JP7364258B2 - Ｒｏｃｋキナーゼ阻害剤のニトロキシド誘導体 - Google Patents

Ｒｏｃｋキナーゼ阻害剤のニトロキシド誘導体 Download PDF

Info

Publication number
JP7364258B2
JP7364258B2 JP2021529083A JP2021529083A JP7364258B2 JP 7364258 B2 JP7364258 B2 JP 7364258B2 JP 2021529083 A JP2021529083 A JP 2021529083A JP 2021529083 A JP2021529083 A JP 2021529083A JP 7364258 B2 JP7364258 B2 JP 7364258B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
compound
reaction
mmol
pyridin
ylamino
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2021529083A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2022530590A (ja
Inventor
旺 沈
奎峰 党
超 ▲張▼
春明 ▲陳▼
立弘 ▲単▼
文 丁
▲きん▼ 王
佳晨 糜
▲亜▼波 ▲孫▼
夏▲きん▼ 盛
家磊 沈
勇 李
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Vivavision Biotech Ltd
Original Assignee
Vivavision Biotech Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vivavision Biotech Ltd filed Critical Vivavision Biotech Ltd
Publication of JP2022530590A publication Critical patent/JP2022530590A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7364258B2 publication Critical patent/JP7364258B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system having sulfur as a ring hetero atom, e.g. ticlopidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D275/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-thiazole or hydrogenated 1,2-thiazole rings
    • C07D275/04—Heterocyclic compounds containing 1,2-thiazole or hydrogenated 1,2-thiazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Description

本発明は、新しい複素環式ＲＯＣＫキナーゼ阻害剤に関し、より具体的には、ＲＯＣＫキナーゼ阻害剤のニトロキシド誘導体に関するものであり、これらの化合物は、緑内障および網膜疾患を治療するために使用することができる。
Ｒｈｏ－関連のコイルドコイルプロテインキナーゼ（ＲＯＣＫ）は、セリン－スレオニンキナーゼのＡＧＣ（ＰＫＡ ／ ＰＫＧ ／ ＰＫＣ）ファミリーに属する。ＲＯＣＫの２つのヒトアイソタイプが記載されてり、ＲＯＣＫ－Ｉ（ｐ１６０ＲＯＣＫまたはＲＯＫβとも呼ばれる）とＲＯＣＫ－ＩＩ（ＲＯＫα）は、Ｎ末端のＳｅｒ ／ Ｔｈｒキナーゼドメインを含む約１６０ｋＤａのタンパク質であり、コイルドコイル構造、プレクストリン相同ドメイン、およびＣ－末端に位置するシステインリッチドメインを持つ（Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｋｉｎａｓｅｓ ｉｎ ｃｅｌｌ ｂｅｈａｖｉｏｕｒ． Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． ２００３（４）：４４６－４５６）。
Ｒｈｏは小分子モノマーのＧＴＰａｓｅスーパーファミリーに属し、Ｒａｓスーパーファミリーの哺乳動物遺伝子ホモログであり、最も重要な下流エフェクター分子であるＲｈｏキナーゼ（Ｒｈｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｃｏｉｌｅｄ－ｃｏｉｌ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ，ＲＯＣＫ）により細胞のアクチン骨格の再構築を調製し、それにより、細胞有糸分裂、細胞骨格調整、平滑筋細胞収縮、神経再生、腫瘍細胞浸潤、およびアポトーシスの調製などの一連の生物学的プロセスに広く参加する。活性化後、Ｒｈｏ ／ ＲＯＣＫはさまざまな基質に作用し、生物学的プロセスをもたらす。最も重要な２つの基質は、ミオシン軽鎖（ＭＬＣ）とミオシン軽鎖ホスファターゼ（ＭＬＣＰ）であり、ＭＬＣのリン酸化レベルは、平滑筋収縮度を決定する重要な因子である。ミオシン軽鎖キナーゼ（ＭＬＣＫ）はＭＬＣのＳｅｒ－１９部位をリン酸化することにより、平滑筋の収縮を引き起こし；ＭＬＣＰに対する抑制は、ＭＬＣのリン酸化と平滑筋の収縮をさらに促進できる。ＲＯＣＫが活性化されると、ＭＬＣをリン酸化して筋フィラメントの収縮を引き起こすことができるとともに、ＭＬＣＰをリン酸化してＭＬＣＰを不活性化し、細胞質内のＭＬＣのリン酸化程度を増加させ、間接的に筋フィラメントの収縮を促進できる。
動物モデルにおけるＲｈｏキナーゼ活性の抑制は、肺高血圧症、高血圧症、粥状動脈硬化症、心肥大、高眼圧症、脳虚血、脳血管痙攣などの心血管疾患と、神経変性などの中枢神経系疾患、および腫瘍を含む、ヒトの疾患の治療においてさまざまな利点を示している。研究によると、ＲＯＣＫの発現と活性は自然発症高血圧ラットで上昇しており、これらの動物での高血圧の発生に関連していることが示されている（Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｒｈｏ－ｋｉｎａｓｅ ｉｎ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ： ａ ｎｏｖｅｌ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． ＦＡＳＥＢ Ｊ．，２００１，１５（６）：１０６２－４）。ＲＯＣＫ阻害剤Ｙ－２７６３２は、３種類のラット高血圧モデル（自然発症高血圧、腎高血圧、酢酸デオキシコルチコステロン塩高血圧）の血圧を大幅に低下でき、対照ラットの血圧に対する作用はわりに少ない（Ｃａｌｃｉｕｍ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ａ Ｒｈｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｉｎ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ， １９９７， ３８９（６６５４）：９９０－４）。また、ＲＯＣＫ阻害剤が肺高血圧症に対して良い効果があると報告される研究もある（Ａｃｕｔｅ ｖａｓｏｄｉｌａｔｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａ Ｒｈｏ－ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ， ｆａｓｕｄｉｌ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｅｖｅｒｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． Ｈｅａｒｔ，２００５：９１（３）：３９１－２）。
ＲＯＣＫ活性は、白血球－血小板－内皮相互作用、白血球の血管外漏出および浮腫における重要なシグナル伝達メカニズムである。内皮細胞におけるＲｈｏキナーゼの過剰な活性化は、炎症細胞の動員を促進する細胞間結合の破壊に起因する漏出を引き起こすことがある。要するに、これらの証拠は、急性および慢性炎症と関連する病的状態および自己免疫疾患におけるＲＯＣＫの役割を示している（Ｉｓｏｆｏｒｍ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ＲＯＣＫ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｉｍｍｕｎｅ ｃｅｌｌｓ． Ｓｍａｌｌ ＧＴＰａｓｅｓ． ２０１６；７（３）：１７３－１７７）。ＲＯＣＫ阻害が関節リウマチおよび狼瘡の実験モデルにおける有益な効果は、動物実験によって検証されている（Ｒｈｏ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ． Ｃｕｒｒ． Ｔｏｐ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．２００９（９）：７０４－７２３；Ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＡＳ１８９２８０２， ａ ｎｏｖｅｌ ｒｈｏ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ， ｉｎ ｒａｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ ｎｏｎｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ． Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２０１０，３３４：９５５－９６３；Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆａｓｕｄｉｌ， ａ ＲＯＣＫ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ， ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｌｕｐｕｓ－ｐｒｏｎｅ ＮＺＢ／Ｗ Ｆ１ ｆｅｍａｌｅ ｍｉｃｅ． Ｌｕｐｕｓ． ２０１２；２１（６）：６５６－６１）。ファスジルのＴ細胞遊走に対する阻害効果は、その多発性硬化症の新しい治療法としての臨床応用を拡大する可能性がある（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ ｂｙ Ｆａｓｕｄｉｌ， ａ Ｒｈｏ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ． Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｒｅｓ．２０１０；８８（８）：１６６４－７２）。蓄積された証拠もまた、ＲＯＣＫが炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の発症機序を調節する腸バリアの破壊、粘膜免疫細胞への腸内容物の曝露、および異常な免疫応答の３つの疾患因子において重要な役割を果たしていることが確認されている（Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｒｈｏ ｋｉｎａｓｅ ｓｉｇｎａｌ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｉｎｔ Ｊ ＣｌｉｎＥｘｐ Ｍｅｄ．２０１５；８（３）：３０８９－３０９７）。
現在市販されているＲＯＣＫ阻害剤には、Ａｓａｈｉ Ｋａｓｅｉ社のＥｒｉｌ（脳血管痙攣治療用）、ＫｏｗａのＧｌａｎａｔｅｃ（高眼圧症と緑内障の治療用、日本でのみ承認され）があり、米国Ａｅｒｉｅ社の新しい緑内障治療薬Ｒｈｏｐｒｅｓｓａ（ｎｅｔａｒｓｕｄｉｌ）は、開放隅角緑内障または高眼圧症に罹患している患者の眼圧を下げる治療薬として、２０１７年に米国で承認された。Ｒｈｏｐｒｅｓｓａは新しい１日１回の点眼薬である。
一酸化窒素（ＮＯ）は、重要な細胞間情報伝達因子である。一酸化窒素（ＮＯ）は、一酸化窒素シンターゼによって生体内で合成でき、薬物（ニトログリセリン、Ｌａｔａｎｏｐｒｏｓｔｅｎｅ Ｂｕｎｏｄニトロ含有プロスタグランジン薬など）によって放出される。ＮＯは可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）に結合し、グアノシン三リン酸を環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）に変換する。ｃＧＭＰは、平滑筋の弛緩と血管拡張、および血小板抑制や細胞の成長と分化など、他の多くの重要な生物学的プロセスを調節するセカンドメッセンジャーである。一酸化窒素は、視神経乳頭の血流量とＩＯＰを調節する上で重要な生理学的役割を果たす。視神経乳頭では、ＮＯドナーは平滑筋を弛緩させることによって血管抵抗を減少させ、局所的な血管拡張と視神経乳頭への血流を増加させる。逆に、ＮＯ経路の損傷は視神経乳頭への血流を減少させ、虚血を引き起こしてしまう。
一酸化窒素は、眼圧（ＩＯＰ）を調節する上で重要な生理学的役割を果たす。たとえば、内皮型一酸化窒素合成酵素（ｅＮＯＳ）は、ぶどう膜血管系、Ｓｃｈｌｅｍｍ管、および毛様体の内皮に存在する。一酸化窒素は、ヒトの前部小柱網（ＴＭ）を増加させることが知られ、ＮＯドナーは動物モデルのＩＯＰを低下させることができる。同時に、ｅＮＯＳ過剰発現マウスはＩＯＰが低くなる。対照的に、ｅＮＯＳノックアウトマウス（機能的なｅＮＯＳ遺伝子がない動物であるため、内因性ｅＮＯＳがない）ではＩＯＰが増加し、ｓＧＣノックアウトマウスではＩＯＰ増加と視神経変性が現れる。ＮＯがＩＯＰを低下させるメカニズムは、アクチンとミオシンの相互作用を抑制することによってＴＭとＳｃｈｌｅｍｍ管における細胞を弛緩させ、水の流出を増加させ、ＩＯＰを減少させると思われる。
したがって、ＲＯＣＫキナーゼに対する抑制作用と持つとともに、ＮＯドナーである小分子薬の開発は、単一機能の小分子よりも眼圧（ＩＯＰ）を低下させる効果を達成する可能性があり、非常に重要な社会的および経済的意義を持つ。
本発明の目的は、ＲＯＣＫキナーゼに対して高い活性を有する阻害剤、同時にＮＯドナーである新規の小分子薬物、ならびにその調製方法および用途を提供することである。
本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、以下の構造式Ｉに示される化合物またはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、ラセミ体、重水素置換同位体誘導体、水和物、溶媒和物、代謝物および薬学的に許容される塩またはプロドラッグであり：
式Ｉ；
ただし、環Ａは置換または非置換のヘテロアリール環であり；
Ｘは（ＣＨ２）ｎから選ばれ、そのうち、ｎは０、１、２、３から選ばれ；
Ｒは末端－Ｏ－ＮＯ２の置換基であり；
Ｒ１は水素、水酸基、ハロゲン、アミノ基、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基、置換または非置換のアルケニル基、置換または非置換のアルキニル基、置換または非置換のヘテロアルキル基から選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立に水素、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のシクロアルキル基、アミノ保護基から選ばれ；
または、Ｒ２とＲ３が結合して置換または非置換のシクロヘテロアルキル基を構成することを特徴とする。
更に、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物は、以下の構造式に示される化合物またはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、ラセミ体、重水素置換同位体誘導体、水和物、溶媒和物、代謝物および薬学的に許容される塩またはプロドラッグであり：
Ｌは結合基であり、置換または非置換のアルキレン基、置換または非置換のヘテロアルキレン基、置換または非置換のアルキレンオキシド基、置換または非置換のシクロアルキル基、置換または非置換のヘテロシクロ基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換のヘテロアリール基、置換または非置換のエステル基から選ばれることを特徴とする。
さらに、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、前記環Ａは式Ａ、または式Ｂから選ばれ；
Ｒ’はヘテロアリール環上の１つまたは複数の置換の置換基であり；
前記置換基は水素、水酸基、ハロゲン、アミノ基、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基、置換または非置換のヘテロアルキル基から選ばれ；
Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５、Ａ６、Ａ７、Ａ８、Ａ９の中の少なくとも１つは窒素、硫黄、酸素から選ばれ；
Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５、Ｂ６、Ｂ７、Ｂ８、Ｂ９の中の少なくとも１つは窒素、硫黄、酸素から選ばれることを特徴とする。
さらに、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、前記環Ａは式Ｉａ、または式Ｉｂ、または式Ｉｃから選ばれ；
Ｒ２１は水素、水酸基、ハロゲン、アミノ基、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基、置換または非置換のヘテロアルキル基から選ばれ；
Ｒ２２は水素、ハロゲン、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基から選ばれることを特徴とする。
更に、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物は、以下の構造式に示される化合物またはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、ラセミ体、重水素置換同位体誘導体、水和物、溶媒和物、代謝物および薬学的に許容される塩またはプロドラッグであり：
ただし、Ｌ１は化学結合であり、または置換または非置換のアルキレン基であり；
Ｌ２は置換または非置換のアルキレン基、置換または非置換のアルキレンオキシド基、置換または非置換のシクロアルキル基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換のヘテロアリール基から選ばれ；
Ｌ３は化学結合であり、または置換または非置換のアルキレンオキシド基であることを特徴とする。
更に、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物は、以下の構造式に示される化合物またはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、ラセミ体、重水素置換同位体誘導体、水和物、溶媒和物、代謝物および薬学的に許容される塩またはプロドラッグであり：
ｎ１は０または自然数であり；
ｎ２は０または自然数であり；
Ｙは置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のシクロアルキル基、置換または非置換のヘテロシクロ基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換のヘテロアリール基から選ばれることを特徴とする。
さらに、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、以下の構造に示される化合物のヒドロキシル基をニトロ化する反応によって得られ；ニトロ化条件は、濃硝酸、または硝酸により無水酢酸において行うことを特徴とする。
。
さらに、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、以下の構造に示される化合物のハロゲンをニトロ化する反応によって得られ；ニトロ化条件は硝酸銀の作用であってもよいことを特徴とする。
Ｙはハロゲンである。
さらに、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、以下の式ＩＩＩａと式ＩＩＩｂに示される化合物のカップリング反応により得られ；
Ｚはハロゲンであることを特徴とする。
さらに、本発明で提供するＮＯドナーである小分子化合物において、ＲＯＣＫキナーゼの阻害剤として使用されることを特徴とする。
本発明で言及される置換のアルキル基とはアルキル基の炭素鎖上の水素原子の１つまたは複数がほかの基で置換された基であり、前記ほかの基はシクロアルキル基
（
などと類似する形で置換し、当該シクロアルキル環上のいずれの水素原子はさらにハロゲン、シアノ基、アルキル基、水酸基、カルボキシ基などの基で置換できる）、ヘテロシクロアルキル基（つまり、前記シクロアルキル基に基づいて、そのアルキル環上の少なくとも１つ炭素原子は酸素、硫黄、窒素で置換される）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、スルホン酸基（－ＳＯ４，）、スルホニル基（－ＳＯ２Ｒａ、Ｒａは水素、アルキル基、アリール基など）、アルキニル基（－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＲｂ、Ｒｂはアルキル基、アリール基など）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない；
本発明で言及される置換のヘテロアルキル基とは、前記置換のアルキル基の中の１つまたは複数の炭素は窒素、酸素、硫黄などのヘテロ原子で置換され；
本発明で言及される置換のシクロアルキル基とはアルキル環上の１つまたは複数の水素原子はほかの基で置換され、前記ほかの基はアルキル基、置換のアルキル基（同上）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、スルホン酸基（－ＳＯ４，）、スルホニル基（－ＳＯ２Ｒａ、Ｒａは水素、アルキル基、アリール基など）、アルキニル基（－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＲｂ、Ｒｂはアルキル基、アリール基など）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない；
本発明で言及される置換のヘテロシクロアルキル基とは、前記置換のシクロアルキル環上の少なくとも１つの炭素原子は窒素、酸素、硫黄などのヘテロ原子で置換され；
本発明で言及される置換のアルケニル基とは、－Ｃ＝Ｃ－構造中の水素原子はほかの基で置換され、前記ほかの基はアルキル基、置換のアルキル基（同上）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない；
本発明で言及される置換のアルキニル基とは、－Ｃ≡ＣＨ構造中の水素原子はほかの基で置換され、前記ほかの基はアルキル基、置換のアルキル基（同上）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない；
本発明で言及される置換のアルキレン基とは、－（ＣＨ２）ｎ（０、自然数）－構造中の水素原子の１つまたは複数がほかの基で置換された基であり、前記ほかの基はシクロアルキル基
（
などと類似する形で置換し、当該シクロアルキル環上のいずれの水素原子はさらにハロゲン、シアノ基、アルキル基、水酸基、カルボキシ基などの基で置換できる）、ヘテロシクロアルキル基 （つまり、前記シクロアルキル基に基づいて、そのアルキル環上の少なくとも１つ炭素原子は酸素、硫黄、窒素で置換される）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、スルホン酸基（－ＳＯ４，）、スルホニル基（－ＳＯ２Ｒａ、Ｒａは水素、アルキル基、アリール基など）、アルキニル基（－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＲｂ、Ｒｂはアルキル基、アリール基など）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではなく、また、複数の炭素原子間は架橋結合で接続でき；
本発明で言及される置換のアルキレンオキシド基とは、－Ｏ－（ＣＨ２）ｎ（０、自然数）－または－（ＣＨ２）ｎ（０、自然数）－Ｏ－（ＣＨ２）ｎ（０、自然数）－構造中の水素原子の１つまたは複数がほかの基で置換された基であり、前記ほかの基はシクロアルキル基（
などと類似する形で置換し、当該シクロアルキル環上のいずれの水素原子はさらにハロゲン、シアノ基、アルキル基、水酸基、カルボキシ基などの基で置換できる）、ヘテロシクロアルキル基（つまり、前記シクロアルキル基に基づいて、そのアルキル環上の少なくとも１つ炭素原子は酸素、硫黄、窒素で置換される）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、スルホン酸基（－ＳＯ４，）、スルホニル基（－ＳＯ２Ｒａ、Ｒａは水素、アルキル基、アリール基など）、アルキニル基（－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＲｂ、Ｒｂはアルキル基、アリール基など）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない；
本発明で言及される置換のヘテロアルキレン基とは前記置換のアルキレン基中の１つまたは複数の炭素原子は窒素、酸素、硫黄などのヘテロ原子で置換され；
本発明で言及される置換のアリール基とは、ベンゼン、ナフタレン、フルオレンなど５員以上の芳香環またはベンゾ芳香環であり、環上の１つまたは複数の水素原子はほかの基で置換され、前記ほかの基はアルキル基、置換のアルキル基（同上）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、スルホン酸基（－ＳＯ４，）、スルホニル基（－ＳＯ２Ｒａ、Ｒａは水素、アルキル基、アリール基など）、アルキニル基（－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＲｂ、Ｒｂはアルキル基、アリール基など）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない。
本発明で言及されるヘテロアリール基とは、チオフェン、ピロール、ピリジン、フラン、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、キノリンなど５員以上の芳香複素環またはベンゾ芳香複素環である。
本発明で言及される置換のヘテロアリール基とは、チオフェン、ピロール、ピリジン、フラン、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、キノリンなど５員以上の芳香複素環またはベンゾ芳香複素環であり、環上の１つまたは複数の水素原子はほかの基で置換された基であり、前記ほかの基はアルキル基、置換のアルキル基（同上）、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、カルボキシル基、シアノ基（－ＣＮ）、スルホン酸基（－ＳＯ４，）、スルホニル基（－ＳＯ２Ｒａ、Ｒａは水素、アルキル基、アリール基など）、アルキニル基（－Ｃ≡ＣＨ、－Ｃ≡ＣＲｂ、Ｒｂはアルキル基、アリール基など）、アミド基（－Ｃ（Ｏ）ＮＲｘＲｙ、ＲｘＲｙはアルキル基、アリール基など）、エステル基（－Ｃ（Ｏ）Ｏ－Ｒｚ、Ｒｚはアルキル基、アリール基など）、アリール基、ヘテロアリール基、－Ｏ－ＮＯ２などの基であってもよいが、これらに限定されるものではない。
本発明で言及される置換のエステル基とは、－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＲＳ－または－Ｌｓ－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－ＲＳ－または－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－ＲＳ－または－Ｌｓ－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｏ－ＲＳ－の形態であり、そのうち、Ｌｓはアルキレン基（置換のアルキレン基）、アリール基、シクロアルキル基（置換のシクロアルキル基）であり；Ｒｓはアルキレン基（置換のアルキレン基）、アリール基、シクロアルキル基（置換のシクロアルキル基）である。
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル硝酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－（ブロモメチル）フェニル）酢酸（化合物１．１）
４－メチルフェニル酢酸（１００ｇ、６７０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１Ｌ）に溶解させ、Ｎ－ブロモスクシンイミド（１２５．２ｇ、７０３．５ｍｍｏｌ）とアゾビスイソブチロニトリル（２．２ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）を反応液に溶解させ、窒素の保護で８０℃で３時間反応させ、反応が完成してから、反応液を室温まで降温し、大量の固体が析出され、ろ過し、ケーキを順次に石油エーテル／酢酸エチル（１：１）（２００ｍＬ）、飽和亜硫酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）、石油エーテル（２００ｍＬ）で洗浄し、５０℃で乾燥させ、化合物１．１を得た（８２ｇ、収率：５４％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ ： ２２９．０／２３１．０（Ｍ＋１）であり、そのまま次の反応に利用した。
工程Ｂ：２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）酢酸（化合物１．２）
化合物１．１（８２ｇ、３５８．１ｍｍｏｌ）を水（３００ｍＬ）に加え、１００℃まで加熱し、２時間反応させ、反応液が透明になってから、室温まで冷却させ、氷浴で続けて０℃まで降温させ、白色固体が析出され、ろ過し、ケーキを水で２回洗浄し、５０℃で乾燥させ、化合物１．２を得（４０ｇ、収率：６７％、白色固体）、そのまま次の反応に利用した。
工程Ｃ：２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）酢酸メチル（化合物１．３）
化合物１．２（４０ｇ、２４１．０ｍｍｏｌ）をメタノール（４００ｍＬ）に溶解させ、硫酸（２．４ｇ、２４．１ｍｍｏｌ）を加え、氷浴で２時間反応させ、反応が完成してから飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２００ｍＬ）を加え、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ × ３）で抽出し、有機層を合併し、飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物１．３を得た（４１ｇ、収率：９５％、淡黄色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：１８１．１ （Ｍ＋１）であり、そのまま次の反応に利用した。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ ７．２３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２２．８， ８．４ Ｈｚ， ４Ｈ）， ５．１５ （ｓ， １Ｈ）， ４．４７ （ｓ， ２Ｈ）， ３．６４ （ｓ， ２Ｈ）， ３．６０ （ｓ， ３Ｈ）．
工程Ｄ：２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）酢酸メチル（化合物１．４）
化合物１．３（４１ｇ、２２６．５ｍｍｏｌ）、イミダゾール（２３．１ｇ、３３９．８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）に溶解させ、氷浴で０℃まで降温させ、数回に分けてトリイソプロピルシリルクロリド（４８．１ｇ、２４９．２ｍｍｏｌ）を加え、自然に室温まで昇温し一晩反応させ、反応が完成してから水（５００ｍＬ）を加え、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ × ３）で抽出し、有機層を合併し、飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して化合物１．４（７２ｇ、収率：９４％、無色油状物）を得、そのまま次の反応に利用した。
工程Ｅ：２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）酢酸（化合物１．５）
化合物１．４（７２ｇ、２１４．０ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）に溶解させ、水酸化リチウム（１０．８ｇ、２５６．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させ、反応が完成してから１Ｍの塩酸溶液（３００ｍＬ）を加え、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ × ３）で抽出し、有機層を合併し、飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して化合物１．５を得た（６７ｇ、収率：９７％、無色油状物）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １２．２８ （ｓ， １Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ ＝ １２．８ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．７８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．５４ （ｓ， ２Ｈ）， １．１４ （ｓ， ３Ｈ）， １．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， １８Ｈ）．
工程Ｆ：（Ｒ）－４－ベンジル－３－（２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）アセチル）オキサゾリジニル－２－オン（化合物１．６）
化合物１．５（６７ｇ、２０７．８ｍｍｏｌ）および無水Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．７６ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタンに溶解させ、氷浴条件でゆっくり塩化オキサリル（３１．７ｇ、２４９．４ｍｍｏｌ）を滴下し、氷浴を保持しながら製造しカルボン酸塩化物を得、同時にもう１つの三口フラスコに（Ｒ）－４－ベンジル－オキサゾリジノン（２５．７ｇ、１４５．２ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（３００ｍＬ）に加え、窒素ガスで置換し、ドライアイス＋アセトンで－７８℃まで降温させ、ゆっくりｎ－ブチルリチウム（２．５Ｍ、６４ｍＬ）を滴下し、温度を－７８℃に保持し、滴下が終わってから続けて－７８℃で２時間攪拌し、そして定圧滴下漏斗によりゆっくり製造されたカルボン酸塩化物の無水テトラヒドロフラン溶液を滴下し、滴下温度を－７８℃に保持し、滴下が終わってから続けて－７８℃に保持しながら２時間反応させ、そして自然に室温まで昇温し、反応が完成してから飽和塩化アンモニウム水溶液（４００ｍＬ）で反応をクエンチし、水層を酢酸エチル（３００ｍＬ × ３）で抽出し、有機層を合併し、順次に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）、飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物１．６を得た（４４ｇ、収率：４４％、無色油状物）。
工程Ｇ：２－（（Ｓ）－３－（（Ｒ）－４－ベンジル－２－オキソオキサゾリジニル－３－イル）－３－オキソ－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）プロピル）イソインドリン－１，３－ジオン（化合物１．７）
化合物１．６（４４ｇ、９１．３ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（５００ｍＬ）に溶解させ、窒素ガスで置換し、ドライアイス＋アセトンで－７８℃まで降温させ、ゆっくりＬｉＨＭＤＳ（１Ｍ、１０９ｍＬ）を滴下し、滴下が終わってから続けて－７８℃で１時間攪拌し、Ｎ－ブロモメチルフタルイミド（２６．３ｇ、１０９．６ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に溶解させ、定圧滴下漏斗によりゆっくり前記系に滴下し、滴下温度を－７０℃未満に制御し、滴下が終わってから反応を－７８℃に保持し３時間攪拌して、自然に室温まで昇温し一晩反応させ、反応が完成してから飽和塩化アンモニウム水溶液（４００ｍＬ）で反応をクエンチし、水層を酢酸エチル（３００ｍＬ × ３）で抽出し、有機層を合併し、順次に飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して黄色固体を得、酢酸エチル／石油エーテル系により再結晶させて、固体が析出され、ろ過し、ケーキを石油エーテル（１００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して化合物１．７を得た（３２ｇ、収率：５５％、白色固体）。
工程Ｈ：（Ｓ）－２－（（２－カルボキシル－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）エチル）アミノホルミル）安息香酸（化合物１．８）
化合物１．７（３２ｇ、４９．９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３００ｍＬ）に溶解させ、水（１００ｍＬ）を加え、氷浴で反応系を０℃まで冷却し、そして水酸化リチウム（６．３ｇ、１４９．７ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間攪拌し、反応が完成してから２Ｍの塩酸溶液で反応液をｐＨが２－３になるように調整し、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ × ４）で抽出し、有機層を合併し、順次に飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物１．８を得た（２０ｇ、収率：８０％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５００．２ （Ｍ＋１）．
工程Ｉ：（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）プロピオン酸（化合物１．９）
化合物１．８（２０ｇ、４０ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（５．９ｇ、４４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１２．１ｇ、１２０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、氷浴で反応系を０℃まで冷却し、そして反応液に１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（８．４ｇ、４４ｍｍｏｌ）を加えた。一定時間攪拌し、反応液が透明になり、ゆっくり室温まで昇温し一晩置いて、反応が完成してから反応液を乾固まで減圧し、飽和塩化アンモニウム水溶液（２００ｍＬ）を加え、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ × ３）で抽出し、有機層を合併し、順次に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）、飽和ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物１．９を得た（１７ｇ、収率：８８％、黄色固体）
工程Ｊ：（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）プロピオンアミド（化合物１．１０）
化合物１．９（６５ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、ジイソプロピルエチルアミン（２５ｕｌ、０．１６ｍｍｏｌ）、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（７７ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１０分間攪拌し、チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－アミン（２０ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）を加え、２時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチし、３０ｍＬの酢酸エチルで３回に分けて抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１．１０を得た（４８ｍｇ、収率：５８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６１４．２（Ｍ＋１）／
工程Ｋ：（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物１．１１）
化合物１．１０（４８ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）を５ｍＬのテトラヒドロフラン溶液に溶解させ、１ｍＬの塩酸（２Ｍ）を加え、室温で０．５時間攪拌した。そのまま溶媒を濃縮し、製品１．１１を得た（３０ｍｇ、収率：１００％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４５８．１（Ｍ＋１）
工程Ｌ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル硝酸エステル（化合物１．１２）
２滴の硝酸と１滴の無水酢酸をジクロロメタンに溶解させ、室温で１０分間攪拌し、そして化合物１．１１（２０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液をゆっくり系に滴下し、反応プロセスにおいて多くの化合物１．１１が不溶で、さらにもう１つの反応フラスコに同様の硝酸と無水酢酸のジクロロメタン溶液を調製し、不溶の反応液をゆっくり滴下し、化合物１．１１が全部溶解するように３－４回繰り返した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加え、反応をクエンチし、そしてジクロロメタン（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１．１２を得た（２０ｍｇ、収率：９３％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５０３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｍ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル硝酸エステル（化合物１）
化合物１．１２（２０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を１ｍＬのメタノールに溶解させ、そしてヒドラジン一水和物を加え、４０℃で一晩反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加え、反応をクエンチし、そして酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、減圧濃縮して、残留物を２ｍＬのメタノールに溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例１を得た（８ｍｇ、収率：４４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：３７３．１（Ｍ＋１）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．７１ （ｓ， １Ｈ）， ９．４１ （ｓ， １Ｈ）， ８．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９９ （ｓ， ３Ｈ）， ７．５４ － ７．５０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．４６ － ７．４２（ｍ， ２Ｈ）， ７．２４ （ｓ， １Ｈ），５．５７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２７ － ４．２２ （ｍ， １Ｈ）， ３．６２ － ３．５７（ｍ， １Ｈ）， ３．２５ － ３．１５（ｍ， １Ｈ）．
3-（３－アミノ－１－（イソキノリン－６－イルアミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）ベンジル硝酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）メチル）フェニル）酢酸メチル（化合物２．１）
２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）酢酸メチル（５．０ｇ，２７．８ｍｍｏｌ）とイミダゾール（２．８ｇ、４１．７ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そしてｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（５．０ｇ、３３．４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２．１を得た（８．１ｇ、収率：９８％）。
工程Ｂ：２－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）メチル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）プロピオン酸メチル（化合物２．２）
化合物２．１（３．０ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解させ、窒素ガスで置換し、ドライアイス＋アセトンで－７８℃まで降温させ、ゆっくりリチウムヘキサメチルジシラジド（１．０Ｍ、１２．２ｍＬ、１２．２ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下が終わってから系を－７８℃で１時間攪拌し、Ｎ－ブロモメチルフタルイミド（２．９ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、ゆっくり系に滴下し、滴下温度を－７０℃未満に制御し、滴下が終わってから反応を－７８℃に保持し３時間攪拌して、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。飽和塩化アンモニウム溶液を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２．２を得た（３．６ｇ、収率：７８％）。
工程Ｃ：２－（（２－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）メチル）フェニル）－２－カルボキシエチル）アミノホルミル）安息香酸（化合物２．３）
化合物２．２（３．６ｇ、８．０ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのテトラヒドロフランと３０ｍＬの水に溶解させ、０℃で水酸化リチウム一水和物（１．０ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３時間攪拌して、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。減圧下で有機溶媒を蒸留除去し、１Ｍの塩酸水溶液でｐＨが３－４になるように調整し、そして酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗製品２．３を得た（３．４ｇ、収率：９３％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４５８．２（Ｍ＋１）
工程Ｄ：２－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）メチル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）プロピオン酸（化合物２．４）
化合物２．３（３．４ｇ、７．４ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．９ｇ、７．４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２．２ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、窒素の保護で、０℃まで降温させ、そして反応液に１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１．４ｇ、７．４ｍｍｏｌ）を加え、一定時間攪拌し、反応液が透明になり、ゆっくり室温まで昇温し、一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応液を希釈し、ジクロロメタン（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２．４を得た（１．５ｇ、収率：４６％）。
工程Ｅ：２－（４－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）メチル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（イソキノリン－６－イル）プロピオンアミド（化合物２．５）
化合物２．４（５００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして順次に２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（６２７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２８３ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で５分間攪拌し、さらに６－アミノイソキノリン（１９０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２．５を得た（４４３ｍｇ、収率：７１％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５６６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）－Ｎ－（イソキノリン－６－イル）プロピオンアミド（化合物２．６）
化合物２．５（４４３ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、そして５ｍＬの塩酸水溶液（１Ｍ）に加え、室温で３０分間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、中和させ、そして酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗製品２．６を得た（２４２ｍｇ、収率：６８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４５２．２（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－（イソキノリン－６－イルアミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）硝酸ベンジル（化合物２．７）
２滴の硝酸と１滴の無水酢酸をジクロロメタンに溶解させ、室温で１０分間攪拌し、そして化合物２．６（２４２ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液をゆっくり系に滴下し、反応プロセスにおいて多くの化合物２．６が不溶で、さらにもう１つの反応フラスコに同様の硝酸と無水酢酸のジクロロメタン溶液を調製し、不溶の反応液をゆっくり滴下し、化合物２．６が全部溶解するように３－４回繰り返した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加え、反応をクエンチし、そしてジクロロメタン（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品２．７を得た（１３６ｍｇ、収率：５４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４９７．１（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：３－アミノ－２－（４－（ヒドラジニルメチル）フェニル）－Ｎ－（イソキノリン－６－イル）プロピオンアミド（化合物２）
化合物２．７（３０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を１ｍＬのメタノールに溶解させ、そしてヒドラジン一水和物を加え、４０℃で５時間反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加え、反応をクエンチし、そして酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で３回抽出し、有機相を合併し、減圧濃縮して、残留物を２ｍＬのメタノールに溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例２を得た（１．１ｍｇ、収率：４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：３６７．１（Ｍ＋１）．
４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル酢酸エチル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－ビニルフェニル）酢酸メチル（化合物３．１）
２－（４－ブロモフェニル）酢酸メチル（１１．０ｇ、４８．０ｍｍｏｌ）、カリウムビニルトリフルオロボラート（７．７ｇ、５７．６ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（３１．３ｇ、９６．０ｍｍｏｌ）を２００ｍＬのテトラヒドロフランと２０ｍＬの水に溶解させ、そしてビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６７４ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）を加え、８５℃で窒素の保護で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。ろ過し、ろ液を酢酸エチル（５０ｍＬ × ３）で３回抽出し、有機相を合併し、飽和のブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．１を得た（７．０ｇ、収率：８３％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：１７７．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：２－（４－（２－ヒドロキシエチル）フェニル）酢酸メチル（化合物３．２）
化合物３．１（３．５ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴でボラン（１０．０Ｍ，４ｍＬ、４０．０ｍｍｏｌ）を滴下し、０℃で１時間反応させ、さらに室温で１時間反応させた。そして氷浴で６０ｍＬの水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ）を滴下し、さらに５ｍＬの過酸化水素水（３０％）を滴下し、氷浴で３０分間反応させ、さらに室温で３０分間反応させた。ＴＬＣにより原料の反応が完成したと検出した。水を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．２を得た（１．５ｇ、収率：３９％）。
工程Ｃ：２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）酢酸メチル（化合物３．３）
化合物３．２（１．５ｇ、７．７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、そして２，６－ジメチルピリジン（１．４ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）とトリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル（２．５ｍＬ、９．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより原料の反応が完成したと検出した。水を加え、反応をクエンチし、ジクロロメタン（２０ｍＬ × ３）で３回抽出し、有機相を合併し、飽和のブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．３を得た（２．１ｇ、収率：７８％）。
工程Ｄ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）プロピオン酸メチル（化合物３．４）
化合物３．３（２．１ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解させ、窒素ガスで置換し、ドライアイス＋アセトンで－７８℃まで降温させ、ゆっくりリチウムヘキサメチルジシラジド（１．０Ｍ、７．２ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下が終わってから系を－７８℃で１時間攪拌し、Ｎ－ブロモメチルフタルイミド（１．７ｇ、７．２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、ゆっくり反応液に滴下し、滴下温度を－７０℃未満に制御し、滴下が終わってから反応を－７８℃に保持し３時間攪拌して、ＴＬＣにより原料の反応が完成したと検出した。飽和の塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．４を得た（１．０ｇ、収率：３３％）。
工程Ｅ：２－（（２－カルボキシル－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）エチル）アミノホルミル）安息香酸（化合物３．５）
化合物３．４（１．０ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランと３ｍＬの水に溶解させ、０℃で水酸化リチウム一水和物（２５２ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３時間攪拌して、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。減圧下で有機溶媒を蒸留除去し、１Ｍの塩酸水溶液でｐＨが３－４になるように調整し、酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して製品３．５を得た（９６０ｍｇ、収率：９５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１４．２（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）プロピオン酸（化合物３．６）
化合物３．５（９６０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（２５７ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．８ｍＬ、５．７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、窒素の保護で、０℃まで降温させ、そして反応液に１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（３６５ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を加え、一定時間攪拌し、反応液が透明になり、ゆっくり室温まで昇温し、一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。水を加え反応液を希釈し、ジクロロメタンで抽出し（２０ｍＬ × ３）、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．６を得た（５１０ｍｇ、収率：５４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４９６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）プロピオンアミド（化合物３．７）
化合物３．６（７０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして順次に２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（８０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を加え、室温で５分間攪拌し、さらにチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－アミン（２５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．７を得た（６２ｍｇ、収率：７１％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６２８．３（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（２－ヒドロキシエチル）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物３．８）
化合物３．７（６２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、そして５ｍＬの塩酸水溶液（１Ｍ）に加え、４０℃で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、中和させ、そして酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗製品３．８を得た（４７ｍｇ、収率：１００％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４７２．１（Ｍ＋１）．
工程Ｉ：４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル酢酸エチル（化合物３．９）
２滴の硝酸と１滴の無水酢酸をジクロロメタンに溶解させ、室温で１０分間攪拌し、そして化合物３．８（３０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液をゆっくり系に滴下し、反応プロセスにおいて多くの化合物が不溶で、さらにもう１つの反応フラスコに同様の硝酸と無水酢酸のジクロロメタン溶液を調製し、不溶の反応液をゆっくり滴下し、化合物が全部溶解するように３－４回繰り返した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そしてジクロロメタン（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品３．９を得た（１２ｍｇ、収率：４８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５１７．１（Ｍ＋１）．
工程Ｊ：４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル酢酸エチル（化合物３）
化合物３．９（１２ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を１ｍＬのメタノールに溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（１４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で一晩反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そして酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、減圧濃縮して、残留物を２ｍＬのメタノールに溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例３を得た（５ｍｇ、収率：３６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：３８７．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－（ベンゾ［ｄ］イソチアゾール－６－イルアミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）硝酸ベンジル
具体的な反応式を以下に示す
工程Ａ：実施例１工程Ｊのチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－アミンの代わりにベンゾ［ｄ］イソチアゾール－６－アミンを使い、合成して化合物４．１を得た。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６１４．２（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：実施例１の工程Ｋを利用し、合成して化合物４．２を得た。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４５８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（１－（ベンゾ［ｄ］イソチアゾール－６－イルアミノ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソプロピル－２－イル）ベンジル硝酸エステル（化合物４．３）
化合物４．２（１５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタン溶液に溶解させ、無水酢酸（０．５ｍｌ）、硝酸（０．５ｍｌ）を加え、窒素の保護で、４０℃で３時間攪拌した。溶媒を濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して化合物４．３を得た（４０ｍｇ、収率：２４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５０３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－（ベンゾ［ｄ］イソチアゾール－６－イルアミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）硝酸ベンジル（化合物４）
化合物４．３（４０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を５ｍＬのメチルアミンエタノール溶液に溶解させ、６０℃で３時間攪拌して、溶媒を濃縮して、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、化合物４を得た（１．４ｍｇ、収率：５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：３７３．１（Ｍ＋１）．
１－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）エタン－１，２－二硝酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－（エチレンオキシド－２－イル）フェニル）酢酸メチル（化合物５．１）
秤量された２－（４－ビニルフェニル）酢酸メチル（２．２ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ）を８０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、氷浴で数回に分けてｍ－クロロ過安息香酸（７．６ｇ、３７．４４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で１時間攪拌し、そして室温で１６時間攪拌した。反応液に飽和亜硫酸ナトリウム溶液３００ｍＬを加え、１時間攪拌し、ジクロロメタン（３００ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（１００ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物５．１を得た（１．８４ｇ、収率：７７％、無色油状物）。
工程Ｂ：２－（４－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－イル）フェニル）酢酸メチル（化合物５．２）
化合物５．１（１．８４ｇ、９．５７ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのアセトンに溶解させ、そしてＡｍｂｅｒｌｙｓｔ １５（２．５ｇ、１２．４４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２０時間攪拌した。反応液をろ過し、ろ液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液１５０ｍＬを加え、そして酢酸エチル（３００ｍＬ）で２回抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（１００ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物５．２を得た（１．５ｇ、収率：６３％、無色油状物）。
工程Ｃ：２－（４－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－イル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）プロピオン酸メチル（化合物５．３）
零下７８℃で、化合物５．２（１．５ｇ、５．９９ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解させ、そしてゆっくりリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（７．２ｍＬ、７．１９ｍｍｏｌ）を反応液に滴下し、－７８℃で窒素の保護で０．５時間攪拌し、続いて秤量されたＮ－ブロモメチルフタルイミド（１．７３ｇ、７．１９ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解させ、ゆっくり反応フラスコに滴下し、そして続けてこの温度で１．５時間攪拌した。２０ｍＬの塩化アンモニウム飽和溶液で反応をクエンチし、酢酸エチル（６０ｍＬ）で２回抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物５．３を得た（２ｇ、収率：８２％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４１０．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：２－（（２－カルボキシル－２－（４－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－イル）フェニル）エチル）アミノホルミル）安息香酸（化合物５．４）
化合物５．３（２ｇ、４．８８ｍｍｏｌ）を３５ｍＬのテトラヒドロフランと３０ｍＬの水に溶解させ、一水合水酸化リチウム（６１５ｍｇ、１４．６４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間攪拌した。ｐＨが６になるように反応液に飽和クエン酸溶液を加え、酢酸エチル（４０ｍＬ）で３回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して製品５．４を得た（１．１ｇ、収率：５５％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４１４．１ （Ｍ＋１）．
工程Ｅ：２－（４－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－イル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）プロピオン酸（化合物５．５）
化合物５．４（１．１ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（７６０ｍｇ、３．９９ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（５４０ｍｇ、３．９９ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（６８８ｍｇ、５．３２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して、残留物に水２０ｍＬを加え、飽和クエン酸溶液でｐＨが６になるように調整し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で３回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品５．５を得た（７６０ｍｇ、収率：７２％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：３９６．１（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：２－（４－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－イル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物５．６）
化合物５．５（２６０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を１２ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、ジイソプロピルエチルアミン（１２７ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）、６－アミノイソキノリン（１０４ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）と２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（３００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１．５時間攪拌した。反応液に水３０ｍＬを加え、酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品５．６を得た（２６０ｍｇ、収率：７５％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５２８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：２－（４－（１，２－ジヒドロキシエチル）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物５．７）
化合物５．６（２６０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのメタノールと３０ｍＬのアセトニトリルに溶解させ、３．３ｍＬ １．５Ｍの塩酸水溶液を加え、反応液を３０℃で２時間攪拌し、反応液を減圧濃縮して、製品５．７を得た（２４０ｍｇ、収率：１００％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４８８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：１－（４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル） エタン－１，２－二硝酸ジニトレート（化合物５．８）
０．４ｍＬの硝酸溶液を６ｍＬのジクロロメタンに加え、反応液を０℃まで冷却させ、硫酸０．２ｍＬを滴下し、反応液を０℃で０．５時間攪拌した。反応液に化合物５．７（３０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）の３ｍＬのジクロロメタン混濁液を滴下した。反応液を０℃で２時間攪拌した。ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、ジクロロメタン（３０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品５．８を得た（５ｍｇ、収率：１４％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５７８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｉ：１－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）エタン－１，２－二硝酸エステル（化合物５）
化合物５．８（５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を８ｍＬのエタノールに溶解させ、ヒドラジン一水和物（１７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃窒素の保護で６時間攪拌した。反応液に２０ｍＬの水を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、化合物５を得た（１．２ｍｇ、収率：３１％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４４８．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸（化合物６．１）
氷浴条件で、無水酢酸（２ｍＬ）を５０ｍＬの反応フラスコに加え、続いて濃硝酸（１ｍＬ）ゆっくり反応フラスコに滴下し、反応液を氷浴で１０分間攪拌した。氷浴条件で、３－ヒドロキシシクロブタンカルボン酸（１００ｍｇ、０．８６２ｍｍｏｌ）を無水酢酸（３ｍＬ）に溶解させ、そして無水酢酸－濃硝酸混合液（３ｍＬ）をゆっくり反応液に滴下し、そして反応液を常温で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ブロモクレゾールグリーンが発色）により反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチル（１５ｍＬ）で抽出し、分液し有機相を合併し、そして有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムにより精製し、白色固体６．１を得た（６２ｍｇ、収率：４４．６７％）。
工程Ｂ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドール－２－イル）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸塩（化合物６．２）
化合物１．１１（６０ｍｇ、０．１３１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）に溶解させ、そして順次に１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－カルボジイミド塩酸塩（３７．７ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（２４ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）と化合物６．１（３１．７ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）を加え、混合液を常温で一晩攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチル（１５ｍＬ）で抽出し、分液し有機相を合併し、そして有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムにより精製し、白色固体６．２を得た（５０ｍｇ、収率：６３．５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６０１．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物６）
化合物６．２（８３ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）を８ｍＬｄのエタノールに溶解させ、ヒドラジン一水和物（６９ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）を反応液に加え、反応を５５℃まで昇温し、不活性ガスの雰囲気で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。反応液に水を加え、酢酸エチル（１２ｍＬ）で抽出し、飽和ブラインで洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をメタノール（３ｍＬ）、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、そして白色固体製品の実施例６を得た（２０ｍｇ（塩酸塩）、収率：２８．５％、純度：９７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４７１．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．４１ （ｓ， １Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝６．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２１ － ８．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．２６ （ｐ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１０ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．８， ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３ （ｓ， １Ｈ）， ３．２１ － ３．１２ （ｍ， １Ｈ）， ３．０３ － ２．９２ （ｍ， １Ｈ）， ２．７１ － ２．６１（ｍ，２Ｈ）， ２．３４ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １７．２， ９．６， ２．８ Ｈｚ， ２Ｈ）．
３－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）プロパン－１，２－二硝酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）酢酸（化合物７．１）
ｐ－ヒドロキシフェニル酢酸（５．０ｇ、３２．８６ｍｍｏｌ）を４００ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、０℃で、イミダゾール（１１ｇ、１６４．３ｍｍｏｌ）とｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（１３．８ｇ、９２．００ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間攪拌した。反応液に１３０ｍＬの飽和炭酸ナトリウム溶液を加え、室温で続けて１時間攪拌した。ｐＨが４になるように反応液に２Ｍの塩酸溶液を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、ブライン（２００ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．１を得た（５．７８ｇ、収率：６６％、無色油状物）。
工程Ｂ：２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）酢酸ベンジル（化合物７．２）
化合物７．１（５．７８ｇ、２１．７０ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、 溶液を０℃まで冷却し、炭酸カリウム（３．６ｇ、２６．０４ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（４．４５ｇ、２６．０４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間攪拌した。反応液に８０ｍＬの水を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ）で４回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．２を得た（３．６６ｇ、収率：４７％、無色油状物）。
工程Ｃ：２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）プロピオン酸ベンジル（化合物７．３）
化合物７．２（３．６６ｇ、１０．２７ｍｍｏｌ）を３０ｍＬの無水テトラヒドロフラン溶液に溶解させ、反応液を－７８℃まで冷却させ、窒素の保護で、１Ｍのリチウムヘキサメチルジシラジド（１２．３ｍＬ、１２．３ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液を－７８℃で窒素の保護で１時間攪拌した。そして２－（ブロモメチル）イソインドール－１，３－ジオン（２．９６ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液２５ｍＬを滴下し、反応液を－７８℃で３時間攪拌した。反応液に３０ｍＬの水を加え、酢酸エチル（６０ｍＬ）で３回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．３を得た（３．９ｇ、収率：７４％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）プロピオン酸（化合物７．４）
化合物７．３（３．９ｇ、７．５６ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのテトラヒドロフランと６０ｍＬのメタノールに溶解させ、パラジウム炭素（６００ｍｇ、１０％）を加え、反応液を室温で水素ガスの保護で３時間攪拌した。反応液をセライトでろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．４を得た（２．９ｇ、収率：９０％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４２６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物７．５）
化合物７．４（６００ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、ジイソプロピルエチルアミン（２７６ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（６４８ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）、およびチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－アミン（２３３ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を２５℃で窒素の保護で２時間攪拌した。反応に水（４０ｍＬ）を加え、そして酢酸エチル（６０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．５を得た（７８０ｍｇ、収率：９９％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５５８．２（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：３－アミノ－２－（４－（（ｔ－ブチルジメチル）オキシ）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物７．６）
化合物７．５（１．２ｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの３３％のメチルアミン／エタノール溶液に溶解させ、反応液を５０℃で１時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して化合物７．６を得た（６５５ｍｇ、収率：７１％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４２８．２（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：アリル（２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物７．７）
化合物７．６（６５５ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、トリエチルアミン（６２０ｍｇ、６．１２ｍｍｏｌ）とクロロぎ酸アリル（３６９ｍｇ、３．０６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で５分間攪拌した。反応液に３０ｍＬの水を加え、そしてジクロロメタン（５０ｍＬ × ２）で抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物７．７を得た（６３０ｍｇ、収率：８０％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１２．２（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：アリル（２－（４－ヒドロキシフェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物７．８）
化合物７．７（６３０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのメタノールに溶解させ、炭酸カリウム（２５５ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）を加え、反応液を４０℃で１時間攪拌した。ｐＨが７になるように反応液に飽和クエン酸溶液を加え、酢酸エチル（６０ｍＬ）で２回抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物７．８を得た（４９０ｍｇ、収率：１００％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：３９８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｉ：アリル（２－（４－（２，３－ジヒドロキシプロポキシ）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物７．９）
化合物７．８（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、水酸化ナトリウム（２４ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）とグリシドール（４６ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で１４時間攪拌した。ｐＨが６になるように反応液に４Ｍの塩酸／ジオキサ溶液を加え、反応液を減圧濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．９を得た（３５ｍｇ、収率：３０％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４７２．１ （Ｍ＋１）．
工程Ｊ：アリル（２－（４－（２，３－ビス（ニトロキシド）プロポキシ）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物７．１０）
３０滴の硝酸溶液を４０ｍＬのジクロロメタンに加え、反応液を０℃まで冷却させ、硫酸を７滴滴下し、反応液を０℃で１時間攪拌した。反応液に化合物７．９（３５ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の２０ｍＬのジクロロメタン混濁液を滴下した。反応液を４０℃で１６時間攪拌した。ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、ジクロロメタン（３０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品７．１０を得た（１４ｍｇ、収率：３４％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５６２．１（Ｍ＋１）．
工程Ｋ：３－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）プロパン－１，２－二硝酸エステル（化合物７）
化合物７．１０（１４ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を３０ｍＬジクロロメタンに溶解させ、１，３－ジメチルピリミジン－２，４，６（１Ｈ、３Ｈ、５Ｈ）－トリオン（１９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（１５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を２５℃で窒素の保護で２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して、残留物を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、実施例７を得た（２．８ｍｇ、収率：２４％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４７８．１（Ｍ＋１）．
３－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸プロピル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：３－アミノ－２－（４－（（ｔ－ブチルジメチル）オキシ）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物８．１）
化合物６．５（１．５ｇ、３．５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのメチルアミンエタノール溶液に溶解させ、５０℃で１．５時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そして酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品８．１を得た（１．０ｇ、収率：６６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４２８．２（Ｍ＋１）。
工程Ｂ：（２－（４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物８．２）
化合物８．１（１．０ｇ、２．３ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．７ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして二炭酸ジ－ｔ－ブチル（０．８ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そして酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品８．２を得た（１．２ｇ、収率：１００％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５２８．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（２－（４－ヒドロキシフェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物８．３）
化合物８．２（１．２ｇ、２．３ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのメタノールに溶解させ、そして炭酸カリウム（４７６ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を加え、５０℃まで昇温し２時間反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応液を濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品８．３を得た（９４０ｍｇ、収率：６３％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４１４．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニルトリフルオロメタンスルホナート（化合物８．４）
化合物８．３（９４０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）とピリジン（４７４ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ）を５ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、０℃でトリフルオロメタンスルホン酸無水物 （８４６ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を滴下し、そして室温で３０分間反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そしてジクロロメタン（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品８．４を得た（２２０ｍｇ、収率：２７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５４６．１（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：（２－（４－アリルフェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物８．５）
化合物８．４（１００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、２－アリル－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（１１７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を９ｍＬのテトラヒドロフランと１ｍＬの水に溶解させ、そして［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］二塩化パラジウム（６ｍｇ、５ｍｏｌ％）を加え、窒素ガスで置換し、８５℃で一晩反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そして酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品８．５を得た（７８ｍｇ、収率：９９％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４３８．２（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：（２－（４－（３－ヒドロキシプロピル）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチル（化合物８．６）
化合物８．５（７８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を２ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴でボラン（１０．０Ｍ，０．０２ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を滴下し、０℃で１時間反応させ、さらに室温で１時間反応させた。そして氷浴で５ｍＬの水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ）を滴下し、さらに１ｍＬ過酸化水素水（３０％）を滴下し、氷浴で３０分間反応させ、さらに室温で３０分間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチルで抽出し（１０ｍＬ × ３）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品８．６を得た（２０ｍｇ、収率：２６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４５６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：３－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸プロピル（化合物８）
２滴の硝酸と１滴の無水酢酸をジクロロメタンに溶解させ、室温で１０分間攪拌し、そして化合物８．６（８ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液をゆっくり系に滴下し、室温で１時間反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、残留物を２ｍＬのメタノールに溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例８を得た（１ｍｇ、収率：１１％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ４０１．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル５－（ニトロキシド）吉草酸エステル
具体的な反応式を以下に示す
工程Ａ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル－５－吉草酸エステル（化合物９．１）
化合物１．１１（１５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、ジシクロヘキシルカルボジイミド（１３５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、ブロモ吉草酸（６０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（４１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチし、３０ｍＬの酢酸エチルで３回に分けて抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品９．１を得た（１２０ｍｇ、収率：５９％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６２０．１，６２２．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル５－（ニトロキシド）吉草酸（化合物９．２）
化合物９．１（１２０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのアセトニトリル溶液に溶解させ、硝酸銀（３６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を加え、窒素の保護で、７０℃で一晩攪拌した。セライトで反応液をろ過し、濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品９．２を得た（４０ｍｇ、収率：３４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６０３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル５－（ニトロキシド）吉草酸エステル（化合物９）
化合物９．２（４０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのメチルアミンエタノール溶液に溶解させ、６０℃で３時間攪拌して、溶媒を濃縮して、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、実施例９を得た（１０ｍｇ、収率：３２％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４７３．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．３８ （ｓ， １Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２０ －８．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ９．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５０ （ｔ， Ｊ ＝ ６．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４４ （ｑ， Ｊ ＝ ８．２， ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６６－３．５９ （ｍ， １Ｈ）， ３．２０－３．１３ （ｍ， １Ｈ）， ２．４１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６８－１．５７ （ｍ， ４Ｈ）．
４－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸ブチル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－（４－ヒドロキシブチル－１－イン－１－イル）フェニル）酢酸メチル（化合物１０．１）
２－（４－ブロモフェニル）酢酸メチル（４．３ｇ、１８．７ｍｍｏｌ）、３－ブチン－１－オール（２．６ｇ、３７．４ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのトリエチルアミンに溶解させ、そしてテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（８６４ｍｇ、４ ｍｏｌ％）とヨウ化銅（４２６ｍｇ、１２ ｍｏｌ％）を加え、窒素ガスで置換し、１００℃で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．１を得た（２．８ｇ、収率：６８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：２１９．１（Ｍ＋１）。
工程Ｂ：２－（４－（４－ヒドロキシブチル）フェニル）酢酸メチル（化合物１０．２）
化合物１０．１（２．８ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解させ、そしてパラジウム／炭素（２８０ｍｇ、１０％）を加え、水素ガスで３回置換し、４０℃で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。ろ過し、ろ液を減圧濃縮し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．２を得た（２．０ｇ、収率：７０％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：２２３．１（Ｍ＋１）。
工程Ｃ：２－（４－（４－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）ブチル）フェニル）酢酸メチル（化合物１０．３）
化合物１０．２（２．０ｇ、９．０ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、そして２，６－ジメチルピリジン（１．６ｍＬ、１３．５ｍｍｏｌ）とトリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル（３．０ｍＬ、１０．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより原料の反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、ジクロロメタン（５０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１００ｍＬ × ３）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．３を得た（３．４ｇ、収率：１００％）。
工程Ｄ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（４－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）ブチル）フェニル）プロピオン酸メチル（化合物１０．４）
化合物１０．３（３．４ｇ、９．０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解させ、窒素ガスで置換し、ドライアイス＋アセトンで－７８℃まで降温させ、ゆっくりリチウムヘキサメチルジシラジド（１．０Ｍ、１０．８ｍＬ、１０．８ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下が終わってから系を－７８℃で１時間攪拌し、Ｎ－ブロモメチルフタルイミド（２．６ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、ゆっくり系に滴下し、滴下温度を－７０℃未満に制御し、滴下が終わってから反応を－７８℃に保持し３時間攪拌して、ＬＣＭＳにより原料が完成に反応したと検出した。飽和の塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（５０ｍＬ × ３）で抽出し、飽和ブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．４を得た（２．９ｇ、 収率：６０％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５３８．３（Ｍ＋１）。
工程Ｅ：２－（（２－カルボキシル－２－（４－（４－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）ブチル）フェニル）エチル）アミノホルミル）安息香酸（化合物１０．５）
化合物１０．４（２．９ｇ、５．４ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランと３ｍＬの水に溶解させ、０℃で水酸化リチウム一水和物（６８０ｍｇ、１６．２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３時間攪拌して、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。減圧下で有機溶媒を蒸留除去し、１Ｍの塩酸水溶液でｐＨが３－４になるように調整し、酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ × ３）、有機相を合併し、飽和ブライン（１００ｍＬ × ３）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して製品１０．５を得た（２．８ｇ、収率：９４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５４２．３（Ｍ＋１）。
工程Ｆ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（４－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）ブチル）フェニル）プロピオン酸（化合物１０．６）
化合物１０．５（２．８ｇ、５．１ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（６８８ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２．１ｍＬ、１５．３ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、窒素の保護で、０℃まで降温させ、そして反応液に１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（９７９ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）を加え、一定時間攪拌し、反応液が透明になり、ゆっくり室温まで昇温し、一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。水を加え反応液を希釈し、ジクロロメタン（５０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．６を得た（２．３ｇ、収率：８６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５２４．３（Ｍ＋１）。
工程Ｇ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－（４－（４－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）ブチル）フェニル）プロピオンアミド（化合物１０．７）
化合物１０．６（３００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして順次に２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（３２７ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１４７ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で５分間攪拌し、さらに化合物１９．５（１０２ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．７を得た（３７３ｍｇ、収率：１００％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６５６．３（Ｍ＋１）。
工程Ｈ：３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（４－ヒドロキシブチル）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物１０．８）
化合物１０．７（３７３ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を２ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、そして６ｍＬの塩酸水溶液（１．０Ｍ）に加え、４０℃で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え中和させ、そして酢酸エチル（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗製品１０．８を得た（２７０ｍｇ、収率：９５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５００．２（Ｍ＋１）。
工程Ｉ：４－（４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸ブチル（化合物１０．９）
４滴の硝酸と２滴の無水酢酸をジクロロメタンに溶解させ、室温で１０分間攪拌し、そして化合物１０．８（３０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液をゆっくり系に滴下し、反応プロセスにおいて化合物が不溶で、さらにもう１つの反応フラスコに同様の硝酸と無水酢酸のジクロロメタン溶液を調製し、不溶の反応液をゆっくり滴下し、化合物が全部溶解するように３－４回繰り返した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そしてジクロロメタン（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品１０．９を得た（２２ｍｇ、収率：６７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５４５．１（Ｍ＋１）。
工程Ｊ：４－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸ブチル（化合物１０）
化合物１０．９（２２ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を１ｍＬのメタノールに溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（２０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で一晩反応させ、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから水を加えて反応をクエンチし、そして酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、減圧濃縮して、残留物を２ｍＬのメタノールに溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例１０を得た（２ｍｇ、収率：１０％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４１５．１（Ｍ＋１）。
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル硝酸エチル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－ビニルフェニル）酢酸メチル（化合物１１．１）
２－（４－ブロモフェニル）酢酸メチル（１０ｇ、４３．６５ｍｍｏｌ）を２００ｍＬのテトラヒドロフランと２０ｍＬの水に溶解させ、ビニルトリフルオロほう酸カリウム（７ｇ、５２．３９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（２８．６ｇ、８７．３１ｍｍｏｌ）とビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６００ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を７８℃で窒素の保護で１６時間攪拌した。反応液を室温まで冷却させ、反応液に水１００ｍＬを加え、酢酸エチル（４００ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（１００ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物１１．１を得た（５．６ｇ、収率：７３％、無色油状物）。
工程Ｂ：２－（４－（２－ヒドロキシエチル）フェニル）酢酸（化合物１１．２）
化合物１１．１（５．６ｇ、３１．７８ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、０℃まで冷却し、１０Ｍのボランのジメチルスルフィド溶液６．４ｍＬを滴下した。反応液を０℃で窒素の保護で１時間攪拌し、そして２０℃で１時間攪拌した。反応液を０℃まで冷却させ、１Ｍの水酸化ナトリウム溶液と３０％の過酸化水素水を５６ｍＬ滴下した。反応液を０℃で０．５時間攪拌し、そして２０℃で１時間攪拌した。反応液に飽和亜硫酸ナトリウム溶液４００ｍＬを加え、そして１Ｍの塩酸溶液でｐＨが２になるように調整し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で５回抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物１１．２を得た（３．８５ｇ、収率：６７％、白色固体）。
工程Ｃ：２－（４－（２－ヒドロキシエチル）フェニル）酢酸メチル（化合物１１．３）
化合物１１．２（３．８５ｇ、２１．３７ｍｍｏｌ）を４５ｍＬのジクロロメタンと１０ｍＬのメタノールに溶解させ、０℃まで冷却し、２Ｍのトリメチルシリルジアゾメタン１１．２ｍＬを滴下し、反応液を室温で０．５時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物１１．３を得た（２．４ｇ、収率：５８％、無色油状物）。
工程Ｄ：２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）酢酸メチル（化合物１１．４）
化合物１１．３（２．４ｇ、１２．３６ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、０℃まで冷却し、２，６－ジメチルピリジン（１．９９ｇ、１８．５４ｍｍｏｌ）とトリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル（４．５６ｇ、１４．８３ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１６時間攪拌した。反応液に水５０ｍＬを加え、ジクロロメタン（８０ｍＬ）で２回抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物１１．４を得た（３．７ｇ、収率：８５％、無色油状物）。
工程Ｅ：２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）酢酸（化合物１１．５）
化合物１１．４（３．７ｇ、１０．５５ｍｍｏｌ）を１５ｍＬの水、１５ｍＬのメタノールと４０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、一水合水酸化リチウム（１．３３ｇ、３１．６５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で２時間攪拌した。ｐＨが３になるように反応液に１Ｍの塩酸溶液を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して製品１１．５を得た（３．４３ｇ、収率：９７％、黄色固体）。
工程Ｆ：２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）アセチルクロリド（化合物１１．６）
化合物１１．５（３．４３ｇ、１０．１９ｍｍｏｌ）を４０ｍＬ ジクロロメタンに溶解させ、反応液を０℃まで冷却させ、窒素の保護で塩化オキサリル（１．５５ｇ、１２．２３ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液を室温で１２時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して製品１１．６を得た（３．６２ｇ、収率：１００％、黄色油状物）。
工程Ｇ：（Ｒ）－４－ベンジル－３－（２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）アセチル）オキサゾリジニル－２－オン（化合物１１．７）
（Ｒ）－４－ベンジルオキサゾリジニル－２－オン（１．７２ｇ、９．６９ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、反応液を－７８℃まで冷却し、窒素の保護で、２．５Ｍのｎ－ブチルリチウム（４．２８ｍＬ、１０．７１ｍｍｏｌ）を滴下し、反応液を－７８℃で１時間攪拌した。そして反応液に化合物１１．６（３．６２ｇ、１０．２０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液を１５ｍＬ滴下した。反応液を－７８℃で２．５時間攪拌した。反応液に塩化アンモニウム溶液を３０ｍＬ加え、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１１．７を得た（３．１５ｇ、収率：６２％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４９６．３（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：２－（（Ｒ）－３－（（Ｒ）－４－ベンジル－２－オキソオキサゾリジニル－３－イル）－３－オキソ－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）プロピル）イソインドール－１，３－ジオン（化合物１１．８）
零下７８℃で、化合物１１．７（３．１５ｇ、６．３５ｍｍｏｌ）を３０ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解させ、そしてゆっくりリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（７．６３ｍＬ、７．６３ｍｍｏｌ）を反応液に滴下し、この温度で１時間攪拌し、続いて秤量されたＮ－ブロモメチルフタルイミド（１．８３ｇ、７．６３ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解させてからゆっくり反応フラスコに滴下し、そしてこの温度で２時間攪拌した。塩化アンモニウム飽和溶液で反応をクエンチし、酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（１００ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物１１．８を得た（２ｇ、収率：４８％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６５５．３（Ｍ＋１）．
工程Ｉ：（Ｒ）－２－（（２－カルボキシル－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）エチル）アミノホルミル）安息香酸（化合物１１．９）
化合物１１．８（２ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を２５ｍＬのメタノールと２５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、そして一水合水酸化リチウム（３８５ｍｇ、９．１６ｍｍｏｌ）を水（２０ｍＬ）に溶解させ、反応液に滴下し、室温で３時間攪拌した。反応液に水６０ｍＬを加え、水相を酢酸エチル（４０ｍＬ）で２回洗浄し、そしてｐＨが４になるように１Ｍの塩酸溶液で調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、分液し有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してから化合物１１．９を得た（９８０ｍｇ、収率：６２％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５１４．２（Ｍ＋１）．
工程Ｊ：（Ｒ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ）エチル）フェニル）プロピオン酸（化合物１１．１０）
化合物１１．９（９８０ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（５４８ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール（３８７ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（５７７ｍｇ、５．７２ｍｍｏｌ）を加え、 反応液を室温で１２時間攪拌した。反応液を１Ｍの塩酸溶液でｐＨが４になるように調整し、酢酸エチル（６０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で３回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１１．１０を得た（８４０ｍｇ、収率：８９％、黄色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４９６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｋ：（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－（４－（２－（（トリイソプロピルシリル）オキシ））エチル）フェニル）プロピオンアミド（化合物１１．１１）
化合物１１．１０（８４０ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、ジイソプロピルエチルアミン（４３８ｍｇ、３．３９ｍｍｏｌ）、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩（９６７ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）とチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－アミン（３０５ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で２時間攪拌した。反応液に水を３０ｍＬ加え、酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１１．１１を得た（５８０ｍｇ、収率：５５％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６２８．３（Ｍ＋１）．
工程Ｌ：（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－２－（４－（２－ヒドロキシエチル）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物１１．１２）
化合物１１．１１（５８０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、１．５Ｍの塩酸水溶液を２０ｍＬ加え、 反応液を４０℃で２時間攪拌した。反応液を室温まで冷却させ、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨが８になるように調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で３回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１１．１２を得た（３５０ｍｇ、収率：８０％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４７２．１（Ｍ＋１）．
工程Ｍ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル硝酸エチル（化合物１１．１３）
２ｍＬの硝酸溶液を５０ｍＬのジクロロメタンに加え、反応液を０℃まで冷却させ、硫酸を０．５ｍＬ滴下し、反応液を０℃で１時間攪拌した。反応液に化合物１１．１２（２５０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）の１０ｍＬのジクロロメタン混濁液を滴下した。反応液を４０℃で８時間攪拌した。ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え調整し、ジクロロメタン（８０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１１．１３を得た（２５０ｍｇ、収率：９２％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１７．１（Ｍ＋１）．
工程Ｎ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル硝酸エチル（化合物１１）
化合物１１．１３（２５０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を３５ｍＬのエタノールに溶解させ、ヒドラジン一水和物（２４３ｍｇ、４．８０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で窒素の保護で５時間攪拌した。反応液に７０ｍＬの水を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品１１を得た（８８ｍｇ、収率：４７％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：３８７．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ１２．７５ （ｓ， １ Ｈ）， ９．４３ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．０７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．０１ （ｓ， ２ Ｈ）， ７．３５ （ｓ， ４ Ｈ）， ７．２６ （ｓ， １ Ｈ）， ４．７４ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ４．２１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．４， ８．８ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６１ （ｓ， １ Ｈ）， ３．１８ （ｓ， １ Ｈ）， ３．００ （ｔ， Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ， ２ Ｈ）
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－（（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）アミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）ベンジル硝酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－Ｎ－（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル））オキシ）メチル）フェニル）プロピオンアミド（化合物１２．１）
化合物１．９（４００ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を６ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして５０％の１－プロピルホスホン酸無水物のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド溶液（７９３ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（２１４ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）と４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－アミン（１５４ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を加え、反応を常温で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。水を反応フラスコに加え、酢酸エチル（１０ｍＬ × ２）で抽出し、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製してから白色固体１２．１を得た（３００ｍｇ、収率：５７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６３２．２（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（Ｓ）－３－アミノ－Ｎ－（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）プロピオンアミド（化合物１２．２）
化合物１２．１（１．１ｇ、１．７４ｍｍｏｌ）をエタノール（１２ｍＬ）に溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（８７０ｍｇ、１７．４ｍｍｏｌ）を反応液に加え、反応を不活性ガスの雰囲気で５５℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認してから、反応液を真空ポンプで濃縮して残留物を酢酸エチルに溶解させ、そして有機相を水と飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、真空濃縮してから淡黄色固体製品１２．２を得た（５８０ｍｇ、収率：６６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５０２．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－アリル（３－（（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）アミノ）－３－オキソ－２－（４－（（（トリイソプロピルシリル）オキシ）メチル）フェニル）プロピル）ウレタン（化合物１２．３）
化合物１２．２（５８０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、そして秤量されたＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１９４ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）とクロロぎ酸アリル（１６７ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を反応フラスコに加え、反応を常温で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。ジクロロメタンで反応液を希釈し、そして飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製してから淡黄色固体１２．３を得た（５２０ｍｇ、収率：７７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５８６．３（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－アリル（３－（（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）アミノ）－２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）－３－オキソプロピル）ウレタン（化合物１２．４）
化合物１２．３（５２０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）とメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、そして１．５ｍｏｌ／Ｌの希塩酸（６ｍＬ）を反応フラスコに加え、反応を６０℃の油浴において２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。飽和の炭酸水素ナトリウム溶液を反応フラスコに加え、そして酢酸エチル（１２ｍＬ）で抽出し、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、真空濃縮してから粗製品をメチルｔ－ブチルエーテルでパルプ化させ、粗製品の白色固体１２．４を得た（４００ｍｇ、収率：１００％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４３０．１（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：（Ｓ）－アリル（３－（（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）アミノ）－２－（４－（（ニトロキシド）メチル）フェニル）－３－オキソプロピル）ウレタン（化合物１２．５）
無水酢酸（１５滴）と濃硝酸（３０滴）を５０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、反応液を常温で２０分間攪拌し、そして化合物１２．４（３２０ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を反応液に加え、常温で続けて５０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を反応フラスコに加え、ジクロロメタン（１５ｍＬ）で抽出し、飽和ブラインで洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製してから白色固体１２．５を得た（１２３ｍｇ、収率：３５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４７５．１（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－（（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）アミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）ベンジル硝酸エステル（化合物１２）
化合物１２．５（１２３ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を８ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、そしてテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（３０ｍｇ、０．０２６ ｍｍｏｌ）と１，３－ジメチルバルビツル酸（４４．６ｍｇ、０．２８６ｍｍｏｌ）を反応液に加え、常温で１時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。飽和の炭酸水素ナトリウム溶液を反応フラスコを加え、ジクロロメタン（１２ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して残留物を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから白色固体１２を得た（６５ｍｇ、収率：５０％、純度：９８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：３９１．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（４－（ニトロキシド）ブチル）カーボネート
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ）－４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）ブチル４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２）－アミノ）プロプ－２－イル）炭酸ベンジル（化合物１３．１）
氷浴で、４－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）ブト－１－オール（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８ｍＬ）に溶解させ、そしてトリホスゲン（８７ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）とピリジン（４６ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を反応液に加え、そして常温で３時間攪拌した。さらに化合物１．１１（４０ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）とピリジン（７ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）を反応フラスコに加え、常温で一晩攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認してから、反応液をジクロロメタンで希釈し、順次に飽和炭酸水素ナトリウム、０．５ｍｏｌ／Ｌの希塩酸和飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製してから淡黄色油状製品１３．１を得た（２５ｍｇ、収率：４２％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６８８．２（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（ ４－ヒドロキシブチル）カーボネート（１３．２）
化合物１３．１（２５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）とメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、そして４ｍｏｌ／Ｌの塩酸－ジオキサ溶液（０．１ｍＬ）を反応フラスコに加え、反応を常温で１０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認してから、反応液を真空濃縮してから粗製品の白色固体１３．２を得た（１５ｍｇ、収率：７２％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５７４．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドリン－２－イル）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（ ４－（ニトロキシド）ブチル）カーボネート（化合物１３．３）
無水酢酸（１滴）と濃硝酸（２滴）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解させ、反応液を常温で２０分間攪拌し、そして化合物１３．２（１５ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）を反応フラスコに加え、続けて反応を常温で２０分間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認してから、飽和の炭酸水素ナトリウム溶液を反応フラスコに加え、そしてジクロロメタン（１０ｍＬ）で抽出し、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、カラムクロマトグラフィーにより精製してから淡黄色油状製品１３．３を得た（５ｍｇ、収率：３１％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６１９．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（４－（ニトロキシド）ブチル）カーボネート（化合物１３）
化合物１３．３（５ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）をエタノール（５ｍＬ）に溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（１滴）を反応液に加え、反応を不活性ガスの雰囲気で５５℃で１．５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチル（１０ｍＬ）で抽出し、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残渣をメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、白色固体の実施例１３を得た（１．５ｍｇ（トリフルオロ酢酸塩）、収率：３１％、純度：９５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４８９．１（Ｍ＋１）．
２－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）プロパン－１，３－二硝酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（４－（３－（（（アリルオキシカルボニル）カルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）マロン酸ジメチル（化合物１４．１）
化合物７．８（５００ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、２－ブロモマロン酸ジメチル（３１９ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（２６０ｍｇ、１．８９ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で１．５時間攪拌した。反応液に水２５ｍＬを加え、酢酸エチル（８０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１４．１を得た（２５０ｍｇ、収率：３８％、黄色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５２８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：アリル（２－（４－（（１，３－ジヒドロプロパン－２－イル）オキシ）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物１４．２）
化合物１４．１（２５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、反応液を０℃まで冷却させ、数回に分けて水素化ほう素ナトリウム（１０７ｍｇ、２．８４ｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で２０分間攪拌し、メタノール１５ｍＬを滴下し、反応液を室温で１時間攪拌した。反応液に水素化ほう素リチウム（１００ｍｇ、４．７０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で３時間攪拌した。ｐＨが６になるように反応液に１Ｍの塩酸溶液を加え、反応液を減圧濃縮して、残留物を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品１４．２を得た（１３０ｍｇ、収率：５８％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４７２．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：アリル（２－（４－（（１，３－ビス（ニトロキシド）プロプ－２－イル）オキシ）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物１４．３）
３ｍＬの硝酸溶液を１００ｍＬのジクロロメタンに加え、反応液を０℃まで冷却させ、硫酸０．７ｍＬを滴下し、反応液を０℃で１時間攪拌した。反応液に化合物１４．２（１３０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を４０℃で４時間攪拌した。ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え調整し、ジクロロメタン（８０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１４．３を得た（８ｍｇ、収率：５％、黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５６２．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：２－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）プロパン－１，３－二硝酸エステル（化合物１４）
化合物１４．３（８ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を８ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、１，３－ジメチルピリミジン－２，４，６（１Ｈ、３Ｈ、５Ｈ）－トリオン（２．７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（２ｍｇ、０．００２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で窒素の保護で０．５時間攪拌した。反応液を減圧濃縮して、残留物を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、実施例１４を得た（６．５ｍｇ、収率：９６％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４７８．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ）－３－アミノ－２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）－Ｎ－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）プロピオンアミド（化合物１５．１）
化合物１．１１（６ｇ、１３．１３ｍｍｏｌ）をエタノール（１３０ｍＬ）とＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）に溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（６．５６ｇ、１３１．３ｍｍｏｌ）を反応液に加え、反応を６０℃で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認してから、反応液を室温まで冷却してからセライトでろ過し、ろ液を真空濃縮して粗製品の化合物１５．１を得た（５ｇ）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：３２８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（Ｓ）－ｔ－ブチル基（２－（４－（ヒドロキシメチル）フェニル）－３－オキソ－３－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（化合物１５．２）
粗製品の化合物１５．１（５ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）を６０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、トリエチルアミン（６．１８ｇ、６１．２ｍｍｏｌ）と二炭酸ジ－ｔ－ブチル（６．６７ｇ、３０．６ｍｍｏｌ）を加え、反応を常温で０．５時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認し、反応液に水を加え、酢酸エチル（３５ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して残留物をシリカゲルカラムにより精製して淡黄色固体製品１５．２を得た（３．５ｇ、純度：９７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４２８．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－カルボン酸（化合物１５．３）
４－ヒドロキシシクロヘキサン－１－カルボン酸（２００ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を１ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で濃硝酸と無水酢酸の混酸溶液（０．２ｍＬの硝酸， ０．４ｍＬの無水酢酸）を加え、０℃で１時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、２０ｍＬの水を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（１０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１５．３を得た（２１０ｍｇ、収率：８０％）。
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（ニトロキシド） ）－１－シクロヘキサンカルボン酸（化合物１５．４）
化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と化合物１５．３（４９ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６８ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２８ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１５．４を得た（１２７ｍｇ、収率：９１％）。
工程Ｅ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸（化合物１５）
化合物１５．４（１２７ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのメタノールに溶解させ、２ｍＬの塩酸メタノール溶液（４Ｍ）を加え、室温で１時間攪拌し、そして系を５０℃まで昇温し１時間反応させ、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、残留物を５ｍＬのメタノールと水溶液に溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例１５を得た（１９ｍｇ、収率：１８％、純度：９７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ４９９．２（Ｍ＋１）．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．３６ （ｄ， Ｊ ＝ １０．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ９．４６ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１２ － ８．０６ （ｍ， １Ｈ）， ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．６ Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．１７ （ｓ， １Ｈ）， ５．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ３．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．０５ － ４．８８ （ｍ， １Ｈ）， ４．５４ － ４．３０ （ｍ， １Ｈ）， ３．６３ （ｓ， １Ｈ）， ３．１８ （ｓ， ２Ｈ）， ２．０２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ２１．９， １１．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．９３ － １．６８ （ｍ， ２Ｈ）， １．６８ － １．３３ （ｍ， ４Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（４－ブロモフェンエトキシ）（ｔ－ブチル）ジメチルシラン（化合物１６．１）
４－ブロモフェニルエタノール（２ｇ、９．９５ｍｍｏｌ）とイミダゾール（１．７ｇ、２５ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、氷浴下で数回に分けてｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（３ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）を加え、そして当該系を室温で２時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１６．１を得た（２．８２ｇ、収率：９０％）。
工程Ｂ：４－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）エチル）安息香酸メチル（化合物１６．２）
化合物１６．１（２．８２ｇ、８．９５ｍｍｏｌ）と［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］二塩化パラジウム（６５９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドと９０ｍＬのメタノール混合溶媒に溶解させ、そして１０ｍＬのトリエチルアミンを加え、当該系を８０℃でＣＯの雰囲気で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（４０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１６．２を得た（１．８４ｇ、収率：７０％）。
工程Ｃ：４－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）エチル）安息香酸（化合物１６．３）
化合物１６．２（７３６ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのメタノールに溶解させ、 水酸化リチウム一水和物（３１５ｍｇ、７．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、６Ｎの塩酸水溶液でｐＨが３になるように調整し、半時間攪拌し、さらに酢酸エチル（３０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１６．３を得た（２５４ｍｇ、収率：６１％）。
工程Ｄ：４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸（化合物１６．４）
化合物１６．３（１００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、氷浴下で濃硝酸と濃硫酸の混合酸溶液（０．４ｍＬの濃硝酸， ０．１ｍＬの濃硫酸）を加え、そして室温で２時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、ジクロロメタン（１５ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１６．４を得た（９２ｍｇ、収率：７３％）。
工程Ｅ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル（化合物１６．５）
化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）と化合物１６．４（５５ｍｇ、０．２５８ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６７ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２８ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１６．５を得た（１１７ｍｇ、収率：８１％）。
工程Ｆ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル（化合物１６）
化合物１６．５（１１７ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を５ｍＬのメタノールに溶解させ、１．５ｍＬの塩酸メタノール溶液（４Ｍ）を加え、まず室温で１時間攪拌し、そして系を５０℃まで昇温し１時間反応させ、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、残留物を５ｍＬのメタノールと水溶液に溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例１６を得た（８３ｍｇ、収率：８４％、純度：９４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５２１．２（Ｍ＋１）．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２２ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ３．２ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３９ （ｓ， １Ｈ）， ５．３３ （ｓ， ２Ｈ）， ４．７８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４ （ｓ， １Ｈ）， ３．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０９ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－４－（２－（ニトロキシド） ）エチル）安息香酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－メチル－４－ビニル安息香酸メチル（化合物１７．１）
４－ブロモ－２－メチル安息香酸メチル（２ｇ、８．７３ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのテトラヒドロフランと４ｍＬの水に溶解させ、ビニルトリフルオロほう酸カリウム（１．４ｇ、１０．４８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（５．７ｇ、１７．４６ｍｍｏｌ）とビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１２２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を７８℃で窒素の保護で１６時間攪拌した。反応液を室温まで冷却させ、反応液に水５０ｍＬを加え、酢酸エチル（６０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物１７．１を得た（１．３ｇ、収率：８５％、黄色油状物）。
工程Ｂ：４－（２－ヒドロキシエチル）－２－メチル安息香酸メチル（化合物１７．２）
化合物１７．１（１．３ｇ、７．３９ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、０℃まで冷却し、１０Ｍのボランのジメチルスルフィド溶液２．２ｍＬを滴下した。反応液を０℃で窒素の保護で１時間攪拌し、そして２０℃で１時間攪拌した。反応液を０℃まで冷却させ、順次２Ｍの水酸化ナトリウム溶液１０ ｍＬと３０％の過酸化水素水２．５ｍＬを滴下した。反応液を０℃で０．５時間攪拌し、そして２０℃で１時間攪拌した。反応液に飽和亜硫酸ナトリウム溶液１００ｍＬを加え、そして２Ｍの塩酸溶液でｐＨが２になるように調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物１７．２を得た（０．６１ｇ、収率：４２％、無色液体）。
工程Ｃ：４－（２－ヒドロキシエチル）－２－メチル安息香酸（化合物１７．３）
化合物１７．２（６１０ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）を６ｍＬのメタノールに溶解させ、そして２Ｍの水酸化ナトリウム溶液５ｍＬを加え、還流させ４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、６Ｎの塩酸水溶液でｐＨが３になるように調整し、半時間攪拌し、さらに酢酸エチル（３０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１７．３を得た（５０９ｍｇ、収率：９０％、白色固体）。
工程Ｄ：２－メチル－４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸（化合物１７．４）
化合物１７．３（２００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を５ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、氷浴下で濃硝酸と濃硫酸の混合酸溶液（１．４ｍＬの濃硝酸， ０．３５ｍＬの濃硫酸）を加え、そして室温で５時間反応した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（１５ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１７．４を得た（１９２ｍｇ、収率：７７％、白色固体）。
工程Ｅ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル（化合物１７．５）
化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）と化合物１７．４（５８ｍｇ、０．２５８ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６８ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２８ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１７．５を得た（１１５ｍｇ、収率：７８％、淡黄色固体）。
工程Ｆ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－４－（２－（ニトロキシド））エチル）安息香酸エステル（化合物１７）
化合物１７．５（９８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を１ｍＬのメタノールに溶解させ、３ｍＬの塩酸メタノール溶液（４Ｍ）を加え、室温で２時間攪拌し、 ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、残留物を５ｍＬのメタノールと水溶液に溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品化合物１７を得た（７２ｍｇ、収率：９０％、純度：９８．８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５３５．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．５２ （ｓ， １Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２４ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５１ （ｑ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．４１ （ｓ， １Ｈ）， ７．２６ （ｓ， １Ｈ）， ７．２３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３０ （ｓ， ２Ｈ）， ４．７６ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６５ （ｓ， １Ｈ）， ３．１８ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．５０ （ｓ， ３Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－５－（２－（ニトロキシド））エチル）安息香酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－メチル－５－ビニル安息香酸メチル（化合物１８．１）
５－ブロモ－２－メチル安息香酸メチル（２ｇ、８．７３ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのテトラヒドロフランと４ｍＬの水に溶解させ、ビニルトリフルオロほう酸カリウム（１．４ｇ、１０．４８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（５．７ｇ、１７．４６ｍｍｏｌ）とビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１２２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を７８℃で窒素の保護で１６時間攪拌した。反応液を室温まで冷却させ、反応液に水５０ｍＬを加え、酢酸エチル（６０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物１８．１を得た（１．１３ｇ、収率：７４％、黄色油状物）。
工程Ｂ：５－（２－ヒドロキシエチル）－２－メチル安息香酸メチル（化合物１８．２）
化合物１８．１（１．１３ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、０℃まで冷却し、１０Ｍのボランのジメチルスルフィド溶液２．２ｍＬを滴下した。反応液を０℃で窒素の保護で１時間攪拌し、そして２０℃で１時間攪拌した。反応液を０℃まで冷却させ、順次２Ｍの水酸化ナトリウム溶液１０ ｍＬと３０％の過酸化水素水２．５ｍＬを滴下した。反応液を０℃で０．５時間攪拌し、そして２０℃で１時間攪拌した。反応液に飽和亜硫酸ナトリウム溶液１００ｍＬを加え、そして２Ｍの塩酸溶液でｐＨが２になるように調整し、酢酸エチル（１００ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから化合物１８．２を得た（０．６２ｇ、収率：５０％、無色液体）。
工程Ｃ：５－（２－ヒドロキシエチル）－２－メチル安息香酸（化合物１８．３）
化合物１８．２（６２０ｍｇ、３．２０ｍｍｏｌ）を６ｍＬのメタノールに溶解させ、そして２Ｍの水酸化ナトリウム溶液５ｍＬを加え、還流させて４時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、６Ｎの塩酸水溶液でｐＨが３になるように調整し、半時間攪拌し、さらに酢酸エチル（３０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して製品１８．３を得た（５７０ｍｇ、収率：９９％、白色固体）。
工程Ｄ：２－メチル－５－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸（化合物１８．４）
化合物１８．３（２００ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を５ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、氷浴下で濃硝酸と濃硫酸の混合酸溶液（１．４ｍＬの濃硝酸， ０．３５ｍＬの濃硫酸）を加え、そして室温で５時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（１５ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１８．４を得た（１９１ｍｇ、収率：７６％、淡黄色固体）。
工程Ｅ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－５－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル（化合物１８．５）
化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）と化合物１８．４（５８ｍｇ、０．２５８ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６８ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２８ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１８．５を得た（８８ｍｇ、収率：５９％、淡黄色固体）。
工程Ｆ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－５－（２－（ニトロキシド） ）エチル）安息香酸エステル（化合物１８）
化合物１８．５（８８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を１ｍＬのメタノールに溶解させ、３ｍＬの塩酸メタノール溶液（４Ｍ）を加え、室温で２時間攪拌し、 ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、残留物を５ｍＬのメタノールと水溶液に溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品化合物１８を得た（６４ｍｇ、収率：８６％、純度：９７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５３５．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．５４ （ｓ， １Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２６ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．７６ （ｄ， Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５２ （ｑ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ４Ｈ）， ７．４６ － ７．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．７２ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ５．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６５ （ｓ， １Ｈ）， ３．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０１ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４８ （ｓ， ３Ｈ）．
４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｓ，４Ｒ）－４－（ニトロキシド） シクロヘキサン－１－カルボン酸塩
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（１ｓ，４ｓ）－４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸（化合物１９．１）
化合物（１ｓ，４ｓ）－４－ヒドロキシシクロヘキサン－１－カルボン酸（２００ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を１．５ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で濃硝酸と無水酢酸の混酸溶液（０．８ｍＬの硝酸， １．６ｍＬの無水酢酸）を加え、０℃で４時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、３０ｍＬの酢酸エチルを加え、希釈し、反応液を順次水（１０ ｍＬ × ３）と飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１９．１を得た（２２０ｍｇ、収率：９０％、白色固体）。
工程Ｂ：４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｓ，４Ｒ ）－４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸（化合物１９．２）
化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）と化合物１９．１（５０ｍｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６８ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２８ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品１９．２を得た（７２ｍｇ、収率：５１％）。
工程Ｃ：４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｓ，４Ｒ）－４－（ニトロキシド） シクロヘキサン－１－カルボン酸塩（化合物１９）
化合物１９．２（７２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、２ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で２時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、飽和炭酸水素ナトリウム（４０ｍＬ）を加え、反応をクエンチし、ジクロロメタン（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残留物を１０ｍＬの酢酸エチルに溶解させ、０．２ｍＬの塩化水素・酢酸エチル溶液（２Ｍ）を加え、１時間攪拌し、真空で溶媒を濃縮して、固体を酢酸エチルとメタノールの混合溶液でパルプ化させ、ろ過した。ケーキを超純水で溶解、ろ過し、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品の実施例１９を得た（５４ｍｇ、収率：９０％、純度：９８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ４９９．２（Ｍ＋１）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．５０ （ｓ， １Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２３ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４５ － ７．２３ （ｍ， ３Ｈ）， ５．１７ （ｓ， １Ｈ）， ５．０９ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４ （ｓ， １Ｈ）， ３．６４ （ｓ， １Ｈ）， ３．２４ － ３．０４ （ｍ， １Ｈ）， ３．２１ － ３．０２ （ｍ， １Ｈ）， ２．５８ － ２．５２ （ｍ， １Ｈ）， １．９０ － １．８１ （ｍ， ２Ｈ）， １．８１ － １．７１ （ｍ， ４Ｈ）， １．６９ － １．５７ （ｍ， ２Ｈ）．
４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｒ，４Ｓ）－４－（ニトロキシド） シクロヘキサン－１－カルボン酸塩
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（１ｒ，４ｒ）－４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸（化合物２０．１）
化合物（１ｒ，４ｒ）－４－ヒドロキシシクロヘキサン－１－カルボン酸（２００ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を１．５ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で濃硝酸と無水酢酸の混酸溶液（０．８ｍＬの硝酸， １．６ｍＬの無水酢酸）を加え、０℃で４時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、３０ｍＬの酢酸エチルを加え、希釈し、反応液を順次水（１０ ｍＬ × ３）と飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２０．１を得た（２１０ｍｇ、収率：８０％、白色固体）。
工程Ｂ：４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｒ，４Ｓ ）－４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸（化合物２０．２）
化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）と化合物２０．１（５０ｍｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６８ｍｇ、０．３５１ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２８ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２０．２を得た（１２６ｍｇ、収率：９０％、淡黄色固体）。
工程Ｃ：４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｒ，４Ｓ）－４－（ニトロキシド） シクロヘキサン－１－カルボン酸塩（化合物２０）
化合物２０．２（１２６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、２ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で２時間攪拌し、 ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、飽和炭酸水素ナトリウム（４０ｍＬ）を加え、反応をクエンチし、ジクロロメタン（２０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残留物を１０ｍＬの酢酸エチルに溶解させ、０．２ｍＬの塩化水素・酢酸エチル溶液（２Ｍ）を加え、１時間攪拌し、真空で溶媒を濃縮して、固体を酢酸エチルとメタノールの混合溶液でパルプ化させ、ろ過した。ケーキを超純水で溶解、ろ過し、凍結乾燥してから目標製品の実施例２０を得た（５８ｍｇ、収率：５５％、純度：９６．５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ４９９．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．０６ （ｓ， １Ｈ）， ９．２８ （ｓ， １Ｈ）， ８．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１９ （ｓ， ３Ｈ）， ７．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２６ （ｓ， １Ｈ）， ５．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ５．０５ － ４．９２ （ｍ， １Ｈ）， ４．４１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．８， ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６８ － ３．５４ （ｍ， １Ｈ）， ３．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．４３ （ｔｔ， Ｊ ＝ １１．２， ３．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．１２ － １．８９ （ｍ， ４Ｈ）， １．６４ － １．３６ （ｍ， ４Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）３－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸ベンジル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：３－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸（化合物２１．１）
３－ブロモメチル安息香酸（５３７ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのアセトニトリルに溶解させ、硝酸銀（５１０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で暗所で一晩攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を濃縮してから、酢酸エチル（２０ｍＬ）で溶解、ろ過し、ろ液を濃縮して化合物２１．１を得た（４９５ｍｇ、収率：９９％、白色固体）。
工程Ｂ：３－（（ニトロキシド）メチル）ベンゾイルクロリド（化合物２１．２）
化合物２１．１（７１ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を４ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、氷浴下で塩化オキサリル（０．０６ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）と２滴のＤＭＦを加え、反応液を室温で１時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を濃縮してから化合物２１．２粗製品を得、そのまま次の反応に利用した。
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（（ ニトロキシド）メチル）安息香酸エステル（化合物２１．３）
前工程で得られた化合物２１．２（０．３６ｍｍｏｌ）、化合物１５．２ （５１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（１．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を５ｍＬのテトラヒドロフランと３ｍＬのジクロロメタンの混合溶媒に溶解させ、氷浴下でトリエチルアミン（０．０５ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。反応が完成してから、反応液をジクロロメタン（１０ｍＬ）で希釈し、順次飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍＬ）、水（１０ｍＬ）と飽和ブライン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから薄層クロマトグラフィーにより分離精製し、化合物２１．３を得た（２８．６ｍｇ、収率：３９％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６０７．２（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）３－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸ベンジル（化合物２１）
化合物２１．３（２８．６ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）を２ｍＬのメタノールに溶解させ、塩化水素のメタノール溶液（４Ｍ、１ｍＬ）を加え、室温で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を濃縮して、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、実施例２１を得た（１３．７ｍｇ、収率：６４％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５０７．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）４－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸ベンジル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：４－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸（化合物２２．１）
４－ブロモメチル安息香酸（５３７ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのアセトニトリルに溶解させ、硝酸銀（５１０ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で暗所で一晩攪拌した。反応液を濃縮してから、酢酸エチル（２０ｍＬ）で溶解させ、ろ過し、ろ液を濃縮して化合物２２．１を得た（４７６ｍｇ、収率：９７％、白色固体）。
工程Ｂ：３－（（ニトロキシド）メチル）ベンゾイルクロリド（化合物２２．２）
化合物２２．１（９４．６ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を５ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、氷浴下で塩化オキサリル（０．０８ｍＬ、０．９６ｍｍｏｌ）と２滴のＤＭＦを加え、反応液を室温で１時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を濃縮してから化合物２２．２の粗製品を得、そのまま次の反応に利用した。
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（（ ニトロキシド）メチル）安息香酸エステル（化合物２２．３）
前工程で得られた化合物２２．２（０．４８ｍｍｏｌ）、化合物１５．２ （１０２．５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（３ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）を８ｍＬのテトラヒドロフランと３ｍＬのジクロロメタンの混合溶媒に溶解させ、氷浴下でトリエチルアミン（０．０７ｍＬ、０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。反応が完成してから、反応液をジクロロメタン（１５ｍＬ）で希釈し、それぞれ飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１５ｍＬ）、水（１５ｍＬ）と飽和ブライン（１５ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製してから薄層クロマトグラフィーにより分離精製し、化合物２２．３を得た（７０ｍｇ、収率：４８％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６０７．２（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）４－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸ベンジル（化合物２２）
化合物２２．３（７０ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）を塩化水素のメタノール溶液（４Ｍ、３ｍＬ）に溶解させてから室温で反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を濃縮して、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例２２を得た（３６．７ｍｇ、収率：５９％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５０７．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタン－１－カルボン酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：３－メチレンシクロブタン－１－カルボン酸（化合物２３．１）
３－メチレンシクロブタン－１－カルボニトリル（３．１ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのエタノールに溶解させ、水酸化カリウム（７．６ｇ、１３５ｍｍｏｌ）の水溶液（２０ｍＬ）を加え、８０℃で３時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、有機溶媒をスピン乾燥させ、水相を濃塩酸でｐＨ＜２になるように調整し、酢酸エチルで抽出した（５０ｍＬ × ２）。合併された有機相を飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２３．１を得た（３．８８ｇ、収率：１００％、無色油液）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：１１３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：３－メチレンシクロブタン－１－カルボン酸ベンジル（化合物２３．２）
化合物２３．１（１．８ｇ、１６ｍｍｏｌ）を２０ｍＬＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、炭酸カリウム（３．３２ｇ、２４ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（２．０９ｍＬ、１７．６ｍｍｏｌ）を加え、室温一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから反応液をろ過し、ろ液を濃縮し、水（５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出した（５０ｍＬ × ２）。合併された有機相を飽和ブラインで洗浄し（５０ｍＬ × ５）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２３．２を得た（２．８５ｇ、収率：８８％、無色油液）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２０３．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：３－（ヒドロキシメチル）シクロブタン－１－カルボン酸ベンジル（化合物２３．３）
窒素の保護で、化合物２３．２（１．４１ｇ、７ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷－食塩浴で２．１ｍＬボランのジメチルスルフィド溶液（１０Ｍ）を滴下し、滴下が終わってから室温で１時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、氷－食塩浴で順次７ｍＬの水酸化ナトリウム水溶液（３Ｍ）と２．４ｍＬ過酸化水素溶液（３０％）を加え、室温で続けて２時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、飽和亜硫酸ナトリウム溶液（５ｍＬ）反応をクエンチし、水（２０ｍＬ）を加え希釈してから酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出した。有機相を合併し、飽和ブラインで洗浄し（５０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２３．３を得た（７４９ｍｇ、収率：４９％、無色油液）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２２１．２（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：３－（ヒドロキシメチル）シクロブタン－１－カルボン酸（化合物２３．４）
化合物２３．３（７１６ｍｇ、３．２５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのメタノールに溶解させ、水酸化ナトリウム（３９０ｍｇ、９．７ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍＬ）を加え、室温で攪拌し反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（２５ｍＬ × ３）、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物２３．４を得た（２３６ｍｇ、収率：５６％、無色液体）。
工程Ｅ：３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタン－１－カルボン酸（化合物２３．５）
氷浴下で１ｍＬの発煙硝酸を２ｍＬの無水酢酸に滴下し、５分間攪拌した。化合物２３．４（２００ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）を５ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で前記硝酸の無水酢酸溶液を滴下し、１時間保温し反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２３．５を得た（１５５．６ｍｇ、収率：５８％、淡茶色液体）。
工程Ｆ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（（ ニトロキシド）メチル）シクロブタン－１－カルボン酸エステル（化合物２３．６）
化合物２３．５（７５ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、化合物１５．２（１００ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（４１．５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解させ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（８８ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２３．６を得た（１５８．１ｍｇ、収率：８１％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５８５．２（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタン－１－カルボン酸エステル（化合物２３）
化合物２３．６（７５ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）を３ｍＬのジクロロメタンに溶解させてから、０．３ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を濃縮して、２０ｍＬの酢酸エチルを加え、順次飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２０ｍＬ）と飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例２３を得た（４７．８ｍｇ、収率：７２％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４８５．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．５６ （ｓ， １ Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．２６ （ ｓ， ３ Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ７．４３ － ７．３５ （ｍ， ３ Ｈ）， ５．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ４．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， １ Ｈ）， ４．５２ － ４．４４ （ｍ， ２ Ｈ）， ３．７２ － ３．５７ （ｍ， １ Ｈ）， ３．３１ － ３．２１ （ｍ， １ Ｈ）， ３．２０ － ３．０８ （ｍ， １ Ｈ）， ２．６９ － ２．５６ （ｍ， １ Ｈ）， ２．３６ － ２．２１ （ｍ， ２ Ｈ）， ２．１４ － １．９４ （ｍ， ２ Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（２－（ニトロキシド）エチル）ウレタン
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－アミノ硝酸エチル硝酸塩（２４．１）
氷浴下で、３ｍＬの発煙硝酸を１２ｍＬの無水酢酸に滴下し、３０分間攪拌した。そして氷浴下でエタノールアミン（９７７．３ｍｇ、１６ｍｍｏｌ）を加え、温度を５℃未満に保持し３０分間攪拌した。反応液を濃縮して、５０ｍＬのエチルエーテルを加え、１時間パルプ化させ、ろ過して製品２４．１を得た（１．９５ｇ、収率：７２％、白色固体）。
工程Ｂ：（Ｓ）－ｔ－ブチル基（２－（４－（（（（（（２－（ニトロキシド）エチル）アミノホルミル）オキシ）メチル）フェニル）－３－オキソ－３－（チオ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロピル）ウレタン（２４．２）
アルゴンガスの保護で、化合物１５．２（６４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）とトリホスゲン（２２．２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を３ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴下でジイソプロピルエチルアミン（１９．４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（３．７ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を加え、温度を保持し１時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、化合物２４．１（５０．７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（３８．８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）溶液を加え、室温で１時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、酢酸エチル（２０ｍＬ）で反応液を希釈し、順次飽和塩化アンモニウム溶液（２０ｍＬ）と飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２４．２を得た（２４．８ｍｇ、収率３０％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５６０．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（２－（ニトロキシド）エチル）ウレタン（化合物２４）
化合物２４．２（２４．８ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を１．５ｍＬのメタノールに溶解させ、塩化水素のメタノール溶液（４Ｍ、１．５ｍＬ）を加えてから、室温で反応させた。反応が完成してから、反応液を濃縮して、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例２４を得た（１１．６ｍｇ、収率：５３％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４６０．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．５０ （ ｓ， １ Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．２４ （ｓ， ３ Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．５５ － ７．４５ （ｍ， ３ Ｈ）， ７．４３ － ７．３２ （ｍ， ３ Ｈ）， ５．０２ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．５９ － ４．４０ （ｍ， ３ Ｈ）， ３．７２ － ３．５７ （ｍ， １ Ｈ）， ３．３６ － ３．３１ （ｍ， ２ Ｈ）， ３．２０ － ３．１０ （ｍ， １ Ｈ）．
（１Ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（１Ｒ，３Ｒ）－３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸（化合物２５．１）
氷浴条件で、秤量された無水酢酸（３ｍＬ）を一口フラスコ（５０ｍＬ）に加え、続いて濃硝酸（１．５ｍＬ）をゆっくり反応フラスコに滴下し、反応液を氷浴で１０分間攪拌した。氷浴条件で、（１Ｒ，３Ｒ）－３－ヒドロキシシクロブタンカルボン酸（１５０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を無水酢酸（４ｍＬ）に溶解させ、そして無水酢酸－濃硝酸混合液（４．５ｍＬ）をゆっくり反応液に滴下し、そして反応液を常温で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ブロモクレゾールグリーンが発色）により反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチル（１５ｍＬ）で抽出し、分液し有機相を合併し、そして有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムにより精製し、白色固体２５．１を得た（１２０ｍｇ、収率：５８％）。
工程Ｂ：（１Ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－（１，３－ジオキソイソインドール－２－イル）－１－オキソ－１－（チオ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－（ニトロ）３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物２５．２）
化合物１．１１（１００ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）に溶解させ、そして順次に１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（６３．３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（４０．２６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と化合物２５．１（４２．３４ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を加え、混合液在常温で一晩攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。水を反応液に加え、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ × ２）、有機相を合併し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して、残留物をシリカゲルカラムにより精製し淡黄色固体２５．２を得た（１０５ｍｇ、収率：８０％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６０１．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：１Ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物２５）
化合物２５．２（１０５ｍｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）をエタノール（８ｍＬ）に溶解させ、ヒドラジン一水和物（８７．５ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）を反応液を加え、反応を不活性ガスの雰囲気で６０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応液に水を加え、酢酸エチル（１２ｍＬ × ２）で抽出した。有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮して、残留物を３ｍＬのメタノールに溶解させ、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから淡黄色固体の実施例２５を得た（２５ｍｇ、収率：３０％、純度：９６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４７１．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．４０ （ｓ， １Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２２ － ８．１２ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４３ － ７．３７ （ｍ， ３Ｈ）， ５．４５ － ５．３５ （ｍ， １Ｈ）， ５．１２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４８ － ４．４２ （ｍ， １Ｈ）， ３．６４ （ｓ， １Ｈ）， ３．２５ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １４．４， ９．７， ４．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２１ － ３．１１ （ｍ， １Ｈ）， ２．６２ （ｄｄｄ， Ｊ ＝ １２．１， ７．３， ４．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４８ － ２．４４ （ｍ， １Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドール－２－イル）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオン酸メチル（化合物２６．１）
化合物１．１１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）に溶解させ、そしてＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ， Ｎ， Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム（６２．７ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（３５．５ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を常温で３０分間攪拌し、そして２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオン酸（２９．５７ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）を加え、混合液を常温で一晩攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ）、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムにより精製し、淡黄色固体２６．１を得た（４０ｍｇ、収率：５５％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６６４．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート（化合物２６）
化合物２６．１（４０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を７ｍＬのエタノールに溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（３０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を反応液に加え、反応を不活性ガスの雰囲気で６０℃で２時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。反応液に水を加え、酢酸エチル（１２ｍＬ）で抽出し、飽和ブラインで洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残渣をメタノール（３ｍＬ）に溶解させ、、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、白色固体製品の実施例２６を得た（１０．５ｍｇ（塩酸塩）、収率：３０．５％、純度：９８％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：５３４．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．３５ （ｓ， １Ｈ）， ９．４６ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２２ － ８．１１ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４２ － ７．３６ （ｍ， ３Ｈ）， ５．１７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．７８ － ４．６９ （ｍ， ４Ｈ）， ４．４４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．８， ５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４ （ｓ， １Ｈ）， ３．２０ － ３．１１ （ｍ， １Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）．
４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｓ，４Ｒ）－４－（（ニトロキシド ）メチル）シクロヘキサン－１－ギ酸
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：ｔｒａｎｓ－４－（（ニトロキシド）メチル）シクロヘキサン－１－ギ酸（２７．１）
氷浴下で、２ｍＬの濃硝酸を２ｍＬの濃硫酸に滴下し、１００分間攪拌した。そして氷浴下でｔｒａｎｓ－４－（ヒドロキシメチル）シクロヘキサン－１－ギ酸（６０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（４ｍＬ）溶液を加え、温度を５℃未満に保持し５０分間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、氷浴下で反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２７．１を得た（６３ｍｇ、収率：８１％、白色固体）。
工程Ｂ：ｔｒａｎｓ－（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル４－（（ ニトロキシド）メチル）シクロヘキサン－１－ギ酸（２７．２）
化合物２７．１（４３．２５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（５４．８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（３３．５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解させ、化合物１５．２（６０．８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２７．２を得た（６２．７ｍｇ、収率：７２％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６１３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：ｔｒａｎｓ－（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（（ニトロキシド）メチル）シクロヘキサン－１－カルボン酸塩（化合物２７）
化合物２７．２（５７ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）を５ｍＬの塩化水素の１、４－ジオキサ溶液（４Ｍ）に溶解させ、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を乾固まで濃縮し、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例２７を得た（３０．９ｍｇ、収率：６０％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１３．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（３－ブロモフェンエトキシ）（ｔ－ブチル）ジメチルシラン（化合物２８．１）
３－ブロモフェニルエタノール（１．８９ｇ、９．４ｍｍｏｌ）とイミダゾール（２．５６ｇ、３６．１６ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、室温でｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルクロリド（２．８３ｇ、１８．７８ｍｍｏｌ）を加え、そして当該系を室温で２．５時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、順次に水（３０ｍＬ × ２）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３０ｍＬ × ２）、飽和ブライン（３０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２８．１を得た（２．６４ｇ、収率：８９％）。
工程Ｂ：３－（２－（（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）エチル）安息香酸メチル（化合物２８．２）
化合物２８．１（２．６４ｇ、８．３７ｍｍｏｌ）と［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］二塩化パラジウム（６１２ｍｇ、０．０８３７ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドと４５ｍＬのメタノール混合溶媒に溶解させ、そして１５ｍＬのトリエチルアミンを加え、当該系を８０℃で一酸化炭素の雰囲気で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、濃縮してから酢酸エチル（３０ｍＬ × ３）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（４０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２８．２を得た（２ｇ、収率：８１％）。
工程Ｃ：３－（２－（（ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシラン）オキシ）エチル）安息香酸（化合物２８．３）
化合物２８．２（２ｇ、６．７９ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのメタノールに溶解させ、そして２０ｍＬのテトラヒドロフランと１５ｍＬの水を加え、そして一水合水酸化リチウム（８５９ｍｇ、２０．３７ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、１Ｍの塩酸水溶液でｐＨが３になるように調整し、半時間攪拌し、さらに酢酸エチル（６０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ × １）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２８．３を得た（１．２ｇ、収率：６３％）。
工程Ｄ：３－（２－ヒドロキシエチル）安息香酸（化合物２８．４）
化合物２８．３（７００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの酢酸エチルに溶解させ、そして３ｍＬの塩化水素／メタノール（４Ｍ）溶液を加え、室温で１．５時間攪拌し反応させ、反応が終わってから、濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより製品２８．４を得た（２５８ｍｇ、収率：６２％）
工程Ｅ：３－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸（化合物２８．５）
氷浴における３０ｍＬのジクロロメタンに濃硝酸と濃硫酸の混合酸溶液（２０滴の濃硝酸， ４滴の濃硫酸）を加え、氷浴で１時間攪拌し、そして化合物２８．４（２５０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、水を加え反応をクエンチし、ジクロロメタン（４０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ × ３）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２８．５を得た（２３５ｍｇ、収率：７４％）。
工程Ｆ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル（化合物２８．６）
化合物１５．２（１６１ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）と化合物２８．５（１１４ｍｇ、０．５３９ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１５５ｍｇ、０．８０８ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（９８．６ｍｇ、０．８０８ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品２８．６を得た（１８５ｍｇ、収率：７９％）。
工程Ｇ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル（化合物２８）
化合物２８．６（１００ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を６ｍＬのメタノールに溶解させ、４ｍＬの塩酸メタノール溶液（４Ｍ）を加え、室温で３時間攪拌して、 ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、残留物を５ｍＬのメタノールと水溶液に溶解させ、ろ過し、ろ液を逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、凍結乾燥してから目標製品化合物の実施例２８を得た（７６ｍｇ、収率：９１％、純度：９９％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５２１．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．５５ （ｓ， １ Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．２５ （ｓ， ３ Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．９４ － ７．８１ （ｍ， ２ Ｈ）， ７．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．５６ － ７．４５ （ｍ， ５ Ｈ）， ７．４１ （ｓ， １ Ｈ）， ５．３５ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．７６ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ４．５１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．６， ８．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６３－３．６６ （ｍ， １ Ｈ）， ３．２２ － ３．１２ （ｍ， １ Ｈ）， ３．０８ （ｔ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２ Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－（１－（（ニトロキシド）メチル） 酢酸シクロプロピルエステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：２－（１－（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）酢酸（化合物２９．１）
化合物２－（１－（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）アセトニトリル（１ｇ、９ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのエタノールに溶解させ、そして水酸化カリウム（５ｇ、８９．１２ｍｍｏｌ）の水（２０ｍＬ）溶液を加え、８０℃で１６時間攪拌し反応させ、ＴＬＣによりが終わったと検出してから、濃縮しエタノールを除去し、そして０℃まで冷却し、濃塩酸でｐＨが１－２になるように調整し、そして酢酸エチル（８０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し化合物２９．１を得た（８７０ｍｇ、収率：７４％）
工程Ｂ：２－（１－（（（ニトロキシド）メチル）シクロプロピル）酢酸（化合物２９．２）
０℃で、１ｍＬの濃硝酸を２ｍＬの無水酢酸に加え、そして当該混合物０℃で１０分間攪拌し、そして混合物を０℃で化合物２９．１（２００ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）の無水酢酸（１５ｍＬ）溶液に滴下し、０℃に保持し１．５時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、水（２０ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（４０ｍＬ × ２）で抽出し、合併された有機相をそれぞれ水、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより化合物２９．２を得た（５６ｍｇ、収率：２１％）
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－（１－（（ニトロキシド）メチル）シクロプロピル）酢酸エステル（化合物２９．３）
化合物２９．２（５６ｍｇ、０．３１９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（９２ｍｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）、 ４－ジメチルアミノピリジン（５９ｍｇ、０．４８３ｍｍｏｌ）および化合物１５．２（６８ｍｇ、０．１５９ｍｍｏｌ）を加え、Ｎ２の保護で室温で一晩反応させ、ＬＣ－ＭＳにより反応が完成したと検出してから、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより化合物２９．３を得た（７２ｍｇ、収率：７７％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５８５．２（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－（１－（（ニトロキシド）メチル） 酢酸シクロプロピルエステル（化合物２９）
化合物２９．３（７２ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、３０ｍＬの塩化水素／メタノール溶液（４Ｍ）を加え、室温で５時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液を減圧濃縮して、炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ ＝ ８－１０になるように調整し、酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ × ２）、そして飽和ブラインで洗浄し（３０ｍＬ × １）、有機相濃縮してからｐ－ＨＰＬＣにより逆相分取し、凍結乾燥してから目標製品の実施例２９を得た（１７ｍｇ、収率：２８％、純度：８１％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ４８５．１（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２，２－ジメチル－５－（ニトロキシド）吉草酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：５－ブロモ－２，２－ジメチル吉草酸（化合物３０．１）
化合物２，２－ジメチルペント－４－エン酸（９００ｍｇ、７．０２ｍｍｏｌ）をｎ－ヘキサン（３５ｍＬ）に溶解させ、そして氷浴で０℃まで冷却し、当該温度で臭化水素の酢酸溶液（３．４４ｇ、３３％含量）を加え、そして室温で４時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、混合物に水（４０ｍＬ）を加え、そして酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、水（３０ｍＬ × ２）、飽和ブライン（３０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し化合物３０．１を得た（１．３６ｇ、収率：９３％）。
工程Ｂ：２，２－ジメチル－５－（ニトロキシド）吉草酸（化合物３０．２）
化合物３０．１（１．１ｇ、５．２６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１６ｍＬ）に溶解させ、そして硝酸銀（１．７９，１０．５９ｍｍｏｌ）を加え、窒素の保護で、８０℃まで昇温し、６時間反応させた。反応が終わってから、室温まで冷却させ、ろ過し、ろ液を濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより化合物３０．２を得た（３４０ｍｇ、 収率：３１％）。
工程Ｃ：５－クロロ－４，４－ジメチル－５－オキシペンチル硝酸塩（化合物３０．３）
化合物３０．２（１５０ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１６ｍＬ）に溶解させ、窒素の保護で、氷浴で０℃まで冷却し、塩化オキサリル（０．１３３ｍＬ）と触媒量のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを加え、室温で３時間攪拌して、反応が終わってから、濃縮し化合物３０．３の粗製品を得、そのまま次の工程に利用した。
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２，２－５－（ニトロキシド）吉草酸ジメチル（化合物３０．４）
化合物１５．２（１６８ｍｇ、３５１．２７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解させ、ジイソプロピルエチルアミン（３０３ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を加えてから混合物を０℃まで冷却させ、さらに前記化合物３０．３の粗製品のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液、および４－ジメチルアミノピリジン（９６ｍｇ、０．７８６ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で１時間攪拌し、ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブラインで洗浄し（３０ｍＬ × １）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、残留物をカラムクロマトグラフィーにより化合物３０．４を得た（１５０ｍｇ、収率：６４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ６０１．２（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２，２－ジメチル－５－（ニトロキシド） 吉草酸エステル（化合物３０）
化合物３０．４（１５０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を８ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加え、室温で１時間攪拌し、ＬＣ－ＭＳにより反応が完成したと検出してから、炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨが８になるように調整し、そして酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブラインで洗浄し（３０ｍＬ × １）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮し、残留物をｐ－ＨＰＬＣにより分取し、製品の実施例３０を得た（８２ｍｇ、収率：６６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５０１．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．６３ （ｓ， １ Ｈ）， ９．５０ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．３０ （ ｓ， ３ Ｈ）， ８．１６ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ７．４３ （ｓ， １ Ｈ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．５２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．２， ８．８ Ｈｚ， １ Ｈ）， ４．４８ － ４．４０ （ｍ， ２ Ｈ）， ３．６５ （ｄ， Ｊ ＝ ４．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．２０ － ３．０７ （ｍ， １ Ｈ）， １．６４ － １．４７ （ｍ， ４ Ｈ）， １．１４ （ｓ， ６ Ｈ）
（S）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）６－（ニトロキシド）ヘキサン酸ベンジル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：６－（ニトロキシド）ヘキサン酸（化合物３１．１）
秤量された６－ブロモヘキサン酸（５００ｍｇ、２．５６ｍｍｏｌ）を８ｍＬのアセトニトリルに溶解させ、硝酸銀（８７１ｍｇ、５．１３ｍｍｏｌ）を反応液に加えた。暗所で、不活性ガスの雰囲気で、反応液を８５℃で下５時間攪拌した。ＴＬＣ（ブロモクレゾールグリーンが発色）により反応が完成したと確認した。反応液から析出された固体をセライトでろ過し、ケーキをアセトニトリルで洗浄し、ろ液を濃縮して残留物を酢酸エチルに溶解させ、有機相を順次に水（１５ｍＬ）と飽和ブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して無色液体３１．１を得た（４００ｍｇ、収率：８８％）。
工程Ｂ：（（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドール－２－イル）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル６－（ニトロキシド）ヘキサン酸エステル（化合物３１．２）
化合物１．１１（１００ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）を７ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（６３．３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（４０．２６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と化合物３１．１（４６．５５ｍｇ、０．２６３ｍｍｏｌ）を加え、混合液を常温で一晩攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチル（１５ｍＬ）で抽出し、分液し有機相を合併し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をシリカゲルカラムにより精製し、淡黄色固体３１．２を得た（８０ｍｇ、収率：５９％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６１７．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）６－（ニトロキシド）ヘキサン酸ベンジル（化合物３１）
化合物３１．２（８０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を８ｍＬのエタノールに溶解させ、ヒドラジン一水和物（６５ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加え、反応を６０℃まで加熱し、不活性ガスの雰囲気で３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（１２ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をメタノール／テトラヒドロフラン（１．５ｍＬ／１．５ｍＬ）に溶解させ、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、淡黄色固体製品の実施例３１を得た（３５ｍｇ、収率：５２％、純度：９６％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４８７．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．５４ （ｓ， １Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２５ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４２ － ７．３６ （ｍ， ３Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５２ － ４．４５ （ｍ， ３Ｈ）， ３．７０ － ３．５６ （ｍ， １Ｈ）， ３．２０ － ３．１０ （ｍ， １Ｈ）， ２．３６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６８ － １．６０ （ｍ， ２Ｈ）， １．５６ （ｄｔ， Ｊ ＝ １５．２， ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３９ － １．２８ （ｍ， ２Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル１－（（ニトロキシド）メチル）シクロプロパンカルボン酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：１－（ヒドロキシメチル）シクロプロパンカルボン酸（化合物３２．１）
氷浴で、１－（メトキシカルボニル）シクロプロパンカルボン酸（６５０ｍｇ、４．５１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの無水テトラヒドロフランに溶解させ、窒素の保護で、ボランのジメチルスルフィド溶液（０．５ｍＬ、４．９６１ｍｍｏｌ）をゆっくり反応液に滴下し、そして反応を常温で１．５時間攪拌した。ＴＬＣ（ブロモクレゾールグリーンが発色）により反応が完成したと確認した。さらに反応液を０℃まで冷却し、メタノールで反応をクエンチした。反応液を濃縮して淡黄色油状の粗製品３２．１を得た（４１０ｍｇ、収率：６９．８７％）。
工程Ｂ：１－（（ニトロキシド）メチル）シクロプロパンカルボン酸（化合物３２．２）
氷浴条件で、秤量された無水酢酸（２ｍＬ）を一口フラスコ（５０ｍＬ）に加え、ゆっくり濃硝酸（１ｍＬ）を反応フラスコに滴下し、反応液を氷浴で１０分間攪拌した。氷浴条件で、化合物３２．１（１５０ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ）を無水酢酸（３ｍＬ）に溶解させ、そして無水酢酸－濃硝酸の混合液（３ｍＬ）をゆっくり反応液に滴下し、そして反応液を常温で１時間攪拌した。ＴＬＣ（ブロモクレゾールグリーンが発色）により反応が完成したと確認した。水を反応液に加え、酢酸エチル（１５ｍＬ）で抽出し、分液し有機相を合併し、そして有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムにより精製し、白色固体３２．２を得た（６０ｍｇ、収率：４３％）。
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドール－２－イル）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル１－（（ニトロキシド）メチル）シクロプロパンカルボン酸（化合物３２．３）
化合物３２．２（５５ｍｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（７ｍＬ）に溶解させ、そして順次に１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（９８．３４ｍｇ、０．５１３ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（６２．５８ｍｇ、０．５１３ｍｍｏｌ）と化合物１．１１（１０９．７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加え、混合液を常温で一晩攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した（約１５％の原料１．１１が残った）。水を反応液に加え、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ）、分液し有機相を合併した。有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してシリカゲルカラムにより精製し、白色固体３２．３を得た（８２ｍｇ、収率：４０％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：６０１．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル１－（（ニトロキシド）メチル）シクロプロパンカルボン酸エステル（化合物３２）
化合物３２．３（８２ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）を７ｍＬのエタノールに溶解させ、そしてヒドラジン一水和物（６８．５ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を反応液に加え、反応を不活性ガスの雰囲気で６０℃まで加熱し３時間攪拌した。ＬＣＭＳにより反応が完成したと確認した。反応液に水を加え、酢酸エチル（１２ｍＬ）で抽出した。有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をメタノール／テトラヒドロフラン（１．５ｍＬ／１．５ｍＬ）に溶解させ、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、白色固体製品の実施例３２を得た（２９．５ｍｇ、収率：４３％、純度：９４％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ：４７１．１（Ｍ＋１）．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．４７ （ｓ， １Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２５ － ８．１３ （ｍ， ４Ｈ）， ７．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４１ － ７．３５ （ｍ， ３Ｈ）， ５．１１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．７１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．４， ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４ （ｓ， １Ｈ）， ３．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， １．３１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．２， ４．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．１９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．２， ４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）．
４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（Ｒ）－４，５－ビス（ニトロキシド）吉草酸
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ、Ｅ）－３－（２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－イル）アクリル酸メチル（化合物３３．１）
化合物（２－メトキシエチル）りん酸ジメチル（２．２８ｍＬ、１５．３６ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり１５ｍＬの水素化ナトリウム含有（６０％、６１４ｍｇ、１５．３６ｍｍｏｌ）のジメトキシエタンに滴下し、０．５時間攪拌し、さらに（Ｓ）－２，２－ジメチル－１，３－ジオキソラン－４－ホルムアルデヒド（２ｇ、１５．３６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、飽和の塩化アンモニウム溶液を加え、反応をクエンチし、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物３３．１を得た（１．６４５ｇ、収率：５８％、無色油状液体）。
工程Ｂ：（Ｓ、Ｅ）－４，５－ジヒドロキシペンチル－２－エン酸メチル（化合物３３．２）
化合物３３．１（１．１６ｇ、６．２３ｍｍｏｌ）を７．５ｍＬの酢酸水溶液（８０％）に溶解させ、８０℃まで加熱し３時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液をそのまま濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物３３．２を得た（７０６ｍｇ、収率：７８％、無色油状液体）。
工程Ｃ：（Ｒ）－４，５－ジヒドロキシ吉草酸メチル（化合物３３．３）
化合物３３．２（７０６ｍｇ、４．８４ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのエタノールに溶解させ、水素ガスの雰囲気でパラジウム炭素（１０％、７１ｍｇ）を加え、室温で一晩攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、反応液をセライトでろ過し、ろ液を濃縮して残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物３３．３を得た（５５８ｍｇ、収率：７８％、無色油状液体）。
工程Ｄ：（Ｒ）－４，５－ビス（ニトロキシド）吉草酸メチル（化合物３３．４）
化合物３３．３（１００ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を１ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で濃硝酸と無水酢酸の混酸溶液（０．８ｍＬの硝酸， １．６ｍＬの無水酢酸）を加え、０℃で４時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、３０ｍＬの酢酸エチルを加え、希釈し、反応液を順次水（１０ ｍＬ × ２）、飽和の炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍＬ）と飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗製品３３．４を得た（１３８ｍｇ、収率：８５％、淡黄色液体）。
工程Ｅ：（Ｒ）－４，５－ビス（ニトロキシド）吉草酸（化合物３３．５）
化合物３３．４（９３ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を１．５ｍＬのテトラヒドロフランと０．５ｍＬの水の混合溶液に溶解させ、氷浴下で一水合水酸化リチウム（２０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を加え、当該温度で１時間攪拌し、ＴＬＣにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、２Ｍの塩酸溶液でｐＨが４になるように調整し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して化合物３３．５を得た（４５ｍｇ、収率：８５％、無色油状液体）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １２．２８ （ｓ， １Ｈ）， ５．７０ － ５．２２ （ｍ， １Ｈ）， ４．９４ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．８， ２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．８， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．４８ － ２．１７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１３ － １．７０ （ｍ， ２Ｈ）．
工程Ｆ：４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（Ｒ）－４，５－ビス（ニトロキシド）吉草酸エステル（化合物３３．６）
化合物１５．２（５１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と化合物３３．５（４０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、そして１－エチル－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。水を加え反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（１０ｍＬ × ２）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３３．６を得た（５５ｍｇ、収率：７２％、淡黄色固体）。
工程Ｇ：４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（Ｒ）－４，５－ビス（ニトロキシド） 吉草酸（化合物３３）
化合物３３．６（５５ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を２ｍＬの酢酸エチルに溶解させ、２ｍＬの酢酸エチル塩酸溶液（２Ｍ）を加え、室温で２時間攪拌し、 ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出した。反応が完成してから、溶媒を濃縮して残留物を超純水で溶解、ろ過し、逆相分取クロマトグラフィーにより精製し、凍結乾燥してから目標製品の実施例３３を得た（４５ｍｇ、収率：９７％、純度：９９％）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋） ｍ／ｚ： ５３４．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６） δ １３．２２ （ｓ， １Ｈ）， ９．４５ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．１１ （ｓ， ４Ｈ）， ７．４６ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３４ （ｓ， １Ｈ）， ５．４９－５．４０ （ｍ， １Ｈ）， ５．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ４．９２ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．８， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７１ （ｄｄ， Ｊ ＝ １２．８， ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９ （ｓ， １Ｈ）， ３．６３ （ｓ， １Ｈ）， ３．１７ （ｄ， Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．５９－２．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ２．０８－１．８７ （ｍ， ２Ｈ）．
（１Ｓ，３Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド ）メチル）シクロブタンカルボン酸塩
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：３－（（ベンジルオキシ）カルボニル）シクロブタンカルボン酸（化合物３４．１）
化合物２３．３（２．３３ｇ、１０．５８ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのジクロロメタン、３０ｍＬのアセトニトリルと３０ｍＬの水に溶解させ、０℃まで冷却し、過ヨウ素酸ナトリウム（６．８ｇ、３１．７３ｍｍｏｌ）と 塩化ルテニウム（ＩＩＩ）Ｎ水和物（２３３ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温まで昇温し、６時間反応させた。反応液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、固体が全部溶解するまで攪拌しながら１Ｍの塩酸溶液を加え、水相を酢酸エチル（５０ｍＬ）１回抽出し、合併された有機相を１０％の亜硫酸水素ナトリウム溶液（３０ｍＬ）で２回洗浄し、飽和ブライン（３０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３４．１を得た（２．３ｇ、収率：９３％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２３５．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（１Ｓ，３Ｓ）－二ベンジルシクロブタン－１，３－二カルボン酸エステル（化合物３４．２）と（１ｒ，３ｒ）－二ベンジルシクロブタン－１，３－二カルボン酸エステル（化合物３４．３）
化合物３４．１（２．３ｇ、９．８２ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、炭酸カリウム（４．０７ｇ、２９．４６ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（５．０４ｇ、２９．４６ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液に水（５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（７０ｍＬ）で２回抽出した。合併された有機相を飽和ブライン（５０ｍＬ）で４回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して比較的極性の低い製品３４．２（１．２９ｇ、無色油状物）と比較的極性の高い製品３４．３を得た（１．５８ｇ、無色油液、収率：９０％）。
工程Ｃ：（１ｓ，３ｓ）－３－（（ベンジルオキシ）カルボニル）シクロブタンカルボン酸（化合物３４．４）
化合物３４．２（１．１９ｇ、３．６７ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフラン、１５ｍＬのメタノールと１５ｍＬの水に溶解させ、水酸化ナトリウム（１４６．７ｍｇ、３．６７ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、ｐＨが３になるように反応液に２ Ｍの塩酸溶液を加え、そして酢酸エチル（６０ｍＬ）で２回抽出し、合併された有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３４．４を得た（３８０ｍｇ、収率：４４％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２３５．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（１ｓ，３ｓ）－３－（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物３４．５）
化合物３４．４（３８０ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴で窒素の保護で０．２４ｍＬボランのジメチルスルフィド溶液（１０Ｍ）を滴下し、滴下が終わってから室温で３時間反応した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、氷浴で順次５ｍＬのメタノールと４ｍＬ ２ Ｍの塩酸溶液を加え、室温で続けて１０分間攪拌した。反応液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ × ４）で抽出した。合併された有機相を飽和ブラインで洗浄し（３０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３４．５を得た（２４５ｍｇ、収率：６９％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２２１．１（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：（１ｓ，３ｓ）－３－（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボン酸（化合物３４．６）
化合物３４．５（２４５ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を６ｍＬのメタノールと１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、水酸化ナトリウム（８９ｍｇ、２．２２ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍＬ）を加え、室温で３時間攪拌し反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（４０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで洗浄し（２５ｍＬ × ３）、そして水相を２Ｍの塩酸溶液でｐＨが２になるように調整し、酢酸エチルで抽出し（４０ｍＬ × ６）、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物３４．６を得た（１４５ｍｇ、収率：１００％、白色固体）。
工程Ｆ：（１ｓ，３ｓ）－３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸（化合物３４．７）
氷浴下で１．５ｍＬの濃硝酸を３ｍＬの無水酢酸に滴下し、５分間攪拌した。化合物３４．６（１４５ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を５ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で前記硝酸の無水酢酸溶液を滴下し、０℃で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３４．７を得た（１１０ｍｇ、収率：５６％、白色固体）。
工程Ｇ：（１ｓ，３Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル ３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物３４．８）
化合物３４．７（５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（８２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）と化合物１５．２（８５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（４０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３４．８を得た（９０ｍｇ、収率：７８％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５８５．２（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：（１ｓ，３Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド ）メチル）シクロブタンカルボン酸塩（化合物３４）
化合物３４．８（９０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を８ｍＬのジクロロメタンに溶解させてから、１．５ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、ｐＨが８になるように、反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出し、合併された有機相を飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例３４を得た（６４ｍｇ、収率：８５％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４８５．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．５３ （ ｓ， １ Ｈ）， ９．４８ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．２４ （ ｓ， ３ Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ７．４３ － ７．３４ （ｍ， ３ Ｈ）， ５．０９ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．５８ （ｄ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ４．５３ － ４．４４ （ｍ， １ Ｈ）， ３．６２－３．６６ （ ｍ， １ Ｈ）， ３．２２－３．２９ （ｍ， １ Ｈ）， ３．１９ － ３．０８ （ｍ， １ Ｈ）， ２．５９－２．６８ （ｍ， １ Ｈ）， ２．２７－２．３４ （ｍ， ２ Ｈ）， ２．０３－２．１０ （ｍ， ２ Ｈ）．
（１Ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド ）メチル）シクロブタンカルボン酸塩
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（１Ｒ，３ｒ）－３－（（ベンジルオキシ）カルボニル）シクロブタンカルボン酸（化合物３５．１）
化合物３４．３（１．４８ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフラン、１５ｍＬのメタノールと１５ｍＬの水に溶解させ、水酸化ナトリウム（１８２ｍｇ、４．５６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、ｐＨが３になるように、反応液に２ Ｍの塩酸溶液を加え、そして酢酸エチル（６０ｍＬ）で２回抽出し、合併された有機相を飽和ブライン（３０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３５．１を得た（３８０ｍｇ、収率：３６％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２３５．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（１ｒ，３ｒ）－３－（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物３５．２）
化合物３５．１（３８０ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴で窒素の保護で０．２４ｍＬボランのジメチルスルフィド溶液（１０Ｍ）を滴下し、滴下が終わってから室温で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、氷浴で順次５ｍＬのメタノールと４ｍＬ ２ Ｍの塩酸溶液を加え、室温で続けて１０分間攪拌した。反応液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ × ４）で抽出した。合併された有機相を飽和ブラインで洗浄し（３０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３５．２を得た（３００ｍｇ、収率：８４％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２２１．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（１ｒ，３ｒ）－３－（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボン酸（化合物３５．３）
化合物３５．２（３００ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を６ｍＬのメタノールと１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、水酸化ナトリウム（１０９ｍｇ、２．７２ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍＬ）を加え、室温で３時間攪拌し反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（４０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで洗浄し（２５ｍＬ × ３）、そして水相を２Ｍの塩酸溶液でｐＨが２になるように調整し、酢酸エチルで抽出し（４０ｍＬ × ６）、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して化合物３５．３を得た（１７７ｍｇ、収率：１００％、無色油状物）。
工程Ｄ：（１ｒ，３ｒ）－３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸（化合物３５．４）
氷浴下で１．５ｍＬの濃硝酸を３ｍＬの無水酢酸に滴下し、５分間攪拌した。化合物３５．３（１７７ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を５ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で前記硝酸の無水酢酸溶液を滴下し、０℃で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３５．４を得た（１２０ｍｇ、収率：５０％、無色油状物）。
工程Ｅ：（１ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル ３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸ベンジル（化合物３５．５）
化合物３５．４（５０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（８２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（５３ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）と化合物１５．２（８５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（４０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３５．５を得た（９６ｍｇ、収率：８２％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５８５．２（Ｍ＋１）．
工程Ｆ：（１ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド ）メチル）シクロブタンカルボン酸塩（化合物３５）
化合物３５．５（９６ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を８ｍＬのジクロロメタンに溶解させてから、１．５ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、ｐＨが８になるように、反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出し、合併された有機相を飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例３５を得た（６６ｍｇ、収率：８３％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４８５．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．５３（ｓ， １ Ｈ）， ９．４７ （ｄ， Ｊ ＝ ５．２ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．３７ － ８．０８ （ｍ， ４ Ｈ）， ７．４９ （ｔ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ７．４４ － ７．３２ （ｍ， ３ Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．６１ － ４．４０ （ｍ， ３ Ｈ）， ３．６３ （ ｓ， １ Ｈ）， ３．０９－３．１８ （ｍ， ２ Ｈ）， ２．６８ － ２．５４ （ｍ， １ Ｈ）， ２．３４ － ２．１９ （ｍ， ２ Ｈ）， ２．０８ － １．９５ （ｍ， ２ Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３，３－ビス（（ニトロキシド）
メチル） シクロブタンカルボン酸塩
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：５，５－ビス（ブロモメチル）－２－フェニル－１，３－ジオキサン（化合物３６．１）
２，２－ビス（ブロモメチル）プロパン－１，３－ジオール（１０ｇ、３８．１８ｍｍｏｌ）を１４０ｍＬのトルエンに溶解させ、ベンズアルデヒド（４．２５ｇ、４０．０９ｍｍｏｌ）とｐ－トルエンスルホン酸（６５７ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を１２０℃まで昇温し、４時間反応させた。反応液を室温まで冷却させ、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（４０ｍＬ）で３回洗浄し、飽和ブラインで（３０ｍＬ）で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をメタノールで室温で再結晶させて、製品３６．１を得た（１２．７ｇ、収率：９５％、白色固体）。
工程Ｂ：７－フェニル－６，８－ジオキサスピロ［３．５］ノナン－２，２－ジカルボン酸ジエチル（化合物３６．２）
マロン酸ジエチル（２．０ｇ、１２．４９ｍｍｏｌ）を水素化ナトリウム含有の（５００ｍｇ、１２．４９ｍｍｏｌ）の２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドの混濁液に滴下し、泡が出なくなるまで攪拌し、化合物３６．１（２．１９ｇ、６．２４ｍｍｏｌ）の１０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド溶液を加え、反応液を１４０℃で３時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を室温まで冷却させ、塩化アンモニウム溶液（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（７０ｍＬ）で２回抽出した。合併された有機相を飽和ブライン（５０ｍＬ）で４回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３６．２を得た（１．４ｇ、収率：６４％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：３４９．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：７－フェニル－６，８－ジオキサスピロ［３．５］ノナン－２，２－ジカルボン酸化合物３６．３）
化合物３６．２（１．４ｇ、４．０２ｍｍｏｌ）を２０ｍＬエタノール和１５ｍＬの水に溶解させ、水酸化カリウム（６７６ｍｇ、１２．０６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を８０℃で０．５時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を減圧濃縮してエタノールを除去し、ｐＨが４になるように反応液に２ Ｍの塩酸溶液を加え、固体が析出され、ろ過し、乾燥させ、製品３６．３を得た（１．０９ｇ、収率：９３％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２９３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：７－フェニル－６，８－ジオキサスピロ［３．５］ノナン－２－カルボン酸（化合物３６．４）
化合物３６．３（１．０９ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのピリジンに溶解させ、反応液を２０時間還流させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を減圧濃縮してピリジンを除去し、残留物を２Ｍの塩酸溶液でｐＨが５になるように調整し、酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出した。合併された有機相を飽和ブラインで洗浄し（３０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３６．４を得た（５００ｍｇ、収率：５４％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２４９．１（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：３，３－ビス（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボン酸（化合物３６．５）
化合物３６．４（３５０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を２５ｍＬのメタノールに溶解させ、パラジウム炭素（１００ｍｇ）を加え、反応液を室温で水素ガス雰囲気で３６時間攪拌し、反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液をセライトでろ過し、ろ液を減圧濃縮して化合物３６．５を得た（２２０ｍｇ、収率：９８％、白色固体）。
工程Ｆ：３，３－ビス（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸（化合物３６．６）
氷浴下で１．５ｍＬの濃硝酸を３ｍＬの無水酢酸に滴下し、１０分間攪拌した。化合物３６．５（１１０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を１５ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で前記硝酸の無水酢酸溶液を滴下し、室温で２時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３６．６を得た（５７ｍｇ、収率：３３％、白色固体）。
工程Ｇ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３，３－ビス（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸エステル（化合物３６．７）
化合物３６．６（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（５７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（３７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）と化合物１５．２（７７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（４０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３６．７を得た（８２ｍｇ、収率：６９％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６６０．２（Ｍ＋１）．
工程Ｈ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３，３－ビス（（ニトロキシド）メチル） シクロブタンカルボン酸塩（化合物３６）
化合物３６．７（８２ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解させてから、２ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出し、合併された有機相を飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例３６を得た（５８ｍｇ、収率：８４％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５６０．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．３６ （ ｓ， １ Ｈ）， ９．４６ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．２５ － ８．０８ （ｍ， ４ Ｈ）， ７．５２ － ７．４４ （ｍ， ２ Ｈ）， ７．４２ － ７．３４ （ｍ， ３ Ｈ）， ５．１０ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．６６ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．５１ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．４７ － ４．４０ （ｍ， １ Ｈ）， ３．６０－３．６８ （ ｍ， １ Ｈ）， ３．３３ － ３．２９ （ｍ， １ Ｈ）， ３．２１ － ３．０７ （ｍ， １ Ｈ）， ２．３２ － ２．１４ （ｍ， ４ Ｈ）．
（３Ｒ，４Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３，４－ビス（ニトロキシド）シクロペンタンカルボン酸塩
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：シクロペンテン－３－カルボン酸ベンジル（化合物３７．１）
シクロペンテン－３－カルボン酸（１ｇ、８．９３ｍｍｏｌ）を１２ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、炭酸カリウム（２．５ｇ、１７．８６ｍｍｏｌ）と臭化ベンジル（１．８３ｇ、１０．７２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で一晩攪拌した。反応液に水（２０ｍＬ）を加え希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、飽和ブラインで（３０ｍＬ）で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３７．１を得た（１．６９ｇ、収率：９４％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２０３．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（１Ｒ，３ｓ，５Ｓ）－６－オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－カルボン酸ベンジル（化合物３７．２）
化合物３７．１（６５０ｍｇ、３．２２ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、０℃まで冷却し、ｍ－クロロ過安息香酸（７２４ｍｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を数回に分けて加え、反応液を室温で３時間攪拌した。白色固体が析出され、反応液をろ過し、ろ液を順次に飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２０ｍＬ）、２０％の亜硫酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ）と飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３７．２を得た（４６０ｍｇ、収率：８８％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２１９．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（３Ｒ，４Ｒ）－３，４－ジヒドロキシシクロペンタンカルボン酸カルボン酸ベンジル（化合物３７．３）
化合物３７．２（４６０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）を４ｍＬのテトラヒドロフランと４ｍＬの水に溶解させ、０．１７ｍＬの硫酸溶液を加え、反応液を室温で一晩攪拌した。ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウムを加え、酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮して、カラムクロマトグラフィーにより精製して製品３７．３を得た（２９０ｍｇ、収率：５８％、無色油状物）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：２３７．１（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（３Ｒ，４Ｒ）－３，４－ジヒドロキシシクロペンタンカルボン酸（化合物３７．４）
化合物３７．３（３３０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を６ｍＬのメタノールに溶解させ、パラジウム炭素（３３ｍｇ）を加え、反応液を室温で水素ガス雰囲気で３時間攪拌した。反応液をセライトでろ過し、ろ液を減圧濃縮して製品３７．４を得た（２００ｍｇ、収率：９８％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：１４５．１（Ｍ－１）．
工程Ｅ：（３Ｒ，４Ｒ）－３，４－ビス（ニトロキシド）シクロペンタンカルボン酸（化合物３７．５）
氷浴下で１ｍＬの濃硝酸を２ｍＬの無水酢酸に滴下し、１０分間攪拌した。化合物３７．４（１００ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を２ｍＬの無水酢酸に溶解させ、氷浴下で前記硝酸無水酢酸溶液を滴下し、０℃で１時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（４０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３７．５を得た（９５ｍｇ、収率：５９％、無色油状物）。
工程Ｆ：（３Ｒ，４Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル ３，４－ビス（ニトロキシド）シクロペンタンカルボン酸ベンジル（化合物３７．６）
化合物３７．５（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドに溶解させ、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（４９ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）、４－ジメチルアミノピリジン（３１ｍｇ、０．２５５ｍｍｏｌ）と化合物１５．２（４４ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（４０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ２）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３７．６を得た（５０ｍｇ、収率：４６％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６４６．２（Ｍ＋１）．
工程Ｇ：（３Ｒ，４Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３，４－ビス（ニトロキシド）シクロペンタンカルボン酸塩（化合物３７）
化合物３７．６（５０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を４ｍＬのジクロロメタンに溶解させ、０．８ｍＬのトリフルオロ酢酸を加え、室温で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、ｐＨが８になるように反応液に飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ × ２）で抽出し、合併された有機相を飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例３７を得た（２７ｍｇ、収率：６０％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５４６．１（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ１３．４２（ｓ， １ Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １ Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ８．２０ （ ｓ， ３ Ｈ）， ８．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ７．５４ － ７．４５ （ｍ， ２ Ｈ）， ７．３９－７．４１ （ｍ， ３ Ｈ）， ５．７０ － ５．５１ （ｍ， ２ Ｈ）， ５．１１ （ｓ， ２ Ｈ）， ４．５５ － ４．３７ （ｍ， １ Ｈ）， ３．６２－３．６６ （ ｍ， １ Ｈ）， ３．２２ － ３．０５ （ｍ， ２ Ｈ）， ２．６０ － ２．５３ （ｍ， １ Ｈ）， ２．４５ － ２．３５ （ｍ， １ Ｈ）， ２．１４－２．２１ （ｍ， １ Ｈ）， ２．１０ － １．９９ （ｍ， １ Ｈ）．
（１ｒ，４Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル４－（（ニトロキシド ）メチル）シクロヘキサンカルボン酸
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（１Ｒ，４Ｒ）－４－（（ニトロキシド）メチル）シクロヘキサンカルボン酸（化合物３８．１）
氷浴下で、３ｍＬの濃硝酸を３ｍＬの濃硫酸に滴下し、１０分間攪拌した。そして氷浴下で（１Ｒ，４Ｒ）－４－（ヒドロキシメチル）シクロヘキサンカルボン酸（１００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液を加え、温度を５℃未満に保持し３０分間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、氷浴下で反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２０ｍＬ × ２）で抽出し、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３８．１を得た（１０２ｍｇ、収率：７９％、白色固体）。
工程Ｂ：（１Ｒ，４Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル ４－（（ニトロキシド）メチル）シクロヘキサンカルボン酸ベンジル（化合物３８．２）
化合物３８．１（４３．５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（５４．８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（３３．５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解させ、化合物１５．２（６０．８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ５）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３８．２を得た（８２．５ｍｇ、収率：９４％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６１３．２（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（１Ｒ，４Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル４－（（ニトロキシド ）メチル）シクロヘキサンカルボン酸（化合物３８）
化合物３８．２（８０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を５ｍＬの塩化水素の酢酸エチル溶液（４Ｍ）に溶解させ、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を乾固まで濃縮し、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例３８を得た（４０．４ｍｇ、収率：６０％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１３．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．５３ （ｓ， １Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２５ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４１ （ｓ， １Ｈ）， ７．３８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５２ － ４．４４ （ｍ， １Ｈ）， ４．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７０ － ３．５８ （ｍ， １Ｈ）， ３．２１ － ３．０８ （ｍ， １Ｈ）， ２．３０ （ｔｔ， Ｊ ＝ １２．０， ３．２ Ｈｚ， １Ｈ）， １．９３ （ｄ， Ｊ ＝ １０．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７９ － １．６２ （ｍ， ３Ｈ）， １．３４ （ｑｄ， Ｊ ＝ １２．８， ３．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．０６ （ｑｄ， Ｊ ＝ １２．８， ３．２ Ｈｚ， ２Ｈ）．
（Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル１－（２－（ニトロキシド） ）エチル）ピロリジン－２－カルボン酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ）－１－（２－ヒドロキシエチル）ピロリジン－２－カルボン酸（化合物３９．１）
Ｌ－プロリン酸（９２１ｍｇ、８ｍｍｏｌ）と水酸化カリウム（１．３５ｇ、２４ｍｍｏｌ）を２０ｍＬイソプロパノール、２－ブロモエタノール（１．２ｇ、９．６ｍｍｏｌ）を滴下し、４０℃で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、塩酸でｐＨ＜４になるように調整した。有機溶媒を減圧でスピン乾燥させ、２０ｍＬのエタノールと２０ｍＬのジクロロメタンを加え、２ｈ攪拌してからろ過し、ろ液を濃縮し、２０ｍＬのアセトンと２ｍＬのメタノールで再結晶させて、化合物３９．１を得た（９６８ｍｇ、収率７６％、白色固体）。
工程Ｂ：（Ｓ）－１－（２－（ニトロキシド）エチル）ピロリジン－２－カルボン酸（化合物３９．２）
氷浴下で、３ｍＬの濃硝酸を３ｍＬの濃硫酸に滴下し、１０分間攪拌した。そして氷浴下で化合物３９．１（５００ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液を加え、温度を５℃未満に保持しで１時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、氷浴下で反応液をジクロロメタン（４０ｍＬ）で希釈し、炭酸ナトリウム固体でｐＨ ＝ ５程度に調整し、有機溶媒をスピン乾燥させ、３０ｍＬのジクロロメタンとエタノールの混合溶液（１：１）を加え、室温で１時間攪拌してから、ろ過し、ろ液を濃縮し、製品３９．２を得た（３３７ｍｇ、収率：５３％、黄色固体）。
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル １－（２－（ニトロキシド）エチル）ピロリジン－２－カルボン酸エステル（化合物３９．３）
化合物３９．２（７３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（６９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（４４ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解させ、化合物１５．２（５１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ５）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品３９．３を得た（４７ｍｇ、収率：６４％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６１４．２（Ｍ＋１）．
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル１－（２－（ニトロキシド） ）エチル）ピロリジン－２－カルボン酸エステル（化合物３９）
化合物３９．３（４７ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）を５ｍＬの塩化水素の酢酸エチル溶液（４Ｍ）に溶解させ、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を乾固まで濃縮し、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例３９を得た（１９ｍｇ、収率：５２％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５１４．２（Ｍ＋１）．
（Ｓ）－４－（３－（ジメチルアミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：（Ｓ）－４－（３－（１，３－ジオキソイソインドール－２－イル）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオン酸メチル（化合物４０．１）
２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオン酸（１４６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－ヘキサフルオロホスファート（１８２ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（１２３．８ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、化合物１５．２（１０７．５ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（３０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（３０ｍＬ × ５）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品４０．１を得た（１５７ｍｇ、収率：７４％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：６６４．１（Ｍ＋１）．
工程Ｂ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート（化合物４０．２）
化合物４０．１（１５７ｍｇ、０．２３７ｍｍｏｌ）を５ｍＬのエタノールに溶解させ、ヒドラジン一水和物（１１８ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を加え、５５℃で２時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品４０．２を得た（７５ｍｇ、収率：５９％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５３４．１（Ｍ＋１）．
工程Ｃ：（Ｓ）－４－（３－（ジメチルアミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート（化合物４０）
窒素の保護で、化合物４０．２（７５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ホルムアルデヒド（５７ｍｇ、３７－４０％の水溶液、０．７ｍｍｏｌ）と一滴の酢酸を５ｍＬのメタノールに溶解させ、氷浴下でシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２６．４ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍＬ）でクエンチし、水（１０ｍＬ）を加え希釈し、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して粗製品を得、続けて逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例４０を得た（４８ｍｇ、収率：５７％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５６２．２（Ｍ＋１）． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．４７ （ｓ， １Ｈ）， ９．２７ （ｓ， １Ｈ）， ８．４４ （ｓ， １Ｈ）， ７．９２ （ｓ， １Ｈ）， ７．５４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４０ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２７ （ｓ， １Ｈ）， ５．１７ （ｓ， ２Ｈ）， ４．８６ － ４．６９ （ｍ， ５Ｈ）， ４．０７ － ３．９６ （ｍ， １Ｈ）， ３．４９ － ３．４１ （ｍ， １Ｈ）， ２．７９ （ｓ， ６Ｈ）， １．２９ （ｓ， ３Ｈ）．
（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）ビシクロ［１．１ ．１］ペンタン－１－カルボン酸エステル
具体的な反応式を以下に示す：
工程Ａ：３－（ヒドロキシメチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボン酸メチル（化合物４１．１）
窒素の保護で、３－（メトキシカルボニル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボン酸（４９３ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのテトラヒドロフランに溶解させ、氷浴下でボランのジメチルスルフィド溶液（０．４４ｍＬ、１０Ｍ、４．３５ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で３時間反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、５ｍＬのメタノールと４ｍＬの塩酸（２Ｍ）で反応をクエンチした。減圧で有機溶媒をスピン乾燥で除去してから、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品４１．１を得た（４０２ｍｇ、収率：８９％、白色固体）。
工程Ｂ：３－（ヒドロキシメチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボン酸（化合物４１．２）
化合物４１．１（４００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬのテトラヒドロフランと１０ｍＬのメタノールに溶解させ、水酸化ナトリウム（２００ｍｇ、５ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍＬ）を加え、室温で一晩反応させた。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、減圧で有機溶媒をスピン乾燥で除去してから、水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５ｍＬ × ２）で洗浄した。水層を塩酸でｐＨ＜４になるように調製し、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品４１．２を得た（２８７ｍｇ、収率：８１％、白色固体）。
工程Ｃ：３－（（ニトロキシド）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボン酸（化合物４１．３）
氷浴下で、５ｍＬの濃硝酸を５ｍＬの濃硫酸に滴下し、１０分間攪拌した。そして氷浴下で化合物４１．２（２８５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液を加え、温度を５℃未満に保持し２時間攪拌した。ＴＬＣにより反応が完成したと検出してから、反応液を２０ｍＬの氷水に入れて希釈し、酢酸エチルで抽出し（２０ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮してカラムクロマトグラフィーにより精製して製品４１．３を得た（３０３ｍｇ、収率：８１％、白色固体）。
工程Ｄ：（Ｓ）－４－（３－（（ｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ ニトロキシド）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボン酸エステル（化合物４１．４）
化合物４１．３（３３．７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（４６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）と４－ジメチルアミノピリジン（２９．３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、化合物１５．２（５１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を水（１５ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出し（１５ｍＬ × ２）、有機相を合併し、飽和ブライン（２０ｍＬ × ３）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して残留物をカラムクロマトグラフィーにより精製して製品４１．４を得た（５４．９ｍｇ、収率：７７％、淡黄色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：５９７．２（Ｍ＋１）．
工程Ｅ：（Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）ビシクロ［１．１ ．１］ペンタン－１－カルボン酸エステル（化合物４１）
化合物４１．４（５４ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を３ｍＬの酢酸エチルと３ｍＬの塩化水素の酢酸エチル溶液（４Ｍ）に溶解させ、室温で２．５時間反応させた。ＬＣＭＳにより反応が完成したと検出してから、反応液を乾固まで濃縮し、逆相分取クロマトグラフィーにより精製して、製品の実施例４１を得た（４０ｍｇ、収率：８３％、白色固体）。ＬＣＭＳ ＥＳＩ（＋）ｍ／ｚ：４９７．２（Ｍ＋１）．１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ） δ １３．５６ （ｓ， １Ｈ）， ９．４７ （ｓ， １Ｈ）， ８．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ８．２１ （ｓ， ３Ｈ）， ８．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４３ － ７．３１ （ｍ， ３Ｈ）， ５．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５８ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５３ － ４．４０ （ｍ， １Ｈ）， ３．７０ － ３．５６ （ｍ， １Ｈ）， ３．２２ － ３．０８ （ｍ， １Ｈ）， ２．０２ （ｓ， ６Ｈ）．
ＲＯＣＫ２キナーゼ阻害剤活性試験
＜一＞実験プロセス
１）実験の必要により、４Ｘ ＲＯＣＫ２反応溶液、４Ｘ ＡＴＰ反応溶液、４Ｘ基質溶液、および４Ｘ化合物溶液を準備した。
２）３８４ウェルプレートに順次に２．５μＬの４Ｘキナーゼ溶液と２．５μＬの異なる濃度勾配で希釈された４Ｘ試験化合物溶液を加え、各濃度に２つの重複ウェルを設置し、同時に酵素溶液空白対照群と陰性対照群（ＤＭＳＯ群）を設置し、１０００ ｒｐｍで１分間遠心分離させ、酵素と化合物をよく混合し、３８４ウェルプレートに２．５μＬの４Ｘ基質溶液を加え、１０００ ｒｐｍで１分間遠心分離させ、３８４ウェルプレートに２．５μＬの４ＸＡＴＰ溶液を加え、１０００ ｒｐｍで１分間遠心分離させて酵素反応を開始し、室温で１．５時間インキュベートした。
ＲＯＣＫ２反応の各群のそれぞれの最終濃度は：ＲＯＣＫ２：１ｎＭ、基質：５００ｎＭ、ＡＴＰ：６ｕＭであり、試験化合物の最終濃度範囲は：１００ｎＭ－５ｐＭであった。
３）実験の必要により、４Ｘ Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－ＸＬ－６６５検出溶液を調製した。
４）酵素反応が終わってから、３８４ウェルプレートの各ウェルに５ｕｌの４Ｘ Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－ＸＬ－６６５検出溶液を加え、１０００ ｒｐｍで１分間遠心分離し、３８４ウェルプレートの各ウェルに５μＬの４Ｘ ＳＴＫ Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｃｒｙｐｔａｔｅ検出抗体溶液を加え、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離させ、室温で１時間インキュベートした。
５）抗体のインキュベーションが終わってから、ＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーでＨＴＲＦプログラムにより各ウェルのシグナル値を測定した。
＜二＞データ分析
１）酵素溶液空白対照群を１００％阻害率とし、陰性対照群（ＤＭＳＯ群）を０％阻害率とし、試験化合物の各濃度に対応する阻害率を計算した。
２）ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアで、試験化合物の濃度の対数値および対応する阻害率について非線形回帰分析を実行して、試験化合物の半数阻害濃度（ＩＣ５０）を取得した。
この方法で化合物ＲＯＣＫ２キナーゼ阻害剤活性（ＩＣ５０）を得られ、下表に示す：
細胞活性試験
＜一＞実験プロセス
１）対数増殖期のＡ７Ｒ５細胞を消化し、６ウェルプレートでウェル毎に２Ｅ５の細胞を接種し、５％のＣＯ２で３７℃で一晩培養し、２４時間後細胞培地を０．０５％のＦＢＳを含む飢餓培地に置き換え、２０時間細胞を飢えさせた。
２）飢餓培地を除去し、調製された化合物濃度勾配で細胞を６０分間処理し、ＶＩＰ－５０２１（１０ｕＭ）を陽性対照として、ＤＭＳＯ群を陰性対照として設定した。
３）化合物処理が終わってから、化合物溶液を吸引し、ＰＢＳで２回洗浄し、各ウェルに１００ｕｌの細胞ライセートを加え、細胞をスクレーパーで軽く細胞をこすり、細胞を遠心チューブに移し、氷上で６０分間溶解した。
４）溶解が終わってから、４℃で、１４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離させ、ライセートの上清を回収し、ＢＣＡ法によりタンパク質を定量し、タンパク質の濃度を調整し、比率に応じてローディングバッファーを加え、１００℃で１０分間処理し、タンパク質を変性させた。
５）電気泳動装置を組み立て、各サンプルに総タンパク質２０ｕｇをロードし、電圧を１２５Ｖに固定し、９０分間電気泳動し、終わってから、膜転写システムを組み立て、電流を３００ｍＡに固定し、１２０分間膜転写し、終わってからＰＶＤＦ膜を取り出し、ＰＢＳで２回洗浄し、ブロッキング溶液を追加、室温で６０分間ブロックしてから、ブロッキング溶液を除去、一次抗体（Ｐｈｏｓｐｈｏ－Ｍｙｏｓｉｎ Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｉｎ２（Ｓｅｒ１９））溶液（抗体希釈倍率１：１０００）を含む溶液を加え、ＧＡＰＤＨを内部参照と選択し、４℃で一晩インキュベートした。
６）ＰＢＳＴで３回洗浄し、対応する種のＨＲＰ抗体（二次抗体希釈倍率１：２０００）を含む溶液を加え、室温で６０分間インキュベートし、ＰＢＳＴで３回洗浄し、ＨＲＰ化学発光基質を準備し、１平方センチメートルあたり０．１ｍｌでＰＶＤＦ膜に滴下し、３０秒間作用させ、ゲルイメージャー（ＣｈｅｍｉＤｏｃ ＸＲＳ＋ （ＢＩＯ－ＲＡＤ））で化学発光シグナルを収集した。
７）ｉｍａｇｅ Ｊソフトウェアを使用して各バンドを定量的に分析し、ＧＡＰＤＨ発現量を内部参照とし、各サンプルのＰｈｏｓｐｈｏ－Ｍｙｏｓｉｎ Ｌｉｇｈｔ Ｃｈａｉｎ２（Ｓｅｒ１９）のリン酸化タンパク質レベルを補正した。
＜二＞データ分析
１）最高濃度の化合物サンプルのＭＬＣ２（Ｓｅｒ１９）タンパク質リン酸化レベルを１００％阻害率とし、陰性対照群（ＤＭＳＯ群）のＭＬＣ２（Ｓｅｒ１９）タンパク質リン酸化レベルを０％阻害率とし、試験化合物の各濃度に対応する阻害率を計算した。
２）ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアで、試験化合物の濃度の対数値および対応する阻害率について非線形回帰分析を実行して、試験化合物の細胞レベルの半数阻害濃度（ＩＣ５０）を取得した。
この方法で化合物細胞活性（ＩＣ５０）を得られ、下表に示す：

Claims (6)

  1. ＮＯドナーである小分子化合物であって、以下の構造式に示される化合物またはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物、および薬学的に許容される塩であり：
    または
    ただし、環Ａは式Ｉａ、または式Ｉｂから選ばれ；
    Ｒ２１は水素、水酸基、ハロゲン、アミノ基、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基、置換または非置換のヘテロアルキル基から選ばれ；
    Ｒ２２は水素、ハロゲン、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基から選ばれ；
    Ｘは（ＣＨ２）ｎから選ばれ、そのうち、ｎは０、１、２、３から選ばれ；
    Ｒ１は水素、水酸基、ハロゲン、アミノ基、シアノ基、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のアルコキシ基、置換または非置換のアルケニル基、置換または非置換のアルキニル基、置換または非置換のヘテロアルキル基から選ばれ；
    Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立に水素、置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のシクロアルキル基から選ばれ；または、Ｒ２とＲ３が結合して置換または非置換のシクロヘテロアルキル基を構成し、
    Ｌは結合基であり、置換または非置換のアルキレン基、置換または非置換のヘテロアルキレン基、置換または非置換のアルキレンオキシド基、置換または非置換のシクロアルキル基、置換または非置換のヘテロシクロ基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換のヘテロアリール基、置換または非置換のエステル基から選ばれ；
    Ｌ１は化学結合であり、または置換または非置換のアルキレン基であり；
    Ｌ２は置換または非置換のアルキレン基、置換または非置換のアルキレンオキシド基、置換または非置換のシクロアルキル基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換のヘテロアリール基から選ばれ；
    Ｌ３は化学結合であり、または置換または非置換のアルキレンオキシド基であり；
    ｎ１は０または自然数であり；
    ｎ２は０または自然数であり；
    Ｙは置換または非置換のアルキル基、置換または非置換のシクロアルキル基、置換または非置換のヘテロシクロ基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換のヘテロアリール基から選ばれることを特徴とする、ＮＯドナーである小分子化合物。
  2. 以下の構造に示される化合物のヒドロキシル基をニトロ化する反応によって得られることを特徴とする、
    請求項１に記載のＮＯドナーである小分子化合物の製造方法。
  3. 以下の構造に示される化合物のハロゲンをニトロ化する反応によって得られ；
    Ｙはハロゲンであることを特徴とする、請求項１に記載のＮＯドナーである小分子化合物の製造方法。
  4. 以下の式ＩＩＩａと式ＩＩＩｂに示される化合物のカップリング反応により得られ；
    Ｚはハロゲンであることを特徴とする、請求項１に記載のＮＯドナーである小分子化合物の製造方法。
  5. ＲＯＣＫキナーゼの阻害剤として使用されることを特徴とする、請求項１に記載のＮＯドナーである小分子化合物。
  6. （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル硝酸エステル；
    ３－（３－アミノ－１－（イソキノリン－６－イルアミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）ベンジル硝酸エステル；
    ４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル酢酸エチル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－（ベンゾ［ｄ］イソチアゾール－６－イルアミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）硝酸ベンジル；
    １－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）エタン－１，２－二硝酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル；
    ３－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）プロパン－１，２－二硝酸エステル；
    ３－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸プロピル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル５－（ニトロキシド）吉草酸エステル；
    ４－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル）硝酸ブチル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェニル硝酸エチル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－（（４－フルオロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）アミノ）－１－オキソプロピル－２－イル）ベンジル硝酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（４－（ニトロキシド）ブチル）カーボネート；
    ２－（４－（３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）フェノキシ）プロパン－１，３－二硝酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－ギ酸；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル４－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－４－（２－（ニトロキシド））エチル）安息香酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－５－（２－（ニトロキシド））エチル）安息香酸エステル；
    ４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｓ，４Ｒ）－４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－カルボン酸塩；
    ４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｒ，４Ｓ）－４－（ニトロキシド）シクロヘキサン－１－カルボン酸塩；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）３－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸ベンジル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）４－（（ニトロキシド）メチル）安息香酸ベンジル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタン－１－カルボン酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（２－（ニトロキシド）エチル）ウレタン；
    （１Ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（ニトロキシド）シクロブタンカルボン酸ベンジル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート；
    ４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（１ｓ，４Ｒ）－４－（（ニトロキシド）メチル）シクロヘキサン－１－ギ酸；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（２－（ニトロキシド）エチル）安息香酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２－（１－（（ニトロキシド）メチル）酢酸シクロプロピルエステル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル２，２－ジメチル－５－（ニトロキシド）吉草酸エステル；
    （S）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）６－（ニトロキシド）ヘキサン酸ベンジル；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル１－（（ニトロキシド）メチル）シクロプロパンカルボン酸エステル；
    ４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル（Ｒ）－４，５－ビス（ニトロキシド）吉草酸；
    （１Ｓ，３Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸塩；
    （１Ｒ，３Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸塩；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３，３－ビス（（ニトロキシド）メチル）シクロブタンカルボン酸塩；
    （３Ｒ，４Ｒ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル３，４－ビス（ニトロキシド）シクロペンタンカルボン酸塩；
    （１ｒ，４Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル４－（（ニトロキシド）メチル）シクロヘキサンカルボン酸；
    （Ｓ）－４－（（Ｓ）－３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル１－（２－（ニトロキシド））エチル）ピロリジン－２－カルボン酸エステル；
    （Ｓ）－４－（３－（ジメチルアミノ）－１－オキソ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロパン－２－イル）ベンジル２－メチル－３－（ニトロキシド）－２－（（ニトロキシド）メチル）プロピオナート；
    （Ｓ）－４－（３－アミノ－１－オキシ－１－（チエノ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イルアミノ）プロプ－２－イル）ベンジル３－（（ニトロキシド）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボン酸エステルである化合物またはその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物、および薬学的に許容される塩であることを特徴とする、ＮＯドナーである小分子化合物。
JP2021529083A 2020-02-21 2020-11-18 Ｒｏｃｋキナーゼ阻害剤のニトロキシド誘導体 Active JP7364258B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010107800.9 2020-02-21
CN202010107800.9A CN111217834B (zh) 2020-02-21 2020-02-21 Rock激酶抑制剂的硝基氧衍生物
PCT/CN2020/129840 WO2021164351A1 (zh) 2020-02-21 2020-11-18 Rock激酶抑制剂的硝基氧衍生物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022530590A JP2022530590A (ja) 2022-06-30
JP7364258B2 true JP7364258B2 (ja) 2023-10-18

Family

ID=70807677

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021529083A Active JP7364258B2 (ja) 2020-02-21 2020-11-18 Ｒｏｃｋキナーゼ阻害剤のニトロキシド誘導体

Country Status (10)

Country Link
US (1) US20220332726A1 (ja)
EP (1) EP3901156A4 (ja)
JP (1) JP7364258B2 (ja)
KR (1) KR20210134327A (ja)
CN (1) CN111217834B (ja)
AU (1) AU2020403705B2 (ja)
CA (1) CA3132077A1 (ja)
IL (1) IL285709A (ja)
SG (1) SG11202109516WA (ja)
WO (1) WO2021164351A1 (ja)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112979675B (zh) * 2019-12-12 2023-12-19 维眸生物科技（上海）有限公司 一种小分子含硫杂环化合物
CN111217834B (zh) * 2020-02-21 2021-10-26 维眸生物科技（上海）有限公司 Rock激酶抑制剂的硝基氧衍生物
CN111606852B (zh) * 2020-05-12 2022-02-11 中国药科大学 一种一氧化氮供体型Netarsudil衍生物及其制备方法和用途
CN114184693B (zh) * 2021-10-14 2023-10-13 重庆医科大学 4-羟苯乙酸作为标志物在制备脓毒症脑病的诊断试剂盒中的应用
WO2023143476A1 (en) * 2022-01-27 2023-08-03 Vivavision Biotech, Inc. Deuterated rock inhibitors, pharmaceutical compositions, and therapeutic applications

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005524631A (ja) 2002-01-25 2005-08-18 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼ阻害剤として有用なインダゾール化合物
JP2017525735A (ja) 2014-09-04 2017-09-07 ニコックス サイエンス アイルランド 一酸化窒素供与カルノシン化合物
JP2017534638A5 (ja) 2015-11-06 2018-12-06
WO2019124488A1 (ja) 2017-12-21 2019-06-27 参天製薬株式会社 セペタプロストとＲｈｏキナーゼ阻害剤との組み合わせ医薬
WO2019178324A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Amino-benzoisothiazole and amino-benzoisothiadiazole amide compounds
WO2020030489A1 (en) 2018-08-06 2020-02-13 Nicox S.A. Nitric oxide releasing phosphodiesterase type 5 inhibitor
CN111606852A (zh) 2020-05-12 2020-09-01 中国药科大学 一种一氧化氮供体型Netarsudil衍生物及其制备方法和用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI705827B (zh) * 2014-11-07 2020-10-01 瑞士商諾華公司 治療眼部疾病之方法
WO2018138293A1 (en) * 2017-01-30 2018-08-02 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Tyrosine amide derivatives as rho- kinase inhibitors
CN111217834B (zh) * 2020-02-21 2021-10-26 维眸生物科技（上海）有限公司 Rock激酶抑制剂的硝基氧衍生物

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005524631A (ja) 2002-01-25 2005-08-18 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド プロテインキナーゼ阻害剤として有用なインダゾール化合物
JP2017525735A (ja) 2014-09-04 2017-09-07 ニコックス サイエンス アイルランド 一酸化窒素供与カルノシン化合物
JP2017534638A5 (ja) 2015-11-06 2018-12-06
WO2019124488A1 (ja) 2017-12-21 2019-06-27 参天製薬株式会社 セペタプロストとＲｈｏキナーゼ阻害剤との組み合わせ医薬
WO2019178324A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Aerie Pharmaceuticals, Inc. Amino-benzoisothiazole and amino-benzoisothiadiazole amide compounds
WO2020030489A1 (en) 2018-08-06 2020-02-13 Nicox S.A. Nitric oxide releasing phosphodiesterase type 5 inhibitor
CN111606852A (zh) 2020-05-12 2020-09-01 中国药科大学 一种一氧化氮供体型Netarsudil衍生物及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
CA3132077A1 (en) 2021-08-26
CN111217834B (zh) 2021-10-26
KR20210134327A (ko) 2021-11-09
SG11202109516WA (en) 2021-09-29
IL285709A (en) 2021-10-31
EP3901156A1 (en) 2021-10-27
WO2021164351A1 (zh) 2021-08-26
AU2020403705A1 (en) 2021-09-09
AU2020403705B2 (en) 2023-01-12
US20220332726A1 (en) 2022-10-20
JP2022530590A (ja) 2022-06-30
EP3901156A4 (en) 2022-03-30
CN111217834A (zh) 2020-06-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7364258B2 (ja) Ｒｏｃｋキナーゼ阻害剤のニトロキシド誘導体
JP6861858B2 (ja) Ｓｓａｏ阻害剤
AU2017200745B2 (en) Opioid receptor ligands and methods of using and making same
AU2020204271A1 (en) Pyrimidinedione compounds against cardiac conditions
JP2022518860A (ja) 免疫調節剤、組成物およびその使用方法
CN103958480A (zh) 咪唑啉类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
TW202112761A (zh) Shp2磷酸酶變構抑制劑
EA022964B1 (ru) Соединения, ингибирующие ферменты гистондеацетилазы, и фармацевтическая композиция, содержащая данные соединения
TWI389894B (zh) 三唑酮衍生物
WO2001057044A1 (fr) Derives de pyrido-oxazine
EA031945B1 (ru) Соединения 1-алкил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ила и применение в качестве модуляторов sgrm
EP3480193A1 (en) Novel pyrazole derivative as alk5 inhibitor and uses thereof
EP3445170A1 (en) Quinoline compounds as modulators of rage activity and uses thereof
AU2015273578B2 (en) Small molecule LFA-1 inhibitors
RU2670982C2 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ α-ЗАМЕЩЕННОГО ГЛИЦИНАМИДА
RU2135484C1 (ru) Производные хиноксалина, способ их получения и фармацевтический состав
CA3148365A1 (en) Alpha-d-galactopyranoside derivatives
JP2019522682A (ja) ラパマイシンシグナル伝達経路阻害剤のメカニズム標的、及びその治療応用
CN112979675B (zh) 一种小分子含硫杂环化合物
CA2433174A1 (en) Cholesterol biosynthesis inhibitor containing tricyclic compound having spiro union as effective component
EP4140997A1 (en) Pyridine acetamide derivative serving as cdk inhibitor, and preparation method therefor and use thereof
CN112010774B (zh) FXIa凝血因子抑制剂、其药物组合物和用途
CN115785088A (zh) 作为sos1抑制剂的化合物及其应用
JP6906105B2 (ja) Ｒｏｃｋを阻害する化合物及びその使用
WO2014069434A1 (ja) 新規チアゾリジノン誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20211021

RD02 Notification of acceptance of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422

Effective date: 20221017

RD04 Notification of resignation of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424

Effective date: 20221024

A977 Report on retrieval

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007

Effective date: 20221027

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20221108

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230206

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20230404

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230728

A911 Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911

Effective date: 20230807

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20230912

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20230928

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7364258

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150