで未補正である
。

参考例　Ｉ Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−し−ブロワβ−
アラニン１．７８ｇを２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液１
０　ｄに溶解し、水冷下に撹拌しつつ、塩化カルボベン
ゾキシ４．１ｇと２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液１５　
ｄとを同時に滴下した。滴下後さらに室温で２時間撹拌
したのち、ジエチルエーテルで洗い、水冷下に濃塩酸を
加えて酸性とした。３０分間放置したのち酢酸エチルで
抽出し、有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥した。

減圧下に溶媒を留去し、Ｎ−カルボベンゾキシ−β−ア
ラニン３．４５　ｇ（７７，４％）を得た。この無色透
明粘稠な液体を冷却放置して固化させ、ジエチルエーテ
ル−石油エーテルより再結晶して、無色針状結晶を得た
。

得られたＮ−カルボキシ−β−アラニン２．２３ｇとＮ
−ヒドロキシコハク酸イミド１．１５ｇとをジオキサン
２０ｍｇに溶解し、冷却下に撹拌しつつ、Ｎ、　Ｎ’−
ジシクロへキシルカルボジイミド２．０６ｇとジオキサ
ン５−の溶液を滴下した。冷所に一夜放置した後、析出
した結晶をろ去し、ろ液を減圧下に濃縮した。

残留油状物をジメトキシエタン１５！！に溶解し、水冷
下に撹拌しつつＬ−プロリン１．１５ｇを加えた。−夜
放置した後ミ減圧下に溶媒を留去し、残留物に水５ｍｌ
を加え、３０分間かきまぜた後、酢酸エチルで抽出した
。有機層をＩＮ−塩酸、５％炭酸水素ナトリウム水溶液
および飽和食塩水で順次洗い、無水硫酸ナトリウムで乾
燥後減圧下に溶媒を留去した。

残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶
媒：酢酸エチル／ベンゼン＝６／４）　で精製して無色
針状晶の、Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−Ｌ−
プロリンを得た。

参考例　２ β−アラニンの代わりにＬ−フェニルアラニンを用いた
以外は参考例１と同様にしてＮ−カルボベンゾキシ−Ｌ
−フェニルアラニル−Ｌ−ブロリンヲ得た。

実施例　Ｉ Ｎ−カルボベンゾキシ−β−アラニル−し−フロリン３
．３０ｇとＮ−ヒドロキシコハク酸イミド１．１５ｇと
をジオキサン２０−に溶解し、冷却下に撹拌しつつ、Ｎ
、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミド２．０６ｇと
ジオキサン５ｄの溶液を滴下した。冷所に一夜放置した
のち、析出した結晶をろ去し、ろ液を減圧下に濃縮した
。残留油状物をジメトキシエタン１５　ｍｇに溶解し、
水冷下に撹拌しつつ、ピロリジン０．７１ｇを滴下した
。−夜放置したのち減圧下に溶媒を留去し、残留物に水
５ｍｌを加え、３０分間かきまぜたのち、酢酸エチルで
抽出した。

有機層をＩＮ−塩酸、５％炭酸水素ナトリウム水溶液お
よび飽和食塩水で順次洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後減圧下に溶媒を留去した。残留物をシリカゲルカラム
クロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ベンゼン
＝　６／４）で精製して無色針状結晶の１−（Ｎ−カル
ボベンゾキシ−β−アラニル−Ｌ−プロリル）ピロリジ
ンを得た。

油状物 ＩＲ（にＯｒ）：　　νｃ０　１７１０．１６３０　　
Ｃ１１−’Ｃα〕＝−３４，９°　（Ｃ４，ＭｅＯＨ）
ＮＳ　（Ｅｌ）：　Ｃｔ。ＨａｖＯｎｌｌｓ　＝３７３
．４３ｍ／ｚ　　３７３　（Ｍ”）、　２７５．２０６
．１４３．９１元素分析値：（Ｃ３゜１（２ＪＪｓとし
て）０％　　　Ｎ％　　　Ｎ％ 計算値　　６４．３２　　　７．２９　　１１．２５実
測値　　６２，９４　　　７．３８　　１０．５４実施
例　２ 対応する原料を用い、実施例１と同様に反応を行って下
記の化合物を合成した。

ＭＳ　（ＦＡＢ）：　ＣｚｓＨ２ＪｓＮｓＳ　”　４６
７．５６ｍ／ｚ　　４６８　（Ｍ”＋１）、　３７９．
２１０．１２０Ｍ５　（ＦＡＢ）：　Ｃ２６Ｈ３１０，
Ｎ３　＝　４４９．５２ｍ／ｚ　　４５０　（Ｍ”＋１
）、　３７９．２１０．１２０Ｍ５　　（ＦＡＢ）：　
　ＣｚｓＨｓ＋口、Ｎ、Ｓ　　＝　　４８１．５８ｍ／
ｚ　　４８２　（Ｍ”＋１）、　３７９．２１０実施例
　３ ＰＥＰ阻害活性測定実験 Ｚ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−β−ＮＡを基質として用い、牛脳
由来ＰＢＰに対する阻害活性を測定した。

（測定方法） １０　ｍＭ　のＥ口ＴＡと１０　ｍＭの２−メルカプト
エタノールを含む２０　ｍＭ　）リス塩酸緩衝液（２０
ｍＭ−Ｔｒｉｓ　ＨＣＩＢｕｆｆｅｒ、　　ｐＨ＝７．
０）　０．７ｄにＰＥＰ　（約０．１４　ｕ／ｍｆｆ１
）１００通および各濃度（０，１０−’　〜１０−’　
Ｍ）　　１，１：調整した被験化合物の溶液１００　ｄ
を加え、３７℃で５分間ブレインキュベーション（Ｐｒ
ｅｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ）　した。

次いでこれに１００　ｄの４０％ジオキサンに溶かした
各々の濃度（５，０，２，５，１，２５，０，６２５，
０，３１２５ｍＭ）の基質を加え、再び３７℃で１５分
間インキ二ベーションを行い、酵素反応を進行させた。

２５％トリクロル酢酸で反応を停止させ、３０００　ｒ
、ｐｏｍ、で１０分間遠心分離を行い、上清０．５ｍｌ
を分取し、これに０．５−の０．１％亜硝酸を加え、さ
らに、３分後、０．０５％のＮ−（１−ナフチル）エチ
レンジアミンジヒドロクロリドエタノール溶液を加えた
。混合液を３７℃で２５分放置した後、５７０　ｎｍで
の吸光度を測定し、次式によって各濃度での酸素活性を
試算し、それぞれの活性値から５０％阻害濃度（ＩＣｓ
ｏ値）　を求めた。

酵素活性単位（、ｕｍｏｌ／ｍｉｎ／　ｍＡ）　　＝Δ
０口Ｘ０．４２Ｘ希釈率 （結　果） 化合物　　　　　ＩＣ，。値 化合物　Ａ　　　　　１９　　μＭ 化合物　８　　　　３４．７　μＭ 化合物　Ｃ１８，２μＭ 化合物　Ｃ１ｍＭ 実施例　４ 製　　　剤 以下のような処方に従い、各種製剤を製する。

なお、剤型の種類および処方は調剤例として挙げたもの
にかぎるものではない。

（Ａ）　　　散　　剤 処方 化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ 乳　　糖　　　　　　　　　　　　　９７５　ｇ全　　
　量　　　　　　　　　　　１０００　　ｇ以上をよく
混和し、散剤を製する。

（Ｂ）　　　散　　剤 処方 化合物　Ａ　　　　　　　　５ｇ 乳　　糖　　　　　　　　　　　　　４９５　ｇ全　　
　量　　　　　　　　　　　　５００　ｇ以上をよく混
和し、散剤を製する。

（Ｃ）　　　錠　　剤 処　　方 化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ 乳　　糖　　　　　　　　　　　　　１４０８６％）Ｉ
ＰＣ乳糖　　　　　　１１０ｇパイレショデンプン　　
′２０ｇ 以上をよく混和して打錠し、錠剤１０００個を製する。

（Ｄ）錠剤 処方 化合物　Ａ　　　　　　　　５ｇ 乳糖　　　　１５０ｇ ６％ＲＰＣ乳糖　　　　　　１２０ｇ パイレショデンブン　　　２０　ｇ 以上をよく混和して打錠し、錠剤１０００個を製する。

（Ｅ）　　カプセル剤 処　　方 化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ 乳　　糖　　　　　　　　　　　　　２２０　ｇパイレ
ショデンプン　　　５０　ｇ ステアリン酸タルク　　　５ｇ 以上をよく混和し、硬カプセルに充填し、カプセル剤１
０００カプセルを製する。

（Ｅ）　　カプセル剤 処　　方 化合物　Ａ　　　　　　　　２５　ｇ 乳　　糖　　　　　　　　　　　　　２３５　ｇパイレ
ショデンプン　　　５５ｇ ステアリン酸タルク　　　５ｇ 以上をよく混和し、硬カプセルに充填し、カプセル剤１
０００カプセルを製する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＡはアミノ酸残基であり、▲数式、化学式、表
   等があります▼は結合窒素原子以外の異項原子を含むこ
   ともある５〜６員環の飽和異項環である）で表される化
   合物を有効成分として含有することを特徴とするプロリ
   ルエンドペプチダーゼ阻害剤